溶剂（例如，吐温80、聚山梨醇酯80)、抗氧化剂（例如，抗坏 血酸、焦亚硫酸钠）、防腐剂（例如，Thimersol、苄醇）和膨化物质（例如，乳糖、甘露醇）。 还可将所述组合物并入聚合物如聚酯、聚氨基酸、水凝胶、聚乳酸/乙交酯共聚物、乙烯醋 酸乙烯酯共聚物、聚乳酸、聚乙醇酸等的颗粒制剂中或并入脂质体中。此类组合物可影响 本发明的药物组合物成分的物理状态、稳定性、体内释放速率以及体内清除速率（参见，例 如，Remington , s Pharmaceutical Sciences and Remington:The Science and Practice of Pharmacy)。本发明的药物组合物还可制备成，例如，液体形式或可制备成干燥粉末形式 (例如，冻干以便以后的重构）。
[0031] 通常将本文所述的治疗剂（例如，编码丙酮醛降解酶如乙二醛酶-1的核酸分子） 作为药物制剂施用于患者。本文所用的术语"患者"是指人或动物受试者。在医师的指导 下，可治疗或预防性地使用本发明的组合物。
[0032] 包含本发明的剂的组合物可方便地配制成与任何药学上可接受的载体一起施用。 可以改变选定的介质中的剂的浓度，并且可以基于药物制剂的所需给药途径选定介质。除 了与待施用的剂不相容的那些外，考虑任何常规介质或制剂在药物制剂中的应用。
[0033] 可以由医生考虑患者的年龄、性别、体重、一般医学状况以及施用该药剂进行治疗 或预防的特定病况及其严重程度，来确定适用于对特定患者施用的根据本发明的所述剂的 剂量和给药方案（例如，对于病毒载体的效价）。医生还可考虑给药途径、药物载体和所述 剂的生物活性。对合适药物制剂的选择还将取决于选定的给药方式。
[0034] 本发明的药物制剂可以配制成剂量单位形式以方便施用和均匀剂量。本文所用的 剂量单位形式是指适于接受治疗或预防性治疗的患者的药物制剂的物理离散单元。每一剂 量应含有计算用于产生与选定的药物载体相关的所需效应的大量活性成分。确定合适剂量 单位的过程是本领域技术人员熟知的。剂量单位可基于患者的体重成比例增加或降低。可 通过本领域已知的剂量浓度曲线计算来确定缓解或预防特定病况的合适浓度。
[0035] 可以合适的间隔时间施用包含所述剂的药物制剂直至病理症状减轻或缓解，而后 可将剂量降低至维持水平。特定情况下的合适间隔时间通常将取决于患者的病况。
[0036] 本文描述的特定制剂的毒性和疗效（例如，治疗性、预防性）可通过标准的药学程 序确定，例如，但不限于，体外、细胞培养物中、离体或实验动物上的程序。由这些研究获得 的数据可用于制定用于人体的剂量范围。可根据剂型和给药途径改变剂量。可以单独地调 整剂量和间隔时间至足以递送治疗有效量或预防有效量的活性成分的水平。
[0037] 定义
[0038] 提供以下定义来促进对本发明的理解：
[0039] 单数形式"一（a)"、"一个（an)"和"该（the)"包括复数指代，除非上下文进行了 清楚的其他说明。
[0040] "药学上可接受的"表明由联邦管理机构或国家政府批准或列于美国药典或其他 通常公认的用于动物以及更特定的用于人的药典。
[0041] "载体"是指，例如，稀释剂、佐剂、防腐剂（例如，Thimersol、节醇）、抗氧化剂（例 如，抗坏血酸、焦亚硫酸钠）、增溶剂（例如，吐温80、聚山梨醇酯80)、乳化剂、缓冲剂（例 如，TrisHC1、醋酸盐、磷酸盐）、抗菌剂、膨化物质（例如，乳糖、甘露醇）、赋形剂、辅助剂 或载体，利用该载体可以施用本发明的活性剂。药学上可接受的载体可以是无菌液体、如 水和油，包括石油、动物、蔬菜或合成来源的那些。水或盐水溶液以及右旋糖溶液和甘油 水溶液可用作载体，特别是可注射溶液。在E.W.Martin"Remington'sPharmaceutical Sciences'，（MackPublishingCo. ,Easton,PA) ;Gennaro,A.R.，Remington:The ScienceandPracticeofPharmacy, (Lippincott，Williams和Wilkins)；Liberman 等人编，PharmaceuticalDosageForms，MarcelDecker，NewYork，N.Y?以及Kibbe 等人编,HandbookofPharmaceuticalExcipients,AmericanPharmaceutical Association,Washington中描述了合适的药物载体。
[0042] 本文所用的术语"治疗"是指对患有疾病的患者赋予益处的任何形式的治疗，包括 改善患者的病况（例如，一种或多种症状），延迟病况进展等。
[0043] 如本文所用的术语"预防"是指对处于发展病况（例如，糖尿病相关并发症）风险 的受试者的预防性治疗，从而导致受试者发展病况的概率降低。
[0044] 化合物或药物组合物的"治疗有效量"是指有效预防、抑制或治疗特定病症或疾病 和/或其症状的量。例如，"治疗有效量"可指足以调节受试者的糖尿病相关并发症的量。
[0045] 如本文所用的术语"受试者"是指动物、特别是哺乳动物，特别是人。
