本发明涉及一种试剂盒,具体是一种乳腺癌基因检测试剂盒。
背景技术:
乳腺癌是发生在乳腺腺上皮细胞组织的恶性肿瘤,乳腺癌中99%发生在女性,男性仅占1%。乳腺并不是维持人体生命活动的重要器官,原位乳腺癌并不致命,但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性,细胞之间连接松散,容易脱落,一旦脱落,游离的癌细胞可以随血液或淋巴结播散全身,形成转移,危及生命。全球乳腺癌发生率自20世纪70年代末开始一直上升,且逐渐年轻化,严重威胁广大妇女的身体健康,因此,对乳腺癌的合理防治至关重要。
乳腺癌是多因素、多基因和环境共同作用的结果,其家族遗传性早已被人们所认识。大量研究表明,与现已知的BRCA1、BRCA2,和PALB2、RECQL等这些基因突变相关的乳腺癌称为遗传性乳腺癌,占全部乳腺癌的5%-10%。随着乳腺癌发病率的增加,乳腺癌易感基因的研究越来越被重视。新一代测序技术为寻找这些易感基因的致病突变提供了一种新的平台。早期发现、早期诊断,将提高治疗的针对性,避免过度化治疗。利用现代科学研究成果,开发一项基于分子遗传基础的乳腺癌基因检测产品会对受检者罹患乳腺癌风险性的评估更便捷,更科学,同时对易感基因突变携带者的临床应用也有很重要的意义。人们都是采用乳腺癌检测试剂盒对基因进行检测,现有的乳腺癌检测试剂盒只能检测几个致病SNP位点,其余的检测需要在别的试剂盒中进行检测,使用不方便并且加大了使用成本,花费时间长。
技术实现要素:
本发明的目的在于提供一种乳腺癌基因检测试剂盒,以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
一种乳腺癌基因检测试剂盒,包括包装盒体、衬垫和试管,所述衬垫设置在包装盒体的内部并且衬垫上设置有容器孔,试管包括引物试管、PCR反应液试管、SAP反应液试管、CODE反应液试管、接头试管、磁珠试管、阳性对照品试管和阴性对照品试管,引物试管、PCR反应液试管、SAP反应液试管、CODE反应液试管、接头试管、磁珠试管、阳性对照品试管和阴性对照品试管均放置在容器孔中,引物试管的数量为七个,第一个引物试管中引物的上游引物序列如SEQIDNo.1所述,第一个引物试管中引物的下游引物序列如SEQIDNo.2所述,第二个引物试管中引物的上游引物序列如SEQIDNo.3所述,第二个引物试管中引物的下游引物序列如SEQIDNo.4所述,第三个引物试管中引物的上游引物序列如SEQIDNo.5所述,第三个引物试管中引物的下游引物序列如SEQIDNo.6所述,第四个引物试管中引物的上游引物序列如SEQIDNo.7所述,第四个引物试管中引物的下游引物序列如SEQIDNo.8所述,第五个引物试管中引物的上游引物序列如SEQIDNo.9所述,第五个引物试管中引物的下游引物序列如SEQIDNo.10所述,第六个引物试管中引物的上游引物序列如SEQIDNo.11所述,第六个引物试管中引物的下游引物序列如SEQIDNo.12所述,第七个引物试管中引物的上游引物序列如SEQIDNo.13所述,第七个引物试管中引物的下游引物序列如SEQIDNo.14所述。
作为本发明进一步的方案: PCR反应液试管、SAP反应液试管、CODE反应液试管、磁珠试管、阳性对照品试管和阴性对照品试管的数量均为一个,接头试管的数量为12的整数倍。
作为本发明进一步的方案:包装盒体上端设置有封盖。
所述乳腺癌基因检测试剂盒的使用方法,具体步骤如下:
步骤一,在PCR仪上扩增基因片段,每支引物试管的PCR扩增使用3个反应管,其中1个反应管为被检测样本,阳性对照和阴性对照各使用1个反应管,每个试管中总体积6.5ul,其中3ulPCR反应液、1ul引物和2.5ul检测样本(基因组DNA、阳性对照和阴性对照)。反应条件为:95℃下进行2分钟;45个循环的95℃,30秒,56℃,30秒,72℃,1分钟;72℃,5分钟;最终在4℃保存;
步骤二,扩增反应结束之后,使用SAP反应液对每管产物进行纯化,反应条件为:37℃,60分钟;80℃、20分钟;最终在4℃保存;
步骤三,SAP反应液反应完成后,使用CODE反应液对每个样本的产物加不同的接头,反应条件为:95℃、10分钟;12个循环的95℃、15秒,60℃、30秒,72℃、30秒;72℃、3分钟;最终在4℃保存;
步骤四,CODE反应结束之后,使用磁珠对产物进行纯化,并使用QIAquick® Gel Extraction Kit回收产物中200-500bp的片段,反应结束后在Hiseq X10仪器上进行测序,根据得到的测序结果进行生物信息学分析,判断BRCA1、BRCA2、PALB2和RECQL基因的外显子序列是否存在致病突变。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:该产品设计合理,结构简单,运用多重PCR技术实现了同时检测4个乳腺癌相关基因全部外显子序列的目的,从而告知被检者患乳腺癌的风险数值,提前预防和控制,指导医师选择正确的临床治疗方案,有利于患者进行针对性治疗;该产品将同一疾病相关基因的全部外显子检测整合在一个试剂盒内,使用更方便而且成本更低,对患乳腺癌风险性的评估也更便捷,更科学。
附图说明
图1为乳腺癌基因检测试剂盒的结构示意图。
其中:1-包装盒体,2-衬垫,3-引物试管,4-PCR反应液试管,5-SAP反应液试管,6-CODE反应液试管,7-接头试管,8-磁珠试管,9-阳性对照品试管,10-阴性对照品试管。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
请参阅图1,一种乳腺癌基因检测试剂盒,包括包装盒体1、衬垫2和试管,所述衬垫2设置在包装盒体1的内部并且衬垫2上设置有容器孔,试管包括引物试管3、PCR反应液试管4、SAP反应液试管5、CODE反应液试管6、接头试管7、磁珠试管8、阳性对照品试管9和阴性对照品试管10,引物试管3、PCR反应液试管4、SAP反应液试管5、CODE反应液试管6、接头试管7、磁珠试管8、阳性对照品试管9和阴性对照品试管10均放置在容器孔中,引物试管3的数量为七个。PCR反应液试管4、SAP反应液试管5、CODE反应液试管6、磁珠试管8、阳性对照品试管9和阴性对照品试管10的数量均为一个,接头试管7的数量为12的整数倍。包装盒体1上端设置有封盖。其中PCR反应液的成分包含:KAPA2G Robust 热启动DNA聚合酶、dNTP、MgCl2和PCR缓冲液。SAP反应液的成分包含:SAP、SAP反应缓冲液、核酸外切酶1和核酸外切酶1反应缓冲液。CODE反应液的成分包含:KAPA HIFI 缓冲液,KAPA HIFI 热启动DNA聚合酶和dNTP。纯化产物用的磁珠为:Axygen的AMPure XP beads。对照品分为阳性对照品和阴性对照品,阴性对照品为无菌双蒸水样品,阳性对照品为血液DNA样本。
实施例
血样总DNA提取试剂盒购于美国Qiagen公司,KAPA2G Robust HotStart DNA Polymerase、dNTP、MgCl2、PCR缓冲液、KAPA HiFi Fidelity buffer、KAPA HiFi Hotstart DNA Polymerase等相关试剂购于美国Kapa Biosystems公司,SAP和SAP reaction buffer购于美国Affymetrix公司,Exonuclease 1和Exonuclease 1 reaction buffer购于美国NEB公司,磁珠购于美国Axygen公司,9700型PCR仪为美国ABI公司产品。选取30例血液样本,其中已确定患乳腺癌的为18例。样本用血样总DNA提取试剂盒提取总DNA,每一例检测为21个反应管,每管中总体积6.5ul,其中3ul PCR反应液,1ul引物,每一管引物使用3个反应管,1个反应管中加入2.5ul被检测DNA,另外2个反应管中加入2.5ul阳性对照和阴性对照,在ABI 9700 PCR仪上进行扩增,反应条件为:95℃、2分钟;45个循环的95℃、30秒,56℃、30秒,72℃、1分钟;72℃、5分钟;最终在4℃保存。扩增反应结束之后,使用SAP反应液对每管产物进行纯化,反应条件为:37℃、60分钟;80℃、20分钟;最终在4℃保存。SAP反应液反应完成后,使用CODE反应液对每个样本的产物加不同的接头,反应条件为:95℃、10分钟;12个循环的95℃、15秒,60℃、30秒,72℃、30秒;72℃、3分钟;最终在4℃保存。CODE反应结束之后,使用磁珠对产物进行纯化,并使用QIAquick® Gel Extraction Kit回收产物中200-500bp的片段。反应结束后在Hiseq X10仪器上进行测序。根据得到的测序结果进行生物信息学分析,判断BRCA1、BRCA2、PALB2、和RECQL基因的外显子序列是否存在致病突变即可。
该产品设计合理,结构简单,运用多重PCR技术实现了同时检测4个乳腺癌相关基因全部外显子序列的目的,从而告知被检者患乳腺癌的风险数值,提前预防和控制,指导医师选择正确的临床治疗方案,有利于患者进行针对性治疗;该产品将同一疾病相关基因的全部外显子检测整合在一个试剂盒内,使用更方便而且成本更低,对患乳腺癌风险性的评估也更便捷,更科学。
对于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。
此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
<110> 上海爱他基因科技有限公司
<120> 一种检测乳腺癌易感基因的试剂盒
<130> 2016
<160> 14
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 1536
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ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGAAGGTTT GTTCATTACT GCTTATGACT T 51
