专利名称：一种治疗肝炎的中药制剂及其制备检测方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗肝炎的中药制剂，具体地说是以中药材为原料，制备而成的中成药，同时涉及该药物的制备方法。
背景技术：
肝炎是一种世界性的常见病，我国属流行“重灾区”，各种类型肝炎严重威胁着国人的健康。西方国家以丙型肝炎为最多，我国主要流行乙型肝炎。据预测我国表面抗原阳性者即感染乙型肝炎者有1亿人以上，而由乙型肝炎引起的肝功能不正常患者约有3000万人。此外，慢性病毒性肝炎还与原发性肝癌的发生有密切关系，绝大部分肝癌病人有慢性肝炎病史。因此慢性肝炎的治疗已成为一个迫切需要解决的重大问题。目前国内外用于慢性肝炎治疗的药物品种甚多，归纳起来，西药大体可分为两类(1)抗病毒药抗病毒药主要有干扰素和几种核苷类似物。干扰素对乙型和丙型肝炎的治疗有效率约为30％～50％，对丙型肝炎的治疗效果比对乙型肝炎稍好。但是在停药后约6个月至1年内大部分病人会复发。而且药费相当昂贵，一个病人用进口干扰素需人民币数万元，用国产干扰素亦在1万元以上。干扰素需要肌肉注射，部分病人用药后有流感样症状的副反应。某些核苷类似物如拉米夫定(lamivudin)、法昔洛韦(famciclovir)对肝炎病毒有一定治疗效果，但亦存在停药后很快反跳即复发现象。药品价格亦较昂贵，部分病人病毒有变异，更难治疗，且有副反应。
(2)免疫调节药免疫调节药有转移因子、白细胞介素2、胸腺肽、皮质激素等。这类药物治疗慢性肝炎的病例不多，疗效尚待肯定，药费较昂贵，且有副反应。
中药制剂在治疗肝炎中应该起着重要作用，有广阔天地。
发明内容
本发明的目的是是提供一种有效治疗肝炎的中药制剂，本发明的另一个目的提供该中药制剂的制备检测方法。
为达到上述目的，我们采用了以下的技术方案本发明制剂由下述原料制成黄芩甙40-90重量份 金银花提取物(以绿原酸计)6-20重量份栀子提取物5-15重量份 茵陈提取物12-30重量份。
制成本发明制剂的原料最佳比例为黄芩甙66.7重量份 金银花提取物(以绿原酸计)13.3重量份栀子提取物10.7重量份 茵陈提取物20重量份。
本发明制剂可加入适当辅料制成临床所能接受的一切固体制剂型如颗粒剂、片剂、丸剂、胶囊剂、滴丸等，优选为颗粒剂。
本发明颗粒剂中主要有效成分含量为每克颗粒中含有黄芩甙10-200mg，每克颗粒中含有绿原酸4-25mg每克颗粒中含有栀子苷0.5-5mg。
上述有效成分在本发明颗粒中的测定方法为(1)黄芩甙的测定方法色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基键合硅胶为填充材料以比例47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相检测波长280nm对照品溶液的制备精密称取干燥至恒重的黄芩苷约10mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研细，取约0.5g精密称定，置50ml量瓶中，加50％甲醇35ml，在热水中加热20分钟，时时振摇，超声处理20分钟，放冷至室温，加50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml，置10ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，摇匀，用微空滤膜(0.45μm)，滤过，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl；(2)绿原酸的测定方法色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为10∶90的乙腈-0.4％磷酸溶液为流动相检测波长为327nm
对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本品，研细，取约0.5g精密称定，置具塞锥形瓶中，加50％的甲醇50ml，称定重量，超声30min，放冷，再称定重量。用50％的甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取滤液适量加入棕色量瓶即得供试样品溶液；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；(3)栀子苷的测定方法色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂以比例为10∶90的乙腈-0.05％三氟乙酸水为流动相；检测波长为239nm对照品溶液的制备 精密称取于60℃干燥至恒重的栀子苷对照品适量，用流动相制成每1ml含1.0mg的溶液，即得；供试品溶液的制备 取本品，研细，取约3g精密称定，置具塞锥形瓶中，加50％的甲醇20ml，在热水中加热20分钟，时时振摇，超声处理20分钟，放冷至室温，加50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，蒸干，用流动相溶解，置2ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，用外标法计算，即得。
