可独立地选自这些残基。因此，所述氨基酸侧链包括羧基、羟基、巯基、酰胺或胺基团，以与 间隔物或亲脂取代基形成酯、磺酰酯、硫代酯、酰胺或磺酰胺。
[0546] 下式中显示包含亲脂部分Z1和间隔物Z 2的亲脂取代基的实例。
[0547]
[0548] 在本文中，式I肽的Lys残基的侧链通过酰胺键与γ -Glu间隔物（Z2)共价连接。 十六烷酰基基团（Ζ1)通过酰胺键与γ-Glu间隔物共价连接。与Lys残基缀合的该亲脂部 分和间隔物的组合可通过缩写符号K(十六烷酰基-γ-Glu)表示（例如当在具体化合物的 式中显示时）。γ-Glu也可被称为异Glu，且十六烷酰基可被称为棕榈酰基。因此，显而易 见的是，如PCT/GB2008/004121中所使用的那样，符号（十六烷酰基-γ-Glu)等同于符号 (异Glu (Palm))或（异Glu (棕榈酰基））。
[0549] 本领域技术人员应知晓用于制备本发明化合物的合适技术。例如，合适的化学参 见 W098/08871、W000/55184、W000/55119、Madsen 等（J. Med. Chem. 2007, 50,6126-32)和 Knudsen 等，2000 (J. Med Chem. 43,1664-1669) 〇
[0550] PEG化和/或酰化有短的半衰期（T1/2)，其导致GluGLP-I激动剂浓度的突然增 加。因此，在整个治疗期间，胰高血糖素受体每天一次（或两次）突然暴露于胰高血糖素激 动作用。
[0551] 不受任何特定理论的约束，GluR重复地突然暴露于胰高血糖素激动作用似乎给肝 和脂肪组织之间脂质和游离脂肪酸的运输带来了困难，其结果是脂肪在肝中积累。
[0552] GluR持续暴露于胰高血糖素激动作用阻断脂肪在肝中的积累。
[0553] 因而发现用胰高血糖素或短效的双效GluGLP-I激动剂重复治疗由于脂肪和糖原 的积累而引起肝增大（Chan 等，1984. Exp. Mol. Path. 40, 320-327)。
[0554] 在体重正常的对象中，以长效酰化双效GluGLP-I激动剂处理不引起肝大小的变 化（增大或缩小），但使肝的脂质含量正常化（Day等，2009 ;Nat. Chem. Biol. 5, 749-57)。
[0555]
[0556] 相关化合物与GLP-I受体或胰高血糖素（Glu)受体的结合可用作激动剂活性的指 示，但一般情况下优选使用生物测定，其测量由化合物与相关受体结合所产生的细胞内信 号转导。例如，胰高血糖素激动剂激活胰高血糖素受体会刺激细胞环AMP (cAMP)的形成。类 似地，GLP-I激动剂激活GLP-I受体会刺激细胞cAMP形成。因此，cAMP在表达这两种受体 之一的适当细胞中的产生可用于监测相关受体活性。因此，使用一对合适的细胞类型（每 种细胞类型表达一种受体而不表达另一种受体）可用于测定激动剂对两种类型受体的活 性。
[0557] 本领域技术人员知晓合适的测定形式，以下提供了实例。GLP-I受体和/或胰 高血糖素受体可具有实施例中所述的受体序列。例如，测定可使用具有初始登记号GI : 4503947 (NP_000151. 1)的人胰高血糖素受体（胰高血糖素-R)和/或具有初始登记号GI : 166795283 (NP_002053. 3)的人胰高血糖素样肽1受体（GLP-IR)。（当涉及前体蛋白质的序 列时，显然应当理解为测定可使用不含信号序列的成熟蛋白质）。
[0558] 可使用EC5tl值作为激动剂对给定受体效力的数值量度。EC5tl值是在特定测定中 实现化合物最大活性一半时所需的该化合物浓度的测量值。因此，例如在特定测定中， EC5JGLP-IR]比天然胰高血糖素的EC5JGLP-IR]更低的化合物可被认为具有比胰高血糖素 更高的对GLP-IR的效力。
[0559] 本说明书中所述的化合物通常为Glu-GLP-I双效激动剂（dual agonist)，即它们 能对胰高血糖素受体和GLP-IR两者刺激cAMP形成。可在独立的测定中测量每种受体的刺 激，而后彼此比较。