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TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTACTAGGT GATTTCAATT CCTGTGCTA 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCGTACTGG GTTTTTAGCA AGCATT 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCGCGTTGA AGAAGTACAA AATGTCA 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGCAACAT TCTCTGCCCA CTC 43
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAAACCGAG ATCACGGGTG AC 42
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACTGAGGC TCTTTAGCTT CTTAGGA 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTTCTCCTC TGCAAGAACA TAAACCA 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGGTCAGGA AAGAATCCAA GTTTGGTATA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGTTCTTCA GAGTCTGGAT TGACAGT 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCTCTGCA GAAGTTTCCT CACTAATATT C 51
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCATGGCTA TTTGCCTTTT GAGTATTCTT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCGTGCCAA AAGACTTCTA CAGAGT 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAATGTTAA ATTCAAAGTC TCTAAGACTT TGTTC 55
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGCATTGA AAGTCTCTTT AGGTGATTCT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCTGTGCT AAAAATCCCA CAAGTATT 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGACAGAG GTACCTGAAT CAGCA 45
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTTCCTTGG ATAACACTAA ATAGCAGCAT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGGCAGTTT AGAATCTGTC AGTTCATCAT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCTTTTGG CTAGGTGTTA AATTATGGTT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCTGCCAGT TTCCATATGA TCCATCTATA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACCACAGT CTCAATAGAA ACAAGGTTTT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCTTGAAG ATTTTTCCAA AGTCAGATGT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAACCTGAA TTATCACTAT CAGAACAAAG CA 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCACAAACG ATTTTACCAC TGGCT 45
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCTTTTTGG ATCATTTTCA CACTGTCCTT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCTGAAGAC CCCAAAGATC TCATGTTA 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGCCTGTG ATTATTCAAG GCTCTT 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGAGAAAT GGGAAATGAG AACATTCCAA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGAAATCA TCAGGTGGTG AACAGAA 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGACCATCA AATATTCCTT CTCTAAGCCA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAGAAAAC ACAGAAAAAT CTCCAGCAAA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCGTTGCC TTTGTTTCTT CTTAATTC 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGAGGAGCT CATTAAGGTT GTTGATGT 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGGTAGAA TATTTACCTT CACAAACTTT GGT 53
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGAGCTTT CGCAACTTCC AAAAAA 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGTTGAAT ATCTGTTTTT CAACAAGTAC ATTT 54
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCTTGTTT TCTTCACAGT GCAGT 45
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACAATTAT CAACCTCATC TGCTCTTTCT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAAGAAAGT GTGAGCAGGG AGAAG 45
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAACAGAA TATACGATGG CCTCCA 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGTGTTGGA CAGTGTAGCA CTCTA 45
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAGCTGCT TGTGAATTTT CTGAGAC 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAACCAGAC AAAAGAGCTT GGGTAT 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCCTGGAA GGTCACTAGT TGATTTC 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGTCTAGAC GTAGGTGAAT AGTGAAGACT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGTCCTAC TTTGACACTT TGAATGCTC 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAAATAAAT TAAAGCGTAA AAGGAGACCT ACA 53
<210> 7
<211> 2657
<212> DNA
<213> 人工序列
<223>管4上游引物序列
<400> 7
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACTTTTTTG TGTGTGTTTA TTTTGTGTAG CTG 53
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGGTGTTTG TATTTGCAGT CAAGTCTTC 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATGCTTTCT TGATAAAATC CTCAGGATGA 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAACTGGGTT GATGATGTTC AGTATTTGTT 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGTATCAGG TAGGTGTCCA GCTC 44
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGGTTTTAC CAAGGAAGGA TTTTCGG 47
