专利名称：双胍基嘌呤环类衍生物制备提高抗癌药药效的新应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及到使用双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐和酯在提高抗癌类药物药效和降低抗癌药副作用的新应用。
背景技术：
本发明所述的双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯是以石房蛤毒素(saxitoxin)为代表的天然生物提取或者人工合成双胍基嘌呤环小分子化学成分。其分子结构式
(I)固体状态下 R1＝R2＝R3＝H R4＝OCONH2 石房蛤毒素(STX)， R1＝OH，R2＝R3＝H R4＝OCONH2 新石房蛤毒素(N-STX)， R1＝OH，R2＝H R4＝OCONH2 R3＝OSO3赤藻毒素(GTX1)， R1＝OH，R3＝H R4＝OCONH2 R2＝OSO3赤藻毒素(GTX4)， R1＝R2＝H R4＝OCONH2 R3＝OSO3赤藻毒素(GTX2)， R1＝R3＝H R4＝OCONH2 R2＝OSO3赤藻毒素(GTX3)， 石房蛤(saxitoxin，简称STX)类化合物最早是从天然水生生物，大石房蛤(Saxidomusgigamteus)；紫斑海菊蛤(Spondylus butleri)；美洲海菊蛤(Spondylusameri canus)；加洲贻贝(Mytilus californianus)；紫贴贝(Mytilus californianus)；颗粒扁足蟹(Platypodia granulose)；蝉蟹(Emerita amaloga)；织纹螺(Nassariu ssp)；夜光蝾螺(Turbo maxmorata)；沙海螂(Myaa renaria)；食用牡蛎(Ostrea edulis)；赤潮(Rad tide)的膝沟藻(Gonyaulaxs sp，)；小丽膝钩藻(G.catenella)；枣形膝沟藻(Gonyaulaxtamarensis)；石灰藻(Janias sp.)；甲藻(Prorocemntrum sp)；硅藻、浮游盐藻等中提取分离的化学成分。现有的技术中，还未见有关本发明中所指的双胍基氢化嘌呤环类化合物及其衍生物的盐和酯应用于制备提高抗癌类药物药效和降低抗癌药副作用的新应用。
在CN1269482C和US4022899专利文献中报道了STX与局部麻醉药的协同研究效果，CN021099758专利文献中报道了将STX制备治疗疼痛症药中的应用，CN1192903专利文献中报道了STX制备戒毒药的研究。本发明是用双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯在提高抗癌药药效方面的应用。抗癌药是目前医院治疗肿瘤患者最常用的药品，但是因其自身的细胞毒性和长期使用产生的耐药性又限制了它对肿瘤细胞抑制率不高的特性。本发现使用双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯可以显著的提高抗癌药的药效，同时可以降低抗癌药原有的毒副作用。
发明内容
本发明的目的之一，发现双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯能显著提高抗癌药的药效和降低抗癌药的毒副作用。本发明的目的之二，发现双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯可以与目前常用的各类抗癌药混配使用，制成新的组合物均有显著提高抗癌药药效的作用。本发明另一目的使用本发明的双胍基氢化嘌呤环类化合物在提高抗癌药药效同时也就是解决了肿瘤细胞对抗癌药的耐药性问题。
本发明使用的双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯是以石房蛤毒素(saxitoxin)为代表的从天然水生生物提取或者人工合成的小分子化合物。其分子结构式
(I)固体状态下 R1＝R2＝R3＝H R4＝OCONH2 石房蛤毒素(STX)或 R1＝OH，R2＝R3＝H R4＝OCONH2 新石房蛤毒素(N-STX)， R1＝OH，R2＝H R4＝OCONH2 R3＝OSO3赤藻毒素(GTX1)， R1＝OH，R3＝H R4＝OCONH2 R2＝OSO3赤藻毒素(GTX4)或 R1＝R2＝H R4＝OCONH2 R3＝OSO3赤藻毒素(GTX2)， R1＝R3＝H R4＝OCONH2 R2＝OSO3赤藻毒素(GTX3)， 本发明使用的双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯的技术特征，是以石房蛤毒素(STX)为母体结构，其中 R1选自H；OH；卤素；C1-C5烷氧基；C1-C5卤代烷氧基；C3-C6环烷氧基；C3-C6环烷基；C2-C6链烯基；C2-C6链炔基；C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基或C5-C10芳基；氨基；C1-C6烷氨基；酰基；C1-C6烷酰基；R2＝R3＝OH；R4＝OCONH2或OCONHSO3或OH。