专利名称：一种多烯磷脂酰胆碱冻干粉针及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种多烯磷脂酰胆碱冻干粉针及其制备方法。
背景技术：
多烯磷脂酰胆碱是一种肝细胞膜保护剂，用于治疗各种类型的肝病，如肝炎、慢性肝炎、肝坏死、肝硬化、肝昏迷、脂肪肝、胆汁阻塞、胆结石复发等症，也可用于肝胆手术前后的治疗。其主要成分是从大豆磷脂中提取的一种高纯度大豆油磷脂，为人体的“必需”磷脂。由于富含多不饱和脂肪酸的磷脂酰胆碱，因此又称为多烯磷脂酰胆碱，其中的多不饱和脂肪酸主要为亚油酸(约占70％)、亚麻酸和油酸。
当人体患肝脏疾病时，肝脏的代谢活力受到严重损伤。多烯脂酰胆碱可提供高剂量、容易吸收利用的高能多烯磷脂酰胆碱，这些多烯磷脂酰胆碱的在化学结构上与重要的内源性磷脂一致。它们主要进入肝细胞，并以完整的分子与肝细胞膜及细胞器膜相结合，另外可分泌入胆汁。因此多烯磷脂酰胆碱具有下列生理功能通过直接影响膜结构使受损的肝功能和酶活力恢复正常；调节肝脏的能量平衡；促进肝组织再生；将中性脂肪和胆固醇转化成容易代谢的形式；稳定胆汁。该药为目前疗效确切并广受临床肯定的一个保肝药物，其注射液由北京安万特公司进口分装，商品名为“易善复”，又称“肝得健”。
由于多烯磷脂酰胆碱含有多个不饱和双键，其在溶液状态于室温下放置很不稳定，易发生氧化降解，进而导致含量下降。因此，该产品在运输过程中需要低温环境，其贮存温度应控制在8℃以下，因此不可避免的会增加运输难度和成本。同时如果保存方式稍有不慎，易使产品失效，严重影响该产品的疗效，危害用药病人的健康。
本发明通过研究发现，通过在药学上的适当的制备工艺改进，可将该产品制成冷冻干燥粉针，从而可明显提高主药在常温下的稳定性，达到降低运输成本和难度，确保疗效之目的。本发明通过药学上的工艺改进，首次制备多烯磷脂酰胆碱冻干制剂，从根本上解决了多烯磷脂酰胆碱注射液于常温下放置稳定性差的问题。本发明制备的多烯磷脂酰胆碱冻干制剂，可在常温下运输和贮存，有利于降低生产成本和临床用药的安全，具有显著的实用性，必将产生巨大的经济效益。
发明内容
本发明提供了一种多烯磷脂酰胆碱冻干粉针及其制备方法，该冻干粉针由主药多烯磷脂酰胆碱与药学上可接受的支架剂、增溶剂及其他附加剂组成。该制剂成品中多烯磷脂酰胆碱的重量百分含量为10～60％，优选20～50％。支架剂为适宜的可注射用的冻干保护剂，如氯化钠、氨基酸、葡萄糖、甘露醇、蔗糖、乳糖等中的一种或多种，其在冻干制剂成品中所占重量比为5～60％，优选20～50％。增溶剂可以是胆酸、甘氨胆酸、牛磺胆酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸或牛磺去氧胆酸及其相应的盐、泊洛沙姆和吐温等中的一种或多种。优选为去氧胆酸钠、胆酸、甘氨胆酸钠。多烯磷脂酰胆碱与胆酸(或其盐)的重量比为0.1～3.0∶1，优选0.5～2.0∶1。附加剂为维生素(如维生素A、B6、B12、C、E、K等)、烟酰胺、泛酸钠或溶剂(如水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇等)中的一种或多种。
本发明制备的多烯磷脂酰胆碱冻干粉针，稳定性好，可在常温下贮存1年内保持稳定。安全性试验结果表明，本发明制备的冻干粉针无菌、热原检查合格，且无过敏性、无刺激性，符合临床用药安全性的要求，可用于静脉注射给药。
试验例1本发明稳定性考察将本发明制备的冻干制剂与市售易善复注射液置相同条件下(25±2℃)一同进行了长期试验考察，并对主要指标总结如下表1 本冻干制剂与易善复注射液长期试验考察结果
试验例2本发明药物无菌检查取以本发明制备的冻干制剂，按照无菌检查法(中国药典2000版附录XI H)检查，检查结果合格。