[0560] 通过将给定化合物对胰高血糖素受体的EC5tl值（EC5tl[胰高血糖素-R])与对GLP-I 受体的EC5tl值（EC5JGLP-IR])相比较，可得出该化合物的相对胰高血糖素选择性:
[0561] 相对胰高血糖素-R选择性[化合物]=(1/EC5Q [胰高血糖素-R] X 100 %八1/ EC5。[胰高血糖素-R] +1/EC5Q [GLP-1R]))
[0562] 同样地，可得出相对GLP-IR选择性：
[0563] 相对 GLP-IR 选择性[化合物]=(1/EC5Q[GLP-1R]X100% Al/EC5Q[胰高血糖 素-R]+1/EC5tl[GLP-IR])
[0564] 利用化合物的相对选择性能将其对GLP-I或胰高血糖素受体的作用与其对另一 受体的作用直接比较。例如，化合物的相对GLP-I选择性越高，化合物对GLP-I受体比对胰 尚血糖素受体更有效。
[0565] 使用下述测定，我们发现人胰高血糖素的相对GLP-I选择性约为5%。
[0566] 与人胰高血糖素相比，本发明化合物具有更高的相对GLP-IR选择性。因此，对于 特定水平的胰高血糖素-R激动剂活性来说，所述化合物表现出比胰高血糖素更高水平的 GLP-IR激动剂活性（即对GLP-I受体效力更高）。应理解，只要实现合适的相对GLP-IR选 择性，则特定化合物对胰高血糖素受体和GLP-I受体的绝对效力与人天然胰高血糖素相比 可以更高、更低或大致相等。
[0567] 然而，本发明化合物与人胰高血糖素相比可具有更低的EC5JGLP-IR]。所述化合 物与胰高血糖素相比可具有更低的EC5tl [GLP-1R]，同时保持其EC5tl [胰高血糖素-R]与人胰 高血糖素的相比高出小于10倍、高出小于5倍或高出小于2倍。
[0568] 期望的是，任何给定化合物对胰高血糖素-R和GLP-IR两者的EC5tl应小于InM。
[0569] 本发明化合物的EC5tl[胰高血糖素-R]可以小于人胰高血糖素 EC5tl[胰高血糖 素-R]的两倍。所述化合物的EC5tl[胰高血糖素-R]可以小于人胰高血糖素 EC5tl[胰高血糖 素-R]的两倍，而且其EC5JGLP-IR]小于人胰高血糖素 EC5tl [GLP-1R]的一半，小于人胰高血 糖素 EC5JGLP-IR]的五分之一，或小于人胰高血糖素 EC5JGLP-IR]的十分之一。
[0570] 化合物的相对GLP-I选择性可以为大于5%而且小于95%。例如，所述化合物的 相对选择性可以为5~20%、10~30%、20~50%、30~70%或50~80%;或者为30~ 50%、40 ~60%、50 ~70% 或 75 ~95%。
[0571] 治疗用涂
[0572] 本发明化合物可为代谢疾病（包括肥胖症和糖尿病）提供有吸引力的治疗选择。
[0573] 糖尿病包括特征为由胰岛素分泌、胰岛素作用缺陷或上述二者所引起的高血糖的 一组代谢疾病。糖尿病的急性症状包括尿产生过量、作为结果的代偿性口渴和流体摄取增 多、视力模糊、原因不明的体重减轻、嗜睡和能量代谢改变。糖尿病的慢性高血糖与多种器 官（主要是眼、肾、神经、心脏和血管）的长期损伤、功能障碍和衰竭相关。根据致病特性， 糖尿病分为1型糖尿病、2型糖尿病和妊娠糖尿病。
[0574] 1型糖尿病占全部糖尿病病例的5~10%，它是由于分泌胰岛素的胰β细胞的自 身免疫性破坏所引起的。
[0575] 2型糖尿病占糖尿病病例的90~95%，它是一系列复杂代谢障碍的结果。2型糖 尿病是内源性胰岛素产生不足以将血浆葡萄糖水平保持为低于诊断阈值的结果。
[0576] 妊娠糖尿病是指怀孕期间鉴定的任何程度的葡萄糖不耐受。
[0577] 糖尿病前期包括受损的空腹葡萄糖和受损的葡萄糖耐量，它是指当血液葡萄糖水 平升高但低于所确立的糖尿病临床诊断水平时发生的那些状态。
