专利名称：利用提取甾体皂甙元的残渣生产单细胞蛋白的方法
技术领域：
本发明涉及一种蛋白质生产方法，尤其是一种利用提取甾体皂甙元的残渣生产单细胞蛋白的方法。
本发明的内容本发明的目的在于克服现有技术不足，提供一种利用提取甾体皂甙元的残渣生产单细胞蛋白的方法，本发明目的通过下述技术方案来实现①选择下列酵母菌群作菌种假囊酵母Eremotnecium 丝孢酵母Trichosporon.spp假丝酵母Candida utilis 油脂酵母Lipomyces.spp汉逊酵母Hansenula.spp扣囊拟内孢酵母Endomycopsis酒精酵母Alcoholyeast
②菌种生产，将上述各菌种分别经琼脂斜面培养基、试管、三角瓶、麦芽汁培养基扩大培养后再经母罐培养、繁殖罐培养、车间扩大培养获取生产菌种，母罐、繁殖罐和车间扩大培养均用改进的麦芽汁培养基；即麦芽汁培养基中加入10-50％重量份的残渣，其中母罐培养基中加入10-20％重量份的残渣，繁殖罐培养基中加入30-40％重量份的残渣，车间生产菌种培养基中加入50％重量份的残渣。菌种生产按常规酵母菌生产工艺进行，各阶段培养时间在18-36小时，温度在25-32℃条件下进行。菌种含量一般在20-30亿/ml个，将上述各生产菌种混合备用。各菌种混合用量为假囊酵母∶丝孢酵母∶假丝孢酵母∶油脂酵母∶汉逊酵母∶扣囊拟内孢酵母∶酒清酵母＝1∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2重量比，③单细胞蛋白生产，甾体皂甙生产的残渣经高压灭菌后，加入复合菌种，搅拌混合后加入冷开水，并用10％盐酸液调PH至5-5.5，残渣∶菌种∶冷开水＝100∶4-6∶60-80重量比，置入具有控湿控温的发酵塔内作固体发酵，温度为28-32℃，时间为5-7天。当活细胞数达到20-30亿个/克时即可出料，熟化、膨化干燥后即为单细胞蛋白，可作饲喂动物的饲料，考虑到运输、储藏和使用方便，可将上述单细胞蛋白再行粉碎后通过成型机造颗。
本发明选取了在甾体皂甙元残渣中菌体生长速度快、繁殖能力强，产率高，合成蛋白质能力强，蛋白质含量高，杂食性强，能充分利用残渣中营养物并具有适应PH较低培养基的酵母菌种。
本发明不但利用了甾体皂甙元生产的残渣，减少的废渣对环境污染，变废为宝，而且通过残渣生产出的单细胞蛋白质量高。经检测本发明生产的单细胞蛋白营养成份如表1及各种氨基酸，维生素含量见表2。
表1 复合酵母菌生产单细胞蛋白营养成份表
表2 复合酵母生产单细胞蛋白的氨基酸、维生素含量表
具体实施例方式
1、选取培育菌种行扩大培养，选取假囊酵母、丝孢酵母、假丝酵母、油脂酵母、汉逊酵母、扣囊拟内孢酵母、酒精酵母作菌种种源，各菌种分别先在普通琼脂斜面培养基上30℃培育24小时后，依次接种到试管和三角瓶麦芽汁培养基中扩大培养，扩大培养后的菌种通过小母罐、大母罐和繁殖罐再扩大培养、最后通过车间扩大培养即为生产用菌种，小母罐、大母罐、繁殖罐及车间扩大培养，均用改进的麦芽汁培养基，小母罐麦芽汁培养基中加入10％重量份残渣，大母罐麦芽汁中加入20％重量份残渣，繁殖罐加麦芽汁培养基中加入30-40％重量份残渣，车间生产的培养基中加入麦芽汁50％重量份残渣，每种培养均在30℃培养18-36小时，本实施例选用母罐培养18小时，繁殖罐培养24小时车间扩大培养36小时。
2、将各种培养好的生产菌种按1∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2重量比，混合作复合菌种备用，本实施例选用重量比为1∶0.9∶1.2∶1.2∶1.1∶0.9∶1.2。