本发明颗粒剂的制备方法为本发明颗粒的制备方法将以金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎，加入蔗糖粉与糊精或乳糖适量，混匀，加乙醇适量，制粒，干燥，即得；金银花提取物的制备方法取金银花，用30％乙醇回流二次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含生药2g，加乙醇使含含醇量达75％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含生药4g，加水至8倍量，冷藏48小时，滤过，滤液浓缩至稠膏状，真空干燥，即得；栀子提取物的制备方法取栀子，粉碎成粗粉，加水煎煮三次，第一、二次1小时，第三次0.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至每1ml含生药1g，加乙醇使含醇量达70％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含生药3g，再加乙醇使含醇量达85％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含水量生药5g，加水约5倍量，冷藏48小时，滤过，滤液浓缩至稠膏状，真空干燥，即得；黄芩苷的制备方法黄芩碎断，加水煎煮二次，每次1小时，合并滤液，滤液用盐酸(2mol/L)调PH值至1.0-2.0，在80℃保温30min，静置24h，滤过，沉淀加8倍量水，搅拌，用40％氢氧化钠溶液调PH值至7.0，并加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸(2mol/L)调PH至2.0，60℃保温30min，静置12h，滤过，沉淀用乙醇洗至PH至4.0，加10倍量水，搅拌，用40％氢氧化钠溶液调PH至6.0，加入0.5％活性炭，充分搅拌，50℃保温30min，加入1倍量乙醇搅拌均匀，立即过滤，滤液用盐酸(2mol/L)调PH至2.0，60℃保温30min，静置12h，滤过，沉淀用少量乙醇洗涤后，于60℃以下干燥，即得。
本发明药物治疗肝炎，具有很好的疗效。为表明本发明药物对肝炎的治疗作用，我们做了大量的实验研究，下面实验例用于进一步说明本发明。
本发明制剂保肝退黄的药效学研究摘要 给予小鼠本发明制剂1.8g/kg、3.6g/kg ig，对D-氨基半乳糖造成的急性肝损伤具有明显的保护作用；给予大鼠1.5g/kg、3.0g/kgig，对四氯化碳所致急性肝损伤亦表现出明显的降酶保肝作用；另外本品对异硫氰酸-1-奈脂所致的小鼠血清胆红素具有明显的降低作用。
试验材料1试验药品本发明制剂，山东鲁南制药厂提供。系中药复方制剂，实验时由水配成所需浓度。强力宁，江苏启东市制药厂2试验动物昆明种小鼠、Wistar大鼠均由山东医科大学医学实验动物中心提供。
3主要试剂D-氨基半乳糖(D-GalN)，美国Sigma公司产品，北京化学试剂公司供应。四氯化碳，北京化工总厂产品。
异硫氰酸-1-奈脂，北京通县育才精细化工厂产品。
谷草转氨酶(AST)，谷丙转氨酶(ALT)试剂盒，卫生部上海生物制品研究所提供。
胆红素测定药盒，上海荣盛生物技术有限公司提供。
试验方法与结果1.对D-氨基半乳糖所致小鼠急性肝损伤的保护作用(1)选18-20g小鼠66只，雌雄各半。按性别体重随机分为五组，正常对照组10只，其余每组各14只，分别为正常对照组(正常饲养)、模型对照组(5％淀粉0.2ml/10g)、本发明颗粒小剂量组(9％的水悬液0.2ml/10g，1.8g/kg)、大剂量组(18％的水悬液0.2ml/10g，3.6g/kg)，强力宁组(取6ml加水致15ml，0.15ml/10g，相当于3.6g/kg)。给药方式均为灌胃，连续给药3天，每天1次。除正常对照组外于禁食4h，末次给药后2h，给予8％的D-氨基半乳糖0.1ml/10g.ip，相当于800mg/kg。注射后2h再给予食物。于给予D-氨基半乳糖24h，禁食8h后，摘除各小鼠右眼球取血，3000r/min，离心分离血清，按试剂盒说明书要求赖氏比色法进行各标本AST，ALT测定和标准曲线绘制。由t检验进行组间统计比较。
结果如表1表1 本发明制剂对D-氨基半乳糖小鼠肝损伤的保护作用组别 ALTP AST P(nmol/s.L)(nmol/s.L)正常对照组176.17±14.51 159.93±36.49模型对照组432.09±27.54 ＜0.001408.39 ±＜0.001175.14本发明1.8g/kg 367.96±39.37 ＜0.001239.56 ±＜0.05130.39本发明3.6g/kg 336.65±75.91 ＜0.001224.81 ±＜0.01146.16阳性对照组382.06+42.06 ＜0.01 256.09±129.7 ＜0.05注模型组与正常对照组相比较，用药组与模型组比较实验结果说明本发明制剂对D-氨基半乳糖所引起的小鼠血清AST，ALT的升高有明显的降低作用，其作用较阳性对照一定程度地增强。
小鼠取血后，解剖取小鼠肝脏，用10％的甲醛固定24h后进行病理学检查。大体检查正常对照组，颜色褐红，质中等硬度；模型对照组，表面颜色暗红，深褐色，质较软。阳性药组和本发明制剂大、小剂量组颜色、质地介于两对照组之间。
