专利名称：氨基烷基酰胺取代的环己基衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的氨基烷基酰胺取代的环己基衍生物、它们的制备方法以及它们用作药物的用途。具体而言，本发明涉及式I化合物及其药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的酯 其中U为O或孤对电子；R1为低级-烷基、羟基-低级-烷基、环烷基或低级-烷基-NH-C(O)-O-低级-烷基；R2为低级-烷基或羟基-低级-烷基；R3为氢、低级-烷基、氟代-低级-烷基或环烷基；或者R2和R3互相连接并与它们所连接的N-(CH2)k-N基团一起形成环并且-R2-R3-为低级-亚烷基；R4为低级-烷基；R5为芳基或杂芳基；W为单键、CO、COO、CONR6、CSO、CSNR6、SO2或SO2NR6；R6为氢或低级-烷基；V为单键、低级-亚烷基或低级-亚烷基-氧基；k为2、3或4；m为0、1、2或3，其中k+m不大于5。
本发明化合物抑制2，3-环氧鲨烯-羊毛甾醇环化酶(EC 5.4.99.)，该酶是胆固醇、麦角固醇和其它固醇类的生物合成所必需的。直接导致冠状和外围动脉粥样硬化的风险因素包括增高的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、较低的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、高血压、吸烟和糖尿病。其它协同的风险因素包括增高的富含甘油三酸酯(TG)的脂蛋白的浓度、微小的低密度脂蛋白微粒、脂蛋白(a)(Lp(a))以及高半胱氨酸。素因性风险因素可改变原因性的和条件下的风险因素，并由此间接影响动脉粥样化形成。素因性风险因素包括肥胖、缺乏体力活动、早熟CVD家族史以及雄性。由于冠心病(CHD)和血浆高LDL-C水平之间有很强的联系，因此已确认降低增高的LDL-C水平具有显著的治疗作用[Gotto等，Circulation 811721-1733(1990)；Stein等，Nutr.Metab.Cardiovasc.Dis.2113-156(1992)；Illingworth，Med.Clin.North.Am.8423-42(2000)]。动脉粥样硬化斑块(富含胆固醇的，有时是不稳定的)可引发血管闭塞，从而导致局部缺血或梗塞。基本预防研究表明，降低血浆中的血浆LDL-C的水平可减少CHD的非致命情况的发生率，尽管总发病率会保持不变。在已经确诊的CHD患者中降低血浆LDL-C水平(二级干预)减少了CHD死亡率以及发病率；不同研究的荟萃分析(meta-分析)显示，该降低与LDL-C的降低成比例[Ross等，Arch.Intern.Med.1591793-1802(1999)。
对具有CHD的患者来说，胆固醇降低的临床优势大于那些无症状的具有高胆固醇的人。根据现有的治疗实践，对于心肌梗塞的幸存者或心绞痛或其它动脉粥性疾病的患者，推荐进行降低胆固醇的治疗，目标LDL-C水平为100mg/dl。
制剂如胆酸螯合剂、贝特类、烟酸、普罗布考以及他汀类，即HMG-Co-A还原酶抑制剂例(如辛伐他汀和阿托伐他汀)，可以用于常规标准治疗。最好的他汀类可以有效降低血浆LDL-C至少40％，并且对血浆甘油三酸酯(协同风险因素)也是有效的，但效果相对差一些。相比之下，贝特类可以有效降低血浆甘油三酸酯，但对LDL-C无效。而他汀类和贝特类的合用已证实能十分有效地降低LDL-C和甘油三酸酯[Ellen和McPherson，J.Cardiol.8160B-65B(1998)]，但该联合用药的安全性仍然是个问题[Shepherd，Eur.Heart J.165-13(1995)]。因此，具有上述联合作用即对降低LDL-C和甘油三酸酯均有效的单一药物将是无症状及有症状的患者临床需要的药物。
在人体内，他汀类在标准剂量下具有良好的耐受性，但在胆固醇合成通路中非固醇中间体(例如类异戊二烯和辅酶Q)的降低可能与高剂量时不良的临床事件有关[Davignon等，Can.J.Cardiol.8843-864(1992)；Pederson和Tobert，Drug Safety 1411-24(1996)]。
这刺激了人们寻找和开发抑制胆固醇生物合成的化合物和作用于这些重要的非固醇中间体化合物合成的远端的化合物。2，3-环氧角鲨烯(羊毛甾醇环化酶(OSC)，一种微粒体酶)是降低胆固醇的药物作用的独特的目标[Morand等，J.Lipid Res.38373-390(1997)；Mark等，J.Lipid Res.37148-158(1996)]。OSC位于焦磷酸法呢酯的下游，远离类异戊二烯和辅酶Q的合成。在仓鼠中，药理学活性剂量的OSC抑制剂不具有副作用，与他汀类不同，他汀类可减少食物摄取和体重，增加血浆胆红素、肝脏重量和肝脏甘油三酸酯含量[Morand等，J.Lipid Res.38373-390(1997)]。在EP 636,367中述及的可以抑制OSC、并且降低血浆中的总胆固醇的化合物即属于此类物质。
OSC抑制并不会引发HMGR的过度表达，因为它是间接地负反馈调节24(S)，25-环氧胆固醇生成的机制[Peffley等，Biochem.Pharmacol.56439-449(1998)；Nelson等，J.Biol.Chem.2561067-1068(1981)；Spencer等，J.Biol.Chem.26013391-13394(1985)；Panini等，J.Lipid Res.271190-1204(1986)；Ness等，Arch.Biochem.Biophys.308420-425(1994)]。这些负馈调节机制是OSC抑制概念的基础，这是因为(i)它可以通过间接地下调HMGR增强主要抑制作用，并且(ii)它阻碍了单环氧角鲨烯前体在肝脏内的大量堆积。另外，人们发现，24(S)，25-环氧基胆固醇是核受体LXR的最有效的激动剂[Janowski等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA96266-271(1999)]。考虑到24(S)，25-环氧基胆固醇为OSC抑制的副产物，试想本发明的OSC抑制剂也可以间接地活化LXR-依赖通路，例如(i)胆固醇-7α-羟化酶以提高胆固醇通过胆酸途径的消耗，(ii)ABC蛋白质表达能够刺激胆固醇反向转送和增加血浆HDL-C水平[Venkateswaran等，J.Biol.Chem.27514700-14707(2000)；Ordovas，Nutr Rev 5876-79(2000)，Schmitz和Kaminsky，Front Biosci 6D505-D514(2001)]，和/或抑制肠胆固醇吸收[Mangelsdorf，第XII次动脉粥样硬化国际会议论文集(XIIthInternational Symposium on Atherosclerosis)，Stockholm，June 2000]。另外，人们推测，肝脏LXR介导的脂肪酸和胆固醇代谢之间可能存在相互作用[Tobin等，Mol.Endocrinol.14741-752(2000)]。
本发明的式I化合物可以抑制OSC，因此也可以抑制胆固醇、麦角固醇和其它固醇的生物合成，并减少血浆胆固醇水平。因此，它们可以用于治疗和预防高胆固醇、高脂血症、动脉硬化和血管疾病。另外，它们可用于预防和/或治疗霉菌病、寄生虫感染、胆结石、胆汁淤积性肝脏疾病、肿瘤和过度增殖性疾病，例如过度增殖性皮肤和血管疾病。另外，申请人意外地发现，本发明化合物也具有下列治疗用途，通过增强葡萄糖耐受性达到治疗和/或预防相关疾病例如糖尿病的作用。与已知的化合物相比，本发明化合物还具有改进的药理学性质。
除非特别指出，给出下列定义用于说明和定义本发明文中所述各种术语的含义和范围。
本说明书中，术语“低级”意指包含1-7个、优选1-4个碳原子的基团。
术语“孤对电子”意指非结合的电子对，特别是在如胺中的氮原子的未结合的电子对。
术语“卤素”意指氟、氯、溴和碘，优选氟、氯和溴。
术语“烷基”，单独或与其它基团结合，意指具有1-20个碳原子的支链或直链单价饱和脂肪烃基团，优选1-16个碳原子，更优选1-10个碳原子。下面所述低级-烷基基团也是优选的烷基基团。
术语“低级-烷基”，单独或与其它基团结合，意指具有1-7个碳原子的支链或直链单价烷基基团，优选1-4个碳原子。这一术语的实例性基团有甲基、乙基、正-丙基、异丙基、正-丁基、仲-丁基、叔-丁基等。
术语“氟代-低级-烷基”意指被氟单-或多取代、优选被多至6个氟原子取代的低级-烷基基团。氟代-低级-烷基基团的实例有如CF3、CF3CH2和(CF3)2CH。
术语“环烷基”意指具有3-10个碳原子、优选3-6个碳原子的单价碳环基团，例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基。
术语“烷氧基”意指基团R’-O-，其中R’为烷基。术语“低级-烷氧基“意指基团R’-O-，其中R’为低级-烷基。术语“硫代-烷氧基”意指基团R’-S-，其中R’为烷基。术语“硫代-低级-烷氧基”意指基团R’-S-，其中R’为低级-烷基。
术语“链烯基”，单独或与其它基团结合，代表直链或支链烃基团，所述基团包含一个烯键和多至20个、优选16个碳原子、更优选多至10个碳原子。下文所述的低级-链烯基基团也是优选的链烯基基团。术语“低级-链烯基”意指直链或支链烃基团，所述基团包含一个烯键和多至7个、优选多至4个碳原子，例如2-丙烯基。
术语“炔基”，单独或与其它基团结合，代表直链或支链烃基团，所述基团包含一个三键和多至20个、优选多至16个碳原子、更优选多至10个碳原子。下文所述的低级-炔基基团也是优选的炔基基团。术语“低级-炔基“意指直链或支链烃基团，所述基团包含三键和多至7个、优选多至4个碳原子，例如2-丙炔基。
术语“亚烷基”意指直链或支链二价饱和脂肪烃基团，具有1-20个碳原子、优选1-16个碳原子、更优选多至10个碳原子。如下文所述的低级-亚烷基基团也是优选的亚烷基基团。术语“低级-亚烷基”意指直链或支链二价饱和脂肪烃基团，具有1-7个、优选1-6个或3-6个碳原子。优选直链亚烷基或低级-亚烷基基团。
术语“亚烷基-氧基”意指基团R”-O-，其中R”为亚烷基。术语“低级-亚烷基-氧基”意指基团R”-O-，其中R”为低级-亚烷基。
术语“芳基”指苯基或萘基基团，优选苯基基团，可以任选被1-3个独立选自下列基团的取代基取代低级-烷基、氟代-低级-烷基、低级-链烯基、低级-炔基、二氧代-低级-亚烷基(形成如一个苯并二氧基基团)、卤素、羟基、CN、CF3、NH2、N(H，低级-烷基)、N(低级-烷基)2、氨基羰基、羧基、NO2、低级-烷氧基、硫代-低级-烷氧基、低级-烷基羰基、低级-烷基羰基氧基、低级-烷氧基羰基。优选的取代基为卤素、氟代-低级-烷基、CF3、CN、低级-烷基和/或低级-烷氧基。
术语“杂芳基”意指芳族5-或6-元环，包含1、2或3个选自氮、氧和/或硫的原子，例如呋喃基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、噻吩基、异唑基、唑基、咪唑基或吡咯基。杂芳基基团可以如前文关于术语″芳基″中所述具有取代形式。
术语“药学上可接受的盐”包括式(I)化合物与有机酸或无机酸形成的盐，所述酸例如为盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、甲酸、马来酸、乙酸、富马酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、对-甲苯磺酸等对活的生物体无毒的酸。优选的盐为磷酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、甲酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐和甲磺酸盐。
术语“药学上可接受的酯”包括式(I)化合物的酯，其中羟基基团已被无机或有机酸转化为相应的酯，例如硝酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、甲酸、马来酸、乙酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、对-甲苯磺酸等对活生物体无毒的酸。
在一个实施方案中，本发明提供了式I化合物以及药学上可接受的盐和/或它们药学上可接受的酯，为反式-异构体，其特征为式Ia 其中R1、R2、R3、R4、R5、U、V、W、k和m如上文所述。
其它优选的实施方案涉及其中U为孤对电子的式(I)化合物。
优选如下定义的上文所述化合物，即其中R1为低级-烷基、羟基-低级-烷基或低级-烷基-NH-C(O)-O-低级-烷基，特别优选低级-烷基或羟基-低级-烷基，更优选甲基或2-羟基乙基。
其它优选的本发明化合物为如下定义的化合物，其中R2为低级-烷基，特别是甲基或羟基-低级-烷基。也优选这样的化合物，其中R3为低级-烷基、氟代-低级-烷基或环烷基，特别优选那些其中R3为低级-烷基、更优选甲基的化合物。
在进一步优选的本发明的实施方案中，R2和R3互相连接，与它们连接的N-(CH2)k-N基团形成环，且-R2-R3-为低级-亚烷基。优选-R2-R3-为-(CH2)2-4-，更优选-(CH2)2-或-(CH2)3-。优选其中R4为甲基的化合物。
进一步优选的本发明化合物是这样的化合物，其中W为SO2或COO且R5为芳基。在此类化合物中，R5优选为被氟代-低级-烷基或卤素取代的苯基。更优选R5为4-三氟甲基-苯基或4-氯代-苯基。其它优选的化合物是这样的化合物，其中W为单键且R5为杂芳基，优选R5为被卤素、低级-烷基或氟代-低级-烷基取代的嘧啶基，更优选R5为5-溴代-嘧啶-2-基、5-氯代-嘧啶-2-基或4-三氟甲基-嘧啶-2-基。
在另一个本发明优选的实施方案中，k为2或3，优选2。另外，优选其中m为0、1或2的化合物。在此类化合物中，优选的实施方案为m＝0、m＝1和m＝2的化合物。