[0578] 较大比例的2型糖尿病和糖尿病前期患者由于很普遍地具有其他代谢风险因素 而具有更大的发病和死亡风险，所述风险因素包括腹部肥胖症（腹内部器官周围堆积脂肪 组织过多）、致动脉粥样硬化性血脂异常（血脂异常包括高甘油三酯、低HDL胆固醇和/或 高LDL胆固醇，其促使斑块在动脉壁中积聚）、血压升高（高血压）、血栓前状态（例如，血 液中存在高水平的纤维蛋白原或纤溶酶原活化剂抑制因子-1)和促炎症状态（例如，血液 中C反应蛋白升尚）。
[0579] 相反，肥胖症使得糖尿病前期、2型糖尿病以及例如某些类型的癌症、阻塞性睡眠 窒息和胆囊病的发病风险增加。
[0580] 血脂异常与心血管病风险增加相关。高密度脂蛋白（HDL)是有临床重要性的，因 为血浆HDL浓度与动脉粥样硬化性疾病的风险之间存在负相关性。存储于动脉粥样硬化斑 中的大多数胆固醇来自LDL，因此低密度脂蛋白（LDL)浓度的升高与动脉粥样硬化密切相 关。HDL/LDL比例是动脉粥样硬化（尤其是冠状动脉粥样硬化）的临床风险指标。
[0581] 不希望受任何特定理论的约束，认为本发明化合物作为GIuGLPI双效激动剂起作 用。双效激动剂可以将胰高血糖素对例如脂肪代谢的作用与GLP-I对例如血液葡萄糖水平 和食物摄取的作用相联合。因此，它们的作用可以是加速消除过量的脂肪堆积、诱导可持续 的体重减轻和改善血糖控制。双效GluGLP-I激动剂的作用还可以是降低心血管风险因素， 如高胆固醇和LDL-胆固醇。
[0582] 因此，本发明化合物可用作用于防止体重增加、促进体重减轻、减少多余体重或治 疗肥胖症（包括病态肥胖症）及相关疾病和健康病症（包括但不限于肥胖症相关炎症、肥 胖症相关胆囊病和肥胖症引发的睡眠窒息）（例如，通过控制食欲、进食、食物摄取、卡路里 摄取和/或能量消耗）的药剂。本发明化合物还可用于治疗胰岛素抵抗、葡萄糖不耐受、糖 尿病前期、空腹葡萄糖增加、2型糖尿病、高血压、血脂异常（或这些代谢风险因素的组合）、 动脉粥样硬化、动脉硬化、冠心病、外周动脉疾病和中风。这些都是可与肥胖症相关联的病 症。然而，本发明化合物对这些病症的作用可完全或部分地由对体重的作用所介导，或者可 不依赖于对体重的作用。
[0583] 药物组合物
[0584] 本发明的化合物或其盐可配制成药物组合物，制备它们以用于保存或施用，所述 药物组合物通常包含可药用载体中的治疗有效量的本发明化合物或其盐。
[0585] 本发明化合物的治疗有效量取决于施用途径、接受治疗的哺乳动物类型以及所考 虑的具体哺乳动物的身体特征。确定该量的这些因素及它们的关系是医药领域技术人员所 熟知的。可调整该量和施用方法以实现最佳效力，而且它们可取决于例如体重、饮食、同时 用药情况（concurrent medication)及医药领域技术人员熟知其它因素。人用最适剂量大 小和给药方案可参考本发明所获得的结果，并可在适当设计的临床试验中加以验证。
[0586] 可通过常规方法确定有效剂量和治疗方案，一开始在实验室动物中使用低剂量， 而后提高剂量同时监测效果，而且也系统地改变给药方案。在确定针对给定对象的最佳剂 量时医生可考虑多种因素。这些考虑因素是本领域技术人员已知的。
[0587] 术语"可药用载体"包括任何标准药用载体。用于治疗用途的可药用载体是药学 领域公知的，并描述于例如 Remington' s Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Co. (A. R. Gennaro编，1985)中。例如，可使用弱酸性或生理pH下的无菌盐水和磷酸盐缓冲 盐水。pH缓冲剂可以是磷酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、三（羟甲基）氨基甲烷（TRIS)、N-三（羟 甲基）甲基-3-氨基丙磺酸（TAPS)、碳酸氢铵、二乙醇胺、组氨酸（其是优选的缓冲剂）、精 氨酸、赖氨酸或醋酸盐或者其混合物。该术语还涵盖在美国药典中所列的用于动物（包括 人）的任何试剂。