镜检与正常对照组相比，模型对照组的病变主要表现为肝小叶结构模糊，血窦扩张充血，肝细胞呈颗粒变性，嗜酸性变性及坏死。坏死区周围及汇管区有炎细胞浸润，各用药组有类似形态学表现，但病变程度较轻，为便于比较，以变性坏死及炎细胞浸润为主要形态学指标，半定量观察列于下表，并用等级序值法计算各组的等级指数，以模型对照组为参照系(等级指数为0)进行组间差异的显著性检验。
表2本发明制剂对D-GalN急性小鼠肝损伤的形态学影响变性坏死炎细胞浸润n- + ++ +++ M- + ++ +++ M正常组10 7 3 0 0 10.33**6 4 0 012.4**模型组14 1 1 8 40 4 8 2口服液14 2 6 5 1 6.57 2 8 2 25.71本发明大剂量 14 3 5 4 2 5.88 3 7 3 16.71本发明小剂量 14 3 6 5 0 7.50*3 6 3 15.14与模型对照组相比*P＜0.05**P＜0.01(因为部分小鼠血清分离不良，未做生化测定，只做病理检查，故动物数多于生化检查数)附半定量标准(1)变性坏死“-” 正常“+” 病变范围＜全小叶的1/5“++” 病变范围＜全小叶的1/2“+++”病变范围＞全小叶的1/2(2)炎细胞浸润“-” 正常“+” 炎细胞散在，少见“++” 炎细胞在某一局部聚集成群
“+++”炎细胞弥漫分布病理组织学检查印象与正常对照组相比模型对照组出现以肝细胞弥漫性变性、坏死、炎细胞浸润为特点的急性肝损伤表现。与模型组相比，各用药组病变相对较轻，其中大剂量组差异有显著意义。
(组织学照片见后，所有照片物镜放大倍数均为20×2.对四氯化碳致大鼠急性肝损伤的保护作用选180-200g大鼠50只，雌雄各半，随机分为正常对照组、模型组(20％淀粉1ml/100gig)、本发明制剂大剂量组(20％的本发明制剂悬液1ml/100g，2g/kgig)、小剂量组(10％的本发明制剂悬液1ml/100g，1g/kgig)、阳性对照组(强力宁)。除正常对照组外，各组大鼠连续给药三天，于禁食5.5h，末次给药2h后分别给予25％CCl4花生油溶液0.2ml/100g ip。给予四氯化碳后大鼠进食。于给予四氯化碳24小时禁食12h后，颈静脉取各大鼠血，3000r/min离心10min分离血清，按ALT，AST测定说明书，进行血清ALT，AST活性测定，结果如表3表3本发明制剂对四氯化碳大鼠急性肝损伤的影响组别n AST(nmol/s.L) PALT(nmol/s.L) P正常对照组 10 201.53±31.45 169.8±25.76模型对照组 10 399.59±42.44 ＜0.001 392.0±84.24 ＜0.001高剂量 10 342.23±58.68 ＜0.05 316.56±44.36 ＜0.01低剂量 10 363.43±38.82 ＜0.05 335.6±32.93 ＜0.05阳性对照10 352.23±58.68 ＜0.05 331.91±29.49 ＜0.05注模型组与正常组比，其他组均与模型组比较大鼠取血后剖腹，取肝脏用10％的甲醛固定，进行病理学检查。结果正常对照组色褐红，边缘锐利，切面较细腻。模型对照组与之相比颜色略灰黄，体积较饱满，边缘钝，有颗粒感，其余各用药组颜色质地介于两者之间。
镜检与正常对照组对比，模型组肝细胞普遍肿胀，肝窦变窄，中央静脉周围肝细胞病变最重，表现为空泡变性，圆形细胞浸润及肝细胞坏死，用药组有类似病变但程度较轻。为便于比较，以肝细胞变性坏死为主要形态学指标，半定量观察见附表。并用等级序值法计算各组的等级指数(M)，以模型对照组为参照系(M＝0)进行组间差异的显著性比较。见表4。(组织学照片见后，所有照看物镜放大倍数均为20×)表4本发明制剂对大鼠四氯化碳肝损伤的形态学影响变性坏死程度n- + ++ +++ MT P正常对照 10 8 2 009.8 4.1 ＜0.05模型对照 10 0 1 36阳性对照 91 1 433.56 1.34 ＞0.05本发明大剂量 90 3 615.89 2.22 ＜0.05本发明小剂量 91 1 442.56 0.96 ＞0.05附半定量评价标准“-” 正常“+” 病变散在发生，程度较轻“++” 病变在中央静脉周围聚集，范围＜1/4肝小叶“+++”病变加重，范围扩大，超过1/4肝小叶由表4可见，各用药组M值都是下值，说明其形态学指标均好于模型对照组，其中大剂量组作用最为显著。
3.对异硫氰酸-1-奈脂化小鼠血清胆红素含量的影响24-28g小鼠，雌雄兼用，分组给药同1，连续给药3天，禁食4h，末次给药后1h，给予0.3％异硫氰酸-1-奈脂花生油溶液，0.2ml/10g ig，合60mg/kg。给予异硫氰酸-1-奈脂4h后，小鼠再次给食，24h后再次给药，给予异硫氰酸-1-奈脂第三天，禁食5h，给药后3h各鼠摘右眼球取血3000r/min，离心10分钟，分离血清，按试剂盒说明书要求，进行总胆红素和结合胆红素测定，测定波长为600nm。结果由t检验进行组间显著性差异比较，如表5表5对异硫氰酸化小鼠血清总胆红素，结合胆红素含量的影响总胆红素 结合胆红组别 剂量n(nmol/L) P素(nmol/L) P正常对照组 -- 12 1.88±3.992.15±1.53模型对照组 -- 12 40.95±17.92 ＜0.001 9.73±5.37 ＜0.001本发明小剂量组 1.8g/kg 12 14.55±9.94 ＜0.001 4.19±1.39 ＜0.001
