一种加快氧化硫硫杆菌增殖的培养基的制作方法

本发明涉及一种加快氧化硫硫杆菌增殖的培养基配方，特别涉及一种加入在常规培养基而促进氧化硫硫杆菌快速增殖的营养液。

背景技术：

氧化硫硫杆菌是一种矿质化能自养菌，专性好氧，嗜酸，革兰氏染色阴性，呈杆状，宽0.3～0.5µm，氧化硫硫杆菌以氧化单质硫或还原态的硫化物来获得自身细胞生长和代谢所需要的能量，以NH₄⁺为氮源，以空气中CO₂为碳源。氧化硫硫杆菌被广泛应用于输油管道、储油罐和飞机油箱中，在微生物浸矿、微生物脱硫方面也多有应用。人们发现，氧化硫硫杆菌在污水治理、土壤治理方面也具有显著的效果。近年来，氧化硫硫杆菌在医药、环保、农业、生物能源等方面的应用得到重视，许多国家加大对氧化硫硫杆菌微生物资源的开发和利用。

氧化硫硫杆菌是一种专性化能自养菌，常用的培养基有Waksman medium、Staeky medium、9K-medium等常规培养基。但是，用这些常规培养基培养氧化硫硫杆菌，其生长速度慢，难以达到满足工业化制备的需要。因此，氧化硫硫杆菌微生物的快速培养技术备受关注。目前，对如何加快氧化硫硫杆菌增殖的培养方法很少有研究报道。本发明通过向常规培养基中添加复合营养液，这些营养液参与氧化硫硫杆菌的生长代谢过程而加速其生长繁殖速度，从而解决氧化硫硫杆菌常规培养增殖速度慢的问题。

技术实现要素：

本发明的目的是提供一种加快氧化硫硫杆菌增殖的培养基配方。

一种加快氧化硫硫杆菌增殖的培养基配方按以下步骤实现。

一种能加快氧化硫硫杆菌增殖的培养基：在常规培养基中加入营养液，所述营养液为蛋白胨和酵母粉。所述的促进氧化硫硫杆菌快速增殖的营养液，是以重量百分数计蛋白胨和酵母粉在常规培养基中的添加量均为0.5%～1%。即本发明的能加快氧化硫硫杆菌增殖的培养基配方为：按重量百分含量计，0.2%（NH₄）₂SO₄、 0.3% KH₂PO₄、0.05% MgSO₄·7H₂O、0.001% FeSO₄·7H₂O、0.025% CaCl·2H₂O、1%硫磺粉、0.5%～1%蛋白胨和0.5%～1%酵母粉。

作为优选，在上述的一种能加快氧化硫硫杆菌增殖的培养基中加以重量百分数计为5%～10%的红糖。

本发明作为一种促进氧化硫硫杆菌快速增殖的培养基，与常规培养基相比有着明显的促进菌株生长、缩短培养时间的效果。利用该培养基培养氧化硫硫杆菌的结果表明，在培养过程中，随着菌体生长、漂浮在水面的硫磺粉颗粒逐渐下沉并分散于水中、溶液由澄清逐渐变为浑浊的时间，与常规培养基相比，提前了5-7天，菌株生长速度显著高于常规培养基。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

实施例1。

本实施方式的一种加快氧化硫硫杆菌增殖的培养基配方按以下步骤实现。

常规培养基配方：按重量百分含量计，0.2%（NH₄）₂SO₄、 0.3% KH₂PO₄、0.05% MgSO₄·7H₂O、0.001% FeSO₄·7H₂O、0.025% CaCl·2H₂O、1%硫磺粉。

添加营养液的培养基配方：按重量百分含量计，0.2%（NH₄）₂SO₄、 0.3% KH₂PO₄、0.05% MgSO₄·7H₂O、0.001% FeSO₄·7H₂O、0.025% CaCl·2H₂O、1%硫磺粉、0.5%蛋白胨和0.5%酵母粉。

在添加蛋白胨和酵母粉的培养基中接种氧化硫硫杆菌，以常规培养基为对照，培养条件为30℃、180rpm恒温振荡培养。与常规培养基相比，添加蛋白胨和酵母粉的培养基，漂浮在水面的硫磺粉颗粒下沉并分散于水中、溶液由清澈变为浑浊，细菌数量增加，OD₆₀₀达到2.8以上，与常规培养基比较，细菌总数提高，时间提前了5天。结果表明，在常规培养基中添加蛋白胨和酵母粉，可明显提高氧化硫硫杆菌的生长繁殖速度，缩短培养时间，实现氧化硫硫杆菌的快速繁殖生长。

实施例2。

本实施方式的一种加快氧化硫硫杆菌增殖的培养基配方按以下步骤实现。

常规培养基配制：按重量百分含量计，0.2%（NH₄）₂SO₄、 0.3% KH₂PO₄、0.05% MgSO₄·7H₂O、0.001% FeSO₄·7H₂O、0.025% CaCl·2H₂O、1%硫磺粉。

添加营养液的培养基配制：按重量百分含量计，0.2%（NH₄）₂SO₄、 0.3% KH₂PO₄、0.05% MgSO₄·7H₂O、0.001% FeSO₄·7H₂O、0.025% CaCl·2H₂O、1%硫磺粉、0.5%蛋白胨、0.5%酵母粉和10%红糖。

在添加红糖的培养基中接种氧化硫硫杆菌，以常规培养基为对照，30℃、180rpm恒温振荡培养氧化硫硫杆菌。与常规培养基相比，添加红糖的培养基，漂浮在水面的硫磺粉颗粒下沉并分散于水中、溶液由清澈变为浑浊，溶液由清澈变为浑浊，细菌数量增加，OD₆₀₀达到2.5以上，与常规培养基比较，细菌总数提高，时间提前了7天。结果表明，在常规培养基中添加红糖，可明显提高氧化硫硫杆菌的生长繁殖速度，缩短培养时间，实现氧化硫硫杆菌的快速繁殖生长。