一种检测血清淀粉样蛋白A的酶联免疫吸附试剂盒及其制备方法和用途与流程

文档序号:12454195阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种检测牛血清淀粉样蛋白A的酶联免疫吸附分析试剂盒,其特征在于,该试剂盒包括:

用牛血清淀粉样蛋白A(SAA)抗体包被的酶标板

牛血清淀粉样蛋白A(SAA)标准品

标准品稀释液

牛血清淀粉样蛋白A(SAA)抗体

酶标记的羊抗鼠IgG抗体

洗涤液

底物

显色剂

终止液。

2.根据权利要求1所述的酶标板,其特点在于酶标板的材质为聚苯乙烯微孔板。

3.根据权利要求1所描述的酶标板,其特征在于酶标板制备方法包括以下步骤

包被:将牛血清淀粉样蛋白A(SAA)抗体用PH6-8的0.01-0.05M PBS缓冲液稀释,终浓度为1-50ug/ml,按照每孔100-300ul的量加入到酶标板的微孔中

在37℃孵育1-4小时或者4℃孵育过夜

洗涤:用0.01-0.05M的PBS缓冲液,加入0.1%的Tween20洗涤酶标板3-5次

封闭:在上述酶标板中每孔加入300ul封闭液(10%小牛血清或者3%脱脂奶粉)室温封闭1-3小时

洗涤:用0.01-0.05M,PH6-8的PBS缓冲液加入0.1%Tween20缓冲液洗涤酶标板3-5次

干燥:在20-37℃干燥5-10小时,使酶标板干燥。

4.根据权利要求3所描述的酶标板制备方法,其特征在于,包被酶标板的牛血清淀粉样蛋白A(SAA)抗体可以是多克隆抗体,也可以是单克隆抗体,其中优选单克隆抗体。

5.根据权利要求1所描述的牛血清淀粉样蛋白A(SAA)标准品,其特征在于所用的牛血清淀粉样蛋白A(SAA)可以是天然的牛血清淀粉样蛋白A(SAA)也可以是重组表达的牛血清淀粉样蛋白A(SAA)。

6.根据权利要求5所描述的天然或者重组表达的牛血清淀粉样蛋白A(SAA),其特征在于,牛血清淀粉样蛋白A(SAA)的基因对应GeneBank ID NM_00181016.3对应的基因序列。

7.根据权利要求1所描述的标准品稀释液,其特征在于标准品稀释液为浓度为0.01-0.05M,PH6-8的磷酸缓冲液PBS, 其中优选0.01MPH7.4的磷酸缓冲液。

8.根据权利要求1所描述的牛血清淀粉样蛋白A(SAA)抗体,其特征在于抗体可以是单克隆抗体也可以是多克隆抗体,其中优选单克隆抗体。

9.根据权利要求1所描述的酶标记的羊抗鼠IgG抗体,其特征在于酶可以是辣根过氧化物酶HRP或者碱性磷酸酶AP,其中优选辣根过氧化物酶HRP。

10.根据权利要求1所描述的洗涤液,其特征在于洗涤液为含有表面活性剂的磷酸盐缓冲液,更具体的,洗涤液为含有0.1%Tween20的磷酸缓冲液。

11.根据权利要求1中所描述的底物,其特征在于底物为过氧化物,更具体的,底物为H2O2或者其氧化物,优选1mg/ml的过氧化氢脲。

12.根据权利要求1中所描述的显色剂,其特征在于显色剂为0.1—0.3mg/ml的四氨基联苯胺溶液。

13.根据权利要求1中所描述的终止液,其特征在于终止液为2M的H2SO4。

14.一种检测牛血清淀粉样蛋白A的酶联免疫试剂盒的用途,其特征在于该试剂盒用于检测牛奶中的牛血清淀粉样蛋白A(SAA)浓度,并以此诊断奶牛的隐性乳房炎。

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