大环化合物和药物组合物的制作方法

本发明涉及化学领域，具体地，涉及化合物和含有该化合物的药物组合物。

背景技术：

g-四链体是人端粒末端和基因启动区的富含鸟嘌呤(g)的单链dna或rna序列形成的四链结构。g-四链体的被发现在肿瘤细胞中高表达，因此，高特异性的g-四链体配体可能据有抗肿瘤活性。我们的研究发现咪唑盐类大环化合物是一类选择性较好的g-四链体配体，对g-四具有很好的稳定作用。能稳定g-四链体的大环化合物在制备药物中的用途有待进一步研究。

技术实现要素：

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种新型大环化合物，该类化合物具有很好的g-四链体的稳定性。

因而，根据本发明的一个方面，本发明提供了一种化合物。根据本发明的实施例，如式(1)所示的化合物，

或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其中：

ar¹和ar²独立地选自以下基团：

各x独立地为o、s和n，

各r¹和r²独立地为羟基、卤素、氨基、氰基、c1-6的烷基、c2-6的烯基。

根据本发明的实施例，ar¹可以为

根据本发明的实施例，ar¹为

根据本发明的实施例，ar²为

根据本发明的实施例，ar²为

根据本发明的实施例，所述化合物具有以下其中之一的结构：

或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药学上可接受的盐。

根据本发明的实施例，所述药学上可接受的盐为无机酸盐或有机酸盐。

根据本发明的实施例，所述无机酸盐为选自盐酸、硫酸和磷酸的至少一种。

根据本发明的实施例，所述有机酸盐为选自乙酸、三氟乙酸、丙二酸、柠檬酸和对甲苯磺酸的至少一种。

根据本发明的另一方面，本发明提供了一种药物组合物。根据本发明的实施例，该药物组合物包括前述的化合物。

根据本发明的实施例，该药物组合物进一步包括其它抗肿瘤药。

根据本发明的实施例，所述其它抗肿瘤药为选自环磷酰胺、塞替派、司莫司汀、盐酸氮芥、白消安、苯丁酸氮芥、氮甲卡莫司汀、六甲蜜胺、洛莫司汀、苯丙氨酸氮芥、硝卡芥、异环磷酰胺、二溴甘露醇、阿糖胞苷、氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、羟基脲、替加氟、甲异靛、巯嘌呤、放线菌素d、丝裂霉素、盐酸阿霉素、盐酸平阳霉素、盐酸表柔比星、盐酸吡柔比星、盐酸柔红霉素、高三尖杉酯碱、硫酸长春新碱、羟喜树碱、依托泊苷、硫酸长春地辛、硫酸长春碱、重酒石酸长春瑞宾、紫杉醇、氨鲁米特、他莫昔芬、氟他胺、戈那瑞林、醋酸亮丙瑞林、来曲唑、卡铂、盐酸丙卡巴肼、安吖啶、枸橼酸达卡巴嗪、门冬酰胺酶、顺铂和盐酸米托蒽醌的至少一种。

本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

附图说明

本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：

图1显示了根据本发明一个实施例的化合物1-1的h-nmr图谱的示意图；

图2显示了根据本发明一个实施例的化合物1-2的h-nmr图谱的示意图；

图3显示了根据本发明一个实施例的化合物1-4的h-nmr图谱的示意图；

图4显示了根据本发明一个实施例的化合物1-4的h-nmr图谱的示意图；

图5显示了根据本发明一个实施例的化合物2-1的h-nmr图谱的示意图；

图6显示了根据本发明一个实施例的化合物2-1的h-nmr图谱的局部放大示意图；

图7显示了根据本发明一个实施例的化合物3-1的h-nmr图谱的示意图；

图8显示了根据本发明一个实施例的化合物3-1的h-nmr图谱的局部放大示意图；

图9显示了根据本发明一个实施例的化合物4-1的h-nmr图谱的示意图；

图10显示了根据本发明一个实施例的化合物4-1的h-nmr图谱的局部放大示意图。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。

