专利名称：抗肿瘤剂的制作方法
背景技术：
本发明涉及口服和/或肠胃外给药的抗肿瘤剂，包含作为有效组分的至少一种选自含有特定5-元环的三萜及其生理学上可接受的盐或其衍生物的成员。
最近，癌症或肿瘤的死亡率在日本基本上一直倾向于增加(1997年)，而在美国终于基本上呈现降低趋势，但是癌症或肿瘤仍然占据死亡原因的第二位。
与此相反，由于最近所进行的集中和广泛的调查和研究，已经在分子水平上阐明了癌症发展的机理。这些努力或研究的成果显然使各种化学物质能够控制癌症发展过程的各个步骤，它们已经被用作具有抗肿瘤作用的药物。
这些抗肿瘤剂分别按照不同的机理显示它们的效果，因此，通过成功地联合它们可以进行有效的治疗。而且，如果一种药物已经被连续使用，那么已被指出会产生所谓的耐受性问题。有鉴于此，广泛抗肿瘤剂的存在是相当可取的。
此外，常规上已经使用各种化学物质作为具有抗肿瘤作用的抗肿瘤剂。一方面，它们具有强烈的抗肿瘤作用，但是另一方面，它们具有副作用，以致它们不仅对肿瘤细胞、而且对正常细胞具有有害或伤害作用。为此，相当明显的是可取的抗肿瘤剂应当具有更低的细胞毒性和高的安全性。
另一方面，含有5-元环的三萜属于三萜的一种，它们通常是含有5-元环的化合物，各自由分子中的六个异戊二烯单位组成，其碳原子数基本上是30，但是在生物合成中通过重排、氧化、消除或烷基化，包含在该三萜中的碳原子数可以发生变化。而且，它们一般是在其骨架的基础上进行分类的，其实例包括齐墩果烷型三萜、熊果烷型三萜、羽扇豆烷型三萜、忽布烷型三萜、塞拉烷型三萜、弗瑞德烷型三萜、蒲公英赛烷型三萜、taraxastane型三萜、multi-furolane型三萜和日耳曼烷型三萜。
它们一般具有抗炎效果和抗致癌促进剂活性，因此，已知它们可以用作预防性药物(Bulletin of the Society of Oil Chemistry in Japan，2000，49571)。而且，在这方面，还已经知道齐墩果酸、古柯二醇(erythrodiol)、甘草次酸等具有致癌促进剂抑制活性(Cancer Letters，1986，30143-151或日本未审专利公报(以下称为“J.P.KOKAI”)No.昭63-57519)。关于已经发育的肿瘤细胞，乌索酸(ursolic acid)已知具有细胞转移抑制效果，尽管肿瘤细胞增殖抑制效果和肿瘤细胞杀死(或坏死)作用尚未得到证实(J.P.KOKAI No.平9-143076)。不过迄今，从未已知含有特定5-元环的三萜及其生理学上可接受的盐或其衍生物、包括已知具有致癌促进剂抑制活性的那些，具有例如肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞坏死效果和肿瘤细胞转移抑制效果。
发明的公开本发明的目的是提供口服和/或肠胃外给药的抗-v剂，包含作为有效组分的至少一种选自含有特定5-元环的三萜及其生理学上可接受的盐或其衍生物的成员，还提供使用它们的方法。更确切地，本发明的目的是提供抗肿瘤剂，它具有肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞坏死效果和肿瘤细胞转移抑制效果，以及提供使用它们的方法。
本发明的发明人为实现上述目的已经进行了各种研究，已经发现含有特定5-元环的三萜及其生理学上可接受的盐或其衍生物具有优异的肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞坏死(或杀死)效果和肿瘤细胞转移抑制效果，从而完成了本发明。
更具体地，本发明涉及抗肿瘤剂，包含作为有效组分的一种或至少两种选自山楂酸(maslinic acid)、古柯二醇(erythrodiol)、乌索酸(ursolic acid)、山楂醇(uvaol)、桦木酸(belulinic acid)、桦木脑(betulin)及其生理学上可接受的盐或其衍生物的成员，优选地涉及具有肿瘤细胞增殖抑制效果的抗肿瘤剂，优选地涉及具有肿瘤细胞杀死效果的抗肿瘤剂，优选地涉及具有肿瘤细胞转移抑制效果的抗肿瘤剂。
另外，本发明优选地涉及抗肿瘤剂，包含作为有效组分的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐，优选地涉及具有肿瘤细胞增殖抑制效果的抗肿瘤剂，优选地涉及具有肿瘤细胞杀死效果的抗肿瘤剂，优选地涉及具有肿瘤细胞转移抑制效果的抗肿瘤剂。
在这一点上，用在本发明中的山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸和桦木脑可以是从天然存在的原料中提取的，或者可以是任意商业上可得到的试剂。另外，生理学上可接受的盐及其衍生物同样可以是从天然存在的原料中提取的，或者可以是任意利用这类提取物作为原料通过合成反应制备的合成产品。尤其是，优选使用从天然存在的原料中分离的那些。
而且，本发明涉及使用作为抗肿瘤剂的至少一种选自山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物的成员的方法。尤其，本发明同样涉及使用至少一种选自山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物的成员的方法，用于实现至少一种下列效果肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞杀死效果和肿瘤细胞转移抑制效果，以及涉及使用至少一种选自乌索酸及其生理学上可接受的盐或其衍生物的成员的方法，用于实现肿瘤细胞增殖抑制效果和/或肿瘤细胞杀死效果。
使用方法不限于任意特定的一种，但是抗肿瘤剂可以直接应用于人体的外部和/或内部肿瘤损伤，从而达到任意所需的效果。而且，例如通过口服途径或注射给以药物同样可以预期相似的效果。
因此，本发明还涉及用于抑制肿瘤细胞增殖或杀死肿瘤细胞的方法，它包含使选自山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物的化合物作为有效组分与肿瘤细胞接触和/或允许该化合物穿透进入肿瘤细胞的步骤。
另外，本发明还涉及用于抑制肿瘤细胞转移的方法，它包含使选自山楂酸、古柯二醇、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物的化合物作为有效组分与肿瘤细胞接触和/或允许该化合物穿透进入肿瘤细胞的步骤。
实施发明的最佳方式本发明涉及抗肿瘤剂，包含作为有效组分的至少一种选自山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物的成员，尤其涉及抗肿瘤剂，其抗肿瘤效果是肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞杀死效果和/或肿瘤细胞转移抑制效果。本文所用的术语“包含作为有效组分的”意味着抗肿瘤剂含有有效组分的量足以实现所需的肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞杀死效果和/或肿瘤细胞转移抑制效果。
而且，本发明优选地涉及抗肿瘤剂，包含作为有效组分的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐。
山楂酸是一种例如存在于橄榄、忽布、薄荷、石榴、丁香、鼠尾草和枣树中的化合物，其生理学上可接受的盐是从化学式(1)中的基团-COOH衍生的那些，盐的种类不限于特定的那些，可以是常用在食品和饮料或医药组合物中的那些。
本文所用的术语“包含作为有效组分的”意味着抗肿瘤剂含有有效组分的量足以实现所需的肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞杀死效果和/或肿瘤细胞转移抑制效果，已如上述。
结合在本发明抗肿瘤剂中的山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物具有肿瘤细胞增殖抑制效果，它们具有肿瘤细胞杀死效果，它们还显示控制或抑制任意肿瘤细胞转移的效果。
在这方面，山楂酸、古柯二醇、乌索酸、桦木酸和桦木脑具有抗致癌促进剂(抗肿瘤促进剂)活性，因此，将预期它们能够控制癌发生(或瘤发生)或者抑制任意肿瘤细胞的发育。而且，本发明的抗肿瘤剂具有抑制肿瘤细胞增殖、杀死肿瘤细胞和抑制其转移的效果，甚至在不可检测的水平，换句话说，该药物通过普通的药剂摄取具有消灭肿瘤至不可见的水平的效果。为此，本发明的药物同样可以用作预防剂。而且，本发明的抗肿瘤剂可以用作治疗剂，用于在肿瘤细胞的发育后不久抑制任意肿瘤细胞增殖、杀死肿瘤细胞和/或抑制任意肿瘤细胞转移，或者作为药物用于抑制肿瘤的进展，消灭肿瘤。另外，这些抗肿瘤剂能够直接应用于人体的外部和/或内部肿瘤损伤，从而达到任意所需的效果。而且，例如通过口服途径或注射给以药物同样可以预期相似的效果。
本发明抗肿瘤剂能够应用的肿瘤包括肿胀和真正的肿瘤，包括良性和恶性肿瘤。这类肿瘤的具体实例是神经胶质瘤，例如星形细胞瘤、成胶质细胞瘤、成神经管细胞瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤和脉络膜丛乳头瘤；脑肿瘤，例如脑膜瘤、垂体腺瘤、神经瘤、先天性肿瘤、转移性脑肿瘤；鳞状上皮癌、淋巴瘤、各种腺瘤和由这些腺瘤导致的咽癌，例如咽上部癌、咽中部癌和咽下部癌；喉癌、胸腺瘤；间皮瘤，例如胸膜间皮瘤、腹膜间皮瘤和心包间皮瘤；乳腺癌，例如胸管癌、小叶癌和乳头状癌；肺癌，例如小细胞癌、腺癌、鳞状上皮癌、大细胞癌和鳞状腺癌；胃癌；食管癌，例如颈食管癌、胸食管癌和腹食管癌；大肠癌症，例如直肠癌、S-样(乙状)结肠癌、上行结肠癌、侧结肠癌、盲肠癌和下行结肠癌；肝细胞瘤，例如肝细胞癌、肝内肝管癌、肝细胞性胚细胞瘤和肝管囊腺癌；胰腺癌；胰腺激素依赖性肿瘤，例如胰岛瘤、胃泌素瘤、产生VIP的腺瘤、肝外肝管癌、肝管囊癌、周围癌、肾盂与输尿管癌；尿道癌；肾癌，例如肾细胞癌(Grawitz肿瘤)、Wilm氏肿瘤(肾胚细胞瘤)和肾血管肌脂瘤；睾丸癌或生殖细胞肿瘤，例如精原细胞瘤、胚胎性癌、卵黄囊肿瘤、绒毛膜癌和畸胎瘤；前列腺癌、膀胱癌、外阴癌症；子宫癌，例如子宫颈癌症、子宫体癌和子宫内膜瘤；子宫肌瘤、子宫肉瘤、绒毛状疾病、阴道癌症；卵巢生殖细胞肿瘤，例如无性细胞瘤、卵黄囊肿瘤、早熟性畸胎瘤、皮样癌和卵巢肿瘤，例如卵巢癌；黑瘤，例如痣细胞与黑瘤；皮肤淋巴瘤，例如蕈样真菌病，皮肤癌，例如由皮肤癌、前驱症状等导致的内表皮癌和棘细胞癌；软组织癌，例如纤维组织细胞瘤病、脂肉瘤、横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤、滑膜肉瘤、纤维形成性肉瘤(纤维肉瘤)、神经瘤、血管肉瘤、纤维肉瘤、神经纤维肉瘤、周皮瘤(血管外皮细胞瘤)和蜂窝状软部分肉瘤；淋巴瘤，例如何杰金淋巴瘤与非何杰金淋巴瘤、骨髓瘤、浆细胞瘤、急性髓细胞性(髓样)白血病和慢性髓样白血病；白血病，例如成年T-细胞白血病性淋巴瘤和慢性淋巴细胞性白血病；慢性髓增殖性疾病，例如真多血症、自发性血小板增多和特发性骨髓纤维变性；淋巴结增大(或肿胀)、胸膜渗漏的肿瘤、腹水肿瘤、其他各种腺瘤、脂肪瘤、纤维瘤、血管瘤、肌瘤、纤维肌瘤和内皮瘤。
本发明涉及抗肿瘤剂，包含作为有效组分的一种或至少两种选自含有5-元环的三萜及其生理学上可接受的盐或其衍生物的成员。在这一点上，含有5-元环的三萜是三萜的一种，通常含有5-元环的化合物由分子中的六个异戊二烯单位组成，其碳原子数基本上是30，但是包括在三萜中的碳原子数可以因生物合成过程中的重排、氧化、消去或烷基化而异。
这些物质可以从天然存在的植物中得到，或者可以人工制备。而且，商业上可得到的产品可以同样可取地用在本发明中。在上文中，优选的是从天然存在的植物中得到的那些。例如，山楂酸和/或其生理学上可接受的盐可以适合从橄榄植物和/或在橄榄油生产过程中生产的产品加以制备。因此，本文优选的实施方式包括抗肿瘤剂、肿瘤细胞增殖抑制剂、肿瘤细胞杀死剂或肿瘤细胞转移抑制剂，它包含如此得到的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐。在这方面，用在本说明书中的术语“橄榄”表示橄榄植物和/或在橄榄油生产过程中生产的产品。
