一种提高免疫力的蚕蛹小肽螯合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及生物技术领域，具体设及一种提高免疫力药物蚕蛹小肤馨合物及其制 备方法。
【背景技术】
[0002] 免疫力是指机体抵抗外来侵袭，维护体内环境稳定性的能力，是人体自身的防御 机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物(病毒、细菌等），处理衰老、损伤、死亡、变性 的自身细胞W及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。现代免疫学认为，提高 免疫力是人体识别和排除"异己"的生理反应，人体内执行运一功能的是免疫系统。数百万 年来，人类生活在一个既适合生存又充满危险的环境，人类得W存续，也获得了非凡的免疫 力，所W说免疫力是生物进化过程的产物。各种原因使免疫系统不能正常发挥保护作用，在 此情况下，极易招致细菌、病毒、支原体、衣原体、真菌等感染，在人体免疫力不足的情况下， 它们都可W成为病原体，因此最直接的表现就是容易生病。免疫力低下的人根本无法抵御 感冒病毒的侵袭，运才是频繁感冒的真正原因。
[0003] 蚕蛹，为蚕蛾科昆虫家蚕的蚕虽绳丝后留下的蛹体。蚕蛹入药在我国有悠久的历 史，中医学认为，蚕蛹性味甘、溫、咸、辛，归脾、胃、肾经。有溫阳补肾、桂风除湿、健脾消积之 功，适用于肾阳亏虚，阳瘦遗精，风湿搏痛，小儿巧积等。唐朝孙思邀《备急千金要方》说它 "益精气，强男子阳道……治泄精"；明朝李时珍《本草纲目》记载："为末饮服，治小儿巧瘦， 长肌，退热，除咖虫;煎汁饮，止消渴。"《医林纂要》言其"和脾胃，桂风湿，长阳气"，表明蚕蛹 具有桂风、健脾、止消渴、镇惊安神、益精助阳等功效。
[0004] 蚕蛹不仅是味道鲜美、营养丰富的副食品，还是极宝贵的动物性蛋白质来源，更是 提取多种化学药品的宝贵原料;蚕蛹含有丰富的蛋白质和多种氨基酸，是体弱、病后、老人 及妇女产后的高级营养补品。蚕蛹能产生具有药理学活性物质，可有效提高人体内白细胞 水平，从而提高人体免疫功能，延缓人体机能衰老，对机体糖、脂肪代谢能起到一定的调整 作用。适量食用蚕蛹，对高血压、高血脂、慢性肝炎及营养不良患者有较好的辅助治疗功效。 食蚕蛹既可补充脂肪、蛋白质和多种维生素，又可增加脑细胞活力，提高思维能力。蚕蛹中 含有大量的精氨酸，其含量超过鸡、鱼、肉、蛋。精氨酸能消除疲劳、提高性功能，是制造男性 精子蛋白的重要原料，且对慢性肝炎、屯、脑血管疾患、白细胞减少及营养不良等症，都有明 显的疗效。其功能无疑使营养丰富的蚕蛹成了保健的珍贵资源。
[0005] 蚕蛹具有高蛋白低脂肪的特点，能起到增强人体机能、抗衰防老的滋补作用。蚕蛹 含有丰富的蛋白质(鲜蚕蛹含粗蛋白占51%)、脂肪酸(粗脂肪占29%)、维生素(包括维生素 A、 维生素 B2、维生素 D及麦角酱醇等），其蛋白质含量远远高于一般食品，而且蛋白质中的必需 氨基酸种类齐全，蚕蛹含有20种氨基酸，包括人体所必需的8种氨基酸，运8种氨基酸含量大 约是猪肉的2倍、鸡蛋的4倍、牛奶的10倍，且营养均衡、比例适当，是一种优质的昆虫蛋白 质；而且所含的蛋白质易被水解，且与人体蛋白质相似，人体吸收率在90%左右。
[0006] 蚕蛹小肤是运用生物工程和酶解技术从蚕蛹中提取出来的小分子肤类，其相对分 子质量在3KDW下，易透皮吸收，溶解性和消化利用率高，安全无副作用、无依赖性，可有效 提高人体内白细胞水平，从而提高人体免疫功能，延缓人体机能衰老，尤其适合工作压力 大、体质虚弱、抵抗力差、病后恢复、中老人及孕产妇等亚健康人群食用。