试验例3本发明药物热原检查取本发明制备的冻干制剂，按照热原检查法(中国药典2000版附录XI D)检查，检查结果合格。
试验例4本发明药物过敏性试验试验方法取本发明制备的冻干制剂适量，加注射用水溶解制成每ml含多烯磷脂酰胆碱46.5mg的注射液(与易善复注射液浓度相同)，为供试注射液。将豚鼠按体重随机分为3组，每组6只，1、2两组豚鼠间日一次，连续三次腹腔注射供试注射液0.5ml/只致敏，1、2两组分别于第一次腹腔注射后的14天及21天足趾静脉注射供试注射液1.0ml/只激发；3组豚鼠间日一次，连续三次腹腔注射20％鸡蛋清液0.5ml/只致敏，于注射后的14天足趾静脉注射20％鸡蛋清液1.0ml/只激发，3组均在激发注射后15分钟内观察过敏反应症状。
试验结果本发明制备的冻干制剂的两组豚鼠分别于第1次腹腔注射后14天和第21天用原药进行攻击均未发生过敏性反应；而阳性对照组(3组)豚鼠于注射后2分钟内出现呼吸困难，抽搐倒下，而后死亡，豚鼠死亡均发生在注射后1～3分钟内。
试验结论在本次试验条件下，本发明制备的冻干制剂对受试豚鼠无致敏作用。
试验例5本发明药物刺激性试验试验方法取本发明制备的冻干制剂适量，加10％葡萄糖注射液溶解制成每ml含多烯磷脂酰胆碱46.5mg的注射液(与易善复注射液浓度相同)，为供试注射液。取新西兰兔2只，分为1、2两组，于左耳缘静脉缓慢注射供试注射液0.4ml/kg(相当于多烯磷脂酰胆碱18.6mg/kg临床上易善复注射液静脉推注最大用量为成人每次465mg，每日2次。以人体重50kg计，则为每次9.3mg/kg，每日2次)，右耳缘静脉缓慢注射10％葡萄糖注射液0.4ml/kg，每天2次，连续注射三天。第1、2组均于注射第一次开始，每天观察注射部位有无水肿、红斑，末次注射后24小时，从耳根剪下耳朵置10％甲醛溶液中固定，然后作病理切片检查。
试验结果2只兔耳注射部位未见有水肿和红斑的发生。病理组织学观察，兔耳表皮结构正常。表皮下乳头层及网织层无炎细胞渗出、无出血，血管内无血栓形成。附件结构正常试验结论本发明制备的冻干制剂对兔耳缘静脉血管无刺激性。
从以上结果可以看出，本发明制备的多烯磷脂酰胆碱冻干制剂的稳定性明显优于现有的市售注射液，其无菌、热原检查合格，无过敏性及刺激性，符合临床用药的相关要求。
具体实施例方式
实施例中关于多烯磷脂酰胆碱冻干制剂成品中多烯磷脂酰胆碱的含量测定，均采用以下方法测定。
色谱条件与系统适用性试验用硅胶为填充剂；以异丙醇∶正己烷∶水(105∶22∶32)为流动相，检测波长206nm。理论板数按3-Sn-磷脂酰胆碱峰计算应不低于1000，分离度应符合规定。
对照品溶液的制备取3-Sn-磷脂酰胆碱对照品约25mg，精密称定，置25ml容量瓶中，加氯仿-甲醇液(2∶1)溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备精密量取本品1ml，置50m量瓶中，加氯仿-甲醇液(2∶1)溶解并并稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法分别取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。
实施例1多烯磷脂酰胆碱93g
甘氨胆酸钠 180g甘露醇 80g注射用水 加至1000ml制备方法取处方量的多烯磷脂酰胆碱、甘氨胆酸钠、甘露醇和适量注射用水，在氮气保护下搅拌均匀，加水至1000ml。用0.22um的微孔滤膜精滤，分装于西林瓶中，经冷冻干燥后轧盖包装，即得。
该制剂中，多烯磷脂酰胆碱在冻干制剂成品中的重量百分含量为25.3％～31.3％(水分因真空干燥被除去，最终成品的含水量约为1％-5％)。
