专利名称：一种治疗肝炎的药物组合物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗肝炎的药物组合物，具体地说，是涉及以中药为原料制备的治疗肝炎的药物组合物，属中药领域。
背景技术：
肝脏为人体重要的脏腑之一，中医理论认为，主疏泄和主藏血，是肝的主要生理功能。肝主疏泄，系指肝脏具有舒张、开展、调达、宣散、流通以保持全身气机宣畅的作用。该功能的正常发挥，可以调节精神情志，使人精神愉快，心情舒畅；又可促进消化吸收，协调脾胃气机升降；还能维持气血的运行，调节水液代谢。肝主藏血，是指肝脏又有储藏血液和调节血量的作用。肝所藏之血，是其疏泄功能的物质基础，疏泄又是藏血的功能表现。疏泄的正常，全赖阴血的濡养；血液的运行通畅，又离不开肝气的调节。一旦肝失疏泄，气机郁滞，则出现肝血瘀阻，脾失健运，痰水内停，进而引起肝体肿大，胁下痉痛，肝脏功能异常等病理改变。
目前，西医治疗临床应用的“抗肝炎药”主要有三大类抗病毒药、免疫调节药和保肝护肝药(维生素类药物、具有解毒功能类药物、促进能量代谢类药物、促进蛋白质合成类药物)。抗病毒药主要有干扰素类抗病毒药及核苷酸类抗病毒药，临床应用主要有干扰素和拉米夫定；免疫调节药主要临床应用的有胸腺肽、香菇多糖等；保肝护肝药临床应用的主要有甘草酸二铵(甘利欣)、苦参素等。但由于病毒性肝炎的病原学治疗迄今尚无突破性进展，临床上往往都是针对肝功能异常症状进行对症治疗。
在对肝炎等造成的肝功能异常的中医药治疗中，以清热化湿、活血化瘀、扶正固本为主要治则。其中，以活血化瘀为主的中药，可含有药材丹参、三七等，对肝炎呈现以下治疗特点①恢复肝功能较好、较快，有明显的降酶、降浊、降胆红质作用；②回缩肝脾，改善瘀症；③抗肝纤维化；④促肝细胞再生。目前已有的中成药产品基本上都是口服粗制剂，未见有效部位注射液剂型。由于肝脏是人体的解毒器官，许多药物需经肝脏代谢，在肝炎治疗中，服用大量的药物常常加重肝脏的负担，需精制提纯，减少服药用量，而粗制剂90％以上为非有效成分，吸收入体内将给肝脏增加极大负担；同时，临床上多数患者因肝炎急性发作，出现明显肝脏损害而入院求医，此时病情危笃，变化迅速、病死率高。因此，针对急性肝功能异常患者，急待开发有效部位或有效成分的制成的口服制剂和注射液制剂，以增效减毒并迅速发挥治疗作用。
现今的含有丹参、三七原料药物制剂，包括口服制剂和注射剂，如丹参注射液、复方丹参滴丸等在内，均未经严格的提取纯化处理，有效部位含量较低，且报道的功能主治与适应症用于治疗心脑血管。目前，已有丹参和三七分别注射或含有两味原料药的口服或注射治疗乙肝的报道(巫善明等，参三七注射液治疗血瘀型慢性肝炎及其血液流变学的初步观察，上海中医药杂志1983；8，14；童绍宏，丹参穴位注射治疗迁、慢性肝炎39例近期疗效观察，福建医学杂志1980；1，50；胡智明.胡金珠，乙肝宝冲剂的研制与疗效观察，现代中药研究与实践，1996年03期；徐立明.，“黄芪解毒活血汤”治疗慢性乙肝107例，江苏中医，2000年10期；柴平清肝汤治疗甲型肝炎146例，中华实用中西医杂志，2002年01期)，但由于中药成分复杂，药材在制剂中发挥的功效不同，且中药注射剂中将单味药物及提取物混合使用，可能产生不可预知的药效和毒性，由于中药用药的特殊性，药物选择不同，用量不同，服用途径不同，药效也不同，因此，至今未见有丹参、三七合用注射治疗乙肝的报道，也没有原料丹参、三七配伍使用治疗肝炎的报道。
发明内容
本发明的技术方案是提供了一种治疗肝炎药物组合物，具体地，是一种以中药材丹参、三七为原料制备的治疗肝炎的药物组合物，本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。
本发明提供了一种治疗肝炎的药物组合物，它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂丹参3-10份、三七1-3份。
其中，丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎；三七为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根。
更进一步地，它是由下述重量配比的原料制备而所的药剂丹参6份、三七1份。
该药物组合物是由药材丹参、三七的水提取物或醇提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的药剂。
所述的药剂是口服制剂或注射剂。
进一步地，所述的口服制剂是胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂、散剂；所述的注射剂是注射水针剂、静滴剂型、粉针剂。
其中，所述的注射剂每毫升含丹参水溶性总酚3.24～3.36mg、总皂苷1.69～1.76mg、丹参素0.83～0.91mg、原儿茶醛0.23～0.25mg、人参皂苷Rg1 0.63～0.69mg。
其中，该药物组合物的HPLC指纹图谱如图1所示，由4个特征峰组成，其中色谱条件为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-乙腈-1.67％甲酸溶液(体积比23∶7∶70)为流动相；检测波长为286nm。
进一步地，所述的4个共有峰相对保留时间的相对标准偏差RSD均小于10.0％，其中，1号峰平均相对保留时间RT0.134％，2号峰RT0.184、3号峰RT0.724、4号峰1.000。
本发明还提供了该药物组合物的制备方法，包括下列步骤a、按各重量配比称取原料丹参3-10份、三七1-3份；b、丹参提取物的制备取药材丹参，加水煎煮提取，过滤，滤液浓缩，干燥，干燥浸膏粉用50-95％乙醇作溶剂，渗漉法提取，得渗漉液，加入活性炭，加热回流提取，滤过，回收乙醇，加水溶解，水溶液通过D101大孔吸附树脂，用30-85％乙醇洗脱，乙醇洗脱液回收乙醇即得丹参提取物；c、三七提取物的制备取药材三七，用35-95％乙醇为溶剂，渗漉法提取，得渗漉液，将渗漉液中加入活性炭，回流提取，滤过，滤液减压回收乙醇，得醇浸膏，将醇浸膏加水溶解，滤过，水溶液通过D101大孔吸附树脂柱，再用30-90％乙醇洗脱有效部位，得乙醇洗脱液，减压回收乙醇，即得三七提取物；d、将步骤b制备的丹参提取物、步骤c制备的三七提取物混合，加水溶解，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分，制备成药学上常用的制剂。
