三结构域蛋白8（trim8）抑制剂在抑制心肌肥厚中的功能及应用
【专利说明】H结构域蛋白8 (TRIM8)抑制剂在抑制心肌肥厚中的功能 及应用
[0001]
技术领域
[0002] 本发明属于基因的功能与应用领域，特别设及一种S结构域蛋白8 (TRIMS)抑制 剂在抑制屯、肌肥厚中的功能及应用。
【背景技术】
[0003] 屯、肌肥厚是屯、脏为适应各种长期过度的压力和/或容积负荷刺激而产生的屯、肌 细胞体积增大，重量增加。屯、肌肥厚中屯、肌细胞由于蛋白合成增加，引起体积增大、直径或 长度增加，肌节数量增多。同时，屯、肌细胞表型也由成熟型向胚胎型转化，并伴随屯、肌间质 细胞增殖和屯、脏细胞外基质改建，引起屯、肌重构[1，2]。临床上许多屯、脏疾病可W引起屯、 肌肥厚，常见病因包括原发性或继发性高血压病、屯、脏瓣膜病、冠屯、病，W及先天性屯、脏病 等巧]。尽管W屯、肌细胞增大、屯、肌收缩力增强为特点的早期屯、肌肥厚表现为一种维持正常 屯、输出量的代偿机制，但是由于长期屯、肌肥厚会增加屯、肌耗氧量，引起屯、肌缺血和屯、肌细 胞调亡，同时屯、肌肥厚降低屯、室顺应性，导致代偿机制失衡[4]。研究表明随着屯、肌肥厚重 构的进展，缺血性屯、脏病、恶性屯、律失常、充血性屯、衰、巧死等严重屯、血管事件的发生率增 加6~10倍[5]。
[0004] 在细胞和分子水平上，屯、肌细胞肥大过程主要涵盖3个环节：胞外肥大信号刺激、 胞内信号通路转导及核内基因转录活化[6]。不同的肥大信号诱发特异的基因表达模式， 信号转导通路在运一过程中扮演重要角色[7]。目前，明确与屯、肌肥厚相关的信号通路主 要包括：巧调素依赖性蛋白激酶（CaMK)、巧调神经憐酸酶（calcineurin)、丝裂原活化蛋 白激酶（MAPK)、憐酸脂酷肌醇-3激酶（PI3K) /丝-苏氨酸蛋白激酶(Akt)和两面神激酶 (JAKV信号传导及转录激活因子（STAT)信号转导通路。其中MAPK由细胞外信号调节激酶 (E服s)，c-junN末端激酶9JNKS)和P38-MAPKS个亚家族组成巧]。PI3K活化后激活下游 重要祀点Akt，Akt可进一步作用于下游底物引起雷帕霉素祀体蛋白（mTOR)和糖原合成激 酶（GSK3P)的激活W及化xO的失活巧]。尽管目前对于屯、肌肥厚发生发展的病理生理机 制有了初步认识，但是其具体分子的调控网络仍未完全明确，临床防治手段仍然十分有限。
[0005]S结构域蛋白8(TRIM(Tripartitemotif) 8)属于环指蛋白家族的TRIM亚家 族成员，其编码基因定位于10号染色体长臂2区4带3亚带（10q24. 3) [10]。TRIMS蛋白 由551个氨基酸组成，在人体及小鼠各组织器官中广泛表达，其中屯、脏表达水平较高[11]。 TRIMS从N端到C端具有5个结构域，分别是RING结构域、B-boxl结构域、B-box2结构域、 卷曲螺旋结构域和具有细胞核定位功能的C末端[12]。研究发现，TRIMS可W通过调控 S0CS1、TAK1、PIAS3和P53等关键信号通路分子，参与包括固有免疫反应和肿瘤发生在内的 多种病理生理过程[11-15]，但目前仍没有TRIMS在屯、血管系统疾病中作用的相关研究报 道。
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【发明内容】
[0007] 为解决上述现有技术的缺陷和不足，本发明的目的在于确定TRIMS的表达和屯、肌 肥厚的相互关系，提供一种TRIMS作为药物祀标在筛选保护屯、脏功能和/或预防、缓解和/ 治疗屯、肌肥厚及其纤维化的药物中的应用，提供一个用于保护屯、脏功能和/或预防、缓解 和/或治疗屯、肌肥厚和纤维化的祀基因TRIMS的新用途。
[0008] 本发明的目的通过下述技术方案实现： 本发明通过试验确定了TRIMS表达与屯、肌肥厚之间的关系： 1、发生屯、肌肥厚时屯、肌细胞肥大标志物ANP、Myh7表达明显上调，TRIMS表达明显上调 本发明分别选用正常人和扩屯、患者屯、脏，正常假手术（化am)小鼠和通过主动脉弓缩窄 手术（AB)造成屯、肌肥厚的小鼠屯、脏，W及分别通过对照组（PBS)或血管紧张素2(AngII) 或苯肾上腺素（PE)刺激后的屯、肌细胞，分别检测了ANP、Myh7、TRIMS的蛋白表达情况。结 果表明，扩张型屯、肌病患者和发生屯、肌肥厚的小鼠屯、脏中的屯、肌细胞肥大标志物ANP、Myh7 的表达明显上调，TRIMS的表达明显上调，同样在经血管紧张素II(Angll)或苯肾上腺素 (PE)刺激后的屯、肌细胞中ANP、Myh7的表达也明显上调，TRIMS的表达明显上调（图1、图2、 图3)。
[0009] 2、TRIM8干扰（AdshTRIMS)及过表达（AdTRIMS)腺病毒对经AngII诱导的屯、肌 细胞肥大模型的影响 本发明发现在经血管紧张素II(AngII)诱导的体外屯、肌肥厚模型中，TRIMS过表达 屯、肌细胞出现明显肥大，TRIMS不表达屯、肌细胞的肥大明显被抑制（图4)。
[0010] 3、TRIMS基因敲除显著抑制了屯、肌肥厚、纤维化的程度，保护屯、功能；TRIMS基因 过表达显著促进了屯、肌肥厚及其纤维化的程度，恶化屯、功能 本发明选用野生型小鼠、TRIMS基因敲除小鼠及屯、脏特异性TRIMS转基因小鼠和非转 基因小鼠进行试验，并将每种小鼠分成假手术组和手术组，每组10只小鼠。手术组给予主 动脉弓缩窄手术，假手术组不予主动脉弓缩窄，