本发明涉及fxr受体激动剂、其药学上可接受的盐、其酯以及它们的立体异构体，含有这些化合物的药物制剂，以及该化合物、其药学上可接受的盐、其酯以及他们的立体异构体在制备治疗和/或预防由fxr受体介导的非酒精性脂肪肝、原发性胆汁性肝硬化、脂质代谢紊乱、糖尿病并发症及恶性肿瘤等相关疾病的药物中的用途。
背景技术：
fxr受体(法尼醇x受体)属于配体激活转录因子核受体家族成员，具有典型的核受体结构，即氨基末端高度保守的dna结合区(dbd)、羧基末端配体结合区(lbd)、氨基末端配体非依赖性转录激活功能区(af1)、羧基末端配体依赖性转录激活功能区(af2)和脚链区。fxr可与视黄醇类x受体(rxr)形成异二聚体，当配体与fxr的lbd区域结合后，fxr构象可发生改变，dna的结合区结合到靶基因启动子的fxr反应元件(ir-1)上面，释放辅抑制因子(如ncor)，招募了辅激活因子，从而发挥转录调控作用。
fxr在多个器官组织中均有表达，包括脂肪组织、肝脏、胃肠道、肾脏等，其中肝脏中表达量最为丰富。fxr信号通路，可直接或间接调节多个下游基因的表达，如bsep、shp、cyp7a1、fgfr4、ostα/β、srebp-1c等基因，进而调节多种代谢途径，如：甘油三酯、胆固醇、血糖及能量稳定性代谢胆酸的代谢，具有治疗癌症、非酒精性脂肪肝(nafld)、代谢紊乱、炎症等疾病的功能。通过抑制胆酸的合成、结合及转运，调节其代谢，是体内胆酸平衡的主要调节者。
部分天然胆酸类化合物可激动fxr受体，如鹅去氧胆酸(cdca)、脱氧胆酸(dca)、石胆酸(lca)及牛磺酸和这些胆酸的甘氨酸结合物。除去天然的化合物，目前国际上研发的fxr激动剂可主要分为两大类，一类是甾体类，以intercept公司的奥贝胆酸为代表(obeticholicacid，oca)，于2016年5月份批准原发性胆管性肝硬化适应症，针对非酒精性脂肪肝炎适应症，处于临床iii期，该类产品在临床研发期间有皮肤瘙痒等不良反应；另一类是新型分子实体，早期研发的化合物如gw4604(wo2000/037077)，虽然具有较强的激动活性，但其对光不稳定且生物利用度较低。另外，phenex公司研发的px-104(wo2011020615a1)已转让给gilead公司，目前处于临床ii期研究阶段。
另有gilead公司研发的gs-9674和novartis研发的ljn-452均处于临床ii期，适应症为原发性胆管性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、非酒精性脂肪肝炎，结构未知。
tully等人公开了一类fxr激动剂(参见专利申请wo2012087519a1)，并具体公开了化合物30-70。
但是，目前依然希望能够开发出高效、低毒、且稳定性较好的新型fxr受体激动剂。
技术实现要素：
本发明提供具有新型分子结构的化合物，其可有效激动fxr受体，提升bsep及shp基因表达水平，同时有效抑制cyp7a1基因的表达。另外，为了达到更好的治疗效果的目的，更好的满足市场需求，还希望能够提供高效、低毒、且稳定性较好的fxr受体激动剂。
具体而言，本发明的目的在于提供一种新型结构的fxr受体激动剂，其具有很好的药效，为fxr受体激动剂用于治疗非酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪肝炎、肝纤维化、原发性胆管性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、脂质代谢紊乱、糖尿病并发症及恶性肿瘤提供了可能性。
本发明的其他目的在于提供上述fxr受体激动剂的制备方法。
本发明的另一目的在于提供上述fxr受体激动剂在制备用于预防和/或治疗非酒精性脂肪肝、原发性胆汁性肝硬化、脂质代谢紊乱、糖尿病并发症及恶性肿瘤的药物中的用途。
本发明人为了实现上述目的持续悉心研究，结果发现下述通式(i)表示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯以及它们的立体异构体可有效激动fxr受体，从而完成了本发明。
具体而言，本发明涉及下述技术方案：
方案1、通式(ⅰ)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体：
其中，
每个r1独立的选自c1-6烷基、c1-6烷氧基、c1-6烷基氨基、二(c1-6烷基)氨基、c1-6烷基硫基、c1-6烷基羰基、卤代c1-6烷基、卤代c1-6烷氧基、c1-6烷氧基c1-6烷基、c1-6烷基羰基氧基、c1-6烷基磺酰基、c1-6烷基氨基磺酰基、二(c1-6烷基)氨基磺酰基、c1-6烷基磺酰氨基、c1-6烷基磺酰氧基、氰基、卤素原子、硝基、氨基、羟基、羧基、3-8元环烷基、3-8元环烷基c1-6烷基、3-8元杂环基或3-8元杂环基c1-6烷基；
r2选自3-8元环烷基、3-8元环烷基c1-6烷基、3-8元杂环基或3-8元杂环基c1-6烷基；
每个r3独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素原子、c1-6烷基、c1-6烷氧基、卤代c1-6烷基、氨基c1-6烷基、羟基c1-6烷基、羧基c1-6烷基、c1-6烷基氨基、c1-6烷基酰氨基、c1-6烷基氨酰基、c1-6烷基磺酰基、c1-6烷基磺酰氨基、c1-6烷基磺酰氧基、c1-6烷基羰基氧基、c1-6烷氧基、c1-6烷氧基c1-6烷基、卤代c1-6烷氧基或羧基c1-6烷氧基；
环a和环c分别独立的选自6-14元芳基、5-14元杂芳基、3-14元杂环基或3-14元环烷基；
环b选自8-12元桥环基或8-12元桥杂环基，且当环b为
l选自c1-6亚烷基，所述c1-6亚烷基中任一碳原子任选被杂原子或基团所替代，所述的杂原子或基团独立的选自n、nr4、o、s、co、so或so2；r4选自氢原子、卤素原子、c1-6烷基、卤代c1-6烷基、c1-6烷氧基或c1-6烷基氨基；
m1、m2分别独立的选自n、nr5、o、s或cr6r7；r5、r6、r7分别独立的选自氢原子、卤素原子、羟基、氨基、氰基、c1-6烷基、卤代c1-6烷基、c1-6烷氧基或c1-6烷基氨基；
q选自nh、o或s；
m选自0-3的整数；
n选自0-3的整数。
方案2、如方案1所述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体：
其中，
每个r1独立的选自c1-4烷基、c1-4烷氧基、c1-4烷基氨基、二(c1-4烷基)氨基、c1-4烷基硫基、c1-4烷基羰基、卤代c1-4烷基、卤代c1-4烷氧基、c1-4烷氧基c1-4烷基、氰基、卤素原子、硝基、氨基、羟基、羧基、3-6元单环环烷基或3-6元单环环烷基c1-4烷基；
r2选自3-6元单环环烷基、3-6元单环环烷基c1-4烷基、3-6元单环杂环基或3-6元单环杂环基c1-4烷基；
每个r3独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素原子、c1-4烷基、卤代c1-4烷基、氨基c1-4烷基、羟基c1-4烷基、羧基c1-4烷基、c1-4烷基氨基、c1-4烷基酰氨基、c1-4烷基氨酰基、c1-4烷基羰基氧基、c1-4烷氧基、c1-4烷氧基c1-4烷基、卤代c1-4烷氧基或羧基c1-4烷氧基；
环a选自6-8元单环芳基、8-12元稠环芳基、6-8元单环杂芳基、8-12元稠环杂芳基、6-8元单环杂环基、8-12元稠环杂环基、6-8元单环环烷基或8-12元稠环环烷基；
环b选自8元桥环基或8元桥杂环基，所述桥杂环基中的杂原子选自n、nh、o、s、so或so2，且当环b为
环c选自6-8元单环芳基、5-7元单环杂芳基、5-8元单环杂环基或5-8元单环环烷基；
l选自c1-4亚烷基，所述c1-4亚烷基中任一碳原子任选被杂原子或基团所替代，所述的杂原子或基团独立的选自n、nr4、o、s、co、so或so2；
r4选自氢原子、卤素原子、c1-4烷基、卤代c1-4烷基或c1-4烷氧基；
m1、m2分别独立的选自n、nr5、o、s或cr6r7；r5、r6、r7分别独立的选自氢原子、卤素原子、羟基、c1-4烷基、卤代c1-4烷基或c1-4烷氧基；
q选自nh、o或s；
m选自1-3的整数；
n选自1-3的整数。
方案3、如方案2所述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体：
其中，
环a选自8-10元稠环芳基、8-10元稠环杂芳基、8-10元稠环杂环基或8-10元稠环环烷基；
环b选自8元桥环基或8元桥杂环基，所述桥杂环所述桥杂环基中的杂原子选自n、nh、o、s、so或so2，且当环b为
方案4、如方案2或3所述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体：