含有5-元环的三萜一般在它们的骨架的基础上加以分类。其实例包括齐墩果烷型三萜、熊果烷型三萜、羽扇豆烷型三萜、忽布烷型三萜、塞拉烷型三萜、弗瑞德烷型三萜、蒲公英赛烷型三萜、taraxastane型三萜、multi-furolane型三萜和日耳曼烷型三萜。
本发明的发明人已经发现在这些物质中，含有特定5-元环的三萜，或者属于齐墩果烷型三萜的山楂酸、古柯二醇，属于熊果烷型三萜的乌索酸、山楂醇，和属于羽扇豆烷型三萜的桦木酸、桦木脑，具有优异的抗肿瘤效果，例如肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞杀死效果和肿瘤细胞转移抑制效果，从而完成了本发明。与此同时，发明人还发现，属于齐墩果烷型三萜的齐墩果酸、β-香树精，属于熊果烷型三萜的α-香树精，和属于羽扇豆烷型三萜的羽扇豆醇，它们的骨架类似于上文列举的那些，不过一点也不显示任何抗肿瘤效果，例如肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞杀死效果和肿瘤细胞转移抑制效果。换句话说，在含有5-元环的三萜中只有特定的物质才显示本发明的预期效果或抗肿瘤效果，结构类似于具有所需抗肿瘤效果的物质并且在本发明中发现的化合物不总是显示所需的抗肿瘤效果。例如，齐墩果酸和山楂酸在它们的结构上是相当相似的，但是其抗肿瘤效果是彼此不同的，山楂酸好于对方。本发明因而已经发现这类具有优异抗肿瘤效果的物质，它们在自然中是随机存在的。
本发明涉及抗肿瘤剂，包含作为有效组分的一种或至少两种选自山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物的成员，优选地涉及具有肿瘤细胞增殖抑制效果的抗肿瘤剂，优选地涉及具有肿瘤细胞杀死效果的抗肿瘤剂，优选地涉及具有肿瘤细胞转移抑制效果的抗肿瘤剂。
在这方面，本文所用的术语“生理学上可接受的盐”确切地表示从含有特定5-元环的三萜的羧基衍生的那些(其部分结构-COOX；X代表任意选择的阳离子物质)，在本发明中，这些盐不限于特定的种类，只要它们目前用在食品与饮料和医药组合物中。其具体实例包括碱金属盐，例如钠、钾和锂盐；碱土金属盐，例如钙、镁、钡和锌盐；烷基胺盐，烷基胺例如氨、甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、二乙胺、三乙胺、丙胺、丁胺、四丁胺、戊胺和己胺；烷醇胺盐，烷醇胺例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、丙醇胺、二丙醇胺、异丙醇胺和二异丙醇胺；其他有机胺的盐，有机胺例如哌嗪和哌啶；碱性氨基酸的盐，氨基酸例如赖氨酸、精氨酸、组氨酸和色氨酸。大体上，这些盐在水中的溶解度高于原来的含有特定5-元环的三萜，因此，盐优选尤其是用在本发明的含水系统中。
而且，本文所用的术语“衍生物”表示能够被生物化学或人工生成的那些，在本发明中，它们不限于特定的种类，只要它们能够被生物化学或人工生成。其实例包括具有醇酯基的衍生物、具有脂肪酸酯基的衍生物、具有烷氧基的衍生物、具有烷氧基甲基的衍生物、或苷。其中，具有醇酯基的衍生物、具有脂肪酸酯基的衍生物、具有烷氧基的衍生物和具有烷氧基甲基的衍生物在油中的溶解度高于原来的含有特定5-元环的三萜，因此，这些衍生物优选确切地用在本发明的油性系统中，而苷在水中的溶解度高于原来的含有特定5-元环的三萜，因此，苷优选用在尤其是本发明的水性系统中。
一部分这些衍生物还是自然界现有的，因而它们可以从天然存在的原料中分离，或者它们可以同样被人工生成。
因而，山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑可以通过转化为生理学上可接受的适当的盐或衍生物而提高它们在水中的溶解度或在油中的溶解度，因此，最终产物可以是任意设计的，以便它们具有改善了的处理能力、质量和所需效果。
本文所用的术语“醇酯基”表示一般作为羧基与醇的脱水反应的结果生成的官能团(部分结构-COOR；R代表任意的烃官能团)。更具体地，含有5-元环的三萜和具有醇酯基的衍生物确切地是从三萜羧基与醇生成的那些。在这方面，醇不限于特定的种类，但是其具体实例包括甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、烯丙醇、正丁醇、仲丁醇、叔丁醇、乙二醇、三甲基甲硅烷基醇、三乙基甲硅烷基醇、苯酚、苯甲醇和糖。其中，优选的是从乙醇、三乙基甲硅烷基醇、甲醇、正丙醇、异丙醇和三甲基甲硅烷基醇生成的衍生物。
本文所用的术语“脂肪酸酯基”表示一般作为羟基与脂肪酸的脱水反应的结果生成的官能团(部分结构-OCOR；R代表任意的烃官能团)。更具体地，本发明的含有5-元环的三萜和具有脂肪酸酯基的衍生物确切地是通过三萜羟基与脂肪酸的反应生成的那些。在这方面，可用在这里的脂肪酸是没有特别限制的，但是其具体实例是乙酸、乙酸酐、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸、新戊酸、己酸、辛酸、癸酸、十一酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、棕榈烯酸、硬脂酸、油酸、反油酸、异油酸、亚油酸、亚反油酸、亚麻酸、γ-亚麻酸、花生酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、山萮酸、二十二碳六烯酸、木蜡酸、蜡酸、褐煤酸和蜂花酸。其中，优选的是从乙酸、乙酸酐、己酸、辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、棕榈烯酸、硬脂酸、油酸、反油酸、亚油酸、亚反油酸、亚麻酸、γ-亚麻酸、花生酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、山萮酸和二十二碳六烯酸衍生或生成的衍生物。
本文所用的术语“烷氧基”表示作为羟基与醇的常规脱水反应的结果生成的官能团(部分结构-OR；R代表任意的烃官能团)。更具体地，本发明中含有5-元环的三萜和具有烷氧基的衍生物尤其是能够从三萜羟基和醇生成的那些。在这方面，醇不限于特定的种类，但是其具体实例包括甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、烯丙醇、正丁醇、仲丁醇、叔丁醇、乙二醇、三甲基甲硅烷基醇、三乙基甲硅烷基醇、苯酚、苯甲醇和糖。其中，优选的是从乙醇、三乙基甲硅烷基醇、甲醇、正丙醇、异丙醇和三甲基甲硅烷基醇生成的衍生物。
本文所用的术语“烷氧基甲基”表示一般作为羟甲基与醇的脱水反应的结果生成的官能团(部分结构-CH2OR；R代表任意的烃官能团)。更具体地，本发明中含有5-元环的三萜和具有烷氧基甲基的衍生物尤其是通过三萜羟基与醇的反应生成的那些。在这方面，可用在这里的醇是没有特别限制的，但是其具体实例包括甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、烯丙醇、正丁醇、仲丁醇、叔丁醇、乙二醇、三甲基甲硅烷基醇、三乙基甲硅烷基醇、苯酚、苯甲醇和糖。其中，优选的是从乙醇、三乙基甲硅烷基醇、甲醇、正丙醇、异丙醇和三甲基甲硅烷基醇生成的衍生物。
而且，本文所用的术语“苷”表示能够从尤其是上述具有醇酯基的衍生物、具有烷氧基的衍生物和具有烷氧基甲基的衍生物中的含有5-元环的三萜的羧基、羟基和羟甲基与糖生成的衍生物(部分结构-COOR、-OR、-CH2OR；R代表任意的糖部分)。在这方面，糖是没有特别限制的，但是其具体实例是葡萄糖、甘露糖、半乳糖、果糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖、鼠李糖、葡糖胺、半乳糖胺和葡糖醛酸，它们可以是α-异构体或β-异构体。而且，这些苷可以是与单糖或由二糖或由任意糖组合构成的高级糖组成的寡糖的衍生物。这些苷有些是自然中常见的，已知类名为“皂甙”。这些苷都可以用在本发明中。
本发明涉及抗肿瘤剂，包含作为有效组分的山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物。在这一点上，本文所用的“包含作为有效组分的”意味着药物包含每种组分的量足以实现所需的抗肿瘤效果或肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞杀死效果和肿瘤细胞转移抑制效果。“能够显示预期效果的量”意味着对受治疗者给药的包括在本发明抗肿瘤剂中的山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物的量确保在肿瘤治疗中的所需效果。
把山楂酸、古柯二醇视为齐墩果烷型三萜，把乌索酸、山楂醇视为熊果烷型三萜，把桦木酸、桦木脑视为羽扇豆烷型三萜，及其生理学上可接受的盐或其衍生物，其起源不限于任意特定种类，可用在这里的可以是来自天然产物的那些、人工合成的那些和商业上可得到的种类。
山楂酸和古柯二醇都是属于齐墩果烷型三萜的物质，已经知道它们存在于各种植物中。当在抗肿瘤剂中使用山楂酸、古柯二醇、其生理学上可接受的盐和/或其衍生物时，其起源不限于特定种类，它们可以是从天然来源分离的那些、人工合成的那些或商业上可得到的种类。
山楂酸是一种齐墩果烷型三萜和由下列化学式(1)代表的化合物。已经知道这种物质具有抗炎效果和抗组胺作用。这些物质已知存在于自然界中，例如橄榄、忽布、薄荷、石榴、丁香、鼠尾草和枣树。在本发明的抗肿瘤剂中，山楂酸及其生理学上可接受的盐或其衍生物的起源不限于特定种类，它们可以是从天然来源分离的那些、人工合成的那些或商业上可得到的种类，但是优选的是从天然来源衍生或分离的那些，例如橄榄、忽布、薄荷、石榴、丁香、鼠尾草和枣树。其特别稳定的供应来源例如是作为油和脂肪原料种植的橄榄植物。橄榄植物是相当优选的，因为它们是稳定和连续栽培的，它们包含高浓度的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐。优选用在这里的还包括从橄榄油生产过程所得产物(副产物)制备的那些。 本发明中，上述同样适用于山楂酸的生理学上可接受的盐和衍生物。更具体地，其“生理学上可接受的盐”在本文中表示从化学式(1)中的-COOH基团衍生的那些，盐的种类不限于任意特定种类，只要它们常用在食品与饮料和药物组合物中。山楂酸盐的具体实例是山楂酸钠、山楂酸钾、山楂酸铵、山楂酸二甲铵、山楂酸钙和山楂酸镁。其中优选的是山楂酸钠和山楂酸钾。
作为山楂酸的衍生物，例如各自在单一的位置被衍生的那些，例如可以列举山楂酸甲酯、山楂酸乙酯、山楂酸正丙酯、山楂酸异丙酯、山楂酸正丁酯、山楂酸三甲基甲硅烷基酯、山楂酸三乙基甲硅烷基酯、山楂酸β-D-吡喃葡糖基酯、山楂酸β-D-吡喃半乳糖基酯、3-O-乙酰基-山楂酸、3-O-丙酰基-山楂酸、3-O-丁酰基-山楂酸、3-O-戊酰基-山楂酸、3-O-辛酰基-山楂酸、3-O-月桂酰基-山楂酸、3-O-肉豆蔻酰基-山楂酸、3-O-棕榈酰基-山楂酸、3-O-棕榈油酰基-山楂酸、3-O-硬脂酰基-山楂酸、3-O-油酰基-山楂酸、3-O-异油酰基-山楂酸、3-O-亚油酰基-山楂酸、3-O-亚麻酰基-山楂酸、3-O-花生酰基-山楂酸、3-O-花生四烯酰基-山楂酸、3-O-山萮酰基-山楂酸、2-O-乙酰基-山楂酸、2-O-丙酰基-山楂酸、2-O-丁酰基-山楂酸、2-O-戊酰基-山楂酸、2-O-辛酰基-山楂酸、2-O-月桂酰基-山楂酸、2-O-肉豆蔻酰基-山楂酸、2-O-棕榈酰基-山楂酸、2-O-棕榈油酰基-山楂酸、2-O-硬脂酰基-山楂酸、2-O-油酰基-山楂酸、2-O-异油酰基-山楂酸、2-O-亚油酰基-山楂酸、2-O-亚麻酰基-山楂酸、2-O-花生酰基-山楂酸、2-O-花生四烯酰基-山楂酸、2-O-山萮酰基-山楂酸、3-O-甲基-山楂酸、3-O-乙基-山楂酸、3-O-叔丁基-山楂酸、3-O-三甲基甲硅烷基-山楂酸、3-O-三乙基甲硅烷基-山楂酸、3-O-苄基-山楂酸、3-O-β-D-吡喃葡糖基-山楂酸、3-O-β-D-吡喃半乳糖基-山楂酸、3-O-β-D-吡喃葡糖醛基-山楂酸、2-O-甲基-山楂酸、2-O-乙基-山楂酸、2-O-叔丁基-山楂酸、2-O-三甲基甲硅烷基-山楂酸、2-O-三乙基甲硅烷基-山楂酸、2-O-苄基-山楂酸、2-O-β-D-吡喃葡糖基-山楂酸、2-O-β-D-吡喃半乳糖基-山楂酸和2-O-β-D-吡喃葡糖醛基-山楂酸。