本发明大剂量组 3.6/kg12 10.41±5.46 ＜0.01 3.47±2.28 ＜0.001阳性对照组 1.5ml/kg 12 18.73±3.7 ＜0.001 5.47±1.48 ＜0.01注 模型组与正常对照组相比，其它组与模型对照组相比小结由药效学试验可知本发明制剂对D-氨基半乳糖，四氯化碳引起的大小鼠急性肝损伤都有明显的保护作用，不仅明显降低血清ALT和AST，而且对肝组织也有明显的保护作用，减轻肝脏损伤程度，对异硫氰酸而致小鼠血清高胆红素有明显的降低作用，证实本品有明显的降酶退黄保肝作用，这些作用与其主治功效是符合的。
下述实施例为进一步公开本发明，需要说明的是这些实施例仅为本发明的优选方式，并不限制本发明要求保护的范围。
实施例1黄芩甙66.7重量份金银花提取物(以绿原酸计)13.3重量份栀子提取物10.7重量份茵陈提取物20重量份将以金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎，加入蔗糖粉与糊精适量，混匀，加乙醇适量，制粒，干燥，即得。
含量测定(1)黄芩甙的测定方法色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基键合硅胶为填充材料以比例47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相检测波长280nm对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的黄芩苷约10mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本品，研细，取约0.5g精密称定，置50ml量瓶中，加50％甲醇35ml，在热水中加热20分钟，时时振摇，超声处理20分钟，放冷至室温，加50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml，置10ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，摇匀，用微空滤膜(0.45μm)，滤过，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl；(2)绿原酸的测定方法
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为10∶90的乙腈-0.4％磷酸溶液为流动相检测波长为327nm对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本品，研细，取约0.5g精密称定，置具塞锥形瓶中，加50％的甲醇50ml，称定重量，超声30min，放冷，再称定重量。用50％的甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取滤液适量加入棕色量瓶即得供试样品溶液；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；(3)栀子苷的测定方法色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂以比例为10∶90的乙腈-0.05％三氟乙酸水为流动相；检测波长为239nm对照品溶液的制备 精密称取于60℃干燥至恒重的栀子苷对照品适量，用流动相制成每1ml含1.0mg的溶液，即得；供试品溶液的制备 取本品，研细，取约3g精密称定，置具塞锥形瓶中，加50％的甲醇20ml，在热水中加热20分钟，时时振摇，超声处理20分钟，放冷至室温，加50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，蒸干，用流动相溶解，置2ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，用外标法计算，即得。
结果每克颗粒中含有黄芩甙60mg，含有绿原酸13.3mg，含有栀子苷1.4mg。
实施例2黄芩甙40重量份金银花提取物(以绿原酸计)20重量份栀子提取物15重量份茵陈提取物30重量份。
将以金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎，加入蔗糖粉与糊精适量，混匀，加乙醇适量，制粒，干燥，即得；