其中，d步骤是将步骤b、步骤c制备的丹参提取物、三七提取物混合，加水溶解，加入药学上常用的口服制剂常用辅料得本发明药物组合物口服制剂；或步骤d是将步骤b、步骤c制备的丹参提取物、三七提取物混合，加水溶解，加入药学上常用的注射剂常用附加剂，调pH值为5.5～6.5，即得本发明药物组合物注射剂。
本发明还提供了各重量配比的原料在制备治疗急、慢性肝炎的药物中的用途。
进一步地，各重量配比的原料在制备口服治疗急、慢性肝炎的药物中的用途。
进一步地，各重量配比的原料在制备注射治疗急、慢性肝炎的药物中的用途。
更进一步地，各重量配比的原料在制备静脉注射治疗急、慢性肝炎的药物中的用途。
本发明药物组合物原料配方基于中医药理论指导，选药合理、精当，方中丹参，味苦，微寒，无毒，具有寒热积聚，破癥除瘕，止烦满，益气功效，祛瘀逐邪而不易耗伤正气，并可促进营血新生，宜于久服，且不易引起不良反应，现代研究表明丹参不仅对心脑血管、微循环等具有多方面药理作用，并有较好的降血脂作用，对于肝脏，能保护多种原因造成的肝损伤，还有抗肝毒作用；对实验性肝硬变有防治作用，亦可促进细胞再生，抑制肝纤维增生等，故方中用作君药。三七，性味甘、微苦而偏湿。主归肝经，兼有补气养血之功(高等教育出版社，面向21世纪课程教材《中药学》)，现代研究表明，三七可降血脂，促进血细胞生成，镇痛；抗肝损伤，改善肝脏血液循环、改善肝功能慢性指标，并有增强免疫功能及强壮作用等。三七用以协助丹参的活血化瘀，消癥止痛之力，并有扶正气，益气血之效，使全方消而不伤，故作为辅药。两原料药配比使用，发挥协同增效的作用。
由于单味中药未知成分太多，同时部分有效成分的性质也不稳定，将中药混合制备的注射剂容易发生化学成分的氧化聚合，降低药物疗效，甚至产生沉淀，临床出现诸多不良反应，甚至造成患者死亡。通过本发明药物组合物原料的提取、精制方法，制备得到的本发明药物组合物治疗肝炎，提取纯化有效部位，原料用量少，服用方便。注射剂溶液不产生沉淀，质量稳定；静脉注射，无副作用，安全，且能克服了水针剂的缺陷。且本发明药物组合物采用指纹图谱控制注射剂的质量，使本发明药物组合物可控、稳定。
综上所述，本发明药物以丹参、三七为原料制备的制剂，药材中的提取物丹参水溶性总酚、三七总皂苷混合既减少了用药量，同时除去杂质，用药量更加准确，治疗肝炎疗效好、安全、可控、稳定，为临床提供了一种新的治疗肝炎药物的选择。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式
，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
图1本发明药物组合物HPLC指纹图谱，其中，1号峰保留时间RT为3.950min、2号峰保留时间RT5.425min、3号峰保留时间RT21.892min、4号峰保留时间30.533min。
具体实施例方式
实施例1 本发明药物组合物静滴剂型的制备a、取丹参1000g，切厚片，加8倍量水煎煮提取4次，每次煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度约1.05(60℃热测)的清膏，喷雾干燥，得浸膏粉。取浸膏粉与3倍量硅藻土混匀，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(《中国药典》2000年版一部附录I O)，用92％乙醇作溶剂，浸渍4小时后，以每分钟3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液15000ml，加活性炭50g，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液减压回收乙醇至干，加水2500ml使溶解，静置24小时，滤过，滤液通过已预处理好的D101大孔吸附树脂柱，加水5000ml洗脱，弃去水洗液，继用50％乙醇20000ml洗脱，收集50％的乙醇洗脱液，减压回收乙醇，即得丹参提取物，该丹参提取物为丹参水溶性总酚。
其中水煎煮提取工艺丹参水溶性总酚、丹参素、原儿茶醛转移率均在95％以上，干膏收率约63％，干膏中丹参总酚酸含量约5.5％；乙醇渗漉预除杂工艺丹参水溶性总酚、丹参素、原儿茶醛转移率均在85％以上，干膏收率降至约10％，干膏中丹参水溶性总酚含量约35％；大孔吸附树脂纯化后所得提取物收率约为3.0％，提取物中水溶性总酚含量约为85％，丹参素含量约为25％，原儿茶醛含量约为8％，已经达到静脉用注射剂新药的要求。
b、三七提取纯化取三七粗粉1000g，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(《中国药典》2000年版一部附录I Q)，用9倍量65％乙醇作溶剂，浸渍过夜，以每分钟5ml的速度渗漉，收集渗漉液，加活性炭30g，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液减压回收乙醇，加水2500ml使溶解，滤过，滤液通过已预处理好的D101大孔吸附树脂柱，用水洗涤至洗涤液近无色(约1200ml)，弃去洗液，继用药材11倍量的50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，即得三七提取物，该三七提取物为三七总皂苷。
其中乙醇渗漉提取工艺三七总皂苷、人参皂苷Rg1转移率均在90％以上，浸出物收率约20％，浸出物中三七总皂苷含量约为45％；大孔吸附树脂纯化后所得的三七提取物收率约为8.5％，三七总皂苷含量在90％以上，已经达到静脉用注射剂的要求。
c、取丹参提取物3.3g、三七提取物1.7g，加注射用水400ml使溶解，备用；另取注射用氯化钠9g，亚硫酸氢钠0.2g，加注射用水100ml使溶解，加热煮沸，加活性炭0.2g，搅匀，继续煮沸15分钟，滤过，滤液与上述药液混匀，加注射用水至1000ml，用10％的氢氧化钠溶液调pH值至6.0，超滤至澄明，分装于100ml输液瓶中，轧盖，灭菌，检查澄明度，包装，即得。