其中，特别优选的是山楂酸乙酯、山楂酸三乙基甲硅烷基酯、3-O-乙酰基-山楂酸、2-O-乙酰基-山楂酸、2-O-三乙基甲硅烷基-山楂酸、3-O-硬脂酰基-山楂酸、2-O-硬脂酰基-山楂酸、山楂酸-β-D-吡喃葡糖基酯、3-O-油酰基-山楂酸、3-O-亚油酰基-山楂酸、3-O-亚麻酰基-山楂酸、2-O-油酰基-山楂酸、2-O-亚油酰基-山楂酸、2-O-亚麻酰基-山楂酸、3-O-β-D-吡喃葡糖基-山楂酸和2-O-β-D-吡喃葡糖基-山楂酸。更特别优选的是山楂酸乙酯、山楂酸三乙基甲硅烷基酯、3-O-乙酰基-山楂酸、2-O-乙酰基-山楂酸、2-O-三乙基甲硅烷基-山楂酸、3-O-硬脂酰基-山楂酸和2-O-硬脂酰基-山楂酸。
上文是其中一个基团被衍生的衍生物实例，但是理所当然的是衍生物可以在两个或更多可能的和不同的位置被衍生，或者衍生为至少两种相应物。例如，其优选实例是山楂酸或上述优选的山楂酸酯的2，3-O-二乙酰基衍生物、2，3-O-二三乙基甲硅烷基衍生物和2，3-O-二硬脂酰基衍生物。另外，上文仅列举了与单糖的苷，但是理所当然的是它们可以是与二糖或高级寡糖的苷，包含各种糖的组合。
古柯二醇是一种齐墩果烷型三萜，具有由下列化学式(2)代表的结构，迄今已经知道具有抗炎作用等(Planta.Med.，1995，Vol.61，No.2，pp.182-185)。已知这种物质存在于自然界中，例如橄榄、向日葵、金盏花、阿拉伯树胶、红檀木和剑叶木姜子(Litsea lancifolia Vill)。在本发明的抗肿瘤剂中，古柯二醇或其衍生物的起源不限于任意特定的种类，古柯二醇或其衍生物可以是从天然来源制备或分离的那些、人工合成的种类或商业上可得到的种类。例如，优选用在这里的是从天然来源衍生或分离的那些，例如橄榄、向日葵、金盏花、阿拉伯树胶、红檀木和剑叶木姜子。确切地，橄榄是本发明优选的，更具体地，优选的是从橄榄植物和/或橄榄油生产过程所得产物衍生或分离的那些。 关于古柯二醇，上文同样适用于其生理学上可接受的盐和衍生物。
在这方面，各自在单一位置上被衍生的其衍生物实例包括但不限于3-O-乙酰基-古柯二醇、3-O-丙酰基-古柯二醇、3-O-丁酰基-古柯二醇、3-O-戊酰基-古柯二醇、3-O-辛酰基-古柯二醇、3-O-月桂酰基-古柯二醇、3-O-肉豆蔻酰基-古柯二醇、3-O-棕榈酰基-古柯二醇、3-O-棕榈油酰基-古柯二醇、3-O-硬脂酰基-古柯二醇、3-O-油酰基-古柯二醇、3-O-异油酰基-古柯二醇、3-O-亚油酰基-古柯二醇、3-O-亚麻酰基-古柯二醇、3-O-花生酰基-古柯二醇、3-O-花生四烯酰基-古柯二醇、3-O-山萮酰基-古柯二醇、28-O-乙酰基-古柯二醇、28-O-丙酰基-古柯二醇、28-O-丁酰基-古柯二醇、28-O-戊酰基-古柯二醇、28-O-辛酰基-古柯二醇、28-O-月桂酰基-古柯二醇、28-O-肉豆蔻酰基-古柯二醇、28-O-棕榈酰基-古柯二醇、28-O-棕榈油酰基-古柯二醇、28-O-硬脂酰基-古柯二醇、28-O-油酰基-古柯二醇、28-O-异油酰基-古柯二醇、28-O-亚油酰基-古柯二醇、28-O-亚麻酰基-古柯二醇、28-O-花生酰基-古柯二醇、28-O-花生四烯酰基-古柯二醇、28-O-山萮酰基-古柯二醇、3-O-甲基-古柯二醇、3-O-乙基-古柯二醇、3-O-叔丁基-古柯二醇、3-O-三甲基甲硅烷基-古柯二醇、3-O-三乙基甲硅烷基-古柯二醇、3-O-苄基-古柯二醇、3-O-β-D-吡喃葡糖基-古柯二醇、3-O-β-D-吡喃半乳糖基-古柯二醇、3-O-β-D-吡喃葡糖醛基-古柯二醇、28-O-甲基-古柯二醇、28-O-乙基-古柯二醇、28-O-叔丁基-古柯二醇、28-O-三甲基甲硅烷基-古柯二醇、28-O-三乙基甲硅烷基-古柯二醇、28-O-苄基-古柯二醇、28-O-β-D-吡喃葡糖基-古柯二醇、28-O-β-D-吡喃半乳糖基-古柯二醇和28-O-β-D-吡喃葡糖醛基-古柯二醇。
其中，特别优选的例如是3-O-乙酰基-古柯二醇、28-O-乙酰基-古柯二醇、3-O-油酰基-古柯二醇、3-O-亚油酰基-古柯二醇、3-O-亚麻酰基-古柯二醇、28-O-油酰基-古柯二醇、28-O-亚油酰基-古柯二醇、28-O-亚麻酰基-古柯二醇、3-O-β-D-吡喃葡糖基-古柯二醇和28-O-β-D-吡喃葡糖基-古柯二醇。
上文是其中一个基团被衍生的衍生物实例，但是理所当然的是衍生物可以在两个或更多可能的和不同的位置被衍生，或者衍生为至少两种相应物。例如可以列举3，28-O-二乙酰基-古柯二醇。另外，上文仅列举了与单糖的苷，但是同样理所当然的是它们可以是与二糖或高级寡糖的苷，包含各种糖的组合。
乌索酸和山楂醇都属于熊果烷型三萜，它们已知是存在于各种植物中的物质。另外，上文同样适用于其生理学上可接受的盐和衍生物。当在根据本发明的抗肿瘤剂中使用乌索酸、山楂醇、其生理学上可接受的盐或其衍生物，这些物质的起源不限于特定的种类，因而这些物质可以是从天然来源衍生或分离的那些、人工合成的种类和商业上可得到的种类，天然产物优选地用在本发明中。
乌索酸是一种熊果烷型三萜和具有由下列化学式(3)代表的结构的化合物。已经知道它具有各种效果，例如抗炎效果、抗动脉硬化效果、抗糖尿病效果和抗脂血效果(Jie Liu，Journal ofEthnopharmacology，1995，4957-68)。已经知道这种物质广泛分布在自然界中，例如苹果、樱桃和熊果的果实和叶。在本发明的抗肿瘤剂中，乌索酸、其生理学上可接受的盐或其衍生物决不限于具体种类，这些物质可以是从天然来源衍生或分离的那些、人工合成的种类和商业上可得到的种类，但是优选的是从天然来源衍生或分离的那些，例如苹果、樱桃和熊果。 关于乌索酸，上文同样适用于其生理学上可接受的盐和衍生物。
在这方面，乌索酸的生理学上可接受的盐的实例包括但不限于乌索酸钠、乌索酸钾、乌索酸铵、乌索酸二甲铵、乌索酸钙和乌索酸镁。
各自在单一位置上被衍生的乌索酸衍生物实例包括乌索酸甲酯、乌索酸乙酯、乌索酸正丙酯、乌索酸异丙酯、乌索酸正丁酯、乌索酸三甲基甲硅烷基酯、乌索酸三乙基甲硅烷基酯、乌索酸β-D-吡喃葡糖基酯、乌索酸β-D-吡喃半乳糖基酯、3-O-乙酰基-乌索酸、3-O-丙酰基-乌索酸、3-O-丁酰基-乌索酸、3-O-戊酰基-乌索酸、3-O-辛酰基-乌索酸、3-O-月桂酰基-乌索酸、3-O-肉豆蔻酰基-乌索酸、3-O-棕榈酰基-乌索酸、3-O-棕榈油酰基-乌索酸、3-O-硬脂酰基-乌索酸、3-O-油酰基-乌索酸、3-O-异油酰基-乌索酸、3-O-亚油酰基-乌索酸、3-O-亚麻酰基-乌索酸、3-O-花生酰基-乌索酸、3-O-花生四烯酰基-乌索酸、3-O-山萮酰基-乌索酸、3-O-甲基-乌索酸、3-O-乙基-乌索酸、3-O-叔丁基-乌索酸、3-O-三甲基甲硅烷基-乌索酸、3-O-三乙基甲硅烷基-乌索酸、3-O-苄基-乌索酸、3-O-β-D-吡喃葡糖基-乌索酸、3-O-β-D-吡喃半乳糖基-乌索酸和3-O-β-D-吡喃葡糖醛基-乌索酸。
在这些实例中，优选用在这里的包括乌索酸乙酯、乌索酸β-D-吡喃葡糖基酯、3-O-乙酰基-乌索酸、3-O-油酰基-乌索酸、3-O-亚油酰基-乌索酸、3-O-亚麻酰基-乌索酸和3-O-β-D-吡喃葡糖基-乌索酸，乌索酸乙酯是本发明特别优选的。
上文是其中仅有一个基团被衍生的衍生物实例，但是理所当然的是衍生物可以在两个或更多可能的和不同的位置被衍生，或者衍生为至少两种相应物。另外，上文仅列举了与单糖的苷，但是同样理所当然的是它们可以是与二糖或高级寡糖的苷，包含各种糖的组合。
山楂醇是一种熊果烷型三萜，具有由下列化学式(4)代表的结构，迄今已经知道是具有抗炎效果(Planta.Med.，1995，Vol.61，No.2，pp.182-185)和甘油磷酸酯脱氢酶抑制效果(J.P.KOKAI No.平9-67249)的物质。这种物质已知存在于自然界中，例如橄榄、熊果、鼠尾草、阿拉伯树胶和玉树。在本发明的抗肿瘤剂中，山楂醇或其衍生物的起源不限于任意特定的种类，这些物质可以是从天然来源衍生或分离的那些、人工合成的种类和商业上可得到的种类，优选用在这里的例如是来自天然存在的原料的那些，例如橄榄、熊果、鼠尾草、阿拉伯树胶和玉树。确切地，优选的是来自橄榄的那些，更具体为从橄榄植物和/或橄榄油生产过程所得产物衍生或分离的那些。 关于山楂醇，上文同样适用于其生理学上可接受的盐和衍生物。
在这方面，各自在单一位置上被衍生的其衍生物实例包括但不限于3-O-乙酰基-山楂醇、3-O-丙酰基-山楂醇、3-O-丁酰基-山楂醇、3-O-戊酰基-山楂醇、3-O-辛酰基-山楂醇、3-O-月桂酰基-山楂醇、3-O-肉豆蔻酰基-山楂醇、3-O-棕榈酰基-山楂醇、3-O-棕榈油酰基-山楂醇、3-O-硬脂酰基-山楂醇、3-O-油酰基-山楂醇、3-O-异油酰基-山楂醇、3-O-亚油酰基-山楂醇、3-O-亚麻酰基-山楂醇、3-O-花生酰基-山楂醇、3-O-花生四烯酰基-山楂醇、3-O-山萮酰基-山楂醇、28-O-乙酰基-山楂醇、28-O-丙酰基-山楂醇、28-O-丁酰基-山楂醇、28-O-戊酰基-山楂醇、28-O-辛酰基-山楂醇、28-O-月桂酰基-山楂醇、28-O-肉豆蔻酰基-山楂醇、28-O-棕榈酰基-山楂醇、28-O-棕榈油酰基-山楂醇、28-O-硬脂酰基-山楂醇、28-O-油酰基-山楂醇、28-O-异油酰基-山楂醇、28-O-亚油酰基-山楂醇、28-O-亚麻酰基-山楂醇、28-O-花生酰基-山楂醇、28-O-花生四烯酰基-山楂醇、28-O-山萮酰基-山楂醇、3-O-甲基-山楂醇、3-O-乙基-山楂醇、3-O-叔丁基-山楂醇、3-O-三甲基甲硅烷基-山楂醇、3-O-三乙基甲硅烷基-山楂醇、3-O-苄基-山楂醇、28-O-甲基-山楂醇、28-O-乙基-山楂醇、28-O-叔丁基-山楂醇、28-O-三甲基甲硅烷基-山楂醇、28-O-三乙基甲硅烷基-山楂醇、28-O-苄基-山楂醇、3-O-β-D-吡喃葡糖基-山楂醇、3-O-β-D-吡喃半乳糖基-山楂醇、3-O-β-D-吡喃葡糖醛基-山楂醇、28-O-β-D-吡喃葡糖基-山楂醇、28-O-β-D-吡喃半乳糖基-山楂醇和28-O-β-D-吡喃葡糖醛基-山楂醇。
在这些山楂醇衍生物中，优选用在这里的是3-O-乙酰基-山楂醇、28-O-乙酰基-山楂醇、3-O-油酰基-山楂醇、3-O-亚油酰基-山楂醇、3-O-亚麻酰基-山楂醇、28-O-油酰基-山楂醇、28-O-亚油酰基-山楂醇、28-O-亚麻酰基-山楂醇、3-O-β-D-吡喃葡糖基-山楂醇和28-O-β-D-吡喃葡糖基-山楂醇，3-O-乙酰基-山楂醇和28-O-乙酰基-山楂醇是本发明特别优选的。
上文是其中仅有一个基团被衍生的衍生物实例，但是理所当然的是衍生物可以在两个或更多可能的和不同的位置被衍生，或者衍生为至少两种相应物。例如可以列举3，28-O-二乙酰基-山楂醇。另外，上文仅列举了与单糖的苷，但是同样理所当然的是它们可以是与二糖或高级寡糖的苷，包含各种糖的组合。
桦木酸和桦木脑都属于羽扇豆烷型三萜，已经知道存在于各种植物中。另外，上文也适用于其生理学上可接受的盐和衍生物。当在根据本发明的抗肿瘤剂中使用桦木酸、桦木脑、其生理学上可接受的盐或其衍生物，这些物质的起源不限于特定的种类，这些物质可以是从天然来源衍生或分离的那些、人工合成的种类和商业上可得到的种类，天然存在的物质优选地用在本发明中。