根据本发明的一个方面，本发明提供了一种化合物。根据本发明的实施例，如式(1)所示的化合物，

或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其中：

ar¹和ar²独立地选自以下基团：

各x独立地为o、s和n，

各r¹和r²独立地为羟基、卤素、氨基、氰基、c1-6的烷基、c2-6的烯基。

除非其他方面表明，本发明所描述的结构式包括所有的同分异构形式(如对映异构，非对映异构，和几何异构(或构象异构))：例如含有不对称中心的r、s构型，双键的(z)、(e)异构体，和(z)、(e)的构象异构体。因此，本发明的化合物的单个立体化学异构体或其对映异构体，非对映异构体，或几何异构体(或构象异构体)的混合物都属于本发明的范围。

另外，需要说明的是，除非以其他方式明确指出，在本文中通篇采用的描述方式“各…独立地为”、“…独立地为”和“…各自独立地为”可以互换，均应做广义理解，其既可以是指在不同基团中，相同符号之间所表达的具体选项之间互相不影响，也可以表示在相同的基团中，相同符号之间所表达的具体选项之间互相不影响，以r¹为例，结构式和结构式“两者之间r¹的具体选项互相之间不受影响。

除非其他方面表明，本发明的化合物的所有互变异构形式都包含在本发明的范围之内。另外，除非其他方面表明，本发明所描述的化合物的结构式包括一个或多个不同的原子的富集同位素。

术语“互变异构体”或“互变异构的形式”是指不同能量的结构的同分异构体可以通过低能垒互相转化。例如质子互变异构体(即质子移变的互变异构体)包括通过质子迁移的互变，如酮式-烯醇式和亚胺-烯胺的同分异构化作用。原子价(化合价)互变异构体包括重组成键电子的互变。

本发明所使用的术语“药学上可接受的盐”是指本发明的化合物的有机盐和无机盐。药学上可接受的盐在所属领域是为我们所熟知的，如文献：s.m.bergeetal.,j.pharmaceuticalsciences,66,1-19,1977所记载的。药学上可接受的无毒的酸形成的盐包括，但并不限于，与氨基基团反应形成的无机酸盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、高氯酸盐，和有机酸盐，如乙酸盐、草酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、丙二酸盐，或通过书籍文献上所记载的其他方法如离子交换法来得到这些盐。其他药学上可接受的盐包括己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、重硫酸盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊基丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、反丁烯二酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡萄糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、扑酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一酸盐、戊酸盐等等。通过适当的碱得到的盐包括碱金属、碱土金属，铵和n⁺(c1-4烷基)4的盐。

根据本发明的一些实施例，ar¹可以为

根据本发明的优选实施例，ar¹可以为

根据本发明的一些实施例，ar²可以为

根据本发明的优选实施例，ar²可以为

根据本发明的实施例，该化合物可以具有以下其中之一的结构：

或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、药学上可接受的盐。

本发明的化合物(在本文中，表述方式“式(i)化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体和药学上可接受的盐及前药”可以统称为“本发明的化合物”)，可以用于生产医药产品治疗癌症，包括那些本发明所描述的。进一步地，本发明的化合物可以用于生产抗癌制品。由此，本发明的化合物可以用于生产一种医药品用来减轻、阻止、控制或治疗癌症。由此，本发明的化合物可以用作药物组合物的活性成分，该药物组合物可以包括式(i)所代表的化合物，还可以进一步包含至少一种药学上可接受的载体、辅剂或稀释剂。

具体地说，盐是药学上可接受的盐。术语“药学上可接受的”的含义是，所采用的物质或组合物必须是适合化学或毒理上与组成制剂的其他组分和用于治疗的哺乳动物匹配的。本领域技术人员可以根据所采用其他组分和所用于治疗的对象例如人，来具体选择“药学上可以接受的”的物质或组合物。

根据本发明的一些实施例，药学上可接受的盐为无机酸盐或有机酸盐。

根据本发明的一些优选实施例，该无机酸盐为选自盐酸、硫酸和磷酸的至少一种。

根据本发明的一些优选实施例，该有机酸盐为选自乙酸、三氟乙酸、丙二酸、柠檬酸和对甲苯磺酸的至少一种。

本发明的化合物的盐还包括用于制备或纯化式(i)所示化合物的中间体或式(i)所示化合物分离的对映异构体的盐，但不一定是药学上可接受的盐。

根据本发明的另一方面，本发明提供了一种药物组合物。该药物组合物包含任何一种本发明的化合物。该药物组合物还可以进一步包含药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂、辅剂、媒介物或其组合。所述药物组合物可以用于治疗癌症。

