用于合成选择性dpp-iv抑制剂的方法和中间体的制作方法

专利名称：用于合成选择性dpp-iv抑制剂的方法和中间体的制作方法
用于合成选择性DPP-IV抑制剂的方法和中间体
相关申请的交叉引用
本申请要求2007年3月8日提交的美国申请No. 60/893,842、 2008年 l月25日提交的美国申请No. 61/023,487、2007年7月12日提交的美国申 请No. 60/959,226以及2008年2月18日提交的美国申请No. 61/029,506 的优先权，所有这些申请的全部内容均在此通过引用并入本文。
背景技术：
二肽基肽酶-IV (DPP誦IV, dipeptidyl peptidase IV)是二肽基肽酶家 族成员之一，其能将N-末端二肽残1^蛋白质上切割下来，尤其是当所述 二肽包含位于N-末端倒数第二位的脯氨酸或丙氨酸残基时。DPP-IV被 认为参与葡萄糖调控，因为其肽分解作用使促胰島素激素肽-胰高血糖素样
肽画l( GLP-1 )和抑胃肽(GIP， gastric inhibitory protein )失活。抑制DPP-IV (例如体内施用合成抑制剂)可起到提高GLP-1和GIP血浆浓度的作用， 并因此改善血糖控制。因此，这样的合成抑制剂可用于治疗糖尿病及相
关病症。
然而，该DPP酶家族还存在其它成员，包括DPP-VII、 DPP-VIII、 DPP-IX和FAP (成纤维细胞活化蛋白)，其对DPP-IV具有相似的底物特 异性。已知在哺乳动物中抑制这些酶中的某些酶(例如DPP-VIII)可引起 毒性作用。因此，为了在医学上有用，DPP-IV抑制剂还必须表现出相对 于DPP酶家族其它成员的对DPP-IV的选择性。
已经开发了某些这样的选择性DPP-IV抑制剂，如以下这些文件所公 开的2006年11月16日/>开的7>开号WO2005/047297的PCT专利申请 公开以及美国申请公开Nos. 2006/0258621、 2006/0264400 (现在为2008年 l月8日7>布的美国专利No. 7,317,109)以及2006/0264401。
在这些申请里的某些申请中，公开了 DPP-IV被下式结构的化合物 所抑制<formula>formula see original document page 17</formula>其中Ra和Rb是OH，从而提供了硼酸或其盐或其保护形式。所述化合
物被称为吡咯烷-3-基-甘氨酰基-硼-脯氨酸及其衍生物，或者更一般而 言，称为吡咯烷-3-基-甘氨酰基氨基烷基硼酸酯。2008年1月8日授权 的美国专利No. 7,317,109要求保护该结构的化合物，并且还要求保护所 述化合物用于选择性抑制DPP-IV的用途，例如在患有可通过抑制 DPP-IV而被调节或正常化的不良状况(例如糖尿病或其它葡萄糖代谢 障碍)的哺乳动物中。
在本发明人的共同未决的PCT申请No. PCT/US2006/029451中， 提供了一种制备上式化合物的硼酸酯保护形式的方法<formula>formula see original document page 17</formula>
其中适当的活化(HOBt / EDAC / NMM / DCM)引起l-节氧羰基吡咯 烷-3-基-N-节氧羰基甘氨酸的羧酸基团与受保护的硼-脯氨酸偶联产生 DPP-IV抑制性化合物N-(吡咯烷-3-基甘氨酰基)硼-脯氨酸的二-爷氧羰 基(Cbz)形式。硼-脯氨酸衍生物意指其中氨基酸的羧酸部分已经被硼 酸部分或其受保护形式(例如硼酸酯)替代的脯氨酸类似物。Ra和Rb 是被保护的羟基，其可被脱保护而形成N-(吡咯烷-3-基甘氨酰基)硼-脯氨酸或其盐。因此，l-千氧羰基吡咯烷-3-基-N-千氧羰基甘氨酸是制备选择性DPP-IV抑制剂N-(吡咯烷-3-基甘氨酰基)硼-脯氨酸的关键中间体。

发明内容
本发明的实施方案涉及合成吡咯烷-3-基甘氨酰基-硼-脯氨酸类的某些DPP-IV抑制性化合物的方法以及可用于实施所述合成方法的中间体。
本发明的一个实施方案提供了制备式(I)化合物的方法
N
PG
(I)
其中PG各自独立地是氮保护基，W和Rb各自是羟基或其盐，或者是可被转化成羟基或其盐的基团，或者Ra和Rb与它们所连接的硼原子一
起形成可转化成B(OH)2或其盐的环状结构；所述方法包括使式(II)的羧酸盐，其中M是阳离子
(II)
与式(III)的受保护的硼-脯氨酸或其盐
(III)在适于形成酰胺键的条件下相接触，以提供式(D化合物。本发明的一个实施方案提供了制备式(IV)化合物的方法:<formula>formula see original document page 19</formula>
其中PG各自独立地是氮保护基，Ra和Rb各自是轻基，i^^ij是
^::I:基或其盐的基团，或者R，Rb与它们所连接的硼原子一起形成可转化成B(OH)2或其盐的环状结构；
所述方法包括使式(v)的羧酸盐(即式Ui)化合物的(R)-立体异构体),
其中M是阳离子
<formula>formula see original document page 19</formula>与式(III)的受保护的硼-脯氨酸或其盐
<formula>formula see original document page 19</formula>在适于形成酰胺键的条件下相接触，以提供式(iv)化合物本发明的一个实施方案提供了制备式(VII)化合物的方法:
(VII)
其中PG各自独立地是氮保护基，Ra和Rb各自是羟基或其盐，或者是可被转化成羟基或其盐的基团，或者Ra和Rb与它们所连接的硼原子一
起形成可转化成B(OH)2或其盐的环状结构；所述方法包括使式(V)的羧酸盐，其中M是阳离子
PG、 Q
O
<formula>formula see original document page 20</formula>
(V)
与式(IX)的受保护的硼-脯氨酸或其盐
<formula>formula see original document page 20</formula>
(IX)
在适于形成酰胺键的条件下相接触，以提供式(VII)化合物,本发明的一个实施方案提供了式(II-Cbz-Na)的钠盐<formula>formula see original document page 21</formula>
包括其立体异构体、互变异构体、溶剂化物和水合物，其中PG均为Cbz基团，并且M+是钠离子。
本发明的另一个实施方案提供了式(V-Cbz-Na)的钠盐
式(II-Cbz-Na)化合物的(R)-立体异构体，包括其互变异构体、溶剂化物和水合物。
本发明的另一个实施方案提供了上述化合物的晶体形式。所述晶体形式可通过本文所提供的X射线粉末衍射数据等来表征。
本发明的另 一个实施方案提供了制备式(II-Cbz-Na)或式(V-Cbz-Na)化合物或其晶体形式的方法，所述方法包括从水性皂化反应混合物的有机萃取物中进行回收，所述水性皂化混合物之前已将pH调节至约5.5-7.5。所述水性皂化混合物可以是氢氧化钠介导的相应酯(例如甲基酯)急化反应的产物。
本发明的另一个实施方案提供了式(II-Cbz-DCHA)的二环己基铵
(V-Cbz-Na )，盐:<formula>formula see original document page 22</formula>
(II-Cbz-DCHA)
包括其立体异构体、互变异构体、溶剂化物和水合物，其中PG均为Cbz基团，并且M+是二环己基铵离子。
本发明的另一个实施方案提供了式(V-Cbz-DCHA)的二环己基铵
盐<formula>formula see original document page 22</formula>
(V-Cbz画DCHA )，
前式化合物的(R)-立体异构体，包括其互变异构体、溶剂化物和水合物。
另一个实施方案提供了上述式化合物的晶体形式，所述晶体形式可通过本文中所提供的X射线粉末衍射数据等来表征。
多个实施方案提供了制备化合物(II-Cbz-DCHA )和(V-Cbz-DCHA)的方法。在一个实施方案中，本发明提供了制备二环己基铵盐的方法，所述方法包括使下式的羧酸与二环己基胺在有机溶剂中相接触，然后收集作为沉淀的化合物。
在另一个实施方案中，可使上述羧酸的(R)-立体异构体与二环己基 胺在有机溶剂中相接触以提供二环己基铵盐的(R)-立体异构体。
在多个实施方案中，提供了利用所述外消旋体或各自的富含(R)-立 体异构体形式的钠盐或二环己基铵盐与式(X)的受保护的硼-脯氨酸衍 生物
(X)
进行偶联反应以分别提供具有式(XI)
(XI)
或式(XII)<formula>formula see original document page 24</formula>
(XII)
的DPP-IV抑制剂的保护形式的方法。
在本发明的多个实施方案中，还提供了将上述式的化合物转化成其 各自相应的完全脱保护的生物活性形式的式(XV)和(XVI)的方法，
或
(XVI)
所述转化例如通过它们的其中Cbz基团已通过例如氲解而被除去但硼 酸酯保护基保持完好的衍生物来进行，例如式(XIII)和(XIV)的化 合物
24<formula>formula see original document page 25</formula>
或
(XIV )。
式(XV)和(XVI)化合物可以作为其盐而被分离。例如，所述化 合物可作为其种樣酸盐或酒石酸盐而被分离和纯化，或者更具体而言， 作为其L-酒石酸盐被分离。式(XVI-T)化合物即式(XVI)化合物的 L-酒石酸盐具有尤其有利的性质，因为其是可容易地被纯化、贮存、分 配、配制和被需要它的患者口月良摄取的稳定的盐。化合物(XVI-T)是 高效和选择性的DPP-IV抑制剂。可将这些盐形式施用给患者以治疗葡 萄糖代谢障碍，例如糖尿病。