桦木酸是一种羽扇豆烷型三萜，具有由下列化学式(5)代表的结构，迄今这种化合物已经知道具有各种效果，例如制癌、抗炎和伤口愈合促进效果(日本已审专利公报(以下称之为“J.P.KOKOKU”)No.平4-26623)、酒精吸收抑制效果(J.P.KOKAI No.平7-53385)和新发生长促进效果(J.P.KOKAI No.平9-157139)。在自然界中，这种物质已经知道例如以游离状态存在于Ophelia japonica、丁香、葡萄外皮和橄榄中，以皂甙形式存在于竹节人身(Panax japonicus C.A.Meyer)、胡萝卜和甜菜中。在本发明的抗肿瘤剂中，这些桦木酸、其生理学上可接受的盐或其衍生物的起源不限于特定的种类，这些物质可以是从天然来源衍生或分离的那些、人工合成的种类和商业上可得到的种类，优选用在这里的是来自天然来源的那些，例如Ophelia japonica、丁香、葡萄、橄榄、竹节人身(Panax japonicus C.A.Meyer)、胡萝卜和甜菜。确切地，优选的是来自橄榄的那些，更具体为来自橄榄植物和/或橄榄油生产过程所得产物的那些。 关于桦木酸，上文同样适用于其生理学上可接受的盐和衍生物。
在这方面，桦木酸的生理学上可接受的盐的实例包括但不限于桦木酸钠、桦木酸钾、桦木酸铵、桦木酸二甲铵、桦木酸钙和桦木酸镁，优选用在这里的是桦木酸钠和桦木酸钾。
桦木酸衍生物、例如仅在单一位置上被衍生的那些的实例包括桦木酸甲酯、桦木酸乙酯、桦木酸正丙酯、桦木酸异丙酯、桦木酸正丁酯、桦木酸三甲基甲硅烷基酯、桦木酸三乙基甲硅烷基酯、桦木酸β-D-吡喃葡糖基酯、桦木酸β-D-吡喃半乳糖基酯、3-O-乙酰基-桦木酸、3-O-丙酰基-桦木酸、3-O-丁酰基-桦木酸、3-O-戊酰基-桦木酸、3-O-辛酰基-桦木酸、3-O-月桂酰基-桦木酸、3-O-肉豆蔻酰基-桦木酸、3-O-棕榈酰基-桦木酸、3-O-棕榈油酰基-桦木酸、3-O-硬脂酰基-桦木酸、3-O-油酰基-桦木酸、3-O-异油酰基-桦木酸、3-O-亚油酰基-桦木酸、3-O-亚麻酰基-桦木酸、3-O-花生酰基-桦木酸、3-O-花生四烯酰基-桦木酸、3-O-山萮酰基-桦木酸、3-O-甲基-桦木酸、3-O-乙基-桦木酸、3-O-叔丁基-桦木酸、3-O-三甲基甲硅烷基-桦木酸、3-O-三乙基甲硅烷基-桦木酸、3-O-苄基-桦木酸、3-O-β-D-吡喃葡糖基-桦木酸、3-O-β-D-吡喃半乳糖基-桦木酸和3-O-β-D-吡喃葡糖醛基-桦木酸。
在桦木酸衍生物中，优选用在这里的是桦木酸乙酯、桦木酸β-D-吡喃葡糖基酯、3-O-乙酰基-桦木酸、3-O-油酰基-桦木酸、3-O-亚油酰基-桦木酸、3-O-亚麻酰基-桦木酸和3-O-β-D-吡喃葡糖基-桦木酸，桦木酸乙酯是本发明特别优选的。
上文是其中仅有一个基团被衍生的衍生物实例，但是理所当然的是衍生物可以在两个或更多可能的和不同的位置被衍生，或者衍生为至少两种相应物。另外，上文仅列举了与单糖的苷，但是同样理所当然的是它们可以是与二糖或高级寡糖的苷，包含各种糖的组合。
桦木脑是一种羽扇豆烷型三萜，具有由下列化学式(6)代表的结构，该化合物已经知道具有各种效果，例如生物蛋白变性抑制作用(J.P.KOKAI No.平9-67253)、甘油磷酸酯脱氢酶抑制作用(J.P.KOKAI No.平9-67249)和脂肪酶抑制作用(J.P.KOKAI No.平10-265328)。这种物质已知存在于自然界中，例如日本白桦树皮。在根据本发明的抗肿瘤剂中，桦木脑或其衍生物的起源不限于任意特定的种类，这些物质可以是从天然来源衍生和分离的那些、人工合成的种类和商业上可得到的种类，优选用在这里的是来自天然原料的那些，例如日本白桦树皮。 关于桦木脑，上文同样适用于其生理学上可接受的盐和衍生物。
在这方面，桦木脑衍生物、例如在单一位置上被衍生的那些的实例包括但不限于3-O-乙酰基-桦木脑、3-O-丙酰基-桦木脑、3-O-丁酰基-桦木脑、3-O-戊酰基-桦木脑、3-O-辛酰基-桦木脑、3-O-月桂酰基-桦木脑、3-O-肉豆蔻酰基-桦木脑、3-O-棕榈酰基-桦木脑、3-O-棕榈油酰基-桦木脑、3-O-硬脂酰基-桦木脑、3-O-油酰基-桦木脑、3-O-异油酰基-桦木脑、3-O-亚油酰基-桦木脑、3-O-亚麻酰基-桦木脑、3-O-花生酰基-桦木脑、3-O-花生四烯酰基-桦木脑、3-O-山萮酰基-桦木脑、28-O-乙酰基-桦木脑、28-O-丙酰基-桦木脑、28-O-丁酰基-桦木脑、28-O-戊酰基-桦木脑、28-O-辛酰基-桦木脑、28-O-月桂酰基-桦木脑、28-O-肉豆蔻酰基-桦木脑、28-O-棕榈酰基-桦木脑、28-O-棕榈油酰基-桦木脑、28-O-硬脂酰基-桦木脑、28-O-油酰基-桦木脑、28-O-异油酰基-桦木脑、28-O-亚油酰基-桦木脑、28-O-亚麻酰基-桦木脑、28-O-花生酰基-桦木脑、28-O-花生四烯酰基-桦木脑、28-O-山萮酰基-桦木脑、3-O-甲基-桦木脑、3-O-乙基-桦木脑、3-O-叔丁基-桦木脑、3-O-三甲基甲硅烷基-桦木脑、3-O-三乙基甲硅烷基-桦木脑、3-O-苄基-桦木脑、28-O-甲基-桦木脑、28-O-乙基-桦木脑、28-O-叔丁基-桦木脑、28-O-三甲基甲硅烷基-桦木脑、28-O-三乙基甲硅烷基-桦木脑、28-O-苄基-桦木脑、3-O-β-D-吡喃葡糖基-桦木脑、3-O-β-D-吡喃半乳糖基-桦木脑、3-O-β-D-吡喃葡糖醛基-桦木脑、28-O-β-D-吡喃葡糖基-桦木脑、28-O-β-D-吡喃半乳糖基-桦木脑和28-O-β-D-吡喃葡糖醛基-桦木脑。
在这些桦木脑衍生物中，优选用在这里的是3-O-乙酰基-桦木脑、28-O-乙酰基-桦木脑、3-O-油酰基-桦木脑、3-O-亚油酰基-桦木脑、3-O-亚麻酰基-桦木脑、28-O-油酰基-桦木脑、28-O-亚油酰基-桦木脑、28-O-亚麻酰基-桦木脑、3-O-β-D-吡喃葡糖基-桦木脑和28-O-β-D-吡喃葡糖基-桦木脑，3-O-乙酰基-桦木脑和28-O-乙酰基-桦木脑是本发明特别优选的。
上文是其中仅有一个基团被衍生的衍生物实例，但是理所当然的是衍生物可以在两个或更多可能的和不同的位置被衍生，或者衍生为至少两种相应物。例如可以列举3，28-O-二乙酰基-桦木脑。另外，上文仅列举了与单糖的苷，但是同样理所当然的是它们可以是与二糖或高级寡糖的苷，包含各种糖的组合。
这些天然存在的含有5-元环的三萜可以通过提取上文列举的各植物而得。更具体地，可以将每种植物体用水和/或有机溶剂提取，所得提取物可以经过下列方法分离和纯化溶剂萃取法——利用所需物质与杂质之间的溶解度差异的方法——、分步沉淀法、重结晶法、离子交换树脂法和液相色谱法，它们可以单独或以任意适当组合使用，或者可以反复采用。
尤其是，山楂酸和/或其生理学上可接受的盐可以将橄榄植物用水和/或有机溶剂提取，所得提取物可以经过下列方法分离和纯化所需物质溶剂萃取法——利用所需物质与杂质之间的溶解度差异的方法——、分步沉淀法、重结晶法、离子交换树脂法和液相色谱法，它们可以单独或以任意适当组合使用，或者可以反复采用。
任一橄榄植物(齐墩果树(Olea europaea L.))都可以用在本发明中，与它们的起源无关，例如国产的和欧洲种植的，或者与它们是否是可食用的或用于榨油的无关。掺在本发明抗肿瘤剂中的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐可以主要从天然橄榄植物的种子和果实中得到，进而这些物质同样可以从橄榄植物的种皮、叶、茎和胚和/或芽中制备。这些物质同样可以适当地从这些原料的干燥、粉碎和/或脱脂产物中得到。
而且，优选的是向上述橄榄植物或其脱脂产物果实加入水，或者使其受到湿化处理，例如熏蒸，由于这些橄榄植物或其脱脂产物果实溶胀至所需程度，因此显著提高提取效率。
确切地，优选的是使用橄榄植物的脱脂产物作为原料，因为山楂酸和/或其生理学上可接受的盐以高浓度存在其中，没有必要从所得山楂酸和/或其生理学上可接受的盐中除去油组分。
作为原料的脱脂产物可以是榨油残渣，从橄榄植物得到，在食用油纯化过程期间产生，或者是从溶剂、例如己烷提取过程弃去的残渣。
而且，橄榄植物或其脱脂产物可以用至少一种溶剂提取，例如选自烃溶剂，例如戊烷、己烷和庚烷，低级脂肪酸烷基酯，例如乙酸乙酯，和已知非水性有机溶剂，例如乙醚，从而除去其中所包括的脂质组分，如果需要的话，重复这种洗涤(或提取)步骤，得到适用于本发明的脱脂产物。
所要掺入本发明抗肿瘤剂中的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐因而可以通过将上述橄榄植物用水和/或有机溶剂提取加以生产。
这样一种用于从橄榄植物制备山楂酸和/或其生理学上可接受的盐的溶剂可以是亲水性有机溶剂或疏水性有机溶剂。其具体实例是已知的有机溶剂，例如醇，例如甲醇、乙醇、甘油、丙二醇和1，3-丁二醇，丙酮、四氢呋喃、乙腈、1，4-二噁烷、吡啶、二甲基亚砜、N，N-二甲基甲酰胺和乙酸，它们是亲水性有机溶剂；和已知的有机溶剂，例如己烷、环己烷、四氯化碳、氯仿、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、二乙醚、乙酸乙酯、苯和甲苯，它们是疏水性有机溶剂。而且，这些有机溶剂可以单独或以至少两种的任意组合使用。
在工业立场上，例如从渗透进入植物组织的能力和提取效率的观点来看，优选的是使用亲水性有机溶剂和含有水分的亲水性有机溶剂。其具体实例是醇，例如甲醇、乙醇、甘油、丙二醇和1，3-丁二醇；其他有机溶剂，例如丙酮、四氢呋喃和乙腈；和含有水的这些有机溶剂。所要掺入本发明抗肿瘤剂中的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐因而可以通过将上述橄榄植物用包含至少一种选自上述有机溶剂的成员的溶剂提取加以生产。
提取条件没有特别限制，但是提取温度例如从5至95℃，优选10至90℃，更优选15至85℃，进而提取同样可以适合在常温下进行。存在这样一种趋势，提取温度越高，提取效率越高。提取操作可取地可以在常压、压力或减压下进行，减压例如是通过抽吸实现的。而且，在进行提取操作时还有可能按照摇动或振动提取或者使用装有搅拌机的提取器，用于提高提取效率。提取时间可以因其他提取条件而异，但是一般从数分钟至数小时。提取时间越长，提取效率越高，但是可以适当地确定提取时间，同时考虑各种生产条件，例如生产设备和生产收率。
在上述提取操作中，溶剂的用量可以从1至100倍(质量/质量；相同的定义将适用于下文)、优选1至20倍于原料量。
在这方面，特别优选的是如果考虑对人体的安全性等，使用水、含有水分的低级醇和无水低级醇进行提取。
而且，优选的是如果考虑所得山楂酸和/或其生理学上可接受的盐的收率及其抗肿瘤效果的强度，使用低级醇含量不少于10质量％的含水低级醇进行提取。用在这里的含水醇更优选地具有从10质量％至95质量％的低级醇含量，最优选地，用在这里的含水醇具有从30质量％至95质量％的低级醇含量。
在这一点上，可用在本发明中的醇例如可以是伯醇，例如甲醇、乙醇、1-丙醇和1-丁醇；仲醇，例如2-丙醇和2-丁醇；叔醇，例如2-甲基-2-丙醇；和液体多元醇，例如乙二醇、丙二醇和1，3-丁二醇。这些溶剂可以单独或以至少两种的任意组合使用。
本文所用的术语“低级醇”表示已知的具有1至4个碳原子的醇，例如上面列举的伯醇、仲醇、叔醇和液体多元醇，这些溶剂可以单独或以至少两种的任意组合使用。
用在本发明中的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐可以通过从所得粗提取物中除去溶剂和水分而得到。
溶剂和水分可以从这样一种粗提取物中按照已知方法除去，例如在减压下蒸馏(或真空蒸馏)、在真空中或减压下干燥、冷冻干燥(或冻干)和喷雾干燥。
最终产物的状况不限于任意特定种类，无需除去溶剂和水分也可以使用产物。
本发明中，来自脱脂产物的提取物是优选的，因为它不含任何油溶性组分，例如甘油三酯、固醇和生育酚，因此，不需要除去这类杂质或者纯化所提取的产物。而且，脱脂产物包含榨油后的残渣，换句话说，在橄榄油榨取之后剩余的压缩渣滓和提取渣滓可以用在本发明中。因此，该方法是相当优异的，实现橄榄油的有效利用，从生产成本观点来看也被视为是优异的，因为该方法使用一般被废弃或用作饲料的材料。
而且，优选的是对含有所要掺入本发明抗肿瘤剂中的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐的提取物进行浓缩处理等，目的是进一步提高从橄榄植物提取的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐的抗肿瘤效果。
