一种用于核酸等温扩增的无电加热器的制造方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及一种用于核酸等温扩增的无电加热器，属于生物仪器技术领域。
【背景技术】
[0002]食源性疾病是影响食品安全最主要问题之一，而导致食源性疾病的是一些致病菌如沙门氏菌，李斯特氏菌，大肠杆菌0157，弯杆菌属等食物致病菌等，如何快速有效的检测这些致病菌，是确保食品安全的首要任务。常规食品微生物检测方法包括反复增菌，菌落分离及多种生化和血清学鉴别实验，不仅步骤复杂而且耗费时间，不能适应飞速发展的现代食品生产和流通。因此开发新型快速便捷的检测方法非常重要。随着生物，化学，材料科学及计算机领域的发展，新的快速检测和识别方法层出不穷，病原学检查是确诊该病的主要方法，但费时费力，容易漏诊；免疫学方法检查循环抗体或循环抗原简单，但特异性不强；PCR法具有较高的敏感性和特异性，但它对DNA模板的要求较高，需要昂贵的PCR仪，对操作人员的熟练程度和专业水平的要求较高，这就需要研究新的检测技术。而核酸等温扩增技术只需在恒定温度下就可以实现扩增，没有复杂的温度循环，核酸等温扩增技术中最具有代表性的如环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplificat1n,LAMP)，它是一种新的核酸扩增方法。该技术依赖于自动循环的链置换反应，在等温条件(60°C -65°C )下，Ih内即能扩增IXlO9拷贝的靶序列，其操作方便，所需设备简单，反应结果可通过肉眼观察直接判断。LAMP技术具有特异性强、灵敏度高、快速和操作简单、耗时短、设备简单等优点。目前大多数检测方法需要的仪器都是需要电、昂贵的、携带不方便的。因此设计一种结合核酸等温扩增技术的、集成本低、无需供电、可携带、适用于现场检测等特点于一身的加热器显得尤为重要。
【实用新型内容】
[0003]本实用新型提供了一种用于核酸等温扩增的无电加热器，具有无需电、成本低、可携带、适用于现场检测的特点。
[0004]为了解决上述问题，本实用新型的技术方案如下:一种用于核酸等温扩增的无电加热器，该加热器包括保温装置1，装有相变材料的第一铝盒2，装有氧化钙和水或镁铁合金和水的第二铝盒3，保温材料4，热电偶5和温度记录仪6 ;所述装有相变材料的第一铝盒2，装有氧化钙和水或镁铁合金和水的第二铝盒3和保温材料4位于保温装置I内；所述装有相变材料的第一铝盒2位于装有氧化钙和水或镁铁合金和水的第二铝盒3内；所述保温材料4填充保温装置I中的空位；所述热电偶5包括第一热电偶探头51、第二热电偶探头52和热电偶线，其中:第一热电偶探头51和第二热电偶探头52通过热电偶线与温度记录仪6相连，第一热电偶探头51穿过保温装置I插入第一铝盒2的相变材料中，第二热电偶探头52穿过保温装置I插入第二铝盒3的氧化钙和水中；所述温度记录仪6位于保温装置I外部。
[0005]优选地，所述保温装置I内设有夹层，装有氧化钙和水或镁铁合金和水的第二铝盒3固定于保温装置I的夹层内。
[0006]所述第一铝盒2的尺寸小于第二铝盒3的尺寸。
[0007]优选地，所述保温材料4为泡沫珍珠板。
[0008]所述相变材料，熔点为22°C -65°C。
[0009]所述氧化钙或镁铁合金与水搅拌均匀后包埋第一铝盒2。
[0010]核酸等温扩增方法除了上述所提到的方法以外，还包括依赖核酸序列的扩增技术、依赖解旋酶的等温扩增技术、滚环等温扩增技术、重组酶聚合酶扩增方法等等。
[0011]所述装置主要特征:
