专利名称：布雷菲德菌素a的羟基磷酸氨基酸酯类衍生物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种真菌代谢产物，尤其是涉及一种布雷菲德菌素A的羟基磷酸氨基酸酯类衍生物及其制备方法和应用。
背景技术：
( 一)、(+) -Brefeldin A 的研究概括布雷菲徳菌素A(英文名(+)-Brefeldin A,简称BFA，中文名称为布雷菲德 菌素A，也称作斜卧菌素或蓝菌素或壳二孢素)，是一种大环内酯类真菌代谢产物，最早由Singleton等在1958年从Penicilliumdecumben中分离得到。虽然BFA的平面结构早已被测定，但是其绝对构型直到1971年才由Weber等用X射线晶体衍射法确立，其结构式如下
权利要求
1.布雷菲德菌素A的羟基磷酸氨基酸酯类衍生物，其特征在于， 所述布雷菲德菌素A的羟基磷酸氨基酸酯类衍生物的结构式为
2.如权利要求I所述的布雷菲德菌素A的羟基磷酸氨基酸酯类衍生物，其特征在于， 所述布雷菲德菌素A的羟基磷酸氨基酸酯类衍生物包括(+)-Brefeldin A-4，7-二羟基磷酸氨基酸酯、(+)-Brefeldin A-4-轻基磷酸氨基酸酯和(+)-Brefeldin A-7-轻基磷酸氨基酸酯； 所述(+)-BrefeIdinA-4, 7-二轻基磷酸氨基酸酯的结构式为
3.如权利要求2所述的(+)-BrefeldinA_4, 7-二轻基磷酸氨基酸酯的合成方法,其特征在于包括以下步骤 a)冰水浴，惰性气体保护下，将(+)-Brefeldin A、磷酰化氨基酸和4_ 二甲氨基吡啶溶解于第一有机溶剂中，所述(+)-Brefeldin A、磷酰化氨基酸和4-二甲氨基吡啶的摩尔配比 I : 4 : 0. I ; b)在冰浴条件下，将二环己基碳二亚胺的有机溶剂加入步骤a)所得的混合物中，反应后，得4，7- 二羟基磷酸氨基酸酯_(+)-Brefeldin A ； c)步骤b)反应后，过滤掉不溶物，减压，浓缩，除去有机溶剂，产物质量用5%的第二有机溶剂溶解，进行硅胶柱层析分离，得到4，7- 二羟基磷酸氨基酸酯_(+)-Brefeldin A。
4.如权利要求3所述的(+)-BrefeldinA_4, 7-二轻基磷酸氨基酸酯的合成方法,其特征在于在步骤a)中，所述第一有机溶剂选自二氯甲烷、DMF中的一种；所述磷酰化氨基酸选自磷酰化甘氨酸、磷酰化丙氨酸、磷酰化缬氨酸、磷酰化苯丙氨酸中的一种； 在步骤b)中，所述二环己基碳二亚胺的有机溶剂可选自二氯甲烷、DMF中的一种； 在步骤c)中，所述第二有机溶剂可选自二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、氯仿中的一种。
5.如权利要求2所述的(+)-BrefeldinA-4-轻基磷酸氨基酸酯的合成方法,其特征在于包括以下步骤 a)将(+)_BrefeldinA、咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷在第一有机溶剂中反应后，再加入第二有机溶剂后，洗涤，有机相减压浓缩，剩余物柱层析分离得到7-0-叔丁基二甲基硅(+)-Brefeldin A ； b)在惰性气体保护下，将步骤a)得到的7-0-叔丁基二甲基娃(+)-Brefeldin A、磷酰化氨基酸和4-二甲氨基吡啶在第二有机溶剂中形成混合物，冰浴下，加入二环己基碳二亚胺的第三有机溶剂，反应后，过滤除掉不溶物，减压浓缩，柱层析分离得到纯的7号位叔丁基二甲基硅保护的(+)-Brefeldin A_4_羟基磷酸氨基酸酯； c)将7-0-叔丁基二甲基硅-(+)-BrefeldinA-4-0-磷酸氨基酸酯溶解在第四有机溶剂中，再加入碘单质，反应后，再加入硫代硫酸钠，直到溶液变为澄清，然后加入第五有机溶齐IJ，再洗涤，有机相减压浓缩，剩余物柱层析分离得到(+)-Brefeldin A-4-羟基磷酸氨基酸酯。
6.如权利要求5所述的(+)-BrefeldinA-4-轻基磷酸氨基酸酯的合成方法,其特征在于在步骤a)中，所述(+)-Brefeldin A、咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷的质量配比为·280 126 204 165 ;所述的第一有机溶剂可选自DMF、DMS0中的一种；所述反应可采用薄层层析板跟踪监测反应，所述的第二有机溶剂加入量按(+)_Brefeldin A质量10mg/mL,所述第二有机溶剂为乙酸乙酯，二氯甲烷，所述洗涤可采用加入水按(+)-Brefeldin A质量·10mg/mL,洗 3 次； 在步骤b)中，所述在惰性气体可采用気气,所述(+)-Brefeldin A、磷酰化氨基酸和·4-二甲氨基吡啶的摩尔配比可为I : 2 0. I ;所述第二有机溶剂可选自乙酸乙酯、二氯甲烧中的一种；所述的第二有机溶剂加入量按(+)_Brefeldin A质量20mg/mL所述第三有机溶剂的加入量按(+)_Brefeldin A质量10mg/mL,所述第三有机溶剂可选自二氯甲烧、氯仿、DMF中的一种；所述反应可采用薄层层析板跟踪监测反应；所述磷酰化氨基酸可选自磷酰化甘氨酸、磷酰化丙氨酸、磷酰化缬氨酸、磷酰化苯丙氨酸中的一种； 在步骤c)中，所述7-0-叔丁基二甲基硅-(+)-Brefeldin A-4-羟基磷酸氨基酸酯、碘单质、硫代硫酸钠、第四有机溶剂、第五有机溶剂的配比可为(100 300)mg (30 ·100)mg : (10 60)mg : (3 5)mL : (10 30)mL ;所述第四有机溶剂可选自甲醇；所述第五有机溶剂可选自乙酸乙酯、二氯甲烷中的一种；所述洗涤可采用的水洗涤加入水按(+) -BrefeldinA 质量 10mg/mL,洗 3 次。
