专利名称：他米巴罗汀纳米脂质载体及其制备方法
技术领域：
本发明涉及他米巴罗汀纳米脂质载体及其制备方法，属于药物制剂领域。
背景技术：
他米巴罗汀(tamibarotene)，化学名 4_ [ (5，5，8，8_ 四甲基 _6，7_ 二氢萘 _2_ 基)氨基甲酰]苯甲酸，是日本新药株式会社(Nippon Shinyaku)开发的新型选择性维甲酸α受体促进剂，该药体外可成功地诱导早幼粒细胞白血病(promyelocytic leukemia, PML)细胞分化和成熟，制止PML增殖；在体内试验中，显示了抗肿瘤活性和较好的耐受性。另外他米巴罗汀导致急性早幼粒细胞白血病(Acute promyelocytic leukemia, APL)细胞分化和死亡的体外有效性约超过全反式维甲酸(ATRA)IO倍。他米巴罗汀于2005年6月在日本首次上市(商品名=Amnolake),临床主要用于APL复发或难治性病例的治疗。他米巴罗汀的
化学结构式如下所示
.COOH他米巴罗汀为白色结晶性粉末，易溶于四氢呋喃和二氯甲烷，在水中几乎不溶，在各种缓冲液中也难溶或基本不溶。由于其水溶性差，口服吸收差，生物利用度低，因而限制了其临床应用。目前他米巴罗汀主要有片剂和胶囊上市，但他米巴罗汀片的生物利用度较低(50%左右)，由于他米巴罗汀水溶性极差，目前没有注射剂问世，因此，改善难溶性药物的溶解度，促进药物的吸收，提高药物的生物利用度是药剂学领域亟待攻克的难题。新型纳米载体(如脂质体、纳米粒等)在解决上述问题方面显示出独特的优势增加药物吸收、控制药物释放、改变药物体内分布。文献报导lipid-based纳米载体,例如脂质体，固体脂质纳米粒(solid lipidnanopaticles, SLN)和纳米脂质载体(nanostructructured lipid carriers, NLC)等，能显著提高疏水性药物非口服给药的递送效率，然而，脂质体和SLN稳定性差，载药量低，限制了其应用。NLC是在SLN基础上发展而来的一种新型胶体给药系统，是在SLN处方基础上加入了液态脂质，造成脂质分子晶体缺陷，增加了晶体的混乱度，从而能够容纳更多的药物，同时也提高了系统的稳定性。因此，NLC不仅具有SLN的优点，如控制药物释放，改善难溶性药物的溶解性，生物相容性好且可生物降解等。还避免了 SLN和脂质体的药物包封率低、易于泄露的问题。因此，本发明将他米巴罗汀制备成纳米脂质载体，以期能达到改善其溶解性，延长在体内循环时间，改善吸收，提高生物利用度，改变药物在体内的分布的目的。
发明内容
针对上述现有技术，本发明提供了一种他米巴罗汀静脉注射给药的新型给药系统一他米巴罗汀纳米脂质载体，该给药系统具有毒性小、可生物降解、在血液中浓度较高、維持时间长等特点。本发明还提供了他米巴罗汀纳米脂质载体的制备方法。本发明是通过以下技术方案实现的一种他米巴罗汀纳米脂质载体，是由以下组分组成的
他米巴罗汀0.05 IO Wt % 固体脂质材料I 60 Wt %
液态脂质0.5 30 Wt %
脂溶性乳化剤I 10wt%
水溶性乳化剤0.05 10 wt%
冻干保护剂O或I 10 wt%