或 当R1＝H，或OH时，R2选自OH；CH2OH；C1-C5烷羟基；卤素；C1-C5烷氧基；C1-C5卤代烷氧基；C3-C6环烷氧基；C3-C6环烷基；C2-C6链烯基；C2-C6链炔基；C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基或C5-C10芳基；氨基；C1-C6烷氨基；酰基；C1-C6烷酰基；R3＝OH；R4＝OCONH2或OCONHSO3或OH。或 当R1＝H，或OH；R2＝CH2OH或OH时，R3选自H；OH；C1-C5烷羟基；卤素；C1-C5烷氧基；C1-C5卤代烷氧基；C3-C6环烷氧基；C3-C6环烷基；C2-C6链烯基；C2-C6链炔基；C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基或C5-C10芳基；氨基；C1-C6烷氨基；酰基；C1-C6烷酰基；R4＝OCONH2或OCONHSO3或OH。或 当R1＝H，或OH时，R2＝H或OSO3或OH；R3＝OH或H或OSO3时；R4选自H；OH；C1-C5烷羟基；卤素；C1-C5烷氧基；C1-C5卤代烷氧基；C3-C6环烷氧基；C3-C6环烷基；C2-C6链烯基；C2-C6链炔基；C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基或C5-C10芳基；氨基；C1-C6烷氨基；酰基；C1-C6烷酰基；CONH-SO3；对羟苯甲酰基；其中选择一类或几类。
在液体壮态下本发明使用的双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯的技术特征是(II)和(III)为互变异构体
(II)液体壮态下(III) 通式(II)和(III)中还包括有， R1＝R2＝R3＝H，R4＝OCONH2， 石房蛤毒素(STX)， R1＝R2＝R3＝H，R4＝OCONHOH，氨基甲磺酸N-羟基石房蛤毒素(N-hySTX)， R1＝R2＝R3＝R4＝H， 脱氧石房蛤毒素(doSTX)， R1＝OH，R2＝R3＝H R4＝OCONH2， 新石房蛤毒素(N-STX)， R1＝OH，R2＝R3＝H R4＝OCONHOH，氨基甲磺酸N-羟基新石房蛤毒素(N-hyN-STX)， R1＝OH，R2＝H，R4＝OCONH2，R3＝OSO3，赤藻毒素(GTX1)， R1＝OH，R3＝H，R4＝OCONH2，R2＝OSO3，赤藻毒素(GTX4)， R1＝R2＝H，R4＝OCONH2，R3＝OSO3，赤藻毒素(GTX2)， R1＝R3＝H，R4＝OCONH2，R2＝OSO3，赤藻毒素(GTX3)， R1＝R2＝R3＝H，R4＝OCONHSO3，赤藻毒素(GTX5)， R1＝OH，R2＝R3＝H，R4＝OCONHSO3，赤藻毒素(GTX6)， R1＝R2＝R3＝H，R4＝OH， 脱氨甲酰石房蛤毒素(deSTX)， R2＝R3＝H，R1＝R4＝OH， 脱氨甲酰新石房蛤毒素(deN-STX)， R1＝R4＝OH，R2＝OSO3，R3＝H，脱氨甲酰赤藻毒素(deGTX1)， R1＝R3＝H，R2＝OSO3，R4＝OH，脱氨甲酰赤藻毒素(deGTX2)， R2＝OSO3，R1＝R3＝R4＝H，脱氧赤藻毒素(doGTX2)， R1＝R2＝H，R3＝OSO3，R4＝OH，脱氨甲酰赤藻毒素(deGTX3)， R1＝R2＝R4＝H，R3＝OSO3，脱氧赤藻毒素(doGTX3)， R2＝H，R3＝OSO3，R1＝R4＝OH，脱氨甲酰赤藻毒素(deGTX4)， 其中选择一种或几种。最优选的是STX，N-STX，GTX1和GTX4。
本发明使用的双胍基嘌呤环类衍生物是一种生物活性其强的钠离子通道阻断剂，通常细胞膜对不同物质具有不同的通透性。膜内外的离子浓度不同，膜内主要为K+，膜外主要为Na+。细胞膜内外侧通常保持50-100mv的负静息电位。神经一兴奋，电位差就起变化，即产生去极化。这种电位变化增加了Na+对细胞膜的通透性，Na+一流入神经细胞膜内，膜电位就起变化，K+接着就流出。这样一系列的变化，使与膜表面相邻的部分之间造成了局部回路，造成的局部回路导致相邻部位去极化，由于去极化，再次造成细胞膜兴奋，增加Na+内流，此种形式，向邻近部位一一传递。传递的速度为0.1-100米/秒。双胍基嘌呤环类衍生物就是通过专一性的阻断Na+内流控制细胞膜的电位极差变化，这种变化导致了细胞的各种生理、生物活性发生显著变化，这种变化也为抗癌药物抑制肿瘤细胞的生长提供了条件。双胍基嘌呤环类衍生物阻断钠离子通道的效果也同时减少了抗癌药物对正常细胞的毒副作用，这种变化不受各种抗癌药的机理影响。因此，使用本发明公开的双胍基嘌呤环类衍生物及其药学上可接受的盐或酯提高抗癌药的药效，可以在给予抗癌药使用前、期间或之后使用。可以是单独或/和抗癌药混配使用。