另外，优选其中V为单键或低级-亚烷基氧基的如上文定义的化合物，特别是那些其中V为单键、-CH2-O-或-(CH2)2-O-的化合物。
优选的通式(I)的化合物选自下列化合物反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-N-甲基-3-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酰胺，反式-N-甲基-N-{4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-3-氧代-丙氧基]-环己基}-4-三氟甲基-苯磺酰胺，反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-N-甲基-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-乙酰胺，反式-N-甲基-N-{4-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-2-氧代-乙氧基]-环己基}-4-三氟甲基-苯磺酰胺，反式-(4-{[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-甲氧基}-环己基)-甲基-氨基甲酸4-溴代-苯基酯，反式-(4-{[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-甲氧基}-环己基)-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，反式-4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，反式-4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己烷甲酸(3-二甲基氨基-丙基)-甲基-酰胺，反式-{4-[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-环己基甲基}-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，
反式-{4-[(3-二甲基氨基-丙基)-甲基-氨基甲酰基]-环己基甲基}-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，反式-(2-{4-[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-环己基}-乙基)-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，反式-(2-{4-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-羰基]-环己基}-乙基)-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸(3-二甲基氨基-丙基)-甲基-酰胺，反式-(4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己基)-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-甲酮，反式-(4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己基)-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-甲酮，反式-4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，反式-(4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-甲酮，反式-(4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-甲酮，反式-丁基-氨基甲酸2-[4-(4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷羰基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-乙基酯，反式-4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，反式-(4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己基)-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-甲酮，反式-(4-{2-[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-甲酮，反式-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-(4-{2-[甲基-(5-丙基-嘧啶-2-基)-氨基]-乙基}-环己基)-甲酮，反式-4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，反式-(4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-甲酮，反式-(4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-甲酮，反式-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-(4-{2-[甲基-(4-三氟甲基-嘧啶-2-基)-氨基]-乙基}-环己基)-甲酮，反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸环丙基-(2-二甲基氨基-乙基)-酰胺，反式-4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸环丙基-(2-二甲基氨基-乙基)-酰胺，反式-4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-(2，2，2-三氟代-乙基)-酰胺，反式-4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸{2-[乙基-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-酰胺，反式-4-{2-[甲基-(5-丙基-嘧啶-2-基)-氨基]-乙基}-环己烷甲酸{2-[乙基-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-酰胺，反式-4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸{2-[乙基-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-酰胺，反式-4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸{2-[乙基-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-酰胺，反式-4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸{2-[双-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-酰胺，反式-4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸{2-[双-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-酰胺，反式-{4-[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-环己基}-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，
反式-4-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，反式-N-甲基-N-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-环己基甲基]-4-三氟甲基-苯磺酰胺，反式-4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-N-甲基-3-(4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯-磺酰基)-氨基]-甲基}-环己基)-丙酰胺，反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-N-甲基-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酰胺，和反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-2，N-二甲基-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酰胺，以及药学上可接受的盐和/或它们药学上可接受的酯。
特别优选的通式(I)化合物选自化合物反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-N-甲基-3-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酰胺，反式-N-甲基-N-{4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-3-氧代-丙氧基]-环己基}-4-三氟甲基-苯磺酰胺，反式-(4-{[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-甲氧基}-环己基)-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，反式-(2-{4-[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-环己基}-乙基)-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，反式-(4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-甲酮，反式-(4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-甲酮，反式-(4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-甲酮，和反式-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-(4-{2-[甲基-(4-三氟甲基-嘧啶-2-基)-氨基]-乙基}-环己基)-甲酮，以及药学上可接受的盐和/或它们药学上可接受的酯。
式(I)化合物可能具有一个或多个不对称碳原子，因此可以以光学纯的对映体或外消旋物形式存在。它们可以以顺式-或反式-异构体形式存在。本发明包含所有这些形式。优选为反式-异构体(关于环己环)的式(I)化合物。
可以理解，本发明通式(I)化合物可以于官能基团上进行衍生从而形成它们的衍生物，这些衍生物在体内可以转化为母化合物。
本发明也涉及制备上文所述化合物的方法，所述方法包括使式II化合物 其中R4、R5、V、W和m具有上文所述定义且Y为基团OH、Cl或Br，与NR1R2(CH2)kNR3H反应，其中R1、R2、R3和k具有上文定义，以及任选将上文所述式(I)化合物转化为药学上可接受的盐和/或药学上可接受的酯，以及任选将其中U为孤对电子的上文所述式(I)化合物转化为其中U为O的相应的化合物。
优选这样的如上文定义的方法，即无需任选将所述化合物转化为药学上可接受的盐和/或药学上可接受的酯的步骤，无需将其中U为孤对电子的上文定义的式(I)化合物转化为其中U为O的相应的化合物的步骤。
式(II)化合物与NR1R2(CH2)kNR3H化合物的反应可以根据本领域已知的方法进行，或如流程3(步骤c)或流程9(步骤c)中的方法，采用偶合剂例如EDCI、HOBT、DCC、2-氯代-1-甲基-吡啶碘化物或BOP，以及碱例如Huenig氏碱、NEt3或NMM，在CH2Cl2、DMF、DMA或二氧六环中进行。或者采用两步骤反应方法将酸(II)用草酰氯的CH2Cl2溶液在DMF存在下处理，随后与相应的胺NR1R2(CH2)kNR3H反应。上文定义的化合物可以根据本领域已知的方法转化为药学上可接受的盐，例如用相应的酸在溶剂如乙醇、甲醇或二氯甲烷中，在温度范围如-20℃至+40℃之间处理。上文所述化合物可以通过用相应的酰氯或酸酐在DMAP存在下、在溶剂如CH2Cl2或吡啶中处理具有羟基部分的化合物而转化为酯。可以通过本领域已知方法，将其中U为孤对电子的上文所定义化合物转化为其中U为O的化合物，例如与过氧化氢脲加成物和邻苯二甲酸酐在二氯甲烷中的混合物在室温下(RT)进行反应。
本发明进一步涉及根据上文所述方法制备的上文所述的式(I)化合物。
如上文所述，本发明的式(I)化合物可以用于治疗和/或预防与OSC相关的疾病，例如高胆固醇、高脂血症、动脉硬化症、血管疾病、霉菌病、寄生虫感染和胆结石，和/或治疗和/或预防糖耐量受损、糖尿病、肿瘤和/或过度增殖性疾病，优选用于治疗和/或预防高胆固醇和/或高脂血症。过度增殖性疾病特别是指过度增殖性皮肤和血管疾病。
因此，本发明也涉及药物组合物，该药物组合物包含上文所定义的化合物和药学上可接受的载体和/或辅助剂。
