银黄眼用制剂及其制备方法

专利名称：银黄眼用制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及了一种组合物在制备眼睛局部用药的药物中的新用途，特别是其制备为滴眼液和眼用膜制剂。
背景技术：
“红眼病”，中医又叫“天行赤眼”，临床称之为急性卡他性结膜炎，是结膜炎临床症状表现最严重的一种结膜病。“红眼病”一般是由细菌或病毒感染引起的，例如腺病毒(AdV)、金黄色葡萄球菌等。它是侵害眼球的多发病，大面积流行周期为6至8年，每年均在各地一定范围内流行。因其具有发病急、传播快、流行广、传染性强的特点，故医学专家们又称之为夏季的眼科“瘟疫”。
“单纯疱疹病毒(HSV)”引起的角膜感染称为“单纯疱疹病毒性角膜炎”。眼部感染是由单疱病毒I型病毒引起，人是HSV唯一的自然宿主，其对人的传染性很强。是当今世界上危害严重的感染性眼病之一，发病率占角膜病的首位。其特点是多类型、易复发、发病机制与免疫状态有关。由于抗生素和皮质类固醇的广泛应用，其发病率有明显上升趋势，往往因反复发作而严重危害视觉功能，临床尚无有效控制复发的药物，因而仍为重要的致盲眼病之一。
“急性卡他性结膜炎“和“单纯疱疹病毒性角膜炎”目前多为西药治疗。由于西药多有一定的毒副作用，长期使用，细菌和病毒容易产生抗药性，从而使西药的疗效下降，而中药制剂的毒副作用小，不易产生耐药性。现已有的中药银黄制剂较多，有口服液、颗粒、含片、胶囊、软胶囊、片剂、注射剂，也有将银黄注射液用于局部滴眼治疗结膜炎和角膜炎的相关报道(李东平.银黄注射液结膜治疗树枝状角膜炎.中国社区医师.2002，18(14)26；曹广菲，张崇智，李同和.中西医结合治疗流行性结膜炎临床体会.河北中西医结合杂志.1996，5(3)111)，但没有提供局部眼用制剂及其质量标准。将银黄注射液用于局部滴眼治疗结膜炎和角膜炎，虽有较好的疗效的报道，然而由于眼部特殊的生理环境，及注射液剂型的限制，直接将注射液用于滴眼液，对眼部刺激大，且注射为玻璃安瓿包装，用于滴眼液极不方便，因此不能直接作为滴眼液使用；另外，由于用药途径不同，用药部位不同，对于金银花提取物、黄芩苷之配比关系尚需进一步筛选，以确定最佳药效配比；临床使用剂量也应进行研究以确定临床安全有效使用范围。目前尚无相关以金银花、黄芩为原料配伍作为滴眼液的配比和剂量的报道。

发明内容
为了解决克服上述问题，本发明所要解决的技术方案是提供了以金银花和黄芩苷为原料的局部眼用药物制剂，特别是作为滴眼液和眼用膜剂能有效的治疗急性卡他性结膜炎和单纯疱疹病毒性角膜炎。本发明的另一技术方案是提供了该眼用制剂的制备方法。
本发明提供了一种用于治疗急性卡他性结膜炎或单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用制剂，它是由金银花提取物、黄芩苷为原料制成的眼用制剂。
该眼用制剂为滴眼液、眼用膜剂。
其中，所述的滴眼液中每ml含有下列成份金银花提取物(以绿原酸计)6.25-18.75mg黄芩苷 10-30mg渗透压调整剂0-20mg抑菌剂 0.4-1.2mg粘度调整剂 0-20mg。
进一步地，所述的滴眼液的渗透压调整剂为硼砂、氯化钠或葡萄糖中的一种；所述滴眼液的抑菌剂为对羟基苯甲酸乙酯、杜灭芬、硼酸、苯乙醇、双氯苯双胍己烷或氯化苯甲烃胺中的一种；所述滴眼液的pH调节剂为磷酸盐缓冲液、硼酸缓冲液、硼酸盐缓冲液、氢氧化钠或氨水中的一种或其混合；所述滴眼液的粘度调整剂为甲基纤维素、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基乙基纤维素中的一种或混合。
更进一步地，所述的滴眼液中每ml含有下列成份金银花提取物(以绿原酸计)12.5mg黄芩苷 20.0mg对羟基苯甲酸乙酯0.8mg。
本发明还提供了该滴眼液制备方法包括如下步骤
将金银花提取物加蒸馏水溶解；黄芩苷加NaOH溶液充分溶解；加入其它辅料，调节pH为6～8，冷藏静止过夜，滤过，灭菌，分装，即得。
所述的眼用膜剂每片含有如下重量配比的原料金银花提取物(以绿原酸计)1.875-5.625mg黄芩苷 3.000-9.000mg成膜材料10.00-30.00mg增塑剂 0.005-0.015mg表面活性剂 0.05-0.15mg进一步地，所述眼用膜剂的成膜材料为聚乙烯醇(05-88)、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素纳、羧甲基纤维素、乙基纤维素或甲基纤维素；所述眼用膜剂的增塑剂为甘油、乙二醇或山梨醇；所述眼用膜剂的表面活性剂为聚山梨酯-80或十二烷基硫酸纳。聚乙烯醇(05-88)指聚合度为500、醇解度为88％，其水溶性较大，在温水中能很快的溶解。
更进一步地，所述的眼用制剂每片含有如下重量配比的原料药物金银花提取物(以绿原酸计)3.75mg黄芩苷 6mg聚乙烯醇20mg甘油0.01mg聚山梨酯-80 0.1mg。
本发明还提供了该眼用膜剂的制备方法包括如下步骤取成膜材料、增塑剂、表面活性剂等，加适量蒸馏水，搅拌至膨胀后加热使溶解，溶液趁热过筛；取金银花提取物、黄芩苷混合均匀，过筛，缓缓加入上述胶浆，搅拌均匀；制膜，切成小块，密封即得。
本发明眼用制剂是一种具有抗菌、抗病毒双重作用的纯中药制剂，通过药效试验说明，其原料药物配伍剂量科学，药效显著，且本发明滴眼液澄明度高、眼用膜剂和滴眼液均无刺激性、无毒、安全性高，不易产生耐药性，治愈率高、疗程短，质量稳定，价格低，采用定量泵滴头包装，患者使用时方便，本产品的开发为临床医生和患者提供了一种新的用药选择。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式
，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施例方式
实施例1 本发明局部眼用制剂的制备1、金银花提取物和黄芩苷的制备见部颁标准中药成方制剂(第十九册)，197页，1998年6月。