根据本发明的一些实施例，该药物组合物还可以进一步包括其它抗肿瘤药。本发明前述的化合物可以与其它抗肿瘤药物产生协同作用，显著提高其它抗肿瘤药的抑瘤效果。

根据本发明的实施例，其它抗肿瘤药的种类并不受特别的限制，只要抑制肿瘤的生长即可，其它抗肿瘤药包括但不限于环磷酰胺、塞替派、司莫司汀、盐酸氮芥、白消安、苯丁酸氮芥、氮甲卡莫司汀、六甲蜜胺、洛莫司汀、苯丙氨酸氮芥、硝卡芥、异环磷酰胺、二溴甘露醇、阿糖胞苷、氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、羟基脲、替加氟、甲异靛、巯嘌呤、放线菌素d、丝裂霉素、盐酸阿霉素、盐酸平阳霉素、盐酸表柔比星、盐酸吡柔比星、盐酸柔红霉素、高三尖杉酯碱、硫酸长春新碱、羟喜树碱、依托泊苷、硫酸长春地辛、硫酸长春碱、重酒石酸长春瑞宾、紫杉醇、氨鲁米特、他莫昔芬、氟他胺、戈那瑞林、醋酸亮丙瑞林、来曲唑、卡铂、盐酸丙卡巴肼、安吖啶、枸橼酸达卡巴嗪、门冬酰胺酶、顺铂和盐酸米托蒽醌。

根据本发明的一些实施例，该药物组合物可以包括一种或多种其它抗肿瘤药，本发明前述的化合物可以与其它抗肿瘤药物产生协同作用，显著提高其它抗肿瘤药的抑瘤效果。

下面参考具体实施例，对本发明进行说明，需要说明的是，这些实施例仅仅是说明性的，而不能理解为对本发明的限制。

下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品，例如可以采购自sigma公司。

实施例1

合成路线：

1)ar气保护下，在250ml三口瓶中依次投入2,6-二氨基吡啶(2.18g，20mmol)，2,6-二溴吡啶(14.22g，60mmol)以及叔丁醇钾(22.4g,200mmol)。剧烈搅拌0.5h后，迅速加入180ml干燥的thf，得到一深绿色溶液。继续反应1.5h。随后，将体系升温至60–70℃，缓慢滴加ch3i的thf溶液(11.36g,80mmolch3i溶于20mlthf中)，继续反应约1.5h。反应结束后，旋蒸除去溶剂，剩余残渣溶于500ml乙酸乙酯中，有机层用饱和食盐水萃取(3*150ml)，合并有机层并用无水硫酸镁干燥。柱层析后得到黄褐色固体产物1-1n²,n⁶-二(6-溴吡啶-2-基)-n²,n⁶-二甲基吡啶-2,6-二胺(n²,n⁶-bis(6-bromopyridin-2-yl)-n²,n⁶-dimethylpyridine-2,6-diamine)7.54g，产率84％，该化合物1-1的h-nmr图谱如图1所示，用于后续反应。

2)在250ml三口圆底烧瓶中，依次加入化合物1-1(30g，0.6mol)、1h-咪唑(9.43g，0.14mol)，cui(1.63g，8.5mmol)，l-proline(1.97g，0.017mmol)以及dmso(80ml)。室温条件下搅拌反应30min后，升温至120℃。反应12h后，冷却至室温，减压蒸馏除去dmso，残余固体溶于二氯甲烷与水的混合液中，用6mol/lhcl调节ph至中性。二氯甲烷萃取水相后，合并有机相并用无水硫酸钠干燥。二氯甲烷/正己烷重结晶后得到产物1-2，1h-咪唑-1基)吡啶-2-基)-n²,n⁶-二甲基吡啶-2,6-二胺(n²,n⁶-bis(6-(1h-imidazol-1-yl)pyridin-2-yl)-n²,n⁶-dimethylpyridine-2,6-diamine)24.4g，产率96％，该化合物1-2的h-nmr图谱如图2所示。