实施例2 本发明药物粉针剂的制备方法a、取丹参1000g，切厚片，加8倍量水煎煮提取4次，每次煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度约1.05(60℃热测)的清膏，喷雾干燥，得浸膏粉。取浸膏粉与3倍量硅藻土混匀，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(《中国药典》2000年版一部附录I O)，用92％乙醇作溶剂，浸渍4小时后，以每分钟3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液15000ml，加活性炭50g，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液减压回收乙醇至干，加水2500ml使溶解，静置24小时，滤过，滤液通过已预处理好的D101大孔吸附树脂柱，加水5000ml洗脱，弃去水洗液，继用50％乙醇20000ml洗脱，收集50％的乙醇洗脱液，减压回收乙醇，即得丹参提取物，该丹参提取物为丹参水溶性总酚。
其中水煎煮提取工艺丹参水溶性总酚、丹参素、原儿茶醛转移率均在95％以上，干膏收率约63％，干膏中丹参总酚酸含量约5.5％；乙醇渗漉预除杂工艺丹参水溶性总酚、丹参素、原儿茶醛转移率均在85％以上，干膏收率降至约10％，干膏中丹参水溶性总酚含量约35％；大孔吸附树脂纯化后所得提取物收率约为3.0％，提取物中水溶性总酚含量约为85％，丹参素含量约为25％，原儿茶醛含量约为8％，已经达到粉针剂新药的要求。
b、三七提取纯化取三七粗粉1000g，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(中国药典2000年版一部附录I Q)，用9倍量65％乙醇作溶剂，浸渍过夜，以每分钟5ml的速度渗漉，收集渗漉液，加活性炭30g，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液减压回收乙醇，加水2500ml使溶解，滤过，滤液通过已预处理好的D101大孔吸附树脂柱，用水洗涤至洗涤液近无色(约1200ml)，弃去洗液，继用药材11倍量的50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，即得三七提取物，该三七提取物为三七总皂苷。
其中乙醇渗漉提取工艺三七总皂苷、人参皂苷Rg1转移率均在90％以上，浸出物收率约20％，浸出物中三七总皂苷含量约为45％；大孔吸附树脂纯化后所得的三七提取物收率约为8.5％，三七总皂苷含量在90％以上，已经达到粉针剂新药的要求。
c、取丹参提取物3.3g、三七提取物1.7g，加注射用水400ml使溶解，备用；另注射用辅料100-200g置无菌容器中，加注射用水450ml，搅拌使溶解，与上述药液混匀，加注射用水补足至1000ml，轻轻搅拌至全部溶解，在正压条件下，用两个串连的微孔滤器过滤药液，在无菌条件下经过喷雾干燥，制成丹七无菌粉末，分装于瓶中，加塞，压铝盖，封瓶，灭菌，包装，即得。
实施例3 本发明药物口服制剂的制备a、取丹参1000g，切厚片，加8倍量水煎煮提取4次，每次煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度约1.05(60℃热测)的清膏，喷雾干燥，得浸膏粉。取浸膏粉与3倍量硅藻土混匀，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(中国药典2000年版一部附录I O)，用92％乙醇作溶剂，浸渍4小时后，以每分钟3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液15000ml，加活性炭50g，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液减压回收乙醇至干，加水2500ml使溶解，静置24小时，滤过，滤液通过已预处理好的D101大孔吸附树脂柱，加水5000ml洗脱，弃去水洗液，继用50％乙醇20000ml洗脱，收集50％的乙醇洗脱液，减压回收乙醇，即得丹参提取物。
其中水煎煮提取工艺丹参水溶性总酚、丹参素、原儿茶醛转移率均在95％以上，干膏收率约63％，干膏中丹参总酚酸含量约5.5％；乙醇渗漉预除杂工艺丹参水溶性总酚、丹参素、原儿茶醛转移率均在85％以上，干膏收率降至约10％，干膏中丹参水溶性总酚含量约35％；大孔吸附树脂纯化后所得提取物收率约为3.0％，提取物中水溶性总酚含量约为85％，丹参素含量约为25％，原儿茶醛含量约为8％，已经达到粉针剂新药的要求。
b、三七提取纯化取三七粗粉1000g，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法(中国药典2000年版一部附录I Q)，用9倍量65％乙醇作溶剂，浸渍过夜，以每分钟5ml的速度渗漉，收集渗漉液，加活性炭30g，加热回流60分钟，放冷，滤过，滤液减压回收乙醇，加水2500ml使溶解，滤过，滤液通过已预处理好的D101大孔吸附树脂柱，用水洗涤至洗涤液近无色(约1200ml)，弃去洗液，继用药材11倍量的50％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，即得三七提取物。
其中乙醇渗漉提取工艺三七总皂苷、人参皂苷Rg1转移率均在90％以上，浸出物收率约20％，浸出物中三七总皂苷含量约为45％；大孔吸附树脂纯化后所得的三七提取物收率约为8.5％，三七总皂苷含量在90％以上，已经达到粉针剂新药的要求；c、取丹参提取物3.3g、三七提取物1.7g，加水300ml使溶解，备用；另口服制剂用辅料100-200g置无菌容器中，加水400ml，搅拌使溶解，与上述药液混匀，加水补足至1000ml，轻轻搅拌至全部溶解，浓缩，制粒，干燥。制成丹七片剂、颗粒剂或胶囊剂，分装，灭菌。包装，即得。
实施例4 本发明注射剂的制备按实施例1的方法，取药材丹参4000g，三七400g，制备所得的丹参提取物13g，三七提取物1g，制备成水针剂。
实施例5 本发明注射剂的制备按实施例1的方法，取药材丹参3000g，三七1000g，制备所得的丹参提取物9.8g，三七提取物1.8g，制备成水针剂。
实施例6 本发明注射剂的制备按实施例1的方法，取药材丹参5000g，三七2000g，制备所得的丹参提取物16.6g，三七提取物3.5g，制备成水针剂。
实施例7 本发明药物的HPLC定量控制方法取实施例1～3制备的本发明药物组合物，照高效液相色谱法测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-乙腈-1.67％甲酸溶液(体积比23∶7∶70)为流动相；检测波长为286nm。其标准指纹图谱如附图1所示。