用于浓缩粗提取物的条件不限于具体种类，但是其实例包括利用提取物组分之间在水中的溶解度差异的那些。掺入本发明抗肿瘤剂中的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐是具有较低极性和水难溶性的化合物。将来自橄榄植物的粗提取物分为难溶于水的组分和/或不溶于水的组分或水难溶性或水不溶性组分和易溶于水的组分，同时利用山楂酸和/或其生理学上可接受的盐的上述特性，从而基本上浓缩粗提取物。包括在来自橄榄植物的粗提取物中的水难溶性或水不溶性组分与来自橄榄植物的全粗提取物相比，提高了抗肿瘤效果，从而可以确认在所得浓缩物中，山楂酸和/或其生理学上可接受的盐是基本上被浓缩的。
水难溶性或水不溶性组分可以这样容易得到，向水中加入橄榄植物粗提取物，同时搅拌，然后例如通过过滤收集所沉淀的部分。
另外，如果必要的话，掺入本发明抗肿瘤剂中的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐可以通过液-液分配方法浓缩，使用常用溶剂的组合。难以无条件地确定这类溶剂组合，但是其实例包括水与疏水性有机溶剂的组合。在这方面，这类疏水性有机溶剂的具体实例是已知的有机溶剂，例如己烷、四氯化碳、氯仿、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、二乙醚、乙酸乙酯、正丁醇、苯和甲苯。
山楂酸和/或其生理学上可接受的盐是难溶于水的，因此分馏所得疏水性有机溶剂相，从而除去不可取的水溶性组分。之后，除去溶剂，从而容易浓缩山楂酸和/或其生理学上可接受的盐。
而且，所要掺入本发明抗肿瘤剂中的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐优选地通过另外分馏和/或纯化上述提取物和/或浓缩物加以制备。这种处理允许山楂酸和/或其生理学上可接受的盐浓缩至高于预期组分经过上述处理和分离所达到的浓度因子。
分馏和/或纯化处理是相当有利的，例如在于它们颇为提高所得产物的抗肿瘤效果，它们同样除去杂质。换句话说，当上述提取物和/或浓缩物经过这些分馏和/或纯化处理后，可以回收山楂酸和/或其生理学上可接受的盐，为白色晶体，因此，这些处理是优选的，因为这些处理具有这样一个优点，可以将产物掺入抗肿瘤剂中，不会导致不可取的药物变色。
可用在这里的分馏和/或纯化方法是不能无条件定义的，但是可用在这里的其实例是例如利用重结晶方法、分步沉淀方法和色谱方法的那些。利用色谱方法、确切为液相色谱方法的方法是优选的，因为该方法允许所要掺入本发明抗肿瘤剂中的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐的分馏和/或纯化，收率高，不会导致任意上述组分的分解。液相色谱方法的具体实例是正相液相色谱、反相液相色谱、薄层色谱、纸色谱和高效液相色谱(HPLC)方法。这些方法都可以用在山楂酸和/或其生理学上可接受的盐的分馏和/或纯化中。确切地，正相液相色谱、反相液相色谱和高效液相色谱(HPLC)方法是本发明优选的，同时例如考虑分辨率、吞吐率和使用所需的步骤数。
在这方面，术语“正相液相色谱”例如表示下列方法。更具体地，该方法例如包含下列步骤，准备柱子，它的固定相包含硅胶，它的移动相例如包含己烷-乙酸乙酯混合溶剂或氯仿-甲醇混合溶剂；将来自橄榄植物的粗提取物或其浓缩物装上柱子，装载率从0.1至5％(wt(质量)/v(体积))；然后按照连续洗脱法，使用单一的移动相洗脱所需部分，或者按照逐步洗脱法，其中所用溶剂的极性是连续增加的。
反相液相色谱方法例如表示下列方法。更具体地，该方法包含下列步骤，准备柱子，它的固定相包含与十八烷基硅连接的二氧化硅(ODS)，它的移动相例如包含水-甲醇混合液、水-乙腈混合液或水-丙酮混合液；将来自橄榄植物的粗提取物或其浓缩物装上柱子，装载率从0.1至5％(wt(质量)/v(体积))；然后按照连续洗脱法，使用单一的移动相洗脱所需部分，或者按照逐步洗脱法，其中所用溶剂的极性是连续增加的。
高效液相色谱(HPLC)在原理上等同于上述正相液相色谱或反相液相色谱，它是用于分馏和/或纯化的高速、高分辨色谱方法。
上述方法优选地可以单独或以至少两种的任意组合使用，因而山楂酸和/或其生理学上可接受的盐可以被浓缩至相当的程度，所得产物基本上不含杂质。
进而，利用上述方法可以调整山楂酸和/或其生理学上可接受的盐的纯度，如果必要的话可以任意设计抗肿瘤效果的强度和产物的特性，这些方法可以单独或以至少两种的任意组合使用。
关于上述浓缩处理，优选地可以反复进行，并且可以联合使用进一步不同的浓缩处理。类似地，关于分馏-纯化处理，优选地可以反复进行，并且可以联合使用进一步不同的分馏-纯化处理。而且，有可能在浓缩处理完成后进行分馏-纯化处理；在分馏-纯化处理完成后进行浓缩处理；或者在浓缩处理完成后进行分馏-纯化处理，然后再次进行另外的浓缩处理。除上述以外的组合同样可以用在本发明中。
山楂酸和/或其生理学上可接受的盐可以适当地例如通过不同地联合上述提取处理、浓缩处理、分馏和/或纯化处理而得到。这类组合不限于具体种类，但是这一系列处理的具体实例如下例如，在将橄榄植物用水和/或亲水性有机溶剂提取后，从所得提取物中除去一部分或全部亲水性有机溶剂，回收沉淀在含水相中的水不溶性部分，从而浓缩提取物。所沉淀的水不溶性部分可以例如借助过滤和离心加以回收，但是所得水溶液如果必要的话可以对其进行另外的处理，例如加入水，搅拌，以提高其回收率。另外，从来自橄榄植物的提取物中除去水和/或亲水性有机溶剂所得干燥状态下的提取物同样可以对其进行另外的处理，例如加入水，搅拌，类似于上述，然后通过过滤回收所得水不溶物，从而浓缩干燥提取物。这种浓缩方法是优选的，因为它是一种在水性系统中的处理，因此安全性优于使用溶剂和各种机械与工具的浓缩。而且，这种方法也是优选的，因为作为原料的干燥提取物几乎不含任何油组分，在浓缩和/或纯化效率上是优并的。
高度纯化的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐可取地可以按照正相和/或反相色谱和/或重结晶法分馏和/或纯化这些浓缩物而得到。
作为替代选择，来自橄榄植物的提取物同样可以使用水-疏水性有机溶剂系统通过液-液分配方法加以浓缩。例如，从提取物中除去亲水性有机溶剂，如果必要的话向剩余水溶液加入水，然后向所得含水相加入疏水性有机溶剂。另外，干燥状态下的提取物同样可以使用水-疏水性有机溶剂系统通过液-液分配方法加以浓缩。例如，象上述方法那样向干燥提取物加入水，然后向所得含水相加入疏水性有机溶剂。高纯度山楂酸和/或其生理学上可接受的盐可取地可以按照正相和/或反相色谱和/或重结晶法分馏和/或纯化这些浓缩物而得到。
如果使用从天然原料分离并高度纯化的产物制备抗肿瘤剂、肿瘤细胞增殖抑制剂、肿瘤细胞杀死剂或肿瘤细胞转移抑制剂，那么能够提高每种药物的效果，可以消除污染物对每种药物的任何影响，并且能够制备无色至淡颜色和/或无臭至几乎无臭的药物。为此，优选地使用高度纯化的分离产物，因为在这些药物的制备中可以没有任何限制地使用任意载体和甜味剂。
另外，作为本发明主题的山楂酸等是包含在天然原料中的，但是从这些原料中分离的产物可以被衍生为盐和衍生物。其结果是，可以提高产物在水或油中的溶解度，因此，产物在特性上可以被广泛地设计，例如效果、质量和/或处理能力，不过天然产物本身、例如橄榄油在药物应用中是有限的。例如，当药物制剂是通过掺入油和脂肪制备的，天然原料照此例如在山楂酸含量和能够组合在一起的有效组分含量与种类上是有限的。不过，当使用从天然原料分离的产物及其盐或衍生物时，用户可以享受各种便利，以便能够确保所需量的有效组分，例如山楂酸，并且可以根据剂型适当地选择添加剂，例如赋形剂和辅助剂。而且与天然原料没有经过任何预处理相比，能够提高每种有效组分的效果。
另外，优选地提高例如用在本发明中的山楂酸的纯度，因为这将减少由可能存在于天然原料中的未鉴别物质引起的副作用。
而且，山楂酸及其生理学上可接受的盐在来自橄榄植物和/或橄榄油生产过程所得产物的山楂酸与生理学上可接受的盐混合物中的总含量优选地不少于95％，更优选为95％至99.99％。该含量例如可以按照气相色谱方法测定。
本发明的抗肿瘤剂包含山楂酸和/或其生理学上可接受的盐，但是抗肿瘤剂还可以通过掺入上述提取物和浓缩物加以制备。而且，例如可以控制浓缩和纯化的程度，例如以调整山楂酸和/或其生理学上可接受的盐的浓度，因而，可以向抗肿瘤剂适当掺入浓缩与纯化程度受控制的产物。更具体地，当需要更强的效果时，将产物浓缩，而在产物具有相当微弱效果即可的情况下，可以使用稀释的产物。因而，所得产物有效组分的浓度可以根据应用加以任意选择。
而且，其他抗肿瘤剂可以与本发明联合使用，因此，可以详细设计所得药物的抗肿瘤效果，预期通过与其他抗肿瘤剂的协同效果将颇为加强抗肿瘤效果。更具体地，预期抗肿瘤剂的抗肿瘤效果可以通过适当调整抗肿瘤效果的强度和作用机理加以设计。抗肿瘤效果的强度可以这样控制，当需要更强的效果时，浓缩含有有效组分的产物，当需要相当微弱效果或足够时，稀释产物。抗肿瘤效果的强度因而可以根据每种具体应用加以控制。作为替代选择，药物的抗肿瘤效果同样可以通过联合本发明的山楂酸等与除本发明以外的其他抗肿瘤剂加以控制。抗肿瘤效果的机理例如可以是肿瘤细胞增殖的抑制、肿瘤细胞的杀死和肿瘤细胞转移的抑制。这类作用可以通过联合山楂酸等与除本发明以外的抗肿瘤剂加以调整。
在本发明的抗肿瘤剂中，优选地使用橄榄油作为油组分，从而获得更可取的效果，例如抗肿瘤效果，因为橄榄油例如包含山楂酸。
而且，当山楂酸和/或其生理学上可接受的盐是从橄榄植物提取的时，与山楂酸等同时还提取了齐墩果酸和/或其生理学上可接受的盐。齐墩果酸和/或其生理学上可接受的盐具有癌发生促进剂抑制活性，在与山楂酸的相容性上是优异的。因此，这些组分的混合物可以直接掺入本发明的抗肿瘤剂中。这样一种混合物的使用是优选的，因为山楂酸和/或其生理学上可接受的盐的抗肿瘤效果可以由于与齐墩果酸等的协同效果而提高。当从橄榄植物中提取、分离和纯化山楂酸和/或其生理学上可接受的盐时，其条件的适当调整将允许齐墩果酸和/或其生理学上可接受的盐作为前者的混合物而被提取。还有可能从橄榄植物中单独提取山楂酸和/或其生理学上可接受的盐、和齐墩果酸和/或其生理学上可接受的盐，再混合这些组分。作为替代选择，还有可能混合山楂酸和/或其生理学上可接受的盐与齐墩果酸和/或其生理学上可接受的盐，它们分别是从不同原料中分离的。
能够掺入本发明抗肿瘤剂中的山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物具有抗肿瘤效果。更具体地，这些效果例如可以是肿瘤细胞增殖抑制作用、肿瘤细胞杀死作用和肿瘤细胞转移抑制效果。
肿瘤细胞增殖抑制作用是抑制肿瘤细胞的任何进一步增殖或生长，确切为已经在活体内发育的癌细胞，以便这些细胞不再危害活体。这种效果在临床上截断癌症的进展，药物的每日摄取显示预防效果或者可以颇为归因于肿瘤细胞进展在无形水平上的抑制。
肿瘤细胞杀死效果表示这样一种效果，药物使肿瘤细胞、确切为已经在活体内发育的癌细胞不可能维持细胞的作用或活性。这种效果在临床上恢复患有癌症的患者至正常，药物的每日摄取显示预防效果或者可以颇为归因于已发育的肿瘤细胞在无形水平上的消退。
肿瘤细胞转移抑制效果是这样一种效果，在肿瘤细胞、确切为已经在活体内发育的癌细胞例如通过血流转运至其他部位并经历增殖的过程中，当细胞存在于血流中时药物使癌细胞消退，或者当它们到达其他部位时药物使细胞增殖抑制或细胞消退。这种效果在临床上防止癌症在活体内传播，药物的每日摄取显示预防效果或者可以颇为归因于所致肿瘤细胞转移在无形水平上的抑制或控制。
肿瘤细胞增殖抑制效果和肿瘤细胞杀死或消退效果可以使用B-16黑瘤细胞按照下列方法加以测定。