2、本发明滴眼液的制备工艺具体步骤是(1)、金银花提取物(绿原酸计)以12.0g取适量蒸馏水溶解；(2)、黄芩苷20.0g加适量8％(g/ml体积)NaOH充分溶解；(3)、对羟基苯甲酸乙酯0.3g，氯化钠8.5g分别加适量蒸馏水溶解；(4)、称取聚乙烯吡咯烷酮0.02g，搅拌充分溶解于适量蒸馏水中；(5)、将上述四液合并，加蒸馏水到1000ml，用氢氧化钠溶液调节pH为7.0，冷藏静止过夜，滤过；(6)、滤液密封，100℃流通蒸气灭菌30分钟，分装即得。
本品每毫升含绿原酸12.0mg，黄芩苷(以纯品计)20.0mg。
3、本发明眼用膜剂的制备工艺具体步骤是(1)、聚乙烯醇(05-88)20g、甘油0.01g，聚山梨酯-80 0.1g，加蒸馏水150ml，搅拌至膨胀后于90℃水浴上加热使溶解，溶液趁热过5号筛；(2)、金银花提取物(绿原酸计)3g、黄芩苷5g，混合均匀，过200目筛，然后缓慢加入聚乙烯醇胶浆，搅拌均匀；(3)、制膜，切成5mm×10mm×0.1mm的小块，密封即得；(4)、每小块含绿原酸3mg，黄芩苷5mg。
本发明眼用膜剂呈黄色至棕黄色，外观完整光洁、厚度一致、色泽均匀、无明显气泡；本品厚度范围在0.1-1.0mm之间。
实施例2 本发明滴眼液制备工艺1、金银花提取物(绿原酸计)以9.6g取适量蒸馏水溶解；2、黄芩苷24g加适量8％(g/ml体积)NaOH充分溶解；3、对羟基苯甲酸乙酯0.2g，硼砂3g分别加适量蒸馏水溶解；4、称取聚乙二醇0.01g，搅拌充分溶解于适量蒸馏水中；
5、将上述四液合并，加蒸馏水到1000ml，用氢氧化钠溶液调节pH为7.0，冷藏静止过夜，精滤；6、滤液密封，100℃流通蒸气灭菌30分钟，分装即得。
本品每毫升含绿原酸9.6mg，黄芩苷(以纯品计)24mg。
实施例3 本发明滴眼液制备工艺1、金银花提取物(绿原酸计)以12.5g取适量蒸馏水溶解；2、黄芩苷20g加适量8％(g/ml)NaOH充分溶解；3、对羟基苯甲酸乙酯0.3g，氯化钠8.5g分别加适量蒸馏水溶解；4、称取聚乙二醇0.06g，搅拌充分溶解于适量蒸馏水中；5、将上述四液合并，加蒸馏水到1000ml，用8％(g/ml)氢氧化钠溶液调节PH为7.0，冷藏静止过夜，精滤；6、滤液密封，100℃流通蒸气灭菌30分钟，分装即得。
本品每毫升含绿原酸12.5mg，黄芩苷(以纯品计)20mg。
实施例4 本发明眼用膜剂制备工艺1、聚乙烯醇(05-88)100g、甘油35g，聚山梨酯-80 3g，加蒸馏水200ml，搅拌至膨胀后于90℃水浴上加热使溶解，溶液趁热过5号筛；2、金银花提取物(绿原酸计)3.75g、黄芩苷6g，混合均匀，过200目筛，然后缓慢加入聚乙烯醇胶浆，搅拌均匀；3、制膜，切成5mm×10mm×0.1mm的小块，密封即得；4、每小块含绿原酸3.75mg，黄芩苷6mg。
实施例5 本发明眼用膜剂制备工艺1、聚乙烯醇(05-88)100g、乙二醇5g，聚山梨酯-80 4g，加蒸馏水150ml，搅拌至膨胀后于90℃水浴上加热使溶解，溶液趁热过5号筛；2、金银花提取物(绿原酸计)3.6g、黄芩苷6.1g，混合均匀，过200目筛，然后缓慢加入聚乙烯醇胶浆，搅拌均匀；3、制膜，切成5mm×10mm×0.1mm的小块，密封即得；4、每小块含绿原酸3.6mg，黄芩苷6.1mg。
本发明眼用膜剂呈黄色至棕黄色，外观完整光洁、厚度一致、色泽均匀、无明显气泡；本品厚度范围在0.1-1.0mm之间。
使用方法敷于患处，每次一块、每日一次。
以下通过药效学试验证明本发明的有益效果。
试验例1、本发明药物滴眼液对家兔试验性单纯疱疹病毒感染性角结膜炎的治疗作用1.实验材料1.1药物a、本发明药物滴眼液1规格8ml/支(含100mg绿原酸和160mg黄芩苷)，相当于46.3mg金银花提取物/ml，21.7mg黄芩提取物/ml；自制。
制备方法按实施例1的制备方法制备。
b、黄芩苷滴眼液棕红色澄明液体，规格每ml含黄芩苷40mg，自制。
制备方法精密称取黄芩苷40g，用8％的氢氧化钠溶液(g/ml)适量溶解，加注射用水至约950ml，用8％NaOH调节pH值约7.5，加适量活性炭，置水浴微热30分钟，滤过，搅拌，煮沸30分钟，加注射用水调整至1000ml，滤过，即得。
c、金银花提取物滴眼液黄色澄明液体，规格每ml含金银花提取物(以绿原酸计)25mg，自制。
制备方法金银花提取物(以绿原酸计)25g，加水适量溶解，加注射用水至约950ml，用8％NaOH调节pH值约7.5，加适量活性炭，置水浴微热30分钟，滤过，搅拌，煮沸30分钟，加注射用水调整至1000ml，滤过，即得。
d、本发明药物滴眼液2规格8ml/支(含52mg绿原酸和208mg黄芩苷)，相当于24.1mg金银花提取物/ml，28.3mg黄芩提取物/ml，自制。
制备方法按实施例1的制备方法制备。
e、本发明药物滴眼液3规格8ml/支(含130mg绿原酸和130mg黄芩苷)，相当于60.2mg金银花提取物/ml，17.7mg黄芩提取物/ml，自制。
制备方法按实施例1的制备方法制备。
f、阿昔洛韦滴眼液本品为无色的澄明液体。适应症抗病毒药。用于单纯疱疹性角膜炎。用法用量滴入眼睑内，每2小时一次。规格8ml∶8mg，由湖北潜江制药股份有限责任公司生产。产品批号20030101，生产日期03年01月05日，有效期至2004年07月。
1.2病毒株 单纯疱疹病毒(HSV)1型，浓度为100TCID50。由四川省人民医院病毒检验科进行病毒的培养、制备和提供。
1.3动物 日本大耳白兔，一级，体重2.0～2.2kg，雌雄兼用。由四川省动物专委会饲养场提供。动物质量合格证川实动管质第99-11号。