使用本发明中的双胍基嘌呤环类衍生物及其药学上可接受的盐或酯类在生物体内如何与抗癌药协同作用或如何提高抗癌药的药效机理还未能清晰阐述，我们仍然在继续研究，但是这并不限制本发明的实际用途及其使用效果。
本发明制备的双胍基氢化嘌呤环类化合物及及其衍生物和它药学上可接受的盐，包括无机酸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、次氯酸、硫酸、亚硫酸、硫代硫酸、磷酸、氢磷酸、二氢磷酸、碳酸、次碳酸、硝酸、亚硝酸和有机酸，包括醋酸、草酸、枸橼酸、苹果酸、酒石酸、马来酸、琥珀酸、半琥珀酸、水杨酸、甲磺酸、烷基苯磺酸，马尿酸等形成的盐类或酯类，可根据现有制药技术使用药物学上的载体、赋形剂或其他添加剂，制成各种剂型，如将其制成皮下、肌内、穴位或静脉注射剂，口服制剂、含剂、油制剂、皮肤贴敷、皮内植入(控释剂)、渗透、泵渗透、肛门栓剂、喷雾剂。优选注射剂、油制剂和皮肤贴剂。制剂含石房蛤毒素纯度为80--110％，最优选为90-105％。其制剂含双胍基氢化嘌呤环类化合物为标示量的80-120％。最优选为90-110％。使用双胍基氢化嘌呤环类化合物及的用药剂量为0.01-50μg/Kg，最佳剂量为0.1-1μg/Kg，可以显著提高抗癌药的药效和降低抗癌药的毒副作用 本发明双胍基嘌呤环类衍生物制备提高抗癌药药效的新组合物中，所述的双胍基嘌呤环类衍生物是指以STX，N-STX，GTX1和GTX4为代表，可以选则其中一种或/和几种相混合而组成，在本发明的实施例中，虽然所举范例证明发明有显著的提高抗癌药的效果，类似增效作用还见于其它抗肿瘤药品。说明具有普遍意义。因此，本发明所述的抗癌药物组合物的有效成分为本发明所选任意一种(或多种)抗癌药。
所指的抗癌药是由目前常见的和临床上常用的各种抗癌药如(1)核糖核酸类抗癌药物，如氟尿苷(floxuridine)，氟尿嘧啶(fluorouracil)，卡莫氟(carmofur)，去氧氟尿苷(doxifluridine)，替加氟-尿嘧啶(tegafur-uracil)，卡培他滨(capecitabine)，盐酸吉西他滨(gemcitabine hydrochloride)，巯嘌呤(mercaptopurine)，羟基脲(hydroxycarbamide)，阿糖胞苷(cytarabine)，甲氨蝶呤(methotrexate)，氟达拉滨(fludarabine)，雷替曲塞(raltitrexed)，培美曲塞(pemetrexed)，氯法拉滨(clofarabine)，氯氧喹(chloroxoquinoline)。(2)调节体内激素平衡类抗癌药物，氨鲁米特(aminoglutethimide)，福美坦(formestane)，依西美坦(exemestane)，阿那曲唑(anastrozole)，来曲唑(letrozole)，枸橼酸他莫昔芬(tamoxifen citrate)。(3)干扰转录过程和阻止RNA合成药物，多柔比星(doxorubicin)，阿柔比星(aciarubicin)，盐酸表柔比星(epirubicin hydrochloride)，伊达比星(idarubicin)，吡柔比星(pirarubicin)米托蒽醌(mitoxantrone)。柔红霉素(daunorubicin)，安丫啶(amsacrine)，匹克生琼(pixantrone)，(4)抑制蛋白质合成类的药物，门冬酢酰胺酶(asparaginase)，培门冬酶(pegaspargase)，高三尖酯碱(homoharringtonine)，硫酸长春碱(vinblastine sulfate)，硫酸长春新碱(vincristine sulfate)，硫酸长春地辛(vindesine sulfate)，紫杉醇(paclitaxel)，多西他塞(docetaxel)，蛋白结合紫杉醇(paclitaxel protein-bound)。(5)拓扑异构酶抑制类药物，伊立替康(irinotecan)，羟基喜树碱(hydroxycamptothecin)，盐酸拓扑替康(topotecan hydrochloride)，喷司他丁(pentostatin)，依托泊苷(etoposide)，替尼泊苷(teniposide)。(6)抗信号转导药，吉非替尼(gefitinib)，甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate)，索拉非尼(sorafenib)。(7)烷化剂类，氮芥(chlormethine)，美法仑(melphalan)，环磷酰胺(cyclophosphamide)，异环酰胺(ifosfamide)，雌莫司汀磷酸钠(estramustine phosphate sodium)，卡莫司汀(carmustine)，洛莫司汀(lomustine)，尼莫司汀(nimustine)，福莫司汀(fotemustine)，司莫司汀(semustine)，塞替派(thiotepa)，白消安(busulfan)，达卡巴嗪(dacarbazine)，替莫唑胺(temozolomidef)。