7.如权利要求2所述的(+)-BrefeldinA-7-轻基磷酸氨基酸酯的合成方法,其特征在于包括以下步骤 a)将(+)_BrefeldinA、咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷在第一有机溶剂中反应后，再加入第二有机溶剂后，洗涤，有机相减压浓缩，剩余物柱层析分离得到形成4，7-0-叔丁基二甲基娃(+) -Brefeldin A ； b)将4，7-双叔丁基二甲基硅-(+)-Brefeldin A溶于THF中，加入醋酸及水，反应后将反应液减压浓缩，加入第三有机溶剂后，洗涤，有机相减压浓缩，剩余物柱层析分离得到4-0-叔丁基二甲基娃(+) -Brefeldin A ； c)在惰性气体保护下，将4号位TBS保护的(+)-Brefeldin A、磷酰化氨基酸和4- 二甲氨基吡啶在第四有机溶剂中形成混合物，冰浴下，再加入二环己基碳二亚胺的第四有机溶剂，反应后，过滤除掉不溶物，减压浓缩，柱层析分离得到4号位叔丁基二甲基硅保护的(+) -Brefeldin A-7-轻基磷酸氨基酸酯； d)将4号位TBS保护的(+)-BrefeldinA-7-羟基磷酸氨基酸酯溶解在第五有机溶剂中，再加入碘，反应后，冷却至室温，再加入硫代硫酸钠，直到溶液变为澄清，然后加入水洗涤，有机相减压浓缩，剩余物柱层析分离得到(+)-Brefeldin A-7-羟基磷酸氨基酸酯。
8.如权利要求7所述的(+)-BrefeldinA_7_轻基磷酸氨基酸酯的合成方法,其特征在于在步骤a)中，所述(+)-Brefeldin A、咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷的摩尔配比为1:3: 6;所述第一有机溶剂可选自DMF、DMSO中的一种；所述第二有机溶剂可选自乙酸乙酯、二氯甲烷中的一种；所述反应可采用薄层层析板跟踪监测反应，所述的第二有机溶剂加入量按(+)-Brefeldin A质量10mg/mL，所述第二有机溶剂为乙酸乙酯，二氯甲烷，所述洗漆可采用加入水按(+)-Brefeldin A质量10mg/mL,洗3次； 在步骤b)中，所述4，7号位TBS双保护的(+)-Brefeldin A、四氢呋喃、醋酸、水、第三有机溶剂的配比ImL: lmL:2mL ;所述反应的条件可为在5(T60°C搅拌反应24h ;所述第三有机溶剂可选自乙酸乙酯、二氯甲烷中的一种；所述洗涤可依次用水、碳酸氢钠，和水洗涤； 在步骤c)中，所述惰性气体可采用氩气、氮气；所述4号位叔丁基二甲基硅保护的(+)-Brefeldin A、磷酰化氨基酸和4-二甲氨基吡啶的摩尔配比可为I : 2 0. I ;所述第四有机溶剂可选自二氯甲烷、氯仿、DMF中的一种；所述反应可采用薄层层析板跟踪监测反应；所述磷酰化氨基酸可选自磷酰化甘氨酸、磷酰化丙氨酸、磷酰化缬氨酸、磷酰化苯丙氨酸中的一种； 在步骤d)中,所述4号位叔丁基二甲基娃保护的(+)-Brefeldin A_7_轻基磷酸氨基酸酯、碘、硫代硫酸钠、第五有机溶剂、水的配比可为(100 300)mg (30 100)mg (10 60)mg (3 5)mL (10 30)mL ;所述反应的条件可为50 80°C下反应10 30h ;所述洗涤可采用与原料10%配比水洗涤3次；所述第五有机溶剂可选自乙酸乙酯、二氯甲烷中的一种。
9.如权利要求I所述的布雷菲德菌素A的羟基磷酸氨基酸酯类衍生物在制备抗癌药品中的应用。
全文摘要
布雷菲德菌素A的羟基磷酸氨基酸酯类衍生物及其制备方法和应用，涉及一种真菌代谢产物。所述衍生物包括(+)-Brefeldin A-4,7-二羟基磷酸氨基酸酯、(+)-Brefeldin A-4-羟基磷酸氨基酸酯和(+)-Brefeldin A-7-羟基磷酸氨基酸酯。合成了具有高度生物活性、较好溶解性及好的生物利用度的布雷菲德菌素A的羟基磷酸氨基酸酯类衍生物，简单、低成本。结构新颖、结构相对稳定，且对肿瘤细胞的增殖具有显著的抑制活性。相对原药(+)-BrefeldinA具有溶解性好，半衰期长等优点，布雷菲德菌素A的羟基磷酸氨基酸酯类衍生物可在制备抗癌药品中应用。
文档编号A61K31/665GK102731573SQ20121022210
公开日2012年10月17日 申请日期2012年6月28日 优先权日2012年6月28日
发明者唐果, 庄荣强, 方美娟, 程宏明, 赵玉芬 申请人:天津林美科技有限公司