3)取9,10-二溴甲基蒽(3.64g10mmol)，与化合物1-2(4.23g,10mmol)分别溶于750ml乙腈中，回流状态下逐滴滴入100ml乙腈中，回流状态下继续反应48h。随后，加入nh4pf6(16.3g,100mmol)，继续反应24h。反应结束后，旋蒸除去乙腈，残余固体用水洗涤后，用乙腈溶解剩余固体，并用硅藻土过滤。滤液旋干后用乙腈/1,4-二氧六环重结晶，得到黄色粉末状产物1-4环，即(n²,n⁶-二(6-(1h-咪唑-1基)吡啶-2-基)-n²,n⁶-二甲基吡啶-2,6-二胺)(9,10-二甲基蒽)二六氟磷酸盐，5.1g，产率56％，该化合物1-4的h-nmr图谱如图3和4所示，其中图4是图3的局部放大图。

实施例2

合成路线

取对二溴甲基苯(2.64g,10mmol)，与实施例1得到的化合物1-2(4.23g,10mmol)分别溶于750ml乙腈中，回流状态下逐滴滴入100ml乙腈中，回流状态下继续反应48h。随后，加入nh4pf6(16.3g，100mmol)，继续反应24h。反应结束后，旋蒸除去乙腈，残余固体用水洗涤后，用乙腈溶解剩余固体，并用硅藻土过滤。滤液旋干后用乙腈/1,4-二氧六环重结晶，得到浅黄色至白色粉末状产物2-1，即环(n²,n⁶-二(6-(1h-咪唑-1基)吡啶-2-基)-n²,n⁶-二甲基吡啶-2,6-二胺)(1,4-二甲基苯)二六氟磷酸盐4.7g，产率58％，该化合物2-1的h-nmr图谱如图5和6所示，其中图6是图5的局部放大图。

实施例3

合成路线

取间二溴甲基苯(2.64g,10mmol)，与化合物1-2(4.23g,10mmol)分别溶于750ml乙腈中，回流状态下逐滴滴入100ml乙腈中，回流状态下继续反应48h。随后，加入nh4pf6(16.3g，100mmol)，继续反应24h。反应结束后，旋蒸除去乙腈，残余固体用水洗涤后，用乙腈溶解剩余固体，并用硅藻土过滤。滤液旋干后用乙腈/1,4-二氧六环重结晶，得到浅黄色至白色粉末状产物3-1，即环(n²,n⁶-二(6-(1h-咪唑-1基)吡啶-2-基)-n²,n⁶-二甲基吡啶-2,6-二胺(1,3-二甲基苯)二六氟磷酸盐，4.3g，产率52％，该化合物3-1的h-nmr图谱如图7和8所示，其中图8为图7的局部放大图。

实施例4

合成路线

取邻二溴甲基苯(2.64g，10mmol)，与化合物1-2(4.23g，10mmol)分别溶于750ml乙腈中，回流状态下逐滴滴入100ml乙腈中，回流状态下继续反应48h。随后，加入nh4pf6(16.3g，100mmol)，继续反应24h。反应结束后，旋蒸除去乙腈，残余固体用水洗涤后，用乙腈溶解剩余固体，并用硅藻土过滤。滤液旋干后用乙腈/1,4-二氧六环重结晶，得到浅黄色至白色粉末状产物4-1，即环(n²,n⁶-二(6-(1h-咪唑-1基)吡啶-2-基)-n²,n⁶-二甲基吡啶-2,6-二胺)(1,2-二甲基苯)二六氟磷酸盐，4.7g，产率43％，化合物4-1的h-nmr图谱如图9和10所示，其中图10是图9的局部放大图。

实施例5

本实施例中，研究实施例1得到化合物1-4(简称mac)的体外抑瘤作用，具体如下：

取增殖良好并处于对数生长期的ht1080细胞制成5*104个/ml的细胞悬液，接种于96孔板内，200μl/孔。过夜培养后，每孔加入200μl含有不同浓度的药物的完全培养液，继续培养72小时，然后每孔加入5g/l的mtt溶液，4h后，倾去各孔上清液，每孔加入dmso200μl，静置20min；用biorad550型仪器于490波长下测定96孔板每一孔的光密度值，每一测定浓度设置4个平行孔，重复3-4次。

