本申请要求2015年7月提交的美国临时专利申请No.62/190,286和2015年10月提交的美国临时专利申请No.62/244,784的优先权。
技术领域
本发明涉及包含胶原蛋白肽的配制物。更具体而言，本发明涉及用于制备包含胶原蛋白肽的浓咖啡型饮料的、包含胶原蛋白肽的配制物。
背景技术：
胶原蛋白是在动物肌体的各种结缔组织的细胞外空间中发现的结构蛋白质。包含水解的胶原蛋白肽的配制物(例如粉末形式)是胶原蛋白的可生物利用形式。通常，制备水解的胶原蛋白肽粉末的工艺涉及富含胶原蛋白的动物的骨骼、皮肤和结缔组织的切割，然后使用酸、酶水解、高压喷雾、干燥、共混和筛分进行处理。2种类似的水解的胶原蛋白肽粉末是可利用的：包含较大尺寸颗粒的球簇状(glomerate)粉末，和包含较精细颗粒的喷雾干燥的粉末。市售可得的水解的胶原蛋白肽粉末可以包含不同分子量的胶原蛋白肽，例如2000,3000或5000Da。
临床试验已经显示口服给予水解的胶原蛋白肽可以有效地改善皮肤水份、弹性、质地和透明度；减少皱纹、皮肤粗糙和紫外线(UV)斑点；增加头发厚度；以及减少骨关节炎并改善骨密度。
口服给予的包含水解的胶原蛋白肽的补充剂是市售可得的药丸或粉末形式。水解的胶原蛋白肽药丸被服用者直接消化。水解的胶原蛋白肽粉末与一份饮料(beverage serving)混合，例如茶、咖啡、牛奶、果汁等，并且被服用者与饮料一起消化。消耗水解的胶原蛋白肽粉末的另一种方式是将粉末与食物组分混合，例如巧克力块、蛋糕等，并且将胶原蛋白肽与食物一起消化。
Inoue等人(2016)实施了2种类型胶原蛋白水解产物的消化的随机双盲安慰剂对照临床试验。在研究过程中，参与者在8周内每日晚饭后口服消化一次粉末形式(在热牛奶、咖啡或任何其他的饮料)的5gr胶原蛋白水解产物样品，或者安慰剂。市售可得的Wellnex品牌的胶原蛋白水解产物衍生自鱼胶，并且由Nitta Gelatin Inc.(Osaka,Japan)制造。在研究期间，与参与者消化安慰剂粉末相比，参与者消化胶原蛋白粉末显示皮肤状况有所改善，例如皮肤水份、弹性、皱纹和粗糙情况(Inoue,N.,Sugihara,F.and Wang,X,Ingestion of bioactive collagen hydrolysates enhance facial skinmoisture and elasticity and reduce facial ageing signs in a randomized double-blind placebo-controlled clinical study,Journal of the Science of Food and Agriculture,doi:10.1002/jsfa.7606,published 8January 2016)。这些结果证明每日消化5gr剂量的水解的胶原蛋白肽粉末在皮肤状况方面是有效的。
在另一个双盲安慰剂对照试验(由Proksch等人(2013)实施)中，参与者在8周时间内口服消化胶原蛋白水解产物或安慰剂。胶原蛋白水解产物由不同的特定的胶原蛋白肽组成，所述的胶原蛋白肽衍生自猪I型胶原蛋白的特定的水解。所述的产物由GELITA AG(Eberbach,Germany)制造，以商品名出售。胶原蛋白水解产物中的胶原蛋白肽的平均分子量为2000Da。每日剂量2.5或5.0gr胶原蛋白水解产物或2.5gr安慰剂(粉末形式)是通过将粉末溶解于水中或任何其他的冷的液体中消化的。在试验期间，2个胶原蛋白水解产物剂量组的皮肤弹性均显示比安慰剂组有所改善，并且在4周随后的处理后，在年龄更大的女性中测定统计学意义更高的皮肤弹性水平(Proksch,E.,Segger,D.,Degwert,J.,Schunck,M.,Zangue,V and Oesser,S.,Oral supplementation of specific collagen peptides has beneficial effects on human skin physiology:A double-blind,placebo-controlled study,Skin Pharmacology and Physiology,27,47-55.Published 14August 2013)。这些结果表明每日剂量2.5gr的水解的胶原蛋白肽粉末(其包含分子量为2000Da的胶原蛋白肽)在皮肤状况方面(特别是皮肤弹性)仍是有效的。
