一种沙门氏菌毒力岛基因mgtC、sseL双重PCR检测方法及用途与流程

文档序号:12412736阅读:来源:国知局

技术特征:

1.用于沙门氏菌毒力岛基因mgtC、sseL的双重PCR检测方法的引物,其中毒力岛基因mgtC的引物的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,毒力岛基因sseL的引物的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。

2.一种检测沙门氏菌毒力岛基因mgtC、sseL的双重PCR检测方法,其中毒力岛基因mgtC的引物的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,毒力岛基因sseL的引物的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示;包括以下步骤:

(1)双重PCR反应;双重PCR反应体系:样品细菌模板溶液3uL,mgtC引物对和sseL引物对共1ml,2×Taq Master MIX 8.5uL,双蒸水11.5uL;

双重PCR扩增参数:94℃变性5分钟,之后开始扩增循环,每个循环的程序为:94℃变性45秒,57℃退火45秒,72℃延伸1分钟,共35个循环;最后72℃延伸10分钟;降温至15℃,结束PCR反应;

(2)PCR扩增产物进行凝胶电泳:取步骤(1)PCR扩增产物进行凝胶电泳。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:步骤(2)中,凝胶电泳结果在449bp和184bp位置同时出现扩增条带,则说明样品中含沙门氏菌;如果电泳结果在184bp位置出现单一条带,说明样品中含伤寒沙门氏菌;如果电泳结果在449bp和184bp位置均未出现扩增条带,则说明样品中不含沙门氏菌。

4.权利要求2或3所述的方法用于鉴定沙门氏菌毒力岛基因mgtC和sseL的用途。

5.权利要求2或3所述的方法用于鉴定沙门氏菌的用途。

6.权利要求2或3所述的方法用于鉴定区分伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的用途。

7.根据权利要求2-3所述的双重PCR方法,其特征在于,步骤(1)样品细菌含有的沙门氏菌≥3×103cfu·mL-1

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