其中，
环a选自8-10元稠环芳基、8-10元稠环杂芳基、8-10元部分饱和稠环杂环基或8-10元部分饱和稠环环烷基；
环b选自含1个氮原子和0-1个n、nh、o或s的8元桥杂环基，且当环b为
方案5、如方案2-4任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体：
其中，环c选苯基、5-7元单环杂芳基、5-6元单环杂环基或5-6元单环环烷基；优选的，环c选自苯基或5-7元单环杂芳基；
l选自c1-4亚烷基，所述c1-4亚烷基任选被1-2个杂原子或基团所替代，所述的杂原子或基团独立的选自n、nh、o、s、co、so或so2；
优选的，l选自-ch2-、-ch2-ch2-、-ch2-nh-、-ch2-co-、-ch2-so-、-ch2-ch2-o-、-ch2-ch2-nh-或-ch2-co-nh-；更优选的，l选自-ch2-、-ch2-ch2-、-ch2-nh-或-ch2-co-；
m1、m2分别独立的选自n、nh、o或s。
方案6、如方案5所述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，具有下式(i-1)所示的结构：
其中，
每个r1独立的选自c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基、卤代c1-4烷氧基、c1-4烷氧基c1-4烷基、氰基、卤素原子、硝基、氨基、羟基、羧基、3-6元单环饱和环烷基或3-6元单环饱和环烷基c1-4烷基；
r2选自3-6元单环饱和环烷基或3-6元单环饱和环烷基c1-4烷基；
每个r3独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素原子、c1-4烷基、卤代c1-4烷基、氨基c1-4烷基、羟基c1-4烷基、羧基c1-4烷基、c1-4烷基氨基、c1-4烷氧基或c1-4烷氧基c1-4烷基；
环a选自9-10元部分饱和稠环杂环基或9-10元部分饱和稠环环烷基；
环c选自苯基或5-6元单环杂芳基；
m1、m2分别独立的选自n、nh、o或s；
q选自nh、o或s；
m选自1、2或3；
n选自1、2或3。方案7、如方案6所述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，每个r1独立的选自c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基、卤代c1-4烷氧基、氰基、卤素原子、硝基、氨基、羟基、3-5元单环饱和环烷基或3-5元单环饱和环烷基c1-2烷基；
r2选自3-5元单环饱和环烷基或3-5元单环饱和环烷基c1-2烷基；
每个r3独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素原子、c1-4烷基、卤代c1-2烷基、氨基c1-2烷基、羟基c1-2烷基、羧基c1-2烷基、c1-2烷基氨基或c1-4烷氧基；
方案8：如方案6或方案7所述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
每个r1独立的选自甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、氟原子、氯原子、溴原子、硝基、氨基、羟基、环丙基、环丁基、环丙基甲基或环丙基乙基；
r2选自环丙基、环丁基、环戊基、环丙基甲基、环丁基甲基或环戊基甲基；
每个r3独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、氟原子、氯原子、溴原子、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、三氟甲基、氨基甲基、羟基甲基、羧基甲基、甲氨基、甲氧基、乙氧基或丙氧基；
环a选自2,3-二氢吲哚基、1,2,3,4-四氢喹啉基、1,2,3,4-四氢异喹啉基、色满基、异色满基、1,2-二氢萘基、1,4-二氢萘基、1,2,3,4-四氢萘基或2,3-二氢-1h-茚基；
环c选自苯基、吡啶基或嘧啶基；
q选自o；
m选自1或2；
n选自1或2。
方案9、如方案8所述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
每个r1独立的选自甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、氟原子、氯原子、溴原子、环丙基、环丁基、环丙基甲基或环丙基乙基；优选的，每个r1独立的选自甲基、乙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、氟原子、氯原子、溴原子、环丙基或环丁基；
r2选自环丙基、环丁基、环丙基甲基或环丁基甲基；
每个r3独立的选自羟基、氨基、羧基、氟原子、氯原子、溴原子、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、氨基甲基、羟基甲基、羧基甲基、甲氨基、甲氧基、乙氧基或丙氧基；优选的，每个r3独立的选自羧基、氟原子、氯原子、溴原子、甲基、乙基、三氟甲基、羧基甲基、甲氧基或乙氧基；
环a选自1,2-二氢萘基、1,4-二氢萘基、1,2,3,4-四氢萘基或2,3-二氢-1h-茚基；优选的，环a选自1,2,3,4-四氢萘基或2,3-二氢-1h-茚基；
环c选自苯基。
方案10、如方案5所述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
每个r1独立的选自c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基、卤代c1-4烷氧基、c1-4烷氧基c1-4烷基、氰基、卤素原子、硝基、氨基、羟基、羧基、3-6元单环饱和环烷基或3-6元单环饱和环烷基c1-4烷基；
r2选自3-6元单环饱和环烷基或3-6元单环饱和环烷基c1-4烷基；
每个r3独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素原子、c1-4烷基、卤代c1-4烷基、氨基c1-4烷基、羟基c1-4烷基、羧基c1-4烷基、c1-4烷基氨基、c1-4烷氧基或c1-4烷氧基c1-4烷基；
环a选自9-10元稠环芳基或9-10元稠环杂芳基；优选的，环a选自9-10元稠环芳基或9-10元含1-2个杂原子的稠环杂芳基，所述杂原子独立选自n、o或s；
环b选自含1个氮原子和0-1个n、nh、o或s的8元部分饱和桥杂环基；
环c选自苯基或5-6元单环杂芳基；优选的，环c选自苯基或6元单环杂芳基；
l选自-ch2-或-ch2-ch2-；
m1、m2分别独立的选自n、nh、o或s；
q选自nh、o或s；
m选自1、2或3；
n选自1、2或3。
方案11、如方案10所述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
环b选自仅含1个氮原子的8元部分饱和桥杂环基；
优选的，环b选自如下基团：
方案12、如方案10所述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
每个r1独立的选自c1-4烷基、c1-4烷氧基、卤代c1-4烷基、卤代c1-4烷氧基、氰基、卤素原子、硝基、氨基、羟基、3-5元单环饱和环烷基或3-5元单环饱和环烷基c1-2烷基；
r2选自3-5元单环饱和环烷基或3-5元单环饱和环烷基c1-2烷基；
每个r3独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素原子、c1-4烷基、卤代c1-2烷基、氨基c1-2烷基、羟基c1-2烷基、羧基c1-2烷基、c1-2烷基氨基或c1-4烷氧基。
方案13、如方案10-12任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
每个r1独立的选自甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、氰基、氟原子、氯原子、溴原子、硝基、氨基、羟基、环丙基、环丁基、环丙基甲基或环丙基乙基；
r2选自环丙基、环丁基、环戊基、环丙基甲基、环丁基甲基或环戊基甲基；
每个r3独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、氟原子、氯原子、溴原子、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、三氟甲基、氨基甲基、羟基甲基、羧基甲基、甲氨基、甲氧基、乙氧基或丙氧基；
环a选自萘基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并吡唑基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基或苯并吡喃基；