其他试验证明，通常较低分子量的水解的胶原蛋白肽使得水解的胶原蛋白肽的每日有效剂量较低，而较高分子量的水解的胶原蛋白肽使得水解的胶原蛋白肽的每日剂量较高，其中所述的水解的胶原蛋白肽必须被消化，从而影响皮肤状况和胶原蛋白肽的其他靶物。例如最低每日消化5gr水解的胶原蛋白肽粉末(包含分子量5000Da的水解的胶原蛋白肽)是有效的，而最低每日消化仅3gr水解的胶原蛋白肽粉末(包含分子量3000Da的水解的胶原蛋白肽)是有效的。
基于这些研究，水解的胶原蛋白肽粉末的供应商建议每日消化至少基本3gr水解的胶原蛋白肽粉末(包含分子量3000Da的肽，更具体而言基本3-10gr每日)，以便影响皮肤并改善关节健康。此外，根据Proksch等人(2013)所得的结果，每日剂量2.5gr胶原蛋白肽(具有分子量2000Da)足以改善皮肤状况。这种大量的水解的胶原蛋白肽粉末(其必须以每日为基础进行消化)可以阻碍潜在的消费者消化水解的胶原蛋白肽粉末。可以不利地影响水解的胶原蛋白肽粉末的消化水平的另一个因素是水解的胶原蛋白肽粉末(其是一些消费者的味觉所不喜欢的)的质地和味道。
因此，以每日为基础向使用者提供每日有效剂量的胶原蛋白肽、同时消除消化大量水解的胶原蛋白肽粉末(不有令人不快的质地和味道)的不适的障碍仍有待克服。
因此，需要水解的胶原蛋白肽粉末的配制物，该配制物可以以每日为基础消化大量的水解的胶原蛋白肽粉末，而且一方面不会引起消费者产生填充的(filling)负担，另一方面克服了令人不快的质地的障碍。
发明概述
除非另外定义，否者本发明使用的所有技术和科学术语都具有本发明所属技术领域中任一普通技术人员通常理解的相同的含义。尽管与本发明所述的那些相似的或等价的方法和材料都可以用于实践或测试本发明，但是合适的方法和材料如下文所述。在矛盾的情况下，以专利说明书(包括定义)为准。此外，材料、方法和实例仅是说明性的，无意于进行限定。
根据本发明的一个方面，提供了用于制备包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料的咖啡盒，该咖啡盒包含用于制备咖啡型饮料的物质的部分，和胶原蛋白粉末的部分。
根据本发明的另一个方面，提供了用于制备咖啡盒的方法，其中所述的咖啡盒用于制备包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料，所述的方法包括将咖啡盒插入用于制备咖啡型饮料的物质的部分和胶原蛋白粉末的部分中。
根据一个实施方案，用于制备咖啡型饮料的物质的部分与胶原蛋白粉末的部分混合。
根据另一个实施方案，用于制备咖啡型饮料的物质的部分与胶原蛋白粉末的部分分离在多个层中。
根据另一个实施方案，至少一层包含用于制备咖啡型饮料的物质的部分，并且至少一层包含胶原蛋白粉末的部分。
根据另一个实施方案，至少一层包含用于制备咖啡型饮料的物质的部分、和胶原蛋白粉末的部分的混合物，并且至少一层包含用于制备咖啡型饮料的物质的部分。
根据另一个实施方案，至少一层包含用于制备咖啡型饮料的物质的部分、和胶原蛋白粉末的部分的混合物，并且至少一层包含胶原蛋白粉末的部分。
根据另一个实施方案，至少一层包含用于制备咖啡型饮料的物质的部分、和胶原蛋白粉末的部分的混合物，至少一层包含用于制备咖啡型饮料的物质的部分，并且至少一层包含胶原蛋白粉末的部分。
根据另一个实施方案，包含用于制备咖啡型饮料的物质的部分的层与咖啡盒的出口侧相邻设置，包含胶原蛋白粉末的部分的层与咖啡盒的入口侧相邻设置。