[0588] 术语"可药用盐"是指所述化合物的盐。盐包括可药用盐，例如酸加成盐和碱式盐。 酸加成盐的实例包括盐酸盐、柠檬酸盐和醋酸盐。碱式盐的实例包括其中阳离子选自以下 的盐：碱金属（如钠和钾）、碱土金属（如钙）和铵离子+N(R3)3(R 4)(其中R3和R4独立地表 示任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C2-C6烯基，任选取代的芳基或任选取代的杂芳基）。 其他可药用盐的实例描述于"Remington' s Pharmaceutical Sciences"，17 版，Alfonso R. Gennaro (编），Mark Publishing Company，Easton，PA，U. S. A.，1985 及更新的版本中和 Encyclopaedia of Pharmaceutical Technology 中。
[0589] "治疗"是用于获得有益或期望之临床结果的方法。为本发明目的，有益或期望之 临床结果（无论是可检出或不可检出的）包括但不限于：缓解症状、减轻疾病程度、稳定疾 病状态（即不恶化）、延后或减缓疾病进展、改善或缓和疾病状态以及（部分或全部地）消 除（remission)。"治疗"还可以指与未接受治疗时的预期存活相比延长存活期。"治疗"是 以防止疾病发生或改变疾病病状为目的而进行的介入。因此，"治疗"指治疗性处理以及预 防或防护性手段两者。需要治疗的对象包括已患病和待预防疾病的对象。治疗是指当与不 治疗时相比抑制或减少病状或症状（例如，体重增加、高血糖），并不一定暗示相关病症的 完全终止。
[0590] 药物组合物可采用单位剂型。在该形式中，组合物被分成包含合适量活性组分的 单位剂量。单位剂型可以是经包装的制剂，包装包含独立量的制剂，例如，盒装片剂、胶囊剂 以及瓶或安瓿中的粉末剂。单位剂型本身还可为胶囊剂、扁囊剂或片剂，或者可以是合适数 目的任何这些经包装形式。药物组合物可以单剂量可注射形式提供，例如采用注射笔（pen) 的形式。可将组合物配置用于任何合适的施用途径和手段。可药用载体或稀释剂包括适用 于口服、经直肠、经鼻或肠胃外（包括皮下、肌内、静脉内、皮内和透皮）施用的制剂中使用 的那些。可方便地将制剂以单位剂型提供，并可通过药学领域公知的任何方法来制备。
[0591] 皮下或透皮施用模式可对本文所述化合物尤其适用。
[0592] 联合治疗
[0593] 本发明化合物可作为联合治疗的一部分与治疗糖尿病、肥胖症、血脂异常或高血 压的药剂一起施用。
[0594] 在这种情况下，可同时或分别给予两种活性药剂，并且可以作为同一药物制剂的 一部分或者作为分别的制剂给予。
[0595] 因此，本发明化合物（或其盐）可与抗糖尿病药剂联合使用，所述药剂包括但不限 于二甲双胍、磺酰脲、格列奈、DPP-IV抑制剂、格列酮或胰岛素。在一个优选的实施方案中， 所述化合物或其盐与胰岛素、DPP-IV抑制剂、磺酰脲或二甲双胍（特别是磺酰脲或二甲双 胍）联合使用以实现充分的血糖控制。在一个甚至更优选的实施方案中，所述化合物或其 盐与胰岛素或胰岛素类似物联合使用以实现充分的血糖控制。胰岛素类似物的实例包括但 不限于 Lantus、NovorapicU Humalog、Novomix、Actraphane HM、Levemir 和 Apidra。
[0596] 所述化合物或其盐还可与抗肥胖症药剂联合使用，所述抗肥胖症药剂包括但不限 于胰高血糖素样肽受体1激动剂、肽YY或其类似物、大麻素受体1拮抗剂、脂酶抑制剂、黑 素皮质素受体4激动剂或黑色素浓集激素受体1拮抗剂。
[0597] 所述化合物或其盐可与抗高血压药剂联合使用，所述抗高血压药剂包括但不限于 血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素 II受体阻断剂、利尿剂、β -阻断剂或钙通道阻断 剂。
[0598] 可与抗血脂异常药剂联合使用的化合物或其盐包括但不限于他汀类、贝特类、烟 酸和/或胆固醇吸收抑制剂。
[0599] 方法
[0600] 酰化腠高血糖素类似物的一般合成