[0007] 微量元素与人体健康息息相关，中国微量元素科学研究会会长陈祥友教授指出： "人是由元素组成的，人的生、老、病、死无不与元素平衡有关，当今世界威协人类健康长寿 的疑难杂症的突破，有待于元素平衡医学的发展"。微量元素已成功应用于疾病的治疗，研 究表明，缺铁会引起贫血，缺铜引起贫血、骨质疏松、冠屯、病，缺钻会引起巨细胞性贫血、白 血病、白内障、口腔溃瘍等，缺铭会引起糖尿病、冠屯、病，缺钢会出现屯、血管疾病，如屯、肌坏 死冠屯、病、屯、绞痛等。
[0008] 铭是人体内必需的微量元素之一，它在维持人体健康方面起关键作用。铭对人体 十分有利的微量元素，不应该被忽视，它是正常生长发育和调节血糖的重要元素，还参与碳 水化合物、脂类、蛋白质和核酸代谢。铭在人体内的含量约为7毫克，主要分布于骨骼、皮肤、 肾上腺、大脑和肌肉之中。随着年龄的增长而逐渐减少，铭的需要量很少，铭作为一种必要 的微量营养元素在所有膜岛素调节活动中起重要作用，它能帮助膜岛素促进葡萄糖进入细 胞内的效率，是重要的血糖调节剂，特别是对糖尿病患者而言有着重要的作用，当缺乏铭 时，就很容易表现出糖代谢失调，如不及时补充运种元素，就会患糖尿病，诱发冠状动脉硬 化导致屯、血管病，严重的会导致白内障、失明、尿毒症等并发症。铭还有助于生长发育，并对 血液中的胆固醇浓度也有控制作用，缺乏时可能会导致屯、脏疾病。铭源包括无机铭和有机 铭两种形式，无机铭有化Cl3 ? 6此0、化2(S04)3、化(M)3)3等，有机铭包括高铭酵母和馨合铭 (如烟酸铭、蛋白铭、氨基酸铭和化晚甲酸铭）。铭的吸收与化学结合形式有很大的关系，无 机铭比有机铭难吸收，人体对无机铭的吸收率仅为1%~3%，而对有机铭的吸收率为10%~ 25%。总的来说铭的利用率比较低，限制了其利用。
[0009] 锋是人体必需的微量元素之一，在人体生长发育、生殖遗传、免疫、内分泌等重要 生理过程中起着极其重要的作用，被人们冠 W "生命之花"、"婚姻和谐素"的美称。锋存在于 众多的酶系中，如碳酸酢酶、呼吸酶、乳酸脱氨酸、超氧化物歧化酶、碱性憐酸酶、DNA和RNA 聚中酶等中，是核酸、蛋白质、碳水化合物的合成和维生素 A利用的必需物质，具有促进生长 发育，改善味觉的作用。锋主要存在于动物性食品中，中国家庭中多W植物性食物为主，而 且植物性食品中的草酸、植酸、纤维素等严重干扰锋的吸收。近代科学研究证明，缺锋会引 发各种病症:比如，锋对生长发育有着促进作用，锋通过参与酶的形成而促进核酸蛋白质合 成，影响细胞的生长和分裂，所W，严重缺锋的儿童就会表现为发育迟缓，矮小症，营养不 良，瘦弱，贫血，头发黄。严重缺锋的孕妇由于染色体变形，会导致流产概率的增加，造成习 惯性流产;锋可W增强创伤组织再生能力，缺锋就会导致创伤表皮及愈合组织中胶原量减 少，创伤不易愈合，所W，锋可W辅助治疗口腔溃瘍、胃溃瘍、烧伤、创伤W及青春期瘦疮、下 肢溃烂、稱疮等病症;锋是维持脑的正常生长和脑功能发育不可缺少的微量元素，缺锋影响 脑DNA、RND、蛋白质的形成，就会导致小脑发育迟缓，行为偏离，智力落后，所W，缺锋是导致 脑擁的最主要原因，运一点对孕妇尤其重要；锋还是促进男性睾丸酬分泌及精子形成的重 要元素，所W，缺锋也是男性不孕症、性功能障碍的主要原因。W上种种表明，锋元素对人体 的重要，应引起各个人群的重视。
[0010] 蚕蛹小肤馨合物不仅能更进一步提高铭、锋等微量元素的吸收率，而且还能使人 体摄入两类物质(小肤和微量元素），各自并协同发挥提高人体免疫力的作用。
【发明内容】
[0011] 本发明的第一目的在于提供一种提高免疫力药物蚕蛹小肤馨合物，本发明的第二 目的是提供该蚕蛹小肤馨合物在制备用于提高免疫力的食品、保健食品及药品中的应用。
