一种盐肤木再生植株的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明公开了一种盐肤木再生植株的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽等步骤，本发明方法所制备的盐肤木生长速度快，再生成活率高，本发明方法可以在短期内获得大量的盐肤木幼苗，为其细胞与遗传工程方面的研究奠定基础。
【专利说明】 一种盐肤木再生植株的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及盐肤木组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002]盐肤木，Rhus chinensis,别名，五倍子树、山梧桐等。为漆树科盐肤木属,落叶小乔木。盐肤木是中国主要经济树种，可供制药和作工业染料的原料。其皮部、种子还可榨油。在园林绿化中，可作为观叶、观果的树种。花开于8?9月，蜜、粉都很丰富，是良好的蜜源植物。盐肤木的分布广泛，除东北以外，其它地方均有种植。根、叶、花及果均可入药，有清热解毒、舒筋活络、散瘀止血、涩肠止泻之效。花入药为“盐麸木花”，治鼻疳、痈毒溃烂。果实入药为“盐麸子”，有生津润肺、降火化痰、敛汗、止痢的功用；治痰嗽、喉痹、黄胆、盗汗、痢疾、顽癣、痈毒、头风白屑。盐肤木的栽培，常用种子育苗移栽或压根繁植法，组培技术应用于盐肤木的快速繁殖国内外还尚无研究。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种盐肤木的快速繁殖方法，由该方法所制备的盐肤木生长速度快，再生成活率高，本发明方法可以在短期内获得大量的盐肤木幼苗，为其细胞与遗传工程方面的研究奠定基础。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取盐肤木叶片，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，250mg/L 二氧化氯与0.15%升萊混合，超净工作台上处理8min,无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的盐肤木叶片接入Nitsch+NAAl.0mg/L+6-BA2.0mg/L+2ipl.0mg/L 培养基中培养，附加蔗糖 30g/L,琼脂
6.5g/L，PH5.8，光照10001x，8h光/16h暗，温度25°C，诱导出来的盐肤木愈伤组织，放入分化培养基 Nitsch+2，4-D0.3-0.5mg/L +2ip0.3-0.5mg/L 中培养，附加蔗糖 40g/L,琼脂
6.5g/L，PH5.8，光照30001x，14h光/12h暗，温度25°C，分化出来的芽苗放入生根培养基MS+NAA0.02-0.03mg/L,附加蔗糖 20g/L,琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照 70001x, 14h 光 /1h 暗，温度25°C，将生根试管苗的玻璃瓶闭瓶从实验室内移到室外直射阳光下，照射6d，使其适应外部坏境后移栽入提前用高锰酸钾处理的基质中，基质为河沙:腐殖土 =1:1，保鲜膜覆盖保持湿度。
[0005]采用本发明制备的盐肤木成活率高，产量大，能耗少，生长周期短。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取盐肤木叶片，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，250mg/L 二氧化氯与0.15%升萊混合，超净工作台上处理8min,无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的盐肤木叶片接入Nitsch+NAAl.0mg/L+6-BA2.0mg/L+2ipl.0mg/L 培养基中培养，附加蔗糖 30g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照10001x，8h光/16h暗，温度25°C，诱导出来的盐肤木愈伤组织，放入分化培养基 Nitsch+2，4-D0.3mg/L+2ip0.3mg/L 中培养，附加蔗糖 40g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照30001x, 14h光/12h暗，温度25°C，分化出来的芽苗放入生根培养基MS+NAA0.02mg/L,附加蔗糖20g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照70001x, 14h光/1h暗，温度25°C，将生根试管苗的玻璃瓶闭瓶从实验室内移到室外直射阳光下，照射6d，使其适应外部坏境后移栽入提前用高锰酸钾处理的基质中，基质为河沙:腐殖土 =1:1，保鲜膜覆盖保持湿度，成活率85%。
[0008]实施例2