本发明的一个实施方案涉及化合物(XIV)的晶体形式
<formula>formula see original document page 25</formula>NH异构体2(R)-l-口-[(3R)-吡咯烷基 氨基-乙酰基卜吡咯烷-2-硼酸(lS，2S，3R,5S)-蒗烷二醇酯。本发明晶体形 式的一个实施方案包括THF溶剂。认为晶体形式的该实施方案是式
(XIV)化合物的晶体THF溶剂化物。所述晶体形式通过本发明所提 供的光谱数据例如X射线粉末衍射、核磁共振(NMR)、红外吸收光镨
(IR)以及差示扫描量热法(DSC)进行表征。
本发明的一个实施方案涉及以溶剂(比如四氢呋喃)结晶来制备化 合物(XIV)的本发明晶体形式的方法。可将物质样品(比如氢解除去 Cbz氮保护基得到的粗反应产物)溶解在温热的THF中，真空下浓缩， 冷却溶液以提供所述晶体物质。可将所述物质进一步干燥。
本发明的另一个实施方案提供了一种可将所述晶体物质用于 DPP-IV抑制性物质化合物(XVI)即2(R)-l-U(3R)-吡咯烷基氨基-乙 酰基}-吡咯烷-2-硼酸的合成中的方法
(XVI )，
所述化合物(XVI)还可进一步与L-酒石酸反应以提供化合物(XVI-T ) 即相应的L-酒石酸盐，该L-酒石酸盐可用作治疗哺乳动物中糖尿病和 其它葡萄糖代谢障碍的药 用化合物。


图1是本发明的(l-节氧羰基吡咯烷-3-基)-N-苄氧羰基甘氨酸钠盐的 晶体形式的差示扫描量热(DSC)图。
图2是图1的钠盐的X射线粉末衍射图。图3是图1的钠盐的溶液质子NMR谱。
图4是本发明的(l-苄氧羰基吡咯烷-3-基)-N-苄氧羰基甘氨酸二环己 基铵盐的晶体形式的差示扫描量热(DSC)图。
图5是图4的二环己基铵盐的X射线粉末衍射图。
图6是图4的二环己基铵盐的溶液质子NMR谱。
图7是图4的二环己基铵盐的溶液13C NMR镨。
图8显示化合物(XIV)的晶体形式的CDCl3溶液的质子核磁共振 (匪R)镨。
图9显示图8的晶体形式的红外吸收(IR)光镨。
图IO显示图8的晶体形式的差示扫描量热(DSC)图。
图ll显示图8的晶体形式的X射线粉末衍射图。
具体实施方式
定义
术语"治疗"定义为以对抗疾病、病况或病症为目的而对患者进行的 处置和护理，包括施用本发明的化合物以阻止症状或并发症的出现，或者 减轻症状或并发症，或者消除疾病、病况或病症。在本发明中，所述疾病、 病况或病症是指可通过选择性地抑制酶DPP-IV或可通过本发明化合物的 一个实施方案的任意其它生物化学性质调节的疾病、病状或病症。
本发明上下文中的"治疗"意为减轻与病症或疾病相关的症状，或者 阻止这些症状的进一步;^或恶化，或者防止或预防所述疾病或病症。因 此，治疗葡萄糖代谢病症或缺陷包括控制、减緩或预防不良状况(例如糖 尿病)的症状。类似地，本文使用的本发明化合物的"有效量"或"治疗 有效量"是指这样的化合物量，其完全或部分緩解与病症或状^U目关的症 状，或者终止或减緩这些症状进一步^A或恶化，或者防止或预防病症或 症状。具体来说，"治疗有效量"是指在剂量和在必要的时间方面可通过 抑制DPP-IV活性而有效达到期望治疗结果的量。治疗有效量也是本发明化合物的治疗有益效果超过任何毒性或有害作用的量。例如，在治疗糖尿
病的情形下，本发明DPP-IV抑制剂的治疗有效量U以为患有与糖尿病 有关的症状的患者提供有益作用的量，所述症状包括但不限于血糖水平升 高、低血糖、视网膜损伤、肾衰竭、神经损伤、微血管损伤和心血管疾病。
除非特别指明了特定的立体化学或特定的异构体形式，否则所有手性、 非对映、外消旋形式的结构均考虑在内。显然，才艮据描述，本发明所用化 合物包括富集或拆分的任何或所有不对称原子的旋光异构体。可以分离或 合成外消旋和非对映的混合物以及单个的旋光异构体，从而基本上不含其 对映体或非对映体，这些都在本发明的范围之内。或者，可将单一异构体
以不同程度富集到物质样品中；化合物样品可以是夕卜消旋的，其中两种对 映体以相等的量存在；或者可以超过等量的任意程度富集特定异构体。例 如，样品可以约60%富集、或者约75%富集、或约卯％富集、或约99% 富集特定的立体异构体。
术语"手性，，或"手性中心"意指不对称中心(通常在碳原子上)， 或者含有这种不对称中心的分子，这是本领域中众所周知的。术语"立 体异构体"指具有手性中心的分子，其中每个手性中心上存在单一构型。 当仅仅具有一个手性中心时，纯的立体异构体被称为"对映体"。 一个 以上的单一手性中心导致可能存在"非对映体"，其可作为dl对存在或 者可以是内消旋形式，这是本领域中众所周知的。在存在单一手性中心 情形下，"外消旋体"或"外消旋混合物"包含在存在单一手性中心的 情形下的两种等量的立体异构体；在存在多个手性中心的情形下，给定 非对映体的各对映体对以等量存在，但是不同非对映体的相对量可以不 同。"立体化学纯的"和"立体化学富集的"分别指样品中存在分子的 单一立体异构体的情形或者样品中一种立体异构体相对于另一种立体 异构体占优势的情形。当存在单一手性中心时， 一种对映体可以相对于 另一种对映体在百分比上占优势，例如立体化学富集的样品可以含有 80%的一种对映体和20%的另一种对映体，或者90%的一种对映体和 10%的另一种对映体等等。立体化学纯度是一个相对术语，因为即便是 99%立体化学纯度的样品仍然包含1%的另一种异构形式。
术语"硼-脯氨酸"意指脯氨酸的类似物，其中羧酸基被硼酸(硼酸
盐)基替代。该术语包含吡咯烷硼酸结构的所有位置的异构体和立体异 构体，还包括取代的衍生物。本文所用的术语"硼酸"或"硼酸盐"分别指式RB(OH)2化合物或 其盐，其中R是通过碳原子与硼原子键合的基团。"硼酸盐"还可以指 硼酸酯，其中一个或两个OH基被碳基例如甲基取代。因此，其中R， 是通过碳原子与氧原子键合的基团的式RB(OR，)2化合物也是本文意义 上的硼酸盐，这些化合物也可称为"硼酸酯"。"环状硼酸二酯"是其中 两个R，基团彼此共价键合的式RB(OR，)2化合物。例如，硼酸的乙二醇 二酯是本文意义上的环状硼酸二酯。
本文所用的术语"偶联反应"指羧酸盐与硼-脯氨酸衍生物之间酰胺 键的形成，如本文所述。
本文4吏用的术语"M保护基"或"N保护的"是指这样的基团，其 在合成步骤中保护氨基不参与不希望的反应，并且随后可以被除去以显露 出胺。常用的#^保护基7>开于Protective Groups in Organic Synthesis, Greene, T.W.; Wuts， P. G M., John Wiley & Sons, New York, NY, (3rd Edition, 1999)。絲保护基包括絲，例如曱絲、乙酰基、丙絲、新 戊SL基、叔丁基乙酰基、2-氯乙酰基、2-溴乙酰基、三氟乙酰基、三氯乙 酰基、邻硝基苯氧基乙酰基、a-氯丁酰基、苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-溴苯曱酰基、4-硝基苯曱酰基等；磺耽基，例如M耽基、对甲^酰基 等；烷氧基羰基或芳氧基羰基(与保护的胺形成尿烷)，例如苄氧羰基 (Cbz)、对氯节氧n、对甲猛千氧絲、对硝基千氧絲、2-硝基节 氧叛基、对溴苄氧氣基、3，4-二甲氡基苄氧羰基、3，5-二甲SJ^氧羰基、 2,4-二甲氡基苄氧羰基、4-曱氡基苄氧叛基、2-硝基-4,5-二曱緣节氧羰基、 3，4，5-三甲氧基苄氧絲、l-(对联苯基)-l-甲基乙氧羰基、01，01-二甲基-3，5-二甲緣爷氧絲、二苯曱氧絲、叔丁氧絲(Boc)、 二异丙基曱氧羰 基、异丙氧叛基、乙氧羰基、曱氧羰基、烯丙氧羰基(Alloc)、 2，2,2-三氯 乙氧n、 2-三曱基曱>^^乙氧^^ (Teoc)、苯緣絲、4-硝基苯氧 基g、芴基-9-甲氧n (Fmoc)、环戊基氧g、金刚)^氧l^、环 己氧羰基、苯石錄a^等；芳基烷基，例如苯甲基、三苯甲基、苄氧基甲 基等；以及曱珪烷基，例如三甲基甲硅烷基等。胺保护^iE包括环状Jl^ 保护基，例如将氨基氮引入杂环中的酞酰基和二硫代琥珀酰亚胺基。通常， ^J^保护基包括甲it基、乙酖基、苯甲醃基、新戊酰基、叔丁基乙醃基、 ^^酰基、Alloc、 Teoc、节基、Fmoc、 Boc和Cbz。为其合成任务选择并 使用合适的M保护M普通技术人员的技能范围之内。一般而言，"取代"是指本文定义的有机基团，其中其包含的一个或多 个与氢原子所成的键被与非氢原子所成的键代替，所述非氢原子例如但不
限于卣素(即F、 Cl、 Br和I);氧原子，例如下列基团中的羟基、烷 氡基、芳氡基、芳基烷氡基；硫原子，例如下列基团中的SfL基、烷基和 芳基多克化物基团、亚砜基、砜基、磺g和磺酰胺基；氮原子，例如下列
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基团中的其他杂原子。取代的烷基、烯基、炔基、环烷基和环烯基基团以 及其他取代的基团还包括其中与氢原子键合的 一个或多个键被一个或多 个与碳原子或与杂原子键合的键(包括双键或三键)所替代的基团，所述 杂原子例如但不限于羰基(氧代)、氯基、酯、酰胺、酰亚胺、尿烷和脲
基团中的氧原子；以及亚胺、羟亚胺、肟、腙、脒、胍和腈中的氮原子。