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAACCCTTTC TGTTGAAGCT GTCAA 45
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATTTCAGGA AGGAATGTTC CCAATAGTAG 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGGGAGGGA GACTGTGTGT AAT 43
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATCCATTGC ATCTTTCTCA TCTTTCTCC 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACCCTTTGA GAGTGGAAGT GACAA 45
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAGATCTTT CAGTTTGCAA AACCCTTTC 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACAGGTGTG GATCCAAAGC TTATTTCTA 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGAAGCTGA TTCTCTGTCA TGCCT 45
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATCCCTTCT TTGGGTGTTT TATGCT 46
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAAAATGAA GCGGCCCATC TCT 43
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGAGCCCCT TCACTTCAGC AA 42
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATGAAAGAA AGTGTCCCAG TTGGT 45
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAAGGCTCA GATACAAACA CAGCTATT 48
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATGTTATTA CGGCTAATTG TGCTCACT 48
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACCCAGTTA GATCCTCCCC TCTTA 45
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGTCTTCAG AATGCCAGAG ATATACAGG 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACAGACTCT TCCAGCTGTT GCT 43
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACTCAGATG TTATTTTCCA AGCAGGATTT 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAGGGAAGC TTCATAAGTC AGTCTCA 47
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGCTTCTTC ATTTCAGGGT ATCAAAAAGT 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATCAATAGC TGACGAAGAA CTTGCATT 48
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAATCACTTC TGGAAAACCA CTCATTAACT 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGGTCACAG GGTTATTTCA GTGAAGA 47
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAGTAGATG TGCTTTTTGA TGTCTGACAA 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACATCCATA GGGACTGACA GGTG 44
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACCAGAATC CAAATCAGGC CTTCTT 46
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACCAGTGGT ATGTGGGAGT TTGTT 45
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATCTCTGAG AAAGAATGAA ATGGAGTTGG 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACACAAAGT TAAGGGAGTG TTAGAGGAAT 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATTGAGCAT CTGTTACATT CACTGAAAAT TG 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGCAAAAAG CTGTGAAACT GTTTAGTGA 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACTAACAGT ACTCGGCCTG CT 42
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACTTCTGTG AGTCAGACTT CATTACTTGA 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAACTCTTGT GCTGACTTAC CAGATG 46
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGCACCTGG TCAAGAATTT CTGTCTAAA 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGGAGGGAA ACACTCAGAT TAAAGAAGAT 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATGCTTTTG AAGCACCACT TACATTTG 48
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACAAATTTG TCTGTCACTG GTTAAAACT 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGCAATTCA GTACAATTAG GTGGGCTTA 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACCCCAAAG TGTAAAGAAA TGCAGAATT 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAAGCAACC CAAGTGTCAA TTAAAAAA 48
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGGTAGGGC CACCTGCATT TA 42
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACTTTGAAA CAGAAGCAGT AGAAATTGCT 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATGAGCTGT TGCCACCTGA AAA 43
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATGTGGGAT ACATACTACT GAATGCAAAG 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGTGACTTT TGGACTTTGT TTCTTTAAGG A 51
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACGCCTCAT GTGGTTTTAT GCAG 44
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACCCAAAGC TGCCTACCAC AAA 43
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATGACTGAC CGAAAAATAA AATGCCAAG 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAATTTCACC ATCATCTAAC AGGTCATCAG 50
<210> 8
<211> 2684
<212> DNA
<213> 人工序列
<223>管4下游引物序列
<400> 8
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTTCCTTTT CCAGTCCATA AACTTTCCTT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCTTCTCA GTCTACTAGG CATAGCA 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGAAAACCT ATCGGAAGAA GGCAAG 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAGTTGGT TGATTTCCAC CTCCA 45