3、将提取甾体皂甙元白的下脚料经灭菌处理后，加入复合菌种和凉开水，无菌水更好，并用提取甾体皂甙所产生的废酸液调PH于5(用10％盐酸也可)，下脚料∶复合菌种∶水＝100∶5∶70重量比混合均匀后置于有控湿控温的发酵塔中作固体发酵，发酵湿度控制在85-90％，发酵温度控制在30℃，发酵时间为6天。一般测定活菌总数达20-30亿个/克时即可出料，再经100℃蒸1小时熟化，再置入膨化机膨化干燥即为单细胞蛋白，考虑到运输和使用方便，本实施例将干燥好的单细胞蛋白进行粉碎并制粒。
实施例21、选取培育菌种行扩大培养，选取假囊酵母、丝孢酵母、假丝酵母、油脂酵母、汉逊酵母、扣囊拟内孢酵母、酒精酵母作菌种种源，各菌种分别先在普通琼脂斜面培养基上32℃培育24小时后，依次接种到试管和三角瓶麦芽汁培养基中扩大培养，扩大培养后的菌种通过小母罐、小母罐、大母罐、繁殖罐及车间扩大培养，均用改进的麦芽汁培养基，小母罐麦芽汁培养基中加入10％重量份残渣，大母罐麦芽汁中加入20％重量份残渣，繁殖罐加麦芽汁培养基中加入30-40％重量份残渣，车间生产的培养基中加入麦芽汁50％重量份残渣，大母罐和繁殖罐扩大培养、最后通过车间扩大培养即为生产用菌种，每种培养均在32℃培养18-36小时，本实施例选用母罐培养20小时，繁殖罐培养36小时车间扩大培养24小时。
2、将各种培养好的生产菌种按1∶1.2∶0.9∶0.9∶0.9∶1.1∶1.2重量比混合作复合菌种备用。
3、将提取甾体皂甙元白的下脚料经灭菌处理后，加入复合菌种和凉开水，并用提取甾体皂甙所产生的废酸液调PH于5.5(用10％盐酸也可)，下脚料∶复合菌种∶水＝100∶6∶80重量比，混合均匀后置于有控湿控温的发酵塔中作固体发酵，发酵湿度控制在85-90％，发酵温度控制在30℃，发酵时间为6天。一般测定活菌总数达20-30亿个/克时即可出料，再经100℃蒸1小时熟化，再置入膨化机膨化干燥即为单细胞蛋白。
实施例31、选取培育菌种行扩大培养，选取假囊酵母、丝孢酵母、假丝酵母、油脂酵母、汉逊酵母、扣囊拟内孢酵母、酒精酵母作菌种种源，各菌种先在普通琼脂斜面培养基上25℃培育24小时后，依次接种到试管和三角瓶麦芽汁培养基中扩大培养，扩大培养后的菌种通过小母罐、大母罐和繁殖罐培养、最后通过车间扩大培养即为生产用菌种，小母罐、大母罐、繁殖罐及车间扩大培养，均用改进的麦芽汁培养基，小母罐麦芽汁培养基中加入10％重量份残渣，大母罐麦芽汁中加入20％重量份残渣，繁殖罐加麦芽汁培养基中加入30-40％重量份残渣，车间生产的培养基中加入麦芽汁50％重量份残渣，每种培养均在25℃培养18-36小时，本实施例选用母罐培养18小时，繁殖罐培养24小时车间扩大培养36小时。
2、将各种培养好的生产菌种按1∶1.1∶1.1∶1.2∶1.1∶1.2∶0.9重量比混合作复合菌种备用。
3、将提取甾体皂甙元白的下脚料经灭菌处理后，加入复合菌种和凉开水，并用提取甾体皂甙所产生的废酸液调PH于5.3(用10％盐酸也可)，下脚料∶复合菌种∶水＝100∶4∶60重量比，混合均匀后置于有控湿控温的发酵塔中作固体发酵，发酵湿度控制在85-90％，发酵温度控制在30℃，发酵时间为6天。一般测定活菌总数达20-30亿个/克时即可出料，再经100℃蒸1小时熟化，再置入膨化机膨化干燥即为单细胞蛋白。考虑到运输和使用方便，本实施例将干燥好的单细胞蛋白进行粉碎并制粒。