(8)破坏DNA的抗生素类和铂类药物，博来霉素(bleomycin)，平阳霉素(bleomycin A5)，丝裂霉素(mitomycin)，顺铂(cisplatin)，卡铂(carboplatin)，洛铂(lobaplatin)，奥沙利铂(oxaliplatin)，奈达铂(nedaplatin)。(9)抗肿瘤抗体类药物，利妥昔单抗(rituximab)，曲妥珠单抗(trastuzumab)，波替单抗(bortezomib)，西妥昔单抗(cetuximab)，贝伐单抗(bevacizumab)，替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan)，丙卡巴肼(procarbazine)，三氧化二砷(arsenic trioxide)，六甲蜜胺(altretamine)，地西他滨(decitabinef)，奈拉滨(nelarabine)，贝沙罗汀(bexarotene)，米替福新(mitefosine)，氟维司群(fulvestrant)。(10)抗肿瘤的辅助用药，美司纳(mesna)，盐酸昂丹司琼(ondansetron hydrochloride)，盐酸格拉司琼(granisetron hydrochloride)，盐酸雷莫司琼(ramosetron hydrochloride)，盐酸托烷司琼(tropisetron hydrochloride)，阿瑞吡坦(aprepitant)，阿立必利(alizapride)，帕洛诺司琼(palonosetron)，香茹多糖(lentinan)，右雷佐生(dexrazoxxane)，帕米磷酸二钠(pamidronate disodium)，氯屈磷酸二钠(clodronate disodium)，伊班磷酸(ibandronic acid)，唑来磷酸(zoledronic acid)，阿扎司琼(azasetron)，乙丙昔罗(efaproxiral)，帕立非明(palifermin)。
实施方案 一、双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯与(1)核糖核酸类抗癌药物联合应用 结果见表1。
表1、核糖核酸类抗癌药与STX，N-STX，GTX4组合后用药剂量
二、双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯与(2)调节体内激素平衡类抗癌药物联合应用 结果见表2。
表2、调节体内激素类抗癌药与STX，N-STX，GTX4组合后用药剂量
三、双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯与(3)干扰转录过程和阻止RNA合成类抗癌药物联合应用 结果见表3。
表3、干扰转录过程和阻止RNA合成类抗癌药与STX，N-STX，GTX4组合后用药剂量
四、双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯与(4)抑制蛋白质合成类抗癌药物联合应用 结果见表。
表4、抑制蛋白质合成类抗癌药与STX，N-STX，GTX4组合后用药剂量
五、双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯与(5)拓扑异构酶抑制类抗癌药物联合应用 结果见表5。
表5、拓扑异构酶抑制类抗癌药与STX，N-STX，GTX4组合后用药剂量
六、双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯与(6)抗信号转导类抗癌药物联合应用 结果见表6。
表6、抗信号转导类抗癌药与STX，N-STX，GTX4组合后用药剂量
七、双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯与(7)烷化剂类抗癌药物联合应用 结果见表7。
表7、烷化剂类抗癌药与STX，N-STX，GTX4组合后用药剂量
八、双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯与(8)破坏DNA的抗生素类和铂类抗癌药物联合应用 结果见表8。
表8、破坏DNA的抗生素类和铂类药物类抗癌药与STX，N-STX，GTX4组合后用药剂量
九、双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯与(9)肿瘤抗体类抗癌药物联合应用 结果见表9。
表9、肿瘤抗体类抗癌药与STX，N-STX，GTX4组合后用药剂量