2、试验方法2.1分组与药物剂量 将家兔35只按性别搭配分成7组，每组5只(雌2雄3)10只眼用于实验。分别作为①空白对照组生理盐水(等体积)，滴眼；②本发明药物滴眼液1组③金银花提取物组④黄芩苷组⑤本发明药物滴眼液2组⑥本发明药物滴眼液3组，两眼同时滴药，0.05ml/眼/次，8次/天。⑦阿昔洛韦滴眼液组0.4mg/kg(两眼同时滴药，0.05ml/眼/次，8次/天)2.2角结膜炎模型的复制方法用局部麻醉药0.5％地卡因溶液对家兔双眼滴眼进行局部麻醉，以5号注射针头针尖轻轻划伤(划“#”)角膜。然后对家兔两只眼的下眼睑与球结膜交接处注射单纯疱疹病毒(HSV1型，浓度为100TCID50)的病毒混悬液0.1ml/眼(主要致结膜病变)后，再以单纯疱疹病毒混悬液0.05ml/眼(主要致角膜病变)滴入双眼结膜囊内，闭合眼睑并按摩1分钟，同时造成病毒感染性结膜炎和角膜炎的模型。
2.3给药途经与方法在注射单纯疱疹病毒(HSV1型)造成结膜炎模型后第2天分组，并开始用本发明药物滴眼液或阿昔洛韦滴眼液(或生理盐)滴眼治疗，连续13天。
2.4观察指标①单纯疱疹病毒(HSV1型)角结膜炎病变程度的观察在注射单纯疱疹病毒(HSV1型)造成角膜炎及结膜炎模型后24小时(第2天)观察病变程度，并根据角膜炎及结膜炎症的病变轻重程度将家兔搭配分组，然后用本发明药物滴眼液或阿昔洛韦滴眼液或生理盐水滴眼治疗。每天上午第1次滴眼药水之前，先检查和记录病变程度后再用滴眼液。
角膜病变程度分级评分标准角膜无浑浊0分；散在成弥漫性浑浊，虹膜清晰可见1分；半透明易分辨，虹膜模糊不清2分；出现灰白色半透明区，虹膜细节不清，瞳孔大小勉强可见3分；角膜不透明，虹膜无法辨认4分。
虹膜病变程度分级评分标准正常0分；皱褶明显加深、充血、肿胀，角膜周围轻度充血，瞳孔对光仍有反应1分；出血/肉眼可见坏死/对光无反应(或其中一种)2分。
②单纯疱疹病毒(HSV1)结膜炎的炎细胞总数、炎细胞面积总和、炎细胞平均黑度总和与炎细胞积分光密度总和的测定给药治疗结束，将家兔切断颈总动脉放血处死，剖取家兔下眼睑注射单纯疱疹病毒部位的睑结膜组织块放入FAA液浸泡。浸泡固定48小时以后，逐级酒精脱水，二甲苯透明，浸蜡，石蜡包埋，将睑结膜病灶组织常规切片4μm，切片HE染色。
2.5统计学方法数据用x±s表示，两组之间的比较用Dunnett t检验。
2.6试验结果(1)对家兔单纯疱疹病毒性角结膜炎的实验治疗作用(对角膜病变、虹膜病变、炎症结膜的充血、水肿和眼分泌物程度的影响)本发明药物滴眼液及阳性对照药物阿昔洛韦滴眼液具有显著的治疗作用。本发明药物滴眼液滴眼治疗2天以后，对角膜、结膜的病变均具有显著的疗效。其疗效呈量效关系变化，黄芩苷组用药7天、金银花组用药9天以后，对角膜的病变才具有显著的疗效。本发明药物滴眼液滴眼治疗2天后，可使结膜的充血和水肿程度显著减轻，使分泌物量显著减少。该作用也呈一定的量效关系变化，黄芩苷组治疗6天及金银花组治疗7天后以后即可出现显著的疗效。
本发明药物滴眼液在治疗角膜病变显效快，优于单独使用黄芩苷滴眼液、金银花滴眼液。
(2)对家兔单纯疱疹病毒性角结膜炎的实验治疗作用(对结膜炎的炎细胞总数、炎细胞面积总和、炎细胞平均黑度总和与炎细胞积分光密度总和的影响)在各组家兔单纯疱疹病毒部位的睑结膜切片上均选择炎细胞最明显区域5个视野，在中倍视野(200×)下采用MIAS2000病理图象分析系统定量检测单纯疱疹病毒性结膜炎组织炎细胞的总数、面积总和、平均黑度总和与积分光密度总和。试验结果见表1及表2。
表1本发明药物滴眼液对家兔单纯疱疹病毒性角结膜炎炎细胞总数和炎细胞面积总和的影响(x±s)组间差异眼睛数炎细胞总数 组间差异 炎细胞面积总和组别 (与本发(只)(个) (与空白组比较) (μm2)明比较)空白对照组10 413.1±109.3 - 17510±6145 -本发明药物10 134.7±69.1**- 4160±2232**-滴眼液1组黄芩苷组 10 305.6±99.8* *(显著) 11566±4863* *(显著)金银花组 10 319.7±53.1* *(显著) 9653±5230* *(显著)本发明药物10 233.2±48.2** 不显著 7183.1±3230 不显著滴眼液2组本发明药物10 200.8±56.8** 不显著 6376.2±4218 不显著滴眼液3组阿昔洛韦组10 202.5±38.2** 不显著 10299±5862* 不显著注*P＜0.05，**P＜0.01。
表2对家兔单纯疱疹病毒性角结膜炎炎细胞平均黑度总和与积分光密度总和的影响(x±s)组间差异 组间差异眼睛数 炎细胞平均黑度 炎细胞积分光密度组别(与本发明 (与本发明比(只) 总和 比较) 总和 较)空白对照组1033852±11952- 4075521±1240980 -本发明药物滴眼1010886±6372** - 1028342±517666** -液1组黄芩苷组 1021586±3713* *(显著) 2895211±496954* *(显著)金银花组 1023197±4315* *(显著) 2944161±568516* *(显著)本发明药物滴眼1016172±5385** 不显著 2382718±586127**不显著液2组本发明药物滴眼1014243±4628** 不显著 2082477±4913147** 不显著液3组阿昔洛韦组1015338±11121* 不显著 2410908±1373982*不显著注*P＜0.05，**P＜0.01。
从表1～表2可见，本发明药物滴眼液对家兔单纯疱疹病毒(HSV1型)感染所致角结膜炎具有极显著的治疗作用，可使结膜炎的炎细胞总数、炎细胞面积总和、炎细胞平均黑度总和与炎细胞积分光密度总和均呈现极显著的降低作用。与黄芩苷组、金银花组治疗效果相比具有显著差异，说明本发明对家兔单纯疱疹病毒感染所致角结膜炎的治疗比单独使用黄芩苷、金银花效果好，发挥了协同作用。
且通过表1可知，本发明药物滴眼液1组治疗效果优于本发明药物滴眼液2、3组，说明金银花提取物(以绿原酸计)与黄芩苷按38.5∶61.5的比例配伍治疗效果最佳。