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCAGGAGA ATGAATTGAC ACTAATCTCT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCATACAT AGGGTTTCTC TTGGTTTCT 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTCAGCTCG TGTTGGCAAC ATA 43
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCAGGCTC TTAGCCAAAA TATTAGCA 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACTTTGAA GTCATCTGGG CTGAG 45
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGTACCGGT AGTTGTTGAT ACTGAGTT 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGGTCACA TGAAGAAATA TGCAATAGGG 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCACCTGGT TCTTTTACTA AGTGTTCAAA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGAAACCTT AACCATACTG CCGTATATGA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAGAACAT CCTTGGAAGT AGGAGTT 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCAAAGCA CGAACTTGCT GT 42
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGAAGGAA GCTTCTCTTT CTCTTATCCT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACTGGTAG CTCCAACTAA TCATAAGAGA T 51
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGGTTTTTC ACTTTGTCCA AAGATTCCTT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGAACAGTA CCCGTTCCCT TGA 43
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAACGAAAC TGGACTCATT ACTCCAAATA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAATGACT GATTTTTACC AAGAGTGCAA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAAGCCATC AGTATTGTAG ACAAACACAT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAATTGGT GGCGATGGTT TTCT 44
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCTGCATTC CTCAGAAGTG GTCTTT 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACTTTGGA AAAGACTTGC TTGGTACTAT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCTGGCCAG CTTCCATTAT CAATTAAATT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGAACTCTC CTGTTCTTTG ATCAGAGAT 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGATGGGCT GGAAGTAAGG AAACA 45
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACACGGTT GTGACATCCC TT 42
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGACCAGGT TTAGAGACTT TCTCAAAGG 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGGTAGAGG GCCTGGGTTA AGTA 44
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCTATTTC CTTGATACTG GACTGTCA 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGATTTGT AAATCTCAGG GCAAAGGT 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGATCAAGG AACCTGTCTC CACAAA 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTCTGAAGA ACCACCTTCA ACATTTAAGT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTCGGCTCT AAAGAAACAT GATGCATAAA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAACAAAA GTGCCAGTAG TCATTTCAA 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGACCGAAA CTCCATCTCA AACAAAC 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTTCTTCAA TACTGGCTCA ATACCAGAAT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTTCTAATG TGTTAAAGTT CATTGGAACA GAAA 54
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCTAACACA CTGTTCAACT CTGTGAAAAT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCACTTGC AGTCTGAAAA AATGTATCA 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACCATGTT TGAGTGACCT GATTCT 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTTTATGTT CAGATTCTTC TGCAGGTTCA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGAATCACT CGAAAAAGAA TCTGCTTTCA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCAGGACT TTTTGCTGTT TCTTTTTCTA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAAGCTACC TCCAAAACTG TGATTTGA 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGAATATC CTCTGAATCA TCCAATGCC 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGGCAACA CGAAAGGTAA AAATGAAC 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTCCTTTCA TTAGCTACTT GGAAGACAAA A 51
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCACAGCAA GTTGCAGCGT TTA 43
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTTGGGACA TGAAGTTAAC CACAGT 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTCTGAGCT GTGTGCTAGA GGTA 44
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGATACAAC CTCAAAAGAC GTCTGTCT 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAATGTGG TCTTTGCAGC TATTTACTTT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGGGTTTTG CAACCTGAGG TCTATAA 47