十、双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯与(10)抗肿瘤的辅助用药联合应用 结果见表10。
表10、抗肿瘤的辅助用药与STX，N-STX，GTX4组合后用药剂量
十一、双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐制备方法 1、石房蛤毒素(STX)及其盐A组合配方制备，取石房蛤毒素，含量(95-99％)3.0mg，用柠檬酸6.0mg，配制成PH＝4.5-5.5的溶液，按每1ml含STX 3.0ug计算，制成3000支注射液，用HPLC检测，含量合格后，灌装，灭菌，符合医用卫生标准即可使用。B组合配方制备，取石房蛤毒素，含量(95-99％)10.0mg，用水杨酸9.0mg，配制成PH＝4.0-5.0的溶液，按每1ml含STX 10.0ug计算，制成1000支注射液，用HPLC检测，含量合格后，灌装，灭菌，符合医用卫生标准即可使用。C、D组合配方仍按上述方式配制，只需要改变酸的种类及其用量，就可制成本发明使用的STX-C或STX-D。
A、STX3.0μg B、STX10.0μg 枸橼酸6.0μg 水杨酸15.0μg C、STX10.0μgD、STX5.0μg 酒石酸15.0μg磷酸 5.0μg 2、新石房蛤毒素(N-STX)及其盐参照A组配方制备，改用不同的酸，就可制成本发明使用的N-STX及其盐制剂。
E、N-STX3.0μg F、N-STX10.0μg 苹果酸 4.0μg 磺酸15.0μg G、N-STX10.0μgH、N-STX5.0μg 醋酸15.0μg次氯酸 10.0μg 3、赤藻毒素(GTX4)及其盐参照A组配方制备，改用不同的酸，就可制成本发明使用的GTX及其盐制剂。
I、GTX4 3.0μgJ、GTX410.0μg 盐酸4.0μg琥珀酸 15.0μg K、GTX1 10.0μg L、GTX15.0μg 碳酸15μg 亚硫酸 10.0μg 十二、双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯提高抗癌药药效研究 1、体外抑制肿瘤研究 取对数生长的人骨肿瘤细胞株(BC12)，人乳腺癌细胞株(MCF-7)，人肺癌细胞株(LH421)，人肝癌细胞株(HepG21)，人鼻咽癌(CNE741)，大肠癌细胞株(SW620)，人白血病细胞株(HL60)，脑肿瘤细胞株(G422)，人宫颈癌细胞株(Hela)，人皮肤癌细胞株(A431)，人肾癌细胞株(H786-1)，人胃癌细胞株(SGC-7901)，人前列腺癌细胞株(LNCap2)接种于96孔(coster)内，37℃培养24hr后，加入不同浓度的药物，每药设3-4个剂量组，每组三个平行孔。对照组加入与药等体积的溶剂，继续培养72hr后，弃去培养液，每孔加入二甲基亚砜150μl，轻微振荡将沉淀物溶解于酶标仪在参考波长450nm、检测波长570nm处测定吸光度(OD)，对照组的抑瘤率为0％，实验结果见表11。
表11 STX、N-STX、GTX4与抗癌药对肿瘤细胞抑制率(剂量是三个剂量的平均值)
续表11
续表11
2、小鼠体内抑制肿瘤效果 2.1取小鼠，将2×108个S180肉瘤细胞注射于其腋部皮下，待肿瘤生长2天后随即分组，每组8只，对照组注射与药物等体积的溶剂，所有的药物都经腹腔注射，治疗10天后处死老鼠，摘眼球取血(1％肝素抗凝)供分析血象用。取脾、胸腺称重，测其指数。剥瘤称重，测抑瘤平均重量，实验结果见表12。
表12 STX、N-STX、GTX对小鼠S180肉瘤生长的抑制作用
2.2取小鼠，将2×108个肝癌细胞HepG21注射于其腋部皮下，待肿瘤生长2天后随机分组，每组8只，对照组注射与药物等体积的溶剂，所有的药物都经腹腔内注射，治疗10天后处死老鼠，摘眼球取血(1％肝素抗凝)供分析血象用。取脾、胸腺称重，测其指数。剥瘤称重，测抑瘤平均重量，实验结果见表13。
表13 STX、N-STX、GTX对小鼠HepG21肝瘤生长的抑制作用
2.3取小鼠，将2×108个肺瘤H523注射于其腋部皮下，待肿瘤生长2天后随即分组，每组8只，对照组注射与药物等体积的溶剂，所有的药物都经腹腔注射，治疗10天后处死老鼠，摘眼球取血(1％肝素抗凝)供分析血象用。取脾、胸腺称重，测其指数。剥瘤称重，测抑瘤平均重量，实验结果见表14。
表14 STX、N-STX、GTX对小鼠肺瘤H523生长的抑制作用
2.4取小鼠，将2×108个骨肿瘤组织液(BC12)注射于其腋部皮下，待肿瘤生长2天后随即分组，每组8只，对照组注射与药物等体积的溶剂，所有的药物都经腹腔注射，治疗10天后处死老鼠，摘眼球取血(1％肝素抗凝)供分析血象用。取脾、胸腺称重，测其指数。剥瘤称重，测抑瘤平均重量，实验结果见表15。
表15 STX、N-STX、GTX对小鼠骨肿瘤细胞BC12生长的抑制作用
