抗稻瘟病基因鉴定方法及抗稻瘟病早粳稻种质创新的制作方法
【专利说明】
[0001]技术领域:
本发明涉及抗稻瘟病早粳稻种质创新，及种质创新过程中使用的抗稻瘟病基因鉴定方法。
[0002]【背景技术】:
水稻是世界上重要的粮食作物，稻米是世界上一半以上人口的主食。稻瘟病是世界范围内水稻生产的主要病害之一，发生稻瘟病的水稻田稻谷产量降低、稻米品质下降。利用抗稻瘟病基因培育抗病水稻品种，是防治稻瘟病危害的最经济有效措施。绝大部分抗稻瘟病基因存在于籼稻及南方水稻种质资源中。黑龙江省水稻为早粳稻生态型，创制抗稻瘟病早粳稻种质资源，有利于培育黑龙江省抗病水稻品种。鉴定抗稻瘟病基因是创制水稻抗病种质的前提。通常的水稻抗稻瘟病基因鉴定有2条途径，一条是人工接种稻瘟病菌或田间自然感病，根据水稻抗感病表型鉴定抗病基因；另外一条是利用分子标记鉴定选择抗病基因。通过表型选择基因型，如果环境中不含有稻瘟病菌或环境不利于稻瘟病菌侵染、扩展，表型抗病水稻材料有可能不含有抗病基因。通过与抗病基因连锁的分子标记间接选择抗稻瘟病病基因，即利用分子标记辅助选择(MAS)技术鉴定的抗稻瘟病基因，也存在“假阳性”的问题。将MAS技术和接种鉴定结合起来选择的抗稻瘟病水稻，不含抗病基因的概率大幅度下降。我们利用MAS技术与接种鉴定相结合，创制了抗稻瘟病早粳稻种质资源空育131( Ρ??),空育131 {Pi2)和空育131 {Pi9)等。
[0003]
【发明内容】
:
本发明的目的是提供一种抗稻瘟病基因鉴定方法，即利用MAS和接种鉴定相结合选择水稻抗稻瘟病基因的方法，以及利用该方法创制的抗稻瘟病早粳稻种质空育131 (Λ7)、空育 131 {Pi2)和空育 131 {Pi9)等。
[0004]上述的目的通过以下的技术方案实现:
一种抗稻瘟病早粳稻种质创新培育方法，利用分子标记辅助选择(MAS)与接种鉴定相结合选择抗稻瘟病基因，回交转育创制抗稻瘟病早粳稻种质，具体过程如下:(1)杂交:早粳稻与抗病基因供体杂交；(2)回交及选择:早粳稻做轮回亲本进行多次回交，各回交世代利用MAS与接种鉴定相结合选择抗病基因；(3)自交及选择:在遗传背景完全恢复到早粳稻的世代，MAS与接种鉴定相结合选择抗病基因纯合体并令其自交获得抗稻瘟病早粳稻。
[0005]所述的抗稻瘟病早粳稻种质创新培育方法，利用MAS与接种鉴定相结合选择抗稻瘟病基因，回交转育创制了抗稻瘟病早粳稻种质空育131 (Λ7)、空育131 (/V1和空育131iPid)等。以早粳稻空育131 (Pi2)的创制为例，过程如下:(1)所述的杂交:即空育131与Pi2基因供体亲本籼稻BL6进行有性杂交，获得F:杂种；(2)所述的回交及选择:即空育131做轮回亲本进行多次回交，各回交世代MAS选择Pi2基因阳性株，针刺法将稻瘟病菌单孢菌株#tHD7 (Mo-HD7系从水稻空育131生产田稻瘟病病样中分离的单孢菌株，其可以诱发空育131产生稻瘟病，籼稻BL6对Mo-HD7表现抗病)接种于入选的Pi2阳性株并选择抗病植株；(3)所述的自交及选择:即在遗传背景完全恢复到空育131的世代，MAS与接种鉴定相结合选择Pi2基因纯合体并令其自交即为空育131 (Pi2)o
[0006]本发明的有益效果:
1.本发明将MAS技术和接种鉴定结合起来选择的抗稻瘟病水稻，使不含拟选抗病基因的概率大幅度下降。
[0007]本发明利用MAS与接种鉴定相结合选择抗稻瘟病基因，回交转育创制了抗稻瘟病早粳稻种质空育131 (Λ7)、空育131 (/V1和空育131 (Z5/奶等，为黑龙江省水稻抗稻瘟病育种准备了物质基础。
[0008]本发明建立了抗稻瘟病基因Pil、Pi2和Pi9的MAS鉴定选择体系和人工接种鉴定体系。
[0009]【附图说明】:
附图1是本发明的水稻空育131 (Pi2)创制过程示意图。
[0010]【具体实施方式】:
实施例1:
一种抗稻瘟病基因鉴定方法及抗稻瘟病早粳稻种质创新，利用分子标记辅助选择(MAS)与接种鉴定相结合选择抗稻瘟病基因，回交转育创制抗稻瘟病早粳稻种质，具体过程如下:(1)杂交:早粳稻与抗病基因供体杂交；(2)回交及选择:早粳稻做轮回亲本进行多次回交，各回交世代利用MAS与接种鉴定相结合选择抗病基因；(3)自交及选择:在遗传背景完全恢复到早粳稻的世代，MAS与接种鉴定相结合选择抗病基因纯合体并令其自交获得抗稻痕病早粳稻。
[0011]实施例2:
根据权利要求1所述的抗稻瘟病基因鉴定方法及抗稻瘟病早粳稻种质创新，利用MAS与接种鉴定相结合选择抗稻瘟病基因，回交转育创制了抗稻瘟病早粳稻种质资源空育131(Λ7)、空育131 (/V1和空育131 QPi9)等。以早粳稻空育131 (Pi2)创制为例，过程如下:(1)所述的杂交:即空育131与Pi2基因供体亲本籼稻BL6进行有性杂交，获得F ι杂种；
(2)所述的回交及选择:即空育131做轮回亲本进行多次回交，各回交世代MAS选择Pi2基因阳性株，针刺法将稻瘟病菌单孢菌株#tHD7 (Mo-HD7系从水稻空育131生产田稻瘟病病样中分离的单孢菌株，其可以诱发空育131产生稻瘟病，籼稻BL6对Mo-HD7表现抗病)接种于入选的Pi2阳性株并选择抗病植株；(3)所述的自交及选择:即在遗传背景完全恢复到空育131的世代，MAS与接种鉴定相结合选择Pi2基因纯合体并令其自交即为空育131(Pi2)。
【主权项】
1.一种抗稻瘟病早粳稻种质创新培育方法，其特征是:利用分子标记辅助选择(MAS)与接种鉴定相结合选择抗稻瘟病基因，回交转育创制抗稻瘟病早粳稻种质，具体过程如下:(1)杂交:早粳稻与抗病基因供体杂交；(2)回交及选择:早粳稻做轮回亲本进行多次回交，各回交世代利用MAS与接种鉴定相结合选择抗病基因；(3)自交及选择:在遗传背景完全恢复到早粳稻的世代，MAS与接种鉴定相结合选择抗病基因纯合体并令其自交获得抗稻瘟病早粳稻。2.根据权利要求1所述的抗稻瘟病早粳稻种质创新培育方法，其特征是:利用MAS与接种鉴定相结合选择抗稻瘟病基因，回交转育创制了抗稻瘟病早粳稻种质空育131 iPil),空育131 {Pi2)和空育131 {Pi9)等。3.以早粳稻空育131(Pi2)的创制为例，过程如下:(1)所述的杂交:即空育131与Pi2基因供体亲本籼稻BL6进行有性杂交，获得匕杂种；(2)所述的回交及选择:即空育131做轮回亲本进行多次回交，各回交世代MAS选择Pi 2基因阳性株，针刺法将稻瘟病菌单孢菌株#^HD7 (Mo-HD7系从水稻空育131生产田稻瘟病病样中分离的单孢菌株，其可以诱发空育131产生稻瘟病，籼稻BL6对Mo-HD7表现抗病)接种于入选的Pi2阳性株并选择抗病植株；(3)所述的自交及选择:即在遗传背景完全恢复到空育131的世代，MAS与接种鉴定相结合选择Pi2基因纯合体并令其自交即为空育131 (Pi2)o
【专利摘要】<b>一种抗稻瘟病基因鉴定方法及抗稻瘟病早粳稻种质创新。准确鉴定选择抗稻瘟病基因，有利于抗稻瘟病种质创新及品种培育。一种抗稻瘟病基因鉴定方法及抗稻瘟病早粳稻种质创新，利用分子标记辅助选择（</b><b>MAS</b><b>）与接种鉴定相结合选择抗稻瘟病基因，回交转育创制抗稻瘟病早粳稻种质，具体过程如下：（</b><b>1</b><b>）杂交：早粳稻与抗病基因供体杂交；（</b><b>2</b><b>）回交及选择：早粳稻做轮回亲本进行多次回交，各回交世代利用</b><b>MAS</b><b>与接种鉴定相结合选择抗病基因；（</b><b>3</b><b>）自交及选择：在遗传背景完全恢复到早粳稻的世代，</b><b>MAS</b><b>与接种鉴定相结合选择抗病基因纯合体并令其自交获得抗稻瘟病早粳稻。本发明应用于抗稻瘟病基因鉴定及抗稻瘟病早粳稻种质创新。</b>
【IPC分类】C12Q1/68, A01H1/04, A01H1/02
【公开号】CN105248274
【申请号】CN201510748192
【发明人】李荣田, 刘长华, 张游, 陈全珍
【申请人】黑龙江大学
【公开日】2016年1月20日
【申请日】2015年11月6日