一种提高重组大肠杆菌胆盐水解酶产量的方法与流程

文档序号:12411716阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种发酵培养基,其特征在于,含有:葡萄糖14~18g/L,酵母膏18~20g/L,KH2PO4 6~8g/L,K2HPO4 2~2.5g/L,FeCl2 0.8~1g/L,MgCl2 0.5~0.8g/L,CaCl2 1~1.5g/L,pH6.5~7.0。

2.根据权利要求1所述的培养基,其特征在于,配方为:葡萄糖15g/L,酵母膏20g/L,KH2PO4 6.5g/L,K2HPO4 2.4g/L,FeCl2 0.85g/L,MgCl2 0.6g/L,CaCl2 1.2g/L,pH6.5~7.0。

3.一种提高重组大肠杆菌胆盐水解酶产量的方法,其特征在于,是将重组大肠杆菌对数期种子以5~8%的接种量接种至权利要求1所述发酵培养基中,200-220rpm,发酵24~48h。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述重组大肠杆菌是以pET-28a(+)为载体,以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,表达SEQ ID NO.1所示基因。

5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,菌体培养至OD600为0.8~1.0时,加入乳糖诱导。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述乳糖浓度为2~2.5g/L。

7.权利要求1所述的方法在制备含胆盐水解酶的产品中的应用。

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