按照下述公式计算中路细胞生长抑制率，肿瘤细胞生长抑制率(％)抑制率＝【1-(od样品/od对照)】*100％

实验结果：实验结果如下表所示，mac本身具有一定的抑瘤作用，而且，可以显著提高ptx的抑瘤效果，如表2所示，在加入mac后，30μg/ml的ptx对ht1080的抑制率由43.2％提高到81.0％，如表3所示，随着mac的浓度的增加，mac对ptx的抑瘤作用提升也显著增加，呈剂量依赖性。由此，实验表明咪唑盐大环化合物mac具有明显的辅助ptx抑制人纤维肉瘤细胞增殖的能力。

表1

表2

表3

实施例6

采用实施例5的方法，研究实施例1得到化合物mac的体外抑瘤作用，只是将肿瘤细胞变为a549-r，其它条件不变，实验结果如下：

实验结果如下表所示，如表4所示，mac本身具有一定的抑瘤作用，而且，可以显著提高ptx的抑瘤效果，如表5所示，在加入mac后，在加入mac后，50μg/l的ptx对mcf-7的抑制率由12.4％提高到69.1％，显示了咪唑盐大环化合物具有明显的辅助ptx抗人肺癌细胞增殖的能力。当咪唑盐大环化合物(mac)本身的浓度为5μm时，对mcf-7的抑制率为18.2％，当ptx本身浓度为50μg/l时，对mcf-7的抑制率为12.4％，mac(5μm)+ptx50μg/l可以显著提高mcf-7的抑制率为35.4％。50μg/l的ptx对mcf-7的抑制率为12.4％，随着咪唑盐大环化合物浓度的提高(0μm-10μm)，ptx对mc2f-7的抑制率可以显著提高，呈剂量依赖性。由此，实验表明咪唑盐大环化合物mac具有明显的辅助ptx抑制乳腺癌肿瘤细胞增殖的能力。

表4

表5

实施例7

采用实施例5的方法，研究实施例1得到化合物mac的体外抑瘤作用，只是将肿瘤细胞变为a549-r，其它条件不变，实验结果如下：

实验结果如下表所示，如表6所示，mac本身具有一定的抑瘤作用，而且，可以显著提高ptx的抑瘤效果，如表7所示，当mac本身的浓度为5μm时，对a549-r的抑制率为9.3％，当ptx本身浓度为250mg/l时，对a549-r的抑制率为-24.3％，而mac(5μm)+ptx250mg/l时可以显著提高a549-r的抑制率为25.6％。250mg/ml的ptx对a549-r的抑制率为-24.3％，随着咪唑盐大环化合物浓度的提高(0μm-10μm)，ptx对a549-r的抑制率可以显著提高。

表6

表7

实施例8

采用实施例5的方法，研究实施例2得到化合物2-1、实施例3得到的化合物3-1和实施例4得到的化合物4-1的体外抑瘤作用，只是将肿瘤细胞变为sw480、du145、a375、bgc-823和hela细胞，并设置5-氟尿嘧啶为阳性对照组，其它条件不变，实验结果如下：

实验结果如下表所示，如表8所示，化合物2-1、3-1和4-1均具有一定的抑瘤作用，但不同肿瘤对不同的化合物的剂量依赖性不同，而且相同化合物对不同肿瘤的抑制率也不同，相同化合物的同种剂量对不同肿瘤的抑制率也相差很大。

表8

实施例8

采用实施例5的方法，研究化合物耦合的不同的盐对该化合物抑瘤作用的影响，具体地，比较盐酸盐和磷酸二氢盐对化合物抑瘤作用的影响实施例2得到化合物2-1、实施例3得到的化合物3-1和实施例4得到的化合物4-1的体外抑瘤作用，只是将肿瘤细胞变为sw480、du145、a375、bgc-823和hela细胞，其它条件不变，实验结果如下：

实验结果如表9所示，其中，盐酸盐用“cl”表示，磷酸二氢盐用“p”表示，例如2-1-cl表示化合物2-1的盐酸盐，结果表明不同的盐类对化合物的抑瘤作用有一定的影响，并且，同一化合物的不同盐类对不同的肿瘤的抑制作用的影响不同。

表9

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，本领域的普通技术人员可以理解：在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由权利要求及其等同物限定。