2.5取小鼠，将2×108个人乳腺癌组织液(MCF-7)注射于其腋部皮下，待肿瘤生长2天后随机分组，每组8只，对照组注射与药物等体积的溶剂，所有的药物都经腹腔注射，治疗10天后处死老鼠，摘眼球取血(1％肝素抗凝)供分析血象用。取脾、胸腺称重，测其指数。剥瘤称重，测抑瘤平均重量，实验结果见表16。
表16 STX、N-STX、GTX对小鼠乳腺癌细胞株MCF-7生长的抑制作用
以上实验证明双胍基嘌呤环类衍生物有广谱性的提高抗癌药效果的作用。类似增效作用还见于其它抗肿瘤药品。说明本发明使用的双胍基氢化嘌呤环类化合物具有普遍意义。因此，本发明所述的抗癌药物组合物的有效成分为任意一种(或多种混合)抗癌药。
十三、双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯减少抗癌药的毒副作用研究 1、对小鼠血液毒性的保护作用 将体内抑制肿瘤处死小鼠的血，用日本光电血液分析仪(MEK5108)分析血象，同时计算脾脏和胸腺指数，结果见表17。
表17 STX、N-STX、GTX对小鼠血液毒性的保护作用
实验结果，本发明使用的双胍基氢化嘌呤环类化合物有显著保护因使用抗癌药引起的白细胞下降的效果，有显著降低抗癌药副作用的效果。
2、提高小鼠的存活率 本发明的双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐或酯在提高抗癌药药效的同时还有显著的减少抗癌药的毒副作用。取小鼠，将2×108个脑肿瘤组织悬液(G422)注射于鼠脑内，待肿瘤生长2天后随即分组，每组10只，对照组注射与药物等体积的溶剂，所有的药物都经腹腔注射观察其平均存活时间。统计发现，对照组小鼠平均存活14天，在同等剂量下单独给予抗癌药的小鼠100％死亡，而加入STX、GTX共同使用的抗癌药的小鼠体重变化不明显，动物100％存活，实验结果见表18。
表18 STX、N-STX、GTX对小鼠脑肿瘤(G422)存活率
3、提高辅助抗癌药的镇痛效果 取小鼠，将2×108个骨肿瘤组织液(BC12)注射于其腋部皮下，待肿瘤生长2天后随即分组，每组8只，对照组注射与药物等体积的溶剂，所有的药物都经腹腔注射，治疗5天后观察小鼠扭体反应，分别记录15min小鼠的扭体次数，结果见表19。
表19 STX、N-STX、GTX对小鼠骨肿瘤的扭体次数
实验结果，本发明使用的双胍基氢化嘌呤环类化合物有明显的延长混合药物的痛阀时间，因而有显著提高抗癌药辅助药物止痛的效果。
本发明的研究结果证实，双胍基氢化嘌呤环类化合物有显著提高抗癌药药效和减少抗癌药的毒副作用的效果，这也说明本发明的这类化合物可以治疗肿瘤细胞对抗癌药的耐药性，也是本发明的一个技术特征。基于本发明公开的内容，微小的改进是本领域技术人员显而易见的，这些都包括在本发明范围内。
权利要求
1.具有通式(I)的双胍基嘌呤环类衍生物或其在药学上可使用的盐和酯在制备提高抗癌类药物药效和降低抗癌药副作用的新应用，
(I)固体状态下
其特征在于
通式(I)中包括有，R1＝R2＝R3＝H R4＝OCONH2 石房蛤毒素(STX)，或
R1＝OH，R2＝R3＝H R4＝OCONH2 新石房蛤毒素(N-STX，
R1＝OH，R2＝H R4＝OCONH2 R3＝OSO3赤藻毒素(GTX1)，
R1＝OH，R3＝H R4＝OCONH2 R2＝OSO3赤藻毒素(GTX4)，或
R1＝R2＝H R4＝OCONH2R3＝OSO3 赤藻毒素(GTX2)，
R1＝R3＝H R4＝OCONH2R2＝OSO3 赤藻毒素(GTX3)，或
R1选自H；OH；卤素；C1-C5烷氧基；C1-C5卤代烷氧基；C3-C6环烷氧基；C3-C6
环烷基；C2-C6链烯基；C2-C6链炔基；C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基或C5-C10芳基；氨基；C1-C6烷氨基；酰基；C1-C6烷酰基；R2＝R3＝OH；R4＝OCONH2或OCONHSO3或OH。或
R1＝H，或OH时，R2选自OH；CH2OH；C1-C5烷羟基；卤素；C1-C5烷氧基；C1-C5卤代烷氧基；C3-C6环烷氧基；C3-C6环烷基；C2-C6链烯基；C2-C6链炔基；C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基或C5-C10芳基；氨基；C1-C6烷氨基；酰基；C1-C6烷酰基；R3＝OH；R4＝OCONH2或OCONHSO3或OH。或
R1＝H，或OH；R2＝CH2OH或OH时，R3选自H；OH；C1-C5烷羟基；卤素；C1-C5烷氧基；C1-C5卤代烷氧基；C3-C6环烷氧基；C3-C6环烷基；C2-C6链烯基；C2-C6链炔基；C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基或C5-C10芳基；氨基；C1-C6烷氨基；酰基；C1-C6烷酰基；R4＝OCONH2或OCONHSO3或OH。或