取盐肤木叶片，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，250mg/L 二氧化氯与0.15%升萊混合，超净工作台上处理8min,无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的盐肤木叶片接入Nitsch+NAAl.0mg/L+6-BA2.0mg/L+2ipl.0mg/L 培养基中培养，附加蔗糖 30g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照10001x，8h光/16h暗，温度25°C，诱导出来的盐肤木愈伤组织，放入分化培养基 Nitsch+2，4-D0.4mg/L+2ip0.4mg/L 中培养，附加蔗糖 40g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照30001x, 14h光/12h暗，温度25°C，分化出来的芽苗放入生根培养基MS+NAA0.03mg/L,附加蔗糖20g/L,琼脂6.5g/L，PH5.8，光照70001x, 14h光/1h暗，温度25°C，将生根试管苗的玻璃瓶闭瓶从实验室内移到室外直射阳光下，照射6d，使其适应外部坏境后移栽入提前用高锰酸钾处理的基质中，基质为河沙:腐殖土 =1:1，保鲜膜覆盖保持湿度，成活率89%。
[0009]实施例3
取盐肤木叶片，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，250mg/L 二氧化氯与0.15%升萊混合，超净工作台上处理8min,无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的盐肤木叶片接入Nitsch+NAAl.0mg/L+6-BA2.0mg/L+2ipl.0mg/L 培养基中培养，附加蔗糖 30g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照10001x，8h光/16h暗，温度25°C，诱导出来的盐肤木愈伤组织，放入分化培养基 Nitsch+2，4-D0.5mg/L+2ip0.5mg/L 中培养，附加蔗糖 40g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照30001x, 14h光/12h暗，温度25°C，分化出来的芽苗放入生根培养基MS+NAA0.03mg/L,附加蔗糖20g/L，琼脂6.5g/L, PH5.8，光照70001x, 14h光/1h暗，温度25°C，将生根试管苗的玻璃瓶闭瓶从实验室内移到室外直射阳光下，照射6d，使其适应外部坏境后移栽入提前用高锰酸钾处理的基质中，基质为河沙:腐殖土 =1:1，保鲜膜覆盖保持湿度，成活率90%。
【权利要求】
1.一种盐肤木再生植株的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取盐肤木的叶片，对其进行灭菌处理； (2)将步骤(I)灭菌处理过的盐肤木叶片接入Nitsch+NAAl.0mg/L+6-BA2.0mg/L+2ipl.0mg/L培养基中培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照lOOOlx，8h光/16h暗，温度25 0C ； (3)取步骤(2)诱导出来的盐肤木愈伤组织，放入分化培养基Nitsch+2，4-D0.3-0.5mg/L+2ip0.3-0.5mg/L 中培养，附加蔗糖 40g/L,琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照30001x, 14h 光 /12h 暗，温度 250C ； (4)取步骤(3)分化出来的芽苗放入生根培养基MS+NAA0.02-0.03mg/L,附加蔗糖20g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照 70001x，14h 光 /1h 暗，温度 25°C ； (5)取步骤(4)生根后的盐肤木试管苗移栽到大田进行炼苗培养。
2.按照权利要求1所述的一种盐肤木再生植株的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(O中所述盐肤木叶片的灭菌处理为，取盐肤木叶片，在漂白粉中浸泡3min，清洗表面，250mg/L 二氧化氯与0.15%升萊混合,超净工作台上处理8min,无菌水冲洗5遍。
3.按照权利要求1所述的一种盐肤木再生植株的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(5)中盐肤木的炼苗培养方法为将生根试管苗的玻璃瓶闭瓶从实验室内移到室外直射阳光下，照射6d，使其适应外部坏境后移栽入提前用高锰酸钾处理的基质中，基质为河沙:腐殖土 =1:1，保鲜膜覆盖保持湿度。
【文档编号】A01H4/00GK104255466SQ201410463089
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年9月12日 优先权日:2014年9月12日
【发明者】杨存 申请人:南京通泽农业科技有限公司