[0012]I)只需将第二铝盒中的氧化钙和水混合搅拌均匀即可进行加热。
[0013]2)加热器共有两根热电偶线，一根热电偶穿过保温饭盒的夹层的盖子进入到盛有相变材料的小铝盒内测定相变材料的温度，另一根热电偶穿过保温饭盒夹层盖测定氧化钙和水反应的温度。
[0014]3)对体系的扩增利用的是氧化钙或镁铁合金和水反应放热结合相变材料的加热器(不带电)。
[0015]4)可根据需求选择不同熔点范围的相变材料。
[0016]5)可以在一个没有PCR仪、水浴锅、金属浴等一些需要电或比较昂贵的仪器的实验室检测液态奶中的致病菌，将菌富集后，利用煮沸法提取核酸后，将配置好的体系利用本实用新型的无电加热器进行核酸扩增，一定时间后取出，最后完成检测。
[0017]6)本实用新型设计的加热器在无电的条件下可以对两种及多种致病菌的同时检测同样适用，即可实现单重LAMP、双重LAMP及多重LAMP体系的扩增。
[0018]7)成本低。加热器的各个构件都已经商品化，无需特殊订制，直接购买即可。
[0019]本实用新型原理:利用氧化钙或镁铁合金粉和水反应放热，利用具有特定熔点范围的相变材料作为缓冲热量的物质，将反应体系放进相变材料中，，从而实现核酸的扩增。
[0020]本实用新型提供了一种用于核酸等温扩增的无电加热器，适用于核酸等温扩增过程，尤其适用于环介导等温扩增体系扩增，本实用新型结合等温扩增技术的优点而设计，不需要昂贵的仪器(如PCR仪)及对人员的专业训练、在没有电的情况下也可以实现体系的扩增，适用于现场检测，对于一些带电并且比较昂贵的仪器的购买可能是不实际的、不可支付的或不存在的，即在一些资源差的环境下如家庭、野外等进行检测同样适用。
【附图说明】
[0021]图1为本实用新型的结构示意图；
[0022](1，保温装置；2，第一铝盒；3，第二铝盒；4，保温材料；5，热电偶；51，第一热电偶探头；52，第二热电偶探头；6，温度记录仪)。
【具体实施方式】
[0023]下面结合说明书附图对本实用新型作进一步的解释。
[0024]实施例1
[0025]如图1所示，一种用于核酸等温扩增的无电加热器，尤其是可以实现LAMP体系扩增的无电加热器，该加热器包括保温装置1，装有相变材料的第一铝盒2，装有氧化钙和水的第二铝盒3，保温材料4，热电偶5和温度记录仪6 ;
[0026]保温装置I内设有夹层，装有氧化钙和水的第二铝盒3固定于保温装置I的夹层内，装有相变材料的第一铝盒2位于装有氧化钙和水的第二铝盒3内，氧化钙与水搅拌均匀后包埋第一铝盒2，保温材料4填充保温装置I中的空位；温度记录仪6位于保温装置I外部；
[0027]热电偶5包括第一热电偶探头51、第二热电偶探头52和热电偶线，其中:第一热电偶探头51和第二热电偶探头52通过热电偶线与温度记录仪6相连，第一热电偶探头51穿过保温装置I的顶盖和夹层盖插入第一铝盒2的相变材料中，第二热电偶探头52穿过保温装置I的顶盖和夹层盖插入第二铝盒3的氧化钙和水中。
[0028]保温装置I为保温饭盒。第一铝盒2的尺寸小于第二铝盒3的尺寸。保温材料4为泡沫珍珠板。相变材料熔点为，熔点为60°C _65°C，温度可以维持在60°C -65°C之间lh。
[0029]将第二铝盒3嵌套在保温装置1(保温饭盒)的一个夹层内，利用双尾夹将第二铝盒3固定住，将氧化钙放到第二铝盒3内加水搅拌发动热量，将盛有相变材料的第一铝盒2用氧化钙与水均匀搅拌后的混合物包埋起来，利用保温饭盒的隔层及保温材料4(泡沫珍珠板)填充保温装置的空位。
[0030]使用时，将氧化钙和水混合均匀，将盛有相变材