试验例2、对家兔试验性金黄色葡萄球菌感染性结膜炎的治疗作用1.实验材料1.1药物a、本发明药物滴眼液规格8ml/支(含100mg绿原酸和160mg黄芩苷)，相当于46.3mg金银花提取物/ml，21.7mg黄芩提取物/ml；自制。
制备方法按实施例1的制备方法制备。
b、黄芩苷滴眼液棕红色澄明液体，规格每ml含黄芩苷40mg，自制。
制备方法精密称取黄芩苷40g，用8％的氢氧化钠溶液(g/ml)适量溶解，加注射用水至约950ml，用8％NaOH调节pH值约7.5，加适量活性炭，置水浴微热30分钟，滤过，搅拌，煮沸30分钟，加注射用水调整至1000ml，滤过，即得。
c、金银花提取物滴眼液黄色澄明液体，规格每ml含金银花提取物(以绿原酸计)25mg，自制。
制备方法金银花提取物(以绿原酸计)25g，加水适量溶解，加注射用水至约950ml，用8％NaOH调节pH值约7.5，加适量活性炭，置水浴微热30分钟，滤过，搅拌，煮沸30分钟，加注射用水调整至1000ml，滤过，即得。
d、本发明药物滴眼液2规格8ml/支(含52mg绿原酸和208mg黄芩苷)，相当于24.1mg金银花提取物/ml，28.3mg黄芩提取物/ml，自制。
制备方法按实施例1的制备方法制备。
e、本发明药物滴眼液3规格8ml/支(含130mg绿原酸和130mg黄芩苷)，相当于60.2mg金银花提取物/ml，17.7mg黄芩提取物/ml，自制。
制备方法按实施例1的制备方法制备。
f、氯霉素滴眼液。规格8ml/支，8ml∶20mg。适应症用于结膜炎、沙眼、角膜炎和眼睑缘炎。用法用量外用。滴眼，每次1～2滴，一日3～5次。由四川泰华堂制药有限公司生产，批号030104。
1.2细菌株 金黄色葡萄球菌ATCC25923，浓度为1×108个菌/ml。由成都中医药大学微生物学教研室进行细菌培养、制备和提供。
1.3动物 日本大耳白兔，一级，体重2.0～2.2kg，雌雄兼用。由四川省动物专委会饲养场提供。动物质量合格证川实动管质第99-11号。
2.试验方法2.1分组与药物剂量将家兔35只按性别搭配分成7组，每组5只(雌雄兼用)10只眼用于实验。分别作为①空白对照组生理盐水(等体积)，滴眼；②～⑦本发明药物滴眼液组、黄芩苷滴眼液、金银花滴眼液、本发明药物滴眼液2组、本发明药物滴眼液3组、氯霉素滴眼液。两眼同时滴药，0.05ml/眼/次，8、4、2次/天。
2.2结膜炎模型的复制方法对家兔两只眼的下眼睑与球结膜交结处注射金黄色葡萄球菌的混悬液(浓度为1×108个菌/ml)0.1ml/眼，造成金黄色葡萄球菌感染性结膜炎模型。
2.3给药途经与方法在注射金黄色葡萄球菌造成结膜炎模型后24小时后分组，开始用本发明药物滴眼液、黄芩苷滴眼液、金银花滴眼液或氯霉素滴眼液(或生理盐水)滴眼治疗，连续7日。
2.4观察指标在注射金黄色葡萄球菌造成结膜炎模型后24小时(第2天)观察结膜炎症程度，并根据结膜炎症的轻重程度将家兔搭配分组，然后用本发明药物滴眼液、黄芩苷滴眼液、金银花滴眼液、氯霉素滴眼液(或生理盐水)滴眼治疗。每天上午第1次滴眼药水之前，先检查和记录结膜炎症程度后再用滴眼液。
结膜炎程度分级评分标准①充血血管正常0分；血管充血呈鲜红色1分；血管充血呈深红色，血管不易分辨2分；弥漫性充血呈紫红色3分。
②水肿无水肿0分；轻微水肿1分；明显水肿，伴有部分眼睑外翻2分；水肿至眼睑近半闭合3分；水肿至眼睑超过半闭合4分。
③分泌物无分泌物0分；少量分泌物1分；分泌物使眼睑和睫毛潮湿或粘着2分；分泌物使整个眼区和睫毛潮湿或粘着2分。
2.5统计学方法数据用x±s表示，两组之间的比较用Dunnett t检验。
2.5试验结果对家兔两只眼睛的下眼睑与球结膜交结处注射金黄色葡萄球菌的混悬液(浓度为1×108个菌/ml)0.1ml/眼，造成金黄色葡萄球菌感染性结膜炎模型。致炎24小时后，可见球结膜和睑结膜弥漫性充血呈紫红色，水肿异常严重(可能系由于注射细菌悬液感染极重之故，模型对照组7天后仍明显)，眼睛呈半闭合至几乎闭合状，炎症分泌物多(尤其感染后1～4天)。
本发明药物滴眼液及氯霉素滴眼液具有极显著的治疗作用。本发明药物滴眼液1、2、3及阳性对照药物氯霉素滴眼液滴眼应用治疗2天(48小时)后，可使结膜的充血和水肿程度显著减轻，P均＜0.05。黄芩苷滴眼液、金银花滴眼液单独使用在治疗5天、4天后出现显著治疗作用。
本发明药物滴眼液1治疗1天(24小时)后，即显极显著疗效。与本发明药物滴眼液2、本发明药物滴眼液3相比，本发明药物滴眼液1起效快，疗效优于本发明药物滴眼液2、本发明药物滴眼液3，故本发明药物滴眼液1配方比例为最佳配伍。
表3 对金黄色葡萄球菌感染所致家兔结膜炎的治疗作用(x±s)


注*P＜0.05，**P＜0.01。
试验例3 对家兔绿脓杆菌感染性结膜炎的治疗作用1.实验材料1.1药物a、本发明药物滴眼液规格8ml/支(含100mg绿原酸和160mg黄芩苷)，相当于46.3mg金银花提取物/ml，21.7mg黄芩提取物/ml，自制。
制备方法按实施例1的制备方法制备。
b、黄芩苷滴眼液棕红色澄明液体，规格每ml含黄芩苷40mg，自制。
制备方法精密称取黄芩苷40g，用8％的氢氧化钠溶液(g/ml)适量溶解，加注射用水至约950ml，用8％NaOH调节pH值约7.5，加适量活性炭，置水浴微热30分钟，滤过，搅拌，煮沸30分钟，加注射用水调整至1000ml，滤过，即得。
c、金银花提取滴眼液黄色澄明液体，规格每ml含金银花提取物25mg，自制。
制备方法金银花提取物(以绿原酸计)25g，加水适量溶解，加注射用水至约950ml，用8％NaOH调节pH值约7.5，加适量活性炭，置水浴微热30分钟，滤过，搅拌，煮沸30分钟，加注射用水调整至1000ml，滤过，即得。
d、本发明药物滴眼液2规格8ml/支(含52mg绿原酸和208mg黄芩苷)，相当于24.1mg金银花提取物/ml，28.3mg黄芩提取物/ml，自制。
制备方法按实施例1的制备方法制备。