其标准指纹图谱的相对保留时间依次为0.134(1)，0.184(2)，0.724(3)，1.000(S)，其相对偏差不得超过10％。
实施例8 本发明药物定量控制方法①水溶性总酚◆仪器与试药岛津UV-2501紫外分光光度仪；试剂试药均为分析纯；丹参素钠对照品购自中国药品生物制品检定所(批号0855-200102)。
◆分析方法丹七注射液样品以水稀释，三氯化铁和铁氰化钾混合溶液显色，在770nm波长处测定吸收度，以丹参素为对照，采用标准曲线法计算含量。
◆方法学考察经精密度、重现性、稳定性及加样回收试验确证该方法可行。
◆测定结果见表1。
表1丹七注射液水溶性总酚测定结果
②总皂苷◆仪器与试药岛津UV-2501紫外分光光度仪；试剂试药均为分析纯；人参皂苷Rg1对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号0703-200015)。
◆分析方法丹七注射液以正丁醇提取，乙醇溶解稀释，香草醛-高氯酸显色，在551nm波长处测定吸收度，以人参皂苷Rg1为对照，采用标准曲线法计算含量。
◆方法学考察经精密度、重现性、稳定性及加样回收试验确证该方法可行。
◆测定结果见表2。
表2丹七注射液总皂苷测定结果
③丹参素及原儿茶醛◆仪器与试药岛津LC-10A高效液相色谱仪，SPD-10AV紫外检测器。流动相中的甲醇为色谱纯，其他试剂试药均为分析纯。丹参素钠、原儿茶醛对照品购自中国药品生物制品检定所提供(批号分别为0855-200102，0810-200004)。
◆分析方法丹七注射液加水稀释作为供试品溶液，HPLC法测定。色谱柱选用Shimpack CLC-ODS柱；流动相为甲醇-0.5％冰醋酸溶液(11∶89)；检测波长280nm；外标法计算含量。
◆方法学考察经精密度、重现性、稳定性及加样回收试验确证该方法可行。
◆测定结果见表3。
表3丹七注射液丹参素与原儿茶醛测定结果
④人参皂苷Rg1◆仪器与试药岛津LC-10A高效液相色谱仪，SPD-10AV紫外检测器。人参皂苷Rg1对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号0703-200015)。其高效液相色谱主峰单一，归一化法测定纯度为99.8％。
◆分析方法丹七注射液直接作为供试品溶液，HPLC法测定。色谱柱色谱柱选用辛烷基硅烷键合硅胶柱；流动相选用乙腈-0.05％磷酸溶液(19∶81)；检测波长203nm；外标法计算含量。
◆方法学考察经精密度、重现性、稳定性及加样回收试验确证该方法可行。
测定结果见表4。
表4丹七注射液人参皂苷Rg1测定结果
丹参与三七均是原料药物中的有效成分，因此，同时对两味原料药中的成分进行质量控制，可控性强，质量更加稳定、可控。
以下通过药效学试验证明本发明的有益效果。
实验例1 抗急性肝损伤模型试验对CCL4所致大鼠急性肝损伤模型，本发明药物注射液17.0mg/kg能对ALT(丙氨酸氨基转移酶)值升高显著和AST(天门冬氨酸氨基转移酶)值升高有非常显著的降低作用(P＜0.001、P＜0.01)；8.5mg/kg能非常显著的降低ALT值(P＜0.01)。本发明药物注射液4.2、8.5、17.0mg/kg对损伤肝细胞有一定的恢复作用，但无显著意义(P＞0.05)。本发明药物口服制剂(实施例3制备)21.0mg/kg能对ALT值升高有极显著和AST值升高有非常显著的降低作用(P＜0.001、P＜0.01)；10.5mg/kg能非常显著的降低ALT值(P＜0.01)。本发明药物口服制剂5.2、10.5、21.0mg/kg对损伤肝细胞有一定的恢复作用，但无显著意义(P＞0.05)。
表5本发明药物注射液对CCL4所致大鼠急性肝损伤模型的影响
注各给药组与模型组比较*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001模型组与正常对照组比较▲▲▲P＜0.001(双侧t检验)
从上表可知对CCL4所致大鼠急性肝损伤模型，本发明药物注射液17.0mg/kg能对ALT值升高有极显著和AST值升高有非常显著的降低作用(P＜0.001、P＜0.01)；8.5mg/kg能非常显著的降低ALT值(P＜0.01)。本发明药物注射液4.2、8.5、17.0mg/kg对损伤肝细胞有一定的恢复作用，但无显著意义(P＞0.05)。
对CCL4所致小鼠急性肝损伤模型，本发明药物注射液17.0mg/kg能极显著的降低ALT、AST值(P＜0.001、P＜0.001)；8.5mg/kg能非常显著的降低ALT、AST值(P＜0.01)；4.2mg/kg能显著的降低ALP(碱性磷酸酶)值(P＜0.05)。4.2、8.5、17.0mg/kg对损伤肝细胞有一定的恢复作用，但无显著意义(P＞0.05)。本发明药物口服制剂21.0mg/kg能极显著的降低ALT、AST值(P＜0.001、P＜0.001)；10.5mg/kg能非常显著的降低ALT、AST值(P＜0.01)；5.2mg/kg能显著的降低ALP值(P＜0.05)。5.2、10.5、21.0mg/kg对损伤肝细胞有一定的恢复作用，但无显著意义(P＞0.05)。
表6本发明药物注射液对CCL4所致小鼠急性肝损伤模型的影响
注各给药组与模型组比较*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001模型组与正常对照组比较▲▲▲P＜0.001(双侧t检验)对CCL4所致小鼠急性肝损伤模型，本发明药物注射液17.0mg/kg能极显著的降低ALT、AST值(P＜0.001、P＜0.001)；8.5mg/kg能非常显著的降低ALT、AST值(P＜0.01)；4.2mg/kg能显著的降低ALP值(P＜0.05)。4.2、8.5、17.0mg/kg对损伤肝细胞有一定的恢复作用，但无显著意义(P＞0.05)。
从以上量效关系试验可以看出高、中剂量组比低剂量组作用明显。
对酒精所致小鼠急性肝损伤模型，本发明药物注射液17.0mg/kg有非常显著和极显著的降低ALT和TB值作用(P＜0.01，P＜0.001)；8.5mg/kg有显著的降低ALT值作用(P＜0.05)。本发明药物口服制剂21.0mg/kg有非常显著和极显著的降低ALT和TB值作用(P＜0.01，P＜0.001)；10.5mg/kg有显著的降低ALT值作用(P＜0.05)。
表7本发明药物注射液抗酒精所致小鼠急性肝损伤模型试验