<210> 9
<211> 2686
<212> DNA
<213> 人工序列
<223>管5上游引物序列
<400> 9
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACTATGAAA AGCACCTTAG GAGGAACA 48
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACTTTCTTC AGAAGCTCCA CCCT 44
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATGTTTCCT AGGCACAATA AAAGATCGAA 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAACAGGATT TGGAAAAACA TCAGGGAAT 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACAATCCAG ACTCTGAAGA ACTTTTCTCA 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGCTAACAT ACAGTTAGCA GCGACA 46
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGTTTAAAC AGTGGAATTC TAGAGTCACA 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAACTGTAAG TGAAAAAAAT AATAAATGCC AACTG 55
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAAACGCAA GACAAGTGTT TTCTGAAA 48
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGCAAAAGG ACCCCATATA GCACAG 46
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATCATACAG CTAGCGGGAA AAAAGTTAAA 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATTGGAGCT AGGTCCTTAC TCTTCA 46
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAATTTCTTC CTCTAGGTTA TTAATTGACA ATACC 55
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATGATCATG AAAATGCCAG CACTCT 46
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGCGTTATA CCTTTGCCCT GAGA 44
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAAAAAACC TGAGACCCTT ACCCAATT 48
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAGTTCACT TTCTTCCATT TCTATGCTTG T 51
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACTCAGAAA TGGAAAAAAC CTGCAGTAAA 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATCCCGAAA ATGAGGAAAT GGTTTTG 47
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGTTAACTG CTACTAAAAC GGAGCAAAAT 47
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATTTGCATC GGCATGTTTG ACAAT 45
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGGAACTTT CAATGCAGAG GTTGAAG 47
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGAAAACCT GAGCTTTCGC CAAA 44
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATGCAGAGT CTTTTCAGTT TCACACT 47
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAATTATCTC AGACTGAAAC GACGTTGT 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCTGAATG AAATGTCACT GATTCTTTCT T 51
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTTTAAAAA CTTGTTGTCA CTGTTGTGCT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCTCTTAAA GGATAGAAAA AGGGCCACTT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCAGGCCG AATGGTGGAT T 41
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGAGCCTTC AAATGATGAA AATTATCCTT GT 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGGGTAATG CAGGCAGACA TTATACA 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACCTCCTA AGACATGCTA TGATGAATAA GA 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGTTTGCTC ACAGAAGGAG GACT 44
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGCCTGGCC TGATACAATT AACTTGAAT 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACTTGAAGC CCCAGAATCT CTTATGTTAA 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACACTGTGC CCAAACACTA CCT 43
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGAGCCACA TAACACATTC AAACTTACTT G 51
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGTGGTGGT ATACGATATG GGTTTTGTAA 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACAAATGGG CAGGACTCTT AGGT 44
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAACTGCTGC TTATAGGTTC AGCTTTC 47
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAACCTTGTT TCTATTGAGA CTGTGGTG 48
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACAGTACTG TATCTACCCA CTCTCTTT 48
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGATTTTCA GTTACATGGC TTAAGTTGGG 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGTTCCCTC TGCGTGTTCT CATAA 45
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACAACCAAA GTCTTTGTTC CACCTTTTAA 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAGGAAAGT GGTGCATTGA TGGA 44
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAACTAGTT TTTGCCAGTT TTTTAAAATA ACCT 54
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGGATGCTT ACAATTACTT CCAGGAAGA 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAACCATATT TACCATCACG TGCACT 46
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAACGCGAA GAGCAGATAA ATCCA 45
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACCAAACGA AAATTATGGC AGGTTGTT 48