e、本发明药物滴眼液3规格8ml/支(含130mg绿原酸和130mg黄芩苷)，相当于60.2mg金银花提取物/ml，17.7mg黄芩提取物/ml，自制。
制备方法按实施例1的制备方法制备。
f、氯霉素滴眼液。规格8ml/支，8ml∶20mg。适应症用于结膜炎、沙眼、角膜炎和眼睑缘炎。用法用量外用。滴眼，每次1～2滴，一日3～5次。由四川泰华堂制药有限公司生产，批号030104。
1.2细菌株铜绿假单胞菌ATCC27853，浓度为1×108个菌/ml。由成都中医药大学微生物学教研室进行细菌培养、制备和提供。
1.3动物日本大耳白兔，一级，体重2.0～2.2kg，雌雄兼用。由四川省动物专委会饲养场提供。动物质量合格证川实动管质第99-11号。
2试验方法2.1试验组与药物剂量将家兔25只按性别搭配分成5组，每组5只(雌雄兼用)10只眼用于实验。分别作为①空白对照组生理盐水(等体积)，滴眼；②～⑤本发明药物滴眼液组、黄芩苷组、金银花组、氯霉素滴眼液(高剂量)组1mg/kg(浓度为2.5mg/ml，两眼同时滴药，0.05ml/眼/次，8次/天)。
2.2结膜炎模型的复制方法按照文献介绍的方法。对家兔两只眼的下眼睑与球结膜交结处注射绿脓杆菌(浓度为1×108个菌/ml)的混悬液0.1ml/眼，造成绿脓杆菌感染性结膜炎模型。
2.3给药途经与方法在注射绿脓杆菌造成结膜炎模型后24小时(第2天)分组，开始用本发明药物滴眼液或氯霉素滴眼液(或生理盐水)滴眼治疗，连续7日。
2.4观察指标在注射绿脓杆菌造成结膜炎模型后24小时(第2天)观察结膜炎症程度，并根据结膜炎症的轻重程度将家兔搭配分组，然后用本发明药物滴眼液或氯霉素滴眼液(或生理盐水)滴眼治疗。每天上午第1次滴眼药水之前，先检查和记录结膜炎症程度后再用滴眼液。
结膜炎程度分级评分标准①充血血管正常0分；血管充血呈鲜红色1分；血管充血呈深红色，血管不易分辨2分；弥漫性充血呈紫红色3分。
②水肿无水肿0分；轻微水肿1分；明显水肿，伴有部分眼睑外翻2分；水肿至眼睑近半闭合3分；水肿至眼睑超过半闭合4分。
③分泌物无分泌物0分；少量分泌物1分；分泌物使眼睑和睫毛潮湿或粘着2分；分泌物使整个眼区和睫毛潮湿或粘着2分。
2.5统计学方法数据用x±s表示，两组之间的比较用Dunnett t检验。
3试验结果对家兔两只眼睛的下眼睑与球结膜交结处注射绿脓杆菌菌的混悬液(浓度为1×108个菌/ml)0.1ml/眼，造成绿脓杆菌感染性结膜炎模型。致炎24小时后，可见球结膜和睑结膜弥漫性充血呈紫红色，水肿异常严重(可能系由于注射细菌悬液感染极重之故，模型对照组7天后仍明显)，眼睛呈半闭合至几乎闭合状，炎症分泌物多(尤其感染后1～3天)。
本发明药物滴眼液1及氯霉素滴眼液在治疗第1天即有显著的治疗作用；本发明药物滴眼液2、本发明药物滴眼液3在治疗第2天即有显著治疗作用，黄芩苷滴眼液、金银花滴眼液在治疗第4天方显显著治疗作用，p均＜0.05。经比较观察，本发明药物滴眼液1、氯霉素滴眼液的疗效相近，其疗效优于本发明药物滴眼液2、本发明药物滴眼液3、其起效时间远远低于单独使用黄芩苷滴眼液、金银花滴眼液，故本发明将金银花提取物、黄芩苷合用，发挥了协同作用，对绿脓杆菌感染所致家兔结膜炎的治疗作用以金银花提取物/黄芩苷(38.5/61.5)效果最佳，协同作用最强。
表4 本发明药物滴眼液对绿脓杆菌感染所致家兔结膜炎的治疗作用(x±s)

注*P＜0.05，**P＜0.01。
试验例4、本发明药物滴眼液体外抗病毒作用1.实验材料1.1药物a、本发明药物滴眼液规格8ml/支(含100mg绿原酸和160mg黄芩苷)，相当于46.3mg金银花提取物/ml，21.7mg黄芩提取物/ml；自制。
制备方法按实施例1的制备方法制备。
b、黄芩苷滴眼液棕红色澄明液体，规格每ml含黄芩苷80mg，自制。
制备方法精密称取黄芩苷80g，用8％的氢氧化钠溶液(g/ml)适量溶解，加注射用水至约950ml，用8％NaOH调节pH值约7.5，加适量活性炭，置水浴微热30分钟，滤过，搅拌，煮沸30分钟，加注射用水调整至1000ml，滤过，即得。
c、金银花提取滴眼液黄色澄明液体，规格每ml含金银花提取物(以绿原酸计)50mg，自制。
制备方法金银花提取物(以绿原酸计)50g，加水适量溶解，加注射用水至约950ml，用8％NaOH调节pH值约7.5，加适量活性炭，置水浴微热30分钟，滤过，搅拌，煮沸30分钟，加注射用水调整至1000ml，滤过，即得。
d、本发明药物滴眼液2规格8ml/支(含52mg绿原酸和208mg黄芩苷)，相当于24.1mg金银花提取物/ml，28.3mg黄芩提取物/ml，自制。
制备方法按实施例1的制备方法制备。
e、本发明药物滴眼液3规格8ml/支(含130mg绿原酸和130mg黄芩苷)，相当于60.2mg金银花提取物/ml，17.7mg黄芩提取物/ml，自制。
制备方法按实施例1的制备方法制备。
f、阿昔洛韦滴眼液本品为无色的澄明液体。适应症抗病毒药。用于单纯疱疹性角膜炎。用法用量滴入眼睑内，每2小时一次。规格8ml∶8mg，由湖北潜江制药股份有限责任公司生产。产品批号20030101，生产日期03年01月05日，有效期至2004年07月。
e、基质无色透明液体，自制。
1.2病毒株 腺病毒(AdV)3型、4型、7型、8型及单纯疱疹病毒(HSV)1型，分别由首都儿科研究所和四川省人民医院病毒室(临床分离株)提供。
1.3细胞株 Hep-2细胞，由汕头市永恒辉生物工程公司出品。生长营养液为10％小牛血清Eagles液，实验前复苏、传代、分装试管。
2.试验方法2.1药物的毒性测定用Hanks液将本发明药物滴眼液、黄芩苷滴眼液、金银花滴眼液、基质滴眼液、阿昔洛韦滴眼液，分别从1∶10～1∶80作倍比稀释，取以上4种药液及1∶10～1∶80药液为0.1ml分别接种Hep-2细胞管各2支，待吸附45分钟后，加2％小牛血清Eagles液0.9ml，同步设细胞对照管、空白对照管，置37℃温箱。每天观察对细胞的毒性反应，并记录结果。