更具体地，将B-16黑瘤细胞按所需数量接种在6-孔平板的每孔内，然后将平板放置在37℃和5％二氧化碳浓度下，从而培养细胞，在培养开始的第二天或5天后向每孔加入所要试验的样本溶液(山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物)，加入量足以达到所需浓度，在培养开始后第6天测定活细胞数，基于活细胞数计算细胞生长率，从而评价肿瘤细胞增殖抑制效果和肿瘤细胞杀死效果。将所得结果与没有加入任何供试样本所观察到的生长率(对照)进行比较。
山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物能够以浓度-依赖性方式抑制B-16黑瘤细胞的增殖或者消灭B-16黑瘤细胞，即使加入相当低的浓度也是如此。换句话说，山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物具有相当强的肿瘤细胞增殖抑制效果和肿瘤细胞杀死效果。已知作为癌发生促进剂抑制剂的齐墩果酸完全不能抑制B-16黑瘤细胞的增殖，而用在本发明中的山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物显示相当优异的肿瘤细胞增殖抑制效果和肿瘤细胞杀死效果。
而且，这些物质即使在低浓度下也是有效的，这些物质实现所需或预期肿瘤细胞增殖抑制效果和肿瘤细胞杀死效果所需的量是较小的，因此，它们将显示上述效果，而不伴有高危险的可能的副作用。这些物质在浓度-依赖性方式上是有效的，因此，其加入量可以响应于使用目的和所需效果的强度加以任意控制。
肿瘤细胞转移抑制效果例如可以按照恶性黑瘤转移抑制试验加以评价。更具体地，将提前制备的B16黑瘤细胞悬液静脉内注射到Wistar雌性大鼠内，从悬液静脉内注射后第2天开始每隔一天将按预定浓度溶解有每种供试物质的棉籽油通过腹膜内注射给药或者利用探子口服给药。在这一点上，仅将棉籽油对对照组动物给药。在B16黑瘤细胞注射后第15天从这些动物中摘取肺，检查，测定所转移的癌损伤的数量，从而计算转移抑制率。在所得转移抑制率的基础上评价每份供试样本的肿瘤细胞转移抑制效果。
关于肿瘤细胞转移抑制效果的评价，在作为已知的癌发生促进剂抑制剂的齐墩果酸给药组与对照组(没有给以有效组分)之间没有观察到这种效果有任何显著性差异，或者说齐墩果酸不具有任何肿瘤细胞转移抑制效果。另一方面，在山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物给药的动物组与对照组(没有给以有效组分)之间观察到这种效果有显著性差异，这清楚地表明这些物质能够抑制恶性黑瘤细胞的任何转移。换句话说，山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物具有相当强的肿瘤细胞转移抑制效果。
这些物质即使在较小剂量下也能够显示所需效果。因此，仅需要少量这些物质即可确保所需肿瘤细胞转移抑制效果的实现，它们将显示上述效果而不伴有高危险的可能的副作用。这些物质在浓度-依赖性方式上是有效的，因此，其加入量可以响应于使用目的和所需效果的强度加以任意控制。
本发明还涉及使用一种或至少两种选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的成员作为抗肿瘤剂的方法，其目的确切地是肿瘤细胞增殖的抑制、肿瘤细胞的消退和/或肿瘤细胞转移的抑制。理所当然的是本发明的抗肿瘤剂可以具体和单独用作肿瘤细胞增殖抑制剂、肿瘤细胞杀死剂或肿瘤细胞转移抑制剂。
本发明的抗肿瘤剂被用作预防剂或治疗剂，具有肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞杀死效果和肿瘤细胞转移抑制效果。
当本发明的抗肿瘤剂用作预防剂时，它可以用于任意肿瘤形成的抑制，用于在肿瘤细胞发育后立即抑制肿瘤细胞增殖和消灭肿瘤细胞。当抗肿瘤剂用作预防剂时，药物有效地显示其效果，例如通过在日常生活中规则地服用定量药物。因而，本发明抗肿瘤剂的这种预防性用途将抑制任意肿瘤发育，即使当在相当早期阶段存在肿瘤细胞的发育时，此时不显示任何自觉症状，即使在医疗机构的体格检查或诊断中也不能被检测到，药物能够控制和/或消灭已发育肿瘤细胞的增殖，药物具有相当优选的预防剂功能。当本发明抗肿瘤剂用作治疗剂时，药物能够用于抑制任意肿瘤细胞增殖和/或杀死之，抑制任意肿瘤细胞转移，换句话说，药物能够用于中断任意肿瘤进展和消灭之。掺入本发明抗肿瘤剂中的一种或至少两种选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的成员即使在小剂量下也足以显示它们的效果，因此，这些物质可以提供治疗剂，它们具有充分的肿瘤细胞增殖抑制作用，几乎没有副作用，安全性高。而且，当一种或至少两种选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的成员以不少于两倍于显示肿瘤细胞增殖抑制效果所需的量使用时，所得药物将预期是用于消灭肿瘤细胞的治疗剂。进而，任意肿瘤细胞转移都由于上述肿瘤细胞增殖抑制效果和肿瘤细胞杀死效果得以抑制，因此，本发明药物作为具有肿瘤细胞转移抑制效果的治疗剂也是有效的。
本发明的抗肿瘤剂可以通过口服或肠胃外途径稳定地对人和动物给药，例如作为药品或准药品。在这方面，肠胃外给药的实例包括静脉内注射、动脉内注射、肌内注射、皮下注射、皮内注射、腹膜内注射、脊柱内注射、硬膜外注射、经皮给药、经肺给药、经鼻给药、经肠给药、通过口腔给药和经粘膜给药，用在这类肠胃外给药途径中的剂型的实例包括注射剂、栓剂(例如直肠栓剂、尿道栓剂和阴道栓剂)、外用液体(例如注射剂、含漱剂、漱口水、热敷剂、吸入剂、喷雾剂、气雾剂、灌肠剂、涂剂、洗净剂、消毒剂、滴鼻剂和滴耳剂)、泥敷剂、经皮吸收带、皮肤外用制剂、软膏剂(例如糊剂、搽剂和洗剂)。其中，优选的是注射剂、外用液体和皮肤外用制剂。另外，用于口服给药的药物制剂包括内服片剂(例如未包衣片、糖衣片、包衣片、肠溶衣片和咀嚼片)、口腔给药片剂(例如颊用制剂、舌下片、锭剂和粘附片)、粉剂、胶囊剂(例如硬胶囊和软胶囊)、颗粒剂(例如包衣颗粒、丸剂、锭剂、液体制剂或药学上可接受的缓释药物制剂)。能够口服给药的液体制剂的具体实例是内服溶液、摇动混合物、悬液、乳剂、糖浆剂、干糖浆剂、酏剂、浸剂与煎剂和柠檬水剂。其中，优选的是内服片剂、粉剂、胶囊剂和颗粒剂。
这些药物制剂是按照已知药物制备方法、例如与药学上可接受的载体和/或稀释剂联合成药物组合物给药的。
用在这些药物制剂中的载体和赋形剂的实例是乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露糖醇、马铃薯淀粉、玉米淀粉、碳酸钙、磷酸钙、硫酸钙、结晶纤维素、粉碎的甘草和粉碎的龙胆。这些添加剂在根据本发明的抗肿瘤剂、肿瘤细胞增殖抑制剂、肿瘤细胞杀死剂或肿瘤细胞转移抑制剂中的含量不限于具体数值，但是优选从0至95质量％。
在这些药物制剂中，使用粘合剂，其实例是淀粉、黄蓍胶、明胶、糖浆、聚乙烯醇、聚乙烯醚、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素和羧甲基纤维素。这些粘合剂在根据本发明的抗肿瘤剂、肿瘤细胞增殖抑制剂、肿瘤细胞杀死剂或肿瘤细胞转移抑制剂中的含量不限于具体数值，但是优选从0至95质量％。
这些药物制剂可以包含崩解剂，其实例是淀粉、琼脂、粉碎的明胶、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、结晶纤维素、碳酸钙、碳酸氢钠和藻酸钠。崩解剂在根据本发明的抗肿瘤剂、肿瘤细胞增殖抑制剂、肿瘤细胞杀死剂或肿瘤细胞转移抑制剂中的含量不限于具体数值，但是优选从0至95质量％。
这些药物制剂同样可以包含润滑剂，其可用在这里的实例是硬脂酸镁、滑石、氢化植物油和聚乙二醇。润滑剂在根据本发明的抗肿瘤剂、肿瘤细胞增殖抑制剂、肿瘤细胞杀死剂或肿瘤细胞转移抑制剂中的含量不限于具体数值，但是优选从0至95质量％。
这些药物制剂同样可以包含色素，这样一种色素例如可以是药学上可接受的种类。
另外，在制备可注射溶液时，如果必要的话，向上述成分加入用于增溶的辅助剂，例如pH调节剂、缓冲剂、稳定剂、增溶剂、无水乙醇、丙二醇和液体聚乙二醇；和/或表面活性剂，例如聚氧乙烯硬化蓖麻油、聚山梨醇酯80和20，然后按照常用方法制备每种所需注射剂。
在制备片剂或颗粒剂时，片剂或颗粒剂如果需要的话可以包有蔗糖、明胶、羟丙基纤维素、纯化的虫胶、明胶、甘油、山梨糖醇、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、乙酸纤维素邻苯二甲酸酯、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、异丁酸甲酯、异丁酸聚合物，或者它可以包有至少两层这些材料。而且，它可以进一步是由乙基纤维素或明胶等物质制成的胶囊剂。
外用制剂例如可以是固体、半固体、半固体样或液体样药物制剂，用于经皮给药或经粘膜给药，例如通过口腔给药或经鼻给药。
液体药物制剂的实例包括药学上可接受的乳剂，例如胶乳或乳状洗剂和洗剂、外用酊剂和用于经粘膜给药的液体制剂。药物制剂例如可以包含乙醇、油组分、乳化剂作为常用稀释剂。
半固体药物制剂的实例包括软膏剂，例如油性软膏剂和亲水性软膏剂。这些半固体药物制剂例如包含水、凡士林、聚乙二醇、油组分和/或表面活性剂作为常用基质或载体。
半固体或固体药物制剂的实例是用于经皮给药或经粘膜给药(例如通过口腔给药或经鼻给药)的粘附剂，例如硬膏剂(例如橡皮膏和硬膏剂)、膜剂、带样制剂或泥敷剂。这种药物制剂例如可以包含橡胶聚合物，例如天然橡胶，合成橡胶，例如丁二烯橡胶、SBR和SIS；明胶，沉积形成剂，例如高岭土和氧化锌；亲水性聚合物，例如羧甲基纤维素钠和聚丙烯酸钠；增粘剂，例如丙烯酸树脂和液体石蜡；水，其他油组分和/或表面活性剂，作为常用基质或载体。
这些药物制剂可以进一步包含辅助剂，例如稳定剂、用于增溶的辅助剂、经皮吸收促进剂；和其他添加剂，例如芳香剂和防腐剂。
根据本发明的抗肿瘤剂、肿瘤细胞增殖抑制剂、肿瘤细胞杀死剂或肿瘤细胞转移抑制剂可以直接应用于人体的外部和/或内部肿瘤损伤，从而享受这些药物的效果，或者可以通过口服途径或者通过注射给药，同样享受这些药物的效果。山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物在根据本发明的抗肿瘤剂、肿瘤细胞增殖抑制剂、肿瘤细胞杀死剂或肿瘤细胞转移抑制剂中的含量可以根据各种因素而异，例如用药方法、摄取与给药及其期限和剂型，因而是不能无条件确定的，但是它不限于具体种类，只要能够确保所需效果。确切地，药物优选地包含山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸和/或桦木脑。具体地，含量优选地不少于0.0001质量％，更优选地不少于0.001质量％，进一步优选地不少于0.01质量％，更优选地不少于0.1质量％，更优选为0.0001至99.99质量％，更优选为0.001至99.99质量％，进一步优选为0.01至99.99质量％，更优选为0.1至99.99质量％，更优选为0.2至99.99质量％，更优选为0.5至99.99质量％，更优选为1至99.99质量％，但是含量不限于任何具体范围。
所要掺入根据本发明的抗肿瘤剂、肿瘤细胞增殖抑制剂、肿瘤细胞杀死剂或肿瘤细胞转移抑制剂中的山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物的浓度以及抗肿瘤剂的量可以适当地根据其使用目的和所需效果强度加以确定。
当使用山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物作为抗肿瘤剂的原料时，药物可以包含这些化合物的量优选地从1至99.99质量％，更优选地从10至99.99质量％，更优选地从30至99.99质量％，更优选地从50至99.99质量％，更优选地从70至99.99质量％，更优选地从90至99.99质量％。