根据另一个实施方案，包含胶原蛋白粉末的部分的层与咖啡盒的出口侧相邻设置，并且包含用于制备咖啡盒的物质的部分的层与咖啡盒的入口侧相邻设置。
根据一个实施方案，咖啡盒中的胶原蛋白粉末的量为至少基本0.2gr。
根据另一个实施方案，咖啡盒中的胶原蛋白粉末的量为至少基本1.5gr。
根据一个实施方案，咖啡盒中的胶原蛋白粉末的量为咖啡盒中物质总量的基本3-100％范围。
根据另一个实施方案，咖啡盒中的胶原蛋白粉末的量为咖啡盒中物质总量的基本3-83％范围。
根据另一个实施方案，咖啡盒中的胶原蛋白粉末的量为咖啡盒中物质总量的基本3-50％范围。
根据另一个实施方案，咖啡盒中的胶原蛋白粉末的量为咖啡盒中物质总量的基本3-42％范围。
根据另一个实施方案，咖啡盒中的胶原蛋白粉末的量为咖啡盒中物质总量的基本12-33％范围。
根据另一个实施方案，咖啡盒中的胶原蛋白粉末的量为咖啡盒中物质总量的基本16-33％范围。
根据另一个实施方案，咖啡盒中的胶原蛋白粉末的量为咖啡盒中粉末总量的基本25％范围。
根据另一个实施方案，咖啡盒进一步包含至少一种添加剂。
根据另一个实施方案，至少一种添加剂选自营养补充剂、风味增强剂、健康增强剂和它们的任意的组合。
根据另一个实施方案，至少一种添加剂选自柠檬莱姆,香葡萄果仁,桂皮香料,咖啡浆果,咖啡浆果提取物,透明质酸,甘草精(甘草提取物),甘草精的衍生产物和它们的任意的组合。
参考实施方案的描述
在详细说明至少一个实施方案之前，应该理解的是本发明在其应用中不限于以下说明书中列出的成分的构建和排列的细节。本发明能够实施其他的实施方案，或者以不同的方式实施或进行。此外，应该理解的是本发明使用的短语和术语是为了说明的目的，不应该认为是进行限定。
如本发明所公开，术语“用于制备咖啡型饮料的物质”是指本领域已知的任何物质，其适用于制备咖啡型饮料，如下文所公开。用于制备咖啡型饮料的物质可以为粉末形式。用于制备根据本发明的咖啡型饮料的粉末的实例包括但不限于研磨咖啡豆粉末、研磨可可豆粉末等。此外，用于制备咖啡型饮料的物质可以为颗粒形式，例如但不限于完整的或切碎的叶子，例如茶叶、薄荷叶等。
如本发明所公开，根据一个实施方案，术语“咖啡型饮料”是指通过将接近沸腾的水加入通过用于制备咖啡型饮料的物质而酿造的饮料，并且根据另一个实施方案，术语“咖啡型饮料”是指通过将少量接近沸腾的水在压力下强制通过用于制备咖啡型饮料的物质而酿造的饮料。术语“咖啡型饮料”进一步是指通过本领域已知的任何方法和装置制成的咖啡型饮料，所述的方法和装置包括但不限于过滤式咖啡机,浓缩咖啡机,重型意大利浓缩咖啡机,还能研磨咖啡豆的浓缩咖啡机,家用或家庭型浓缩咖啡机,浓缩咖啡机(使用包含用于制备咖啡型饮料的物质的盒),浓缩咖啡机(使用包含用于制备咖啡型饮料的物质的咖啡硬饼),浓缩咖啡机(使用包含用于制备咖啡型饮料的物质的咖啡垫)等。术语“咖啡型饮料”进一步是指基于上述咖啡型饮料制成的任何类型的饮料，例如但不限于拿铁咖啡,卡布奇诺咖啡,焦糖玛奇朵,摩卡咖啡,小白咖啡,美式咖啡等。
如本发明所公开，术语“盒”或“咖啡盒”是指本领域已知的任何容器，其可以包含用于制备咖啡型饮料的物质，该物质适用于通过本领域已知的用于制备咖啡型饮料的任何方法和任何装置制备咖啡型饮料。盒的实例包括但不限于：由用于放置制备咖啡型饮料的物质的刚性材料制成的容器，例如金属制成的容器，其被构造用于浓缩咖啡机，例如重型意大利浓缩咖啡机；一次性容器(通常称为“咖啡盒”或“咖啡胶囊”)，其包含用于制备咖啡型饮料的物质；咖啡硬饼和咖啡垫等。本发明范围内的市售可得的一次性咖啡盒的实例包括但不限于Lavazza Espresso Capsules,K-Pods,K-Reusable Coffee Filters,IperEspresso Capsules(Illy),Nespresso Capsules,和DolceCapsules。
如本发明所公开，术语“胶原蛋白粉末”是指本领域已知的任何水解的胶原蛋白肽粉末，尤其包括凝胶类型0Bloom的胶原蛋白的水解产物。
