抑制bet蛋白的5-芳基三唑并氮杂*的制作方法
【专利说明】抑制BET蛋白的5-芳基H睡并氮杂草
[0001] 本发明设及抑制BET蛋白，特别是抑制B畑4的5-芳基S挫并氮杂草，设及包含 本发明化合物的药物组合物，W及设及其用于过度增殖性病症，特别是用于肿瘤病症的预 防性和治疗性用途。本发明还设及BET蛋白抑制剂在病毒感染、神经变性病症、炎性疾病、 动脉粥样硬化疾病和男性生育力控制中的用途。
[0002] 人类BET家族（布罗莫结构域和额外C末端结构域家族）有4个成员炬RD2、 BRD3、BRD4和BRDT)，它们包含两个相关联的布罗莫结构域和一个额外末端结构域（Wu和 Chiang，J.Biol.Chem. ,2007, 282 ; 13141-13145)。布罗莫结构域为识别己酷化赖氨酸残 基的蛋白区域。经常在组蛋白（例如组蛋白3或组蛋白4)的N-末端发现该些己酷化赖 氨酸，并且其具有开放的染色质结构和活动的基因转录的特征（Kuo和Allis,Bioessays， 1998,20:615-626)。此外，布罗莫结构域可识别其它己酷化蛋白。例如，B畑4结合RelA， 该导致NF-kB的刺激和炎症基因的转录活性化uang等人，Mol.Cell.Biol. ,2009, 29 ; 1375-1387)。B畑2、B畑3和B畑4的额外末端结构域与数种与染色质调整和基因表达调节 相关的蛋白质相互作用（R址man等人，Mol.Cell.Biol. ,2011，31 ;2641-2652)。
[0003] 从机制上讲，BET蛋白在细胞生长和细胞周期中起重要作用。它们与有丝分裂 染色体相关，该表示其在表观遗传记忆中起作用值巧等人，Mol.Biol.Cell，2009,20 ; 4899-4909;Yang等人，Mol.Cell.Biol. ,2008, 28 ;967-976)。B畑4 对于转录延伸是重要 的和募集延伸复合物P-TEFb(由CDK9和细胞周期蛋白T1组成），该导致RNA聚合酶II的 活化（Yang等人，Mol.Cell, 2005,19 ;535-545)。结果，刺激与细胞增殖相关的基因（例如 c-Myc和AuroraB)的表达（You等人，Mol.Cell.Biol. ,2009, 29 ;5094-5103;Zuber等人， 化化re, 2011，doi;10. 1038)。B畑2和B畑3与高度己酷化的染色质区域中的转录的基因结 合，并且通过RNA聚合酶II促进转录（LeRoy等人，Mol.Cell, 2008, 30 ;51-60)。
[0004] 在各种不同细胞系中敲低（knock-down)B畑4导致G1阻滞（Mochiz址i等人， J.Biol.Chem.，2008,283 ;9040-9048)。已证明B畑4与数种在G1期活化的基因（例如 细胞周期蛋白D1和D2)的启动子区域结合（Mochizuki等人，J.Biol.Chem.，2008,283 ; 9040-9048)。
[0005] B畑2和B畑4敲除小鼠在胚胎发育早期死亡佑yuris等人，Biochim. Biophys. Acta, 2009,1789 ;413-421 ;Houzelstein等人，Mol. Cell. Biol.，2002, 22 ;3794-3802)。杂 合的BRD4小鼠具有多种生长缺陷，该可归因于降低的细胞增殖化ouzelstein等人，Mol. Cell.Biol.，2002, 22 ;3794-3802)。
[0006]BET蛋白在多种肿瘤中发挥重要作用。BET蛋白炬畑3或B畑4)和NUT(通常仅 在睾丸中表达的蛋白）之间的融合导致鱗状细胞癌的攻击性形式，其被称作NUT中线癌 (Rrench，CancerGenet.切togenet. ,2010, 203 ; 16-20)。该融合蛋白阻止细胞分化并促进 增殖（Yan等人，J.Biol.Chem. ,2011，286 ;27663-27675)。由此得到的体内模型的生长被 B畑4-抑制剂抑制（Filippakopoulos等人，Nature, 2010,468 ;1067-1073)。在急性髓性白 血病细胞系（AML)中的治疗祀点的筛选证明BRD4在该肿瘤中具有重要作用狂uber等人， 化化re, 2011，doi;10. 1038)。B畑4表达的降低导致细胞周期的选择性阻滞，并导致调亡。 用BRD4-抑制剂疗法阻止AML异种移植物在体内的增殖。在原发性乳腺肿瘤中检测到包含B畑4基因的DNA区域的扩增化adota等人，CancerRes, 2009,69:7357-7365)。也有关于 B畑2在肿瘤中作用的数据。在B细胞中选择性过表达B畑2的转基因小鼠产生B细胞淋己 瘤和白血病（Greenwall等人，Blood, 2005,103 ; 1475-1484)。