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACTGCTGAA CAAAAGGAAC AAGGTT 46
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAACCACGTC ATAGAAAGTA ATTGTGCAA 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATTGGAAGG CTAGGATTGA CAAATTCTTT A 51
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGCCAAAAG GAAGTCTGTT TCCACA 46
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGAAGTGCC TGAAAACCAG ATGAC 45
<210> 10
<211> 2509
<212> DNA
<213> 人工序列
<223>管5下游引物序列
<400> 10
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCGGGCTTG GAAGAAAATA ATCAAGAAG 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGGTTTGC CTAAATTCCT AGTTTGTAGT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGGAAGTGT TAACTTCTTA ACGTTAGTGT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTTTGGTTC CACTTCAGAT ACAAATGAGT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGTAGAGTT CTTGAAAATG GGTTCGTTT 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCGTGGCT GGTAAATCTG AAATAAAATT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCTCAATG AAATTATGTC AGAAACACAG A 51
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTATCAGTAA ATAGCAAGTC CGTTTCATCT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGAAACTTG CTTTCCACTT GCTGTA 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTCCTACTT TGACACTTTG AATGCTCTTT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGTACTTTA GGGTCTTTGC CCATTGA 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAGCAGGA AATGGCTGAA CTAGA 45
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGAAAGGG TCAACAAAAG AATGTCCAT 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGGCAACA GCTCAACGTT TTTATAATTT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACCTCAGC TCCTAGACTT TCAGA 45
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGTCAAGT TTCTCTTCAG GAGGAAAAG 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTCTCGTTA CTGGAAGTTA GCACTCT 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACGTTTTT AGGTGAAGCC TGTTCT 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGGCTGAA AAGACATAGT TTATAACACT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGCAATTC TTCTGGTTTC TGATCAAAGA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCTTGGGAT CATTTGCATG CAGTATATG 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACAGAGAC CAGAACTTTG TAATTCAACA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCAGTAAA TTGTAACATT CGTCTGACAA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGAAGAAA GAGGGATGAG GGAATACA 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGTGCAAC ATAAGTACTA ATGTGTGGT 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCTGGGCTG AACAGTTAAT TAGTTCTGA 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCTTCATG TTCTTCAAAT TCCTCCTGAA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCTCCCAA AAACTGCACA AAAACT 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGAACATT TCCTCAGAAT TGTCCCAAA 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGAACTTGA GGCCTTATGT TGACT 45
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGCCAGTT GATAATGCCA AATGTAGT 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGGCTTGC TCAGTTTCTT TTGATTATCT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGGCAGTT CAAAAGACTC CTGAAAT 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCTAAGGC TGAATTTTCA ATGACTGAAT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGGTCATT TGACAGTTCT GCATACAT 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGCTGATG TATTGGACGT TCTAAATGAG 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTATTCCTGC ACTAATGTGT TCATTCT 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAACGGAA ATATCTAACT GAAAGGCAAA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCTCTTTT GTGAATCGCT GACC 44
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGAAACAAA CTCCCACATA CCACTG 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGATGAAA ACATTCAAGC AGAACTAGGT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACAGCTTC TCACCTTGAA TAATCATCAA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGACGTTGT CATTAGTTCT TTGGTTTGTA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGTTTCCA AACTAACATC ACAAGGTGA 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCATTAGT AGTGGATTTT GCTTCTCTG 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAAGGTTGA TAATCACTTG CTGAGTGT 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAGCAGAA ACCTACAACT CATGGA 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACAACTCC TTGGTGGCTG AAAT 44
