一种高纯度D‑阿洛酮糖的制备方法与流程

文档序号:12097303阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种D-阿洛酮糖的制备方法,其特征在于,步骤如下:

(1)将枯草芽孢杆菌的发酵液经离心后,取菌体经均质处理,得到含有D-阿洛酮糖3-差向异构酶的混合液;

所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BLCY-005,于2016年10月26日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号CGMCC No.13152,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所;

(2)配制质量浓度为20%~60%的果糖溶液,加入含有D-阿洛酮糖3-差向异构酶的混合液,调pH值5.5~6.5,按质量百分比0.001%~0.005%的比例添加氯化钴,在40~60℃条件下,保温反应10~30小时,然后向反应液中流加果糖溶液,维持反应体系中果糖质量浓度为20%~60%,继续反应10~30h,停止反应,制得D-阿洛酮糖粗液;

(3)将步骤(2)制得的D-阿洛酮糖粗液经脱色、过滤、离交、色谱分离、浓缩后,再经过结晶或干燥,制得D-阿洛酮糖。

2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中,离心条件为:温度10~20℃,转速3000r/min,时间30~50分钟。

3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中,均质的条件为:温度10~20℃,压力30mpa~50mpa,时间10~20min。

4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中,枯草芽孢杆菌的发酵液的制备方法如下:

I、将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BLCY-005接种于种子培养基中,在30~38℃的条件下,增殖培养6~12h,制得种子液;

所述种子培养基组分如下,均为重量百分比:

蛋白胨1%,酵母浸粉0.5%,氯化钠1%,无水硫酸镁0.01%,磷酸二氢钾0.02%,余量水,pH6.0~7.0;

II、将步骤I制得的种子液按体积比1~10%的比例接种于发酵培养基中,在30~38℃发酵培养30~48h,制得枯草芽孢杆菌发酵液;

所述发酵培养基组分如下,均为重量百分比:

酵母浸粉3%,玉米浆粉2%,葡萄糖1%,无水硫酸镁0.01%,磷酸氢二铵0.02%,硫酸铵0.02%,余量水,pH6.0~7.0。

5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,含有D-阿洛酮糖3-差向异构酶的混合液的加入量为果糖溶液体积百分比的5%。

6.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中,脱色步骤如下:

将步骤(2)制得的D-阿洛酮糖粗液,按质量百分比0.5~1%的比例加入活性炭,80~85℃搅拌30~40min;

优选的,所述步骤(3)中,过滤采用板框过滤,过滤压力0.2~0.4Mpa,水流量5.0~6.0t/h。

7.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中,离交步骤如下:

将脱色过滤后的粗糖液以3倍树脂体积/小时的流速,在35~55℃通过连续离子交换系统,进行离交脱盐,离交后料液透光率≥98%;

优选的,所述步骤(3)中,色谱分离步骤如下:

色谱运行压力0.20~0.30MPa,温度60~70℃,水耗比1:(1.3~1.6),每小时进料1.5~2.0m3,收集D-阿洛酮糖。

8.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中,浓缩采用四效降膜蒸发器,真空度为0.06-0.09Mpa,料液温度50~85℃,浓缩至原体积的60~75%。

9.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中,干燥为喷雾干燥,步骤如下:

浓缩后的糖液进入到干燥塔中,进风温度130~150℃,启动雾化器,液体经喷雾干燥为粉末状固体。

10.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中,结晶反应条件为:

糖液质量浓度70~85%,温度50~70℃,添加溶质质量10~30%的晶种,搅拌均匀,于50~70℃静置8~16小时,随后按照3~6h降1℃的速率缓慢降温,同时缓慢搅拌,直至溶液中形成大量均匀、规则的晶粒,分离,制得D-阿洛酮糖。

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