一种杜松烷型倍半萜类化合物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从粘毛鼠尾草的干燥全草中分离得到的一种 具有神经保护作用的杜松烷型倍半萜类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 粘毛鼠尾草Salviaroborowskii Maxim.系唇形科一年生或二年生草本，又名野芝 麻、黄花鼠尾草，生长于海拔2500~3700m的山坡草地、沟边阴处、山脚山腰，分布于西藏、青 海、甘肃西南部、四川西部等地，植物资源非常丰富，目前已有人工引种栽培。粘毛鼠尾草味 微苦、微甘，性凉，具有清肝、明目、止痛之功效。粘毛鼠尾草藏药名吉子嘎保，在藏民族地区 广泛应用，《青藏药鉴》记载全草治肝炎、牙痛，《藏本草》记载全草治肝炎、肺炎、肺结核、咯 血、风火牙痛。《藏药志》记载其味辛，性寒，可治疗黄疸性发烧、肝热、热性病头痛、眼翳、支 气管炎、淋巴结炎、口腔溃疡、感冒咳嗽等。同属植物中同为藏药的甘西鼠尾草 Salviaprzewalskii Maxim.的化学成分研究比较深入，主要有砲类(包括单砲、倍半砲、二 萜、二倍半萜、三萜）、酚酸类、木脂素、黄酮、挥发油等。
[0003] 粘毛鼠尾草化学成分有倍半萜类、二萜类、三萜类、黄类、留类、酚酸、挥发油、脂肪 酸等，其中倍半萜和三萜类是主要成分。倍半萜成分主要为吉玛烷型倍半萜和愈创木烷型 倍半萜，以吉玛烷型倍半萜为主。粘毛鼠尾草中三萜包含乌苏烷型、齐墩果烷型、羽扇烷型 等，以羽扇烷型三萜、乌苏烷型三萜为主。
[0004] 如前所述，粘毛鼠尾草成分主要为萜类化合物(倍半萜、二萜、三萜），而萜类化合 物具有广泛的生物活性，如细胞毒性、抗肿瘤、抗氧化功能，此外还具有抗寄生虫、抗菌、抗 艾滋病毒活性，因此从粘毛鼠尾草中寻找出具有良好前景的生物活性成分或先导化合物是 可行的。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从粘毛鼠尾草的干燥全草中分离得到的一种具有神经 保护作用的杜松烷型倍半萜类化合物及其制备方法。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物(I)，
[0009]所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)粘毛鼠尾草的干燥全草粉 碎，用80~90%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水 饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a) 中乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用15%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙醇洗脱12个 柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏；（c)步骤(b)中75%乙醇洗 脱物浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1、55:1、35:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇 梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1、 15:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷 键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为80 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~10个柱体积 洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(I)。
[0010] 进一步地，步骤(a)中，用85%乙醇热回流提取，合并提取液。
[0011] 进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0012] -种药物组合物，该药物组合物含有治疗有效量的权利要求1所述的化合物（I)和 药学上可接受的载体。
[0013] 所述的化合物(I)在制备神经保护的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备神经保护的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、对 人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等;用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0018] 图1为化合物(I)结构式；
[0019 ]图2为化合物（I)理论ECD值与实验ECD值比较。
【具体实施方式】
[0020]下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021 ]实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0022] 试剂来源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0023]制备方法：（a)将粘毛鼠尾草的干燥全草(8kg)粉碎，用85%乙醇热回流提取(25L X3次），合并提取液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和 水饱和的正丁醇(3LX3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(347g)和正丁醇 萃取物；（b)步骤(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用15%乙醇洗脱8个柱体 积，再用75%乙醇洗脱12个柱体积，收集75%乙醇洗脱液，减压浓缩得75%乙醇洗脱物浸膏 (131g);(c)步骤(b)中75%乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1(8个柱体 积）、55:1 (8个柱体积）、35:1 (6个柱体积）、15 :1 (8个柱体积)和1:1 (5个柱体积）的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4(29g)用正相硅胶进一步分离，依次用 体积比为20:1(8个柱体积）、15:1(10个柱体积)和10:1(6个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2(llg)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积 百分浓度为80 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8-10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到 纯的化合物（I)(233mg)。
[0024] 结构确证:无色立方晶（甲醇）；册43頂3显示[1+他]+为111/2 241.1608，结合核磁 特征可得分子式为C15H220，不饱和度为5。核磁共振氢谱数据δΗ( ΡΡπι，DMS〇-d6，400MHz)，H-1 (2.75，m)，H-2(7.68，m)，H-3(5.92，d，J = 3.4)，H-5(5.62，br，d，J = 4.2)，H-6(1.99，m)，H-7 (1.68，m)，H-8(1.95，m)，H-8(2.17，m)，H-9(5.31，br，s)，H-ll(1.89，m)，H-12(3.35，m)，H-12(3.59，111)，!1-13(0.82，(1，了 = 7.0)，!1-14(1.82,8)，!1-15(1.71，8);核磁共振碳谱数据60 (ppm，DMS0-d6，100MHz):46.8(CH，l-C)，138.3(CH，2-C)，127.4(CH，3-C)，131.2(C，4-C)， 133.7(CH，5-C)，37.1(CH，6-C)，34.9(CH，7-C)，24.8(CH2,8-C)，122.1(CH，9-C)，136.5(C， 10-C)，35.4(CH，11-C)，66.3(CH2，12-C)，10.6(CH 3，13-C)，21.1(CH3，14-C)，21.6(CH3，15-C);碳原子标记参见图1。红外光谱表明该化合物含有羟基基团谱显示了 三个甲基信号[6!10.82((1，了 = 7.0!^，]^-13)，1.71(8，]^-15)和1.82(8，]\^-14)]，一个含氧 亚甲基信号[SH3.35(m，H-12)和3.59(m，H-12)]，四个烯属次甲基信号RH5.31(br，s，H-9)， 5.62(1^，(1，了 = 4.2抱，!1-5)，5.92((1，了 = 3.4!^，!1-3)，7.68(111，!1-2)]。13(：-匪1?谱显示出 15 个 共振碳信号，包括三个甲基，两个亚甲基（一个含氧亚甲基SC66.3)，八个次甲基（四个烯属 次甲基6(：122.1，127.4，133.7和138.3)，以及两个烯烃季碳0(：131.2和136.5)。 1!1-匪1?谱 中，低场甲基质子信号δΗΙ.71和1.82(各3H，s)表明它们与双键相连。1H- 1!! COSY谱中Η-ll与 H2-12和Me-13的相关性表明C-11位上连有一个甲基。HMBC谱中，含氧亚甲基信号[δΗ3.35 (m，H-12)和3.59(m，H-12)]与C-110C35.4)和(Μ3(δα〇.6)的相关性，以及含氧亚甲基碳 信号0C66.3)表明C-12为羟基亚甲基，与C-11相连。综合氢谱、碳谱、HMBC谱和R0ESY谱，以 及文献关于相关类型核磁数据，可基本确定该化合物如图1所示，立体构型进一步通过ECD