选择性fak抑制剂的制作方法
【专利摘要】一种用作FAK抑制剂的式(I)的化合物，其中R1或R2为环胺基且R5为具有含羰基取代基的芳族基团。
【专利说明】选择性FAK抑制剂
【技术领域】
[0001]本发明涉及抑制粘着斑激酶(FAK)(也称为酪氨酸蛋白激酶2(PTK2))的2，4，5_取代的嘧啶并且涉及含有此类化合物的药物组合物。本发明还涉及使用此类化合物用于预防和/或治疗增生性疾病(如癌症)的方法。
【背景技术】
[0002]定向细胞迁移在许多生理和病理过程(包括胚胎发育、伤口愈合、血管生成、肿瘤侵入和转移)中是很重要的。刺激细胞定向移动的细胞外信号转导可以通过许多方法来诱发，包括结合至细胞外基质蛋白的跨膜整联蛋白和生长因子(例如EGF、IGF和VEGF)对其同源受体的胞外结构域的作用。
[0003]FAK是介导来自跨膜整联蛋白和生长因子受体两者的信号的非受体酪氨酸激酶。已经报道，FAK在协调这些不同的细胞外信号、以通过它们的外部环境定向移动细胞的方式来整合它们中发挥核心作用(Tomar and Schlaepfer.Current Opinion in CellBiology:2009, 21，676-683)。
[0004]整联蛋白聚集或生长因子受体(例如EGFR、IGF-1R、Her2和VEGFR)的活化在Y397促进FAK自磷酸化。然后磷酸化的Y397FAK结合至c-Src(本文称为Src)并且在Y576和Y577发生Src介导的FAK磷酸化以产生活性FAK-Src复合物。然后活性FAK-Src通过许多生化途径促进发信号，这对以下过程有影响:如细胞粘附、迁移、侵入，细胞存活、增殖，获得化疗耐受性和转移等(Brunton and Frame.Current Opinionin Pharmacology:2008， 8，437_432and Chatzizacharias et al.Expert Opinion inTherapeutic Targets:2007，11(10)，1315-1328)。
_5]细胞粘附
[0006]解决FAK在细胞粘附中的作用的功能性研究表明其有助于粘着斑装配(Richardson and Parsons.Nature:1"6, 38O, 53S-54O)和粘着斑翻转(focal adhesionturnover) (Fincham et al.0ncogene: 1995，10 (11)，2247-2252)。在人类和小鼠细胞系中通过RNAi抑制FAK (导致了降低的FAK蛋白水平)在体外已经证明降低了细胞对纤连蛋白/层粘连蛋白涂覆的孔板的粘附力(Tsutsumi et al.1nternational Journal ofOncology:2008, 33(I)，215—224)。
[0007]细朐讦移
[0008]有较强的证据表明FAK是细胞迁移的关键调节因子(Angelucci and Bologna.Current Pharmaceutical Design:2007，13，2129-2145 和 Mitra et al.Nature ReviewsMolecular Cell Biology: 2005, 6，56-68)。源自 FAK-/-小鼠胚胎的细胞由于受损的粘附翻转显示出降低的迁移(--? et al.Nature:1995, 377，539-544)。此外，从粘着斑移位 FAK 降低了细胞迁移(Gilmore and Romer.Molecular Biology of theCell: 1996，7(8)，1209-1224)，而在CHO细胞中的过表达刺激迁移(Cary et al.Journal ofCell Science: 1996，7，1787-1794)。另外，在人类和小鼠细胞系中通过RNAi抑制FAK (导致降低的FAK蛋白水平)在体外趋触性迁移测定中已经显示降低了细胞迁移(Tsutsumi etal.1nternational Journal of Oncology:2008，33(I)，215-224)。
[0009]细朐停入
[0010]已经证明FAK活化增强了基质降解侵入行为。FAK-Src通过细胞凋亡易感性蛋白(CAS)发信号(Liao et al.Journal of Experimental and Clinical CancerResearch:2008, 27:15)引起表达基质金属蛋白酶(MMP)，包括MMP2和MMP9。FAK-Src活化也通过磷酸化endophilin A2来促进细胞表面表达MMP14。然后MMP14通过切割 pro_MMP2 将 MMP2 活化成其活性形式(Siesser and Hanks.Clinical CancerResearch:2006, 12 (11)，3233-3237)。高度侵袭性的癌细胞形成称为侵袭伪足(invadopodia)的特化的富含肌动蛋白的细胞外基质降解膜突出物，其富含基质降解蛋白酶如MMP。已经证明FAK和Src两者都有助于侵袭伪足的形成(Chan et al.Journal ofChemical Biology:2009, 185(2)，357-370)。
[0011] 细胞存y舌