注射用水余M。所述固体脂质材料选自单硬脂酸甘油酷、甘油三酷、脂肪酸、蜡或固醇中的任ー种或两种以上的组合。所述甘油三酯包括三硬脂酸甘油酷、三棕榈酸甘油酷、三月桂酸甘油酷、三肉豆蘧酸甘油酯；所述脂肪酸包括硬脂酸、棕榈酸、癸酸、辛酸、二十ニ酸、豆蘧酸等；所述蜡包括鲸蜡醇十六酸酷、鲸蜡醇棕榈酸酯；所述固醇包括胆固醇、留体。优选的，所述固体脂质材料选自单硬脂酸甘油酷、硬脂酸、胆固醇或三棕榈酸甘油酯中的任ー种或两种以上的组合。所述液态脂质选自天然植物油、中链脂肪酸甘油酷、油酸、亚油酸、肉豆蘧酸异丙酷、维生素A、维生素E、维生素酯或鱼油中的任ー种或两种以上的组合。所述天然植物油包括大豆油、花生油、红花油、葵花籽油、橄榄油；所述中链脂肪酸甘油酯为链长在C8 Cltl之间的中链脂肪酸甘油酷。优选的，所述液态脂质选自油酸、大豆油或维生素E中的任ー种或两种以上的组合。所述脂溶性乳化剂选自磷脂、脂肪酸山梨坦或聚山梨酯中的任ー种或两种以上的组合；所述磷脂包括大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、卵磷脂、氢化卵磷脂；所述脂肪酸山梨坦包括Span60、Span80 ;所述聚山梨酯包括Tween60、Tween80。优选的,所述脂溶性乳化剂选自卵磷脂、大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂或TweenSO中的任ー种或两种以上的组合。所述水溶性乳化剂选自泊洛沙姆188 (F68)、泊洛沙姆182、聚氧こ烯脂肪酸酷、聚氧こ烯脂肪醇醚或十二烷基硫酸钠中的任ー种或两种以上的组合。优选的，所述水溶性乳化剂选自泊洛沙姆188 (F68)或泊洛沙姆182。进ー步地，为了适应静脉注射的要求，优选的乳化剂组成为大豆卵磷脂(脂溶性乳化剂)和F68 (水溶性乳化剤)。所述他米巴罗汀纳米脂质载体的制备方法为熔融-乳化-低温固化法，即将药物、固体脂质材料、液态脂质和脂溶性乳化剂溶于有机溶剤，高温加热熔融；将水溶性乳化剂溶于注射用水，并加热至相同温度；然后油相缓缓滴入水相，高温乳化；将制好的初乳低温固化，具体步骤如下(I)精密称取他米巴罗汀、固体脂质材料、液态脂质和脂溶性表面活性剤，超声使其溶于有机溶剂中，水浴加热至70 80°C形成油相，备用；(2)将水溶性乳化剂溶于适量注射用水中，水浴加热至70 80°C，作为水相，备用；(3)在转速为500 IOOOrpm的电磁搅拌的条件下，用微量注射泵将油相缓缓滴入水相，继续乳化30min 60min，并保持恒温搅拌，直至有机溶剂完全挥发，形成初乳；(4)将步骤(3)得到的初乳置入O 2°C的冰水浴，低温固化，以500 IOOOrpm的转速电磁搅拌30 80min (优选60min),制得外观为淡蓝色半透明的胶体混悬液，即为他米巴罗汀纳米脂质载体。进ー步地，还包括以下步骤(5)向步骤(4)中制得的他米巴罗汀纳米脂质载体中加I 10wt%的冻干保护剂，得他米巴罗汀纳米脂质载体冻干制剂，分装于5mL西林瓶中，置_80°C超低温冰箱预冻24h， 置于冷冻干燥机中，冻干48h，測定含水量应く O. 01%，取出加盖密封即可。所述步骤(I)中，有机溶剂选自无水こ醇、丙酮、氯仿、ニ氯甲烷或四氢呋喃中的任意ー种或任意两种以上的混合物。所述步骤(3)中，微量注射泵的滴加速度为10 50mL/h。所述步骤(5)中，所述冻干保护剂选自甘露醇、乳糖、葡萄糖、氯化钠或海藻糖中的任意ー种或任意两种以上的混合物。本发明所制备的他米巴罗汀纳米脂质载体粒径在100 200nm，供静脉注射使用，与ロ服剂型相比，可以减少给药剂量，在体内具备缓释特点，可延长药物在血液中的时间，提闻生物利用度。本发明的他米巴罗汀纳米脂质载体给药系统具有以下优点(I)本发明所用载体材料为脂质类，毒性低，可生物降解，生物相容性好，提高了机体耐受性；(2)该系统克服了固体脂质纳米粒的载药量低、药物易泄漏的缺点，使制剂可以稳定储存；通过冷冻干燥エ艺将所述纳米脂质载体制成冻干产品，进ー步提高了制剂的稳定性；(3)本发明的エ艺为熔融-乳化-低温固化法，制备过程简单，成熟，适于エ业化大