而且，所要掺入根据本发明的抗肿瘤剂、肿瘤细胞增殖抑制剂、肿瘤细胞杀死剂或肿瘤细胞转移抑制剂中的山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物的剂量可以根据各种条件而异，例如接受给药的受治疗者的种类、年龄、性别、体重、症状程度和健康状况，因此是不能无条件确定的。不过，每天至少一次将药物按下列剂量对成人口服或肠胃外给药足矣优选地不少于0.1mg，更优选地不少于1mg，更优选为1mg至10000mg，更优选为10mg至10000mg，更优选为10mg至3000mg，更优选为100mg至1000mg，更优选为100mg至7500mg，更优选为200mg至5000mg，更优选为500mg至3000mg，以山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物的量表示。如果本发明的抗肿瘤剂是外用制剂，并且如果药物例如用量为10g，那么本发明抗肿瘤剂包含山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物的量优选地从0.001至50质量％，更优选地从0.001至30质量％，更优选地从0.01至30质量％，更优选地从0.01至10质量％，更优选地从0.1至1质量％，更优选地从0.1至20质量％，更优选地从0.2至15质量％，更优选地从0.5至10质量％，更优选地从1至5质量％，频率为每天至少一次，但是本发明不限于这种具体实施方式
。
本发明的抗肿瘤剂包含作为有效组分的山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物。山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物具有优异的肿瘤细胞增殖抑制效果、优异的肿瘤细胞杀死效果和优异的肿瘤细胞转移抑制效果，因此，本发明的抗肿瘤剂在临床上能够用在各种地方，用户因而能够享受药物的优异的抗肿瘤效果。另外，掺入本发明抗肿瘤剂中的山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物优选地是利用天然植物体作为原料制备的，因此，本发明的抗肿瘤剂具有低毒性，能够安全地给药，能够确保药物的稳定供应。确切地，山楂酸和/或其生理学上可接受的盐具有相当优异的肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞杀死效果和肿瘤细胞转移抑制效果，因此，本发明的抗肿瘤剂在临床上能够用在各种地方，用户因而能够享受药物的优异的抗肿瘤效果。而且，山楂酸和/或其生理学上可接受的盐优选地是从原料或橄榄植物中得到的，这些原料一直是作为食品使用的，因此，本发明的抗肿瘤剂具有相当低的毒性，能够安全地给药，能够确保药物的稳定供应。
实施例以下参照下列工作例，将更加详细地描述本发明，但是本发明决不限于这些具体实施例。
作为含有5-元环的三萜用在下列实施例中的古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸和桦木脑是购买的试剂。使用HPLC级的试剂，无需任何预处理，将其他试剂溶于乙醇，加热至其沸点，直至饱和点，然后冷却饱和溶液，从而重结晶试剂，过滤分离，蒸发至干，得到纯化的产物。从橄榄植物中提取山楂酸，纯化，确认其纯度是否为95％之后使用。下文将举例描述山楂酸的提取和/或分离操作细节。
制备例1将来自国产橄榄植物(齐墩果树(Olea europaea L.))的干燥果实(包括种子)(1kg)压碎或粉碎，然后向压碎的产物加入3L己烷，提取持续3小时。提取操作重复4次，得到脱脂的果实，从脱脂产物中除去种子，粉碎，再次用5体积己烷提取3小时，从而得到229g脱脂渣滓，其中已经完全除去了油组分。向脱脂渣滓加入10体积乙醇含量60质量％的乙醇水溶液，提取持续3小时，同时在室温下剧烈搅拌。过滤全部系统，浓缩所得滤液至干，得到112.7g提取物。
向100g提取物加入2L水，然后将所得混合物在室温下剧烈搅拌1小时。离心全部系统，通过滗析除去所得上清液，干燥剩余沉淀，得到10.0g浓缩物。
然后通过硅胶柱色谱分馏浓缩物，其中使用装有约40体积(400g)硅胶的柱子。首先，使洗脱溶液或3∶1己烷∶乙酸乙酯混合物流过柱子，数量为10倍于装柱硅胶体积(4000mL)，从而洗脱所有不希望的组分，然后使洗脱溶液或1∶1己烷∶乙酸乙酯混合物穿过柱子，数量为2.5倍于硅胶体积(1000mL)，从而洗脱所有不可取的组分。随后洗脱预期的山楂酸，使洗脱溶液或1∶1己烷∶乙酸乙酯混合物穿过硅胶柱，数量为10倍于装柱硅胶体积(4000mL)，从而得到含有粗山楂酸的部分。除去己烷和乙酸乙酯后，在真空中干燥，得到1.96g含有山楂酸的分馏产物。
而且，利用ODS柱色谱纯化这种含有粗山楂酸的分馏产物，使用装有十八烷基硅胶的柱子，数量为产物体积的约30倍(60g)。首先，使洗脱溶液或8∶2甲醇∶水混合物穿过柱子，数量为10倍于上柱硅胶体积(600mL)，从而洗脱所有不可取的组分。然后洗脱目标山楂酸，使洗脱溶液或8∶2甲醇∶水混合物穿过柱子，数量为30倍于上柱硅胶体积(1800mL)，从而得到含有纯化山楂酸的分馏产物。除去甲醇后，在真空中干燥含有山楂酸的部分，得到1.51g纯化的山楂酸1。
在此阶段，利用NMR、MS和GC方法分析纯化的山楂酸1，确认一部分纯化的山楂酸是钠盐和钾盐，其剩余的大部分是游离状态，其纯度以山楂酸表示不少于95％。
制备例2对意大利种植的橄榄(齐墩果树(olea europaea L.)进行榨油操作，得到500g榨油后的残渣，然后加入10体积乙醇含量65质量％的乙醇水溶液，随后在室温下提取3小时，同时剧烈搅拌。过滤全部体积的提取系统，然后浓缩所得滤液至干，得到20.2g提取物质。
向这种提取物质加入1L正丁醇和1L水，将所得混合物搅拌10分钟，然后将混合物分离为正丁醇相和含水相。从正丁醇相中除去正丁醇后，在真空中干燥所得残渣，得到13.3g浓缩物。
然后利用硅胶柱色谱分馏浓缩物，使用装有约40体积(500g)硅胶的柱子。首先，使洗脱溶液或3∶1己烷∶乙酸乙酯混合物流过柱子，数量为10倍于装柱硅胶体积(5000mL)，从而洗脱所有不希望的组分，然后使洗脱溶液或1∶1己烷∶乙酸乙酯混合物穿过柱子，数量为2.5倍于装柱硅胶体积(1250mL)，从而洗脱所有不可取的组分。随后洗脱目标山楂酸，使洗脱溶液或1∶1己烷∶乙酸乙酯混合物穿过硅胶柱，数量为10倍于装柱硅胶体积(5000mL)，从而得到含有粗山楂酸的部分。除去己烷和乙酸乙酯后，在真空中干燥，得到2.66g含有山楂酸的分馏产物。
而且，利用ODS柱色谱纯化这种含有粗山楂酸的分馏产物，使用装有十八烷基硅胶的柱子，数量为产物体积的约30倍(80g)。首先，使洗脱溶液或8∶2甲醇∶水混合物流过柱子，数量为10倍于上柱硅胶体积(800mL)，从而洗脱所有不希望的组分。然后洗脱目标山楂酸，使洗脱溶液或8∶2甲醇∶水混合物流过柱子，数量为30倍于装柱硅胶体积(2400mL)，从而得到含有纯化山楂酸的部分。除去甲醇后，在真空中干燥含有山楂酸的部分，得到2.06g纯化的山楂酸2。
在此阶段，利用NMR、MS和GC方法分析纯化的山楂酸2，确认一部分纯化的山楂酸是游离状态，其剩余的大部分是钠盐和钾盐，其纯度以山楂酸表示不少于97％。
山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸和桦木脑衍生物是如下制备的合成例1山楂酸乙酯在50mL氯仿中溶解4.5g山楂酸和1.0g三乙胺，另将1.1g亚硫酰氯溶于10mL氯仿，得到亚硫酰氯溶液，然后将山楂酸溶液在冰冷却下搅拌1小时，同时向山楂酸溶液滴加亚硫酰氯溶液。然后向反应系统加入3.2g乙醇，将所得混合物在冰冷却下搅拌3小时，同时滴加1.0g三乙胺的10mL氯仿溶液。反应完成后，萃取可溶于氯仿的组分，蒸馏除去氯仿，得到粗反应产物，后者经过硅胶色谱纯化，从而回收3.5g山楂酸乙酯。
合成例22，3-O-二乙酰基-山楂酸将山楂酸(2.0g)溶于100mL吡啶，向所得溶液加入50mL乙酸酐，将混合物搅拌过夜。蒸馏除去吡啶和乙酸酐后，将所得残余物溶于乙醚，将该乙醚相用1N盐酸水溶液洗涤一次、用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤一次、用纯水洗涤三次，向乙醚相加入硫酸镁，然后将混合物放置过夜。通过过滤从混合物中除去硫酸镁，蒸馏除去乙醚，所得粗反应产物然后经过硅胶柱色谱纯化，得到2.2g 2，3-O-二乙酰基-山楂酸。
合成例32，3-O-二-三乙基甲硅烷基-山楂酸三乙基甲硅烷基酯将山楂酸(1.0g)溶于200mL无水二甲基甲酰胺，在0℃下向所得溶液加入144.0mg咪唑和350μL三乙基甲硅烷基氯，密封反应容器，将其内容物搅拌2小时。蒸馏除去二甲基甲酰胺后，将所得残余物溶于乙醚，将乙醚相用1N盐酸水溶液洗涤一次、用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤一次、用纯水洗涤三次，向乙醚相加入硫酸镁，然后将混合物放置过夜。通过过滤从混合物中除去硫酸镁，蒸馏除去乙醚，所得粗反应产物然后经过硅胶柱色谱纯化，得到1.5g 2，3-O-二-三乙基甲硅烷基-山楂酸三乙基甲硅烷基酯。
合成例42，3-O-二硬脂酰基-山楂酸乙酯将合成例1所制备的山楂酸乙酯(1.0g)溶于50mL甲苯，相所得溶液加入5.0g三乙胺，再在冰冷却下向溶液逐渐加入6.0g硬脂酰氯，将所得混合物搅拌1小时，进一步搅拌9小时，同时混合物的温度逐渐恢复至室温。向混合物加入足量1N盐酸水溶液，然后用乙醚萃取，将乙醚相用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤一次、用纯水洗涤三次，向乙醚相加入硫酸镁，然后将混合物放置过夜。通过过滤从混合物中除去硫酸镁，蒸馏除去乙醚，所得粗反应产物然后经过硅胶柱色谱纯化，得到1.2g 2，3-O-二硬脂酰基-山楂酸乙酯。
合成例53，28-O-二乙酰基-古柯二醇将古柯二醇(5.0g)溶于250mL吡啶，向所得溶液加入100mL乙酸酐，将混合物放置过夜。蒸馏除去吡啶和乙酸酐后，将所得残余物溶于乙醚，将所得乙醚相用1N盐酸水溶液洗涤一次、用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤一次、用纯水洗涤三次，向乙醚相加入硫酸镁，然后将混合物放置过夜。通过过滤从混合物中除去硫酸镁，蒸馏除去乙醚，所得粗反应产物然后经过硅胶柱色谱纯化，得到5.4g 3，28-O-二乙酰基-古柯二醇。
合成例6乌索酸乙酯在50mL氯仿中溶解5.0g乌索酸和1.1g三乙胺，然后在冰冷却下搅拌1小时，同时向所得溶液滴加1.2g亚硫酰氯的10mL氯仿溶液。随后，向溶液加入3.5g乙醇，在冰冷却下搅拌3小时，同时向反应溶液滴加1.1g三乙胺的10mL氯仿溶液。反应完成后，通过氯仿萃取除去可溶于氯仿的组分，蒸馏除去氯仿，所得粗反应产物经过硅胶柱色谱纯化，从而回收3.8g乌索酸乙酯。
合成例73，28-O-二乙酰基-山楂醇将山楂醇(5.0g)溶于250mL吡啶，向所得溶液加入100mL乙酸酐，然后将混合物放置过夜。蒸馏除去吡啶和乙酸酐后，将所得残余物溶于乙醚，将所得乙醚相用1N盐酸水溶液洗涤一次、用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤一次、用纯水洗涤三次，向乙醚相加入硫酸镁，然后将混合物放置过夜。通过过滤从混合物中除去硫酸镁，蒸馏除去乙醚，所得粗反应产物然后经过硅胶柱色谱纯化，得到5.4g 3，28-O-二乙酰基-山楂醇。
合成例8桦木酸乙酯在50mL氯仿中溶解5.0g桦木酸和1.1g三乙胺，然后在冰冷却下搅拌1小时，同时向所得溶液滴加1.2g亚硫酰氯的10mL氯仿溶液。随后，向溶液加入3.5g乙醇，在冰冷却下搅拌3小时，同时向反应溶液滴加1.1g三乙胺的10mL氯仿溶液。反应完成后，通过氯仿萃取除去可溶于氯仿的组分，从萃取液中蒸馏除去氯仿，所得粗反应产物经过硅胶柱色谱纯化，从而回收3.8g桦木酸乙酯。