[0012]已经证明FAK在细胞存活中起重要作用。已经证明FAK的活化会抑制失巢凋亡(对不适当的细胞外基质环境做出应答的凋亡)(Frisch et al Journal of CellBiology.1996，134(3)，793-799 和 Xu et al Cell Growth and Differentiation.1996,7(4)，413-418)。研究表明FAK在成纤维细胞和上皮细胞中激活多个下游通路以抑制失巢凋亡(Zouq et al.Journal of Cell Science:2008，122，357-367)。在人类肠隐窝细胞中，通过FAK与β I整联蛋白的结合发信号，并且随后结合Src通过PI3-K/Akt-l信号传导上调抗-凋亡蛋白Bcl-X^和Mcl-1的表达。PI3-K/Akt-l信号传导还下调促凋亡激活剂Bax和Bak的表达，引起促凋亡增敏剂Bad的磷酸化并拮抗ρ38 β的活化。FAK/Src的分离导致持续的/增强的ρ38β活化,该ρ38β是凋亡/失巢凋亡驱动剂(Bouchard etal.Apoptosis:2008, 13, 531-542)。
[0013]细朐增葙
[0014]降低FAK或β I整联蛋白的表达并因此破坏M-FAK信号轴导致降低了分布于肺中的微转移细胞的初始增殖。使用3D培养的D2细胞观察到在FAK Υ397和Υ861的磷酸化与增殖能力之间具有较强相关性(Shibue and Weinberg.PNAS2009，106(25), 10290-10295)。已经证明转染以过表达FAK的HL-60细胞翻倍的速率比对照HL-60细胞快1.5倍。研究发现在过表达FAK的细胞中，细胞周期蛋白D3表达和CDK活性的显著诱导。活化PI3-K/Akt-l信号传导(在许多研究中与FAK活化有关的过程)被确定为细胞周期蛋白表达/活化的一种可能原因(Yamamoto et al.CellularSignaling:2003，15.575-583)。
[0015]获得化疗耐受性
[0016]使顺钼敏感性卵巢癌细胞系0AW42暴露于顺钼治疗和随后恢复的重复循环，导致了化学耐受性0AW42-R细胞的形成。旨在确定该化学耐受性的原因的研究发现，FAK在敏感性和化学耐受性细胞两者中具有构成性活性(constituently active)。然而,通过用顺钼治疗在0AW42细胞中诱导了 Y397 FAK磷酸化的抑制，但在0AW42-R细胞中则没有(Poulain及其同事.Gynaecologic oncology: 2006, 101, 507-519)。还在体外和在体内使用FAK抑制剂TAE226 (单独地以及与多西紫杉醇联用)，在紫杉烷敏感性(SK0V3ipl和HeyA8)及紫杉烷耐受性(HeyA8-MDR)卵巢癌细胞系中研究了 FAK抑制对化学耐受性的影响。TAE226具有
如下结构:
【权利要求】
1.一种式⑴的化合物:
2.根据权利要求1所述的化合物，其中R2为H且R1为:
3.根据权利要求1所述的化合物，其中R2为H且R1为:
4.根据权利要求1所述的化合物，其中R2为H且R1为:
5.根据权利要求1所述的化合物，其中R2为H且R1为:
6.根据权利要求1所述的化合物，其中R2为H且R1为:
7.根据权利要求1所述的化合物，其中R1为H且R2为:
8.根据权利要求1所述的化合物，其中R1为H且R2为:其中Rn6选自H和甲基。
9.根据权利要求1~8中任一项所述的化合物，其中R3选自F、Me、Et、OMe和0CF3。
10.根据权利要求1~9中任一项所述的化合物，其中R3为OMe。
11.根据权利要求1~10中任一项所述的化合物，其中R4选自CF3、C1和CF2H。
12.根据权利要求11所述的化合物，其中R4为CF3。
13.根据权利要求1~11中任一项所述的化合物，其中R5为下式的组:R7
14.根据权利要求13所述的化合物，其中R7为H且R6选自CH2C(O) NH2XH2C (O) NHCH3、CHCH3C (O) NH2 和 CHCH3C (O) NHCH3。
15.根据权利要求14所述的化合物，其中R7为H且R6选自CH2C(O) NH2、CHCH3C(O)NH2和 CH2C (O) NHCH3。
16.根据权利要求15所述的化合物，其中R7为H且R6选自CH2C(O)NH2和CHCH3C(O) NH2。
17.根据权利要求13所述的化合物，其中R6为H且R7选自C(O) NH2X(O) NHCH3XH2C (O)NH2 和 CH2C(0)NHCH3。
18.根据权利要求17所述的化合物，其中R6为H且R7为C(O)NH20
19.根据权利要求18所述的化合物，其中R8为甲基。
20.根据权利要求1~11中任一项所述的化合物，其中R5为下式的组:
21.一种组合物，包含根据权利要求1~20中任一项所述的化合物、和药学上可接受的载体或稀释剂。
22.根据权利要求1~20中任一项所述的化合物，用于治疗方法中。
23.根据权利要求1~20中任一项所述的化合物在制备用于治疗通过抑制FAK而改善的疾病的药物中的用途。
24.根据权利要求1~20中任一项所述的化合物用于治疗通过抑制FAK而改善的疾病的方法中。
25.根据权利要求1~20中任一项所述的化合物用于治疗人体或动物体的方法中。
26.—种在体外或体内抑制FAK的方法，包含使细胞与有效量的根据权利要求1~20中任一项所述的化合物接`触。
【文档编号】A61P35/00GK103534240SQ201280018816
【公开日】2014年1月22日 申请日期:2012年2月17日 优先权日:2011年2月17日
【发明者】艾安·彼得·霍姆斯, 于尔娃·贝格曼, 吉利恩·伊丽莎白·伦宁斯, 马里察·尼卡茨, 尼尔·乔依, 凯瑟琳·法埃·黑姆莱, 斯科特·雷蒙德·沃克, 理查德·查尔斯·福伊齐克, 丹尼·加纳梅, 罗米纳·勒森纳 申请人:癌症疗法Crc私人有限公司