一种新的柠檬苦素类化合物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体设及从九里香的干燥叶中分离得到的一种具有治 疗肾癌作用的巧樣苦素类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 九里香MurrayaexoticaL为芸香科九里香属植物，主要分布在我国云南、贵州、 湖南、广东、广西、福建、海南、台湾等省区，W及亚洲一些热带及亚热带地区，其气香，味苦、 辛，有麻舌感，具有行气止痛、活血散疲之功效，用于胃痛、风湿搏痛，也用于治疗牙痛、跌扑 肿痛、虫蛇咬伤。
[0003] 近年来，中外学者对九里香的化学成分进行了大量研究，从其叶、根皮、果实等部 位中分离得到了多种化合物，主要包括香豆素类、黄酬类、生物碱类W及挥发油等。九里香 含有大量的香豆素类成分，运类成分的常见特征为在7-甲氧基或5, 7-二甲氧基香豆素骨 架的C8位带有异戊二締单位，W氧化、醋化或骨架重排等多种形式存在。九里香含有多种 黄酬类化合物，还含有黄酬巧类成分。九里香的叶中含有大量的黄酬类和香豆素类化合物， 而九里香的根、皮中主要含有生物碱类成分。挥发油类是九里香的主要化学成分之一。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种从九里香的干燥叶中分离得到的一种具有治疗肾癌作 用的巧樣苦素类化合物及其制备方法。 阳〇化]本发明的上述目的是通过下面的技术方案得W实现的：
[0006] 具有下述结构式的化合物（I)，
[0007]
[0008] 所述的化合物（I)的制备方法，包含W下操作步骤：(a)将九里香的干燥叶粉 碎，用75~85 %乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋和 水饱和的正下醇萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；(b)步骤 (a)中乙酸乙醋萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙醇洗 脱10个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇洗脱物浸膏；(C)步骤化）中 75 %乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、45:1、25:1、10:1和1:1的二氯 甲烧-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（C)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用 体积比为15:1、10:1和5:1的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分 2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75%的甲醇水溶液等度洗脱， 收集8~12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I)。
[0009] 进一步地，所述大孔树脂为Dioi大孔吸附树脂。
[0010] 进一步地，所述用乙醇热回流提取采用的乙醇浓度为80%。
[0011] 一种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I)和药学上可接受的 载体。
[0012] 所述的化合物（I)在制备治疗肾癌药物中的应用。
[0013] 所述的药物组合物在制备治疗肾癌药物中的应用。
[0014] 本发明化合物用作药物时，可W直接使用，或者W药物组合物的形式使用。
[0015] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0016] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 W及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物W单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0017] 图1为化合物（I)结构式； 阳〇1引 图2为化合物（I)理论ECD值与实验ECD值比较。
【具体实施方式】
[0019] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可W对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0020] 实施例1 :化合物（I)分离制备及结构确证
[0021] 试剂来源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲烧为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0022] 制备方法：(a)将九里香的干燥叶（IOkg)粉碎，用80%乙醇热回流提取（2化X3 次），合并提取液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油酸（化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和 水饱和的正下醇0LX3次）萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物（431g)和正下 醇萃取物；化）步骤（a)中乙酸乙醋萃取物用DlOl大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱8个柱 体积，再用75 %乙醇洗脱10个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇洗脱物 浸膏（172g) ;(c)步骤化）中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1(8 个柱体积）、45:1 (8个柱体积）、25:1 (8个柱体积）、10:1 (10个柱体积）和1:1巧个柱体 积）的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（C)中组分4 (65g)用正相硅胶进 一步分离，依次用体积比为15:1 (8个柱体积）、10:1 (10个柱体积）和5:1 (8个柱体积）的 二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分2 (37g)用十八烷基硅烷键合 的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75%的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-12个柱体积洗脱 液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I) (45mg)。
[0023] 结构确证：白色无定形粉末；HR-ESIMS显示[M+Na]+为m/z553. 2406,结合核磁 特征可得分子式为C29H3诉9,不饱和度为12。核磁共振氨谱数据5H(ppm，DMS0-d6,500MHz): H-I(7. 29,d，J= 10.6)，H-2 (5. 97,d，J= 10.6)，H-5 (2. 99,dd，J= 7. 0,1. 9)，H-6(2. 22， m)，H-6(2. 37，m)，H-9(2.86，d，J= 7. 2)，H-1U5. 31，dd，J= 10. 3,7. 2)，H-12(4. 19，dd，J= 10. 3,6. 0)，H-15 化 79,s)，H-16 (I. 81，m)，H-16 (2. 23,m)，H-17 (2. 92,dd，J= 10. 4, 7.I)， H-18 0). 71，s)，H-19〇). 91，s)，H-21(7. 13,s)，H-22 化 29,s)，H-23(7. 22,s)，H-28(0. 94， s)，H-29(1.01，s)，H-30 巧.09,s)，H-30 巧.19,s)，7-0CH3(3. 59,s)，ll-0Ac(1.94,s)， 12-0H(1. 76,d，J=6. 0)，14-OH巧.21，br，s)，15-OH巧.35,br，s);核磁共振碳谱数据 5C(卵m，DMSO-de，125MHz) : 152.6(CH，1-C)，124. 7 (CH，2-C)，203.6(C，3-C)，45.I(C，4-C)， 44. 5 (CH，5-C)，30. 7 (細2,6-C)，173.6(C，7-C)，136.6(C，8-C)，52. 2 (CH，9-C)，41. 4 (C， 10-C)，73. 7 (CH，11-C)，75. 3 (CH，12-C)，45. 2 (C，13-C)，71. 3 (C，14-C)，59.I(CH，15-C)， 31.8(細2, 16-C)，38. 4 (CH，17-C)，12. 2 (細3, 18-C)，20. 9 (細3, 19-C)，122.6(C，20-C)， 139. 4 (CH，21-C)，111. 5 (CH，22-C)，142. 0 (CH，23-C)，22. 5 (CH3, 28-C)，22.I(CH3, 29-C)， 119. 9 (邸2, 30-C)，51.8(CH3,7-OCH3)，170. 3 (C，11-OAc)，20. 4 (CH3,11-OAc);碳原子标记 参见图1。红外光谱表明该化合物含有径基（3443cmI)和幾基（1737cmI)基团。该化合 物在234nm有紫外吸收带，说明含有a, 0-不饱和酬幾基基团。古和"CNMR谱表明该 化合物含有四个叔甲基，一个甲氧基，一个环外双键，一个乙酷氧基，一个a,0-不饱和 酬幾基，一个醋基，W及一个P单取代巧喃环。通过核磁数据分析可知该化合物是一个 B环开环的巧樣苦素类化合物。根据HMBC谱中H-17(S肥.92,dd，J= 10.4,7.IHz)与 C-20( 5C122.6)，C-21( 5C139. 4)和C-22(Scm. 5)的相关性，可推断巧喃环位于C-17 位上。HMBC谱中，H-ll(5 册.31，dd，J= 10.3,7.2Hz)与乙