另外，本发明还涉及用作治疗活性物质的上文所述化合物，特别是作为治疗活性成分用于治疗和/或预防与OSC相关的疾病，例如高胆固醇、高脂血症、动脉硬化、血管疾病、霉菌病、寄生虫感染、胆结石、肿瘤和/或过度增殖性疾病，和/或治疗和/或预防糖耐量受损和糖尿病，优选用于治疗和/或预防高胆固醇和/或高脂血症。
在另一个实施方案中，本发明涉及治疗和/或预防与OSC相关的疾病的方法，上述疾病为例如高胆固醇、高脂血症、动脉硬化、血管疾病、霉菌病、寄生虫感染、胆结石、肿瘤和/或过度增殖性疾病，和/或治疗和/或预防糖耐量受损和糖尿病，优选治疗和/或预防高胆固醇和/或高脂血症的方法，所述方法包括给予人类或动物上文所述化合物。
本发明进一步涉及上文所述化合物的用途，用于治疗和/或预防与OSC相关的疾病，例如高胆固醇、高脂血症、动脉硬化、血管疾病、霉菌病、寄生虫感染、胆结石、肿瘤和/或过度增殖性疾病，和/或治疗和/或预防糖耐量受损和糖尿病，优选治疗和/或预防高胆固醇和/或高脂血症的用途。
另外，本发明涉及上文所定义化合物用于制备药物的用途，上述药物用于治疗和/或预防与OSC相关的疾病，例如高胆固醇、高脂血症、动脉硬化、血管疾病、霉菌病、寄生虫感染、胆结石、肿瘤和/或过度增殖性疾病，和/或治疗和/或预防糖耐量受损和糖尿病，优选用于治疗和/或预防高胆固醇和/或高脂血症。此类药物包括上文定义化合物。
式(I)化合物可以根据下面给出的方法、实施例所述方法及类似方法进行制备。用于单独反应步骤的适当的反应条件是本领域技术人员所已知的。起始原料可以自商业获得或通过类似于下文或实施例或本领域已知的方法制备。
流程1
流程2 流程3
流程4 流程5
流程6
流程7
流程8
流程9
流程1其中V包含氧的式(I)的氨基环己基衍生物的起始原料的制备方法在流程1中示出。对于m＝0的化合物，采用反式-4-氨基环己醇1作为原料，将该化合物分别转化为Z-衍生物或BOC衍生物2，例如ZCl、Na2CO3、THF、H2O或(BOC)2O、iPrOH、CH2Cl2(步骤a)。采用下文所述的一种方法，进行氢化铝锂还原反应得到反式-4-甲基氨基环己醇3，将该化合物经BOC-保护或者Z-保护，得到化合物4(步骤c)或直接转化(步骤d)为所需的R5W-衍生物5。如果需要，在引入R5W-基团之前，可以于回流下，将氨基环己醇衍生物用六甲基二硅氮烷处理。
磺酰胺胺的磺酰基化可以于室温下，在二氧六环或CH2Cl2中，用Huenig氏碱和磺酰氯处理过夜进行，得到磺酰胺5。
氨基甲酸酯可以使所述胺与R5OCOCl/Huenig氏碱在二氧六环或CH2Cl2中反应。也可以在喹啉存在下，通过将R5OH用Cl3COCl处理，随后与胺在Huenig氏碱存在下反应就地制备氯代甲酸酯。
硫代氨基甲酸酯可以使所述胺与R5OCSCl在二氧六环中反应。脲于室温下，可以使所述胺与异氰酸酯在二氧六环中反应。
硫代脲于室温下，可以使所述胺与异硫代氰酸酯在二氧六环中反应。
酰胺在CH2Cl2中，使该胺与R5COCl/Huenig氏碱、R5COOH/EDCI/DMAP反应(经形成对称酸酐，然后于-10℃至室温，加入原料胺)，或者于室温下，在DMF、二氧六环或CH2Cl2中，与R5COOH/EDCI/DAMP或R5COOH/Huenig氏碱或NMM/EDCI/HOBT反应。
磺酰胺可以使所述胺与磺酰氯在二氧六环中、在过量的三乙胺存在下反应，得到磺酰胺5。可于0℃至室温下，用R5NH2和氯磺酸在CH2Cl2中反应、然后于75℃下与PCl5在甲苯中反应制备氨磺酰氯。或者，可于0℃-65℃下，用R5NH2和磺酰氯于乙腈中合成氨磺酰氯。
杂环为制备W＝单键且R5＝杂环的化合物，可采用两种不同的方法方法A于80-120℃下、在DMA中或不采用溶剂，使所述胺与2-卤代-杂芳基/N-乙基二异丙胺反应1小时至5日，或方法B(用于反应性低的化合物)于120℃下，使胺与2-卤代-杂芳基/N-乙基二异丙胺/CuI或NaI反应1-10小时，或于120-150℃下，于DMA中经微波加热0.5-6小时。
或者，基团R4可经烷基化反应引入。因此，可以首先将化合物进行O-保护，然后于室温至80℃下，在碱如氢化钠的存在下，在溶剂如N，N-二甲基甲酰胺、THF或乙腈中，用烷基衍生物对保护的氨基官能团进行N-烷基化；O-脱保护后，得到化合物4(步骤e)。BOC-脱保护(TFA，CH2Cl2)或Z-脱保护(氢化)后，用R5W-衍生物进行处理，产生式5化合物(步骤f)。
对于m＞0的化合物，可以通过氢化，由相应的氨基苯酚、4-羟基苄胺、酪胺或3-(4-羟基苯基)丙基胺获得氨基环己醇衍生物。如式5所述，这些衍生物可以转化成式10化合物。
流程2胺的结构单元的合成如流程2所描述。采用氯甲酸苄基酯和Et3N在CH2Cl2中，可以将羟基烷基胺1转化成Z-保护的衍生物2a或2b(步骤a)。当R3＝H时，可以经烷化反应引入其它R3基团。为此，首先对化合物2a进行O-保护(例如用AcCl在CH2Cl2中，吡啶)，然后在碱如氢化钠的存在下，在溶剂如N，N-二甲基甲酰胺、THF或乙腈中，在室温至80℃下，用烷基衍生物进行N-烷化，随后进行O-脱保护，产生化合物2b(步骤b)。用甲磺酰氯和吡啶在CH2Cl2中进行甲磺酰化(步骤c)，并用胺NR1R2H处理甲磺酸酯3，生成化合物4(步骤d)。当R1’为氢时，所需的基团R1可以经与活性烷基衍生物烷化引入，如果必要，此过程可以适当的保护形式进行(步骤e)。当反应采用胺NHR1’R2’进行时，其中R1’和/或R2’含有酯部分，可以经例如NaBH4在溶剂如THF或MeOH中还原，产生相应的羟基烷基衍生物。经用Pd/C在酸性MeOH或EtOH中进行氢化完成化合物4的脱保护，产生目标胺5(步骤f)。制备其中R2和R3互相连接形成一个环的化合物时，可以由衍生物3合成，其中R3为BOC-保护的氨基烷基。脱保护(HCl，在二氧六环或TFA、CH2Cl2中)、然后环化产生化合物4(步骤d)。当R1’为氢时，可以通过用活性烷基衍生物烷化引入所需的基团R1，如果必要，可以适当的保护形式进行(步骤e)。
流程3其中V为低级-亚烷基-氧基的式(I)化合物的合成方法在，流程3中示出。在相转移条件下，可以用例如ω-卤代-烷基碳酸叔丁酯、NaOH、nBu4NHSO4处理氨基-环己醇衍生物1，产生酯2。或者，也可以通过就地产生三氟甲磺酸酯进行制备。于0℃下，采用三氟甲磺酸酐/2，6-二-叔-丁基吡啶在CH2Cl2中，自相应的ω-羟基烷基碳酸烷基酯，可以形成三氟甲磺酸酯。然后于60℃下，在硝基甲烷中，采用2，6-二-叔-丁基吡啶作为碱，使其与醇1反应，产生酯2[根据Belostotskii和Hassner在TetrahedronLett中所述的方法进行，355075-5076(1994)](步骤a)。当V＝OCH2CO2R时，亚甲基部分可以采用双-(三甲基甲硅烷基)-氨化锂、碘代甲烷在THF中，于-78℃-室温下进行单-或双-烷化，分别产生O-2-丙酸酯衍生物或O-2-甲基-2-丙酸酯。
酯2的皂化可以采用标准条件进行，对于烷基酯，采用例如LiOH或NaOH，在EtOH、MeOH或THF中进行，或者对于叔丁酯，采用TFA或HCl在THF乙醚或CH2Cl2中进行，得到酸3(步骤b)。用NR1R2(CH2)kNR3H和偶合剂(例如EDCI、HOBT、DCC、2-氯代-1-甲基-吡啶碘化物或BOP)和碱(例如Huenig氏碱、NEt3或NMM)在CH2Cl2、DMF、DMA或二氧六环中处理酸3，产生酰胺4。或者可以采用两步骤反应法在DMF存在下，用草酰氯在CH2Cl2中处理酸3，然后与相应的胺NR1R2(CH2)kNR3H反应。如果需要，基团R1和R2可以如流程1中关于所述化合物4的方法进行改性。当R1’为氢时，所需的基团R1可以通过用活性烷基衍生物烷化引入，如果必要，可以适当的保护形式进行。当反应采用其中R1’和/或R2’含有酯部分的胺NHR1’R2’进行时，该部分可以经例如NaBH4在溶剂如THF或MeOH中还原，得到相应的羟基烷基衍生物。
当R1为羟基烷基时，所述化合物可以于温度0℃-室温之间，用异氰酸烷基酯在CH2Cl2中处理，产生所需低级-烷基-NH-C(O)-O-低级-烷基衍生物。
如果在4中的R5W为保护基团，对于BOC-基团，可以采用TFA在CH2Cl2中裂解该基团，或而对于Z-基团，采用Pd/C在甲醇/HCl中氢化裂解该基团。在衍生为适当的R5W衍生物4前，将得到的铵盐根据上文所述方法之一处理。如果需要，在R5W-部分引入之前，可以于回流下，将氨基环己烷衍生物用六甲基二硅氮烷处理。
流程4-流程8描述了合成m＞＝0且V＝单键或低级亚烷基的化合物的中间体的方法。
流程4通过酯形成，将4-叔-丁氧基羰基氨基-环己烷-甲酸1转化为衍生物2(例如羰基-二-咪唑、甲醇在THF中，步骤a)，然后直接采用氢化钠和反应烷基衍生物烷化(步骤b)。酯3为BOC脱保护的(TFA、CH2Cl2、步骤c)，采用前文流程1化合物4的制备方法中所述之一转化为目标R5W-衍生物4(步骤d)。4的皂化采用标准条件，对于烷基酯，采用例如LiOH或NaOH在EtOH，MeOH或THF中，或对于叔丁酯，采用TFA或HCl在THF、醚或CH2Cl2中，产生酸5(步骤e)。
用氢化铝锂对酯3或4进行还原得到醇6(步骤f)。醇6的Swern氧化产生相应的醛7(步骤g)。或者，醛7可以经Weinreb-酰胺，自酯3或4(酯皂化采用LiOH或NaOH在EtOH、MeOH或THF中进行，然后用N，O-二甲基-羟基l-胺盐酸盐，于室温下，采用EDCI和HOBT在CH2Cl2中处理，经氢化铝锂还原，步骤h)制备。
流程5顺式-或反式-(4-甲基氨基甲基-环己基)-甲醇(R4＝Me)2可以自顺式-或反式-(4-羟基甲基-环己基甲基)-氨基甲酸叔-丁酯1[US 5,843,973或US6,022,969]通过用氢化铝锂在四氢呋喃中、在室温至四氢呋喃的回流温度下处理获得(流程5，步骤a)。于-10℃至室温下，用二碳酸二-叔-丁基酯在甲醇/三乙基胺中处理引入叔-丁氧基羰基保护官能团，产生化合物3(R4＝Me)(步骤b)。可以首先将化合物1进行O-保护，然后于室温至80℃下，在碱如氢化钠的存在下、在溶剂如N，N-二甲基甲酰胺、THF或乙腈中，用烷基卤化物于叔-丁氧基羰基保护的氨基官能团处进行N-烷化引入取代基R4；O-脱保护后，得到化合物3(步骤c)。经采用例如Swern条件草酰氯/二甲基亚砜/三乙基胺在二氯甲烷中，于-78℃至室温下，将化合物3随后氧化成相应的醛4(步骤d)。该醛4可以进一步氧化生成所需的羧酸5，采用例如三氯化钌水合物、偏高碘酸钠在CCl4、水和乙腈混合物中进行。或者，可以采用三氯化钌水合物、偏高碘酸钠在CCl4、水和乙腈混合物中以一步法直接氧化化合物3，产生酸5(步骤e)。
流程6在流程6中，顺式或反式-[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-环己基]-甲醇2可以自相应的双-羟基甲基环己烷衍生物1经用1当量的n-丁基锂在四氢呋喃中、于-78℃下处理，然后再用1当量叔-丁基-二甲基-氯代硅烷、于-65℃至室温下处理制备(步骤a)。将[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-环己基]-甲醇2(甲磺酰氯在二氯甲烷和三乙基胺中，于0-10℃下)进行甲磺酰化，产生相应的甲磺酸酯，然后于80℃下，用氰化钠在N，N-二甲基甲酰胺中进行处理，得到氰基化合物3(步骤b)。将氰基化合物3直接还原，例如采用铂催化剂在酸性甲醇(例如自CHCl3在MeOH中就地形成)中进行氢化，产生伯O-脱保护的胺4(步骤c)。首先在三乙基胺存在下、在二氯甲烷中，用二碳酸二-叔-丁基酯处理，然后在乙酸酐和吡啶存在下、在二氯甲烷中处理氨基-醇4，产生双-保护的化合物5(步骤d)。在碱如氢化钠存在下，在溶剂如N，N-二甲基甲酰胺或乙腈中，于室温至下80℃下，通过用烷基卤化物在伯叔-丁氧基羰基保护的氨基官能团上引入取代基R4，将化合物5N-烷化，经乙酸盐碱性裂解后，得到伯羟基化合物6(步骤e)。随后伯羟基化合物6可以采用例如Swern条件被氧化为相应的醛7草酰氯/二甲基亚砜/三乙基胺在二氯甲烷中，于-78℃至室温下(步骤f)。该醛7可以采用例如三氯化钌(III)·水合物、偏高碘酸钠在CCl4、水和乙腈的混合物中氧化，生成所需的羧酸8。或者，化合物6可以采用三氯化钌(III)物·水合物、偏高碘酸钠在CCl4、水和乙腈的混合物中进行一步氧化，得到酸8。
流程7流程7描述了制备氨基环己烷衍生物5-7的另外的途径。化合物2可以由相应的4-(氨基甲基)苄基醇、4-(2-氨基乙基)苄基醇、4-(3-氨基丙基)苄基醇经氢化获得(步骤a)。先在三乙基胺存在下，用二碳酸二-叔-丁基酯在二氯甲烷中处理氨基-醇2(步骤b)，然后在乙酸酐和吡啶存在下在二氯甲烷中进行处理，产生双-保护的化合物4(步骤c)。在碱如氢化钠存在下，在溶剂如N，N-二甲基甲酰胺或乙腈中，于室温至80℃下，用烷基卤化物于伯叔-丁氧基羰基保护的氨基官能团上引入取代基R4，将化合物4N-烷化，并经乙酸盐碱性裂解，得到伯羟基化合物5(步骤d)。采用例如Swern条件，伯羟基化合物5可以随后被氧化为相应的醛6草酰氯/二甲基亚砜/三乙基胺在二氯甲烷中，于-78℃至室温下(步骤e)。采用例如三氯化钌(III)·水合物、偏高碘酸钠在CCl4、水和乙腈的混合物中，该醛6可以氧化生成所需的羧酸7。或者，氧化化合物5可以采用三氯化钌(III)·水合物、偏高碘酸钠在CCl4、水和乙腈混合物中以一步法进行，得到酸7(步骤f)。
流程8流程8描述了纯反式-醛结构单元8的合成。任选R4取代的环己醇1通过氢化相应的4-氨基苯酚、4-羟基苄胺、酪胺或3-(4-羟基苯基)丙基胺合成(也参见流程1)。胺1可以被转化为N-保护的-衍生物2(例如ZCl、Na2CO3/THF/H2O)(步骤a)。用TEMPO(2，2，6，6-四甲基哌啶1-氧基l，radical)和次氯酸钠进行氧化，产生酮3(步骤b)。与(甲氧基甲基)三苯膦氯化物4在THF中进行Wittig反应，用叔-丁氧化钾作为碱，可以产生烯醇醚5(步骤c)。如果R4＝H，可以在该阶段对该基团进行改性(与R4-卤化物/NaH在DMF或DMA中)。用1N HCl在THF中、于回流下水解烯醇醚5，产生醛6(步骤d)。粗品醛6(为顺式/反式混合物)可以经亚硫酸氢盐-加合物7(用焦亚硫酸二钠在水/TBME中，步骤e)被异构化。然后亚硫酸氢盐加合物7可以用Na2CO3在水/TBME中被转化为纯反式-醛8(步骤f)。如前述流程中所述，纯反式-醛8的还原或氧化分别得到产生相应的醇和羧酸。