2.2病毒毒力测定用Hanks液将腺病毒(AdV)3型、7型从10-1～10-6稀释，腺病毒(AdV)4型、8型及单纯疱疹病毒(HSV)1型从10-3～10-6稀释。取以上10倍稀释的各种浓度的病毒液分别接种0.1ml于4支Hep-2细胞管中，待吸附45分钟后，加2％小牛血清Eagles液0.9ml，同步设细胞对照管，置37℃温箱。每天观察细胞病变(CPE)，以高浓度病毒管出现≥3+细胞病变(CPE)，细胞对照管正常，可终止试验。以最低浓度病毒管出现≥2+细胞病变(CPE)为病毒毒力终点，计算该病毒TCID50。
2.3抗病毒作用测定取100 TCID50/0.1ml腺病毒(AdV)3型、4型、7型、8型及单纯疱疹病毒(HSV)1型感染Hep-2细胞管各2支，待吸附60分钟后，洗去病毒液，分别加入0.1ml本发明药物滴眼液、黄芩苷滴眼液、金银花滴眼液、基质滴眼液、阿昔洛韦滴眼液的原液及1∶10～1∶80稀释药液，待吸附45分钟后，分别于各病毒Hep-2细胞管加2％小牛血清Eagles液0.8ml，同步设细胞对照管、病毒对照管及空白对照管(以Hanks液代替药液)，置37℃温箱。每天观察细胞病变，并记录结果。
3.试验结果
3.1本发明药物滴眼液等药物对细胞的毒性结果见表5。
表5 本发明药物滴眼液对细胞的毒性作用各种药物浓度 细胞空白药物名称 细胞1∶11∶101∶201∶401∶80对照对照本发明药物滴眼Hep-2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2液1本发明药物滴眼Hep-2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2液2本发明药物滴眼Hep-2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2液3黄芩苷组 Hep-2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2金银花组 Hep-2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2基质组 Hep-2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2阿昔洛韦滴眼液 Hep-2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2注“0”表示细胞无病变；“2”表示细胞管数。
从表5可见，本发明药物滴眼液1、本发明药物滴眼液2、本发明药物滴眼液3、黄芩苷滴眼液、金银花滴眼液、滴眼剂基质液、阿昔洛韦滴眼液等各种药物的原浓度药液及1∶10～1∶80稀释后各种浓度的药液，对Hep-2细胞均无任何毒性反应。
3.2病毒毒力作用测定病毒选用敏感的易感细胞，分别加入10倍稀释的不同浓度的病毒液，根据细胞病变结果用Reed、Muench法，计算病毒半数感染细胞量(TCID50)。结果见表6。
表6 各类病毒半数感染细胞量(TCID50)病毒 AdV3AdV4AdV7AdV8HSV1TCID5010-4.6610-6.2510-4.6610-4.6610-8.203.3本发明药物滴眼液体外的抗病毒作用①本发明药物滴眼液体外对病毒的抑制作用浓度的测定结果见表7。
表7 本发明药物滴眼液体外对病毒抑制作用浓度测定结果

②本发明药物滴眼液的抑制细胞病毒感染量(TCID50)、最小有效浓度(MTC)、半数有效浓度(IC50)和治疗指数(TI)按Reed、Muench法，计算其抑制细胞病毒感染量(TCID50)、最小有效浓度(MTC)、半数有效浓度(IC50)和治疗指数(TI)。结果见表8。
表8 本发明药物滴眼液TCID50、MTC、IC50和TI药物病毒 MTC IC50AdV31∶20 1∶28.16AdV41∶10 1∶14.08银黄滴眼液1 AdV71∶20 1∶28.16AdV81∶20 1∶28.16HSV11∶20 1∶28.16AdV31∶20 1∶28.16AdV41∶10 1∶14.08本发明药物滴眼液2 AdV71∶20 1∶28.16AdV81∶20 1∶28.16HSV11∶20 1∶28.16AdV31∶20 1∶28.16AdV41∶10 1∶14.08本发明药物滴眼液3 AdV71∶20 1∶28.16AdV81∶20 1∶28.16HSV11∶20 1∶28.16AdV31∶10 1∶14.08AdV41∶10 1∶14.08黄芩苷AdV71∶10 1∶14.08滴眼液AdV81∶10 1∶14.08HSV11∶10 1∶14.08AdV31∶20 1∶28.16AdV41∶10 1∶14.08金银花AdV71∶10 1∶14.08滴眼液AdV81∶20 1∶28.16HSV11∶10 1∶14.08
AdV30 0AdV40 0阿昔洛韦AdV70 0滴眼液AdV81∶11∶1.4HSV11∶11∶1.4以上体外抗病毒实验，本发明药物中绿原酸、黄芩苷含量比单独使用金银花、黄芩苷达到相同效果时绿原酸、黄芩苷含量低，说明本发明药物将黄芩苷、金银花提取物组合，发挥了协同增效的作用，抗病毒活性比单独使用黄芩苷、金银花提取物强。
本发明药物滴眼液1与本发明药物滴眼液2、本发明药物滴眼液3体外抗病毒试验结果相差不大。
试验例5、本发明药物滴眼液体外抗菌作用1.实验材料1.1药物a、本发明药物滴眼液规格8ml/支(含100mg绿原酸和160mg黄芩苷)，相当于46.3mg金银花提取物/ml，21.7mg黄芩提取物/ml，自制。
制备方法按实施例1的制备方法制备。
b、黄芩苷滴眼液棕红色澄明液体，规格每ml含黄芩苷80mg，自制。
制备方法精密称取黄芩苷80g，用8％的氢氧化钠溶液(g/ml)适量溶解，加注射用水至约950ml，用8％NaOH调节pH值约7.5，加适量活性炭，置水浴微热30分钟，滤过，搅拌，煮沸30分钟，加注射用水调整至1000ml，滤过，即得。