环b选自
环c选自苯基；
l选自-ch2-；
m选自1或2；
n选自1或2。
方案14、如方案13所述的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，其中，
每个r1独立的选自甲基、乙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、氟原子、氯原子、溴原子、环丙基或环丁基；
r2选自环丙基、环丁基或环戊基；
每个r3独立的选自羧基、氟原子、氯原子、溴原子、甲基、乙基、三氟甲基、羧基甲基、甲氨基、甲氧基、乙氧基或丙氧基；
环a选自苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基或苯并吡唑基。
上述方案之间的取代基可以任意组合成一个新的技术方案，所得到的新的技术方案均包含在本发明的范围内。
本发明的部分化合物
发明详述
本发明所述的“卤素原子”包括氟原子、氯原子、溴原子和碘原子等。
本发明所述的“c1-6烷基”表示直链或支链的含有1-6个碳原子的烷基，包括例如“c1-4烷基”、“c1-3烷基”等，具体实例包括但不限于：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、2-甲基丙基、1-甲基丙基、1,1-二甲基乙基、正戊基、3-甲基丁基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、正己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基或1,2-二甲基丙基等。
本发明所述的“c1-4烷基”表示直链或支链的含有1-4个碳原子的烷基，包括例如“c1-4烷基”、“c1-3烷基”等，具体实例包括但不限于：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、2-甲基丙基、1-甲基丙基、或1,1-二甲基乙基等。
本发明所述的“c1-6烷氧基、c1-6烷基氨基、二(c1-6烷基)氨基、c1-6烷基硫基、c1-6烷基羰基、c1-6烷基羰基氧基、c1-6烷基磺酰基、c1-6烷基氨基磺酰基、二(c1-6烷基)氨基磺酰基、c1-6烷基磺酰氨基、c1-6烷基磺酰氧基、c1-6烷基酰氨基、c1-6烷基氨酰基”，是指以c1-6烷基-o-、c1-6烷基-nh-、(c1-6烷基)2n-、c1-6烷基-s-、c1-6烷基-c(o)-、c1-6烷基-c(o)-o-、c1-6烷基-so2-、c1-6烷基-nh-so2-、(c1-6烷基)2-n-so2-、c1-6烷基-so2-nh-、c1-6烷基-so2-o-、c1-6烷基-c(o)-nh-、c1-6烷基-nh-c(o)-方式形成的基团，其中“c1-6烷基”的定义如前文所述。
本发明所述的“c1-4烷氧基、c1-4烷基氨基、二(c1-4烷基)氨基、c1-4烷基硫基、c1-4烷基羰基、c1-4烷基羰基氧基、c1-4烷基磺酰基、c1-4烷基氨基磺酰基、二(c1-4烷基)氨基磺酰基、c1-4烷基磺酰氨基、c1-4烷基磺酰氧基、c1-4烷基酰氨基、c1-4烷基氨酰基”，是指以c1-4烷基-o-、c1-4烷基-nh-、(c1-4烷基)2-n-、c1-4烷基-s-、c1-4烷基-c(o)-、c1-4烷基-c(o)-o-、c1-4烷基-so2-、c1-4烷基-nh-so2-、(c1-4烷基)2-n-so2-、c1-4烷基-so2-nh-、c1-4烷基-so2-o-、c1-4烷基-c(o)-nh-、c1-4烷基-nh-c(o)-方式形成的基团，其中“c1-4烷基”的定义如前文所述。
本发明所述的“卤代c1-6烷基、羟基c1-6烷基、羧基c1-6烷基、氨基c1-6烷基、c1-6烷氧基c1-6烷基、卤代c1-6烷氧基、羧基c1-6烷氧基”，是指一至多个，例如1～4个、1～3个、1～2个卤素原子、羟基、羧基、氨基、c1-6烷氧基分别取代c1-6烷基、c1-6烷氧基中的氢原子所形成的基团。
本发明所述的“卤代c1-4烷基、羟基c1-4烷基、羧基c1-4烷基、氨基c1-4烷基、c1-4烷氧基c1-4烷基、卤代c1-4烷氧基、羧基c1-4烷氧基”，是指一至多个，例如1～4个、1～3个、1～2个卤素原子、羟基、氨基、c1-4烷氧基、羧基分别取代c1-4烷基、c1-4烷氧基中的氢原子所形成的基团。
“3-14元环烷基”，是指含有3-14个环原子的饱和或部分饱和的单环或稠环化合物除去一个氢原子得到的基团，包括例如“3-6元单环环烷基”、“4-7元环烷基”、“4-6元单环环烷基”、“5-6元单环环烷基”、“6-8元单环环烷基”、“8-12元稠环环烷基”、“8-10元稠环环烷基”、“9-10元稠环环烷基”等。具体可以为“3-6元饱和环烷基”、“3-6元部分饱和环烷基”、“3-6元单环饱和环烷基”、“5-6元饱和环烷基”、“5-6元部分饱和环烷基”、“5-6元单环部分饱和环烷基”、“8-10元饱和环烷基稠环环烷基”、“8-10元部分饱和稠环环烷基”、“9-10元部分饱和稠环环烷基”等。实例包括但不限于：环丙烷基、环丁烷基、环戊烷基、环己烷基、环庚烷基、环辛烷基、甲基环丙烷基、二甲基环丙烷基、甲基环丁烷基、二甲基环丁烷基、甲基环戊烷基、二甲基环戊烷基、甲基环己烷基、二甲基环己烷基、环戊烯基、1,3-环戊二烯基、环己烯基、1,4-环己二烯基、环庚烯基、1,4-环庚二烯基、环辛烯基、十氢萘基、1,2,3,4-四氢萘基、2,3-二氢-1h-茚基、1,2-二氢萘基、。
“3-14元杂环基”是指含有3-14个环原子、且含有至少一个杂原子(例如1、2、3、4或5个杂原子)的饱和或部分饱和的单环杂环化合物除去一个氢原子得到的基团。所述的杂原子选自n、nh、o、s、co、so或so2。包括例如“3-12元杂环基”、“3-10元杂环基”、“3-8元杂环基”、“3-6元单环杂环基”、“3-4元单环杂环基”、“3-4元单环饱和杂环基”、“4-14元杂环基”、“4-12元杂环基”、“4-10元杂环基”、“4-8元杂环基”、“4-6元单环杂环基”、“5-14元杂环基”、“5-12元杂环基”、“5-10元杂环基”、“5-8元杂环基”、“5-6元单环饱和杂环基”、“6-14元杂环基”、“6-12元杂环基”、“6-10元杂环基”、“6-8元单环杂环基”、“7-14元稠环杂环基”、“7-12元稠环杂环基”、“7-10元稠环杂环基”、“7-8元单环杂环基”、“8-14元稠环杂环基”、“8-12元稠环杂环基”、“8-10元稠环杂环基”、“8-10元部分饱和稠环杂环基”、“8-9元稠环杂环基”、“8-9元饱和稠环杂环基”、“9-14元稠环杂环基”、“9-12元稠环杂环基”、“9-10元稠环杂环基”、“9-10元部分饱和稠环杂环基”等。具体可以为：“含1-2个n、o和/或s原子的6-8元杂环基”、“含1-2个n、o和/或s原子的8-12元饱和杂环基”、“含1-2个n、o和/或s原子的5-6元饱和杂环基”、“含1-2个n、o和/或s原子的9-10元部分饱和稠环杂环基”、“含1-2个n、o和/或s原子的8-10元部分饱和稠杂环基”。3-14元部分饱和单环杂环基，是指含有双键、杂原子的环状基团。3-14元饱和单杂环基，是指全部为饱和键的含有杂原子的环状基团。具体实例包括但不仅限于：氮杂环丙烷基、2h-氮杂环丙烷基、二氮杂环丙烷基、3h-二氮杂环丙烯基、氮杂环丁烷基、1,4-二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环戊烷基、1,4-二氧杂环己二烯基、四氢呋喃基、二氢吡咯基、吡咯烷基、咪唑烷基、4,5-二氢咪唑基、吡唑烷基、4,5-二氢吡唑基、2,5-二氢噻吩基、四氢噻吩基、4,5-二氢噻唑基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、4,5-二氢噁唑基、4,5-二氢异噁唑基、2,3-二氢异噁唑基、2h-1,2-噁嗪基、6h-1,3-噁嗪基、4h-1,3-噻嗪基、6h-1,3-噻嗪基、2h-吡喃基、2h-吡喃-2-酮基、3,4-二氢-2h-吡喃基、2,5-二氢噻吩基、3,4-二氢-2h-吡喃基、5,6-二氢-4h-1,3-噁嗪基、1,2,3,6-四氢吡啶基、1,2,3,4-四氢吡啶基、2,3,4,5-四氢吡啶基、苯并二氢呋喃基、苯并二氢吡喃基、苯并1,4-二氧杂环己烯基、苯并1,3-二氧杂环己烯基、苯并四氢吡啶基、苯并二氢噁嗪基、苯并四氢吡嗪基或1,2,3,4-四氢喹唑啉基等。
本发明所述的“3-8元环烷基c1-6烷基、3-8元杂环基c1-6烷基”，是指3-8元环烷基、3-8元杂环基”取代c1-6烷基中的氢原子所形成的基团。