烷基包括直链和支链的烷基和环烷基，其具有1到约20个碳原子，通 常1到12个碳，或者在一些实施方案中具有1到8个碳原子。直链貌基的 实例包括具有1到8个碳原子的烷基，例如曱基、乙基、正丙基、正丁基、 正戊基、正己基、正庚基和正辛基。支^基的实例包括但不限于异丙基、 异丁基、仲丁基、叔丁基、新戊基、异戊基和2,2-二甲基丙基。代表性的 取代烷基可以被以上所列的任何基团取代一次或多次，所述基团例如氨 基、羟基、H&、 ^、硝基、巯基、烷？L^和卤素基团。
芳基是不含有杂原子的环状芳香烃。因此，芳基包括但不限于苯基、 奧基(azulenyl )、庚搭烯基(heptalenyl )、联苯基、吲丹烯基(indacenyl )、 苗基、菲基、三亚苯基(triphenylenyl )、芘基、萘并萘基(naphthacenyl )、 蔥基、亚联苯基、蒽基和萘基。在一些实施方案中，芳基在该基团的环部 分中包含6-14个碳。芳基可以是未取代的，或者可以是如上所述取代的。 代表性的取代芳基可以是单取代或者多取代的，例如但不限于2、 3、 4、 5 或6取代的苯基或2-8取代的萘基，其可^Lg或非破基(例如以上所列 的那些基团)取代。
术语"烷氣基"是指氧原子与以上定义的烷勤目连接。直链烷H基的 实例包括但不限于甲氡基、乙氣基、丙氡基、丁氡基、戊氣基、己ft^等。 支^氡基的实例包括但不限于异丙氡基、仲丁氡基、叔丁氡基、异戊氧 基、异己IL^等。环状烷氣基的实例包括但不限于环丙氡基、环丁氡基、 环戊氡基、环己氡基等。
术语"芳lL基"和"芳基烷氡基"分别指与氧原子键合的芳基和在烷基上与氧原子键合的芳基烷基。实例包括但不限于苯氡基、萘氣基和苄氧 基。
术语"胺"包括例如具有式-N(基团)3的伯胺、仲胺和叔胺，其中各基
团可独立地是H或非H，例如烷基、芳基等。胺包括但不限于R-NH2、烷 基胺、芳基胺、烷基芳基胺、R2NH (其中R各自独立地选自例如二烷基 胺、二芳M、芳烷基胺、杂环胺等)、R3N(其中R各自独立地选自例如 三^胺、二烷基芳M、烷基二芳基胺、三芳M等)。是-NH2國、 NHR、 -NR2、 -NR/形式的取代基，其中R各自独立地选自各自的质子化 形式。术语"胺"还包括本文所用的铵离子。
"铵"离子包括未取代的铵离子NH4+，但是除非另外指明，否则其还 包括胺的任意质子化或季铵化形式。因此，盐酸三曱基铵和四甲基氯化铵 均是本文意义上的铵离子。
术语"酰胺"(或"酰氨基")包括C-和N-酰胺基，即分别为-C(0)NR2 和-NRC(O)R基团。因此，酰胺基包括但不限于^J^甲絲(-C(0)NH2) 和曱酰胺基(-NHC(O)H)。
本文所用的术语"阳离子"是相对于本发明方法中所用的羧酸盐而 言的，指带正电荷的离子型分子实体，例如金属离子或铵离子。金属阳 离子包括碱金属离子，例如锂、钠、钾和铷离子，碱土金属离子例如镁、 钧和锶离子，过渡金属离子例如亚铁离子或铁离子、锌离子等。铵阳离 子包括如上所述的取代或未取代的铵离子，包括胺的阳离子(质子化或 季铵化)形式，例如二环己基铵离子。
此外，在以马库什组的方式描述本发明的特征或方面时，本领域技术 人员会认识到，本发明也由此就该马库什组中的任何单个成员或亚组成员 进行了描述。因此，如果X被描述为选自溴、氯和碘，则完全地描述了X 为溴的权利要求以及X为溴和氯的权利要求。此外，在以马库什组的方式
描述本发明的特征或方面时，本领域技术人员会4人识到，本发明也由此就 该马库什组中的任何单个成员或亚组成员的组合i^行了描述。因此，例如，
如果X被描述为选自溴、氯和碘，而Y被描述为选自甲基、乙基和丙基， 则完全地描述了 X是溴且Y是甲基的权利要求。发明详述
在本发明中，提供了用于制备某些N-乙酰化的硼-脯氨酸化合物的 合成方法，已知所述化合物作为酶二肽基肽酶IV (DPP-IV)的选择性 抑制剂是具有生物活性的，所述酶是调节葡萄糖代谢的重要酶。而且， 还提供了可用于实施本发明方法的合成中间体。
本发明的一个实施方案提供了制备式(I)化合物的方法
其中PG各自独立地是氮保护基，W和Rb各自是羟基或其盐，或者是 可被转化成羟基或其盐的基团，或者Ra和Rb与它们所连接的硼原子一 起形成可转化成B(OH)2或其盐的环状结构；所述方法包括使式(II) 的羧酸盐
其中M是阳离子；
与式(III)的受保护的硼-脯氨酸或其盐
<formula>formula see original document page 32</formula>在适于形成酰胺键的条件下相接触，以提供式(I)化合物。式(II)化
合物是羧酸盐，所述羧酸是双N-保护形式的吡咯烷-3-基甘氨酸，又称 为3-(羧甲基氨基)吡咯烷或3-N-(甘氨酰基)吡咯烷。N-保护基可以是 对羧酸盐与式(III)的硼-脯氨酸衍生物或其盐偶联的反应条件稳定的 任意合适基团。例如，PG可以是节氧基羰基，又称为节氧羰基(Cbz)， 或者PG可以是叔丁氧羰基(tBoc)或者烯丙氧羰基(alloc),或者现 有技术中已知的多种合适的N-保护基中的任意一种。前提是所述保护 基在偶联反应条件下是稳定的，但是可在不破坏式(I)的偶联产物
<formula>formula see original document page 33</formula>(I)
或最终的去封闭(deblocked)产物
的条件下除去。实际上，可以使用任意氮保护基或封闭基团。两个PG 基团不必相同，虽然它们可以具有相同的身份。
可以利用硼酸盐保护的硼-脯氨酸衍生物进行偶联反应，其中Ra和
Rb是适当封闭的羟基。例如，Ra和Rb可各自是烷氧基，例如甲氧基。 或者，Ra和Rb可与它们所连接的硼原子一起形成环状基团，其最后可 被水解成硼酸或其盐。例如，Ra和Rb与硼原子一起可包含环状硼酸二 酯，例如乙二醇环状硼酸二酯或丙二醇环状硼酸二酯。或者，Ra和Rb 与硼原子一起可包含单薛二醇环状硼酸二酯，例如落烷二醇环状硼酸二 酯。单薛二醇可以是手性形式，也就是说，是具有至少一个手性中心的 单辟，其中使用了立体异构纯的形式。这提供了通过选择性结晶所期望的非对映体二酯来纯化在连有硼原子的吡咯烷碳(a-碳)上的优选的手 性形式的优点。例如，所述蒗烷二醇环状二酯可以是(lS，2S，3R,5S)-蒗 烷二醇(也称为(+)-蒗烷二醇)的环状二酯。
在本发明方法的一个实施方案中，可将立体化学富集的式(III)的 硼-脯氨酸化合物用在所述偶联反应中，例如式(IX)的受保护的硼-脯 氨酸或其盐
(IX)，
其中所述化合物具有在手性中心(a-碳)上的(R)绝对构型，通过纯化 式(IX)分子的单一非对映体可容易地制得，其中BRaRb是环状(+)-蒎 烷二醇硼酸二酯，其中蒗烷二醇的单一立体异构体用于由外消旋吡咯烷 -2-硼酸制备环状二酯，然后分离所期望的在a-碳上具有(R)构型的环状 二酯的非对映体。
偶联反应可以使用式(II)的羧酸盐
(II)
其中M是阳离子，其可包含任意和所有的立体化学形式和混合物。或 者，偶联反应可使用立体化学纯形式的羧酸盐，例如式(V)化合物<formula>formula see original document page 35</formula>
(V)
其中M是阳离子，所述化合物在所指出的手性中心(即带有受保护的 取代氨基的吡咯烷-3-碳)处主要是(R)绝对构型。
可在式(II)的未确定立体化学的化合物或式(V)的已确定立体 化学的化合物与式(III)的未确定立体化学的硼-脯氨酸衍生物或其盐 或式(IX)的已确定立体化学的硼-脯氨酸衍生物或其盐之间进行偶联 反应。因此，反应产物可以是式(I)的未确定立体化学的产物
(1)，<formula>formula see original document page 35</formula>
式(IV)的在吡咯烷-3-碳上确定立体化学的产物:
(IV)，<formula>formula see original document page 35</formula>
式(IVA)的在硼-脯氨酸a-碳上确定立体化学的产物:(VII )。
式(VII)化合物尤其可用作立体化学确定的已知的DPP-IV抑制剂即 式(XVI)化合物
(XVI )，
或其药学上可接受的盐的直接前体，这公开于在2008年6月8日授权 的美国专利No.7，317，109中。所述药学上可接受的盐可以是杵檬酸盐， 或者可以是酒石酸盐，例如L-酒石酸盐，这公开于本发明人的未决PCT 申请No. PCT/US2007/018629中。
式(III)的硼-脯氨酸反应物或其式(IX)的(R)-对映体可作为游离 碱存在于偶联反应中，或者可以盐形式引入，例如作为式(X)化合物，
PG
N
BR3R1
a。b
o
N
I
PG
(IVA)，
或者式(VII)的立体化学在吡咯烷-3-碳和硼-脯氨酸a-碳上确定立体化 学的产物
PG其中Ra、 Rb以及它们所键合的硼原子是环状(+)-蒗烷二醇硼酸二酯，并
且Y是合适的反离子
<formula>formula see original document page 37</formula>
合适的反离子是阴离子，其在反应条件下是稳定和无反应活性的， 并且不导致偶联反应中所用试剂的分解。卣化物(例如氯化物)是已知 用于偶联反应的所示硼-脯氨酸铵离子的合适反离子的 一个非限定性实 例。
在适合形成酰胺键的条件下进行偶联反应。例如，可在羧基活化剂 (例如可与羧基形成活化酯的幾基化合物)存在下进行偶联反应。更具
体地，所述羧基活化剂可以是N-羟基化合物。 一个具体实例是N-羟基 苯并三唑。另一个实例是N-羟基琥珀酰亚胺。
可在脱水剂的存在下进行偶联反应。羧基和氨基的偶联得到作为副 产物的水，因此脱水剂的存在可用于驱动反应完成。脱水剂还可起到导 致形成活化酯的作用，所述活化酯由上文所述的活化酯中所用的羧基和 羟基化合物形成。脱水剂的一个实例是碳二亚胺。具体实例是EDAC、 N-乙基-N，-(3-(二曱基氨基)丙基)碳二亚胺盐酸盐。碳二亚胺也可通过形 成O-醜基异脲化合物来起到羧基活化剂的作用。