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCTAAACC CCACTTCATT TTCATCTGTT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCACAAAT ACTCATGCCA GCTC 44
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAAGTTCC TCAACGCAAA TATCTTCATT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGTGAATA CCCTATAAGC CAGAATCCA 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCTATGGGC CCTTCACCAA CAT 43
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTTGCAGCT TCTCTTTGAT TTGTGTTT 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCTTTCAC CCATACACAT TTGGCT 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCTCTTCA TCTCTCTTAT TTACCACTGT 50
<210> 11
<211> 1245
<212> DNA
<213> 人工序列
<223>管6上游引物序列
<400> 11
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAGGAGAAC CCTCAATCAA AAGAAACTTA TT 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGGGATTTG CTTTGTTTTA TTTTAGTCCT GT 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACAAATAGT AGATGTGCTT TTTGATGTCT GA 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATTCTGCAG AGGTACATCC AATAAGTTTA TC 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATTTTACCT CAGTCACATA ATAAGGAATG CA 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATGATGAAT GGTTTTATAG GAACGCTATG T 51
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAAAATCAA AGTGTTTGTT CCAATACAGC A 51
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACACTGAAT TATTGTACTG TTTCAGGAAG GA 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGCAATAAA ACTAGTAGTG CAGATACCCA 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAATTTGGAG TAATGAGTCC AGTTTCGTT 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAATGGCAT ATACATGCAT AAACCATCTT 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAACTTTAAC AGGATTTGGA AAAACATCAG G 51
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACCACACCT GGCTACTTTT GTGTT 45
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACTGAAGCC TCTGAAAGTG GACT 44
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGAACCCAT TTTCAAGAAC TCTACCATG 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAGCTTGTG TTGAAATTGT AAATACCTTG G 51
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAATGGACAT TCTAAGTTAT GAGGAAACAG AC 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACAGCCTTA GCTTTTTACA CAAGTTGT 48
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACAAAATAT GTGGAGGCCC AACAA 45
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATCCAGGAA GACTTTGTTT ATAGACCTCA 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAATTCGAG TTCCATATTG CTTATACTGC T 51
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATTTAATTT GAAGACTACA GAACACAGGG AA 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATTCAGTGA TGGAGGAAAT GTTGGTT 47
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACCCATTGC AGCACAACTA AGGA 44
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACATAAAAC TCTTTCCAGA ATGTTGTTAA GTC 53
<210> 12
<211> 1226
<212> DNA
<213> 人工序列
<223>管6下游引物序列
<400> 12
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTATAAAGA GGTCCTTGAT TAGGCACAGT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTATGAAACA AACTCCCACA TACCACT 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGGTTTAGA GACTTTCTCA AAGGCTTAGA T 51
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTACTTGAA TCACTGCCAT CAAATTCTAA GT 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGGTTCTAA GCAACACTGT GACGTA 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAGTTGTG AGATTATCTT TTCATGGCTA TT 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAATTGGT GGCGATGGTT TTCTC 45
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAGGCTCT TAGCCAAAAT ATTAGCATAA AA 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAATGACT GATTTTTACC AAGAGTGCAA 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGAAGAGG AATGTGCAAC ATTCTCTG 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAACTGAAT AGCTGGATTT TTACCAAGGT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAGCGTTT GCTTCATGGA AAATTTTT 48
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTATCTCTGG CATTCTGAAG ACTTGTAATT AAA 53
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCATTTGCT TCAAACTGGG CTGAA 45
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCTGAAGCT ACCTCCAAAA CTGTGA 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCCTTTTG GCTAGGTGTT AAATTATGG 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCACTTTGT CCAAAGATTC CTTTGCA 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGAATAGCT GTTAGACATG CTACTGTTAC T 51