如本发明所公开，术语“咖啡粉末”是指本领域已知的适用于制备咖啡型饮料的任何研磨的咖啡豆粉末。
如上文所述，分子量3000Da的胶原蛋白肽的每日建议有效剂量为至少基本3gr，并且分子量2000Da的胶原蛋白肽的每日有效剂量为至少基本2.5gr。仅为了简单起见，并且为了对消费者的效力的安全起见，胶原蛋白肽的每日建议剂量在本发明中是指至少3gr胶原蛋白肽的量。
根据一个方面，本发明提供了用于制备包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料的配制物，该配制物包含用于制备咖啡型饮料的物质和胶原蛋白粉末。此外，本发明提供了咖啡盒，其包含用于制备包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料的配制物，该配制物包含用于制备咖啡型饮料的物质和胶原蛋白粉末，并且本发明提供了咖啡盒的制备方法。此外，本发明的配制物包含用于制备咖啡型饮料的物质和胶原蛋白粉末的混合物。此外，本发明提供了咖啡盒，其包含用于制备包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料的配制物，其中所述的盒包含用于制备咖啡型饮料的粉末的层，和胶原蛋白粉末的层；并且本发明提供了咖啡盒的制备方法。此外，本发明提供了咖啡盒，其包含制备包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料的配制物，其中所述的盒包含用于制备咖啡型饮料的粉末的层，和用于制备咖啡型饮料的粉末和胶原蛋白粉末的混合物的层；并且本发明提供了咖啡盒的制备方法。
市售可得的咖啡盒可以是多种形状和尺寸。然而，所有的咖啡盒都共用多种普通的结构和功能特征。咖啡盒是容器，其被构造用于包含制备咖啡型饮料的物质。咖啡盒的一侧(在下文中称为“入口侧”)允许水(例如热水)进入盒中。然后，水通过盒中所包含的用于制备咖啡型饮料的物质，并且用于制备咖啡型饮料的物质的水溶性成分溶解于水中。包含物质(用于制备咖啡型饮料)的水溶性成分的溶液的饮料通过咖啡盒的一侧(在下文中称为“出口侧”)离开盒，进入饮料容器，例如但不限于杯、壶等。
根据一些实施方案，本发明提供了用于制备包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料的配制物。根据其他的实施方案，本发明提供了用于制备包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料的咖啡盒。根据一个实施方案，使用本发明的配制物或盒制备的一份咖啡型饮料(espresso beverage serving)提供至少基本0.2gr胶原蛋白肽，其为每日建议的最低有效剂量3gr胶原蛋白肽的基本6％。
因此，根据一个实施方案，本发明提供了用于制备一份咖啡型饮料的配制物，其包含至少基本0.2gr胶原蛋白粉末。根据另一个实施方案，本发明提供了用于制备一份咖啡型饮料的咖啡盒，其中所述的盒包含用于制备一份咖啡型饮料的配制物，其包含至少基本0.2gr胶原蛋白粉末。根据另一个实施方案，本发明提供了用于制备一份咖啡型饮料的咖啡盒，其中所述的盒包含用于制备一份咖啡型饮料的配制物，其包含至少基本1.5br胶原蛋白粉末，其为每日建议的有效剂量3gr胶原蛋白肽的至少一半。消化至少2份包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料(使用上文所述的配制物和盒制备，其包含至少基本1.5gr胶原蛋白粉末)提供了每日所建议的有效剂量的胶原蛋白。
在下文中，描述了在本发明的研发过程中实施的试验的实例。在试验过程中，使用咖啡粉末作为用于制备咖啡型饮料的物质，标准的一次性Nespresso兼容盒(能够包含至多13.5ml水)，适用于标准的一次性Nespresso兼容盒的咖啡装置，以及多种类型的胶原蛋白粉末。应该注意的是这些实例不应该作为限定本发明的范围，而是作为用于证明本发明的效力的手段。