[0601] 使用标准Fmoc化学，用CEM Liberty肽合成仪进行固相肽合成。使用前，在 NMP(IOml)中膨胀 TentaGel S Ram 树脂（lg ;0.25mmol/g)，并使用 DCM 和 NMP 在管和反应 容器之间转移。
[0602] 偶联：
[0603] 在 CEM Discover 微波单元中，将 NMP/DMF/DCM(1 : I ： 1 ;0· 2M ;5ml)中的 Fmoc-氨基酸与 HATU/NMP(0. 5M ;2ml)和 DIPEA/NMP(2. OM ;lml) -起加入树脂中。将偶联 混合物加热至75°C 5分钟，同时将氮气以气泡形式通过该混合物。随后用NMP (4 X IOml)清 洗该树脂。去保护：
[0604] 将哌啶/NMP(20%;10ml)加入树脂中用于初始去保护，通过微波（30秒；40°C )加 热该混合物。排干反应容器，加入第二份哌啶/NMP(20%;10ml)，再次加热（75°C;3分钟）。 随后用NMP (6 X IOml)清洗该树脂。
[0605] 侧链酰化：
[0606] 在酰化位置引入Fmoc-Lys (ivDde)-OH或作为替代地具有正交侧链保护基团的其 他氨基酸。随后使用Boc2O或作为替代地通过在最后偶联中使用Boc保护的氨基酸对肽骨 架的N端进行Boc保护。在肽仍与树脂连接时，使用新配制的NMP中的水合肼（2~4% ) 选择性地切割正交侧链保护基团2X 15分钟。首先用Fmoc-Glu-OtBu或另一间隔氨基酸偶 联未保护的赖氨酸侧链，将其用哌啶去保护并通过上文中描述的肽偶联方法用亲脂部分酰 化。
[0607] 使用的缩写如下：
[0608] ivDde :1_(4,4_二甲基_2,6_二氧代亚环己基）3_甲基-丁基
[0609] Dde :1-(4,4_二甲基-2,6_二氧代亚环己基）-乙基
[0610] DCM :二氯甲烷
[0611] DMF :N，N-二甲基甲酰胺
[0612] DIPEA :二异丙基乙胺
[0613] EtOH:乙醇
[0614] Et2O:乙醚
[0615] HATU:N-[(二甲基氨基）-1Η-1，2,3-三唑[4,5-b]吡啶-1-基亚甲基]-N-甲基 甲铵六氟磷酸酯N-氧化物
[0616] MeCN:乙腈
[0617] NMP :N-甲基吡咯烷酮
[0618] TFA :三氟乙酸
[0619] TIS :三异丙基硅烷
[0620] 切割：
[0621] 用EtOH (3 X IOml)和Et2O (3 X IOml)清洗树脂，并在室温（r. t.)下干燥至重量恒 定。用TFA/TIS/水（95/2. 5/2. 5 ;40ml，2小时；室温）从树脂上切割粗制肽。在减压下除 去大部分TFA，沉淀粗制肽并用乙醚清洗3次，然后在室温下干燥至重量恒定。
[0622] HPLC纯化粗制肽：
[0623] 利用 PerSeptive Biosystems VISION 工作站（装备有 C-18 柱（5cm ; 10 μ m)和级 分控制器）通过制备型反相HPLC纯化粗制肽至大于90 %，使用梯度缓冲液A (0. 1 % TFA， aq.)和缓冲液B (0· 1 % TFA，90 % MeCN，aq.)以35ml/分钟运行。通过分析HPLC和MS分 析级分，合并相关级分并冷冻干燥。通过HPLC和MS表征终产品。
[0624] 表汰人腠高血糖素#体和GLP-I #体的细朐系的产牛
[0625] 分另Ij 从 cDNA 克隆 BC104854(MGC :132514/IMAGE :8143857)或 BC112126(MGC : 138331/IMAGE :8327594)克隆编码人胰高血糖素受体（胰高血糖素-R)(初始登记号 P47871)或人胰高血糖素样肽1受体（GLP-IR)(初始登记号P43220)的cDNA。使用编码用 于亚克隆之末端限制性位点的引物，通过PCR扩增编码胰高血糖素-R或GLP-IR的DNA。5' 端引物还编码类似Kozak的共有序列以确保有效翻译。通过DNA测序来验证编码胰高血糖 素-R和GLP-IR的DNA的保真性。将编码胰高血糖素-R或GLP-IR的PCR产物亚克隆进含 有新霉素（G418)抗性标记的哺乳动物表达载体中。