生产；(4)本发明所述制剂可用生理盐水或葡萄糖注射液进行稀释或分散，用于静脉注射给药，优选的技术方案(实施例I)中纳米粒粒度小(平均粒径S 200nm)，分布狭窄(PI含O. 3)，包封率高，有助于提高制剂的有效性和安全性。本发明具有以下有益效果①提供了ー种他米巴罗汀静脉注射给药的新型给药系统，即他米巴罗汀纳米脂质载体，该给药系统具有毒性小、可生物降解、在血液中浓度较高、維持时间长等特点。②采用熔融-乳化制备的他米巴罗汀纳米脂质载体可以控制药物释放，改变药物药动学特征；还可以在体循环中避开单核细胞巨噬系统(MPS)，从而达到被动靶向和改变药物在体内分布目的。③本发明制备的他米巴罗汀纳米脂质载体，可克服固体脂质纳米粒和脂质体中药物的泄漏及包封率低的缺点，从而提高了系统的稳定性。④本发明制备的他米巴罗汀纳米脂质载体，他米巴罗汀纳米脂质载体静脉注射给药，可降低给药剂量，減少给药次数，达到与上市制剂相同的治疗效果，从而有望提高患者的顺应性。
图I为他米巴罗汀纳米脂质载体透射电镜照片。图2 :他米巴罗汀纳米脂质载体粒径分布图。图3 :他米巴罗汀纳米脂质载体体外释放得累计释放百分率-时间曲线图，其中，A :他米巴罗汀纳米脂质载体冻干制剂；B :他米巴罗汀纳米脂质载体。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明。实施例I制备他米巴罗汀纳米脂质载体精密称取他米巴罗汀10mg、硬脂酸20mg、单硬脂酸甘油酯30mg、大豆卵磷脂50mg、油酸20mg，溶于5mL无水乙醇中，置75°C水浴加热至熔融，构成有机相；另外称取泊洛沙姆188200mg溶于20mL注射用水中，加热至相同温度，构成水相。将有机相在600r/min搅拌下用微量注射泵以15mL/h的速度缓缓注入水相，(75±2) 1恒温搅拌，使有机溶剂充分挥发，Ih后将所得初乳冰水浴中以600r/min搅拌lh，制得他米巴罗汀纳米脂质载体。所制得的纳米粒外观如图I所示，由图可知他米巴罗汀纳米脂质载体大小均匀，外观圆整。平均粒径为189nm，粒径分布如图2所示，ξ电位为_34mv，平均包封率为91%，载药量为9. 05%。向制得的他米巴罗汀纳米脂质载体中加3wt%的甘露醇，然后分装与5mL西林瓶中，置于_80°C低温冰箱预冻24h，置于冷冻干燥机中，冻干48h，取出加盖密封即可。他米巴罗汀纳米脂质载体冻干制剂的体外释放是通过以下方式实现的称取适量他米巴罗汀纳米脂质载体冻干制剂，采用正相动态膜透析法，以含3wt%Tween80的pH7. 4PBS作为释放介质，转速lOOrpm，温度为(37. 5±0. 5)°C。将装有2mL上述冻干制剂的混悬液的透析袋(截留分子量8000 14000)，置于释放介质中。分别于O. 17,0. 5,1,2,4,6,8,12,24,36,48h吸取释放介质O. 5mL,同时补入同温的释放介质,样品过滤后进样20 μ L进行高效液相分析。计算累积释放百分率，如图3-Α所示，由图可知，他米巴罗汀纳米脂质载体的体外释放呈双相，即前8h释放较快，然后释放比较缓慢。他米巴罗汀纳米脂质载体的体外释放是通过以下方式实现的同样采用动态膜透析法，精密吸取他米巴罗汀纳米脂质载体2mL置于截留分子量8000 14000的透析袋中，将透析袋置于释放介质中，其他条件同冻干制剂释放的条件。