可在碱(例如有机碱)存在下进行偶联反应。 一个实例是N-甲基吗 啉。碱可起到清除硼-脯氨酸盐中质子的作用。
用于偶联反应的合适溶剂包括非羟基和非氨基有机溶剂，例如二氯 甲烷或N，N-二甲基甲酰胺。
所述反应可以在任意合适的温度下进行，例如在约0'C-约5'C，例 如在二氯甲烷中；或者在约15。C-约25'C,例如在二甲基甲酰胺中。在 这些温度下可反应几个小时以完成反应。可利用本领域中众所周知的技术(例如高效液相色镨(HPLC))来监测反应进程。
式(II)或(V)的羧酸盐包括反离子M+。阳离子M+可以是金属 离子或者取代或未取代的铵离子。例如，M+可以是钠离子。或者，M+ 可以是烷基取代的铵离子，例如二环己基铵离子。
在多个实施方案中，所述化合物或所述化合物组(例如用在本发明 方法的那些)可以是上文所列举实施方案的任意组合和/或亚组合中的 任意一种。
因此，本发明提供了式(II-Cbz-Na)化合物，其中M+是钠 两个BP基团均是Cbz:
子:
<formula>formula see original document page 38</formula>
其可用作制备DPP-IV抑制剂的合成中间体。本发明的该化合物包括具 有所示结构的化合物的立体异构体、互变异构体、水合物和溶剂化物。
的支持。对于分子式，计算值为C22H23N206Na.H20 ，理论值为C (58.40%)、 H(5.53%)、 N (6.19%)、 Na (5.09%)。实测的元素组成百分 率为C (58.17%)、 H(4.91%)、 N(6.00%)、 Na (5.92%)。钠含量支持所 述结构是钠盐而不是游离羧酸，虽然在某些实例中当通过本发明方法制 备钠盐时可存在少量的最高达约20%的游离羧酸。残留的钠盐(例如氯 化钠)可存在于本发明方法制备的晶体物质中，如下文所述，这解释了 在上文分析中所检测到的稍高的钠含量。NMR谱也与所提出的结构一 致。发现所分离的晶体形式是高度可溶于水的，符合钠盐结构。
式(II-Cbz-Na)化合物可在手性碳原子上具有(R)-构型，其中3-氨基与吡咯烷环键合。因此，本发明还提供了(R)-立体异构体，即式(V-Cbz-Na)化合物(其中两个PG基团均是Cbz， M+是钠离子)
(V-Cbz-Na)
以及制备该钠盐的(R)-立体异构体的方法。
本发明还提供了式(V-Cbz-Na)化合物的晶体形式，其中所述晶体形 式可容易地在pH约5.5-6.5下利用有机溶剂W目应酯(其可以是甲酯)的 碱7jC解反应混合物中萃取而回收。所述晶体形式已通过DSC (见图1)和 X射线粉末衍射(XPD )(见图2 )以及溶'絲子NMR镨(见图3 )进行 了^^征，其通常可以至少约70。/。的收率以及至少约卯％的纯度而回收。 DSC图显示在约178°C (所述物质的熔点)具有尖的吸热峰。XPD图包括 选自具有以下近似值的极大20值9.57、 11.25、 14.37、 16.34、 16.72、 16.96、 17.34、 18.38、 18.61、 18.97、 19.29、 19.51、 20.34、 21.07、 21.24、 21.81、 22.54、 23.11、 23.45、 24.41、 25.33、 25.82、 27.10、 28.02以及29.97度。
晶体形式可包含少量的游离羧酸，例如约5-10%、或高达约20%的 游离羧酸。所述晶体形式是以盐形式从皂化反应水相(其已经调节到 pH约5.5-7.5 )中萃取出来以后再以有机溶剂结晶而出乎意料地得到的。 在所述pH下将所述盐形式萃取到有机溶剂中是意料不到的，因为羧酸 盐是离子型化合物，通常被分配到水相中。从所述过程中回收晶体形式 也是意料不到的，因为在其它实验中发现钾盐、铯盐和四甲基胍盐以及 游离酸形式都是非晶体腊状固体或油，其不适于通过重结晶纯化并且难 于大规模处理。就合成中间体而言，钠盐的晶体形式具有特别有利的性 质，因为其可容易地纯化，例如通过结晶，并且晶体形式作为相对稳定、 易于流动的粉末存在，而不是腊或油。当进行大规模合成DPP-IV抑制 剂时这是有利的。
不希望受到理论的约束，认为将钠盐形式萃取到有机溶剂(例如二氯甲烷)中的发生至少部分归因于所述亲脂性羧酸钠盐的表面活性剂性
质，使得二-Cbz-吡咯烷-3-基-甘氨酸钠盐可以胶束形式被萃取到有机溶 剂中，除了有机羧酸盐以外，所述胶束还可包含水和氯化钠。浓缩萃取 物，然后将残留物溶解在可溶解大量水的醚(例如MTBE、 THF或乙 醚)、醇(例如异丙醇)中，这导致二-Cbz-吡咯烷-3-基-甘氨酸钠盐从 醚或醇溶液中结晶出来。
式(II)化合物的晶体形式可在手性碳原子上具有(R)-构型，其中 3-氨基与吡咯烷环键合。当使用合适的手性原料时，通过本发明方法回 收的晶体形式是式(V-Cbz-Na)的(R)-立体异构体。
式(V-Cbz-Na)化合物的晶体形式是以高收率得到的，并且容易纯 化。因此，其适合用作用于医疗用途的DPP-IV抑制剂制备中的中间体 并且是有利的，因为晶体形式容易纯化，因此得到纯度较高的最终药物 物质，而且因为固体晶体物质与粘性油或腊状固体相比更容易大规模处 理。
本发明的晶体形式可由氢氧化钠介导的羧酸曱酯(II-Cbz-E)或其 立体化学纯的(R)形式(V-Cbz-E)皂化的反应混合物得到
在碱条件下(例如在pH约13)之后，所述甲酯发生皂化形成式 (II-Cbz-Na)的钠盐。出乎意料地，将反应混合物的pH调节到约5.5-7.5 之后，可溶于水的式(II-Cbz-Na )化合物或立体化学纯的式(V-Cbz-Na) 的(R)形式也可被萃取到二氯甲烷中。可利用约l-2N的盐酸调节pH。 在对调节pH后的混合物进行首次萃取之后，可在随后进行有机萃取时 调节pH以维持在约5.5-7.5的值。优选地，利用有机溶剂萃取pH为 5.5-7.5的水溶液至少两次。
(II-Cbz-E )。可通过蒸发而浓缩式(II-Cbz-Na )钠盐的有机(例如二氯甲烷)溶 液。然后，将残留物加到醚中，例如可将残留物加到曱基叔丁基醚中。 或者，可使用乙醚。可添加其它溶剂，例如THF或异丙醇。在加入醚 或乙醇后的任意情形下，将混合物静置，由此发生结晶。可通过过滤或 其它合适的技术回收晶体形式，然后干燥。按摩尔计，可得到收率为至 少约70%的式(II-Cbz-Na)或式(V-Cbz-Na )的物质，其纯度适于进 一步精制成DPP-IV抑制剂，如方案1所示。当通过本发明方法制备时， 所分离的钠盐可含有最高约20wt。/。的游离羧酸，例如约5wt。/。或约 10wt。/。的游离羧酸。该物质可不需要进一步纯化而直接用在本文所述的 本发明偶联反应中。
因此，本发明提供了式(II-Cbz-Na)化合物的R-立体异构体，即 式(V-Cbz-Na)化合物(其中M+是钠离子，两个PG基团均是Cbz) 以及制备所述(R)-立体异构体的方法
(V-Cbz-Na )。
可如下进行化合物的全合成将3-氨基吡咯烷的N(l)-Cbz衍生物的合 适的立体异构体与羧甲基化试剂(例如溴乙酸曱酯)偶联，然后，例如 利用氯甲酸节酯将Cbz基团与环外氮偶联；然后进行酯皂化和结晶，如 上文所述。
本发明的另一个实施方案提供了式(II-Cbz-DCHA)化合物，其中 两个PG基团均是Cbz， M+是二环己基铵(DCHA)离子<formula>formula see original document page 42</formula>其可容易地以稳定的晶体形式被分离出来。在另一个实施方案中，提供 了相应的(R)-对映体，即式(V-Cbz-DCHA)化合物<formula>formula see original document page 42</formula>
其可容易地以稳定的晶体形式被分离出来。参照图4和5，分别显示了 本发明晶体形式的式(V-Cbz-DCHA)化合物的差示扫描量热(DSC) 图和X射线粉末衍射(XPD)图。DSC图显示在约156。C (所述物质的 熔点)具有尖的吸热峰。XPD图包括具有选自以下近似极大值的极大 20值:6.16、 7.47、 8.52、 10.51、 14.24、 16.79、 17.13、 17.81、 18.30、 19.03、 20.51、 20.78、 22.43、 23.69、 25.18、 27.07和28.11度。
参照图6和7，提供了溶解在CDCl3中的式(V-Cbz-DCHA)化合 物的溶液NMR镨(分别是质子NMR和碳13 NMR )，其中M+是二环 己基铵离子。
在本发明的一个实施方案中，提供了制备式(V-Cbz-DCHA)化合 物的方法。可利用游离酸与二环己基胺的有机溶液结晶来制备所述二环 己基胺盐。例如，所述有机溶液可包含乙酸异丙酯。所述有机溶液还可 包含四氲呋喃(THF)。通过本发明制备的DCHA盐可含有少量的游离
(II誦Cbz誦DCHA )，羧酸，分离时通常存在约5%-约10%的游离酸。该物质可不需要进一 步纯化而直接用于实施本发明的合成方法。
出乎意料地发现式(V-Cbz-DCHA)化合物的晶体形式高度稳定、 易于处理且容易纯化。例如，未发现羧酸(V-Cbz-A)与其它胺(例如三 乙胺或吗啉)形成的盐具有相当的稳定性或易于处理和纯化。
稳定的、晶体形式的化合物(V-Cbz-DCHA)在大规模制备此类的 DPP-IV抑制剂(例如制备化合物(XIV-T))时尤其有利，因为化合物 (V-Cbz-DCHA)的纯化、处理和分散相对容易。
