专利名称：土党参多糖在制备药物和保健食品中的应用的制作方法
技术领域：
本发明属于医药、保健开发技术领域，涉及中草药土党参的医药新用途，具体的说 就是土党参多糖在制备药物和保健食品中的应用。
背景技术：
手术是一把“双韧剑”，在治疗的同时，也会对机体产生一定创伤，从而引起一系列 内分泌及代谢的改变，导致消耗增加，还会引起出血、疼痛、水肿、便秘、感染等系列并发症。 术后可能因为微栓塞、麻药、低氧、低血、低灌注、系统炎症反应引起神经元损害，神经递质 失调，神经元可塑性受抑，进而导致术后认知功能障碍，精神行为障碍以及由于焦虑、恐惧、 欣快感和感情淡漠引起的睡眠周期障碍，增加患者住院时间和医疗费用，并导致患者社会 活动能力减退，严重影响生活质量。多糖是许多中药的活性成分之一，也是食品的重要营养成分，在生物体内作为能 量物质，存在于一切细胞膜结构中，参与细胞的各种生理活动。近年来，人们发现中药多糖 具有提高免疫力，抗病毒、细菌感染疗效、降低伤口处感染的几率，防止由此诱发的伤口发 炎、反复破裂等问题；促进伤口细胞的再生，可以帮助加快伤口愈合，缓解机体对于疼痛的 敏感性，能够降低疼痛给病人带来的痛苦。多糖容易吸收，在补充营养的同时，不会给身体 增加任何负担，同时还具有增强胃肠道功能的作用。中药多糖无毒副作用，是一类有很大开 发潜力的免疫调节剂。土党参为桔梗科植物金钱豹Campanumoea javanica Bi.的根，在民间习用药食资 源，具有健脾益气，补虚润肺，通乳止咳，通血等功效，主治气虚乏力，肺虚咳嗽，脾虚泄泻， 产后体虚，病后或手术后体虚、产后流血不止，神经衰弱等症。常被用来炖鸡、炖瘦肉、煎水 等。我们课题组在开展民族药中具有神经营养作用的物质研究时，从众多植物中筛选出黔 产药食兼用植物土党参，提取制备得到土党参多糖，于2005年申请国家专利《土党参多糖、 衍生物及其制备方法和应用》，已获国家专利授权，专利号ZL200510200024.2。为了更好、 更快的开发NGF样土党参多糖，我们开展了土党参多糖作为促进术后恢复的应用研究。
发明内容
本发明的目的是对专利《土党参多糖、衍生物及其制备方法和应用》(专利号 ZL200510200024. 2)所制备的粗多糖和纯多糖的应用进一步研究，特别是在制备药物和保 健食品中的应用。为实现上述目的，本发明对土党参多糖的应用开展了以下研究1、药物急性毒性试验及给药剂量研究；2、药物改善认知功能障碍功能性评价；3、药物对低血低氧灌注脑损伤的预防作用；4、药物对低血低氧灌注脑损伤的治疗作用；5、药物抗疲劳功能性评价；
6、药物耐缺氧功能性评价7、药物促进消化吸收功能性评价；8、药物造血功能功能性评价；9、药物增强免疫功能性评价；10、药物促进创伤愈合作用；11、药物抗肿瘤以及化疗后增效减毒功效。根据上述研究发现1、土党参多糖无任何毒副作用，经小鼠急性毒性实验表明，在灌服3. 75g/kg剂量 (为成人用量的185倍)后未见死亡。2、土党参多糖具有保健作用，研究证明土党参多糖具有促进消化吸收、抗疲劳、耐 缺氧、提高免疫力、增强造血功能和改善认知功能障碍的作用，可以广泛用于制备对于代谢 下降、体弱易病、胃肠功能减退、食欲不振、免疫力低下方面有保健作用的保健食品。3、土党参多糖具有促进创伤修复的作用，能促进创伤愈合、或由于创伤造成的机 体功能降低，如认知功能障碍、低血低氧灌注损伤，红细胞、白细胞降低，外周血清总蛋白 低、食欲不振，精神不好方面功能的恢复，可以用于制备促进术后恢复的药物及药物制剂。4、土党参多糖具有抗肿瘤以及肿瘤化疗后增效减毒的作用，可以用于制备抗肿瘤 以及肿瘤化疗后增效减毒的药物及药物制剂。本发明土党参多糖在制备药物和保健食品中的应用，在于制备各种内外科手术 后、产科手术后、肿瘤化疗期间、烧烫伤医疗期间促进功能恢复的药物及药物制剂，以及制 备对于代谢下降、体弱易病、胃肠功能减退、食欲不振、免疫力低下方面有保健作用的保健 食品或保健食品添加剂。。上述药物制剂是以土党参多糖为原料，或以土党参多糖为原料接受蛋白质、维生 素、脂肪酸为辅料加工而成的任何一种药剂学上所述的剂型。上述促进功能恢复的药物为促进创伤愈合、或由于创伤造成的机体功能降低，如 认知功能障碍、低血低氧灌注损伤，红细胞、白细胞降低，外周血清总蛋白低、食欲不振，精 神不好方面功能的恢复的药物或药物制剂。上述肿瘤化疗期间促进功能恢复的药物及药物制剂，是指抗肿瘤以及肿瘤化疗期 间增效减毒的药物及药物制剂。