c、金银花提取滴眼液黄色澄明液体，规格每ml含金银花提取物(以绿原酸计)50mg，自制。
制备方法金银花提取物(以绿原酸计)50g，加水适量溶解，加注射用水至约950ml，用8％NaOH调节pH值约7.5，加适量活性炭，置水浴微热30分钟，滤过，搅拌，煮沸30分钟，加注射用水调整至1000ml，滤过，即得。
试验时吸取20ml，加入20ml融化的50℃M-H琼脂培养基混匀后，从40ml中吸出20ml含药培养基倾倒平皿，余下的20ml含药培养基中再添加20ml无药琼脂培养基稀释，混匀后再吸出20ml倾倒平皿，依此类推，即以此二倍稀释法制备出含本发明药物滴眼液稀释度为原液的1/2、1/4、1/8、1/16、……1/2048的系列含药平皿待用。
1.2细菌株试验所用菌株均为2001-2003年从四川地区收集的临床分离致病菌，所有菌种在收集分离的单位(成都中医药大学附属医院检验科细菌室)均经鉴定后，再经本室用API系统重新鉴定后使用。
1.3培养基(1)M-H培养基 均由北京奥博星生物技术有限责任公司出品。
(2)M-H肉汤培养基 称取25g，加1000ml蒸馏水，混匀分装，调整pH值至7.2-7.4，121℃高压灭菌20分钟，用于革兰阳性、阴性需氧菌的药敏试验。
(3)M-H固体培养基 称取36.5g，加1000ml蒸馏水，混匀分装，调整pH值至7.2-7.4，121℃高压灭菌20分钟，用于革兰阳性、阴性需氧菌的药敏试验。
2试验方法2.1最小抑菌浓度(MIC)的测定采用琼脂二倍稀释法测定本发明药物滴眼液的最低抑菌浓度(MIC)。将细菌接种于含不同药物浓度的琼脂平皿表面，每点含菌量约为105CFU/ml，37℃孵育18～24小时观察结果，以无细菌生长平皿培养基中所含药物的最低浓度为药物对该菌的最低抑菌浓度(MIC值)。
2.2最低杀菌浓度(MBC)的测定采用液体稀释法测定本发明药物滴眼液的最小杀菌浓度(MBC)。用M-H肉汤将受试药液进行二倍稀释后，分别于2ml含药培养液中接种100μL受试菌液(使终浓度为约105CFU/ml)，置于37℃孵育18～20小时，肉眼观察，以无细菌生长试管中所含药物的最低浓度为药物对该菌的最低抑菌浓度(MIC值)。
将肉眼观察无细菌生长的试管的0.01ml培养液涂于不含药物的琼脂平皿表面，继续37℃孵育18～20小时后，以琼脂平皿上未见细菌生长的对应试管中的药物最低浓度作为药物对该菌的最低杀菌浓度(MBC)。
3试验结果(1)最小抑菌浓度(MIC)的测定结果见表9。
表9 本发明药物滴眼液的体外最小抑菌浓度(MIC)本发明药物滴眼液黄芩苷滴眼液金银花滴眼液细菌名称(菌号) (mg/ml) (mg/ml) (mg/ml)大肠杆菌2.03 5 3.125金葡球菌2.03 2.5 3.125表葡球菌4.06 5 6.25肺克1.02 2.5 3.125施氏假单胞 0.51 2.5 1.56产气杆菌0.51 1.251.56沙雷菌 0.25 1.250.78阴沟杆菌1.02 2.5 1.56不动杆菌0.13 0.630.78从见表9可见，本发明药物滴眼液在体外对临床分离的大多数革兰阳性、阴性细菌均有较强的抗菌作用，其中对金黄色葡萄球菌和不动杆菌的抑菌作用尤其明显。本发明药物滴眼液体外MIC值比黄芩苷滴眼液、金银花滴眼液的MIC值小，故使用本发明药物滴眼液治疗比单独使用黄芩苷滴眼液、金银花提取物滴眼液效果好，发挥了黄芩苷、金银花提取物的协同作用。
(2)最低杀菌浓度(MBC)的测定结果见表10。
表10 本发明药物滴眼液的体外杀菌浓度(MBC)本发明药物滴眼液细菌(编号) 黄芩苷滴眼液(mg/ml)金银花滴眼液(mg/ml)(mg/ml)大肠杆菌16.25 ＞40 ＞25ESBLs大肠杆菌 16.25 ＞40 ＞25金葡球菌16.25 ＞40 ＞25肺炎克雷伯杆菌 16.25 ＞40 ＞25不动杆菌16.25 ＞40 ＞25以上体外抗菌实验说明，本发明药物将黄芩苷、金银花提取物组合，发挥了协同增效的作用，抗菌活性比单独使用金银花提取物或黄芩苷强。
通过上述实验说明，本发明药物将金银花提取物与黄芩苷合用，在广谱抗菌、抗病毒实验中发挥了协同增效的作用，比任意单独使用黄芩苷、金银花提取物的疗效更为显著，且通过对比实验说明，以金银花提取物/黄芩苷(38.5/61.5)配比，药效最佳，协同作用最强。
试验例6 本发明药物滴眼液对家兔眼睛多次滴入应用的刺激性试验1、药物(1)受试药物本发明药物滴眼液。由实施例1制备，实验时对家兔滴眼应用。
(2)氯化钠注射液四川美大康佳乐药业有限公司，批号03061025-21。
2、动物日本大耳白兔，一级，体重2.0～2.2kg，雌雄各半。由四川省动物专委会饲养场提供。动物质量合格证川实动管质第99-11号。
实验动物设施条件壹级。设施合格证四川省实验动物管理委员会实验动物设施条件合格证明书川实动管使第2001-7号。
3、实验场地将动物放在实验动物饲养观察室内饲养和给药。室内温度控制在18～22℃。
4、试验方法(1)分组选择角膜、虹膜和结膜均正常无病变的家兔5只。采用同体自身对照方法。于家兔右眼滴入本发明药物滴眼液，0.1mL/眼/次，8次/天；以家兔左眼滴入生理盐水(0.1mL/眼/次，8次/天)作对比观察。将本发明药物滴眼液或生理盐水滴入家兔两侧眼结膜囊内，每次滴药后使家兔眼睛被动闭合约10钞钟左右，以便使药物充分接触眼睛各部位(角膜、球结膜、睑结膜)，连续给药2周(14天)。
(2)观察检查指标眼刺激反应程度每次滴入本发明药物滴眼液之前，先检查和记录眼刺激反应程度后再滴眼药水。
眼刺激反应程度及其评分分值如下①角膜混浊程度及其评分分值(以最致密部位为准)无混浊0分；散在或弥漫性混浊，虹膜清晰可见1分；半透明区易分辨，虹膜模糊不清2分；出现灰白色半透明区，虹膜细节不清，瞳孔大小免强看清3分；角膜不透明，由于混浊，虹膜无法辨认4分。