R1＝H，或OH时，R2＝H或OSO3或OH；R3＝OH或H或OSO3时；R4选自H；OH；C1-C5烷羟基；卤素；C1-C5烷氧基；C1-C5卤代烷氧基；C3-C6环烷氧基；C3-C6环烷基；C2-C6链烯基；C2-C6链炔基；C5-C10芳基部分和C1-C6烷基部分的芳烷基或C5-C10芳基；氨基；C1-C6烷氨基；酰基；C1-C6烷酰基；CONH-SO3；对羟苯甲本酰基；其中选择一类或几类。
2.具有通式(II)和(III)的双胍基嘌呤环类衍生物或其在药学上可使用的盐和酯在制备提高抗癌类药物药效和降低抗癌药副作用的新应用，
(II) 液体壮态下 (III)
其特征在于
通式(II)和(III)中还包括有，
R1＝R2＝R3＝H，R4＝OCONH2， 石房蛤毒素(STX)，
R1＝R2＝R3＝H，R4＝OCONHOH，氨基甲磺酸N-羟基石房蛤毒素(N-hySTX)，
R1＝R2＝R3＝R4＝H， 脱氧石房蛤毒素(doSTX)，
R1＝OH，R2＝R3＝H R4＝OCONH2， 新石房蛤毒素(N-STX)，
R1＝OH，R2＝R3＝H R4＝OCONHOH，氨基甲磺酸N-羟基新石房蛤毒素
(N-hyN-STX)，
R1＝OH，R2＝H，R4＝OCONH2，R3＝OSO3，赤藻毒素(GTX1)，
R1＝OH，R3＝H，R4＝OCONH2，R2＝OSO3，赤藻毒素(GTX4)，
R1＝R2＝H，R4＝OCONH2，R3＝OSO3，赤藻毒素(GTX2)，
R1＝R3＝H，R4＝OCONH2，R2＝OSO3，赤藻毒素(GTX3)，
R1＝R2＝R3＝H，R4＝OCONHSO3，赤藻毒素(GTX5)，
R1＝OH，R2＝R3＝H，R4＝OCONHSO3，赤藻毒素(GTX6)，
R1＝R2＝R3＝H，R4＝OH，脱氨甲酰石房蛤毒素(deSTX)，
R2＝R3＝H，R1＝R4＝OH，脱氨甲酰新石房蛤毒素(deN-STX)，
R1＝R4＝OH，R2＝OSO3，R3＝H， 脱氨甲酰赤藻毒素(deGTX1)，
R1＝R3＝H，R2＝OSO3，R4＝OH， 脱氨甲酰赤藻毒素(deGTX2)，
R2＝OSO3，R1＝R3＝R4＝H， 脱氧赤藻毒素(doGTX2)，
R1＝R2＝H，R3＝OSO3，R4＝OH， 脱氨甲酰赤藻毒素(deGTX3)，
R1＝R2＝R4＝H，R3＝OSO3， 脱氧赤藻毒素(doGTX3)，
R2＝H，R3＝OSO3，R1＝R4＝OH， 脱氨甲酰赤藻毒素(deGTX4)，其中选择一种或几种。
3.权利要求1、2所述的(I)、(II)和(III)，其特征在于，它们与无机酸，盐
酸、氢溴酸、氢碘酸、次氯酸、硫酸、亚硫酸、硫代硫酸、磷酸、氢磷酸、二
氢磷酸、碳酸、次碳酸、硝酸、亚硝酸和有机酸，醋酸、草酸、枸橼酸、苹果
酸、酒石酸、马来酸、琥珀酸、半琥珀酸、水杨酸、甲磺酸、烷基苯磺酸，马
尿酸等形成的盐类或酯类同样具有提高抗癌类药物药效和降低抗癌药副作用的效果。
4.权利要求1-3所述的化合物，其特征在于所述双胍基嘌呤环类衍生物或其在
药学上可使用的盐和酯类化合物，选取其中的一类或几类和其中的一种或几种
与抗癌类药物联合应用。
5.权利要求1-4所述新应用，其特征在于，在使用双胍基嘌呤环类衍生物或其在药学上可使用的盐和酯类化合物，给予抗癌药剂之前、给予抗癌药剂期间或给予抗癌药剂之后。
6.权利要求1-4所述新应用，其特征在于，制备药品方式可与药物学上使用的载体、赋形剂或其他添加剂，制成注射剂，皮下、肌内或静脉注射用剂和口服制剂(油剂、含片)、皮肤贴敷、泵渗透、肛门栓剂、喷雾剂。可以是单独使用双胍基嘌呤环类衍生物的盐和酯类化合物，选取其中一类或几类和一种或几种或与抗癌药混合制备成组合物。
7.权利要求1-5所述的应用，其特征在于提高抗癌类药物药效和降低抗癌药毒副作用的用药剂量，双胍基嘌呤环类衍生物或其在药学上可使用的盐和酯类化合物的治疗剂量为0.01-50μg/Kg，抗癌药剂量保持原剂量。
8.权利要求1-5所述的应用，其特征在于使用双胍基嘌呤环类衍生物或其在药学上可使用的盐和酯类化合物的一种或几种的原料含量为80-110％，制剂含量为90-120％。
9.权利要求1-8所述的新应用，其特征在于，所指的抗癌药是目前临床上常用的各种抗癌药(1)与核糖核酸药类抗癌药物，如氟尿苷(floxuridine)，氟尿嘧啶(fluorouracil)，卡莫氟(carmofur)，去氧氟尿苷(doxifluridine)，替加氟-尿嘧啶(tegafur-uracil)，卡培他滨(capecitabine)，盐酸吉西他滨(gemcitabine hydrochloride)，巯嘌呤(mercaptopurine)，羟基脲(hydroxycarbamide)，阿糖胞苷(cytarabine)，甲氨蝶呤(methotrexate)，氟达拉滨(fludarabine)，雷替曲塞(raltitrexed)，培美曲塞(pemetrexed)，氯法拉滨(clofarabine)，氯氧喹(chloroxoquinoline)。