在多个实施方案中，可将式(II)或(V)的盐用在合成式(XVI) 的DPP-IV抑制剂的方法中，所述式(II )或(V )的盐例如式(II-Cbz-Na) 的钠盐、其式(V-Cbz-Na)的(R)立体异构体或其晶体形式，或者式 (II-Cbz-DCHA)的DCHA盐，其式(V-Cbz-DCHA)的(R)立体异构 体或其晶体形式。盐或者盐的晶体形式可用在方案1所示的偶联反应中，
其中保护的硼脯氨酸衍生物(X)或其盐的氨基可与羧酸盐在适于形成 酰胺键的条件下偶联以提供式(XII)化合物，或其立体化学不完全确 定形式的式(XI)化合物，其在吡咯烷的3-位具有两种手性形式。本发 明方法的多个实施方案可利用多种保护基和反离子。产生化合物(XII) (或(XI))的偶联反应的条件可包括利用羧基活化剂，即可与羧基或 羧酸根基团反应以提供活化形式(例如N-羟基化合物的酯)的试剂。 例如，羧基活化剂可以是N-羟基苯并三唑。这些偶联条件还可包括利 用脱水剂，即以能量有利的方式与水反应并且可起到驱动完成产生水作 为副产物之反应(例如酰胺形成反应)的作用的试剂。例如，所述脱水 剂可以是碳二亚胺，其可与水反应形成脲产物。更具体地，所述碳二亚 胺可以是EDAC。所述偶联条件还可包括在反应混合物中存在碱。碱可 起到清除偶联反应所产生的酸的作用，或将胺游离碱从其相应的盐形式
(V-Cbz-A)中释放出来。所述偶联条件可包括存在合适的有机溶剂，例如二氯甲烷 或二甲基甲酰胺。合适的溶剂不与任意试剂在任何程度上以干扰所期望 的酰胺产物形成的方式进行反应。
更具体地，偶联反应可在适于形成酰胺键的条件下利用式(X)的 (+)-蒗烷二醇保护的硼-脯氨酸环状二酯的盐进行
然后可将偶联产物(XI)或其3-(R)-立体化学纯形式的(XII)部分地 去封闭，通过氢解除去两个N-Cbz基团，在立体化学纯的3-(R)-对映体 的情形下，可通过结晶(例如用四氢呋喃)来任选地纯化氢解产物 (XIV)。如下文所述，可通过在合成上将硼酸根部分去封闭，而将在 吡咯烷3-位上具有两种手性构型的式(XIV)化合物或式(XIII)化合 物进行部分去封闭，分别产生立体化学上确定的化合物(XVI)或化合 物(XV)。
(X)。(XVI)
本发明的一些实施方案涉及式(XIV)化合物的晶体形式和纯化方
法
(XIV )。
本发明的晶体形式(XIV)(称为2(R)-l-口-[(3R)-吡咯烷基氨基乙 酰基卜吡咯烷-2-硼酸(lS，2S,3R,5S)-蒗烷二醇酯)可通过利用四氢呋喃(THF)溶液的重结晶步骤进行纯化。由THF重结晶得到的产物可包 含残留溶剂，甚至在真空干燥之后也是如此，并被认为是化合物(XIV) 的晶体溶剂化物。认为晶体形式的纯度为至少约99% (残留溶剂除外)。 晶体溶剂化物意指晶体形式，其中溶剂分子占据晶体晶胞中空间上确定 的位置。
本发明的一个实施方案提供了晶体形式，其具有本文所述的光谱特 征和物理性质。如图8所示，(XIV)晶体形式的CDCl3溶液的质子核 磁共振(NMR)镨显示所预期的共振，以及由残留THF的存在而造成 的共振。图9显示通过由THF重结晶得到的(XIV)晶体形式的红外 (IR)吸收光镨。在1620cm—1附近观察到酰胺键的强的羰基带。图10 显示所述晶体形式的差示扫描量热(DSC)图。在约157'C观察到强的 单一吸热峰。图ll显示由晶体形式得到的X射线粉末衍射图。在26值 为约7、 12、 14、 16、 18和21。观察到强的散射峰。
本发明的一个实施方案提供了制备本发明晶体形式的方法。所述方 法包括由四氢呋喃结晶产物的步骤。在所述实施例中，给出以下示例性 方法用于粗物质的合成及其纯化用THF进行结晶；提供本发明的晶 体形式的化合物。
当将硼酸根保护成化合物(XII)或其手性形式即化合物(XI)的 二酯或环状二酯时，然后可将所述分子完全去封闭，例如通过酸催化水 解或酯交换作用。例如，当硼酸根封闭基团是环状蒎烷二醇二酯时，其 可在苯基硼酸存在下除去，如方案2所示。最终产物可以L-酒石酸盐 (XIV-T)形式分离和纯化。方案2
<formula>formula see original document page 47</formula>
根据本发明方法制备的完全去封闭的吡咯烷-3-基甘氨酰基-硼-脯氨 酸(XVI)可用于治疗不良状况，或可被转化成稳定的盐例如柠檬酸盐 或酒石酸盐(例如化合物(XVI-T)),然后用于治疗不良状况。
本发明的一个实施方案提供了治疗患者的不良状况的方法，其中所 述不良状况可以是糖尿病或葡萄糖代谢障碍，或其中对DPP-IV的抑制 是有医学上指征的，包括以足以向患者提供有益作用的剂量、频率以及 时间来向患者施用式(XV)或(XVI)的化合物或其盐，其中式(XV) 或(XVI)化合物或其盐是分别由式(II)或式(V)化合物或晶体形 式制得的，或者根据本发明的方法制备的。
虽然为了本领域技术人员制备和使用已经足够详细地描述和举例 说明了本发明，但是在不背离权利要求的精神和范围的情形下，多种替 代、变动和改进对本领域技术人员而言是显而易见的。
实施例
缩写Cbz千氧羰基
EDACN-乙基-N，-(3-(二甲基氨基)-丙基)碳二亚胺盐酸盐
HOBtN-羟基苯并三唑
MTBE曱基叔丁醚，曱基叔丁基醚
匪MN-曱基吗啉
THF四氢呋喃
h小时
miii分钟
实施例1
Cbz < bz
O
将(R)-(+)-3-氨基-l-Cbz-吡咯烷盐酸盐(1.0kg)置于反应器中。将 甲基叔丁基醚(3.0 kg ± 5% <=> 4.1 1±5% )置于所述反应器中，利用一 部分曱基叔丁基醚沖洗(R)-(+)-3-氨基-l-Cbz-吡咯烷盐酸盐的加料系 统，将冲洗液加入到反应器中。将预先通过将碳酸钾(2.6kg±l%)溶 解在工业用水(5.0 1 ± 5%)中而制得的溶液加到所述反应混合物中， 同时将温度维持在15-25'C。将混合物的温度冷却至10-0'C。将溴乙酸 甲酯(0.9 kg 士 1% <=> 0.6 1 ± 1% )加到反应器中，同时将温度维持在0-10 。C。利用甲基叔丁基醚(0.2kg±5%<=>0.31±5%)冲洗溴乙酸甲酯的 加料系统，将沖洗液加入到反应器中，同时将温度维持在0-10'C。在 20-25。C的温度下加热混合物。在20-25。C的温度下搅拌混合物至少4小 时，直到(R)-(+)-3-氨基-l-Cbz-吡咯烷盐酸盐的含量小于或等于通过 HPLC检测的5%面积。直接将所述溶液用在下一反应中。<formula>formula see original document page 49</formula>O
将上述反应的混合物冷却至10-0。C。将氯甲酸节酯(0.7kg土l。/oG 0.6 1 ± 1% )加到反应器中，同时将温度维持在0-14。C。利用甲基叔丁 基醚(0.2kg±5%<=>0.31±5%)冲洗氯甲酸节酯的加料系统，将冲洗 液加入到反应器中，同时将温度维持在0-14。C。在20-25'C的温度下加 热混合物。在20-25'C的温度下搅拌混合物至少1小时，直到原料含量 小于或等于通过HPLC检测的1%面积。将工业用水(3.0 1 ± 5%)加 到反应混合物中，将温度维持在15-25X3。在15-25X:的温度下搅拌至少 30分钟。停止搅拌，分层至少30分钟。倒出水相(下面的相)弃掉。 将工业用水(2.0 1±5%)加到有机相中，将温度维持在15-25X:。在15-25 匸的温度下搅拌至少30分钟。停止搅拌，分层至少30分钟。倒出水相 (下面的相)弃掉。将预先用工业用水(1.51土5。/o)稀释盐酸(0.59kg ±1%<=>0.511±1%)而制得的溶液加到有机相中，同时将温度维持在 15-25'C。在15-25t:的温度下搅拌至少30分钟。停止搅拌，分层至少 30分钟。倒出水相(下面的相)弃掉。将预先用工业用水(1.51±5%) 稀释盐酸(0.59 kg ± 1% <=> 0.511 ± 1% )而制得的溶液加到有机相中， 同时将温度维持在15-25。C。在15-25匸的温度下搅拌至少30分钟。停 止搅拌，分层至少30分钟。倒出水相(下面的相)弃掉。
实施例3
<formula>formula see original document page 49</formula>将之前通过利用工业用水(2.5 1 ± 5% )稀释氢氧化钠(20% w/w ) (2.5kg ± 1% O 2.1 1 ± 1% )而得到的溶液加到有机相中，同时将温度 维持在15-45°C。将混合物加热至回流温度并维持回流，直到原料的含 量小于或等于通过HPLC检测的1。/。面积。将混合物冷却至25。C至15'C 的温度。停止搅拌，分层至少30分钟。将下面的两相转移到接收器中。 注在此阶段有三相，产物在下面的两相中。倒出有机相(上面的相) 弃掉。将甲基叔丁基醚(2.0kg±5%^>2.71±5%)加到下面的两相中， 同时将温度维持在15-25'C。在15-251C的温度下搅拌至少20分钟。停 止搅拌，分层至少30分钟。将下面的两相转移到接收器中。注在此 阶段有三相，产物在下面的两相中。倒出有机相(上面的相)弃掉。将 甲基叔丁基醚(2.0kg±5%o2.71±5%)加到下面的两相中，同时将 温度维持在15-25。C。在15-25n的温度下搅拌至少20分钟。停止搅拌， 分层至少30分钟、。将下面的两相转移到接收器中。注在此阶段有三 相，产物在下面的两相中。倒出有机相(上面的相)弃掉。将工业用水 (4 ± 5% 1)加到有机相中，同时将温度维持在15-25。C 。将工业用水(5 ± 5% 1)加到混合物中，同时将温度维持在15-25'C。将温度稳定在在 20-25'C。利用2N的HCl调节pH至5.7-5.9之间。在20-25匸的温度下 搅拌混合物至少15分钟。将二氯甲烷(9.8kg ± 5% <=> 7.5 1 ± 5% )加到 水相中，同时将温度维持在20-25'C。在20-25t:的温度下搅拌混合物至 少20分钟。停止搅拌，分层至少30分钟。将有机相(下面的相)转移 到接收器中。产物在有机相中。水相(上面的相)保留在反应器中。再 次利用2N的HC1调节水相的pH至5.7-5.9。将二氯甲烷(9.8kg ± 5% <=> 7.5 1 ± 5%)加到水相中，同时将温度维持在20-25'C。在20-25匸的温 度下搅拌至少20分钟。停止搅拌，分层至少30分钟。取水相样品用于 HPLC分析。将有机相(下面的相)转移到接收器中，并与之前的有机 相合并。注产物在有机相中。倒出水相(上面的相)弃掉。在低于或 等于25"C的温度下于真空下浓缩合并的有机相，直到残留物为11 ±5% (约2.3kg ± 5% )。将甲基叔丁基醚(11.8kg ± 5% 0 16 1 ± 5% )加到 混合物中。在60-70"C的温度下回流混合物以除去所有水。注优选在 651C的温度下回流混合物，通常除去约1.2倍体积的水。