为了简单起见，在试验的说明部分中，对于“Nespresso盒”的任何涉及均为能够包含至多13.5ml水的标准的一次性Nespresso兼容盒。
Nespresso盒通常包含用于制备一份咖啡型饮料的基本5-6gr咖啡粉末。使用基本4.5gr咖啡粉末和基本1.5gr胶原蛋白粉末/Nespresso盒通的混合物实施初步的试验，其提供了建议的每日最低剂量的胶原蛋白肽的一半。除了仅少数情况下，观察到没有咖啡型饮料由Nespresso盒流出或极少流出。另一方面，包含6gr胶原蛋白粉末的Nespresso盒允许咖啡型饮料适当地由Nespresso盒流出。此外，如本领域公知的那样，包含基本6gr咖啡粉末的Nespresso盒允许咖啡型饮料适当地由Nespresso盒流出。因此，这些结果证明在咖啡粉末和胶原蛋白粉末的混合物中，存在堵塞水通过Nespresso盒的通道的趋势—一种阻碍制备包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料的现象。
惊人的是，发现将咖啡粉末和胶原蛋白粉末放置于Nespresso盒的分离的层中会急剧地改善咖啡型饮料由Nespresso盒的流出。
由于本发明的一个目的是提供咖啡型饮料，其提供了每日建议的有效剂量的胶原蛋白的至少基本6％，所以本发明必须显示咖啡型饮料包含胶原蛋白肽。表1显示在一份100ml咖啡型饮料中蛋白质的量，其中所述的咖啡型饮料是使用Nespresso盒制备的，该Nespresso盒人工填充分子量为2000Da或3000Da的胶原蛋白粉末和咖啡粉末，不同之处在于在Nespresso盒中咖啡粉末的层和胶原蛋白粉末的层的相对取向。
使用多种类型的Nespresso盒的每一种制备一份100ml咖啡型饮料，其中重复次数(n)如表1所示。然后，使用用于测量肉中粗蛋白的the AOAC Official Method 981.10测定一份咖啡型饮料的每一种中蛋白质的总量。表1所示的蛋白质的量为平均量±标准偏差。
表1：在使用包含咖啡粉末和胶原蛋白粉末的Nespresso盒制备的一份100ml咖啡型饮料中蛋白质的量
*“位置”列表示Nespresso盒的一侧，在接近这一侧处，放置有咖啡粉末或胶原蛋白粉末的层。“入口”是指所述的层与Nespresso盒的入口侧相邻。“出口”是指所述的层与Nespresso盒的出口侧相邻。
**盒A包含基本6gr咖啡粉末。但是，使用盒A制备的咖啡型饮料中蛋白质的量对包含基本4.5gr咖啡粉末的Nespresso盒归一化，以便与包含基本4.5gr咖啡粉末的盒B、C、D和E比较。
如表1可见，使用基本4.5gr咖啡粉末制备的一份咖啡型饮料(盒A)包含基本量的蛋白质，其被认为是饮料中蛋白质的背景水平。另一方面，使用盒B-E制备的几份咖啡型饮料(包含基本4.5gr咖啡粉末的层和基本1.5gr胶原蛋白粉末的层)包含更高量的蛋白质。这些结果表明使用Nespresso盒(包含胶原蛋白粉末)制备的咖啡型饮料包含可以被使用者消化、同时消化咖啡型饮料的胶原蛋白肽。
就此而言，观察到由Nespresso盒得到的咖啡型饮料流的品质与咖啡型饮料中胶原蛋白肽的量之间存在关联。咖啡型饮料流的品质越好，咖啡型饮料中胶原蛋白肽的量越高。
表1中的结果进一步显示所述的盒中所述的层的相对位置会影响转移至一份咖啡型饮料中的蛋白质的量。当咖啡粉末的层与所述的盒的出口侧相邻定位，并且胶原蛋白粉末的层与所述的盒(盒B和D)的入口侧相邻定位时，咖啡型饮料中蛋白质的量与使用具有相对取向的层的盒(盒C和E)制备的一份咖啡型饮料相比，基本更高。这些结果表明与所述的盒的出口侧相邻的咖啡粉末的层和与所述的盒的入口侧相邻的胶原蛋白粉末的层的定位使得一份咖啡型饮料中胶原蛋白肽的产率比所述的盒中所述的层相对定位的产率更高。
此外，包含咖啡粉末的层、以及咖啡粉末和胶原蛋白粉末的混合物的层的盒允许咖啡型饮料由所述的盒适当地流出。咖啡粉末的层可以与所述的盒的出口侧或入口侧相邻定位。