实施例41、选取培育菌种行扩大培养，选取假囊酵母、丝孢酵母、假丝酵母、油脂酵母、汉逊酵母、扣囊拟内孢酵母、酒精酵母作菌种种源，各菌种分别先在普通琼脂斜面培养基上29℃培育24小时后，依次接种到试管和三角瓶麦芽汁培养基中扩大培养，扩大培养后的菌种通过小母罐、大母罐和繁殖罐培养、最后通过车间扩大培养即为生产用菌种，小母罐、大母罐、繁殖罐及车间扩大培养，均用改进的麦芽汁培养基，小母罐麦芽汁培养基中加入10％重量份残渣，大母罐麦芽汁中加入20％重量份残渣，繁殖罐加麦芽汁培养基中加入30-40％重量份残渣，车间生产的培养基中加入麦芽汁50％重量份残渣，每种培养均在28℃培养18-36小时，本实施例选用母罐培养18小时，繁殖罐培养24小时车间扩大培养36小时。
2、将各种培养好的生产菌种按1∶1∶1∶1∶1∶1∶1重量比混合作复合菌种备用。
3、将提取甾体皂甙元白的下脚料经灭菌处理后，加入复合菌种和凉开水，并用提取甾体皂甙所产生的废酸液调PH于5.4(用10％盐酸也可)，下脚料∶复合菌种∶水＝100∶5∶70重量比，混合均匀后置于有控湿控温的发酵塔中作固体发酵，发酵湿度控制在85-90％，发酵温度控制在30℃，发酵时间为6天。一般测定活菌总数达20-30亿个/克时，即可出料，再经100℃蒸1小时熟化，再置入膨化机膨化干燥即为单细胞蛋白。
权利要求
1.一种利用提取甾体皂甙元的残渣生产单细胞蛋白的方法，包括菌种选择、菌种生产和单细胞蛋白生产，其特征在于①选择下列酵母菌群作菌种假囊酵母Eremotnecium 丝孢酵母Trichosporon.spp假丝酵母Candida utilis 油脂酵母Lipomyces.spp汉逊酵母Hansenula.spp扣囊拟内孢酵母Endomycopsis酒精酵母Alcoholyeast②菌种生产，将上述各菌种分别经琼脂斜面培养基、试管、三角瓶、麦芽汁培养基扩大培养后再经母罐培养、繁殖罐培养、车间扩大培养获取生产菌种，母罐、繁殖罐和车间扩大培养均用改进的麦芽汁培养基，各阶段培养时间在18-36小时，温度在25-32℃条件下进行，将上述各生产菌种混合备用，各菌种混合用量为假囊酵母∶丝孢酵母∶假丝孢酵母∶油脂酵母∶汉逊酵母∶扣囊拟内孢酵母∶酒清酵母＝1∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2重量比；③单细胞蛋白生产，甾体皂甙生产的残渣经高压灭菌后，加入复合菌种，搅拌混合后加入冷开水，并用10％盐酸液调PH至5-5.5，残渣∶菌种∶冷开水＝100∶4-6∶60-80重量比，置入具有控湿控温的发酵塔内作固体发酵，温度为28-32℃，时间为5-7天出料，熟化、膨化干燥后即为单细胞蛋白。
2.根据权利要求1所说的利用提取甾体皂甙元的残渣生产单细胞蛋白的方法，其特征在于所述的改进麦芽汁培养基为麦芽汁培养基中加入10-50％重量份甾体皂甙元提取后的残渣。
全文摘要
本发明公开了一种利用提取甾体皂甙元的残渣生产单细胞蛋白的方法，包括菌种选择、菌种生产和单细胞蛋白生产，其特征在于选择下列酵母菌群作菌种假囊酵母、丝孢酵母、假丝酵母、油脂酵母、汉逊酵母、扣囊拟内孢酵母、酒精酵母，经琼脂斜面培养基、试管、三角瓶、麦芽汁培养基扩大培养后再经母罐培养、繁殖罐培养、车间扩大培养获取生产菌种，各菌种混合后加入到经高压灭菌后的残渣作固体发酵，温度为28－32℃，时间为5－7天出料，熟化、膨化干燥后即为单细胞蛋白，本发明不但利用了甾体皂甙元生产的残渣，减少的废渣对环境污染，变废为宝，而且通过残渣生产出的单细胞蛋白质量高。
文档编号C12P21/02GK1434125SQ03117318
公开日2003年8月6日 申请日期2003年2月18日 优先权日2003年2月18日
发明者覃世元 申请人:覃世元