注各给药组与模型组比较*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001模型组与正常对照组比较▲▲▲P＜0.001(双侧t检验)对酒精所致小鼠急性肝损伤模型，本发明药物注射液17.0mg/kg有非常显著和极显著的降低ALT和TB值作用(P＜0.01，P＜0.001)；8.5mg/kg有显著的降低ALT值作用(P＜0.05)。
对TAA(硫代乙酰胺)所致大鼠急性肝损伤模型，本发明药物注射液17.0mg/kg能显著降低TBil值(P＜0.05)；8.5mg/kg能显著降低ALT值(P＜0.05)；4.2mg/kg对ALT、AST和TBil均有显著的降低作用(P＜0.05)。4.2、8.5、17.0mg/kg均对损伤肝细胞有一定的恢复作用，但无显著意义(P＞0.05)。本发明药物口服制剂21.0mg/kg能显著降低Tbil(总胆红素)值(P＜0.05)；10.5mg/kg能显著降低ALT值(P＜0.05)；5.2mg/kg对ALT、AST和TBil均有显著的降低作用(P＜0.05)。5.2、10.5、21.0mg/kg均对损伤肝细胞有一定的恢复作用，但无显著意义(P＞0.05)。
对D-GLAN(D-氨基半乳糖胺)所致大鼠急性肝损伤模型，本发明药物注射液17.0mg/kg能非常显著的降低ALT值(P＜0.01)、显著降低AST值(P＜0.025)；8.5mg/kg有显著降低ALT值作用(P＜0.05、P＜0.025)。8.5mg/kg对损伤肝细胞有显著的恢复作用(P＜0.05)；4.2、17.0mg/kg对损伤肝细胞有一定的恢复作用，但无显著意义(P＞0.05)。本发明药物口服制剂21.0mg/kg能非常显著的降低ALT值(P＜0.01)、显著降低AST值(P＜0.025)；10.5mg/kg有显著降低ALT值作用(P＜0.05、P＜0.025)。10.5mg/kg对损伤肝细胞有显著的恢复作用(P＜0.05)；5.2、21.0mg/kg对损伤肝细胞有一定的恢复作用，但无显著意义(P＞0.05)。
对D-GLAN所致小鼠急性肝损伤模型，本发明药物注射液17.0mg/kg有显著和极显著降低ALT、ALP值作用(P＜0.025、P＜0.001)；8.5mg/kg有显著和非常显著的降低AST、ALT、ALP值作用(P＜0.01、P＜0.05、P＜0.01)；4.2mg/kg有显著和极显著的降低ALT、ALP作用(P＜0.025、P＜0.001)。4.2、8.5、17.0mg/kg对损伤肝细胞有一定的恢复作用，但无显著意义(P＞0.05)。本发明药物口服制剂21.0mg/kg有显著和极显著降低ALT、ALP值作用(P＜0.025、P＜0.001)；10.5mg/kg有显著和非常显著的降低AST、ALT、ALP值作用(P＜0.01、P＜0.05、P＜0.01)；5.2mg/kg有显著和极显著的降低ALT、ALP作用(P＜0.025、P＜0.001)。5.2、10.5、21.0mg/kg对损伤肝细胞有一定的恢复作用，但无显著意义(P＞0.05)。
实验例2 抗免疫性肝损伤模型试验对细菌内毒素造成的小鼠免疫性肝损伤模型，本发明药物注射液17.0mg/kg有非常显著降低ALT作用(P＜0.01)；8.5mg/kg有显著降低ALT、AST作用(P＜0.05)。17.0mg/kg对肝细胞坏死有明显降低作用(P＜0.05)；能显著增加肝细胞增生(P＜0.05)；8.5mg/kg对肝细胞变性有极显著改善作用(P＜0.001)；4.2mg/kg能极显著改善肝细胞变性、坏死(P＜0.001)；能显著改善肝细胞的炎性病变(P＜0.05)；能极显著增加肝细胞增生(P＜0.001)。本发明药物口服制剂21.0mg/kg有非常显著降低ALT作用(P＜0.01)；10.5mg/kg有显著降低ALT、AST作用(P＜0.05)。21.0mg/kg对肝细胞坏死有明显降低作用(P＜0.05)；能显著增加肝细胞增生(P＜0.05)；10.5mg/kg对肝细胞变性有极显著改善作用(P＜0.001)；5.2mg/kg能极显著改善肝细胞变性、坏死(P＜0.001)；能显著改善肝细胞的炎性病变(P＜0.05)；能极显著增加肝细胞增生(P＜0.001)。
实验例3 退黄试验对-萘异硫氰酸酯引起的大鼠阻塞性黄疸模型，本发明药物注射液17.0mg/kg有显著降低DBil、ALT和ALP值作用(P＜0.05)；8.5mg/kg能显著降低ALT和ALP值(P＜0.05)；4.2mg/kg能极显著降低ALT(P＜0.001)、非常显著的降低ALP(P＜0.01)。本发明药物口服制剂21.0mg/kg有显著降低DBil、ALT和ALP值作用(P＜0.05)；10.5mg/kg能显著降低ALT和ALP值(P＜0.05)；5.2mg/kg能极显著降低ALT(P＜0.001)、非常显著的降低ALP(P＜0.01)。
实验例4 免疫功能试验本发明药物注射液17.0mg/kg能非常显著和4.2mg/kg能显著的增强小鼠单核细胞吞噬异物的作用(P＜0.01、P＜0.05)，17.0、8.5、4.2mg/kg对D-GALN所造成的急性肝损伤模型小鼠分别有极显著、非常显著和显著增强其单核细胞吞噬异物的作用(P＜0.001、P＜0.01、P＜0.05)，具有增强免疫作用。17.0mg/kg有显著降低ALT值作用(P＜0.025)。
本发明药物口服制剂21.0mg/kg能非常显著和5.2mg/kg能显著的增强小鼠单核细胞吞噬异物的作用(P＜0.01、P＜0.05)，21.0、10.5、5.2mg/kg对D-GALN所造成的急性肝损伤模型小鼠分别有极显著、非常显著和显著增强其单核细胞吞噬异物的作用(P＜0.001、P＜0.01、P＜0.05)，具有增强免疫作用。21.0mg/kg有显著降低ALT值作用(P＜0.025)。
实验例5 抗应激能力试验本发明药物注射液8.5、17.0、34.0mg/kg对正常小鼠在常压缺氧状态下的存活时间有一定的提高的作用，但无显著性意义(P＞0.05)。34.0、17.0mg/kg能非常显著地提高小鼠在冰水中存活时间(P＜0.01)。
本发明药物口服制剂10.5、21.0、42.0mg/kg对正常小鼠在常压缺氧状态下的存活时间有一定的提高的作用，但无显著性意义(P＞0.05)。42.0、21.0mg/kg能非常显著地提高小鼠在冰水中存活时间(P＜0.01)。