将THF ( 3.6kg ± 5% <=> 4 1 ± 5% )加到混合物中，同时将温度维持 在低于或等于25'C。在60-70n的温度下回流混合物1小时。在15-25"C的温度下冷却混悬液至少2小时。在15-20匸的温度下搅拌所述混悬液至少1小时。过滤混悬液。利用THF ( 0.9kg ± 5% <=> 11 ± 5% )清洗湿滤饼。在低于40匸的温度下于真空中干燥固体，直到得到5。/。(w/w)的卡尔费休(Karl Fischer)试验结果。
实施例4
式(II)化合物的分离一方法A
在利用NaOH水解相应的甲酯并用MTBE清洗有机层后将产物分离。浓缩混合物以除去残留的溶剂(T《40'C),利用2N的HC1调节pH至5.9。溶液用CH2Cl2萃取两次，在第一次萃取后将pH调节至相同的值。浓缩有机相得到残留物，加入MTBE。将混合物回流几小时以除去水，加入THF，将混合物在65。C回流1小时，冷却至室温，搅拌l小时，过滤沉淀。产物高度溶于水，用去离子水以1:1的重量比溶解。其也溶于甲醇和乙醇，但是不溶于乙酸乙酯或甲苯。其在二氯甲烷中有一定的溶解。产率70%。 DSC图和X射线粉末图分别显示在图1和2中。溶液质子NMR语显示在图3中。
实测值C (58.17%), H (4.91%), N (6.00%), Na (5.92%)。
一水合物的理论值C (58.40%)， H (5.53%)， N (6.19%), Na(5.09%)。
实施例5
式(II)化合物的分离一方法B
在利用氢氧化钠水解曱酯并用MTBE清洗碱相(pH约13)后，利用IN的HC1溶液调节pH至约6。水相用CH2Cl2萃取，有机相用磷酸钠干燥。浓缩有机相得到残留物，用乙醚和异丙醇稀释所述残留物。5分钟后，加入THF，搅拌混合物约5分钟。停止搅拌，混合物放置过夜。第二天早晨观察到大的晶体，通过过滤将其回收。
实施例6
式(II)化合物钠盐与硼-脯氨酸酯(IV)的偶联
向盛有100mL二氯甲烷的500mL圆底烧瓶中加入13.8g硼-脯氨酸蒎烷二醇酯和7.8g 1-羟基苯并三唑。将溶液的温度维持在15-25'C，同时加入18.6mLN-甲基吗啉。然后，加入20g式(II)化合物在38mL二氯甲烷中的溶液，同时将反应温度维持在0-5。C,然后加入10.2g N-(3-二曱基氨基丙基)-N，-乙基碳二亚胺盐酸盐在50mL二氯曱烷中的溶液。在0-5'C搅拌反应混合物4小时。然后在旋转蒸发仪上浓缩溶液，将残留物在262mL乙酸乙酯和111.4g 7。/。碳酸氢钠水溶液之间进行分配。在20-25。C搅拌20分钟后，使相分离10分钟，利用另外的53.6g 7%碳酸氢钠水溶液清洗有机相，然后利用7g柠檬酸在80mL水中的溶液进行清洗。分离有机相，在低于约35'C的温度和真空下在旋转蒸发仪上除去溶剂。然后将残留物溶解在140mL甲醇中，并转移到氢化瓶中，向其中加入1.6g 5%的把碳。利用氢气吹洗6次后，将瓶在氢气下于28-30'C下振摇过夜。然后通过60g纤维素和34g硫酸钠过滤所述溶液，然后利用甲醇清洗。在约20-35"C的温度下于真空下将滤液浓缩至约40mL的体积。然后，加入158mL乙酸乙酯，再次在约20-35X:的温度下于真空下浓缩溶液，重复所述步骤得到18.28g (100%)产物，其中Ra和
Rb与硼原子一起是环状蒗烷二醇硼酸二酯。
实施例7
向(R)-(+)-3-氨基-l-Cbz-吡咯烷盐酸盐(l.Okg)在MTBE ( 3.0kg)中的溶液中加入之前制备的碳酸钾(2.6kg)水溶液(5.0L)，同时将温度维持在15-25'C。然后将混合物冷却至10-0。C，然后将溴乙酸曱酯加到混合物中。然后将混合物温热至20-25°C，然后在此温度下搅拌约4小时。将反应混合物直接用于下一步中。<formula>formula see original document page 52</formula>Cbz
K2C03(在水中) ,N、
(两相) N\ ,0、
0
将氯甲酸千酯(0.63kg)加到上述步骤的反应混合物中，同时将反应温度维持在0-14'C。然后将反应混合物温热至20-25'C，并搅拌至少1小时。然后，加水(3.0L)，将温度维持在15-25'C。然后在此温度下搅拌混合物至少30分钟。停止搅拌，使混合物静置至少30分钟。然后，弃掉水层(下层)，另外加入2.0L水。再次搅拌混合物至少30分钟，静置30分钟，弃掉水层(下层)。然后，加入盐酸(0.59kg-0.51L)在水(1.5L)中的溶液，搅拌混合物30分钟，停止搅拌，使相分离，弃掉水层(下层)。重复此盐酸萃取1次。将反应混合物直接用于下一步中。
Cbz CbzN、 NaOH(在水中) 力、
Cbz、|/ n ，个 Cbz、r/ ，J。
'\ ,0(两相) IN\ ,0 Na
0 0
将之前制备的20%氩氧化钠(2.5kg=2.1L)在水(9.5L)中的溶液加入到之前反应得到的反应混合物中，同时将温度维持在15-45°C。将混合物加热至回流30分钟，然后冷却至15-25°C。将反应混合物静置30分钟，发生相分离。分离出下面的相(水相)并保留，弃掉有机相(上面的相)。可存在明显的第三层，应将其与下面的相(水相) 一起取出。利用MTBE清洗水相3次，每次2.0L,每次保留水层(下层)与任何明显的第三相(或乳液层)，同时弃掉有机层(上层)。将保留的溶液或混悬液直接用于下一步中。<formula>formula see original document page 54</formula>
将浓盐酸(1.2kg=1.0L)加入到之前步骤得到的水相中，同时将温度维持在15-34。C。然后将温度稳定在15-25。C,加入乙酸异丙酯(7.0L)。然后利用浓盐酸(约0.3L)将水相的pH调节至约0.7-1.3，同时将温度维持在15-25。C。搅拌混合物30分钟，然后在15-25'C静置30分钟。分离出有机相(上面的相)并保留，必要时利用浓盐酸(约0.3L)将水相(下面的相)的pH调节至约0.7-1.3，再次利用乙酸异丙酯(7.0L)萃取，将混合物在15-25。C搅拌30分钟，并静置30分钟。再次分离出有机相(上面的相)，并与之前的有机相合并。通过HPLC检测乙酸异丙酯溶液中游离羧酸的浓度(C )，测定溶液的总重量(W )。利用另外的乙酸异丙酯将合并的有机相的体积调至18L，然后在搅拌下加入四氢呔喃(l.OL )和二环己基胺((K615xCxW kg )。将混合物在25-35'C搅拌6小时，然后冷却至15-25'C，静置至少2小时。然后，过滤沉淀，利用预冷却的(15-25'C)乙酸异丙酯(0.8L)和四氢呋喃(0.2L)的混合物清洗滤饼，然后在低于35。C的温度下于真空下干燥，以提供基本上纯的l-Cbz-吡咯烷基-N-Cbz-甘氨酸二环己基铵盐。该DCHA盐的DSC扫描显示在图4中，X射线粉末衍射图显示在图5中，溶液质子NMR镨显示在图6中，溶液"CNMR镨显示在图7中。
实施例8Cbz、N
H.HCI ^ 'N、』
1. N-曱基-吗啉
蔡基苯并三峻 在匿中
CbzN
将l-Cbz-吡咯烷基-N-Cbz-甘氨酸二环己基铵盐(l.Okg，以游离 酸计)、l-羟基苯并三唑(0.454kg )、蒎烷二醇保护的硼-脯氨酸(0.765kg) 和N,N-二甲基曱酰胺(3.0L)于15-25'C下混合至少30分钟至均匀，然 后加入EDAC (0.519kg)，然后加入N-曱基吗啉(0.912kg=0.209L )， 将反应温度始终维持在15-25°C。在相同温度下再搅拌4小时。然后， 向反应混合物中加乙酸乙酯(7.0L)和去离子水(IO.OL)，同时将反应 温度维持在15-25C。搅拌混合物20分钟，使相分离，排出水层(下层) 并弃掉。再加入10.0L去离子水，重复萃取。然后，加入之前制备的碳 酸氢钠(0.37kg)在去离子水(5.2L)中的溶液，在15-25。C搅拌混合 物，使相分离，排出7jC相(下层)并弃掉。加入另一份在去离子水(2,5L) 中的碳酸氢钠(0.18kg)溶液，搅拌混合物，使相分离，排出水相(下 层)并弃掉。然后，加入之前制备的在去离子水(4.0L)中的柠檬酸 (0.05kg)溶液，搅拌混合物10分钟，使相分离，排出水相(下层) 并弃掉。利用去离子水(5.0L)清洗有机溶液。在35'C或更低的温度下 于真空下浓缩有机相至最终体积为约1.7L。<formula>formula see original document page 56</formula>