使用基本1.5gr胶原蛋白粉末和基本4.5gr咖啡粉末/Nespresso盒实施表1所示的试验，得到用于制备咖啡型饮料的总量基本6gr粉末/Nespresso盒。在表1所示的所有的试验中，咖啡型饮料由Nespresso盒适当地流出。还实施具有其他量的胶原蛋白粉末/Nespresso盒、同时保持粉末/Nespresso盒的总量为基本6gr的相似的试验，并且检测咖啡型饮料由Nespresso盒的流出。较低量的胶原蛋白粉末/盒(低至基本0.2gr胶原蛋白粉末/Nespresso盒)(和基本5.8gr咖啡粉末/Nespresso盒)和较高量的胶原蛋白粉末/Nespresso盒(高达基本6gr胶原蛋白粉末/Nespresso盒)(不具有咖啡粉末)使得咖啡型饮料由Nespresso盒适当地流出。然而，通常较低水平的胶原蛋白粉末/盒使得饮料由所述的盒较好的流出。
基于这些结果，当粉末/盒的总重量为基本6gr时，本发明提供了以下重量范围的胶原蛋白粉末/盒(该盒具有用于制备咖啡型饮料的粉末，例如咖啡粉末、可可粉末等，以及胶原蛋白粉末)：基本0.2-6gr,0.2-5gr,0.2-3gr,0.2-2.5gr,0.75-2gr,1-2gr和1.5gr胶原蛋白粉末/盒。
由于本发明的范围包括所有类型的咖啡盒(其可以使各种总量的粉末插入至所述的盒中)，本发明提供占盒中粉末总量的以下百分率范围的胶原蛋白粉末：粉末总量/盒的基本3-100％,3-83％,3-50％,3-42％,12-33％,16-33％和25％胶原蛋白粉末。
应该注意，在本发明人实施试验的过程中，发现可以插入盒中的胶原蛋白粉末的量取决于胶原蛋白粉末的颗粒的尺寸。通常，较大尺寸的胶原蛋白粉末颗粒可以使较低量的胶原蛋白粉末插入至盒中，反之亦然。
使用包含例如基本2.5gr胶原蛋白粉末的层和基本3.5gr咖啡粉末的层的盒是有利的，特别是对于喜欢消耗具有低含量咖啡的咖啡型饮料的使用者而言，同时提供每日建议的最低有效剂量的、分子量2000Da的胶原蛋白肽(Proksch et al,2013)。使用包含基本1.5gr胶原蛋白粉末的层和基本4.5gr咖啡豆粉末的层的盒在使用者所消耗的胶原蛋白的量方面是最优的—大约每日建议的有效剂量的一半—因此，每日消耗2份此类咖啡型饮料提供每日剂量基本3gr的胶原蛋白肽，这比分子量2000Da的每日建议的最低有效剂量的胶原蛋白肽更高点。然而，咖啡粉末的量低于基本5gr/盒使得咖啡型饮料具有对典型的咖啡消费者而言不足水平的味道和香味。人么可以将咖啡粉末的量增加至基本5gr或更高/盒，但是这要以一定量的胶原蛋白粉末/盒为代价。
就此而言，本发明人惊人地发现胶原蛋白粉末的进一步研磨能够在Nespresso盒中包装基本1.5gr研磨的胶原蛋白粉末的层和基本4.8-5gr咖啡粉末的层，使得盒具有最佳量的胶原蛋白肽和咖啡。在本实例中，使用胶原蛋白粉末(分子量2000Da)。在放大装置(例如显微镜或放大镜)下检测研磨的胶原蛋白粉末表明不同于未研磨的胶原蛋白粉末，研磨的胶原蛋白粉末包含具有不规则形状的颗粒。此外，如表2中可见，研磨的胶原蛋白粉末颗粒的尺寸小于未研磨的胶原蛋白粉末颗粒的尺寸。使用Mastersizer 3000粒径测量仪(Malvern Instruments Limited,Worcestershire,UK)测定研磨的和未研磨的胶原蛋白粉末的尺寸。该测量仪测量颗粒群体的直径，并测定群体中颗粒的直径分布，其为正态分布。下表中颗粒的直径表示为10th百分位直径，50th百分位直径(中值)和90th百分位直径。在一些情况下，仅给出中值直径。
表2：市售可得的胶原蛋白粉末颗粒和研磨的胶原蛋白粉末颗粒的尺寸分布
实施其他的试验—检测咖啡型饮料由Nespresso盒流出的品质，其中所述的Nespresso盒包含不同类型的咖啡粉末(不同之处在于粒径)和不同类型胶原蛋白粉末(不同之处在于胶原蛋白肽的分子量、制造商和粒径)。结果概括于表3中。所有的Nespresso盒均人工填充基本1.5gr胶原蛋白粉末的层(与所述的盒的入口侧相邻)和咖啡粉末的层(与所述的盒的出口侧相邻)。在大多数的情况下，能够插入到Nespresso盒中的咖啡粉末的量为基本4.5gr，如表3所示。但是，在下文讨论的一些情况下，其他的量(较低或较高)的咖啡粉末可以插入到Nespresso盒中，这与粒径有关，如表3所示。