[0012] 本发明目的第一目的是运样实现的： 一种提高免疫力的蚕蛹小肤馨合物，其特征在于采用W下工艺步骤制备： (1)蚕蛹小肤的制备:将蚕蛹加8-12倍量水匀浆，加热煮沸15-30分钟，待冷至约35~45 。(：，调节抑值1.0~3.0，加入0.5~2%胃蛋白酶，保溫1~3小时，调节抑值7.0~9.0，加入0.5 ~2%膜蛋白酶，保溫3~5小时，煮沸10~15分钟，离屯、，上清液通过相对分子质量为3KD的超 滤膜超滤，透过液加于DA201-C大孔吸附树脂柱上，W水洗脱，弃去水洗液，再W60~90%乙 醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇并继续浓缩至60°C相对密度为1.10~1.15的清膏， 喷雾干燥(进风溫度为180~200°C，出风溫度为90~IO(TC),得到蚕蛹小肤提取物。经LC-MS 检测，蚕蛹小肤提取物中含有Arg-Trp-Ser-Glu-Pro-Thr-Val-Phe ,Lys-Thr-Gly-Asp-Leu-Ala-Trp-Val-Arg、Arg-HiS-Val-Pro-Lys-HiS-Asp-Glu、Arg-Gly-Ser-HiS-HiS-Pro-Val-Glu-Trp四种小分子肤，总含量为50%~90%。
[0013] (2)藝合反应:将=氯化铭(或烟酸铭，或化晚甲酸铭，或氯化锋，或葡萄糖酸锋，或 乳酸锋)溶于蒸馈水配成浓度为10~15mg/ml盐溶液，W稀盐酸调节pH值2~4,按盐溶液与 蚕蛹小肤提取物比例8~10:1比例加入蚕蛹小肤提取物，揽拌溶解，在溫度为50~60°C条件 下，馨合反应60~90分钟，用纳滤膜(截留相对分子质量为150~300Da)纳滤除盐，得到蚕蛹 小肤馨合物溶液。
[0014] (3)喷雾干燥得馨合物:将蚕蛹小肤馨合物溶液减压浓缩至60°C相对密度为1.10 ~1.15,喷雾干燥(进风溫度为180~200°C，出风溫度为90~IO(TC)，得到蚕蛹小肤馨合物。
[0015] 经过上述方法制备的蚕蛹小肤馨合物，用于制备成下述制剂： (1) 按蚕蛹小肤馨合物:玉米油:蜂蜡:卵憐脂比例为10:36:3:1混合物料，经胶体磨研 磨，制备成软胶囊剂； (2) 按蚕蛹小肤馨合物:聚乙二醇400:丙二醇比例为10:38:2混合物料，经胶体磨研磨， 制备成软胶囊剂； (3) 蚕蛹小肤馨合物，加入常规辅料，制备成口服液、胶囊剂、片剂、颗粒剂。
[0016] 但本发明不限于上述剂型。成型工艺所用的常规药剂辅料可W用其他的性质类似 的辅料代替，如糖粉、蜂蜜、簇甲基纤维素钢等辅助成型药用辅料;也可与其他药用物质合 用，共同达到提高免疫力的作用。
[0017] 本发明的第二目的是提供上述蚕蛹小肤馨合物的用途，其具有提高免疫力的作 用，其可在制备用于提高免疫力的食品、保健食品及药品中应用。
[0018] 本发明的有益效果是:本发明蚕蛹小肤馨合物，制备简便，成本低;蚕蛹小肤与微 量元素协同发挥提高免疫力的作用，同时具有毒副作用小、无耐药性、不易残留等优点，达 到绿色食品纯天然的要求，能获得良好的经济效益。
[0019] 药效试验 为进一步验证本发明蚕蛹小肤馨合物的提高免疫力的作用，发明人进行了药效试验考 察，试验方法及结果如下： 1.对小鼠游泳时间的影响 (1)受试药物 蚕蛹小肤铭馨合物，自制，含蚕蛹小肤m总肤量计)75.2%，含铭1.7%。临用前采用灭菌 蒸馈水配成相应浓度药液供灌胃。
[0020]蚕蛹小肤锋馨合物，自制，含蚕蛹小肤（从當肤量计)73.9%，含锋3.1%。临用前采用 灭菌蒸馈水配成相应浓度药液供灌胃。
[0021 ]蚕蛹小肤，自制，含蚕蛹小肤（W总肤量计）76.5%。临用前采用灭菌蒸馈水配成相 应浓度药液供灌胃。
[0022] 化晚甲酸铭，食