在15-25。C的温度下利用曱醇(7.0L )稀释前述反应得到的浓缩溶 液，然后加入钯碳(5。/。Pd， 0.04kg)，搅拌混合物。然后在约3至约9 巴(约45至约135psi)的压力下引入氢气，搅拌混合物直到起始原料 的含量小于0.4% (GC分析)。通过置于0.45微米滤器上的纤维素 (10.0kg)和无水石危酸钠(0.4-1.7kg)的床层过滤反应混合物，然后用 甲醇(1.3L)清洗过滤床层。在不超过35'C的温度下于真空下浓缩曱醇 溶液至最终体积为约2.0L。然后加入四氬呋喃(7.9L)，在不超过35。C 的温度下于真空下浓缩溶液至最终体积为约2.0L。如果曱醇含量超过 0.5%,则加入THF并反复蒸馏。然后，将溶液冷却至约-5。C至约-10'C， 搅拌至少30分钟。通过过滤收集所沉淀的产物，利用冷THF((K3L) 清洗滤饼，然后在约40'C真空干燥约8小时。<formula>formula see original document page 56</formula>在低于30。C的温度下将上述反应得到的产物(l.Okg,以干重计) 和L-酒石酸(0.4kg)的水溶液(2.0L )混合30分钟，然后加入苯基硼 酸(0.33kg )和MTBE ( 5.0L )。在15-25。C搅拌混合物2小时，然后停 止搅拌，使相分离。排出有机层(上层)并弃掉。向水层中加入另外5.0L MTBE,搅拌混合物10分钟，然后使相分离15分钟。排出有机层，再 重复MTBE萃取3次，每次用5.0LMTBE。然后，在约35-50。C的温度 下于约0.1-0.2巴压力的真空下除去残留的溶剂。然后通过孔隙不大于 0.22微米的绝对滤器(absolute filter)将水溶液加到喷雾干燥器中以提 供吡咯烷-3-基甘氨醜基硼脯氨酸产物的酒石酸盐。实施例9
化合物(XIV)的结晶
将化合物(XIV) (1.0kg)置于反应器中，然后加入21.4至24L 的THF。在40-45。C加热混合物至少2小时以溶解固体。然后，在不超 过45。C的温度下于真空下浓缩混合物直到化合物(XIV)的量达到 4.2-4.5体积，然后将混合物冷却至18-20'C，搅拌至少2小时。过滤出 沉淀的固体，利用预先冷却至18-22。C的THF (0.89kg)清洗滤饼。在 不超过40'C的温度下于真空下干燥所述滤饼直到干燥失重小于2% (w/w)。认为产物的纯度为至少99% (所包含的THF除外)。
实施例10
化合物(XIV)向化合物(XVI)的转化
将纯度为至少99%的晶体形式的化合物(XIV)置于反应器中， 然后加入酒石酸(0.4kg)和纯化水(2.0L)。在不超过30。C的温度下搅 拌所得混合物至少1小时。然后，加入苯基硼酸(0.33kg)和MTBE (3.7kg)，在15-25'C下搅拌混合物至少2小时。通过HPLC分析所述 混合物直到原料剩余量小于0.5%。然后，停止搅拌，使所述层分离至 少15分钟，弃掉有机层(上层)。然后加入MTBE (3.7kg)，搅拌混合 物10分钟，使相分离至少15分钟。弃掉有机层(上层)，利用MTBE 反复萃取两次，在每个步骤中保留水层(下层)。过滤水溶液并于35-50'C 下在-0.8至-0.9巴的真空下保持2小时以除去痕量溶剂。将溶液转移到 冷冻干燥机的托盘或喷雾干燥机中，通过冷冻干燥或喷雾干燥除去水。 得到酒石酸盐形式的化合物(XVI)。通过HPLC测定的纯度超过99%。
权利要求
1.一种制备式(I)化合物的方法其中PG各自独立地是氮保护基，以及Ra和Rb各自是羟基或其盐，或者是可转化成羟基或其盐的基团，或者Ra和Rb与它们所连接的硼原子一起形成可转化成B(OH)2或其盐的环状结构；所述方法包括使式(II)的羧酸盐其中M是阳离子，与式(III)的受保护的硼-脯氨酸或其盐在适于形成酰胺键的条件下相接触，以提供式(I)化合物。
2.权利要求l的方法，其中所述式(I)化合物是式(IV)化合物:<formula>formula see original document page 3</formula>所述方法包括使包含式(V)化合物的式(II)羧酸盐<formula>formula see original document page 3</formula>与式(III)的受保护的硼-脯氨酸或其盐<formula>formula see original document page 3</formula>在适于形成酰胺键的条件下相接触，以提供式(IV)化合物。
3.权利要求l的方法，其中所述式(I)化合物是式(VII)化合物:<formula>formula see original document page 3</formula>所述方法包括:使包含式(V)化合物的式(II)羧酸盐<formula>formula see original document page 4</formula>与包含式(IX)化合物的式(III)的受保护的硼-脯氨酸或其盐<formula>formula see original document page 4</formula>在适于形成酰胺键的条件下相接触，以提供式(VII)化合物。
4. 权利要求l-3中任一项的方法，其中PG是千SJ^羰基(Cbz)。
5. 权利要求l-4中任一项的方法，其中M+是金属离子或者取代或未 取4戈的铵离子。
6. 权利要求l-5中任一项的方法，其中M+是钠离子或二环己基铵离子。
7. 权利要求l-6中任一项的方法，其中Ra和Rb与它们所连接的硼原 子一起形成可转化成B(OH)2或其盐的环状结构。
8. 权利要求7的方法，其中所述环状结构包括单萜二醇的环状硼酸二酯。
9. 权利要求8的方法，其中所述环状结构包括蒗烷二醇的环状硼酸二酯。
10. 权利要求l-9中任一项的方法，其中所述适于形成酰胺键的M 包括在有机溶剂中存在羧基活化剂和脱水剂。
11. 权利要求10的方法，其中所述羧基活化剂包括iV-羟基化合物。
12. 权利要求ll的方法，其中所述7V-羟基化合物包括7V-羟基苯并三峻。
13. 权利要求10-12中任一项的方法，其中所述脱水剂包括碳二亚胺。
14. 权利要求13的方法，其中所述碳二亚胺包括7V-(3-二曱基氨基丙 基HV，-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDAC )。
15. 权利要求10-14中任一项的方法，其中所述有机溶剂包括二氯甲 烷或二甲基甲酰胺。
16. 权利要求1-15中任一项的方法，其中所述适于形成酰胺键的4Hf 包括存在有机喊。
17. 权利要求16的方法，其中所述有机碱包括iV-甲基吗啉。
18. 权利要求l-3中任一项的方法，其中PG在每种情形下是爷M羰 基(Cbz)， M+是钠离子，Ra和Rb以及它们所连接的硼原子一起形成落 烷二醇硼酸二酯，所述适于形成酰胺键的条件包括在二氯甲烷中存在l-羟基苯并三唑、AL甲基吗啉以及tV-(3-二甲基氨基丙基)-tV，-乙基碳二亚胺 盐酸盐
19. 权利要求18的方法，其中所述条件包括约0'C至约5。C的温度。
20. 权利要求l-3中任一项的方法，其中PG在每情形下是千lL^羰 基(Cbz)， M+是二环己基铵离子，Ra和Rb以及它们所连接的硼原子一 起形成蒗烷二醇硼酸二酯，所述适于形成酰胺键的条件包括在二甲基曱酰 胺中存在1-羟基苯并三唑、7V-曱基吗啉以及iV-(3-二甲基氨基丙基)-iV，-乙 基碳二亚胺盐酸盐。
21. 权利要求20的方法，其中所述条件包括约15。C至约25。C的温度。
22. 包含式(II-Cbz-Na )化合物<formula>formula see original document page 6</formula>的权利要求l的式(II)化合物，包括其立体异构体、互变异构体、溶 剂化物和水合物。
23.包含式(V-Cbz-Na )化合物的权利要求2或3的式(V)化合物，包括其立体异构体、互变异构体、 溶剂化物和水合物。
24. 权利要求22或23的化合物的晶体形式，包括其立体异构体、 互变异构体、溶剂化物和7JC合物，其特征在于基本上如图1所示的DSC， 基本上如图2所示的X射线粉末衍射图以及基本上如图3所示的溶液质 子醒R镨。
25. 权利要求24的晶体形式，其(R)-构型的立体化学纯度为至少约 80wt%，或至少约90wtV。，或至少约95wt。/。，或至少约98wt。/。，或 至少约99wt%。
26. 权利要求22或23的化合物或者权利要求24或25的晶体形式， 其是通过包括在pH约5.5-7.5的水性介质中利用不与水混溶的溶剂进行(V-Cbz-Na)萃取的方法制备的。
27. 权利要求22或23的化合物或者权利要求24或25的晶体形式， 其差示扫描量热的吸热峰在约1781C ，或者X射线粉末衍射的20极大值 为约9.57、 11.25、 14.37、 16.34、 16.72、 16.96、 17.34、 18.38、 18.61、 18.97、 19.29、 19.51、 20.34、 21.07、 21.24、 21.81、 22.54、 23.11、 23.45、 24.41、 25.33、 25.82、 27.10、 28.02以及29.97度,或者二者皆满足。
28. —种制备权利要求22或23的化合物或者权利要求24或25的 晶体形式的方法，所述方法包括从水性皂化反应的不与水混溶有机溶剂 的萃取物中回收所述化合物或所述晶体形式，所述水性皂化反应预先已 将高pH调节至约5.5-7.5。
29. 权利要求28的方法，其中所述约5.5-7.5的pH是约5.7至约5.9。