实验例6 改善血液流变学试验对肾上腺素造成的大鼠肝气郁结及寒凝气滞模型，本发明药物注射液50.0mg/kg有极显著的降低全血粘度作用(P＜0.001)；对全血还原粘度和全血相对指数有极显著、非常显著的增高作用(P＜0.001、P＜0.01)25.0、12.5mg/kg均有极显著、非常显著的降低全血粘度作用(P＜0.01、P＜0.001)；对全血还原粘度和全血相对指数有非常显著、显著的增高作用(P＜0.01、P＜0.05)。25.0mg/kg能极显著的和12.5mg/kg能显著降低全血纤维蛋白(P＜0.001、P＜0.05)。本发明药物口服制剂60.0mg/kg有极显著的降低全血粘度作用(P＜0.001)；对全血还原粘度和全血相对指数有极显著、非常显著的增高作用(P＜0.001、P＜0.01)30.0、15.0mg/kg均有极显著、非常显著的降低全血粘度作用(P＜0.01、P＜0.001)；对全血还原粘度和全血相对指数有非常显著、显著的增高作用(P＜0.01、P＜0.05)。30.0mg/kg能极显著的和15.0mg/kg能显著降低全血纤维蛋白(P＜0.001、P＜0.05)。
实验例7 改善微循环试验本发明药物注射液50.0、25.0mg/kg均能显著地扩张微血管管径(P＜0.05)；均能显著地对抗肾上腺素引起的微血管管径缩小(P＜0.05)。12.5、25.0、50.0mg/kg均能显著、非常显著和极显著地对抗肾上腺素对血液流态的影响，具有改善微循环的作用(P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001)。
本发明药物口服制剂60.0、30.0mg/kg均能显著地扩张微血管管径(P＜0.05)；均能显著地对抗肾上腺素引起的微血管管径缩小(P＜0.05)。15.0、30.0、60.0mg/kg均能显著、非常显著和极显著地对抗肾上腺素对血液流态的影响，具有改善微循环的作用(P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001)。
实验例8 修复损伤肝细胞及促进肝细胞再生对D-GLAN所致大鼠急性肝损伤模型，本发明药物注射液8.5mg/kg对损伤肝细胞有显著的恢复作用(P＜0.05)；对细菌内毒素造成的小鼠免疫性肝损伤模型，本发明药物注射液17.0mg/kg有明显降低肝细胞坏死作用(P＜0.05)，8.5mg/kg有极显著改善肝细胞变性作用(P＜0.001)，4.2mg/kg能极显著改善肝细胞变性、坏死作用(P＜0.001)，还能显著改善肝细胞的炎性病变作用(P＜0.05)。同时，本发明药物注射液17.0mg/kg和4.2mg/kg能显著、极显著促进肝细胞增生作用(P＜0.05、P＜0.001)。本发明药物口服制剂10.5mg/kg对损伤肝细胞有显著的恢复作用(P＜0.05)；对细菌内毒素造成的小鼠免疫性肝损伤模型，本发明药物注射液21.0mg/kg有明显降低肝细胞坏死作用(P＜0.05)，10.5mg/kg有极显著改善肝细胞变性作用(P＜0.001)，5.2mg/kg能极显著改善肝细胞变性、坏死作用(P＜0.001)，还能显著改善肝细胞的炎性病变作用(P＜0.05)。同时，本发明药物口服制剂21.0mg/kg和5.2mg/kg能显著、极显著促进肝细胞增生作用(P＜0.05、P＜0.001)。
另外，CCL4、TAA所致大鼠急性肝损伤模型，以及CCL4、D-GLAN(D-氨基半乳糖胺)所致小鼠急性肝损伤模型的试验结果均表明，本发明药物注射液4.2-17.0mg/kg和本发明药物口服制剂5.2-21.0mg/kg对损伤肝细胞均有一定的恢复作用，但无显著意义(P＞0.05)。
上述药效学研究证明，本发明药物注射液和口服制剂均对多种原因引起急性肝损伤和免疫性肝损伤所致ALT、AST、ALP、TB活性升高均有明显的降低作用；对肝损伤的组织形态学肝细胞变性、坏死、炎性程度有一定的改善和增生肝细胞作用；对胆道阻塞所致的黄疸升高有一定消退作用；能提高正常动物与肝损伤动物机体细胞免疫调控作用；具有较好的改善血液流变学和微循环的作用、有一定的抗应激作用。
中药注射剂的毒性及过敏性一直是难于解决的问题，主要由于中药材中含有大量不明确的成份。为评价其药效作用和毒理反应，对该制剂进行了与功能主治有关的主要药效学，一般药理学，急性毒性、长期毒性(Beagle犬长期毒性、大鼠长期毒性)和特殊安全性试验研究，分述如下实验例9 动物急性毒性试验用Biliss法计算求得本发明药物注射液对ICR种小鼠静脉注射给药的LD50及其95％的可信限为2684.81(2554.52～2821.75)mg/Kg；腹腔注射给药的LD50及其95％的可信限为2750.85(2538.73～2980.70)mg/Kg。用Biliss法计算求得本发明药物口服制剂对ICR种小鼠灌胃给药的LD50及其95％的可信限为2879.81(2684.57～3078.63)mg/Kg。
用Biliss法计算求得本发明药物注射液对SD大鼠静脉注射给药的LD50及其95％的可信限为2189.35(2073.62～2311.53)mg/Kg；腹腔注射给药的LD50及其95％的可信限为2682.58(2493.14～2886.42)mg/Kg。用Biliss法计算求得本发明药物口服制剂对SD大鼠灌胃给药的LD50及其95％的可信限为2714.35(2531.84～2916.45)mg/Kg。
静脉注射给药后动物出现呼吸困难，活动减少等症状，死亡的动物多在注射后30分钟内死亡，死亡数量和时间随剂量的减少而减少和延长，解剖观察，无肉眼可见病变。存活动物24小时后恢复正常，摄食量和体重无明显减少，处死动物后，肉眼观察重要器官(心、肝、脾、肺、肾等)均无异常发现。
腹腔注射给药后动物出现呼吸困难，活动减少等症状，小鼠死亡多在注射后8小时内死亡；大鼠死亡多在注射后12小时内死亡，死亡数量和时间随剂量的减少而减少和延长，解剖观察，无肉眼可见病变。存活动物48小时后恢复正常，摄食量和体重无明显减少，处死动物后，肉眼观察重要器官(心、肝、脾、肺、肾等)均无异常发现。
灌胃给药后动物出现呼吸困难，活动减少等症状，48小时后恢复正常，摄食量和体重无明显减少，处死动物后，肉眼观察重要器官(心、肝、脾、肺、肾等)均无异常发现。
结论以上试验表明本发明药物注射液和口服制剂安全剂量范围较大。