流程9在流程9中，描述了碳类似物的合成。对于m＞＝0的化合物，合成以4-叔-丁氧基羰基氨基烷基-环己烷-甲酸衍生物1为原料(流程4-8)。BOC-脱保护(TFA，CH2Cl2)或Z-脱保护(氢化)，然后采用前文所述方法之一，用R5W-衍生物处理，产生式2化合物(步骤a，b)。在引入R5W-部分前，于回流下，酸部分可以用六甲基二硅氮烷处理。
经用NR1R2(CH2)kNR3H和偶合剂(例如EDCI、HOBT、DCC、2-氯代-1-甲基-吡啶碘化物或BOP)和碱(例如Huenig氏碱、NEt3、NMM)在CH2Cl2、DMF、DMA或二氧六环中处理，化合物2可以转化为酰胺3(步骤c)。或者可以采用两步法用草酰氯在CH2Cl2中，在DMF存在下处理酸1，然后与相应的胺NR1R2(CH2)kNR3H反应。当R1’为氢时，目标基团R1可以经活性烷基衍生物烷化引入，如果必要，可以以适当的保护形式。当采用胺NHR1’R2’进行反应时，其中R1’和/或R2’包含酯部分，该部分可以经例如NaBH4在溶剂如THF、MeOH中还原为相应的羟基烷基衍生物。
当R1为羟基烷基时，所述化合物可以用异氰酸烷基酯在CH2Cl2中、于温度0℃-室温处理，产生所需低级-烷基-NH-C(O)-O-低级-烷基衍生物。
或者，可以将随后步骤反向进行，在所需R5W-基团引入前形成酰胺。
当m＞＝0、V＝亚烷基时，化合物的合成以醇4(参见用于制备的流程4-8)为原料。4与例如甲磺酰氯在二氯甲烷和三乙基胺中反应，产生相应的甲磺酸酯，然后用氰化钠在N，N-二甲基甲酰胺中，于80℃处理。产生氰基化合物5(步骤d)。用DIBAH(-78℃至室温于THF中)还原氰基化合物5，产生C1延长的醛，然后采用三氯化钌(III)·水合物、偏高碘酸钠在CCl4、水和乙腈的混合物中氧化，生成所需的羧酸6(步骤e)。可以根据如前所述方法，将酸6转化为终产物3(步骤a、b、c)。
对于C2-的延伸，可以使醛7(参见用于制备的流程4-8)在乙醇中与磷酰基乙酸三乙酯、甲醇钠一起经历Horner-Emmons反应，得到不饱和酯8(步骤f)。在10％披钯炭存在下，将不饱和酯8在甲醇中氢化，然后将该酯皂化(例如LiOH或NaOH，在EtOH、MeOH或THF中)，得到酸6(步骤g，h)。酸6可以转化成如前文所述的化合物3(步骤a，b，c)。
对于C2到C1-延伸，可以采用Corey-Fuchs方法可以于0℃至室温下，将醛7用三苯基膦、四溴代甲烷和三乙基胺在CH2Cl2中处理从而产生2，2-二溴代-乙烯基衍生物9(步骤i)。在THF中、于-78℃下，用n-BuLi(约1.6M的己烷液)重排，然后与甲醛反应(-78℃至室温)产生炔丙基醇10(l＝0)[步骤k，根据Marshall等在J.Org.Chem.615729-5735(1996)和Baker等在J.Chem.Soc.Perkin Trans.11415-1421(1990)中所述的条件]。
对于较长的侧链，可以如前文所述于-78℃用n-BuLi(约1.6M的己烷液)在THF中完成重排。然后，加入助溶剂如DMPU，将中间体与O-保护的1-溴代-烷基-醇反应(步骤q；例如1-溴代-n-四氢吡喃基(pyaranyl)氧基烷烃)，得到O-保护化合物，经过酸水解后得到目标化合物10。采用例如Jones′试剂将伯醇氧化，产生酸11。在Pt/C存在下，于溶剂甲醇、乙醇或EtOAc中，通过氢化将酸11转化为化合物6。酸6向终产物3的转化可以如前文所述完成(步骤a，b，c)。
进行下列实验以测定式I化合物及其盐的性质。
人肝脏微粒体2，3-环氧角鲨烯-羊毛甾醇环化酶(OSC)的抑制将采自健康志愿者的肝脏微粒体在硫酸钠缓冲液(pH 7.4)中制备。在同样的缓冲液中测定OSC活性，所述缓冲液也含有1mM EDTA和1mM二硫代苏糖醇。在冷的磷酸盐缓冲液中将微粒体稀释至0.8mg/ml蛋白质。用乙醇将干燥的[14C]R，S-单环氧角鲨烯(MOS，12.8mCi/mmol)稀释至20nCi/μl，并与磷酸盐缓冲液-1％BSA(牛血清蛋白)混和。用磷酸盐缓冲液-1％BSA将1mM实验物的DMSO储备液稀释至目标浓度。将40μl的微粒体与20μl的实验物溶液混和，随后用20μl的[14C]R，S-MOS溶液启动反应。最终条件为0.4mg/ml微粒体蛋白和30μl的[14C]R，S-MOS在盐酸盐缓冲液中，pH 7.4，含有0.5％血清蛋白、DMSO＜0.1％和乙醇＜2％，总体积为80μl。
于37℃1小时后，通过加入0.6ml的10％KOH-甲醇、0.7ml的水和0.1ml的己烷∶乙醚(1∶1，v/v)(它含有25μg非放射性MOS和25μg的羊毛甾醇作为载体)终止反应。震摇后，向每一个实验试管中加入1ml的己烷∶乙醚(1∶1，v/v)，并再次震摇，然后离心。将上层液相转移到玻璃试管中，底层液相再次用己烷∶乙醚萃取，并与第一次萃取液合并。用氮将全部萃取液蒸发至干，将残留物悬浮于50μl的己烷∶乙醚中，并置于硅胶板上。用己烷∶乙醚(1∶1，v/v)作为洗脱液进行色谱分离。MOS酶解物和羊毛甾醇产物的Rf值分别为0.91和0.54。干燥后，在硅胶板上观察放射性MOS和羊毛甾醇。自放射带测定MOS转化为羊毛甾醇的比例，以便于测定反应收率和OSC抑制。
一方面用不变的浓度为100nM的实验物进行实验，同时计算相对于对照物的OSC抑制百分率。更优选的本发明化合物具有大于50％的抑制，例如实施例1.6的化合物具有61％的抑制率，实施例5.4化合物具有51％的抑制率，实施例15.4化合物具有65％的抑制率，实施例22.6化合物具有56％的抑制率。
另外，采用不同浓度的实验物进行实验，随后计算IC50值，即降低MOS转化为羊毛甾醇达50％相对值时所需要的浓度。优选的本发明化合物具有的IC50值为1nM到10μM，优选为1-100nM。
式I化合物和/或其药学上可接受的盐可以用作药物，例如以药物制剂的形式用于肠道、胃肠外或局部给药。它们可以采用如下方式给药，例如口服给药(如以片剂、包衣片剂、糖丸、硬或软胶囊、溶液剂、乳剂或混悬液的形式)，直肠给药(如以栓剂的形式)，胃肠外给药(如以注射剂的形式)，或局部给药(如以软膏、霜剂或油剂的形式)。优选口服给药。
药物制剂的生产可以通过本领域任何技术人员所熟知的方法进行，将式I化合物和/或其药学上可接受的盐、任选与其它有治疗价值的物质联合，同时与适当的、非毒性、惰性、治疗相容性的固体或液体载体物质(如果需要，通常为药用辅料)一起，制备成盖仑制剂。
适当的载体物质不仅包括无机载体物质，也包括有机载体物质。所以，例如，乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸及其盐可以用作载体物质用于制备片剂、包衣片剂、糖丸和硬胶囊。用于软胶囊的适当的载体物质包括，例如，植物油、石蜡、脂肪及半固体和液体多元醇(根据活性成分的性质而定，在某些软胶囊中可能并不需要载体)。用于溶液剂和糖浆剂的适当的载体物质为，例如，水、多元醇、蔗糖、转化糖等。用于注射剂的适当的载体物质为，例如，水、醇、多元醇、甘油和植物油。用于栓剂的适当的载体物质为，例如，天然或固化的油、蜡、脂肪及半固体或液体多元醇。用于局部制剂的适当的载体物质为，例如，甘油酯、半合成和合成甘油酯、氢化油、液体蜡、液体石蜡、液体脂肪醇、甾醇、聚乙二醇和纤维素衍生物。
通常药用辅料也考虑下列成分稳定剂、防腐剂、润湿剂和乳化剂、增稠剂、调味剂、调节渗透压的盐、缓冲物质、增溶剂、着色剂和掩蔽剂以及抗氧剂。
式I化合物的剂量可以在较宽的范围内变化，这取决于待治疗的疾病、患者的年龄和个体情况和给药的方式，当然，也要适合于每一个具体病例的个体要求。对于成人患者，日剂量约为1-1000mg，优选约为1-100mg。根据疾病的严重程度和精确的药物动力学模型，化合物可以以一个或多个日剂量单位给药，例如以1-3个剂量单位给药。
药物制剂通常含有约1-500mg，优选1-100mg的式I化合物。
下列实施例用来更详细地阐明本发明。然而它们并非用于以任何形式限制本发明的范围。
实施例所用缩写为BOC＝叔-丁基氧基羰基，CH2Cl2＝二氯甲烷，DCC＝N，N’-二环己基碳二酰亚胺，DMA＝二甲基乙酰胺，DMAP＝4-二甲基氨基吡啶，DMF＝二甲基甲酰胺，EDCI＝N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二酰亚胺盐酸盐，EtOAc＝乙酸乙酯，EtOH＝乙醇，Et2O＝乙醚，Et3N＝三乙基胺，eq＝当量，HOBT＝1-羟基苯并三唑，Huenig氏碱＝iPr2NEt＝N-乙基二异丙胺，KH2PO4＝磷酸二氢钾，LAH＝氢化铝锂，MeOH＝甲醇，NaH＝氢化钠，NaI＝碘化钠，Red-Al＝二(2-甲氧基乙氧基)氢化铝钠，RT＝室温，TBDMSCl＝叔-丁基二甲基甲硅烷基氯，TBME＝叔-丁甲醚，THF＝四氢呋喃。
注所有反应均在氩气环境下进行。
实施例11.1于5℃，用20分钟的时间，向50g(0.33mol)反式-4-氨基环己醇盐酸盐和77g(0.726mol，2.2eq)的Na2CO3的650mL的THF和150mL的水的悬浮液中，加入51.2mL(0.363mol，1.1eq)的氯代甲酸苄酯。将反应混合物于室温下搅拌2小时，用乙酸乙酯稀释，分离相。有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥，过滤并蒸发。正己烷研磨得到为白色结晶的162.4g(98％)反式-4-羟基-环己基氨基甲酸苄基酯，MS249(M)[类似于Venuti等，J.Med.Chem.30303-318(1987)]。
1.2将温度保持在5-10℃之间，用6小时的时间，通过套管向37.9g(0.94mol，2.0eq)的LAH的1.3L的THF悬浮液中加入117g(0.47mol)反式-4-羟基-环己基氨基甲酸苄基酯的1L的THF悬浮液。将反应物回流过夜，加入Na2SO4、硅胶和水(160g，50g，80mL)的混合物，另外搅拌30分钟，过滤并浓缩。粗品产物经正己烷研磨产生27.9g(46％)的反式-4-甲基氨基-环己醇。母液经硅胶柱层析得到另外的为白色固体的17.1g(28％)的反式-4-甲基氨基-环己醇，MS129(MH+)[类似于Venuti等，J.Med.Chem.30303-318(1987)]。
1.3向3g(23.2mmol)反式-4-甲基氨基-环己醇的120mL CH2Cl2液中加入4.2mL(24.4mmol，1.05eq)的N，N-二异丙基乙基胺，然后加入5.96g(24.4mmol，1.05eq)的4-(三氟甲基)-苯磺酰氯的50mL CH2Cl2液。将混合物于室温下搅拌过夜，用1M KHSO4萃取有机层，然后用5％NaHCO3和盐水萃取。用盐水洗涤合并的有机相，Na2SO4干燥并蒸发。硅胶柱层析，正己烷∶EtOAc 1∶1洗脱，得到为类白色固体的6.0g(77％)反式-N-(4-羟基-环己基)-N-甲基-4-三氟甲基-苯磺酰胺，MS338(MH+)。
1.4于0℃，向0.62g(5.9mmol)β-羟基丙酸甲酯的4.5mL的CH2Cl2溶液中加入1.4mL(6.4mmol，2.4eq)的2，6-二-叔-丁基吡啶，然后加入1.03mL(6.2mmol，2.4eq)的三氟甲磺酸酐。于该温度下将溶液搅拌2.5小时，并浓缩，残留物溶于5mL的硝基甲烷中。向该溶液中加入1g(2.96mmol)反式-N-(4-羟基-环己基)-N-甲基-4-三氟甲基-苯磺酰胺和1.3mL(5.9mmol，2.0eq)2，6-二-叔-丁基吡啶的10mL硝基甲烷液。将溶液于60℃搅拌3小时，并用EtOAc和1M KHSO4稀释。用EtOAc萃取无机相。合并的有机相用饱和的NaHCO3水溶液和盐水洗涤，Na2SO4干燥并蒸发。硅胶柱层析，用EtOAc/正己烷1∶3洗脱，得到为淡黄色油状物的1.2g(95％)反式-3-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酸甲酯，MS424(MH+)。
1.5于室温下，将1.14g(2.7mmol)反式-3-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酸甲酯的27mL的THF溶液用27mL的1MLiOH处理1小时。通过加入1M KHSO4将溶液酸化，用EtOAc萃取混合物。用盐水洗涤有机相，用Na2SO4干燥并蒸发，得到为无色油状物的1.1g(定量)反式-3-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酸，MS408(M-H)-。
1.6将120mg(0.29mmol)反式-3-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酸的3mL CH2Cl2溶液用0.057mL(0.44mmol，1.5eq)的N，N，N’-三甲基乙二胺和0.48mL(0.36mmol，1.5eq)的NMM处理。将上述溶液冷却至0℃并加入73.0mg(0.38mmol，1.3eq)的EDCI和9mg(0.06mmol，0.2eq)的HOBT。将混合物于室温下干燥2天，并在CH2Cl2和饱和的NaHCO3水溶液之间分配。盐水洗涤有机相，Na2SO4干燥并蒸发。硅胶柱层析，CH2Cl2∶MeOH 9∶1洗脱，得到为无色油状物的118mg(82％)反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-N-甲基-3-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酰胺，MS494(MH+).