合成例93，28-O-二乙酰基-桦木脑将桦木脑(5.0g)溶于250mL吡啶，向所得溶液加入100mL乙酸酐，然后将混合物放置过夜。蒸馏除去吡啶和乙酸酐后，将所得残余物溶于乙醚，将所得乙醚相用1N盐酸水溶液洗涤一次、用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤一次、用纯水洗涤三次，向乙醚相加入硫酸镁，然后将混合物放置过夜。通过过滤从混合物中除去硫酸镁，从乙醚相中蒸馏除去乙醚，所得粗反应产物然后经过硅胶柱色谱纯化，得到5.4g3，28-O-二乙酰基-桦木脑。
试验例1肿瘤细胞增殖抑制效果和肿瘤细胞消退试验为了测定肿瘤细胞增殖抑制效果和肿瘤细胞杀死效果，按照下列方法进行试验。向6-孔平板内按2mL/孔分配培养基，然后按所需量接种B-16黑瘤细胞，之后培养黑瘤细胞，将平板或培养基放置在37℃和浓度5％的二氧化碳下。第二天，加入所制备的供试样本溶液至所需浓度，与每孔内容物混合，继续黑瘤细胞的培养。然后在培养开始后第5天交换培养基，再次向每孔加入供试样本溶液。第二天，除去培养基，回收所培养的黑瘤细胞，然后用PBS(磷酸盐缓冲盐水)洗涤细胞，测定活细胞数，然后按照下列方程1计算细胞生长率。在所测定的细胞生长率的基础上评价每份供试样本的肿瘤细胞增殖抑制效果和肿瘤细胞杀死效果。将结果与没有加入任何供试样本时所观察到的细胞生长率(对照)进行比较。
细胞生长率(％)＝(A/B)×100其中A是加入每份供试样本时所观察到的活细胞数，B是对照所观察到的活细胞数。
在细胞生长率的基础上评价上述效果，在培养黑瘤细胞的同时向每份培养基加入山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物，浓度如下表1所示。作为对比例，向培养基加入齐墩果酸、β-香树精、α-香树精和羽扇醇，从而利用上述相同方法测定和评价细胞生长率。所得结果总结在下表1中。
表1
*对比例表1所列结果表明，对比例β-香树精、α-香树精和羽扇醇完全不具有任何肿瘤细胞增殖抑制效果。另外，齐墩果酸具有癌发生促进剂(或肿瘤促进剂)抑制活性，仅在更高的浓度下显示相当微弱的肿瘤细胞增殖抑制效果。与此相反，发现山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物具有相当强的肿瘤细胞增殖抑制效果。确切地，山楂酸、乌索酸及其生理学上可接受的盐或其衍生物在不少于2倍于显示肿瘤细胞增殖抑制效果所需的浓度下显示相当强大的肿瘤细胞杀死效果。这样一种作用在齐墩果酸、β-香树精、α-香树精和羽扇醇中完全没有观察到。
上述证实按照本发明，可以提供具有相当优异的肿瘤细胞增殖抑制效果和肿瘤细胞杀死效果的抗肿瘤剂。
试验例2恶性黑瘤转移抑制效果试验为了评价每份供试样本的恶性黑瘤转移抑制效果，按照下列方法进行试验。将Wistar雌性大鼠(6周龄，平均体重160g)预先用具有AIN-93组成的粉状饲料制备物喂养一周，将这些动物分成5组(每组8只)，使平均体重相等，然后向每只大鼠静脉内注射预先制备的B16黑瘤细胞悬液。随后，将这些动物用具有AIN-93组成的粉状饲料制备物喂养，从B16黑瘤细胞注射后第2天开始每隔一天向每只动物静脉内注射或者利用探子口服给以已经按预定浓度溶解有山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑、合成例1与2化合物或齐墩果酸的棉籽油。在这一点上，向对照组仅给以棉籽油。在B16黑瘤细胞注射后第15天，取出每只动物的肺，检查，测定所转移的癌损伤的数量，从而按照下列方程2计算转移抑制率。在所得转移抑制率的基础上可以评价每份供试样本的肿瘤细胞转移抑制效果。
转移抑制率(％)＝[(D-C)/D]×100其中C是在每个动物组中观察到的所转移的癌损伤的平均数，D是在对照组中观察到的所转移的癌损伤的平均数。
利用下表2所示剂量和给药方法，检验山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物以及作为对照的棉籽油的转移抑制率(RMI)。另外，重复上述相同操作，但是使用齐墩果酸作为对比例，从而评价其转移抑制率(RMI)。所得结果总结在下表2中。
表2
正如将从上表2所列数据显而易见的是，与对照组相比，山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物在腹膜内给药组和口服给药组都能够显著(P＜0.05)抑制癌症向肺的任何转移。当齐墩果酸给药时，没有观察到任何显著性效果。
这些结果清楚地表明，山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物具有相当有效或高效的肿瘤细胞转移抑制效果。
产品例1注射剂
按照上述混合比例，将组分(1)与组分(2)充分混合，然后向上述混合物加入适量组分(3)，调整混合物的总体积至1mL，从而得到注射剂。在这一点上，该溶液可以在用适量等渗氯化钠溶液稀释后给药。
产品例2片剂
首先按上述混合比例将上述组分(1)至(4)充分混合在一起，然后加入组分(5)，混合在一起。将所得混合物压制成片。
包括在本发明抗肿瘤剂中的山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物具有优异的肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞杀死效果和肿瘤细胞转移抑制效果。确切地，山楂酸和/或其生理学上可接受的盐具有相当优异的肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞杀死效果和肿瘤细胞转移抑制效果。山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物可以人工制备，但是山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸和桦木脑同样可以例如从天然植物中获得，因此，它们可以提供相当安全的抗肿瘤剂。确切地，山楂酸和/或其生理学上可接受的盐是能够从橄榄植物中分离的组分，这些原料一直是作为食品使用的，因此，它们可以提供相当可取的抗肿瘤剂，具有较强的抗肿瘤效果和较高的安全性。
权利要求
1.抗肿瘤剂，包含作为有效组分的选自由山楂酸、古柯二醇、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物。
2.肿瘤细胞增殖抑制剂，包含作为有效组分的选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物。
3.肿瘤细胞杀死剂，包含作为有效组分的选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物。
4.肿瘤细胞转移抑制剂，包含作为有效组分的选自由山楂酸、古柯二醇、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物。
5.抗肿瘤剂，包含作为有效组分的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐。
6.肿瘤细胞增殖抑制剂，包含作为有效组分的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐。
7.肿瘤细胞杀死剂，包含作为有效组分的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐。
8.肿瘤细胞转移抑制剂，包含作为有效组分的山楂酸和/或其生理学上可接受的盐。
9.使用一种或至少两种选自由山楂酸、古柯二醇、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的成员的方法，用于实现至少一种选自由肿瘤细胞增殖抑制效果、肿瘤细胞杀死效果和肿瘤细胞转移抑制效果组成的组的效果。
10.肿瘤细胞增殖抑制剂，包含作为有效组分的乌索酸及其生理学上可接受的盐或其衍生物。
11.肿瘤细胞杀死剂，包含作为有效组分的乌索酸及其生理学上可接受的盐或其衍生物。
12.使用选自由乌索酸及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物的方法，用作肿瘤细胞增殖抑制剂或肿瘤细胞杀死剂。
13.抗肿瘤剂，包含选自由山楂酸、古柯二醇、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物；和载体和/或稀释剂。
14.抗肿瘤剂的原料，包含选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物。
15.使用选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物的方法，用作抗肿瘤剂的原料。
16.如权利要求1所述抗肿瘤剂，其中选自由山楂酸、古柯二醇、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物是从天然原料中提取的。
17.如权利要求2所述肿瘤细胞增殖抑制剂，其中选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物是从天然原料中提取的。
18.如权利要求3所述肿瘤细胞杀死剂，其中选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物是从天然原料中提取的。
19.如权利要求4所述肿瘤细胞转移抑制剂，其中选自由山楂酸、古柯二醇、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物是从天然原料中提取的。
20.选自由山楂酸、古柯二醇、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物在抗肿瘤剂制备中的用途。
21.选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物在肿瘤细胞增殖抑制剂制备中的用途。
22.选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物在肿瘤细胞杀死剂制备中的用途。
23.选自由山楂酸、古柯二醇、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物在肿瘤细胞转移抑制剂制备中的用途。
24.抑制肿瘤细胞增殖的方法，包含使选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物与肿瘤细胞接触的步骤。
25.杀死肿瘤细胞的方法，包含使选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物与肿瘤细胞接触的步骤。
26.抑制肿瘤细胞转移的方法，包含使选自由山楂酸、古柯二醇、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物与肿瘤细胞接触的步骤。
27.抑制肿瘤细胞增殖的方法，包含向肿瘤细胞内加入选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物的步骤。
28.杀死肿瘤细胞的方法，包含向肿瘤细胞内加入选自由山楂酸、古柯二醇、乌索酸、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物的步骤。
29.抑制肿瘤细胞转移的方法，包含向肿瘤细胞内加入选自由山楂酸、古柯二醇、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物的步骤。
全文摘要
本发明涉及抗肿瘤剂，它包含作为有效组分的选自由山楂酸、古柯二醇、山楂醇、桦木酸、桦木脑及其生理学上可接受的盐或其衍生物组成的组的化合物。
文档编号A61K31/191GK1450900SQ01815073
公开日2003年10月22日 申请日期2001年7月25日 优先权日2000年7月31日
发明者久野宪康, 篠原刚, 乾利之 申请人:日清奥利友株式会社