本发明所述的“3-6元单环环烷基c1-4烷基、3-6元单环杂环基c1-4烷基”，是指3-6元单环环烷基、3-6元单环杂环基”取代c1-4烷基中的氢原子所形成的基团。
本发明所述“6-14元芳基”是指含有6-14个环碳原子的不饱和的环状芳香基团，包括单环芳基和稠环芳基，所述的“单环芳基”是指单环芳香性基团；所述的“稠环芳基”是指两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的具有芳香性的基团。本发明所述的“6-14元芳基”包括例如“6-10元芳基”、“8-12元稠环芳基”、“8-10元稠环芳基”、“6-8元单环芳基”、“9-10元稠环芳基”等，优选包括但不限于苯基、萘基、蒽基等。。
本发明所述“5-14元杂芳基”是指含有5-14个环碳原子且至少一个杂原子或基团的不饱和的环状芳香基团，包括单环杂芳基和稠环杂芳基，所述的杂原子或基团包括氮、氧、硫、co、so或so2；所述杂原子或基团的个数优选1-4个，进一步优选1-3个，更进一步优选1-2个。包括例如“5-12元杂芳基”、“5-10元杂芳基”、“5-8元单环杂芳基”、“5-7元单环杂芳基”、“5-6元单环杂芳基”、“6-14元杂芳基”、“6-12元杂芳基”、“6-10元杂芳基”、“6-8元单环杂芳基”、“7-14元杂芳基”、“7-12元杂芳基”、“7-10元杂芳基”、“7-8元单环杂芳基”、“8-14元稠环杂芳基”、“8-12元稠环杂芳基”、“8-10元稠换杂芳基”、“8-9元稠换杂芳基”、“9-14元稠换杂芳基”、“9-10元稠环杂芳基”、“10-12元稠环杂芳基”，，具体可以为“含1～3个o、s和/或n的5-8元单环杂芳基”、“含1～2个o、s和/或n的5-7元杂芳基”、“含1～3个o、s和/或n的5-6元杂芳基”、“含1-2个n、o和/或s原子的8-10元稠环杂芳基”、“含1-2个n、o和/或s原子的9-10稠环元杂芳基”。具体实例包括但不仅限于呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、咪唑基、吡唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、吡啶基、2-吡啶酮、4-吡啶酮、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、1,2,3-三嗪基、1,3,5-三嗪基、1,2,4,5-四嗪基、苯并噻唑基、异苯并噻唑基、苯并恶唑基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、喹啉基、喹唑啉基等。
本发明所述的“稠环”是指两个或两个以上环状结构，两两共用相邻的两个环原子所形成的基团，例如，
本发明所述的“8-12元桥环基”是指是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个非相邻的环原子所形成的含有8-12个环碳原子的饱和或部分饱和的环状结构。包括例如“8-10元饱和桥环基”、“10-12元部分饱和桥环基”、“8元饱和桥环基”、“8元部分饱和桥环基”等，具体实例包括但不仅限于：
本发明所述的“8-12元桥杂环基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个非相邻的环原子所形成的含有8-12个环原子(其中至少一个环原子为杂原子或基团，例如n、nh、o、s、co、so、so2等)的饱和或部分饱和的环状结构，优选杂原子或基团的个数为1、2、3、4或5个，进一步优选1个或2个。例如包括“8-10元饱和桥杂环基”、“10-12元部分饱和含氮桥杂环基”、“8元饱和桥杂环基”、“8元含氮桥杂环基”、“8元饱和含氮桥杂环基”、“含1个氮原子和0-1个n、nh、o或s的8元桥杂环基”、“含1个氮原子和0-1个n、nh、o或s的8元部分饱和桥杂环基”、“含1个氮原子和0-1个n、nh、o或s的8元饱和桥杂环基”等。具体实例包括但不限于：
本发明所述的“cr6r7”是指r6、r7分别取代亚甲基上的两个氢原子形成的基团，具体的连接方式为
本发明所述的“c1-6亚烷基”是指是指直链含1-6个碳原子的烷烃去除两个不在同一碳原子上的氢所衍生的基团，包括“c1-5亚烷基”、“c1-4亚烷基”、“c1-3亚烷基”、“c1-2亚烷基”，具体实例包括但不限于：-ch2-、-ch2ch2-、-ch2ch2ch2-、-ch2ch2ch2ch2-、-ch2ch2ch2ch2ch2-、-ch2ch2ch2ch2ch2ch2-等。
本发明所述的“c1-6亚烷基中任一碳原子任选被杂原子或基团所替代”是指“c1-6亚烷基”中的任意一个碳原子可以任选被一个杂原子或基团所替代，可以是c1-6亚烷基中的碳原子未被任何杂原子或基团所替代；也可以是c1-6亚烷基中的一个碳原子被一个杂原子或基团所替代；也可以是c1-6亚烷基中的任意两个碳原子被相同或不同的两个杂原子或基团所替代；也可以是c1-6亚烷基中的任意多个碳原子被相应的相同或不同的多个杂原子或基团所替代；所述的杂原子或基团选自n、nh、o、co、s、so或so2。
本发明所述的“c1-4亚烷基任选被1-2个杂原子或基团所替代”是指，c1-4亚烷基的碳原子未被替代，或者c1-4亚烷基中的任意1个碳原子被1个杂原子或基团所替代，或者c1-4亚烷基中的任意2个碳原子被2个杂原子或基团所替代。
本发明所述的“部分饱和”是指相关基团至少包含一个双键或一个三键。
另外，本发明还提供上述通式(i)表示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯以及它们的立体异构体的制备方法。
具体而言，所述制备方法，其包括但不限于下述工艺路线(其中，各缩写所代表的定义如下：
dma：n,n-二甲基乙酰胺；dcm：二氯甲烷；pe：石油醚；ea：乙酸乙酯；dmf：n,n-二甲基甲酰胺；dppp：1,3-双(二苯基膦)丙烷；thf：四氢呋喃；tfa：三氟乙酸；tlc：薄层色谱。
r1、r2、r3、m1、m2、m、n、l、a、b、c、q如前文所述，x代表氟原子、氯原子、溴原子或碘原子，x1代表氟原子、氯原子、溴原子、碘原子或羰基。
具体的示例性步骤如下：
1、中间体1的制备
将起始原料1(自制或购买)溶于有机溶剂(例如四氢呋喃等)中，加入起始原料2(自制或购买)，碱性溶液(例如叔丁醇钾等)和18-冠-6，在20℃-40℃反应。反应完毕，反应液减压除去溶剂，硅胶柱层析纯化，得中间体1。
2、中间体2的制备
将中间体1溶于有机溶剂(例如二氯甲烷等)中，加入酸性溶液(例如三氟乙酸等)，加完后，室温搅拌反应，反应完毕，浓缩得粗产物，或者将浓缩液加入碱性溶液(例如饱和碳酸氢钠溶液等)，用有机溶剂(例如乙酸乙酯等)萃取，有机相干燥，过滤，除去溶剂得中间体2。
3、中间体3的制备
制备或购买中间体3。
4、式(i)化合物的制备
将中间体2、中间体3溶于有机溶剂(例如dma、四氢呋喃等)中，加入碱性化合物(例如碳酸铯等)，加热或微波反应。反应液加入水稀释，加入有机溶剂(例如乙酸乙酯等)，分液，萃取，有机相干燥，浓缩，经纯化(纯化方式优选为：制备高效液相色谱，硅胶柱层析等)得式(i)化合物。
或者，将中间体2、中间体3溶于有机溶剂(例如四氢呋喃)中，加入钛酸四异丙酯，或将中间体2和3直接溶于钛酸四异丙酯中。室温反应，然后加入醇类溶剂(例如甲醇、乙醇等)，并缓慢加入硼氢化钠，继续反应数小时，反应完毕，过滤，滤液浓缩，经纯化(纯化方式优选为：制备高效液相色谱，硅胶柱层析等)得式(i)化合物。
本发明式(i)所示化合物的“药学上可接受的盐”是指式(i)化合物中存在的酸性官能团与适当的无机或者有机阳离子(碱)形成的盐，包括与碱金属或碱土金属形成的盐、铵盐，以及与含氮有机碱形成的盐；以及式(i)化合物中存在的碱性官能团(例如-nh2等)与适当的无机或者有机阴离子(酸)形成的盐，包括与无机酸、与有机羧酸。
本发明式(i)所示化合物的“酯”是指，当式(i)化合物存在羧基时，可以与醇发生酯化反应而形成的酯，当式(i)化合物存在羟基时，可以与有机酸、无机酸、有机酸盐等发生酯化反应而形成的酯。酯在酸或者碱存在的条件下，可以发生水解反应生成相应的酸或醇。
本发明化合物的“立体异构”分为构象和构型异构，而构型异构还分为顺反异构和旋光异构。构象异构是指具有一定构型的有机物分子由于碳、碳单键的旋转或扭曲而使得分子各原子或原子团在空间产生不同的排列方式的一种立体异构现象，常见的有烷烃和环烷烃类化合物的结构，如环己烷结构中出现的椅式构象和船式构象。“立体异构体”，指当本发明化合物含有一个或多个不对称中心，因而可作为外消旋体和外消旋混合物、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单一非对映异构体。本发明化合物有不对称中心，这类不对称中心各自会独立地产生两个光学异构体，本发明的范围包括所有可能的光学异构体和非对映异构体混合物和纯的或部分纯的化合物。本发明所述的化合物若含有烯烃双键，除非特别说明，本发明包括顺式异构体和反式异构体。本发明所述的化合物可以以互变异构体形式存在，其通过一个或多个双键位移而具有不同的氢的连接点。所有式(i)或通式(i-1)化合物的对映异构体、非对映异构体、外消旋体、内消旋体、顺反异构体、互变异构体、几何异构体、差向异构体及其混合物等，均包括在本发明范围中。