分别于O. 17,0.5,1,2,4,6,8,12，24，36，48h吸取释放介质O. 5mL,同时补入同温的释放介质，样品过滤后进样20μ L进行高效液相分析。计算累积释放百分率，如图3-Β所示。实施例2制备他米巴罗汀纳米脂质载体精密称取他米巴罗汀10mg、单硬脂酸甘油酯40mg、油酸30mg、大豆卵磷脂50mg,用5mL丙酮溶解，75°C水浴加热形成油相。另取泊洛沙姆188200mg溶于20mL注射用水中，水浴加热至于有机相相同的温度，构成水相。将有机相在600rpm搅拌下用微量注射泵以20mL/h的速度缓缓注入水相，(75±2) 1恒温搅拌，挥尽有机溶剂，再在O 2°C冰水浴下以600rpm搅拌30min,制得他米巴罗汀纳米脂质载体。向制得的他米巴罗汀纳米脂质载体中加3wt%的乳糖，然后分装与5mL西林瓶中，置于_80°C低温冰箱预冻24h，置于冷冻干燥机中，冻干48h，取出加盖密封即可。实施例3制备他米巴罗汀纳米脂质载体精密称取他米巴罗汀15mg、硬脂酸20mg、单硬脂酸甘油酯30mg、大豆油20mg、卵磷脂40mg,溶于5mL氯仿中，75°C水浴加热形成油相。另量取20mL注射用水,水浴加热至与有机相相同的温度，作为水相。将有机相用微量注射泵以15mL/h的速度滴入水相，并以600rpm的速度搅拌lh，以挥发有机溶剂。将所得初乳在O 2°C冰水浴下以600rpm搅拌40min,制得他米巴罗汀纳米脂质载体。向制得的他米巴罗汀纳米脂质载体中加3wt%的葡萄糖，然后分装与5mL西林瓶中，置于_80°C低温冰箱预冻24h，置于冷冻干燥机中，冻干48h，取出加盖密封即可。实施例4制备他米巴罗汀纳米脂质载体
精密称取他米巴罗汀5mg、单硬脂酸甘油酯30mg、胆固醇20mg、油酸20mg、卵磷脂40mg，溶于5mL无水乙醇中，75°C水浴加热形成油相。另量取20mL注射用水，加入泊洛沙姆182200mg，水浴加热至与有机相相同的温度，作为水相。以15mL/h的速度用微量注射泵滴入水相，并以600rpm的速度搅拌lh，挥尽有机溶剂。将所得初乳在O 2°C冰水浴下继续以600rpm搅拌50min,制得他米巴罗汀纳米脂质载体。向制得的他米巴罗汀纳米脂质载体中加6wt%的甘露醇，然后分装与5mL西林瓶中，先-20°C预冻，再_80°C预冻24h，置于冷冻干燥机中，冻干48h，取出加盖密封即可。实施例5制备他米巴罗汀纳米脂质载体精密称取他米巴罗汀10mg、三棕榈酸甘油酯30mg、胆固醇20mg、大豆油20mg、大豆卵磷脂50mg，溶于5mL氯仿中，75°C水浴加热形成油相。另取泊洛沙姆188200mg溶于20mL注射用水中，水浴加热至于有机相相同的温度，构成水相。以15mL/h的速度用微量注射泵滴入水相，并以600rpm的速度搅拌lh，挥尽有机溶剂。将所得初乳在O 2°C冰水浴下继续以600rpm搅拌Ih,制得他米巴罗汀纳米脂质载体。向制得的他米巴罗汀纳米脂质载体中加6wt%的乳糖，然后分装与5mL西林瓶中，先_20°C预冻，再_80°C预冻24h，置于冷冻干燥机中，冻干48h，取出加盖密封即可。实施例6制备他米巴罗汀纳米脂质载体精密称取他米巴罗汀20mg、硬脂酸20mg、单硬脂酸甘油酯30mg、大豆油20mg、大豆卵磷脂40mg，溶于5mL无水乙醇中，置75°C水浴加热至熔融，构成有机相。另取泊洛沙姆188200mg溶于20mL注射用水中，水浴加热至于有机相相同的温度,构成水相。以25mL/h的速度用微量注射泵滴入水相，并以SOOrpm的速度搅拌lh，挥尽有机溶剂。将所得初乳在
