恩康唑在制备治疗或预防流感病毒感染的药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种恩康唑（Enilconazole）在制备预防或治疗流感病毒感染药物中的应用。首先检测了恩康唑对MDCK细胞的毒性，结果显示恩康唑的最大无毒性浓度为100.0μM。其次，在完全无毒性的浓度范围内测定了恩康唑的抗病毒活性，结果显示这种小分子化合物具有显著的抗病毒活性，且抗病毒作用呈剂量依赖效应。最后，检测了恩康唑对不同型和亚型的流感病毒的抗病毒活性，结果显示恩康唑可以剂量依赖地抑制所有被检测流感病毒株的复制，表明恩康唑的抗流感病毒活性具有广谱性。因此，本发明披露了恩康唑是一种新型广谱抗流感病毒药物，可以用于制备预防或治疗流感病毒感染的药物。
【专利说明】恩康唑在制备治疗或预防流感病毒感染的药物中的应用
【技术领域】[0001]本发明涉及恩康唑在制备治疗或预防流感病毒感染的药物中的应用，属于医药【技术领域】。
【背景技术】
[0002]流感病毒属于正粘病毒科（Orthomyxoviridae),流感病毒属。根据病毒粒子核蛋白（NP)和基质蛋白（M)的抗原特性及基因特性的不同，流感病毒分为A、B、C三型，也称甲、乙、丙三型。A型流感病毒全基因组由8条大小不等的单股负链RNA组成，分别以节段I至节段8命名。病毒基因组全长约13. 6吐，编码10种结构蛋白（？82、？81、？4、撤、册、嫩、皿1、M2、PB1-F2和NS2/NEP)和非结构蛋白（NS1)。根据病毒粒子表面糖蛋白血凝素（HA)和神经氨酸酶（NA)的不同，A型流感病毒可进一步分为17个H(H1-H17)和10个N(Nl-NlO)亚型。人流感病毒主要是H1、H2和H3亚型。而目前危害严重的高致病性禽流感多为H5、H7和H9亚型，其中以H5N1亚型致死率最高。B型流感病毒常引起流感局部流行，不引起世界性流感大爆发，仅在人和海豹中发现。C型流感病毒多以散在形式存在，主要侵袭婴幼儿，一般不引起流感流行，可感染人类和猪。
[0003]流感病毒的整个生活周期需要在细胞质和细胞核内完成。感染的起始是病毒颗粒表面的刺突HA识别和结合宿主细胞表面含唾液酸的受体。唾液酸与次末端半乳糖的连接键，决定了病毒的宿主特异性，该连接键在禽类中为α (2-3),在人类中为α (2_6)。病毒吸附细胞后，细胞通过网格蛋白受体介导的胞饮作用摄入病毒。在细胞内，网格蛋白分子解离，病毒与内涵体融合形成吞噬体，使得病毒粒子周围的PH值下降至5. O左右。在此pH条件下，病毒HA蛋白的构象发生变化，使位于轻链（HA2) N端的融合肽暴露，从而引起病毒囊膜与细胞膜融合。低PH环境也致使大量H+经由M2离子通道进入病毒粒子内部，导致Ml蛋白与vRNPs的解离。两者的共同结果致使病毒粒子的vRNPs释放到被感染细胞的胞浆。vRNPs随后转到细胞核内进行基因组的复制和转录，复制时病毒首先以自身RNA为模板合成互补RNA (cRNA)，然后以cRNA为模板再合成vRNA。转录生成的mRNA由核内转移到胞浆，翻译出病毒的结构蛋白和非结构蛋白。一部分合成蛋白如NP需要重新转移到核内与新生成的vRNA组装成vRNP，vRNP出核后与其余的病毒蛋白开始组装成新的病毒粒子，新生成的子代病毒通过神经氨酸酶（NA)水解细胞表面的糖蛋白，释放N-乙酰神经氨酸，促使病毒粒子从出芽位点释放出来。病毒成熟的最后一步是HA在宿主蛋白酶的作用下裂解为HAl和HA2多肽，这样的病毒粒子才具有感染性，从而开始新一轮病毒的复制。
[0004]流感病毒自20世纪初发现以来已在全球范围内造成五次大流行，十年左右会产生一次暴发流行，在全球范围内造成了巨大的损失。流感流行每年可导致25万~50万例死亡，300万~500万重病例，全球约共有5~15%的人被感染。接种疫苗和使用抗病毒药物是应对流感大流行的重要手段，然而由于流感病毒抗原变异能力强，在大流行前基本上不可能大规模生产疫苗。目前，经美国食品和药物管理局（FDA)批准正式上市的抗流感病毒药物有两类：（1)以金刚烷胺和金刚乙胺为代表的M2离子通道阻断剂。此类药只对甲型流感病毒有预防和治疗作用，研究表明此类药物具有神经毒性等毒副作用，而且由于耐药株的普遍存在，所以CDC建议此类药物不再用于预防流感病毒感染。（2)神经氨酸酶抑制剂，此类药的代表是奥斯他韦和扎拉米韦。此类药物对所有已知的人流感病毒及高致病性禽流感病毒均有效。但是近年来关于奥斯他韦的耐药株却不断有报道。因此，研究并开发新型抗流感病毒药物有重要意义。
[0005]恩康唑，中文别名抑霉唑、烯菌灵；英文名为Enilconazole,英文别名Imazalil ；化学名为I-[2-(2，4-二氯苯基）-2-(2-烯丙基）乙基]-IH-咪唑；商品名包括Freshgard，Fungaflor和Nuzone ;分子量297. 2。农业上主要用于水果的新型杀菌剂、种子处理剂。兽医上主要作为局部抗菌药物。但至今未见到恩康唑抗流感病毒的报道。恩康唑的结构式如下：
【权利要求】
1.恩康唑在制备治疗或预防流感病毒感染的药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述药物是以恩康唑即I-[2-(2，4-二氯苯基）-2-(2-烯丙基）乙基]-IH-咪唑作为药物活性成分，制成任何一种药学上可接受的剂型。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、注射液、缓释制剂、控释制剂或纳米制剂等。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的流感病毒为甲型流感病毒或乙型流感病毒。
【文档编号】A61K31/4174GK103705506SQ201310667452
【公开日】2014年4月9日 申请日期:2013年12月11日 优先权日:2013年12月11日
【发明者】陈绪林, 安利伟 申请人:武汉威立得生物医药有限公司