实验例10动物长期毒性试验1、Beagle犬长期毒性试验本发明药物注射液按250、125和62.5mg/kg三个剂量，分别相当于其临床静脉滴注剂量的30、15和7.5倍，连续对Beagle犬静脉给药45天及停药15天，结果如下(1)生长发育及一般情况观察给药期间和停药观察，动物精神行为、活动、皮毛、呼吸、循环、食欲、大小便等均未见明显异常，给药及停药期间，对犬体重增长和发育无明显影响，也无延迟性毒性反应。
(2)尿常规检查未见异常。
(3)对血象的影响未见异常。
(4)对肝功能的影响未见异常。
(5)对肾功能的影响未见异常。
(6)对血糖和血清胆固醇的影响未见异常。
(7)对心电图的影响未见异常。
(8)活体动物骨髓检查未见异常。
(9)系统尸解和脏器指数未见异常。
(10)病理组织学检查给药45天检查，低剂量组雄性动物1例结肠粘膜下淋巴小结形成；低剂量组雌性动物1例淋巴滤泡增多，并出现于髓质。给药组与对照组比较无统计学差异(P＞0.05)。停药15天检查，各组脏器检查均未见异常。
结论本发明药物注射液连续给Beagle犬静脉滴注250mg/Kg 45天无毒性反应。250mg/Kg及以下剂量对犬各项指标未见明显异常影响，亦无明显延迟性毒性反应，属安全剂量范围。
2、大鼠长期毒性试验资料综述本发明药物注射液按250、125和62.5mg/kg三个剂量，本发明药物口服制剂按630、157.5和78mg/kg三个剂量，分别相当于临床日用剂量的30、15和7.5倍，分别连续对大鼠腹腔注射给药45天及停药14天，观察了本发明药物注射液及口服制剂对动物的主要不良反应为
(1)一般情况及体重给药45天和停药14天各组受试大鼠行为活动正常，动物毛泽光滑，无异常分泌物。动物体重和摄食量随时间正常增长，各组均无动物死亡。
(2)血常规本发明药物注射液连续对大鼠腹腔注射给药45天血常规检查，与对照组比较，本发明药物注射液高、低剂量雌性组RBC分别显著升高(P＜0.05)，中剂量雌性组RBC非常显著升高(P＜0.01)；高、中、低剂量雄性组PLT分别极显著升高P＜0.001)；高、中、低剂量雌、雄性组RC分别显著、非常显著和极显著升高(P＜0.05，P＜0.01和P＜0.001)；高、中剂量雌性组MCHC分别非常显著降低(P＜0.01)，其余各项指标未见异常(P＞0.05)，各组指标均在正常范围内，实际意义不明显。停药14天检查与对照组比较，本发明药物注射液高剂量雌性组RBC显著降低(P＜0.05)，中剂量雌性组PDW非常显著降低(P＜0.01)，各组指标均在正常范围内，实际意义不明显。
本发明药物口服制剂组连续对大鼠腹腔注射给药45天血常规检查，与对照组比较，本发明药物口服制剂组高、低剂量雌性组RBC分别显著升高(P＜0.05)，中剂量雌性组RBC非常显著升高(P＜0.01)；高、中、低剂量雄性组PLT分别极显著升高P＜0.001)；高、中、低剂量雌、雄性组RC分别显著、非常显著和极显著升高(P＜0.05，P＜0.01和P＜0.001)；高、中剂量雌性组MCHC分别非常显著降低(P＜0.01)，其余各项指标未见异常(P＞0.05)，各组指标均在正常范围内，实际意义不明显。停药14天检查与对照组比较，本发明药物口服制剂组高剂量雌性组RBC显著降低(P＜0.05)，中剂量雌性组PDW非常显著降低(P＜0.01)，各组指标均在正常范围内，实际意义不明显。
(3)肝功能本发明药物注射液连续给药45天检查，与对照组比较，本发明药物注射液中剂量雌性组TP有非常显著升高(P＜0.01)，其余各组动物的肝功能指标均在正常范围内。停药14天检查与对照组检查，未见明显差异(P＞0.05)。各组动物的肝功能指标均在正常范围内。
本发明药物口服制剂组连续给药45天检查，与对照组比较，本发明药物口服制剂组中剂量雌性组TP有非常显著升高(P＜0.01)，其余各组动物的肝功能指标均在正常范围内。停药14天检查与对照组检查，未见明显差异(P＞0.05)。各组动物的肝功能指标均在正常范围内。
(4)肾功能本发明药物注射液、口服制剂组连续给药45天和停药14天肾功能检查，与对照组比较，未见明显差异(P＞0.05)，各组动物肾功能指标均在正常范围内。
(5)其它生化指标本发明药物注射液、口服制剂组连续给药45天，与对照组比较，本发明药物注射液、口服制剂组高、低剂量雌性组CHOL分别显著降低(P＜0.05)。停药14天后检查，与对照组比较，未见明显差异(P＞0.05)。
(6)系统尸解及脏器指数结果显示，给药45天和停药14天，本发明药物注射液、口服制剂组各剂量组与对照组比较，无显著差异(P＞0.05)。
(7)病理组织学检查给药45天和停药14天，本发明药物注射液各剂量组和对照组大鼠脑(小脑)、垂体、视神经、心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺、胰腺、胸腺、膀胱、胃、十二指肠、回肠、结肠、卵巢、子宫、睾丸、附睾、前列腺、淋巴结、脊髓、胸骨、鼻中隔、视网膜的组织形态学检查，结果发现给药45天本发明药物注射液高剂量组雄性动物1例、中剂量组雌性动物1例胃下部分血管扩张伴中性白细胞浸润。高剂量组雄性动物2例、雌性动物1例，中剂量雌、雄性动物各1例和对照组雄性动物1例结肠粘膜下淋巴小结形成。高剂量组雄性动物1例膀胱部分肌层明显出血伴单核、中性细胞浸润。高剂量组1例子宫内膜及肌层少许中性白细胞浸润。其余各组各项指标，均未发现明显的病理形态学损害。给药组与对照组比较，无统计学差异(P＞0.05)。停药14天检查，各组均未发现明显的病理形态学损害。
病理组织学检查给药45天和停药14天，本发明药物口服制剂组各剂量组和对照组大鼠脑(小脑)、垂体、视神经、心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺、胰腺、胸腺、膀胱、胃、十二指肠、回肠、结肠、卵巢、子宫、睾丸、附睾、前列腺、淋巴结、脊髓、胸骨、鼻中隔、视网膜的组织形态学检查，结果发现给药45天本发明药物口服制剂组高剂量组雄性动物2例、中剂量组雌性动物1例胃下部分血管扩张伴中性白细胞浸润。高剂量组雄性动物1例、雌性动物1例，中剂量雌、雄性动物各1例和对照组雄性动物1例结肠粘膜下淋巴小结形成。高剂量组雄性动物1例膀胱部分肌层明显出血伴单核、中性细胞浸润。高剂量组1例子宫内膜及肌层少许中性白细胞浸润。其余各组各项指标，均未发现明显的病理形态学损害。给药组与对照组比较，无统计学差异(P＞0.05)。停药14天检查，各组均未发现明显的病理形态学损害。
结论本发明药物注射液、本发明药物口服制剂组长期大剂量腹腔注射给予受试动物未出现明显毒性反应及病理损害。