含量测定(1)黄芩甙的测定方法色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基键合硅胶为填充材料以比例47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相检测波长280nm对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的黄芩苷约10mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本品，研细，取约0.5g精密称定，置50ml量瓶中，加50％甲醇35ml，在热水中加热20分钟，时时振摇，超声处理20分钟，放冷至室温，加50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml，置10ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，摇匀，用微空滤膜(0.45μm)，滤过，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl；(2)绿原酸的测定方法色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为10∶90的乙腈-0.4％磷酸溶液为流动相检测波长为327nm对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本品，研细，取约0.5g精密称定，置具塞锥形瓶中，加50％的甲醇50ml，称定重量，超声30min，放冷，再称定重量。用50％的甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取滤液适量加入棕色量瓶即得供试样品溶液；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；(3)栀子苷的测定方法色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂以比例为10∶90的乙腈-0.05％三氟乙酸水为流动相；检测波长为239nm对照品溶液的制备 精密称取于60℃干燥至恒重的栀子苷对照品适量，用流动相制成每1ml含1.0mg的溶液，即得；
供试品溶液的制备 取本品，研细，取约3g精密称定，置具塞锥形瓶中，加50％的甲醇20ml，在热水中加热20分钟，时时振摇，超声处理20分钟，放冷至室温，加50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，蒸干，用流动相溶解，置2ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，用外标法计算，即得结果每克颗粒中含有黄芩甙10mg，含有绿原酸25mg，含有栀子苷0.5mg。
实施例3黄芩甙90重量份金银花提取物(以绿原酸计)6重量份栀子提取物15重量份茵陈提取物30重量份。
将以金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎，加入乳糖、甜味剂适量，混匀，干法制粒，包装，即得；含量测定方法同上测定结果每克颗粒中含有黄芩甙200mg，含有绿原酸4mg，含有栀子苷5mg。
实施例4黄芩甙90重量份 金银花提取物(以绿原酸计)20重量份栀子提取物5重量份茵陈提取物30重量份。
将以金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎，加入糊精味剂适量，用70％的乙醇制软材，制粒，干燥，压片，即得；含量测定方法同上测定结果每克颗粒中含有黄芩甙100mg，含有绿原酸25mg，含有栀子苷0.5mg。
实施例5黄芩甙90重量份金银花提取物(以绿原酸计)20重量份栀子提取物15重量份茵陈提取物12重量份。
将以金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎，加入糊精味剂适量，用70％的乙醇制软材，制粒，干燥，装胶囊，即得；
含量测定(1)黄芩甙的测定方法色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基键合硅胶为填充材料以比例47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相检测波长280nm对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的黄芩苷约10mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本品内容物，研细，取约0.5g精密称定，置50ml量瓶中，加50％甲醇35ml，在热水中加热20分钟，时时振摇，超声处理20分钟，放冷至室温，加50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml，置10ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，摇匀，用微空滤膜(0.45μm)，滤过，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl；(2)绿原酸的测定方法色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为10∶90的乙腈-0.4％磷酸溶液为流动相检测波长为327nm对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本品内容物，研细，取约0.5g精密称定，置具塞锥形瓶中，加50％的甲醇50ml，称定重量，超声30min，放冷，再称定重量。用50％的甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取滤液适量加入棕色量瓶即得供试样品溶液；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；(3)栀子苷的测定方法色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂以比例为10∶90的乙腈-0.05％三氟乙酸水为流动相；检测波长为239nm对照品溶液的制备 精密称取于60℃干燥至恒重的栀子苷对照品适量，用流动相制成每1ml含1.0mg的溶液，即得；