本发明进一步要求保护包括式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯以及他们的立体异构体与一种或多种药用载体和/或稀释剂的药物组合物。所述的药物组合物以口服、肠胃外、直肠或经肺给药等方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服给药时，可制成常规的固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。
本发明还提供了本发明式(i)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯以及它们的立体异构体在制备用于治疗和/或预防fxr介导的疾病及相关疾病的药物中的应用。所述的疾病包括：(1)脂质或脂蛋白紊乱，如动脉粥样硬化、胆汁酸紊乱、原发性硬化性胆管炎、胆固醇结石、纤维化相关疾病、脂肪肝(酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪肝等)、肝硬化(原发性胆汁性肝硬化、原发性胆管性肝硬化等)、肝炎(慢性肝炎、非病毒性肝炎、酒精性脂肪肝炎、非酒精性脂肪肝炎等)、肝脏衰竭、胆汁郁积(良性肝内胆汁淤积、进行性家族性肝内胆汁淤积、肝外胆汁郁积病症等)、胆石病、心肌梗塞、中风、血栓等；急性肝衰竭，胆石病，和/或炎性肠道疾病。(2)i型或ii型糖尿病的临床并发症，包括糖尿病性肾病、糖尿病性神经病变、糖尿病性视网膜病、及其临床显性长期糖尿病的其他观察到的结果。(3)过度增殖性疾病，选自：肝细胞癌、结肠腺瘤和息肉病、结肠腺癌、乳腺癌、胰腺癌、食管癌和其他形式的胃肠道和肝脏肿瘤性疾病。
本发明化合物具有以下优点：
(1)本发明式(i)化合物、其药学上可接受的盐、其酯及其立体异构体具有优异的fxr受体激动活性，能被安全的用于治疗和/或预防非酒精性脂肪肝、原发性胆汁性肝硬化、脂质代谢紊乱、糖尿病并发症及恶性肿瘤等相关疾病；
(2)本发明式(i)化合物、其药学上可接受的盐、其酯及其立体异构体显示出良好的生物稳定性和良好的药代动力学性质，作用更持久，生物利用度高；
(3)本发明式(i)化合物、其药学上可接受的盐、其酯及其立体异构体显示出较低的毒性，耐药性好，安全性高。
以下通过生物学实验进一步阐述本发明化合物有益效果，但不应将此理解为本发明化合物仅具有下列有益效果。
实验例1：本发明化合物对hepg2细胞bsepmrna相对表达量的影响
测试物：本发明化合物，其化学名称和制备方法见各个化合物的制备实施例。
试剂：pbs：磷酸盐缓冲液。
实验方法：
1、铺细胞，加化合物和收集细胞
使用胰酶消化、收集细胞，测定细胞浓度；根据计数结果，重悬细胞至7.5e5cell/ml密度；6孔细胞培养板，每孔接种2ml细胞；将培养板至于培养箱中，于37℃，5％co2条件培养24小时。
使用dmso稀释化合物至3，0.3mm；取上一步稀释得到的储液5ul分别加到5ml培养基中。得到的工作液浓度分别为3，0.3μm。
对照组培养基使用等体积的dmso代替储液配制；移除细胞培养板的培养基，加入工作液和对照培养基；将培养板放回培养箱，于37℃，5％co2条件培养24小时。
处理24小时后，移除细胞培养板的培养基，用预冷(4℃)的pbs润洗细胞3次；每孔加入200μl胰酶(预热至37℃)，轻轻晃动使得胰酶均匀覆盖板底。将培养板放回培养箱温育直至细胞脱离板底。加入1ml培养基终止消化。用移液器轻轻吹打几次后，将孔中所有物质吸入到1.5ml的rnase-free的离心管中，200×g离心5分钟；移除上清，收集细胞样品。
2、从细胞样品中提取和纯化rna
细胞裂解：准备新鲜的rna裂解液(1ml裂解液加10μl2-巯基乙醇)；向细胞样品加入600μl裂解液；剧烈涡旋1-2分钟，使细胞完全裂解；将细胞裂解液于12,000×g离心5分钟；取上清转移至rnase-free的1.5ml离心管中。
rna提取纯化：添加等量的70％的乙醇到细胞裂解液中；剧烈震荡离心管，充分混合，尽量分散加入乙醇后可能形成的微粒沉淀；将吸附柱置于收集管上，转移混合物至吸附柱中。每次最多转移700μl；室温离心15秒。弃掉收集管中的溶液，将剩余的混合物全部转移到吸附柱中。加700μl洗脱液i至吸附柱中；室温离心15秒。加500μl洗脱液ii到吸附柱中；室温离心15秒。弃掉收集管中的溶液，加500μl洗脱液ii到吸附柱中；室温离心1-2分钟，将吸附柱放置于rna收集管上；加入50μlrnase-free水至吸附柱的中心位置，室温孵育1分钟；室温离心2分钟，将rna洗脱至收集管中。
测量提取的rna的浓度和质量。rna存储于-80℃。
3、rna逆转录为cdna
将第二步骤中提取的rna在70℃孵育5分钟使rna变性。处理后将样品置于冰上；
使用rnase-free水稀释rna样品至200ng/μl；按照下表配制10μl的逆转录溶液，并和10μl变性rna混合。逆转录反应中rna的总量为2μg。实验过程中，所有试剂均放置于冰上。
逆转录在g-stormgs1thermalcyclerpcr热循环仪上进行。逆转录过程设置如下：
25℃10分钟→37℃120分钟→85℃5分钟→4℃∞。逆转录产物(cdna)存储于-20℃。
4、样品qpcr实验
根据qpcr扩增效率，选择合适的cdna浓度进行样品的qpcr实验。第三步骤逆转录得到的cdna样品，取10μl加60μlrnase-free水稀释7倍。
按照下表准备80μl的反应混合物，用移液器取20μl到96孔pcr反应板中，3个重复(每个反应孔加7μl100ng)cdna样品。
qpcr在quantstudiotmdx实时定量pcr仪上进行，程序设置如下：50℃2分钟→95℃10分钟→95℃15秒→60℃60秒，其中95℃15秒与60℃60秒之间设置40个循环。
数据分析：
mrna表达量＝2-δct；其中，δct＝ct的平均值(目的基因)–ct的平均值(gapdh)；
实验结果：
表1.本发明化合物处理的hepg2细胞中bsepmrna相对表达量的检测
实验结论：
由表1可知本发明化合物对hepg2细胞中bsepmrna有较好的表达作用，对于治疗非酒精性脂肪肝具有重要的意义。
实验例2：本发明化合物在不同种属中的肝微粒体代谢稳定性实验
供试品：本发明化合物化合物1、化合物3，自制，其化学名称和制备方法见各化合物的制备实施例。
对照品：化合物30-70、px-104，按照现有技术方法制备，其结构见背景技术。
实验材料：
sd大鼠的混合肝微粒体购自xenotech，批号为：1410271，肝微粒体蛋白浓度均为20mg·ml-1。
cyno猴的混合肝微粒体购自瑞德肝脏疾病研究中心(上海有限公司)，批号为：nmzc，肝微粒体蛋白浓度为20mg·ml-1。
人混合肝微粒体购自xenotech，批号1410013，肝微粒体蛋白浓度均为20mg·ml-1。
实验启动因子β-nadph购于美国roche公司(批号：524f0231)；ph7.4的磷酸盐缓冲液(pbs)由本实验室自制。
供试品溶液制备：
精密称取供试品粉末适量，加入适量的二甲基亚砜(dmso)溶解到1mm，再用甲醇稀释20倍到50μm的工作液。
实验方法:
表2.肝微粒体代谢稳定性实验温孵体系组成
实验操作步骤：
(1)按照上面表2“实验温孵体系的构成”比例，每个化合物取100mmpbs6ml，20mmmgcl2溶液0.6ml及h2o3.66ml，制备温孵体系混合溶液1(不含微粒体、供试品和β-nadph)。
(2)从-80℃冰箱中取出肝微粒体(20mg蛋白/ml)，置于37℃水浴恒温振荡器上预温孵3min。
(3)每个化合物每个种属取1.88ml温孵体系混合溶液1，加入55μl不同种属的微粒体，制备温孵体系混合溶液2(不含供试品和β-nadph)。
(4)样品组(含微粒体和β-nadph)：取616μl温孵体系混合溶液2，加入14μl浓度为50μm的供试品工作溶液，加入70μl10mm的β-nadph工作溶液。混匀，复样。取样时间点为0min，5min，10min，20min，30min，60min。
(5)对照组(含微粒体，不含β-nadph，以水代替β-nadph)：取264μl温孵体系混合溶液2，加入6μl浓度为50μm的供试品工作溶液，加入30μl水。混匀，复样。取样时间点为0min和60min。