通过观察流出所述的盒的咖啡型饮料流的宽度和流速来评价咖啡型饮料由所述的盒流出的品质。减号(-)表示没有咖啡型饮料由所述的盒流出。至多4个加号(+)表示咖啡型饮料由所述的盒流出。更多数量的加号(+)表示在饮料流的宽度和流速方面，咖啡型饮料流的更高的品质。
表3还显示3种类型的胶原蛋白粉末和2种类型的咖啡粉末。“原始的”表明未经过任何处理而使用的市售的胶原蛋白或咖啡粉末；“研磨的X1”表明使用工业规模的研磨机研磨1次的市售的胶原蛋白或咖啡粉末；以及“研磨的X2”表明使用工业规模的研磨机研磨2次的市售的胶原蛋白粉末。应该注意，在使用相似参数(例如速度和持续时间)重复研磨工艺后，颗粒的尺寸存在一些变化。
表3：咖啡型饮料由Nespresso盒的流出，所述的Nespresso盒包含与该盒的出口侧相邻的咖啡粉末的层(其包含不同尺寸的颗粒)和与该盒的入口盖相邻的胶原蛋白粉末的层(得自不同的制造商并且包含不同分子量的肽和不同尺寸的颗粒)
咖啡粉末的粒径对包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料由盒的流出的品质的影响
使用Nespresso盒制备包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料，其中所述的Nespresso盒包含不同类型的胶原蛋白粉末，和咖啡粉末，其包含较大的颗粒(10th,50th和90th的百分位尺寸分别为84,464和1220μm)或较小的颗粒(10th,50th和90th的百分位尺寸分别为43,386和728μm)。根据表3所示的结果，所有包含大颗粒咖啡粉末的Nespresso盒均不允许咖啡型饮料由所述的盒流出。另一方面，包含较小颗粒咖啡粉末的Nespresso盒在所检测的所有类型胶原蛋白粉末存在的情况下，均允许咖啡型饮料由所述的盒流出。
应该注意这些结果应该被认为仅是示例性的，并且其他结果可以在其他的条件下获得，例如当使用用于制备咖啡型饮料的其他类型的物质，例如咖啡粉末；其他类型的胶原蛋白粉末；用于制备咖啡型饮料的物质和胶原蛋白粉末的颗粒的其他尺寸；以及其他类型的咖啡盒。此外，其中将用于制备咖啡型饮料的物质和胶原蛋白粉末填充至盒中的压力也可以影响咖啡型饮料由所述的盒的流出。
咖啡粉末的量/盒
为了获得包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料，建议使用用于制备咖啡型饮料的粉末，该粉末包含较小的颗粒，而不是较大的颗粒—例如使用包含10th,50th和90th百分位尺寸分别为43,386和728μm的颗粒的咖啡粉末，而不使用包含例如10th,50th和90th百分位尺寸分别为84,464和1220μm的较大颗粒的咖啡粉末。
应该注意，咖啡粉末的这些粒径不应该认为限定了本发明的范围，而应该仅作为实例，其证明用于当粉末用于制备包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料时，用于制备咖啡型饮料的粉末的颗粒尺寸的重要性。
胶原蛋白粉末的粒径对包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料由盒的流出的品质的影响
表3中所示的结果证明胶原蛋白粉末的颗粒尺寸与咖啡型饮料由所述的盒的流出的品质之间的一般相关性。较大的粒径使得咖啡型饮料由所述的盒的流出越差，而较小的粒径使得咖啡型饮料由所述的盒的流出较好。
因此，为了获得良好品质的包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料流，建议使用具有小颗粒的胶原蛋白粉末，例如但不限于中值粒径为基本100μm的颗粒。然而，应该注意另一种颗粒的尺寸可以应用于其他类型的盒、咖啡粉末和胶原蛋白粉末的组合中。