30. 权利要求28的方法，其中所述水性皂化反应是下式酯的氢氧化钠 急化反应其中R包括低级烷基或芳基。
31. 权利要求30的方法，其中R是甲基或乙基。
32. 权利要求28的方法，其中所述萃取物是利用二氯曱烷得到的。
33. 权利要求32的方法，其还包括除去二氯甲烷以提供残留物以及将 醚加到所述残留物中。
34. 权利要求33的方法，其中所述醚包括MTBE、 THF或乙醚。
35. 权利要求33或34的方法，其中式(II)的晶体形式是通过结晶 从醚中回收的。
36.权利要求22或23的化合物或者权利要求24或25的晶体形式，或者通过权利要求28-35中任一项的方法制备的化合物，其还包含最高约20%的式(II-Cbz-A)的游离羧酸<formula>formula see original document page 8</formula>
37.包含式(II-Cbz-DCHA)化合物<formula>formula see original document page 8</formula>的权利要求l的式(II)化合物，包括其立体异构体、互变异构体、溶剂化物和水合物。
38.包含式(V-Cbz-DCHA)化合物<formula>formula see original document page 8</formula>的权利要求2或3的式(V)化合物，包括其立体异构体，互变异构体、溶剂化物和7jC合物。
39. 权利要求37或38的化合物的晶体形式，其特征在于基本上如图4所示的DSC曲线和基本上如图5所示的X射线粉末衍射图。
40. 权利要求39的晶体形式，其(R)-构型的立体化学纯度为至少约80wt %，或至少约90wt %，或至少约95wt %,或至少约98wt %，或至少约99wt%。
41. 权利要求37或38的化合物或者权利要求39或40的晶体形式，其特征在于基本上如图6所示的溶液质子NMR镨和基本上如图7所示的溶液碳-13NMR谱。
42. 权利要求37或38的化合物或者权利要求39或40的晶体形式，其差示扫描量热的吸热峰在约156X:，或者X射线粉末衍射的2e极大值为约6.16、 7.47、 8.52、 10.51、 14.24、 16.79、 17.13、 17.81、 18.30、 19.03、20.51、 20.78、 22.43、 23.69、 25.18、 27.07和28.11度，或者二者皆满足。
43. 权利要求37或38的化合物或者权利要求39或40的晶体形式，其通过下述方法制备，所述方法包括使式(II-Cbz-A)的羧酸<formula>formula see original document page 9</formula>(II-Cbz-A)或式(V-Cbz-A)的羧酸<formula>formula see original document page 9</formula>(V-Cbz-A)与二环己基胺在有机溶剂中相接触，然后收集作为沉淀的所述化合物或所述晶体形式。
44. 一种制备权利要求37的式(II-Cbz-DCHA)化合物的方法，其包括使式(II-Cbz-A)的羧酸<formula>formula see original document page 10</formula>与二环己基胺在有机溶剂中相接触，然后收集作为沉淀的所述化合物。
45. —种制备权利要求38的式(V-Cbz-DCHA)化合物的方法，其包括使式(V-Cbz-A)的羧酸<formula>formula see original document page 10</formula>与二环己基胺在有机溶剂中相接触，然后收集作为沉淀的所述化合物。
46. 权利要求44或45的方法，其中所述沉淀是权利要求39或40的晶体形式。
47. 权利要求44或45的方法，其中所述有机溶剂包含乙酸异丙酯。
48. 权利要求47的方法，其中所述有机溶剂还包含四氢呋喃。
49. 权利要求37或38的化合物或者权利要求39或40的晶体形式，或者通过权利要求44-48中任一项的方法制备的化合物，其还包含高达约20%的式(II-Cbz-A)的游离羧酸<formula>formula see original document page 11</formula>
50. —种使用权利要求22的式(II-Cbz-Na )化合物或权利要求36的式(II-Cbz-DCHA)化合物的方法，其包括使所述各化合物与式(X)化合物，其中Y是合适的反离子<formula>formula see original document page 11</formula>在适于形成酰胺键的条件下相接触，以提供式(XI)化合物<formula>formula see original document page 11</formula>
51. —种使用权利要求23的式(V-Cbz-Na)化合物或权利要求37的式(V-Cbz-DCHA)化合物，或者权利要求24或25或者38或39的各晶体形式的方法，其包括使所述化合物或所述晶体形式与式(X)化合物，其中Y是合适的反离子<formula>formula see original document page 12</formula>(X)在适于形成酰胺键的条件下相接触，以提供式(XII)化合物<formula>formula see original document page 12</formula>(XII )。
52. 权利要求50或51的方法，其中Y包括氯离子。
53. 权利要求50-52中任一项的方法，其还包括分别在适于提供式 (XV)<formula>formula see original document page 12</formula>(XV)或(XVI)<formula>formula see original document page 12</formula>CXVI)的DPP-IV抑制性化合物的条件下使式(XI)或(XII)的化合物完全去封闭。
54. 权利要求53的方法，其还包括将式(XV)化合物或(XVI) 化合物转化为各自相应的柠檬酸盐或酒石酸盐。
55. 权利要求54的方法，其中所述酒石酸盐是L-酒石酸盐。
56. 权利要求50-52中任一项的方法，其还包括分别在适于提供部 分去封闭的式(XIII)或<formula>formula see original document page 13</formula>的化合物的条件下使式(XI)或(XII)的化合物部分去封闭。
57. 权利要求56的方法，其中适于提供所述部分去封闭化合物的条 件包括氢解。
58. 权利要求56的方法，其还包括通过重结晶纯化式(XIII)或 (XIV)的化合物。
59. 权利要求58的方法，其中所述重结晶是从THF中重结晶。
60. 通过权利要求58或59的方法制备的式(XIII)或(XIV)的化合物。
61. —种纯化式(XIII)或(XIV)的化合物的方法，其包括从THF 中重结晶。
62. 通过权利要求61的方法制备的式(XIII)或(XIV)的化合物。
63. 权利要求60或62的化合物，其包含残留的THF。
64. 权利要求60或62的化合物，其特征在于基本上如图8所示的 溶液质子核磁共振(NMR) i普、基本上如图9所示的红外吸收(IR)光 镨，基本上如图IO所示的差示扫描量热(DSC)曲线或基本上如图11 所示的X射线粉末衍射图，或者它们的任意组合。
65. 权利要求56的方法，其还包括使所述部分去封闭的式(XIII)<formula>formula see original document page 14</formula>(XIII)或<formula>formula see original document page 14</formula>(XIV)<formula>formula see original document page 14</formula>(XIV)的化合物完全去封闭，以提供完全去封闭的式(XV)<formula>formula see original document page 15</formula>的化合物。
66. 权利要求65的方法，其还包括使式(XV)化合物或式(XVI) 化合物转化为各自相应的柠檬酸盐或酒石酸盐。
67. 权利要求66的方法，其中用所述酒石酸盐是L-酒石酸盐。
68. 式(XV)、 (XVI)化合物或其盐，其是通过包括权利要求1-21 中任一项之方法的过程合成的，或者是通过利用权利要求22或23化合 物或权利要求24或25的晶体形式或权利要求36或37化合物或权利要 求38或39的晶体形式进行的合成方法合成的。
69. 权利要求68的化合物，其中所述其盐是杼檬酸盐或酒石酸盐。
70. 权利要求68的化合物，其中所述其盐是L-酒石酸盐。
71. 权利要求68的化合物在制备用于治疗糖尿病或其它葡萄糖代 谢障碍的药物中的用途，其包括以为患者有效提供有益作用的剂量、频 率和持续时间向需要这样治疗的患者施用所述化合物。
全文摘要
本发明提供了用于合成二肽基肽酶IV(DPP-IV)选择性抑制剂的方法和中间体。将羧酸盐与硼-脯氨酸衍生物偶联提供保护形式的DPP-IV抑制剂，其可被去封闭以得到药用化合物。所述羧酸盐可以是钠盐或二环己基铵盐的晶体形式。所述抑制剂可用于治疗糖尿病。
文档编号C07D207/00GK101679238SQ200880015066
公开日2010年3月24日 申请日期2008年3月5日 优先权日2007年3月8日
发明者吴振平, 埃米莉娅·P·T·莱唐, 大卫·艾伦·坎贝尔, 朋 王 申请人:芬诺密克斯公司