(6)于各个预定时间点从孵育样品管中取样50μl，加入至终止样品管(内含300μl冷的终止剂，含内标甲苯磺丁脲50ng/ml的乙腈溶液)，涡旋，终止反应。
(7)涡旋10min后，离心5min(12000rpm)。
(8)取上清液100μl，加入100μl水，涡旋混匀，lc-ms/ms进样分析。
数据分析：
通过下面公式中对照品与内标峰面积的比值转化成剩余量百分比。
实验结果：
表3本发明化合物肝微粒体稳定性结果
”--”表示未测定。
实验结论：
本发明化合物均具有较好的肝微粒体代谢稳定性，且代谢稳定性明显优于对照药。
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例16-((1r,3r,5s)-3-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸的制备(化合物1)
1.5-氧代-5,6,7,8-四氢萘-2-基三氟甲磺酸酯的制备
将6-羟基-3,4-二氢萘-1(2h)-酮(11g,67.8mmol)溶于dcm(150ml)中，降至-5℃，滴入三乙胺(10.3g,101.8mmol)，在缓慢滴入三氟甲磺酸酐(23g,81.5mmol)，加毕，移至25℃反应4小时，反应完毕后，浓缩，残余物经硅胶柱层析(pe:ea＝20:1)得产物(13g，产率：65.2％)。
2.5-氧代-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸甲酯的制备
将5-氧代-5,6,7,8-四氢萘-2-基三氟甲磺酸酯(10g,34mmol)溶于dmf(70ml)和甲醇(20ml)中，依次加入三乙胺(7g,69.2mmol)，dppp(0.45g,1.09mmol)，乙酸钯(0.45g,2.0mmol)，co气球保护，70℃反应16小时，反应完毕后倒入水中，滴加碳酸氢钠饱和溶液至不再产生气泡，再补加碳酸氢钠(20g,0.24mol)，过滤，滤饼经硅胶柱层析(pe:ea＝5:1)得产物(6.2g，产率：89.3％)。
3.5-羟基-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸甲酯的制备
-5℃将5-氧代-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸甲酯(5.0g,24.5mmol)溶于甲醇(80ml)中，缓慢加入硼氢化钠(1.85g,48.9mmol)加毕，移至25℃下反应2小时，反应完毕后，浓缩，残余物加入水(30ml)，用乙酸乙酯萃取(50ml×3)萃取，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得产物(4.5g，产率89.1％)。
4.7,8-二氢萘-2-甲酸甲酯的制备
将5-羟基-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸甲酯(4.5g,21.8mmol)溶于甲苯(50ml)中，加入对甲苯磺酸一水合物(0.42g,2.2mmol)，加热至110℃反应2小时。反应完毕后，浓缩，残余物加入水(30ml)，用二氯甲烷(50ml×3)萃取，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得产物(3.7g，产率90.2％)。
5.1a,2,3,7b-四氢萘并[1,2-b]环氧乙烷-5-甲酸甲酯的制备
将7,8-二氢萘-2-甲酸甲酯(3.0g,15.9mmol)溶于dcm(60ml)中，加入间氯过氧苯甲酸(5.5g,31.9mmol)，25℃反应3小时。反应完毕后，过滤，滤液浓缩，加入饱和碳酸氢钠(50ml)搅拌10分钟，再用二氯甲烷(100ml×2)萃取，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得粗产物(3.5g)。
6.6-氧代-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸甲酯的制备
将1a,2,3,7b-四氢萘并[1,2-b]环氧乙烷-5-甲酸甲酯(3.5g,粗品)溶于甲苯(50ml)中，对甲苯磺酸一水合物(0.35g,1.84mmol)，加热至110℃反应2小时。反应完毕后，浓缩，残余物经c18反相柱层析(水/乙腈＝0-30％)得产物(1.6g，两步产率：49.3％)。
7.叔丁基(1r,3r,5s)-3-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸酯的制备
将叔丁基(1r,3r,5s)-3-羟基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸酯(1.0g,4.4mmol)，18冠6(325mg,1.23mmol)和叔丁醇钾(276mg,2.46mmol)，加入到thf(30ml)中，氮气保护下，25℃反应半小时，再加入4-(溴甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑(1.53g,4.4mmol)，25℃反应2小时，反应完毕后，浓缩，经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)，得产物(1.5g，产率:69.1％)。
8.4-(((1r,3r,5s)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)氧基)甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑的制备
将叔丁基(1r,3r,5s)-3-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸酯(0.6g,1.22mmol)溶于dcm(10ml)中，加入tfa(2ml)，25℃反应2小时。反应完毕后，浓缩，残余物加入饱和碳酸钠水溶液(20ml)，用乙酸乙酯(30ml×3)萃取，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得产物(430mg，产率89.6％)。
9.6-((1r,3r,5s)-3-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸甲酯的制备
将4-(((1r,3r,5s)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)氧基)甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑(0.4g,1.02mmol)和6-氧代-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸甲酯(0.4g,1.96mmol)溶于thf(2ml)中，加入钛酸四异丙酯(10ml)，25℃反应16小时。反应完毕后加入甲醇(20ml)，降至0℃，缓慢加入硼氢化钠(0.12g,3.17mmol)，移至25℃反应3小时，反应完毕后过滤，滤液浓缩，残余物经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得产物(100mg，产率16.9％)。
10.6-((1r,3r,5s)-3-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸的制备
将6-((1r,3r,5s)-3-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸甲酯(0.1g,0.17mmol)溶于甲醇(6ml)，thf(4ml)，水(4ml)混合溶剂中，加入氢氧化锂一水合物(36mg,0.85mmol)，加热到40℃反应6小时，反应完毕后浓缩，残余物加入水(10ml)中，用1m稀盐酸调ph＝2，用乙酸乙酯(20ml×3)萃取，合并有机层，浓缩，残余物经c18反相柱层析(乙腈/水＝0-55％)得产物(30mg，产率：31.1％)。
分子式:c31h32cl2n2o4分子量:566.2lc-ms(m/z):567.3(m+h+)
1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:7.39-7.67(m,2h),7.29-7.40(m,3h),6.95(d,j＝6.8hz,1h),4.22(s,2h),4.10-4.17(m,2h),4.08(s,1h),4.02(s,1h),3.55(s,1h),3.12-3.30(m,1h),2.81-2.99(m,2h),2.68(br,1h),2.68(br,1h),2.15(br,1h),1.91-2.05(m,5h),1.75-1.80(m,2h),1.23-1.27(m,4h),1.09-1.15(m,2h).