[0046] 本文所用的术语"启动子"是指指导与其可操作地连接的聚核苷酸序列的转录 (例如，在细胞内）的DNA序列。启动子还可包含来自连接的启动子的刺激转录的增强子 元件。术语"增强子"是指结合至转录起始复合物并促进相关启动子处的转录的开始的DNA 序列。
[0047] "载体"是核酸分子如质粒、粘粒、杆粒（bacmid)、噬菌体或病毒，其上可连接/插 入另一基因序列或元件（DNA或RNA)以便引起序列或元件（例如，在载体中包含的启动子 的控制下）的复制和/或表达。
[0048] 如本文所用的"核酸"或"核酸分子"是指单链或双链的任何DNA或RNA分子，如 果是单链的，则为其互补序列的线性或环形形式的分子。在讨论核酸分子的过程中，可根据 提供5'到3'方向的序列的正常惯例在本文中描述特定核酸分子的序列或结构。关于本发 明的核酸，有时使用术语"分离的核酸"。该术语应用于DNA时，是指从序列中分离出来的 DNA分子，其与该序列在其来源的生物体的天然存在的基因组中是连续的。例如，"分离的 核酸"可包含插入载体如质粒或病毒载体或整合至原核或真核细胞或宿主生物体的基因组 DNA的DNA分子。分离的核酸（DNA或RNA)还可代表直接由生物或合成方式产生的以及由 其产生过程中存在的其他成分分离的分子。
[0049] 以下实例提供了实践本发明的示例性方法，并非意在以任何方式限制本发明的范 围。
[0050] 实施例
[0051] 简介
[0052] 患有糖尿病（DM)的个体由于降糖药物、监测葡萄糖的装置、食物管理和锻炼策略 的施用而存活较长时间。遗憾地是，他们还继续以高于普通群体3-4倍的比率发展心血管 疾病和多种终末器官并发症，包括视网膜病变、肾衰竭、心力衰竭、性功能障碍、牙周病和中 风（Guariguata 等人（2011)Diabetes Res. Clin. Prac. ,94:322-332)，消极影响日常生活 活动的并存疾病。除了这些熟知的并存疾病之外，近期研究还揭示了信息处理速度和精神 运动功能的减慢，受损的视空间觉、注意力缺陷、受损的思维灵活性和工作记忆以及认知缺 陷（Kodl等人（2008)Endocrine Rev. ,29:494-511)。这些认知缺陷独立于低血糖事件，并 且消极影响日常生活活动。迄今为止，TlD终末器官并发症的分子诱因仍然未完全确定，并 且没有可用的用于预防的药理学治疗。
[0053] 临床研究明确确立了终末器官功能损害与微血管缺陷之间的强相关 (Biessels等人（2〇〇8) Lancet Neurol.，7:184-I9O;Liew等人（2〇〇9)J. Amer. Geriatr. Soc. ,57:1892-1896)。反应性二-羰基物种丙酮醛（MG)为导致内皮细胞介导的微血 管失调的主要分子候选物（Takahashi等人（2008)￥&1〇^&1〇12&8811；[:]\?11&1'111.3〇(3. Japan, 128:1443-1448 ;Dhar等人（2010) Brit. J. Pharmacol.，161:1843-1856 ;Brouwers等 人（2010)Diabetologia 53:989-1000)。然而，损害微血管的丙酮醛的来源是未知的。因 为这种小分子电解质调节关键生理学功能，包括细胞分化、细胞死亡和休眠（Hovatta等人 (2005) Nature 438:662-666 ; Jakubcakova 等人（2013) J. Psychopharmacol.，27:1070-5)， 将MG水平总体降低至使TlD的微血管并发症最少化，很可能产生不良副作用。然而，鉴别 和降低MG的"微血管损害集合体"将治疗性地有效降低TlD终末器官并发症，而不引发毒 副作用。
[0054] 整体过表达Glo-I的啮齿动物在诱发TlD后很少发展终末器官并发症，并且敲 除（knock out)/敲减（knock down)Gl〇-l导致类糖尿病并发症、终末器官并发症。此外， 过表达产生MG的酶氨基脲敏感胺氧化酶（SSAO)的小鼠也展现出类糖尿病症状。因为MG 调节关键的细胞和生理功能，包括细胞分化、细胞死亡和休眠，将其水平总体降低至使内 皮功能紊乱最小化，将产生一系列的不良副作用，包括焦虑、癌症和应激性。增加SMC中 Glo-I的表达预防软脑膜微动脉（一种原型微血管）的内皮细胞介导的功能障碍，发展糖 尿病心力衰竭以及TlD的特征耗水量和排尿的增加（烦渴/多尿）。这些动物展现出正 常的筑巢能力，日常生活活动，这些需要认知完整性，包括注意力、决策、视空间觉和运动技 能。在SMC中过表达Glo-I的TlD大鼠在9周研究期和死亡时未展现出疼痛、悲伤或异常 理毛行为的迹象，也不存在明显的内部器官异常迹象。在SMC中过表达Glo-I不影响SMC 介导的微血管功能。本文构建的新型基因转移构建体，AAV2/9-G10-1由内皮素-1启动子 驱动（AAV2/9-End〇-Gl〇-l)，也预防对突触传递的损害和脑炎症。在TlD发病后一周注射 AAV2/9-End〇-Gl〇-l不降低血浆MG水平，这表明在血浆MG与微血管