1.7类似于实施例1.6，自反式-3-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酸和1-甲基哌嗪制备反式-N-甲基-N-{4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-3-氧代-丙氧基]-环己基}-4-三氟甲基-苯磺酰胺，为无色油状物，MS492(MH+)。
实施例22.1类似于实施例1.4，自反式-N-(4-羟基-环己基)-N-甲基-4-三氟甲基-苯磺酰胺和羟乙酸甲酯制备反式-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-乙酸甲酯，为淡黄色油状物，MS409(M-H-)。
2.2类似于实施例1.5，自反式-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-乙酸甲酯制备反式-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-乙酸，为淡黄色油状物，MS394(M-H-)。
2.3类似于实施例1.6，自反式-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-乙酸和N，N，N′-三甲基乙二胺制备反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-N-甲基-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-乙酰胺，为无色油状物，MS480(MH+)。
2.4类似于实施例1.6，自反式-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-乙酸和1-甲基哌嗪制备反式-N-甲基-N-{4-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-2-氧代-乙氧基]-环己基}-4-三氟甲基-苯磺酰胺，为无色油状物，MS478(MH+)。
实施例33.1类似于实施例1.1，自反式-4-甲基氨基-环己醇和氯代甲酸苄酯制备反式-(4-羟基-环己基)-甲基-氨基甲酸苄酯，为白色固体，MS263(M)。
3.2向15.0g(57mmol)的反式-(4-羟基-环己基)-甲基-氨基甲酸苄酯的230mL甲苯悬浮液中加入16.8mL(114mmol，2eq)的溴代-乙酸叔-丁酯和1.93g(5.7mmol，0.1eq)四-n-丁基硫酸氢铵和400mL的50％NaOH水溶液。将混合物于室温下搅拌4小时，加入另外的1.93g(5.7mmol，0.1eq)的四-n-丁基-硫酸氢铵和4.2mL的溴代-乙酸叔-丁酯，持续搅拌过夜。将溶液浓缩并加入400mL的37％HCl酸化。用EtOAc萃取溶液，用盐水洗涤有机相，并用Na2SO4干燥。除去溶剂得到为白色固体的18.2g(定量)的反式-[4-(苄基氧基羰基-甲基-氨基)-环己基氧基]-乙酸，MS320(M-H)-。
3.3类似于实施例1.6，自反式-[4-(苄基氧基羰基-甲基-氨基)-环己基氧基]-乙酸和N，N，N′-三甲基乙二胺制备反式-(4-{[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-甲氧基}-环己基)-甲基-氨基甲酸苄酯，为无色油状物，MS406(MH+)。
3.4在0.51g的10％Pd/C存在下，将6.24g(13.38mmol)的反式-(4-{[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-甲氧基}-环己基)-甲基-氨基甲酸苄酯的34mL的EtOAc液氢化。除去催化剂并蒸发溶剂后，将残留物溶于50mL的MeOH中，并在0.4g的10％Pd/C存在下氢化。经decalite过滤除去催化剂，并将滤液浓缩。向残留物中加入乙醚和HCl水溶液，分层。乙醚洗涤无机部分，加入1M NaOH，用CH2Cl2和CH2Cl2/THF(1∶1)混合物萃取化合物。盐水洗涤合并的有机层，Na2SO4干燥。蒸发溶剂得到为无色油状物的2.7g(75％)反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-N-甲基-2-(4-甲基氨基-环己基氧基)-乙酰胺，MS272(MH+)。
3.5向150mg(0.55mmol)的反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-N-甲基-2-(4-甲基氨基-环己基氧基)-乙酰胺的4mL CH2Cl2液中加入0.14mL(0.8mmol，1.5eq)的N，N-二异丙基乙基胺，然后加入0.08mL(0.58mmol，1.1eq)的氯代甲酸4-溴代苯基酯。将混合物于室温下搅拌2小时，将溶液加到NaHCO3溶液和CH2Cl2混合物中。分层并用CH2Cl2萃取无机层。盐水洗涤合并的有机相，Na2SO4干燥并蒸发。硅胶柱层析，CH2Cl2∶MeOH 9∶1洗脱，得到为无色油状物的174mg(67％)的反式-(4-{[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-甲氧基}-环己基)-甲基-氨基甲酸4-溴代-苯基酯，MS470(MH+，1Br)。
3.6类似于实施例3.5，自反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-N-甲基-2-(4-甲基氨基-环己基氧基)-乙酰胺和氯代甲酸4-溴代苯基酯制备反式-(4-{[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-甲氧基}-环己基)-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，为无色油状物，MS426(MH+，1Cl)。
实施例4
4.1将24.33g(100mmol)的BOC-反式-1，4-氨基环己烷甲酸的500mL的DMA溶液冷却至0℃，并用9.6g(220mmol，2.2eq)的NaH(55％的油液)处理30分钟。将混合物温热至室温(1.5h)，再次冷却至0℃，用227.1mL(1600mmol，16eq)的CH3I处理，并自0℃温热至室温过夜。将反应混合物冷却至0℃，加入100mL的H2O和350mL的28％NaOH水溶液，将混合物于室温下搅拌1小时(将中间体甲基酯水解，用TLC正己烷/EtOAc 2∶1测定)。将反应物在Et2O(×3)/H2O之间分配，水相用10％KHSO4酸化，并用Et2O(×3)分配，用10％NaCl水溶液洗涤一次，Na2SO4干燥并蒸发，得到23.2g(90％)的反式-4-(叔-丁氧基羰基-甲基-氨基)-环己烷甲酸，MS256(M-H-)。
4.2将5.15g(20.0mmol)的反式-4-(叔-丁氧基羰基-甲基-氨基)-环己烷甲酸溶于50mL的二氧六环中，冷却至10℃，并用50mL(200mmol，10eq)的4M HCl的二氧六环液处理，然后温热至室温过夜。将溶液蒸发至容积约为15mL，冷却至0℃，并用～100mL的Et2O沉淀。过滤固体沉淀，用Et2O(×3)洗涤并减压干燥产生3.76g(97％)的反式-4-甲基氨基-环己烷甲酸盐酸盐。MS156(M-H-)，MP249℃，dec。
4.3将0.194g(1.00mmol)的反式-4-甲基氨基-环己烷甲酸盐酸盐与2.62mL(12.58mmol，12.6eq)的六甲基二硅氮烷混和，于140℃加热回流1小时(总时间1.5h)。将溶液蒸发，悬浮于THF中，并于0℃用0.245g(1.00mmol，1eq)的4-(三氟甲基)-苯磺酰氯处理，于室温下搅拌过夜。于室温下加入1mL的水，然后再加入2mL的1M NaOH。于室温下持续搅拌1小时，然后加入1M HCl。将溶液在Et2O(×3)/H2O之间分配，Na2SO4干燥并蒸发，得到0.234g(64％)的反式-4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己烷甲酸，MS364(M-H-)。
4.4将0.137g(0.375mmol)的反式-4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己烷甲酸的2mL的CH2Cl2溶液于室温下用1滴DMF处理，然后用0.035mL(0.412mmol，1.1eq)的草酰氯处理5分钟，持续搅拌90分钟。蒸发溶液，再溶于2mL的CH2Cl2中，并于0℃用0.058mL(0.450mmol，1.2eq)的N，N，N‘-三甲基乙二胺处理。将反应物于室温下放置2小时，然后在Et2O(×3)/饱和NaHCO3水溶液之间分配。有机相用10％NaCl水溶液洗涤一次，Na2SO4并蒸发。在8g硅胶上经快速柱色谱(CH2Cl2∶MeOH 99∶1至9∶1)纯化，得到0.088g(53％)的纯反式-4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，MS450(MH+)，MP83℃。
4.5类似于实施例4.4，将反式-4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己烷甲酸和N，N，N‘-三甲基-1，3-丙二胺转化为反式-4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己烷甲酸(3-二甲基氨基-丙基)-甲基-酰胺，MS464(MH+)。
实施例55.1类似于实施例4.1，将BOC-凝血酸转化为反式-4-[(叔-丁氧基羰基-甲基-氨基)-甲基]-环己烷甲酸，MS270(M-H-)。
5.2类似于实施例4.2，将反式-4-[(叔-丁氧基羰基-甲基-氨基)-甲基]-环己烷甲酸转化为反式-4-甲基氨基甲基-环己烷甲酸·HCl，MS172(MH+)。
5.3类似于实施例4.3，将反式-4-甲基氨基甲基-环己烷甲酸·HCl和氯代甲酸4-氯代苯基酯转化为反式-4-{[(4-氯代-苯氧基-羰基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸，MS324(M-H-，1CI)。
5.4类似于实施例4.4，将反式-4-{[(4-氯代-苯氧基羰基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸和N，N，N‘-三甲基乙二胺转化为反式-{4-[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-环己基甲基}-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，MS410(MH+，1Cl)。
5.5类似于实施例4.4，将反式-4-{[(4-氯代-苯氧基羰基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸和N，N，N‘-三甲基-1，3-丙二胺转化为反式-{4-[(3-二甲基氨基-丙基)-甲基-氨基甲酰基]-环己基甲基}-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，MS424(MH+，1Cl)。
实施例66.1于-60℃到-67℃，30分钟内向30.0g(208mmol)反式-(4-羟基甲基-环己基)-甲醇的450mL的四氢呋喃溶液中加入130mL(208mmol，1eq)的1.6Mn-丁基锂溶液(1.6M的正己烷液)。于-78℃搅拌30分钟后，10分钟内加入32.3g(208mmol，1eq)的叔-丁基-二甲基-氯代硅烷，于-65℃持续搅拌15分钟。将反应混合物升至室温并放置过夜，然后在乙醚、1M HCl溶液和水之间分配。有机层用MgSO4干燥，减压浓缩，然后将残留物经硅胶色谱纯化，用3∶1v/v的正己烷和EtOAc的混合物洗脱，得到为无色粘稠油状物的27.7g(51％)的纯反式-[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-环己基]-甲醇，MS259(MH+)。
6.2于0-10℃、搅拌下，20分钟内向冰冷的27.6g(107mmol)的反式-[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-环己基]-甲醇和9.99mL(128mmol，1.2eq)的甲烷磺酰氯的350mL的CH2Cl2溶液中加入29.6mL(213mmol，2eq)的Et3N。将反应混合物于室温下搅拌1小时。然后将其在CH2Cl2、1M HCl和水之间分配。CH2Cl2相用MgSO4干燥并浓缩产生38.2g的粗品反式-甲磺酸4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-环己基甲基酯，为无色粘稠油状物，MS354(M+NH4+)。
6.3将溶于380mL DMF中的38.2g粗品反式-甲磺酸4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-环己基甲基酯和16.7g(340mmol，3.2eq)氰化钠于80℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温后，将其在乙醚和水之间分配。有机层用MgSO4干燥并减压浓缩。残留物经硅胶色谱纯化，用9∶1v/v的正己烷和EtOAc混合物为洗脱液，得到24.2g(80％两步收率)的纯反式-[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-环己基]-乙腈，为无色粘稠油状物，MS290(MNa+)。
6.4在氢气环境下，将24.2g(90.5mmol)的反式-[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-环己基]-乙腈、22mL(270mmol，3eq)的CHCl3和2.4g的PtO2(Degussa 223)的250mL乙醇溶液于室温下搅拌20小时。过滤除去催化剂，减压蒸发溶剂得到17.1g(97％)的纯反式-[4-(2-氨基-乙基)-环己基]-甲醇盐酸盐，为无色固体，MS158(MH+)。
6.5于室温下，10分钟内向17.6g(90.9mmol)反式-[4-(2-氨基-乙基)-环己基]-甲醇盐酸盐和13.9mL(100mmol，l.1eq)的Et3N的120mL的CH2Cl2溶液中加入21.8g(100mmol，1.1eq)的二碳酸二叔丁酯的70mL的CH2Cl2液。于室温下搅拌3小时后，将反应混合物在CH2Cl2、1M HCl溶液和水之间分配。然后，CH2Cl2相用MgSO4干燥并浓缩产生27.9的粗品反式-[2-(4-羟基甲基-环己基)-乙基]-氨基甲酸叔-丁酯，为无色粘稠油状物，MS275(MNH4+)。
6.6将27.9g(86.7mmol)的反式-[2-(4-羟基甲基-环己基)-乙基]-氨基甲酸叔-丁酯、41mL(434mmol，5eq)的乙酸酐和35mL(434mmol，5eq)的吡啶的140mL的CH2Cl2溶液于室温下搅拌16小时。然后将反应混合物置于乙醚中，并用1M HCl溶液、碳酸氢钠溶液和水洗涤。醚相用MgSO4干燥并浓缩产生26.0g粗品反式-乙酸4-(2-叔-丁氧基羰基氨基-乙基)-环己基甲基酯，为无色粘稠油状物，MS200[(M-(叔-丁氧基羰基))H+]。
6.715分钟内，向冰冷并搅拌的粗品26.0g反式-乙酸4-(2-叔-丁氧基羰基氨基-乙基)-环己基甲基酯和5.77mL(92.6mmol，1.1eq)的CH3I的300mL的DMF溶液中加入4.04g(92.58mmol，1.1eq)的NaH(55％的油液)。于室温下搅拌过夜后，加入另外的1.65mL(26.5mmol，0.3eq)的CH3I和1.16g(26.5mmol，0.3eq)的NaH，然后将反应混合物于室温下再搅拌1小时。然后将其在乙醚、1M HCl溶液和水之间分配。有机层用MgSO4干燥，减压浓缩，然后残留物经硅胶柱色谱，用4∶1v/v的正己烷和EtOAc混合物为洗脱液，得到18.7g(68％，3步收率)的纯反式-乙酸4-[2-(叔-丁氧基羰基-甲基-氨基)-乙基]-环己基甲基酯，为无色粘稠油状物，MS214[(M-(叔-丁氧基羰基))H+]。