图1是小鼠学习记忆获得障碍模型成绩(跳台法)。图2是东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍实验结果(Y水迷宫法)。图3是给药10天后小鼠跳台实验记忆潜伏期。图4是给药20天后小鼠跳台实验记忆潜伏期成绩。图5是给药30天后小鼠跳台实验记忆潜伏期成绩。图6是各组小鼠海马区HE切片图(HE X 200)。图7是各组小鼠海马区NGF免疫组化切片图(免疫组化X 200)。图8是各组小鼠海马CAl区凋亡细胞图(TUNEL法，X 400)。图9是各组小鼠术后6h，24h，3d，7d全血中红细胞数目。
图10是各组小鼠术后611，2411，3(1，7(1，15(1全血中白细胞数目。图11是各组小鼠术后611，2411，3(1，7(1，15(1全血中血红蛋白含量。图12是各组小鼠术后6h，24h，3 d，7d外周血血清中白蛋白含量。图13是各组小鼠术后6h，24h，3d，7d外周血血清中总蛋白含量。图中标记CJP1-M. 土党参多糖纯品CJP-I中剂量组(150mg/kg)，CJP1-H. 土党参 多糖纯品CJP-I高剂量组(300mg/kg)，CJP-L. 土党参粗多糖低剂量组(75mg/kg)，CJP-M. 土党参粗多糖中剂量组(150mg/kg)，CJP-H. 土党参粗多糖高剂量组(300mg/kg)，YX.中药 阳性对照银杏叶提取物组(100mg/kg)，NMDP.西药阳性对照尼莫地平组(100mg/kg)。下面结合具体实施方式
对本发明作进一步说明，并非对本发明的限定，依照本领 域公知的现有技术，本发明的实施方式并不限于此，因此凡依照本公开内容所作出的本领 域的等同替换，均属于本发明的保护范围。
具体实施例方式实施一、土党参多糖作为制备促进术后恢复的用途土党参药材经水提，醇沉，制备成土党参粗多糖；进一步柱层析纯化，制备土党参 多糖纯品CJP-1。再采用常规技术以土党参多糖为原料制备成片剂、胶囊剂、口服液等剂型。实施二、给药剂量的研究实验部分参考《中药药理研究方法学》，急性毒性实验表明，小鼠在灌服土党参多 糖3. 75g/kg剂量(为成人用量的185倍)后未见死亡，表明土党参多糖安全、无毒副作用。实施三、药物改善改善认知功能障碍作用研究土党参多糖对化学品致认知功能障碍有保护作用，作为术后产品具有较理想的预 防因麻醉、心理因素等导致的记忆功能障碍。实施内容如下1、给药及分组KM小鼠(体重20士2g，SPF级，重庆医科大学实验动物中心提供，许可证号 SCXK (渝)2007-001)，20 士 2 °C下饲养。经过跳台、Y水迷宫筛选98只合格小鼠，雄性各 半，随机分7组，空白组、模型组、脑复康对照(500mg/kg)、土党参粗多糖高剂量(300mg/ kg, CJP-H)、土党参粗多糖低剂量(150mg/kg，CJP-M)、土党参多糖纯品高剂量(300mg/kg， CJP1-H)、土党参多糖纯品低剂量(150mg/kg，CJP1-M)。2、方法及结果2. 1东莨菪碱致记忆获得障碍动物模型连续给药7d，末次给药30min后，空白组注 射生理盐水，其他组腹腔注射氢溴酸东莨菪碱3mg/kg，IOmin后进行跳台训练，记录学习成 绩，次日测试记忆成绩；第9、IOd进行Y水迷宫训练测试，按上述给药方案注射氢溴酸东莨 菪碱，记录第IOd成绩。结果显示，模型组在给予东莨菪碱后学习潜伏期明显增长，与空白组具有极显著 差异。与模型组相比，药物组能改善东莨菪碱致记忆障碍，在实验剂量范围显示一定量效关 系，与阳性对照脑复康无显著差异(附图1)。小鼠Y水迷宫游泳学习记忆成绩结果表明，模型组小鼠Y水迷宫游泳的潜伏期大 于空白组、药物组、对照组，而药物组之间以及与空白组间没有统计差异，在给定剂量范围 内显示出较好的量效关系，药物组与阳性对照脑复康组无显著差异(附图2)。
2. 2三氯化铝致动物学习记忆障碍模型连续给药7天，于第8天空白组皮下注射等 容量0. 9%氯化钠溶液，其余各组每天皮下注射1次氯化铝120mg · kg—1，连续注射3d，进行 避暗法测试，记录24h后小鼠进人暗箱的潜伏期，5min内受到电击的次数。结果见表1，与空白组相比，模型组小鼠错误次数明显增多(P < 0. 01)，说明铝离 子在体内大量蓄积使小鼠的学习记忆能力明显下降。与模型组比较，药物组小鼠错误次数 明显减少，潜伏期增加。提示，药物能够改善由三氯化铝所致的小鼠学习记忆功能衰退。表1是不同给药期记忆再现缺失模型成绩(又士s，η = 9-14)