O 2°C冰水浴下继续以800rpm搅拌70min,制得他米巴罗汀纳米脂质载体。向制得的他米巴罗汀纳米脂质载体中加6wt%的葡萄糖，然后分装与5mL西林瓶中，先-20°C预冻，再_80°C预冻24h，置于冷冻干燥机中，冻干48h，取出加盖密封即可。实施例7制备他米巴罗汀纳米脂质载体精密称取他米巴罗汀10mg、三棕榈酸甘油酯30mg、单硬脂酸甘油酯30mg、大豆油20mg、大豆卵磷脂40mg，溶于5mL无水乙醇中，置75°C水浴加热至熔融，构成有机相。另外称取泊洛沙姆188200mg溶于20mL注射用水中，加热至相同温度，构成水相。以25mL/h的速度用微量注射泵滴入水相，并以600rpm的速度搅拌lh，挥尽有机溶剂。将所得初乳在O 2°C冰水浴下继续以600rpm搅拌80min,制得他米巴罗汀纳米脂质载体。
向制得的他米巴罗汀纳米脂质载体中加9wt%的甘露醇，然后分装与5mL西林瓶中，先-20°C预冻，再-80°C预冻24h，置于冷冻干燥机中，冻干48h，取出加盖密封即可。实施例8制备他米巴罗汀纳米脂质载体精密称取他米巴罗汀5mg、三棕榈酸甘油酯30mg、硬脂酸20mg、维生素E20mg、Tween80100mg,溶于5mL无水こ醇中，置75°C水浴加热至熔融,构成有机相。另称取十二烧基硫酸钠200mg溶于20mL注射用水中，加热至相同温度,构成水相。将有机相在800rpm搅拌下用微量注射泵以15mL/h的速度缓缓注入水相，(75±2)で恒温搅拌，挥尽有机溶剂，再在O 2°C冰水浴下以800rpm搅拌Ih,制得他米巴罗汀纳米脂质载体。向制得的他米巴罗汀纳米脂质载体中加9wt%的乳糖，然后分装与5mL西林瓶中， 先_20°C预冻，再-80°C预冻24h，置于冷冻干燥机中，冻干48h，取出加盖密封即可。实施例9制备他米巴罗汀纳米脂质载体 精密称取他米巴罗汀10mg、硬脂酸20mg、单硬脂酸甘油酯30mg、维生素E20mg、Tween80100mg,溶于5mL丙酮中，置75 °C水浴加热至熔融，构成有机相。另取泊洛沙姆188200mg溶于20mL注射用水中，水浴加热至于有机相相同的温度,构成水相。以15mL/h的速度用微量注射泵滴入水相，并以600rpm的速度搅拌lh，挥尽有机溶剤。以10mL/h的速度用微量注射泵滴入水相，并以600rpm的速度搅拌lh，挥尽有机溶剤。将所得初乳在O 2°C冰水浴下继续以600rpm搅拌40min,制得他米巴罗汀纳米脂质载体。向制得的他米巴罗汀纳米脂质载体中加9wt%的葡萄糖，然后分装与5mL西林瓶中，先-20 0C预冻，再-80 0C预冻24h，置于冷冻干燥机中，冻干48h，取出加盖密封即可。实施例10制备他米巴罗汀纳米脂质载体精密称取他米巴罗汀15mg、三硬脂酸甘油酯20mg、三月桂酸甘油酯30mg、卵磷脂40mg，溶于5mL氯仿中，75°C水浴加热形成油相。另取泊洛沙姆188200mg溶于20mL注射用水中，水浴加热至于有机相相同的温度，构成水相。将有机相在600rpm搅拌下用微量注射泵以25mL/h的速度缓缓注入水相，(75±2)で恒温搅拌，挥尽有机溶剂，再在O 2°C冰水浴下以600rpm搅拌80min,制得他米巴罗汀纳米脂质载体。向制得的他米巴罗汀纳米脂质载体中加10wt%的甘露醇，然后分装与5mL西林瓶中，先-20°C预冻，再-80°C预冻24h，置于冷冻干燥机中，冻干48h，取出加盖密封即可。
权利要求