6.85分钟内，向冷却(～15℃)并搅拌的18g(57.4mmol)反式-乙酸4-[2-(叔-丁氧基羰基-甲基-氨基)-乙基]-环己基甲基酯的135ml二氧六环溶液中加入63.2mL(63.2mmol，1.1eq)的1M NaOH水溶液。用13mL的MeOH和28.7mL(28.7mmol，0.5eq)的1M NaOH溶液将反应物匀化3小时后，再搅拌1.5小时。将反应物蒸发以除去二氧六环，在Et2O(×3)/H2O之间分配，Na2SO4干燥并蒸发，得到17.13g(定量)的反式-[2-(4-羟基甲基-环己基)-乙基]-甲基-氨基甲酸叔-丁酯，MS272(MH+)。
6.930分钟内，将17.1g(63.1mmol)的反式-[2-(4-羟基甲基-环己基)-乙基]-甲基-氨基甲酸叔-丁酯的60mL CCl4、60mL水和90mL乙腈溶液用0.075g(0.33mmol，0.05eq)的三氯化钌(III)·水合物和55.4g(259mmol，4.1eq)的偏高碘酸钠处理。6小时后，将反应物轻轻倒出，并用CH2Cl2(×3)洗涤。倒出相在CH2Cl2(×3)/H2O之间分配，用Na2SO4干燥并蒸发，得到17.24g(96％)的反式-4-[2-(叔-丁氧基羰基-甲基-氨基)-乙基]-环己烷甲酸，MS284(M-H-)。
6.10类似于实施例4.2，将反式-4-[2-(叔-丁氧基羰基-甲基-氨基)-乙基]-环己烷甲酸转化为反式-4-(2-甲基氨基-乙基)-环己烷甲酸·HCl，MS186(MH+)，MP212-214℃。
6.11类似于实施例4.3，将反式-4-(2-甲基氨基-乙基)-环己烷甲酸·HCl和氯代甲酸4-氯代苯基酯转化为反式-4-{2-[(4-氯代-苯氧基羰基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸，MS338(M-H-，1Cl)。
6.12类似于实施例4.4，将反式-4-{2-[(4-氯代-苯氧基羰基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和N，N，N‘-三甲基乙二胺转化为反式-(2-{4-[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-环己基}-乙基)-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，MS424(MH+，1Cl)。
6.13类似于实施例4.4，将反式-4-{2-[(4-氯代-苯氧基羰基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和2-(1，4-二氮杂环庚-1-基)乙-1-醇转化为反式-(2-{4-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚烷-1-羰基]-环己基}-乙基)-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，MS466(MH+，1Cl)。
实施例77.1将0.42g(2.0mmol)的反式-4-甲基氨基甲基-环己烷甲酸·HCl、1.85mL(1.1mmol)的Huenig氏碱和0.57g(2.4mmol)的2，5-二溴代-嘧啶[Brown和Arantz，J.Chem.Soc.C Issue 10，1889-1891(1971)]的2mL的DMA混合物置于微波炉中，并于120℃加热1小时。将溶剂蒸发，在Et2O(×3)/10％KH2PO4之间分配，Na2SO4干燥并蒸发，得到0.604g(92％)的反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸，MS326(M-H-，1Br)，MP172-174℃。
7.2类似于实施例4.4，将反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸和N，N，N‘-三甲基乙二胺转化为反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，MS412(MH+，1Br)，MP111-113℃。
7.3类似于实施例4.4，将反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸和N，N，N‘-三甲基-1，3-丙二胺转化为反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸(3-二甲基氨基-丙基)-甲基-酰胺，MS426(MH+，1Br)。
7.4类似于实施例4.4，将反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸和1-甲基高哌嗪转化为反式-(4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己基)-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-甲酮，MS424(MH+，1Br)，MP114-116℃。
7.5类似于实施例4.4，将反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸和2-(1，4-二氮杂环庚-1-基)乙-1-醇转化为反式-(4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己基)-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-甲酮，MS454(MH+，1Br)。
实施例88.1类似于实施例7.1，将反式-4-(2-甲基氨基-乙基)-环己烷甲酸·HCl和5-溴代-2-氯代嘧啶转化为反式-4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸，MS340(M-H-，1Br)，MP155-158℃。
8.2类似于实施例4.4，将反式-4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和N，N，N‘-三甲基乙二胺转化为反式-4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，MS426(MH+，1Br)，MP58-59℃。
8.3类似于实施例4.4，将反式-4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和1-甲基高哌嗪转化为反式-(4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-甲酮，MS438(MH+，1Br)。
8.4类似于实施例4.4，将反式-4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和2-(1，4-二氮杂环庚-1-基)乙-1-醇转化为反式-(4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-甲酮，MS468(MH+，1Br)。
8.5将0.10g(0.21mmol)的反式-(4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-甲酮的2mL CH2Cl2溶液冷却(0℃)，用0.048mL(0.43mmol，2eq)的异氰酸正丁基酯处理。20小时和48小时后，再次将反应物冷却(0℃)，并分别用0.048mL(0.43mmol，2.0eq)和0.024mL(0.21mmol，2.0eq)的异氰酸正丁基酯处理。将反应物蒸发，溶于5mL的CH2Cl2/0.5mL的MeOH中，并搅拌1.5小时。蒸发后，反应物在5g硅胶上经快速色谱(CH2Cl2∶MeOH 99∶1至4∶1)纯化，得到0.081g(68％)的纯反式-丁基-氨基甲酸2-[4-(4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷羰基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-乙酯，MS567(MH+，1Br)。
实施例99.1类似于实施例7.1，将反式-4-甲基氨基甲基-环己烷甲酸·HCl和2-氯代-5-乙基嘧啶(4eq，5小时45分钟，120℃)转化为反式-4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸，MS276(M-H-)，MP128-130℃。
9.2类似于实施例4.4，将反式-4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸和N，N，N‘-三甲基乙二胺转化为反式-4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，MS362(MH+)。
9.3类似于实施例4.4，将反式-4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸和2-(1，4-二氮杂环庚-1-基)乙-1-醇转化为反式-(4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己基)-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-甲酮，MS404(MH+)。
实施例1010.1类似于实施例7.1，将反式-4-(2-甲基氨基-乙基)-环己烷甲酸·HCl和2-氯代-5-乙基嘧啶(4eq，2h，120℃)转化为反式-4-{2-[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸，MS290(M-H-)。
10.2类似于实施例4.4，将反式-4-{2-[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和2-(1，4-二氮杂环庚-1-基)乙-1-醇转化为反式-(4-{2-[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-甲酮，MS418(MH+)。
实施例1111.1类似于实施例7.1，将反式-4-(2-甲基氨基-乙基)-环己烷甲酸·HCl和2-氯代-5-丙基嘧啶(4eq，2h，120℃)转化为反式-4-{2-[甲基-(5-丙基-嘧啶-2-基)-氨基]-乙基}-环己烷甲酸，MS304(M-H-)。
11.2类似于实施例4.4，将反式-4-{2-[甲基-(5-丙基-嘧啶-2-基)-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和2-(1，4-二氮杂环庚-1-基)乙-1-醇转化为反式-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-(4-{2-[甲基-(5-丙基-嘧啶-2-基)-氨基]-乙基}-环己基)-甲酮，MS432(MH+)。
实施例1212.1类似于实施例7.1，将反式-4-(2-甲基氨基-乙基)-环己烷甲酸·HCl和2-溴代-5-氯代嘧啶[自5-氯代-2-羟基-嘧啶合成，类似于Brown和Arantz，J.Chem.Soc.C Issue 101889-1891(1971)所述的方法](1.7eq，2h，120℃)转化为反式-4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸，MS296(M-H-，1Cl)，MP118-120℃。
12.2类似于实施例4.4，将反式-4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和N，N，N‘-三甲基乙二胺转化为反式-4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，MS382(MH+，1Cl)。
12.3类似于实施例4.4，将反式-4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和1-甲基高哌嗪转化为反式-(4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-甲酮，MS394(MH+，1Cl)。
12.4类似于实施例4.4，将反式-4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和2-(1，4-二氮杂环庚-1-基)乙-1-醇转化为反式-(4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-甲酮，MS424(MH+，1Cl)。
实施例1313.1将0.250g(1.13mmol)反式-4-(2-甲基氨基-乙基)-环己烷甲酸·HCl、1.04mL(6.09mmol，5.3eq)的Huenig氏碱和0.412g(2.26mmol，2eq)的2-氯代-4-(三氟甲基)嘧啶的4mL的DMA溶液于室温下反应19小时。蒸发溶剂，残留物在Et2O(×3)/10％KH2PO4水溶液之间分配，Na2SO4干燥并蒸发，得到0.422g(定量)的反式-4-{2-[甲基-(4-三氟甲基-嘧啶-2-基)-氨基]-乙基}-环己烷甲酸，MS330(M-H-)，MP110-112℃。
13.2类似于实施例4.4，将反式-4-{2-[甲基-(4-三氟甲基-嘧啶-2-基)-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和1-甲基高哌嗪转化为反式-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-(4-{2-[甲基-(4-三氟甲基-嘧啶-2-基)-氨基]-乙基}-环己基)-甲酮，MS428(MH+)。
实施例1414.1于室温下将0.50g(1.52mmol)反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸的4.5mL的CH2Cl2溶液用1滴DMF处理，然后用0.14mL(1.68mmol，1.1eq)草酰氯处理5分钟，持续搅拌90分钟。将溶液蒸发，残留物溶于CH2Cl2，并于0℃滴加2.14mL(30.47mmol，20eq)的环丙基胺的3mL CH2Cl2液。将反应物温热至室温并放置3小时，然后在Et2O(×3)/10％NaHCO3之间分配，用10％NaHCO3洗涤一次，Na2SO4干燥并蒸发，得到0.55g(99％)的反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸环丙基酰胺，MS367(MH+，1Br)。
14.2将0.12g(0.33mmol)的反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸环丙基酰胺溶于10mL的DMA中，用0.21g(4.90mmol，14eq)的NaH(55％油液)于0℃处理，然后温热至室温。将混合物用0.47g(3.27mmol，10eq)的N-(2-氯乙基)-N，N-二甲基铵氯化物于0℃处理，温热至室温。将反应物搅拌72小时，然后在Et2O(×3)/10％NaHCO3分配，用10％NaCl水溶液洗涤一次，Na2SO4干燥并蒸发。残留物经硅胶(20g)色谱层析，用CH2Cl2∶MeOH 95∶5洗脱，得到0.09g(68％，2步收率)的纯反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸环丙基-(2-二甲基氨基-乙基)-酰胺，MS438(MH+，1Br)。
14.3类似于实施例14.1和14.2，将反式-4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸、环丙基胺和N-(2-氯乙基)-N，N-二甲基铵氯化物转化为反式-4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸环丙基-(2-二甲基氨基-乙基)-酰胺，MS388(MH+)。