[0626] 通过标准的磷酸钙转染法将编码胰高血糖素-R或GLP-IR的哺乳动物表达载体转 染入HEK293细胞。转染48小时后将细胞接种用于有限稀释克隆，并在培养基中用lmg/ml G418进行选择。3周后，挑取胰高血糖素-R和GLP-IR表达细胞的12个存活克隆，扩增并 在如下所述的胰高血糖素-R和GLP-IR效力测定中进行测试。选择一个表达胰高血糖素 -R 的克隆和一个表达GLP-IR的克隆进行化合物分析。
[0627] 腠高血糖素#体和GLP-I #体效力测宙
[0628] 将表达人胰高血糖素-R或人GLP-IR的HEK293细胞以40, 000个细胞/孔接种在 包被了 0. 01 %聚-L-赖氨酸的96孔微滴定板上，并在100 μ 1生长培养基中培养1天。在 分析当天，去除生长培养基，用200 μ I Tyrode缓冲液清洗细胞1次。在37°C下在含有浓度 递增的测试肽、100 μΜ IBMX和6mM葡萄糖的100 μ I Tyrode缓冲液中孵育细胞15分钟。 通过加入25 μ 1 0. 5Μ HCl终止反应，并在冰上孵育60分钟。使用来自Perkin-Elmer的 FIashP丨ate? CAMP试剂盒估测CAMP含量。通过计算机辅助的曲线拟合估测EC5tl和与参 照化合物（胰高血糖素和GLP-1)相比较的相对效力。
[0629] 皮下施用后对小鼠血浆中肽Glu-GLPl激动齐1丨讲行宙量的牛物分析筛诜法
[0630] 以100nmol/kg向小鼠皮下（s. c.)给药。在以下时间点处死小鼠并收集血液：0. 5、 2、4、6、16和24小时。分析血浆样品如下：使用蛋白沉淀，然后进行固相提取（SPE)和液相 色谱质谱（LC-MS)。
[0631] 高脂饲喂的C57B1/6T IH常小鼠中的口服葡萄糖耐量测试（OGTT)，血脂和体重以 及db/db小鼠中的HbAlc
[0632] 使雄性小鼠（长期高脂饲喂的C57B1/6J、短期高脂饲喂的C57B1/6J和db/db)适 应自由获取食物和水。将它们5~6只一组的饲养在控制光、温度和湿度的室内（12小时 光照：12小时黑暗周期，光照打开/关闭于2000/0800时；24°C ;50%相对湿度）。
[0633] 向动物s. c.注射100 μ 1载剂（每天一次）三天，以使动物适应处理和注射。从 眼或从尾尖取血液样品。处理前，将动物随机化。
[0634] 以GluGLP-I激动剂或载剂每天两次s. c.处理小鼠（注射体积=2. 5ml/kg)。整 个研宄中，每天记录体重，并将其用于施用以体重校正剂量的肽。给药前新鲜制备肽溶液。
[0635] 动物短期禁食之后进行口服糖耐量测试（OGTT)。为防止混杂食物摄取，在OGTT期 间保持动物的禁食。给予肽之后，取初始血液样品。随后给予（5ml/kg)溶于磷酸盐缓冲液 (pH = 7. 4)的口服剂量的葡萄糖（lg/kg)，并将动物放回其原笼中（t = 0)。在t = 15分 钟、t = 30分钟、t = 60分钟、t = 90分钟和t = 120分钟时测量全血葡萄糖（BG)。
[0636] 按照制造商的说明书，通过固定葡萄糖氧化酶法使用一滴血液（< 5 μ I ;Elite Autoanalyser，Bayer，Denmark)分析 BG 浓度。
[0637] HbAlc 测宙
[0638] 可以通过测定血红蛋白AlC(HbAlc)的水平来评价化合物对对象葡萄糖水平的长 期作用。HbAlc是血红蛋白的糖化形式，其在细胞中的水平反映所述细胞的生命周期中所暴 露的平均葡萄糖水平。在小鼠中，HbAlc是之前4周平均血液葡萄糖水平的相关生物标志 物，因为HbAlc的转化受限于红细胞的寿命（约47天）仏此代〇吐&1^?611，1972;14??1· Physiol. 32,443-445)。
[0639] 根据 Turbidimetric INhibition ImmunoAssay (TINIA)测定HbAlc