供试品溶液的制备 取本品内容物，研细，取约3g精密称定，置具塞锥形瓶中，加50％的甲醇20ml，在热水中加热20分钟，时时振摇，超声处理20分钟，放冷至室温，加50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，蒸干，用流动相溶解，置2ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，用外标法计算，即得测定结果每克颗粒中含有黄芩甙150mg，含有绿原酸25mg，含有栀子苷5mg。
实施例6黄芩甙66.7重量份金银花提取物(以绿原酸计)13.3重量份栀子提取物10.7重量份茵陈提取物20重量份。
将以金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎，混匀，另取聚乙二醇加热熔融，加入药粉，滴制成丸，包装，即得滴丸剂。
含量测定方法同实施例1。
测定结果每克颗粒中含有黄芩甙20mg，含有绿原酸4mg，含有栀子苷0.5mg。
实施例7黄芩甙66.7重量份 金银花提取物(以绿原酸计)13.3重量份栀子提取物10.7重量份 茵陈提取物20重量份。
将以金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎，混匀，另取糊精适量，加入药粉，混匀，泛制成丸，包装，即得丸剂。
含量测定方法同实施例1。
测定结果每克颗粒中含有黄芩甙40mg，含有绿原酸8mg，含有栀子苷2mg。
金银花提取物的制备方法取金银花，用30％乙醇回流二次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含生药2g，加乙醇使含含醇量达75％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含生药4g，加水至倍量，冷藏48小时，滤过，滤液浓缩至稠膏状，真空干燥，即得；栀子提取物的制备方法取栀子，粉碎成粗粉，加水煎煮三次，第一、二次1小时，第三次0.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至每1ml含生药1g，加乙醇使含醇量达70％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含生药3g，再加乙醇使含醇量达85％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含水量生药5g，加水约5倍量，冷藏48小时，滤过，滤液浓缩至稠膏状，真空干燥，即得；黄芩苷的制备方法黄芩碎断，加水煎煮二次，每次1小时，合并滤液，滤液用盐酸(2mol/L)调PH值至1.0-2.0，在80℃保温30min，静置24h，滤过，沉淀加8倍量水，搅拌，用40％氢氧化钠溶液调PH值至7.0，并加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸(2mol/L)调PH至2.0，60℃保温30min，静置12h，滤过，沉淀用乙醇洗至PH至4.0，加10倍量水，搅拌，用40％氢氧化钠溶液调PH至6.0，加入0.5％活性炭，充分搅拌，50℃保温30min，加入1倍量乙醇搅拌均匀，立即过滤，滤液用盐酸(2mol/L)调PH至2.0，60℃保温30min，静置12h，滤过，沉淀用少量乙醇洗涤后，于60℃以下干燥，即得。
权利要求
1.一种治疗肝炎的中药固体制剂，其特征在于其是由下述原料制成的黄芩甙40-90重量份 金银花提取物(以绿原酸计)6-20重量份栀子提取物5-15重量份茵陈提取物12-30重量份。
2.如权利要求1所述的制剂，其特征在于其有效成分主要由下述原料组成黄芩甙66.7重量份金银花提取物(以绿原酸计)13.3重量份栀子提取物10.7重量份茵陈提取物20重量份。
3.如权利要求1、2所述的制剂，其特征在于其剂型为片剂、颗粒、胶囊、滴丸、丸剂。
4.如权利要求3所述的制剂，其特征在于其剂型为颗粒剂。
5.如权利要求3所述的固形物，其特征在于每克颗粒中含有黄芩甙10-200mg。
6.如权利要求3所述的固形物，其特征在于每克颗粒中含有绿原酸4-25mg。
7.如权利要求3所述的固形物，其特征在于每克颗粒中含有栀子苷0.5-5mg。