14.4类似于实施例14.1和14.2，将反式-4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸、2，2，2-三氟代乙基胺和N-(2-氯乙基)-N，N-二甲基铵氯化物转化为反式-4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-(2，2，2-三氟代-乙基)-酰胺，MS430(MH+)。
实施例1515.1将20.0g(266.3mmol)的2-(甲基氨基)乙醇溶于100mL的CH2Cl2，先用74.23mL(532.54mmol，2eq)的Et3N处理，然后于室温下用33.8mL(239.64mmol，0.9eq)的氯甲酸苄基酯处理1.5小时。将反应物在Et2O(×3)/10％KHSO4(x2)之间分配，Na2SO4干燥并蒸发，得到37.93g(68％)的(2-羟基-乙基)-甲基-氨基甲酸苄基酯，MS210(MH+)。
15.2于0℃，将18.0g(86.02mmol)(2-羟基-乙基)-甲基-氨基甲酸苄基酯溶于600mL CH2Cl2中，并用7.35mL(94.63mmol，1.1eq)甲磺酰氯和10.38mL(129.03mmol，1.5eq)吡啶处理。将溶液于室温下搅拌24小时，然后再用4.68mL(60.22mmol，0.7eq)甲磺酰氯和6.23mL(77.42mmol，0.9eq)吡啶(0℃)处理。于室温下5小时后，将反应物蒸发并干燥。
将粗品甲磺酸酯溶于500mL的DMA中，并用83.9mL(86.03mmol，1eq)的2-乙基氨基乙醇和催化量的NaI处理，于室温下反应20小时，于60℃反应4小时。加入另外的41.95mL(43.02mmol，0.5eq)的2-乙基氨基乙醇，并于60℃反应3小时。然后将溶液蒸发，并在Et2O(×3)/10％NaHCO3之间分配，Na2SO4干燥并蒸发。快速色谱纯化，用1.5kg硅胶快速层析(CH2Cl2∶MeOH 95∶5)，得到17.12g(71％，2步收率)的{2-[乙基-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-氨基甲酸苄基酯，MS281(MH+)。
15.3将9.71g(34.65mmol)的{2-[乙基-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-氨基甲酸苄基酯溶于400mL的MeOH中，用71.03mL(71.03mmol，2eq)的1M HCl水溶液处理，并置于氩气环境下。用10％Pd/C和氢处理溶液。在常压下，将溶液于室温下氢化过夜，过滤，蒸发至～50ml，用n-戊烷将化合物沉淀产生6.84g(90％)的2-[乙基-(2-甲基氨基-乙基)-氨基]-乙醇·2HCl，MS147(MH+)。
15.4于室温下，将0.15g(0.44mmol)反式-4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸的4mL CH2Cl2溶液用1滴DMF处理，然后用0.04mL(0.48mmol，1.1eq)的草酰氯处理5分钟，持续搅拌90分钟。然后将溶液蒸发，残留物再溶于乙腈，并于0℃将其滴加到0.29g(1.32mmol，3eq)的2-[乙基-(2-甲基氨基-乙基)-氨基]-乙醇·2HCl和0.92mL(6.57mmol)的Et3N的4mL DMA溶液中。将反应物温热至室温并放置过夜，然后在Et2O(×3)/10％NaHCO3(2×)水溶液之间分配，Na2SO4干燥并能够蒸发，然后经色谱层析，在CH2Cl2∶MeOH 97.5∶2.5中制备的硅胶(20g)上并经95∶5洗脱，产生0.13g(64％)的纯反式-4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸{2-[乙基-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-酰胺，MS470(MH+，1Br)。
15.5
类似于实施例15.4，将反式-4-{2-[甲基-(5-丙基-嘧啶-2-基)-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和2-[乙基-(2-甲基氨基-乙基)-氨基]-乙醇·2HCl转化为反式-4-{2-[甲基-(5-丙基-嘧啶-2-基)-氨基]-乙基}-环己烷甲酸{2-[乙基-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-酰胺，MS434(MH+)。
15.6类似于实施例15.4，将反式-4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和2-[乙基-(2-甲基氨基-乙基)-氨基]-乙醇·2HCl转化为反式-4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸{2-[乙基-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-酰胺，MS426(MH+，1Cl)。
15.7类似于实施例15.4，将反式-4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸和2-[乙基-(2-甲基氨基-乙基)-氨基]-乙醇·2HCl转化为反式-4-{[(5-乙基-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸{2-[乙基-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-酰胺，MS406(MH+)。
实施例1616.1类似于实施例15.2，将(2-羟基-乙基)-甲基-氨基甲酸苄基酯和二乙醇胺转化为{2-[二-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-氨基甲酸苄基酯，MS297(MH+)。
16.2类似于实施例15.3，将{2-[二-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-氨基甲酸苄基酯转化为2-[(2-羟基-乙基)-(2-甲基氨基-乙基)-氨基]-乙醇·2HCl，MS163(MH+)。
16.3类似于实施例15.4，将反式-4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和2-[(2-羟基-乙基)-(2-甲基氨基-乙基)-氨基]-乙醇·2HCl转化为反式-4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸{2-[二-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-酰胺，MS486(MH+，1Br)。
16.4类似于实施例15.4，将反式-4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸和2-[(2-羟基-乙基)-(2-甲基氨基-乙基)-氨基]-乙醇·2HCl转化为反式-4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己烷甲酸{2-[二-(2-羟基-乙基)-氨基]-乙基}-甲基-酰胺，MS442(MH+，1Cl)。
实施例1717.1在搅拌和冰浴条件下，将16.2g(62.95mmol)反式-4-叔-丁氧基羰基氨基-环己烷甲酸甲基酯和5.87mL(94.43mmol，1.5eq)甲基碘化物的100mlDMF液用3.57g(81.84mmol，1.3eq)的NaH(55％油液)处理。将溶液于室温下搅拌20小时，然后在冰浴条件下用1M HCl处理。将反应混合物溶于乙醚中，用水洗涤4次。醚相经减压浓缩产生17.5g(定量)的反式-4-(叔-丁氧基羰基-甲基-氨基)-环己烷甲酸甲基酯，MS201(M-OC4H9)。
17.2类似于实施例4.2，由反式-4-(叔-丁氧基羰基-甲基-氨基)-环己烷甲酸甲基酯得到反式-4-甲基氨基-环己烷甲酸甲基酯·HCl，MS171(M)，MP227.7-229.6℃。
17.3将2.12g(10.21mmol)的反式-4-甲基氨基-环己烷甲酸甲基酯·HCl溶于30mL的吡啶中，于0℃用1.57mL(11.23mmol，1.1eq)的氯代甲酸4-氯代苯基酯处理，并于室温下搅拌22小时。溶液蒸发，并在EtOAc(×3)/1MHCl水溶液之间分配。有机相用10％NaCl水溶液洗涤一次，Na2SO4干燥并蒸发，得到3.41g(90％)的反式-4-[(4-氯代-苯氧基羰基)-甲基-氨基]-环己烷-甲酸甲基酯，MS326(MH+，1Cl)。
17.4将1.1g(3.37mmol)反式-4-[(4-氯代-苯氧基羰基)-甲基-氨基]-环己烷甲酸甲基酯溶于25mL二氧六环中，并于0℃用6.7mL(6.70mmol，2eq)的1M NaOH水溶液处理。于室温下3小时后，将反应物倒入10％KHSO4水溶液/Et2O(3x)中。用10％NaCl水溶液洗涤有机层，Na2SO4干燥得到0.97g(92％)的反式-4-[(4-氯代-苯氧基羰基)-甲基-氨基]-环己烷甲酸，MS310(M-H-，1Cl)。
17.5
类似于实施例4.4，将反式-4-[(4-氯代-苯氧基羰基)-甲基-氨基]-环己烷甲酸和N，N，N‘-三甲基乙二胺转化为反式-{4-[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-环己基}-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，MS396(MH+)。
实施例1818.1类似于实施例7.1，将反式-4-甲基氨基-环己烷甲酸·HCl和2，5-二溴代-嘧啶[Brown和Arantz，J.Chem.Soc.C Issue 101889-1891(1971)]转化为反式-4-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-环己烷甲酸，MS312(M-H-，1Br)。
18.2类似于实施例4.4，将反式-4-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-环己烷甲酸和N，N，N‘-三甲基乙二胺转化为反式-4-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，MS328(MH+，1Br)。
实施例1919.1于-10℃，将2.17mL(3.57g，30mmol，3eq)的亚硫酰氯加到冷却的1.57g(10mmol)反式-4-氨基甲基-环己烷甲酸的20mL的MeOH悬浮液中。随后，将混合物于室温下搅拌18小时。然后在常压下除去溶剂，得到2.07g(定量)反式-4-氨基甲基-环己烷甲酸甲基酯·盐酸盐，为白色结晶，MS171(M)。
19.2将2.07g(10mmol)反式-4-氨基甲基-环己烷甲酸甲基酯·盐酸盐悬浮于20mL的CH2Cl2中，并用1.4mL(10mmol)的Et3N和2.88g(13mmol，1.3eq)的4-(三氟甲基)苯磺酰氯处理。将混合物冷却至-10℃，加入4.14g(30mmol，3eq)K2CO3的10mL H2O溶液。将双相混合物于-10℃剧烈搅拌10分钟，然后于室温下搅拌2小时。水相用2份20mL的CH2Cl2萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤，无水Na2SO4干燥并能够最终蒸发。残留物经硅胶色谱纯化，CH2Cl2∶Et2O(95.5∶0.5)为洗脱剂。得到3.6g(95％)反式-4-[(4-三氟甲基-苯磺酰基氨基)-甲基]-环己烷甲酸甲基酯，为白色固体，MS378(M-H-)。
19.3将1.09g(2.87mmol)反式-4-[(4-三氟甲基-苯磺酰基氨基)-甲基]-环己烷甲酸甲基酯和569mg(85％，8.62mmol，3eq)的KOH的20mL MeOH和1mL H2O的溶液回流3小时。冷却至室温后，加入4.5mL的2M HCl水溶液，用3份20mL的CH2Cl2萃取。先用水，再用盐水洗涤合并的有机相，无水Na2SO4干燥并最终蒸发，得到1g(95％)的反式-4-[(4-三氟甲基-苯磺酰基氨基)-甲基]-环己烷甲酸，为白色固体，MS364((M-H)-)。
19.4将200mg(0.54mmol)的反式-4-[(4-三氟甲基-苯磺酰基氨基)-甲基]-环己烷甲酸、210mg(1.09mmol，2eq)的EDCI、221mg(2.2mmol，4eq)的Et3N和274mg(2.74mmol，5eq)的1-甲基-哌嗪溶于5mL的CH2Cl2中。于室温下反应70小时后，加入1mL的H2O，将反应混合物剧烈搅拌1小时。分离有机相，水相用10mL的CH2Cl2萃取，用H2O和盐水洗涤合并的有机相。经无水Na2SO4干燥后，蒸发有机相。残留物经硅胶色谱纯化，用CH2Cl2∶MeOH∶25％NH4OH(9∶1∶0.1)洗脱。得到120mg(49％)的反式-N-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-环己基甲基]-4-三氟甲基-苯磺酰胺，为无色无定形固体，MS448(MH+)。
实施例2020.1将100mg(4mmol，1.1eq)的钠在2mL的MeOH中反应。然后将溶于3mL无水DMF的1.33g(3.5mmol)的反式-4-[(4-三氟甲基-苯磺酰基氨基)-甲基]-环己烷甲酸甲基酯加入，再加入0.44mL(7mmol，2eq)的CH3I。于室温下搅拌混合物2小时，然后倒入冰-水中，用3份15mL的CH2Cl2萃取。用水和盐水洗涤合并的有机相，无水Na2SO4干燥并蒸发，得到为白色固体的1.34g(97％)反式-4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己烷-甲酸甲基酯，MS411(M+NH4+)。
20.2类似于实施例19.3，将反式-4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己烷-甲酸甲基酯皂化得到反式-4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己烷甲酸，为白色固体，MS378(M-H-)。
20.3类似于实施例19.4，将反式-4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己烷甲酸和1-甲基-哌嗪转化为反式-N-甲基-N-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-环己基甲基]-4-三氟甲基-苯磺酰胺，MS462(MH+)。
实施例2121.1于50℃，将200mg(0.53mmol)反式-4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己烷甲酸和125mg(1.05mmol，2eq)亚硫酰氯的1mL无水CH2Cl2溶液加热1小时，然后蒸发，并溶于1mL的CH2Cl2中。于0℃将该溶液加到269mg(2.54mmol，5eq)的N，N，N’-三甲基乙二胺的1mL吡啶中，于室温下搅拌2小时。随后将反应混合物倒入冰和水的混合物中，用3份15mL的CH2Cl2萃取。用水、稀HCl、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤合并的有机相，然后经无水Na2SO4干燥并最终蒸发。残留物经硅胶层析，用CH2Cl2∶MeOH∶25％NH4OH(9∶1∶0.1)洗脱。得到195mg(79.8％)的反式-4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，为无色无定形固体，MS464(MH+)。
21.2类似于实施例21.1，将反式-4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己烷甲酸和1-甲基-4-(甲基氨基)哌啶转化为反式-4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己烷甲酸甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-酰胺，为白色无定形固体，MS490(MH+)。