μ*Sm记忆成绩
Mg^g 只_潜伏期(S)_错误次数 ~空白组—10244.90±85.35**0.25士 0.75**
模型组—14105.81±35.414.82±2.92CJPl-M 150 12 225.17±108.49** 1.40±1.77** CJPl-H 300 10 244.04±78.32** 1.00±1.22** CJP-M 150 12 171.16±97.46 2.00±2.33* CJP-H 300 10 183.26±74.08* 1.36±1.91** 脑复康_100_9_214.59±94.70**_0.55 土 1.01**注与模型组比，*ρ< 0. 05，**ρ < 0.012. 3亚硝酸钠致记忆巩固障碍动物模型小鼠连续给药7d，末次给药30min后，进行 跳台法训练。训练后，空白组小鼠颈前部皮下注射生理盐水，其它组小鼠颈前部皮下注射 120mg/kg亚硝酸钠，24h后测试记忆成绩。亚硝酸钠可以造成脑部缺氧从而破坏记忆保持，导致记忆巩固障碍。从表2，可以 看出，在本实验剂量范围内，与模型组相比，空白组、药物组、对照组(脑复康组)记忆成绩、 错误次数有显著差异。模型组潜伏期显著缩短，在5min内错误次数显著增加。 表2是各组小鼠记忆巩固障碍模型成绩(又士S，η = 9-14)
"“~ S 记忆成绩
』别Mg/kg 只_潜伏期(S)_错误次数
~空白组— 10213.77±122.49**0.20±0.63**模型组一 14 70.11±146.66 4·00±5.08 CJPl-M150 12 202.41±105.95** 0.25±0.45** CJPl-H300 10 206.82±103.25** 0.30±0.48** CJP-M150 12 177.65±93.47* 0.45±0.82** CJP-H_300_10_213.02±116.31**_0.20 士 0.42**脑复康1009205.34±103.87**0.55±0.88**注与模型组比，*ρ< 0. 05，**ρ < 0.012. 440%乙醇致记忆再现缺失动物模型小鼠连续给药7d，末次给药30min后，进行 暗箱法训练。24h后测试前，对照组灌服生理盐水，其它组灌服40 %乙醇0. lmL/10g, 30min 后测试记忆能力。暗暗法显示(表3)，与模型组相比，空白组、药物组、对照组记忆潜伏期均显著增力口，不同剂量药物组呈现量效关系。而与空白组相比，药物组、对照组，小鼠潜伏期和5min 内错误次数无统计学差异。表3是各组小鼠记忆再现缺失模型成绩(妊S，η = 9-14)
权利要求
土党参多糖在制备药物和保健食品中的应用，其特征是在于制备各种内外科手术后、产科手术后、肿瘤化疗期间、烧烫伤医疗期间促进功能恢复的药物及药物制剂，以及制备对于代谢下降、体弱易病、胃肠功能减退、食欲不振、免疫力低下方面有保健作用的保健食品或保健食品添加剂。
2.根据权利要求1所述的土党参多糖在制备药物和保健食品中的应用，其特征在于所 述药物制剂是以土党参多糖为原料，或以土党参多糖为原料接受蛋白质、维生素、脂肪酸为 辅料加工而成的任何一种药剂学上所述的剂型。
3.根据权利要求1所述的土党参多糖在制备药物和保健食品中的应用，其特征是所述 促进功能恢复的药物为促进创伤愈合、或由于创伤造成的机体功能降低，如认知功能障碍、 低血低氧灌注损伤，红细胞、白细胞降低，外周血清总蛋白低、食欲不振，精神不好方面功能 的恢复的药物或药物制剂。
4.根据权利要求1所述的土党参多糖在制备药物和保健食品中的应用，其特征是制备 用于抗肿瘤以及化疗后增效减毒的药物及药物制剂。
全文摘要
本发明土党参多糖在制备药物和保健食品中的应用涉及医药、保健技术领域，其特征在于制备各种内外科手术后、产科手术后、肿瘤化疗期间、烧烫伤医疗期间促进功能恢复的药物及药物制剂，以及制备对于代谢下降、体弱易病、胃肠功能减退、食欲不振、免疫力低下方面有保健作用的保健食品或保健食品添加剂。具有高效无毒，安全性高的特点。
文档编号A61P39/02GK101966199SQ20101029277
公开日2011年2月9日 申请日期2010年9月27日 优先权日2010年9月27日
发明者吴兰芳, 张振东, 彭梅, 景永帅, 杨娟, 杨小生 申请人:贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室