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTGTTGCTA TTCTTTGTCT AACACCAAAA A 51
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCTGAAAGA GAAATGGGAA ATGAGAACAT TC 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTCCTGAGG ATTTTATCAA GAAAGCAGAT TT 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGCAGTGT TTAGAGGATT CTGATGC 47
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGTGGTGGC TCAGCTACTT GAG 43
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCTAACACA CTGTTCAACT CTGTGAAAAT G 51
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTACCATCT TCAACCTCTG CATTGAAA 48
<210> 13
<211> 1106
<212> DNA
<213> 人工序列
<223>管7上游引物序列
<400> 13
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATGACATTG AAGACTGACT TTACTCTTTC AA 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGCTTTTAT TCTGCTCATG GCACAA 46
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAATCATGGA AAATTTGTGC ATTGTTAAGG AA 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGGGAAAAT GTTCTTGGGT GTCA 44
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAATAGGAAA ATACCAGCTT CATAGACAAA GG 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATGATAGAT TTAATTACAA GTCTTCAGAA TGCCA 55
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAAAAAATAC CGAAAGACCA AAAATCAGAA CT 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGAAGATAA CAAATATACT GCTGCCAGTA GA 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACTTCCTTT ATTTCACCAT CATCTAACAG GT 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGGGAATCA GGCTTTACTA GAAGAACA 48
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACGCTGATG AATGTGAAAA ATCTAAAAAC CA 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATGAGGAAA CAGTGGTAAA TAAGAGAGAT GA 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGCTGATTT CTGTTGTATG CTTGTACTG 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACAAATGGG CAGGACTCTT AGGT 44
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGAAAAATA TTAGTGTCGC CAAAGAGTCA TT 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGGTTTTCA TACAGCTAGC GGGAAA 46
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAATGACAAA AATCATCTCT CCGAAAAACA AG 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATTCTCTAA TGTTATTACG GCTAATTGTG CT 52
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAGTTCCCTG ATTTATCATT TCAGGAGTCT 50
ACACTGACGA CATGGTTCTA CATTTTAAGG CAGTTCTAGA AGAATGAAAA CTCT 54
ACACTGACGA CATGGTTCTA CAACTTACCA GATGGGACAC TCTAAGATT 49
ACACTGACGA CATGGTTCTA CACAACCAAA GTCTTTGTTC CACCTTTTA 49
<210> 14
<211> 1102
<212> DNA
<213> 人工序列
<223>管7下游引物序列
<400> 14
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCTTTTTG AAGCCTTTAA GGATTTTTCT TG 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAACAAAA GTGCCAGTAG TCATTTCAAT AT 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCTCTCCT CTGTCATTCT TCCTGT 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTATGTGTTT ATGACAAGTT ACACATCAAA ACC 53
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGCCACAGT AGATGCTCAG TAAATATTTC TA 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTCTGTCAT AAAAGCCATC AGTATTGTAG AC 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCTAAACA ATCATGTATA CAGATGATGC CT 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTTGAGCTT TCGCAACTTC CAAAAA 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCCAAAATT GAATGCTATG CTTAGATTAG GG 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAATGTGG TCTTTGCAGC TATTTACTT 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTATTTTCTC CATCTGGGCT CCATTT 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTCCTCCTT CTGTGAGCAA ACAG 44
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGTAATCGG CTCTAAAGAA ACATGATGC 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCTGAGGCT TGCTCAGTTT CTTTTG 46
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAACTGGG ACACTTTCTT TCAGTATTTT G 51
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTACCACAGT CTCAATAGAA ACAAGGTTTT TA 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTCAAGTTCC TCAACGCAAA TATCTTCATT 50
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGAGGCTCT AGGTTTTGTC TATCATCTC 49
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTAGAGTTCA CTCCAAATCA GTAGAGAGTA AT 52
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTTCATACCT GTATAGGGTA TGCTCTTTGA ATAAT 55
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGACGTTGT CATTAGTTCT TTGGTTTGTA T 51
TACGGTAGCA GAGACTTGGT CTGAAAGGCA AAAATTCATC ACACAAATTG T 51