[0007] BET蛋白还与病毒感染相关。BRD4与多种乳头状瘤病毒的E2蛋白结合，并且其 对于潜伏性感染细胞中的病毒存活是重要的（Wu等人，GenesDev. ,2006, 20 =2383-2396)。 引起卡波西肉瘤的瘤疹病毒也与多种BET蛋白相互作用，该对于疾病抵抗力是重要的 (Viejo-Borbolla等人，J.Virol. ,2005, 79 ;13618-13629;You等人，J.Virol. ,2006,80 ; 8909-8919)。B畑4通过与P-TE讯结合，在HIV复制中也有重要作用炬isgrove等人，Proc. 化tlAcad.Sci.USA,2007,104 ; 13690-13695)。
[000引此外，BET蛋白参与炎症过程。B畑2-亚等位基因化ypomo巧he)小鼠在脂肪组织中 表现出炎症减少（Wang等人，Biochem.J.，2009,425 ;71-83)。在B畑2-缺陷小鼠中的白脂肪 组织中的巨瞻细胞渗透也降低（Wang等人，Biochem.J.，2009,425 ;71-83)。还已证明，B畑4 调节许多与炎症相关的基因。在LPS-刺激的巨瞻细胞中，BRD4-抑制剂阻止炎症基因（例如 比-1 或比-6)的表达（Nicodeme等人，化Uire，2010,468 ;1119-1123)。邸T蛋白还与ApoAl 基因的调节相关（Mirguet等人，Bioorg.Med.Qiem.Lett.，2012, 22 ;2963-2967)。相应的蛋 白是部分高密度脂蛋白化DL)，其在动脉粥样硬化中具有重要作用（Smith,Arterioscler. !'虹omb.Vase.Biol.，2010, 30 ; 151-155)。通过ApoAl表达的刺激，BET蛋白抑制剂可W增加 胆固醇皿L的浓度并由此可潜在地用于动脉粥样硬化的治疗（Mirguet等人，Bioorg.Med. Qiem.Lett.，2012,22 ;2963-2967)。
[0009] 通过调节多种在减数分裂期间和之后的重要基因的表达，BET蛋白BRDT在精子发 生中具有重要作用（Slang等人，Development, 2007,134 ;3507-3515 ;Matz址等人，Cell, 2012,150 ;673-684)。此外，B畑T设及染色质的后减数分裂的组织值bar等人，J.Biol. 化em.，2012,287 ;6387-6405)。小鼠中的体内实验显示，用BET抑制剂（其也抑制B畑T)治 疗导致精子产生减少和不育症曲312址等人，〔611，2012，150;673-684)。
[0010] 所有该些研究显示，BET蛋白在多种病理学，W及男性生育力中具有重要作用。因 此期望发现阻止邸T蛋白和己酷化蛋白之间相互作用的有效和选择性抑制剂。该些新抑制 剂还应具有适合的药物代谢动力学性质，使其能够体内，即在患者体内抑制该些相互作用。
[0011] 现已发现，取代的4-烷基-6-芳基-轴-[1，2，句S挫并[4,3-a]U]苯并氮杂草 (Benzaz巧ine)具有所期望的性质，即，显示出抑制B畑4的作用。 现有技术
[0012] 由下图解释说明在现有技术结构评定中所使用的命名：
[0013]
【主权项】
1?通式（I)的化合物
其中 R1表不氛、羟基、Ci-Q-烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、齒 素或氰基， 或 表示C3-C8-环烷基、C3-C8-环烷氧基、C3-C8-杂环烷基、具有5或6个环原子的芳基或 杂芳基，其可任选地被选自以下组的相同或不同的取代基单取代或多取代：&-(；-烷基、卤 代-Q-C；-烷基、Q-C；-烷氧基、卤代-Q-C；-烷氧基、羟基、氧代、卤素、氰基、杂芳基或芳基， 或表示-C( = 0) -OR8、-C( = 0) -NR12R13、-C( = 0) -R14、-S( = 0) 烷基、-S(= 0)2-0R8或-S( = 0) 2-nr12r13