实施例2多烯磷脂酰胆碱93g去氧胆酸钠90g葡萄糖50g注射用水 加至1000ml制备方法取处方量的多烯磷脂酰胆碱、去氧胆酸钠、葡萄糖和适量注射用水，在氮气保护下搅拌均匀，加水至1000ml。用0.22um的微孔滤膜精滤，分装于西林瓶中，经冷冻干燥后轧盖包装，即得。
该制剂中，多烯磷脂酰胆碱在冻干制剂成品中的重量百分含量为38.9～44.9％(含水量约为1％-5％)。
实施例3多烯磷脂酰胆碱46.5g去氧胆酸钠10g维生素B120.2gEDTA-2Na 0.5g乳糖 60g注射用水 加至1000ml
制备方法取处方量的多烯磷脂酰胆碱、去氧胆酸钠、维生素B12、乳糖、EDTA-2Na和适量注射用水，在氮气保护下搅拌均匀，加水至1000ml。用0.22um的微孔滤膜精滤，分装于西林瓶中，经冷冻干燥后轧盖包装，即得。
该制剂中，多烯磷脂酰胆碱在冻干制剂成品中的重量百分含量为38.6～44.6％(含水量约为1％-5％)。
实施例4多烯磷脂酰胆碱 46.5g泊洛沙姆 10g维生素E0.5g乳糖 50g注射用水 加至1000ml制备方法取处方量的多烯磷脂酰胆碱、泊洛沙姆、维生素E、乳糖和适量注射用水，在氮气保护下搅拌均匀，加水至1000ml。用0.22um的微孔滤膜精滤，分装于西林瓶中，经冷冻干燥后轧盖包装，即得。
该制剂中，多烯磷脂酰胆碱在冻干制剂成品中的重量百分含量为42.4～51.5％(含水量约为1％-5％)。
以上通过具体实施例的方式对本发明的制备方法做进一步详述，但不应理解为是对本发明保护范围的限制，凡基于上述技术思想，利用本领域普通技术知识和惯用手段所做的修改、替换、变更均属于本发明的范围。
权利要求
1.一种多烯磷脂酰胆碱冻干粉针制剂，其特征在于该制剂包含多烯磷脂酰胆碱及药学上可接受的增溶剂、支架剂及其他附加成分。
2.根据权利要求1所述的多烯磷脂酰胆碱冻干粉针制剂成品(经冷冻干燥后)中，多烯磷脂酰胆碱的重量百分含量为10％～60％，优选20％～50％。
3.根据权利要求1所述的增溶剂选自胆烷酸及其盐，如去氧胆酸、甘氨胆酸、胆酸及其它们所成的盐、泊洛沙姆及吐温等中的一种或多种。优选去氧胆酸、甘氨胆酸及它们所成的盐。
4.根据权利要求1所述的多烯磷脂酰胆碱冻干粉针中多烯磷脂酰胆碱与胆酸(盐)的比例为0.1～3.0∶1，优选0.5～2.0∶1。
5.根据权利要求1所述的支架剂为药学上适宜的冻干保护剂，如氯化钠、氨基酸、甘露醇、山梨醇糖、葡萄糖、蔗糖、海藻糖、乳糖等中的一种或多种，其在冻干制剂成品中所占重量比为5～60％，优选20～50％。
6.根据权利要求1所述的附加成分为维生素(如维生素A、B6、B12、C、E、K等)、烟酰胺、泛酸钠或溶剂(如水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇等)中的一种或多种。
7.根据权利要求1所述的附加成分可加或不加。
全文摘要
本发明提供了一种多烯磷脂酰胆碱冻干粉针及其制备工艺，该冻干粉针处方由主药多烯磷脂酰胆碱与药学上可接受的增溶剂、支架剂及其他附加成分组成。该制剂中多烯磷脂酰胆碱的量为10～60％。增溶剂可以是胆酸、甘氨胆酸、牛磺胆酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸或牛磺去氧胆酸及其相应的盐、泊洛沙姆和吐温等中的一种或多种。支架剂为适宜的可注射用的冻干保护剂。本发明制备的多烯磷脂酰胆碱冻干粉针，稳定性好，可在常温下至少贮存1年内质量无明显改变。安全性试验结果表明，本发明制备的冻干粉针无菌、热原检查合格，且无过敏性、无刺激性，符合临床用药安全性的要求，可用于静脉注射给药。
文档编号A61P1/16GK1879634SQ200510021089
公开日2006年12月20日 申请日期2005年6月16日 优先权日2005年6月16日
发明者杨磊 申请人:四川思达康药业有限公司