8.如权利要求4所述的制剂，其特征在于有效成分测定方法为(1)黄芩甙的测定方法色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基键合硅胶为填充材料以比例47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸为流动相检测波长280nm对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的黄芩苷约10mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本品，研细，取约0.5g精密称定，置50ml量瓶中，加50％甲醇35ml，在热水中加热20分钟，时时振摇，超声处理20分钟，放冷至室温，加50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml，置10ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，摇匀，用微空滤膜(0.45μm)，滤过，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl；(2)绿原酸的测定方法色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为10∶90的乙腈-0.4％磷酸溶液为流动相检测波长为327nm对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本品，研细，取约0.5g精密称定，置具塞锥形瓶中，加50％的甲醇50ml，称定重量，超声30min，放冷，再称定重量。用50％的甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取滤液适量加入棕色量瓶即得供试样品溶液；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得；(3)栀子苷的测定方法色谱条件 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂以比例为10∶90的乙腈-0.05％三氟乙酸水为流动相；检测波长为239nm对照品溶液的制备 精密称取于60℃干燥至恒重的栀子苷对照品适量，用流动相制成每1ml含1.0mg的溶液，即得；供试品溶液的制备 取本品，研细，取约3g精密称定，置具塞锥形瓶中，加50％的甲醇20ml，在热水中加热20分钟，时时振摇，超声处理20分钟，放冷至室温，加50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，蒸干，用流动相溶解，置2ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，用外标法计算，即得。
9.如权利要求4所述的颗粒剂，其特征在于该颗粒剂的制备方法为本发明颗粒的制备方法将以金银花提取物、栀子提取物、黄芩苷、茵陈提取物粉碎，加入蔗糖粉与糊精或乳糖适量，混匀，加乙醇适量，制粒，干燥，即得；金银花提取物的制备方法取金银花，用30％乙醇回流二次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含生药2g，加乙醇使含含醇量达75％，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含生药4g，加水至8倍量，冷藏48小时，滤过，滤液浓缩至稠膏状，真空干燥，即得；栀子提取物的制备方法取栀子，粉碎成粗粉，加水煎煮三次，第一、二次1小时，第三次0.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至每1ml含生药1g，加乙醇使含醇量达70％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含生药3g，再加乙醇使含醇量达85％，冷藏24小时，滤过，滤液回收乙醇至每1ml含水量生药5g，加水约5倍量，冷藏48小时，滤过，滤液浓缩至稠膏状，真空干燥，即得；黄芩苷的制备方法黄芩碎断，加水煎煮二次，每次1小时，合并滤液，滤液用盐酸(2mol/L)调PH值至1.0-2.0，在80℃保温30min，静置24h，滤过，沉淀加8倍量水，搅拌，用40％氢氧化钠溶液调PH值至7.0，并加等量乙醇，搅拌使溶解，滤过，滤液用盐酸(2mol/L)调PH至2.0，60℃保温30min，静置12h，滤过，沉淀用乙醇洗至PH至4.0，加10倍量水，搅拌，用40％氢氧化钠溶液调PH至6.0，加入0.5％活性炭，充分搅拌，50℃保温30min，加入1倍量乙醇搅拌均匀，立即过滤，滤液用盐酸(2mol/L)调PH至2.0，60℃保温30min，静置12h，滤过，沉淀用少量乙醇洗涤后，于60℃以下干燥，即得。
全文摘要
本发明公开了一种新的治疗肝炎的中药制剂及其制备方法，它是以黄芩苷、金银花提取物、栀子提取物、茵陈提取物为原料，以不同的物理或化学方法处理后制备而成的固体剂型。本发明配方独特，临床上用于治疗肝炎效果显著。
文档编号G01N30/00GK1616012SQ20041007395
公开日2005年5月18日 申请日期2004年9月17日 优先权日2004年9月17日
发明者赵志全 申请人:鲁南制药股份有限公司