1.一种他米巴罗汀纳米脂质载体，其特征在于是由以下组分组成的他米巴罗汀0.05 10 wt %固体脂质材料I 60 wt %液态脂质0.5 30 wt %脂溶性乳化剂I 10 wt%水溶性乳化剂0.05 10 wt%冻干保护剂0或I 10 wt% 注射用水余量。
2.根据权利要求I所述的他米巴罗汀纳米脂质载体，其特征在于所述固体脂质材料选自单硬脂酸甘油酯、甘油三酯、脂肪酸、蜡或固醇中的任一种或两种以上的组合。
3.根据权利要求I所述的他米巴罗汀纳米脂质载体，其特征在于所述液态脂质选自天然植物油、中链脂肪酸甘油酯、油酸、亚油酸、肉豆蘧酸异丙酯、维生素A、维生素E、维生素酯或鱼油中的任一种或两种以上的组合。
4.根据权利要求I所述的他米巴罗汀纳米脂质载体，其特征在于所述脂溶性乳化剂选自磷脂、脂肪酸山梨坦或聚山梨酯中的任一种或两种以上的组合。
5.根据权利要求I所述的他米巴罗汀纳米脂质载体，其特征在于所述水溶性乳化剂选自泊洛沙姆188、泊洛沙姆182、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚或十二烷基硫酸钠中的任一种或两种以上的组合。
6.权利要求I 5中任一项所述的他米巴罗汀纳米脂质载体的制备方法，其特征在于包括以下步骤 (1)精密称取他米巴罗汀、固体脂质材料、液态脂质和脂溶性表面活性剂，超声使其溶于有机溶剂中，水浴加热至70 80°C形成油相，备用； (2)将水溶性乳化剂溶于注射用水中，水浴加热至70 80°C，作为水相，备用； (3)在转速为500 IOOOrpm的电磁搅拌的条件下，用微量注射泵将油相缓缓滴入水相，继续乳化30min 60min，并保持恒温搅拌，直至有机溶剂完全挥发，形成初乳； (4)将步骤(3)得到的初乳置入0 2°C的冰水浴，低温固化，以500 IOOOrpm的转速电磁搅拌30 80min，制得外观为淡蓝色半透明的胶体混悬液，即为他米巴罗汀纳米脂质载体。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于还包括以下步骤(5)向步骤(4)中制得的他米巴罗汀纳米脂质载体中加I 10wt%的冻干保护剂,得他米巴罗汀纳米脂质载体冻干制剂。
8.根据权利要求6或7所述的制备方法，其特征在于所述步骤(I)中，有机溶剂选自无水乙醇、丙酮、氯仿、二氯甲烷或四氢呋喃中的任意一种或任意两种以上的混合物。
9.根据权利要求6或7所述的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中，微量注射泵的滴加速度为10 50mL/h。
10.根据权利要求6或7所述的制备方法，其特征在于所述步骤(5)中，所述冻干保护剂选自甘露醇、乳糖、葡萄糖、氯化钠或海藻糖中的任意一种或任意两种以上的混合物。
全文摘要
本发明公开了一种他米巴罗汀纳米脂质载体，是由以下组分组成的他米巴罗汀0.05～10wt%；固体脂质材料1～60wt%；液态脂质0.5～30wt%；脂溶性乳化剂1～10wt%；水溶性乳化剂0.05～10wt%；冻干保护剂0或1～10wt%；注射用水余量。制备方法为熔融-乳化-低温固化法。本发明所制备的他米巴罗汀纳米脂质载体粒径在100～200nm，供静脉注射使用，与口服剂型相比，可以减少给药剂量，在体内具备缓释特点，可延长药物在血液中的时间，提高生物利用度。
文档编号A61K9/19GK102961346SQ201210555428
公开日2013年3月13日 申请日期2012年12月19日 优先权日2012年12月19日
发明者黄桂华, 柳新, 王忠兰, 刘俊丽, 席延卫 申请人:山东大学