本发明属于食品领域，具体涉及一种魔芋葡甘露聚糖微球的制备方法。
背景技术：
食品天然产物活性因子往往具有增强机体免疫力、抗氧化和防止多种癌症等重要生理功能，但因食品活性因子存在稳定性差的问题，限制了其应用和人体营养吸收。而载体可以用来保护食品活性因子，维持其稳定性，并能提高其分散性，进而提高生物利用度。天然高分子具有可再生、生物兼容性和降解性等优点，成为制备活性因子载体的最佳材料。目前运用于装载活性因子的天然高分子有淀粉、糊精类川、蛋白、海藻酸钠等。
魔芋葡甘露聚糖(KGM)主要成分为葡萄糖和甘露糖，二者通过β-1,4或者β-1,3-糖苷键连接。KGM分子质量在500～2000kD之间，在水中的溶解度为1％左右，吸水膨胀后体积约为干状态的80倍。它具有良好的增稠性、凝胶性、成膜性和一些特殊的生理功能，目前已被用于减肥、降脂以及食品添加剂领域。但由于KGM分子质量高，溶解度低，溶胶黏度大以及稳定性差，限制了KGM进一步的开发利用。所以，对魔芋葡甘露聚糖进行处理具有重要的意义。
技术实现要素：
本发明提供魔芋葡甘露聚糖微球的制备方法，是一种通过2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基氧化制备魔芋葡甘露聚糖的方法。
本发明是通过以下技术方案实现的。
魔芋葡甘露聚糖微球的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取20 g 魔芋葡甘露聚糖溶解到2L沸水中，搅拌溶解，向溶液中加入1mg β-甘露聚糖酶，酶解温度为50℃，酶解时间为10 min，将酶解后的魔芋葡甘露聚糖溶液移入水浴锅，沸水浴10min灭酶，用乙醇析出固体后进行真空冷冻干燥，得到酶解后的魔芋葡甘露聚糖；
（2）称取8.2g酶解后的魔芋葡甘露聚糖分散在200 mL水中，用磁力搅拌器搅拌并加入0.0648g 2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基，用盐酸调节溶液pH=10，向溶液中加入4-7mL pH=10的次氯酸钠溶液，通过向溶液中加入0.5 mol/L的氢氧化钠溶液使溶液的pH值恒定为10，反应45min后，加入10mL无水乙醇终止反应，1h后用浓盐酸调节溶液pH=3，20min后，再用0.5 mol/L的氢氧化钠溶液调节溶液的pH=7并保持该pH值反应1 h，然后加入300mL无水乙醇，过滤析出的沉淀，用乙醇洗涤3次，丙酮洗涤3次，将沉淀出来的固体溶于50 mL水中，真空冷冻干燥后得到经2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基氧化的魔芋葡甘露聚糖；
（3）称取步骤（2）的产物溶解于水中，使浓度为0.005g/mL，用0.1mol/L的盐酸调节溶液PH=3，取该溶液500μL，加入0.05mg的FeSO4·7H2O，制成水相；另称取0.75g司盘80溶解在20g的液体石蜡中制成油相；将水相加入油相中，用磁力搅拌器搅拌形成油包水乳液，向该乳液中通入空气，制得微球，将微球用正己烷和甲醇分别洗涤3次，离心分离，真空干燥，即得到魔芋葡甘露聚糖微球。
优选地，步骤（1）的搅拌速度为200rpm。
优选地，步骤（2）的pH=10的次氯酸钠溶液加入的体积为5mL。
本发明的优点：
本发明制备得到的魔芋葡甘露聚糖微球可提高难溶性和敏感活性因子的分散性和稳定性，并同时装载多种活性因子，在食品工业中具有较好的应用前景。
具体实施方式
实施例1
魔芋葡甘露聚糖微球的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取20 g 魔芋葡甘露聚糖溶解到2L沸水中，搅拌溶解，向溶液中加入1mg β-甘露聚糖酶，酶解温度为50℃，酶解时间为10 min，将酶解后的魔芋葡甘露聚糖溶液移入水浴锅，沸水浴10min灭酶，用乙醇析出固体后进行真空冷冻干燥，得到酶解后的魔芋葡甘露聚糖；
（2）称取8.2g酶解后的魔芋葡甘露聚糖分散在200 mL水中，用磁力搅拌器搅拌并加入0.0648g 2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基，用盐酸调节溶液pH=10，向溶液中加入4-7mL pH=10的次氯酸钠溶液，通过向溶液中加入0.5 mol/L的氢氧化钠溶液使溶液的pH值恒定为10，反应45min后，加入10mL无水乙醇终止反应，1h后用浓盐酸调节溶液pH=3，20min后，再用0.5 mol/L的氢氧化钠溶液调节溶液的pH=7并保持该pH值反应1 h，然后加入300mL无水乙醇，过滤析出的沉淀，用乙醇洗涤3次，丙酮洗涤3次，将沉淀出来的固体溶于50 mL水中，真空冷冻干燥后得到经2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基氧化的魔芋葡甘露聚糖；
（3）称取步骤（2）的产物溶解于水中，使浓度为0.005g/mL，用0.1mol/L的盐酸调节溶液PH=3，取该溶液500μL，加入0.05mg的FeSO4·7H2O，制成水相；另称取0.75g司盘80溶解在20g的液体石蜡中制成油相；将水相加入油相中，用磁力搅拌器搅拌形成油包水乳液，向该乳液中通入空气，制得微球，将微球用正己烷和甲醇分别洗涤3次，离心分离，真空干燥，即得到魔芋葡甘露聚糖微球。
实施例2
魔芋葡甘露聚糖微球的制备方法，包括以下步骤：
（1）称取20 g 魔芋葡甘露聚糖溶解到2L沸水中，搅拌溶解，搅拌速度为200rpm，向溶液中加入1mg β-甘露聚糖酶，酶解温度为50℃，酶解时间为10 min，将酶解后的魔芋葡甘露聚糖溶液移入水浴锅，沸水浴10min灭酶，用乙醇析出固体后进行真空冷冻干燥，得到酶解后的魔芋葡甘露聚糖；
（2）称取8.2g酶解后的魔芋葡甘露聚糖分散在200 mL水中，用磁力搅拌器搅拌并加入0.0648g 2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基，用盐酸调节溶液pH=10，向溶液中加入5mL pH=10的次氯酸钠溶液，通过向溶液中加入0.5 mol/L的氢氧化钠溶液使溶液的pH值恒定为10，反应45min后，加入10mL无水乙醇终止反应，1h后用浓盐酸调节溶液pH=3，20min后，再用0.5 mol/L的氢氧化钠溶液调节溶液的pH=7并保持该pH值反应1 h，然后加入300mL无水乙醇，过滤析出的沉淀，用乙醇洗涤3次，丙酮洗涤3次，将沉淀出来的固体溶于50 mL水中，真空冷冻干燥后得到经2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基氧化的魔芋葡甘露聚糖；
（3）称取步骤（2）的产物溶解于水中，使浓度为0.005g/mL，用0.1mol/L的盐酸调节溶液PH=3，取该溶液500μL，加入0.05mg的FeSO4·7H2O，制成水相；另称取0.75g司盘80溶解在20g的液体石蜡中制成油相；将水相加入油相中，用磁力搅拌器搅拌形成油包水乳液，向该乳液中通入空气，制得微球，将微球用正己烷和甲醇分别洗涤3次，离心分离，真空干燥，即得到魔芋葡甘露聚糖微球。