实施例26-((1r,3r,5s)-3-((5-环丙基-3-(2-环丙基苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)-5,6,7,8-四氢萘-2-羧酸的制备(化合物2)
1.2-环丙基苯甲醛的制备
将2-溴苯甲醛(30.0g,162.2mmol)，环丙硼酸(16.7g,194.4mmol)溶于甲苯(400ml)和水(100ml)的混合溶液中，加入无水磷酸钾(103.3g,486.6mmol)，醋酸钯(3.6g,16.1mmol)，三环己基膦(9.1g,32.4mmol)，氮气置换，加热至100℃，搅拌12小时。冷却，分液，水相用乙酸乙酯(300ml)萃取，合并有机相，旋干，剩余物经柱层析分离(石油醚:乙酸乙酯＝50:1)，得产物(22.0g,产率:92.8％)。
2.(e)-2-环丙基苯甲醛肟的制备
将2-环丙基苯甲醛(22.0g,15mmol)溶于乙醇(300ml)中，分批缓慢加入盐酸羟胺(12.0g,172.7mmol)，加毕，加入1.6n氢氧化钠溶液(108ml,172.8mmol)，加热至90℃，搅拌14小时。冷却，旋干，剩余物中加入水(300ml)和乙酸乙酯(300ml)，分液，水相用乙酸乙酯(200ml)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，剩余物直接用于下一步(20.6g,产率:85.1％)。
3.(z)-2-环丙基-n-羟基亚氨苄基氯的制备
将(e)-2-环丙基苯甲醛肟(20.6g,127.8mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(200ml)中，分批缓慢加入n-氯代丁二酰亚胺(17.1g,128.1mmol)，25℃下继续搅拌反应2.0小时，将反应液倒入水(500ml)中，加入乙酸乙酯(300ml)，分液，水相用乙酸乙酯(200ml)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，剩余物直接用于下一步(22.5g,产率:90％)。
4.5-环丙基-3-(2-环丙基苯基)异恶唑-4-羧酸甲酯制备
将钠(2.8g,121.7mol)溶于无水乙醇(200ml)中，加入3-环丙基-3-氧代丙酸甲酯(17.2g,120.9mmol)和(z)-2-环丙基n-亚氨苄基氯(22.5g,115.0mmol)，25℃下搅拌反应12小时，旋干，加入乙酸乙酯(300ml)和水(100ml)，分液，有机相旋干，剩余物经柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)得产物(3.1g,产率:9.5％)。
5.(5-环丙基-3-(2-环丙基苯基)异恶唑-4-基)甲醇的制备
将5-环丙基-3-(2-环丙基苯基)异恶唑-4-羧酸甲酯(3.1g,10.9mmol)溶于四氢呋喃(50ml)中，-78℃下，加入二异丁基铝氢(32.7ml,32.7mmol)，25℃下继续搅拌反应12小时，加入饱和氯化铵水溶液(10ml)淬灭反应，加入乙酸乙酯(100ml)和水(100ml)，分液，水相用乙酸乙酯(100ml)萃取，合并有机相，旋干，剩余物经柱层析分离(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得化合物(1.8g,产率:64.3％)。
6.4-(溴甲基)-5-环丙基-3-(2-环丙基苯基)异恶唑的制备
冰浴下，将(5-环丙基-3-(2-环丙基苯基)异恶唑-4-基)甲醇(1.8g,7.1mmol)溶于二氯甲烷(50ml)中，加入三苯基膦(2.8g,10.7mmol)和四溴化碳(3.5g,10.6mmol)，升至25℃搅拌反应4小时。将溶剂旋干，剩余物经柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得化合物(1.5g,产率66.4％)。
7.5-羟基-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸甲酯的制备
0℃,将5-氧代-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸甲酯(2.0g,9.8mmol)溶于甲醇(50ml)中，缓慢加入硼氢化钠(0.6g,15.9mmol)，25℃下反应4小时，反应完毕后，加入5ml水，旋干，加入乙酸乙酯萃取(100ml)和水(50ml)，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得产物(1.9g，产率:94.0％)。
8.7,8-二氢萘-2-甲酸甲酯的制备
将5-羟基-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸甲酯(1.9g,9.2mmol)溶于甲苯(30ml)中，加入对甲苯磺酸一水合物(0.2g,1.0mmol)，加热至110℃反应2小时。旋干，加入二氯甲烷(50ml)，水(20ml)，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得化合物(1.6g，产率:94.1％)。
9.7,8-二氢萘-2-甲酸的制备
将7,8-二氢萘-2-甲酸甲酯(1.6g,8.5mmol)溶于甲醇(30ml)，水(20ml)中，加入氢氧化钠(0.7g,17.5mmol)，加热至40℃，反应3小时。旋干，加入水(30ml)，盐酸调ph＝4，二氯甲烷(50ml×3)萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得产物(1.3g，产率:87.8％)。
10.7,8-二氢萘-2-甲酸乙酯的制备
将7,8-二氢萘-2-甲酸(1.3g,7.5mmol)溶于乙醇(30ml)中，0℃，加入二氯亚砜(1.8g,15.1mmol)，加热至80℃，反应4小时，旋干，剩余物直接用于下一步。
11.1a,2,3,7b-四氢萘并[1,2-b]环氧乙烷-5-甲酸乙酯的制备
将7,8-二氢萘-2-甲酸乙酯(粗品)溶于dcm(50ml)中，加入间氯过氧苯甲酸(2.6g,15.1mmol)，25℃，反应4小时，过滤，滤液旋干，剩余物经柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)得产物(0.9g，产率:55.3％)。
12.6-氧代-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸乙酯的制备
将1a,2,3,7b-四氢萘并[1,2-b]环氧乙烷-5-甲酸乙酯(0.9g,4.1mmol)溶于甲苯(30ml)中，加入对甲苯磺酸一水合物(80mg,0.42mmol)，加热至110℃，反应3小时。tlc检测反应完毕后，旋干，剩余物经柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)得化合物(0.51g，产率:56.7％)。
13.叔丁基(1r,3r,5s)-3–((5-环丙基-3-(2-环丙基苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸酯的制备
将4-(溴甲基)-5-环丙基-3-(2-环丙基苯基)异恶唑(0.5g,1.6mmol)，叔丁基(1r,3r,5s)-3-羟基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸酯(0.36g,1.6mmol)溶于四氢呋喃(30ml)中，加入18-冠醚-6(0.46g,1.7mmol)，叔丁醇钾(0.19g,1.7mmol)，25℃，反应3小时，旋干，剩余物经柱层析(二氯甲烷:甲醇＝30:1)得化合物(0.21g，产率:28.4％)。
14.4-(((1r,3r,5s)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)氧基)甲基)-5-环丙基-3-(2-环丙基苯基)异恶唑的制备
将叔丁基(1r,3r,5s)-3–((5-环丙基-3-(2-环丙基苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸酯(0.21g,0.45mmol)溶于dcm(5ml)中，加入tfa(2ml)，25℃反应4小时，旋干，剩余物直接用于下一步。
15.6–((1r,3r,5s)-3–((5-环丙基-3-(2-环丙基苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)-5,6,7,8-四氢萘-2-羧酸乙酯的制备