(2)与调节体内激素平衡类抗癌药物，氨鲁米特(aminoglutethimide)，福美坦(formestane)，依西美坦(exemestane)，阿那曲唑(anastrozole)，来曲唑(letrozole)，枸橼酸他莫昔芬(tamoxifen citrate)。(3)与干扰转录过程和阻止RNA合成药物，多柔比星(doxorubicin)，阿柔比星(aciarubicin)，盐酸表柔比星(epirubicin hydrochloride)，伊达比星(idarubicin)，吡柔比星(pirarubicin)，米托蒽醌(mitoxantrone)。柔红霉素(daunorubicin)，安丫啶(amsacrine)，匹克生琼(pixantrone)，(4)与抑制蛋白质合成类的药物，门冬酢酰胺酶(asparaginase)，培门冬酶(pegaspargase)，高三尖酯碱(homoharringtonine)，硫酸长春碱(vinblastine sulfate)，硫酸长春新碱(vincristine sulfate)，硫酸长春地辛(vindesine sulfate)，紫杉醇(paclitaxel)，多西他塞(docetaxel)，蛋白结合紫杉醇(paclitaxelprotein-bound)。(5)与拓扑异构酶抑制类药物，伊立替康(irinotecan)，羟基喜树碱(hydroxycamptothecin)，盐酸拓扑替康(topotecan hydrochloride)，喷司他丁(pentostatin)，依托泊苷(etoposide)，替尼泊苷(teniposide)。(6)与抗信号转导药，吉非替尼(gefitinib)，甲磺酸伊马替尼(imatinibmesylate)，索拉非尼(sorafenib)。(7)与烷化剂类，氮芥(chlormethine)，美法仑(melphalan)，环磷酰胺(cyclophosphamide)，异环酰胺(ifosfamide)，雌莫司汀磷酸钠(estramustine phosphate sodium)，卡莫司汀(carmustine)，洛莫司汀(lomustine)，尼莫司汀(nimustine)，福莫司汀(fotemustine)，司莫司汀(semustine)，塞替派(thiotepa)，白消安(busulfan)，达卡巴嗪(dacarbazine)，替莫唑胺(temozolomidef)。(8)与破坏DNA的抗生素类和铂类药物，博来霉素(bleomycin)，平阳霉素(bleomycin A5)，丝裂霉素(mitomycin)，顺铂(cisplatin)，卡铂(carboplatin)，洛铂(lobaplatin)，奥沙利铂(oxaliplatin)，奈达铂(nedaplatin)。(9)与抗肿瘤抗体类药物，利妥昔单抗(rituximab)，曲妥珠单抗(trastuzumab)，波替单抗(bortezomib)，西妥普单抗(cetuximab)，贝伐单抗(bevacizumab)，替伊莫单抗(ibritumomabtiuxetan)，丙卡巴肼(procarbazine)，三氧化二砷(arsenic trioxide)，六甲蜜胺(altretamine)，地西他滨(decitabinef)，奈拉滨(nelarabine)，贝沙罗汀(bexarotene)，米替福新(mitefosine)，氟维司群(fulvestrant)。(10)与抗肿瘤的辅助用药，美司纳(mesna)，盐酸昂丹司琼(ondansetronhydrochloride)，盐酸格拉司琼(granisetron hydrochloride)，盐酸雷莫司琼(ramosetron hydrochloride)，盐酸托烷司琼(tropisetronhydrochloride)，阿瑞吡坦(aprepitant)，阿立必利(alizapride)，帕洛诺司琼(palonosetron)，香茹多糖(lentinan)，右雷佐生(dexrazoxxane)，帕米磷酸二钠(pamidronate disodium)，氯屈磷酸二钠(clodronatedisodium)，伊班磷酸(ibandronic acid)，唑来磷酸(zoledronic acid)，阿扎司琼(azasetron)，乙丙昔罗(efaproxiral)，帕立非明(palifermin)。
全文摘要
本发明涉及到使用双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐和酯在提高抗癌类药物药效和降低抗癌药副作用的新应用。本发明的技术特征是，使用双胍基嘌呤环类衍生物及其药用盐和酯与抗癌药混配使用可以显著提高抗癌药的药效和减少抗癌药原有的毒副作用，其给予抗癌药剂之前、给予抗癌药剂期间或给予抗癌药剂之后，都有相同的效果。
文档编号A61P35/00GK101513408SQ20081000721
公开日2009年8月26日 申请日期2008年2月19日 优先权日2008年2月19日
发明者平 熊, 邱芳龙 申请人:平 熊, 邱芳龙