应该注意上文所述的胶原蛋白粉末颗粒的尺寸与咖啡型饮料由所述的盒流出的品质之间的一般相关性不应该被认为限定本发明的范围，并且在一些情况下，可以不利用这种相关性。此外，本发明所提及的胶原蛋白粉末的粒径不应该被认为限定本发明的范围，而应该仅作为实例，其证明用于当粉末用于制备包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料时，用于制备咖啡型饮料的粉末的颗粒尺寸的重要性。
如之前所讨论，Nespresso盒通常能够包含总量基本6gr咖啡粉末。使用相似量的胶原蛋白粉末替代基本1.5gr咖啡粉末/Nespresso盒得到咖啡型饮料，该咖啡型饮料由于低水平的咖啡味道和香味而可能不被使用者接受。因此，在相同量的胶原蛋白粉末存在下，增加咖啡粉末/盒的量是有利的。就此而言，本发明人发现当胶原蛋白肽的分子量为3000Da或2000Da时，2次研磨胶原蛋白粉末可以增加咖啡粉末的量，所述的咖啡粉末在基本1.5gr胶原蛋白粉末存在下，可以插入到Nespresso盒中。
表3进一步示出流出测试盒的咖啡型饮料流的品质。结果显示咖啡粉末/盒的量与咖啡型饮料流(其是使用基本1.5gr胶原蛋白粉末/Nespresso盒制成的)的品质之间的相关性。在至多基本4.8gr咖啡粉末/Nespresso盒存在下，由Nespresso盒得到的咖啡型饮料流的品质比基本5gr咖啡粉末/Nespresso盒存在下的情况更好。
该试验和其他试验表明由包含咖啡粉末和胶原蛋白粉末的盒得到的咖啡型饮料流取决于所述的盒中粉末的总量。通常，盒中粉末的总量较低可以使咖啡型饮料由所述的盒适当地流出，而盒中粉末的总量较高使得咖啡型饮料由所述的盒更难以流出。其原因可能在于为了将较高量的粉末插入盒中，粉末应该更加的压紧，由此增加了堵塞盒的机会，并且妨碍咖啡型饮料由所述的盒适当地流出。此外，观察到所述的盒中的粉末缺乏压紧还导致咖啡型饮料流缺乏由所述的盒的流出。因此，应该测定所述的盒中的粉末的最佳压紧水平，以便取得咖啡型饮料由所述的盒的适当地流出。如本发明所示，所述的盒中的粉末的压紧水平尤其与粉末颗粒的尺寸相关。
本领域公知的是将胶原蛋白粉末加入饮料或食物产品中使得饮料或食物产品对于消费者而言是不美味的。就此而言，本发明人惊人地发现根据本发明的包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料比不包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料更美味，并且具有更好的口中填充(mouth fill)。本发明不仅消除了包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料的令人不快的味道，甚至改善了咖啡型饮料的味道和口中填充。
此外，本发明通过以下方式提供了胶原蛋白肽方便传递给使用者的方法：制备和消化包含胶原蛋白肽的咖啡型饮料，同时消除将胶原蛋白粉末与一份咖啡型饮料混合的负担，消除粉末状胶原蛋白肽的令人不快的味道，以及富集咖啡型饮料的味道和口中填充。
根据一个实施方案，包含用于制备咖啡型饮料的物质和胶原蛋白粉末的盒可以进一步包含至少一种添加剂。添加剂的实例包括但不限于营养补充剂,风味增强剂,健康增强剂和它们的任意的组合。添加剂的具体实例包括但不限于柠檬莱姆,香葡萄果仁,桂皮香料,咖啡浆果,咖啡浆果提取物,透明质酸,甘草精(甘草提取物),甘草精的衍生产物和它们的任意的组合。
应该理解的是，为了清楚起见，在分开的实施方案的内容中描述的本发明的某些特征还可以在单一实施方案的组合中提供。相反，为了简单起见在单一实施方案的内容中描述的本发明的多个特征也可以分开或者在任何合适的亚组合中提供。
尽管联合本发明的具体实施方案描述了本发明，明显的是许多备选、修改和改变对于本领域那些技术人员而言是显而易见的。因此，预计涵盖落入所附权利要求书精神和广泛范围内的所有此类备选、修改和改变。