将4-(((1r,3r,5s)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)氧基)甲基)-5-环丙基-3-(2-环丙基苯基)异恶唑(0.45mmol)和6-氧代-5,6,7,8-四氢萘-2-甲酸乙酯(0.3g,1.4mmol)溶于钛酸四异丙酯(8ml)中，25℃，反应24小时，加入乙醇(30ml)，硼氢化钠(0.12g,3.2mmol)，25℃，反应6小时，tlc检测反应完成，加入水(20ml)，乙酸乙酯(50ml)，过滤，滤液旋干，剩余物经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝30:1)得产物(50mg，产率:19.6％)。
16.6-((1r,3r,5s)-3–((5-环丙基-3-(2-环丙基苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)-5,6,7,8-四氢萘-2-羧酸的制备
将6-((1r,3r,5s)-3-((5-环丙基-3-(2-环丙基苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)-5,6,7,8-四氢萘-2-羧酸乙酯(50mg,0.088mmol)溶于甲醇(2ml)，thf(2ml)，水(1ml)混合溶剂中，加入氢氧化锂一水合物(20mg,0.48mmol)，25℃反应6小时。旋干，加入水(5ml)中，用2n稀盐酸调ph＝4，用二氯甲烷(20ml×2)萃取，有机相旋干，剩余物经硅胶柱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)得产物(16mg，产率:34.0％)。
分子式:c34h38n2o4分子量:538.69lc-ms(m/z):539.3(m+h+)
1h-nmr(400mhz,meod)δ:7.74(s,2h),7.37-7.40(m,1h),7.21-7.40(m,3h),6.99(d,j＝8.0hz,1h),4.39(s,2h),4.11-4.19(m,2h),3.60-3.63(m,1h),2.92-3.29(m,3h),2.35-2.41(m,1h),2.17-2.26(m,3h),1.98-2.05(m,6h),1.79-1.84(m,2h),1.28-1.33(m,2h),1.15-1.17(m,4h),0.88-0.93(m,2h),0.68-0.72(m,2h).
实施例32-((1r,3s,5s)-3-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-烯-8-基)苯并[d]噻唑-6-羧酸的制备(化合物3)
1.叔丁基(1r,5s)-3-氧代-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-烯-8-羧酸酯的制备
将1,1,3,3-四溴丙酮(19.5g,52.2mmol)和1-吡咯甲酸叔丁酯(7.3g,43.7mmol)溶于甲苯(180ml)中，25℃滴入二乙基锌正己烷溶液(52ml,52mmol,1m)，25℃反应16小时，再加入水(50ml)，硅藻土过滤，分液，甲苯层浓缩。向残余物加入饱和氯化铵甲醇溶液(50ml)，降至0℃，缓慢加入zn-cu(22.5g,174.5mmol)，25℃反应3小时，硅藻土过滤，滤液浓缩，经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得产物(1.1g，产率:11.2％)。
2.叔丁基(1r,3s,5s)-3-羟基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-烯-8-羧酸酯的制备
将叔丁基(1r,5s)-3-氧代-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-烯-8-羧酸酯(0.85g,3.8mmol)溶于thf(30ml)中，-78℃滴入三仲丁基硼氢化锂(l-selectride)四氢呋喃溶液(5.7ml,5.7mmol,1m)，25℃反应2小时，用甲醇(2ml)淬灭，浓缩经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)纯化，得产物(0.8g，产率:93.4％)。
3.叔丁基(1r,3s,5s)-3-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-烯-8-羧酸酯的制备
将叔丁基(1r,3s,5s)-3-羟基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-烯-8-羧酸酯(0.1g,0.44mmol)，叔丁醇钾(74mg,0.66mmol)，18冠6(116mg,0.44mmol)溶于thf(10ml)中，25℃反应10分钟，再加入4-(氯甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑(200mg,0.66mmol)和ki(110mg,0.66mmol)，30℃反应4小时，浓缩，经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)纯化，得产物(120mg，产率:55.5％)。
4.4-((((1r,3s,5s)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-烯-3-基)氧基)甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑三氟乙酸盐的制备
将叔丁基(1r,3s,5s)-3-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-烯-8-羧酸酯(0.12g,0.24mmol)加入到dcm(4ml)中，加入tfa(2ml)，25℃反应1小时，浓缩得粗产物(200mg)。
5.甲基2-((1r,3s,5s)-3-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-烯-8-基)苯并[d]噻唑-6-羧酸酯的制备
将4-((((1r,3s,5s)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-烯-3-基)氧基)甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑三氟乙酸盐(200mg,粗品)，甲基2-溴苯并[d]噻唑-6-羧酸酯(100mg,0.37mmol)和碳酸铯(240mg,0.73mmol)加入到dma(6ml)中，微波120℃反应1小时，倒入水(50ml)中，乙酸乙酯(20ml×3)萃取，合并有机层，浓缩，经硅胶柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)纯化，得产物(100mg，两步产率:71.5％)。
6.2-((1r,3s,5s)-3-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-烯-8-基)苯并[d]噻唑-6-羧酸的制备
将甲基2-((1r,3s,5s)-3-((5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异恶唑-4-基)甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-烯-8-基)苯并[d]噻唑-6-羧酸酯(100mg,0.17mmol)，氢氧化锂一水合物(36mg,0.86mmol)溶于甲醇(2ml)，四氢呋喃(2ml)和水(2ml)的混合溶液中，25℃搅拌4小时，浓缩，用稀盐酸(1m)调ph＝2，用乙酸乙酯(20ml×2)萃取，合并有机层，浓缩，残余物经薄层色谱(tlc)分离(二氯甲烷:甲醇＝10:1)，得产物(60mg，产率:62.1％)。
分子式:c28h23cl2n3o4s分子量:567.1lc-ms(m/z):568.1(m+h+)
1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:8.35(s,1h),8.05(d,j＝8.8hz,1h),7.55(d,j＝8.4hz,1h),7.42-7.44(m,2h),7.32-7.37(m,1h),6.04(s,2h),4.61(s,2h),4.19(s,2h),3.47-3.53(m,1h),2.20-2.25(m,2h),2.07-2.19(m,1h),1.71(s,1h),1.67(s,1h),1.19-1.26(m,2h),1.08-1.14(m,2h).