②虹膜刺激反应程度及其评分分值正常0分；皱褶明显加深，充血、肿胀、角膜周围有轻度充血，瞳孔对光仍有反应1分；出血、肉眼可见坏死，对光无反应(或出现其中一种反应)2分。
③结膜刺激反应程度及其评分分值A.充血(指睑结膜、球结膜部位)血管正常0分；血管充血呈鲜红色1分；血管充血呈鲜红色，血管不易分辨2分；弥漫性充血呈紫红色3分。
B.水肿无水肿0分；轻微水肿1分；明显水肿，伴有部分眼睑外翻2分；水肿至眼睑近半闭合3分；水肿至眼睑超过半闭合4分。
C.分泌物无分泌物0分；少量分泌物1分；分泌物使眼睑和睫毛潮湿或粘着2分；分泌物使整个眼区和睫毛潮湿或粘着2分。
眼刺激性评分标准见表11。
表11 眼刺激性评分标准刺激性程度 总积分无刺激性 0～3分轻度刺激性 4～8分中度刺激性 9～12分强度刺激性 13～165、试验结果本发明药物滴眼液多次用药对家兔眼睛的刺激性程度。结果见表12。
表12 本发明药物滴眼液连续滴眼应用2周对家兔眼睛的刺激性程度(x±s)给药时间对照组(生理盐水)本发明药物滴眼液组 本发明药物滴眼液刺激性程度给药前 0±00±0 无刺激性给药1天 0±00.47±0.50 无刺激性2天0±00.33±0.47 无刺激性3天0±00.33±0.47 无刺激性4天0±00±0 无刺激性5天0±00±0 无刺激性6天0±00±0 无刺激性7天0±00±0 无刺激性8天0±00±0 无刺激性9天0±00±0 无刺激性10天 0±00±0 无刺激性11天 0±00±0 无刺激性12天 0±00±0 无刺激性13天 0±00±0 无刺激性14天 0±00±0 无刺激性从表12可见，以本发明药物滴眼液对家兔右眼每天多次(8次/天)滴眼，连续2周应用后，分别与家兔左眼滴生理盐水后比较观察，在用药的第1天至第3天内，可见本发明药物滴眼液对部分家兔眼睛有极其轻微的刺激性反应，其刺激性强度为0.33～0.47分。以药物对眼刺激性评分标准判定，其刺激性强度均在0～3分之内，应属于“无刺激性”。因此，可认为本发明药物滴眼液多次滴眼应用对眼睛无刺激性。
通过上述药效学试验和刺激性实验说明，本发明药物眼用制剂，其原料药物配伍剂量科学，说明金银花和黄芪发挥了协同增效作用，且提供了原料药物的最佳剂量配比，药效显著，且本发明滴眼液澄明度高、眼用膜剂和滴眼液均无刺激性、无毒、安全性高，不易产生耐药性，治愈率高、疗程短，质量稳定，患者使用时方便，本产品的开发为临床医生和患者提供了一种新的用药选择。
权利要求
1.一种用于治疗急性卡他性结膜炎或单纯疱疹病毒性角膜炎的眼用制剂，其特征在于它是由金银花提取物、黄芩苷为原料制成的眼用制剂。
2.根据权利要求1所述的眼用制剂，其特征在于该眼用制剂为滴眼液、眼用膜剂。
3.根据权利要求2所述的眼用制剂，其特征在于所述的滴眼液中每ml含有下列成份金银花提取物-以绿原酸计 6.25-18.75mg黄芩苷10-30mg渗透压调整剂 0-20mg抑菌剂0.4-1.2mg粘度调整剂0-20mg。
4.根据权利要求3所述的眼用制剂，其特征在于所述的滴眼液的渗透压调整剂为硼砂、氯化钠或葡萄糖中的一种；所述滴眼液的抑菌剂为对羟基苯甲酸乙酯、杜灭芬、硼酸、苯乙醇、双氯苯双胍己烷或氯化苯甲烃胺中的一种；所述滴眼液的pH调节剂为磷酸盐缓冲液、硼酸缓冲液、硼酸盐缓冲液、氢氧化钠或氨水中的一种或其混合；所述滴眼液的粘度调整剂为甲基纤维素、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基乙基纤维素中的一种或混合。
5.根据权利要求3，4所述的眼用制剂，其特征在于所述的滴眼液中每ml含有下列成份金银花提取物-以绿原酸计 12.5mg黄芩苷 20.0mg对羟基苯甲酸乙酯 0.8mg。
6.权利要求3所述的眼用制剂的制备方法，其特征在于所述的滴眼液制备方法包括如下步骤将金银花提取物加蒸馏水溶解；黄芩苷加NaOH溶液充分溶解；加入其它辅料，调节pH为6～8，冷藏静止过夜，滤过，灭菌，分装，即得。
7.根据权利要求3所述的眼用制剂，其特征在于所述的眼用膜剂每片含有如下重量配比的原料金银花提取物-以绿原酸计 1.875-5.625mg黄芩苷 3.000-9.000mg成膜材料10.00-30.00mg增塑剂 0.005-0.015mg表面活性剂 0.05-0.15mg。
8.根据权利要求7所述的眼用制剂，其特征在于所述眼用膜剂的成膜材料为聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素纳、羧甲基纤维素、乙基纤维素或甲基纤维素；所述眼用膜剂的增塑剂为甘油、乙二醇或山梨醇；所述眼用膜剂的表面活性剂为聚山梨酯-80或十二烷基硫酸纳。
9.根据权利要求7、8所述的眼用制剂，其特征在于所述的眼用制剂每片含有如下重量配比的原料药物金银花提取物-以绿原酸计 3.75mg黄芩苷 6mg聚乙烯醇20mg甘油0.01mg聚山梨酯-80 0.1mg。
10.权利要求7所述的眼用制剂的制备方法，其特征在于所述的眼用膜剂的制备方法包括如下步骤取成膜材料、增塑剂、表面活性剂等，加适量蒸馏水，搅拌至膨胀后加热使溶解，溶液趁热过筛，得胶浆；取金银花提取物、黄芩苷混合均匀，过筛，缓缓加入上述胶浆，搅拌均匀；制膜，切成小块，密封即得。
全文摘要
本发明提供了以金银花和黄芩苷为原料的局部眼用药物制剂，特别是作为滴眼液和眼用膜剂能有效的治疗急性卡他性结膜炎和单纯疱疹病毒性角膜炎。本发明还提供了该眼用制剂的制备方法。通过药效试验说明，其原料药物配伍剂量科学，说明金银花和黄芪苷发挥了协同增效作用，且提供了原料药物的最佳剂量配比，药效显著，且本发明滴眼液澄明度高、眼用膜剂和滴眼液均无刺激性、无毒、安全性高，本发明眼用制剂为临床医生和患者提供了一种新的用药选择。
文档编号A61P27/02GK1575813SQ200410059650
公开日2005年2月9日 申请日期2004年6月14日 优先权日2003年6月25日
发明者阳向波, 谢永平, 陈明元 申请人:成都三明药物研究所