本发明涉及一种制备磁性纳米复合物用于分散固相微萃取方法，同时采用高效液相色谱检测水样中有机污染物孔雀石绿(MG)和结晶紫(CV)的分析方法，属于环境水样分析技术领域。
背景技术：
孔雀石绿(MG)作为添加剂主要是为鱼类保活保鲜，但进入人体后其代谢产物具有高残留和致癌、致畸、致突变等毒性，对人体危害极大。结晶紫(CV)属于三苯甲烷类阳离子型染料，除广泛应用于纺织、印染和油墨工业领域外，也可用于对纸张、玩具和一些塑料制品染色。在生产、使用过程中产生的大量废水颜色深，结构中含有对生物降解呈抑制作用的苯环，难以降解成无机小分子，严重污染环境，其中的化学官能团三苯甲烷具有高毒、高残留及“三致”作用。基于MG和CV对环境的危害性，对水体中MG和CV的分析监测非常重要。
现有的检测MG和CV的方法主要有：分光光度法、质谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法等。其中高效液相色谱法应用较为广泛是由于强的定性能力和高的灵敏度。然而，由于水样中MG和CV含量很低，所以在检测前必须对目标物进行富集。
常用的富集方法有液液萃取法和固相萃取法，然而液液萃取法耗时较多，需要使用有毒有机试剂。固相萃取法过程繁琐，提取时间长，因此开发一个简单、有效的前处理方法提取水样中的MG和CV并用HPLC检测其含量很有必要。
技术实现要素：
本发明的目的在于利用Fe3O4/GO纳米复合材料中GO的优良的吸附性能和Fe3O4的超强顺磁性能，对样品进行富集和分离，从而能够达到对痕量样品有效检测的目的。本发明的技术方案如下：
(1)制备Fe3O4/GO纳米粒子，并用超纯水洗涤后，加入超纯水形成悬浊液备用。
(2)取待测水样，用0.45μm滤膜抽滤，移取水样于比色管中。
(3)在比色管中依次加入：Fe3O4/GO纳米复合物，MG、CV混合标准溶液或环境水样、pH 6.0的乙酸铵缓冲溶液，在室温下反应一段时间；
(4)反应后的溶液用磁铁进行固液相分离后，弃去清液，收集磁性固体后用乙腈/冰乙酸洗脱液洗脱，洗脱液经滤头过滤后在高效液相色谱仪上进行检测，计算出水样中MG和CV的含量。
发明效果
与现有技术相比，本发明具有如下优点：
(1)灵敏度高。本发明利用了Fe3O4/GO磁性纳米复合物富集MG和CV，提高了方法的灵敏度，可实现对溶液中低至0.5μg L-1MG和CV的检测；
(2)样品前处理方法简单，无需离心等操作；
(3)方法可用于环境、食品、生物等复杂样品中MG和CV的检测。
具体实施方式
实施例1
在比色管中依次加入0.05mL浓度为2.68mg mL-1的Fe3O4/GO纳米复合物，0.02mL 10mg L-1MG和CV混合标准溶液、pH 6.0的醋酸铵缓冲或水样(水样用0.45μm的滤膜过滤并调节pH至6.0)19.93mL，在室温下反应15min。反应后的溶液用磁铁进行固液相分离后，弃去清液。磁性固体用200μL乙腈/冰乙酸(V:V＝4:1)洗脱液超声洗脱后、经磁铁分离、0.45μm滤头过滤后，取20μL溶液在高效液相色谱仪上进行进行吸光度测定(检测波长为600nm处)，根据水样与标准系列的吸光度，计算出水样中MG和CV的含量。
实施例2
在比色管中依次加入0.1mL浓度为2.68mg mL-1的Fe3O4/GO纳米复合物，0.02mL 10mgL-1MG和CV混合标准溶液、pH 5.0的醋酸铵缓冲或水样(水样用0.45μm的滤膜过滤并调节pH至5.0)19.88mL，在室温下反应15min。反应后的溶液用磁铁进行固液相分离后，弃去清液，磁性固体用200μL乙腈/冰乙酸(V:V＝4:1)洗脱液超声洗脱后、经磁铁分离、0.45μm滤头过滤后，取20μL溶液在高效液相色谱仪上进行进行吸光度测定(检测波长为600nm处)，根据水样与标准系列的吸光度，计算出水样中MG和CV的含量。
采用实施例1、2对环境水样1、2、3、4进行回收率测定，实验结果见表1。由于所采水样均未被污染，且一般水体中MG和CV含量很低，因此采用了加标回收的方法，回收率在91-117％之间。
表1实际样品中MG和CV的加标回收结果