一种黄霉素发酵生产工艺的制作方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及一种黄霉素发酵生产工艺。
【背景技术】
[0002]现有的黄霉素发酵生产工艺中，一直采用豆油作为生产菌的主要碳源，但是豆油的价格较贵，如何降低生产成本，而又能够得到发酵效果好的黄霉素是本领域技术人员所要解决的技术问题。
【发明内容】
[0003]本发明提供了一种黄霉素发酵生产工艺，生产成本低，发酵效果好。
[0004]新疆有丰富的棉籽油资源，价格比豆油低廉，本发明采用棉籽油替代豆油作为生产菌的碳源，发酵水平相当，而成本却能够有效降低。
[0005]本发明提供一种黄霉素发酵生产工艺，是用含有棉籽油的培养基培养黄霉素生产菌得到的，所述黄霉素生产菌为\Streptomyces bambergiensisXJ-1510
[0006]作为优选方案，所述培养基分为种子培养基和发酵培养基；每10ml种子培养基中棉籽油的含量为0.05-0.15go
[0007]作为优选方案，每10ml发酵培养基中棉籽油的含量为1.0g-4.0。
[0008]作为优选方案，每10ml种子培养基的配方为:玉米淀粉3.0g、玉米浆0.5g、豆柏粉2.0g、棉籽油0.lg、碳酸钙0.3g、磷酸二氢钾0.2g、α -淀粉酶0.0I g/g干淀粉，纯净水余量；pH值7.2?7.5。
[0009]作为优选方案，每10ml发酵培养基的配方为:玉米淀粉3.0g、玉米浆0.5g、豆柏粉2.5g、棉籽油3.0g、磷酸氢二钾0.0lg、碳酸钙0.3g、α -淀粉酶0.004g/g干淀粉、硫酸铵
0.3g、硫酸镁0.2g、氯化钴0.0OOlg、硫酸亚铁0.00003g、聚氧丙稀聚氧乙稀甘油醚0.05g、脂肪醇聚氧乙烯醚0-25 0.3g，纯净水余量；pH6.9?7.1。
[0010]作为进一步地优选方案，步骤如下:
(O将黄霉素生产菌菌种接入已灭菌的种子培养基中，培养温度35-37°C，摇床转速220-260转/分，培养18-26小时获得摇瓶种子培养液；
(2)将上述摇瓶种子培养液通过无菌操作转入已灭菌的种子罐，培养基使用种子培养基，搅拌转速120-160r/min，罐温35_37°C培养40_48h，获得种子罐种子培养液；
(3)将上述种子罐种子培养液转入发酵罐培养，培养基使用发酵培养基，搅拌转速80-130r/min ;温度32°C?37°C，罐压0.05 MPa,每分钟内通气比1:0.6-1:1.1 ;发酵170-230 小时。
[0011]作为优选方案，步骤(I)中接种量为0.45-0.55 _升菌液/50 _升培养基。
[0012]本发明的黄霉素发酵生产工艺发酵效果好，生产成本低，从图1中可以看出，用棉籽油代替豆油，发酵水平相当。
【附图说明】
[0013]附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中:
图1为棉籽油和豆油分别作为培养基原料时的黄霉素效价对比，其中，横坐标为小时，纵坐标为效价值(单位/毫升)。
【具体实施方式】
[0014]以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
[0015]菌株和培养基:
1.黄霉素生产菌:斑伯链霉菌Streptcmycesbambergiensis YJ-151:由浙江钱江生物技术有限公司馈赠；
2.培养基:
2.1.种子培养基(g/100ml):玉米淀粉:3.0、玉米浆0.5、豆柏粉2.0、棉籽油(食用棉籽油三级以上)0.05-0.15、碳酸钙0.3、磷酸二氢钾0.2、α -淀粉酶0.0I g/g干淀粉，pH值7.2 ?7.5。
[0016]2.2.发酵培养基(g/100ml):玉米淀粉3.0、玉米浆0.5、豆柏粉2.5、棉籽油(食用棉籽油三级以上)1.0-4.0、磷酸氢二钾0.01、碳酸钙0.3、α -淀粉酶0.004g/g干淀粉、硫酸铵0.3、硫酸镁0.2、氯化钴0.0001、硫酸亚铁0.00003、聚氧丙烯聚氧乙烯甘油醚(消泡剂)0.05、脂肪醇聚氧乙烯醚0-25 (乳化剂)0.3、pH6.9?7.1。
[0017]本发明的黄霉素发酵生产工艺步骤如下:
(I)将冷冻管保藏的生产菌种Streptcmyces bambergiensis YJ-151号菌种接入已灭菌的种子培养基中，接种量为0.45-0.55毫升菌液/50毫升培养基，培养温度35-37 °C，摇床转速220-260转/分，培养18-26小时获得摇瓶种子培养液。
[0018](2)将上述摇瓶种子培养液通过无菌操作转入已灭菌的种子罐，培养基使用种子培养基，搅拌转速120_160r/ min，罐温35_37°C培养40_48h，获得种子罐种子培养液。
[0019](3)将上述种子罐种子培养液转入发酵罐培养，培养基使用发酵培养基，搅拌转速80-130r/ min;温度 32°C ?37 °C ,罐压 0.05 MPa,每分钟内通气比(v/ (v.min)) =1:0.6-1:1.1o
[0020](4)从36h开始每24h检测一次黄霉素效价，发酵170-230小时，得到黄霉素。
[0021](5)结论:结果参见图1，从图1中可以看出，用棉籽油代替豆油，发酵水平相当。
[0022]实施例1
本发明的黄霉素发酵生产工艺步骤如下:
(I)将冷冻管保藏的生产菌种Streptcmyces bambergiensis YJ-151号菌种接入已灭菌的种子培养基中，接种量为0.50毫升菌液/50毫升培养基，培养温度36 °C，摇床转速240转/分，培养22小时获得摇瓶种子培养液。
[0023]种子培养基的配方为:玉米淀粉:3.0g、玉米浆0.5g、豆柏粉2.0g、棉籽油(食用棉籽油三级以上)0.10g、碳酸钙0.3g、磷酸二氢钾0.2g、α -淀粉酶0.0I g/g干淀粉，加水至 100ml，pH 为 7.3。
[0024](2)将上述摇瓶种子培养液通过无菌操作转入已灭菌的种子罐，培养基使用种子培养基，搅拌转速140r/ min，罐温36°C培养44h，获得种子罐种子培养液。
[0025](3)将上述种子罐种子培养液转入发酵罐培养，培养基使用发酵培养基，搅拌转速IlOr/ min ;温度 34°C ,罐压 0.05 MPa,每分钟内通气比(v/ (v.min) ) =1:0.8。
[0026]发酵培养基配方为:玉米淀粉3.0g、玉米浆0.5g、豆柏粉2.5g、棉籽油(食用棉籽油三级以上)3.0g、磷酸氢二钾0.0lg、碳酸钙0.3g、α -淀粉酶0.004g/g干淀粉、硫酸铵0.3g、硫酸镁0.2g、氯化钴0.0OO