实施例2222.115分钟内，将冷却的(0-5℃)7g(17.8mmol)反式-4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己烷甲酸甲基酯的40mL THF溶液用7mL(24.5mmol，1.4eq)的Red-Al溶液(3.5M的甲苯溶液)处理。将反应物于室温下搅拌1小时，然后冷却至-10℃，并用1mL H2O的10mL THF液处理。然后加入40mL的25％HCl水溶液。加入100mL的EtOAc后，将混合物搅拌直到两相完全分离。水相再用2份75mL的EtOAc萃取。用H2O、饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤合并的有机相，然后用无水Na2SO4干燥，最后减压蒸发。自EtOH中结晶得到6.12g(94％)的反式-N-(4-羟基甲基-环己基甲基)-N-甲基-4-三氟代-甲基-苯磺酰胺，为白色结晶，MS366(MH+)。
22.2将0.56mL(6.57mmol，2eq)草酰氯的15mL的CH2Cl2液冷却至-78℃，用0.51g(6.57mmol，2eq)二甲基亚砜的3mL的CH2Cl2液处理10分钟。然后加入1.2g(3.28mmol)反式-N-(4-羟基甲基-环己基甲基)-N-甲基-4-三氟甲基-苯磺酰胺的10mL CH2Cl2液，将反应混合物于-78℃搅拌10分钟。随后在同样的温度下加入2.3mL(164mmol，5eq)的Et3N，将反应混合物于-78℃搅拌30分钟，温热至室温后，再搅拌1小时。然后将其倒入50mL冰/水混和液中，用50mL的CH2Cl2萃取3次。合并的CH2Cl2相用稀HCl、NaHCO3溶液和水洗涤，无水Na2SO4干燥并最后蒸发。残留物经硅胶层析，用CH2Cl2∶Et2O(4∶1)洗脱。得到1.05g(88％)的反式-N-(4-甲酰基-环己基甲基)-N-甲基-4-三氟代-甲基-苯磺酰胺，为白色固体，MS364(MH+)。
22.3于90℃，将2g(5.5mmol)反式-N-(4-甲酰基-环己基甲基)-N-甲基-4-三氟甲基-苯磺酰胺和2.2g(6.6mmol，1.2eq)的(三苯基-亚膦基)乙酸甲酯的25mL的甲苯液搅拌1小时。将溶液浓缩并经硅胶层析，用CH2Cl2∶Et2O95∶5洗脱，得到为类白色固体的2.09g(91％)的反式-3-(4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己基)-丙烯酸甲酯，它是E和Z异构体的混合物(98∶2)，MS437(M+NH4+)。
22.4在常压下，用5％Pd/C作催化剂，将1.45g(3.5mmol)的反式-3-(4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己基)-丙烯酸甲酯的25mL的EtOA氢化得到1.4g(96％)反式-3-(4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己基)-丙酸甲酯，为白色固体，MS422(MH+)。
22.5类似于实施例19.3，将反式-3-(4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己基)-丙酸甲酯皂化得到反式-3-(4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己基)-丙酸，MS406(M-H-)。
22.6类似于实施例21.1，由反式-3-(4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己基)-丙酸和N，N，N’-三甲基乙二胺得到反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-N-甲基-3-(4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己基)-丙酰胺，为淡黄色固体，MS492(MH+)。
22.7类似于实施例21.1，由反式-3-(4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己基)-丙酸和1-甲基-4-(甲基氨基)哌啶得到反式-N-甲基-N-(1-甲基-哌啶-4-基)-3-(4-{[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-甲基}-环己基)-丙酰胺，为淡黄色固体，MS518(MH+)。
实施例2323.1向1g(2.96mmol)反式-N-(4-羟基-环己基)-N-甲基-4-三氟甲基-苯磺酰胺的12mL甲苯悬浮液中加入0.9ml(6.04mmol，2eq)溴代-乙酸叔-丁酯、100mg(0.3mmol，0.1eq)四-正-丁基硫酸氢铵和12mL的50％NaOH水溶液。将混合物于50℃搅拌1小时。将有机相溶于EtOAc，经Na2SO4干燥，并蒸发溶剂。硅胶柱层析得到1.3g(97％)的反式-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-乙酸叔-丁酯，为类白色固体，MS469(M+NH4+)。
23.2将1.19g(2.6mmol)反式-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-乙酸叔-丁酯的20ml无水THF溶液冷却至-78℃，并滴加1M二-(三甲基硅烷基)-氨化锂的THF(6.2ml，2.5eq)溶液处理。在约1小时内将混合物升高至室温，并再次冷却至-78℃。加入0.18ml(2.9mmol，1.1eq)碘代甲烷的2.5ml THF溶液，在约1小时内将混合物升高至室温，加入冰后，混合物用EtOAc萃取，用Na2SO4干燥，并蒸发溶剂。硅胶柱层析得到600mg(49％)的反式-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酸叔-丁酯，为无色固体，MS483(M+NH4+)。
23.3类似于实施例23.2，自反式-2-甲基-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酸叔-丁酯制备反式-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酸叔-丁酯，为淡黄色油状物，MS497(M+NH4+)。
23.4将300mg(0.64mmol)的反式-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酸叔-丁酯的3ml的CH2Cl2溶液用0.5ml(6.7mmol，10eq)三氟代乙酸处理，并于40℃搅拌3小时。蒸发溶剂得到266mg(定量)反式-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酸，为类白色固体，MS408(M-H-)。
23.5类似于实施例23.4，自反式-2-甲基-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酸叔-丁酯制备反式-2-甲基-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酸，为浅棕色油状物，MS422(M-H-)。
23.6将50mg(0.12mmol反式-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酸的1ml CH2Cl2液用30mg(0.15mmol，1.2eq)的DCC、18mg(0.15mmol，1.2eq)的DMAP和19mg的N，N，N’-三亚甲基二胺处理。将溶液搅拌过夜，并在Et2O和0.5M NaOH水溶液之间分配。有机相经Na2SO4干燥并蒸发溶剂。经硅胶柱层析得到10mg(17％)反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-N-甲基-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酰胺，为淡黄色油状物，MS494(MH+)。
23.7将30mg(0.07mmol)反式-2-甲基-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酸的CH2Cl2溶液用22mg(0.085mmol，1.2eq)的2-氯代-1-甲基-吡啶碘化物和11μl(0.0851.2eq)的N，N，N’-三亚甲基二胺处理。将混合物搅拌过夜，并在Et2O和0.5M NaOH水溶液之间分配。有机相经Na2SO4干燥并蒸发溶剂。经硅胶柱层析得到20mg(56％)的反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-2，N-二甲基-2-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酰胺，为无色油状物，MS508(MH+)。
实施例A可以根据常规方法生产含有下列成分的薄膜包衣片剂
将活性成分过筛，并与微晶纤维素混和，混合物用聚乙烯吡咯烷酮的水溶液制粒。将颗粒与羧甲基淀粉钠和硬脂酸镁混和，分别压制成120或350mg的片芯。用上述薄膜衣的水溶液/悬浮液将片芯包衣。
实施例B可以根据常规方法生产含有下列成分的胶囊
将各成分过筛并混和，填充到2号胶囊。
实施例C注射溶液可以含有下列成分
将活性成分溶于聚乙二醇400和注射用水(部分)的混合物中。用乙酸将pH调节到5.0。通过加入剩余量的水将体积调节到1.0ml。将溶液过滤，适当过量地灌装到小瓶中，灭菌。
实施例D可以根据常规方法生产含有下列成分的软明胶胶囊
将活性成分溶于温热融化的其它成分中，将混合物填充到适当大小的软明胶胶囊中。根据常用方法处理已填充的软明胶胶囊。
实施例E可以根据常规方法生产含有下列成分的颗粒剂小药囊
将活性成分与乳糖、微晶纤维素和羧甲基纤维素钠混和，并用聚维酮的水混合物制粒。将颗粒与硬脂酸镁和调味剂混和，填充到药囊中。
权利要求
1.式I化合物及其药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的酯， 其中U为O或孤对电子；R1为低级-烷基、羟基-低级-烷基、环烷基或低级-烷基-NH-C(O)-O-低级-烷基；R2为低级-烷基或羟基-低级-烷基；R3为氢、低级-烷基、氟代-低级-烷基或环烷基；或者R2和R3互相连接并与它们所连接的N-(CH2)k-N基团一起形成环，并且-R2-R3-为低级-亚烷基；R4为低级-烷基；R5为芳基或杂芳基；W为单键、CO、COO、CONR6、CSO、CSNR6、SO2或SO2NR6；R6为氢或低级-烷基；V为单键、低级-亚烷基或低级-亚烷基-氧基；k为2、3或4；m为0、1、2或3，其中k+m不大于5。
2.权利要求1的化合物及其药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的酯，为反式-异构体，其特征为式Ia 其中R1、R2、R3、R4、R5、U、V、W、k和m如权利要求1定义。
3.权利要求1-2的化合物，其中U为孤对电子。
4.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R2为低级-烷基或羟基-低级-烷基。
5.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R3为低级-烷基、氟代-低级-烷基或环烷基。
6.权利要求1-5中任一项的化合物，其中R3为甲基。
7.权利要求1-6中任一项的化合物，其中R2和R3互相连接，并与它们所连接的N-(CH2)k-N基团一起形成环，且-R2-R3-为-(CH2)2-或-(CH2)3-。
8.权利要求1-7中任一项的化合物，其中R4为甲基。
9.权利要求1-8中任一项的化合物，其中W为SO2或COO，且R5为芳基。
10.权利要求1-8中任一项的化合物，其中W为单键，且R5为杂芳基。
11.权利要求1-12中任一项的化合物，其中V为单键、-(CH2)2-、-CH2-O-或-(CH2)2-O-。
12.权利要求1-11中任一项的化合物，选自下列化合物及其药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的酯反式-N-(2-二甲基氨基-乙基)-N-甲基-3-{4-[甲基-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-氨基]-环己基氧基}-丙酰胺，反式-N-甲基-N-{4-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-3-氧代-丙氧基]-环己基}-4-三氟甲基-苯磺酰胺，反式-(4-{[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-甲氧基}-环己基)-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，反式-(2-{4-[(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-氨基甲酰基]-环己基}-乙基)-甲基-氨基甲酸4-氯代-苯基酯，反式-4-{[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-甲基}-环己烷甲酸(2-二甲基氨基-乙基)-甲基-酰胺，反式-(4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-甲酮，反式-(4-{2-[(5-溴代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-[4-(2-羟基-乙基)-[1，4]二氮杂环庚-1-基]-甲酮，反式-(4-{2-[(5-氯代-嘧啶-2-基)-甲基-氨基]-乙基}-环己基)-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-甲酮，和反式-(4-甲基-[1，4]二氮杂环庚-1-基)-(4-{2-[甲基-(4-三氟甲基-嘧啶-2-基)-氨基]-乙基}-环己基)-甲酮。
13.制备权利要求1-12中任一项化合物的方法，该方法包括使式II化合物 其中R4、R5、V、W和m具有如权利要求1-11中任一项的定义，且Y为基团OH、Cl或Br，与NR1R2(CH2)kNR3H反应，其中R1、R2、R3和k具有权利要求1-11中任一项的定义，并且任选使权利要求1-11中任一项的化合物转化为药学上可接受的盐和/或药学上可接受的酯，以及任选使其中U为孤对电子的权利要求1-11中任一项的化合物转化为其中U为O的相应的化合物。
14.权利要求1-12中任一项的化合物，是根据权利要求13所述方法制备的。
15.药物组合物，该药物组合物包含权利要求1-12中任一项的化合物及药学上可接受的载体和/或辅料。
16.权利要求1-12中任一项的化合物，用作治疗活性成分。
17.治疗和/或预防与OSC相关的疾病的方法，所述疾病例如高胆固醇、高脂血症、动脉硬化、血管疾病、霉菌病、寄生虫感染、胆结石、肿瘤和/或过度增殖性疾病，和/或治疗和/或预防糖耐量受损和糖尿病，所述方法包括给予人类或动物权利要求1-12中任一项的化合物。
18.权利要求1-12中任一项的化合物的用途，用于治疗和/或预防与OSC相关的疾病。
19.权利要求1-12中任一项的化合物在制备用于治疗和/或预防与OSC相关的疾病的药物中的用途，。
20.基本上如前文所述的新的化合物、制备方法和治疗方法以及此类化合物的用途。
全文摘要
本发明涉及式(I)化合物及其药学上可接受的盐和/或其药学上可接受的酯，在式(I)中，R
文档编号A61P9/10GK1882532SQ200480033874
公开日2006年12月20日 申请日期2004年9月13日 优先权日2003年9月22日
发明者J·艾克尔曼, J·埃比, H·德姆洛, G·海尔斯, H-P·玛尔基, O·莫兰德, N·潘戴 申请人:弗·哈夫曼-拉罗切有限公司