3、特殊安全性试验研究资料综述3.1溶血试验本发明药物注射液与2％兔红细胞混悬液混合，温育4小时，结果未出现溶血和凝聚现象。
3.2血管刺激试验本发明药物注射液对家兔耳缘静脉滴注50mg/kg，连续3天，肉眼观察无充血、水肿、变性、坏死等刺激反应，病理组织形态学检查各结构正常，表明该药对注射部位血管无刺激作用。
3.3肌肉刺激试验本发明药物注射液对家兔股四头肌注射1ml(5mg)，48小时后，观察刺激反应情况，结果无充血、水肿、变性等刺激反应，表明该药对注射部位肌肉无刺激作用。
3.4全身主动过敏试验本发明药物注射液对豚鼠隔日腹腔注射每只0.5ml致敏，共3次，动物分别于首次注射本发明药物注射液后第14天和第21天，静脉注射本发明药物注射液2ml进行攻击，结果均未出现全身主动过敏反应症状，卵蛋白阳性对照组动物全部出现阳性反应，表明该药不引起过敏反应。
3.5降压物质检查本发明药物注射液对麻醉猫股静脉注射8.3mg/kg，以组织胺为对照进行降压实验，结果本发明药物注射液未引起降压反应，表明该药无降压作用。
小结本发明药物注射液不产生溶血与凝聚反应，对肌肉、血管无刺激性，不引起全身主动过敏反应，无降压作用，符合注射剂一般安全性要求。
经系统的药理毒理学研究证明，本发明药物注射液具有对多种原因引起急性肝损伤和免疫性肝损伤所致ALT、AST、ALP、TB活性升高均有明显的降低作用；对肝损伤的组织形态学肝细胞变性、坏死、炎性程度有一定的改善和修复肝细胞作用；对胆道阻塞所致的黄疸升高有一定消退利胆作用；能提高正常动物与肝损伤动物机体细胞免疫调控作用；具有较好的改善血液流变学和微循环的作用、对正常动物和肝损伤动物均具有较好的抗应激作用功效，为临床应用提供了药理学依据；此外，小鼠急性毒性试验，Beagle犬、大鼠长期毒性试验和一般药理学试验研究结果表明，该制剂毒性反应低，安全度较大，为其临床安全用药提供了毒理学依据，对正常动物各系统无影响，无不良反应。特殊安全性试验研究表明符合注射剂一般安全性要求。
本发明药物原料配伍经药效学筛选与拆方研究而确定，以此原料配伍制成的本发明药物注射液制剂经药效与毒理研究证明对各种原因引起的肝脏损害具有较强的药理活性，毒副作用较低。虽然无病原学治疗作用，但以降酶和促进肝细胞再生为特色，适用范围广，能迅速改善临床症状，采用口服制剂和注射液剂型可以增强中医急症治疗的手段。
权利要求
1.一种治疗肝炎的药物组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂丹参3-10份、三七1-3份。
2.根据权利要求1所述的治疗肝炎的药物组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂丹参6份、三七1份。
3.根据权利要求1或2所述的治疗肝炎的药物组合物，其特征在于它是由药材丹参、三七的水提取物或醇提取物混合为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的药剂。
4.根据权利要求3所述的治疗肝炎的药物组合物，其特征在于所述的药剂是口服制剂或注射剂。
5.根据权利要求4所述的治疗肝炎的药物组合物，其特征在于所述的口服制剂是胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂、散剂。
6.根据权利要求4所述的治疗肝炎的药物组合物，其特征在于所述的注射剂是注射水针剂、静滴剂型、粉针剂。
7.根据权利要求6所述的治疗肝炎的药物组合物，其特征在于每毫升注射水针剂中含丹参水溶性总酚3.24～3.36mg、总皂苷1.69～1.76mg、丹参素0.83～0.91mg、原儿茶醛0.23～0.25mg、人参皂苷Rg1 0.63～0.69mg。
8.根据权利要求6或7所述的治疗肝炎的药物组合物，其特征在于其特征在于该药物组合物的HPLC指纹图谱如图1所示，由4个特征峰组成，其中色谱条件为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-乙腈-1.67％甲酸溶液，其体积比为23∶7∶70的流动相；检测波长为286nm。
9.根据权利要求8所述的治疗肝炎的药物组合物，其特征在于所述的4个特征峰相对保留时间的相对标准偏差RSD均小于10.0％，其中，1号峰平均相对保留时间RT 0.134，2号峰RT 0.184，3号峰RT 0.724，4号峰RT 1.000。
10.一种制备上述任意权利要求所述的治疗肝炎的药物组合物的方法，它包括下列步骤a、按各重量配比称取原料丹参3-10份、三七1-3份；b、丹参提取物的制备取药材丹参，加水煎煮提取，过滤，滤液浓缩，干燥，干燥浸膏粉用50-95％乙醇作溶剂，渗漉法提取，得渗漉液，加入活性炭，加热回流提取，滤过，回收乙醇，加水溶解，水溶液通过大孔吸附树脂，用30-85％乙醇洗脱，乙醇洗脱液，回收乙醇即得丹参提取物；c、三七提取物的制备取药材三七，用35-95％乙醇为溶剂，渗漉法提取，得渗漉液，将渗漉液中加入活性炭，回流提取，滤过，滤液减压回收乙醇，得醇浸膏，将醇浸膏加水溶解，滤过，水溶液通过大孔吸附树脂柱，再用30-90％乙醇洗脱，得乙醇洗脱液，回收乙醇，即得三七提取物；d、将步骤b制备的丹参提取物、步骤c制备的三七提取物混合，加水溶解，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分，制备成药学上常用的制剂。
11.权利要求1所述的下述重量配比的原料在制备治疗急、慢性肝炎的药物中的用途丹参3-10份、三七1-3份。
12.根据权利要求11所述的用途，其特征在于所述药物为口服治疗急、慢性肝炎的药物。
13.根据权利要求11所述的用途，其特征在于所述的药物为注射治疗急、慢性肝炎的药物。
14.根据权利要求13所述的用途，其特征在于所述的药物为静脉注射治疗急、慢性肝炎的药物。
全文摘要
本发明涉及一种治疗肝炎的药物组合物，它是由丹参、三七为原料制备而成的药剂，该药剂为口服和注射制剂，药材中的提取物丹参水溶性总酚、总皂苷混合既减少了用药量，同时去除杂质，用药量更加准确，治疗肝炎疗效好、安全、可控、稳定，为临床提供了一种新的治疗肝炎药物的选择。
文档编号A61P31/00GK1795893SQ20041008155
公开日2006年7月5日 申请日期2004年12月21日 优先权日2004年12月21日
发明者蒲旭峰, 杨幼琪, 银海, 林庆华, 文永盛, 张德波, 孙继林, 曾雁鸣 申请人:四川迪康科技药业股份有限公司