一种抗肿瘤的药物组合物的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种抗肿瘤的药物组合物，所述药物组合物包含东廧子提取物和药学上可接受的载体。实验结果表明，东廧子提取物对人神经胶质瘤细胞有生长抑制活性。
【专利说明】一种抗肿瘤的药物组合物
【技术领域】
[0001]本发明涉及医药领域，具体来说涉及一种抗肿瘤的药物组合物。
【背景技术】
[0002]神经胶质瘤亦称胶质细胞瘤，是发生于神经外胚层的各种肿瘤，在颅内的各种肿瘤中最为常见，由于神经系统及头部的解剖学特点，神经胶质瘤很少通过脉管系统转移到其他组织，多数为颅内转移。
[0003]目前，对神经胶质瘤细胞的治疗手段包括手术，放疗等，但总体疗效仍不理想，通过手术切除肿瘤组织后，有的高转移性神经胶质瘤细胞甚至可以通过脉管系统转移到远处其他脏器，术后发生远处转移的神经胶质瘤虽然很少见，仅有300例报道，但这些转移的神经胶质瘤细胞常常对放疗，化疗等不敏感，因而难以被根除，隐患时现。因此，临床上需要不断开发新的有效治疗乳腺癌的药物。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种抗肿瘤的药物组合物。
[0005]为了实现本发明的目的，本发明提供东庵子提取物在制备对人神经胶质瘤细胞U87具有生长抑制活性的药物中的用途。
[0006]优选地，所述东庵子提取物是通过下列方法制备的:取东庵子1000克，粉碎，过30目筛，加入无水乙醇300毫升，在40°C、封闭的条件下加热3小时，冷却至室温，过滤，向滤液中加入水，至醇含量为70体积％，在封闭的条件下放置24小时，过滤，在回收滤液中的乙醇后，加入等体积的乙酸乙酯萃取3次，每次乙酸乙酯层的体积都和水层的体积相同，合并萃取后的乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯至恒重，得到6.3克的东庵子提取物。
[0007]优选地，所述药物可以制成片剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、汤剂或散剂。
[0008]本发明还提供一种东庵子提取物的制备方法，该方法包括下列步骤:取东庵子1000克，粉碎，过30目筛，加入无水乙醇300毫升，在40°C、封闭的条件下加热3小时，冷却至室温，过滤，向滤液中加入水，至醇含量为70体积％，在封闭的条件下放置24小时，过滤，在回收滤液中的乙醇后，加入等体积的乙酸乙酯萃取3次，每次乙酸乙酯层的体积都和水层的体积相同，合并萃取后的乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯至恒重，得到6.3克的东庵子提取物。
[0009]本发明还提供一种抗肿瘤的药物组合物，所述药物组合物包含东庵子提取物和药学上可接受的载体。
[0010]优选地，所述东庵子提取物是通过下列方法制备的:取东庵子1000克，粉碎，过30目筛，加入无水乙醇300毫升，在40°C、封闭的条件下加热3小时，冷却至室温，过滤，向滤液中加入水，至醇含量为70体积％，在封闭的条件下放置24小时，过滤，在回收滤液中的乙醇后，加入等体积的乙酸乙酯萃取3次，每次乙酸乙酯层的体积都和水层的体积相同，合并萃取后的乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯至恒重，得到6.3克的东庵子提取物。
[0011]优选地，所述药物组合物可以制成片剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、汤剂或散剂。
[0012]在本发明中，东庵子为藜科沙蓬属植物沙蓬的种子。沙蓬Agr1phyllumsquarrosum(L.)Moq.。
[0013]实验结果表明，东庵子提取物对人神经胶质瘤细胞有生长抑制活性。
【具体实施方式】
[0014]下面通过实施例进一步说明本发明。应该理解的是，本发明的实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。除非另有说明，否则本发明中的百分数是重量百分数。
[0015]实施例本发明提取物的制备
[0016]取东庵子1000克，粉碎，过30目筛，加入无水乙醇300毫升，在40°C、封闭的条件下加热3小时，冷却至室温，过滤，向滤液中加入水，至醇含量为70体积％，在封闭的条件下放置24小时，过滤，在回收滤液中的乙醇后，加入等体积的乙酸乙酯萃取3次，每次乙酸乙酯层的体积都和水层的体积相同，合并萃取后的乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯至恒重，得到6.3克的东庵子提取物。
[0017]实验例
[0018]毒性试验
[0019]急性毒性试验:应用NIH小鼠60只，SPF级，雌雄各半，体重17?24g，进行急性毒性试验。小鼠随机分为两组，每组30只，即对照组和给药组，实验前禁食12小时；将实施例中制备的提取物加入水，使得浓度为3.13g生药/ml，灌胃，灌胃容积为5ml/kg (即单次给药剂量为15.65g生药/kg)，对照组给予等量生理盐水，一天给药2次，给药间隔时间6小时，给药后连续观察14天，并记录小鼠的毒性反应及死亡数。实验结果表明:与对照组比较，给药后小鼠未见明显差异，实验连续观察14天，小鼠全身状况、饮食、饮水、体重增长均正常。选择处死给药组小鼠，显微镜下检查:心、肝、肺、胃内及胸腺等重要脏器，未见异常改变。小鼠口服灌胃本发明的药物LD5(i>15.65g生药/kg，每日最大给药量为31.3g生药/kg/日。本发明的药物用药量为4.39g生药/日/人，成人体重以60kg计，平均用药剂量为0.073g生药/kg/日。按体重计:小鼠(平均体重以21g计)口服灌胃本发明的提取物的耐受量为临床用量的429倍。因此本发明内服的提取物急性毒性低，临床用药安全。
[0020]长期毒性试验:应用SD大鼠，体重200g±10g，雌雄各半。将实施例中制备的提取物加入水制成溶液来进行测试。配制高、中、低三个剂量组，分别为用药量的300、150、75倍，用含2重量％阿拉伯树胶的生理盐水1:1混合。采用灌胃给药方式，连续用药16周(1.0ml/100g体重，每天2次)及停药4周后，结果表明:本发明药物对大鼠的毛发、行为、大小便、体重、脏器重量、血象、肝肾功能、血糖、血脂等指标均无明显影响，脏器肉眼没有发现异样变化和组织学检查结果表明，用药16周及停药4周后，大鼠各脏器均无明显改变。说明本发明内服的提取物对大鼠长期用药后毒性小，停药后也没有异样反应，应用安全。
[0021]试验原理
[0022]MTT法(四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法)是以分析代谢还原四甲基偶氮唑盐为基础的。在体外环境下，活细胞可通过线粒体能量代谢过程中脱氢酶的作用，将黄色的MTT还原为不溶性的蓝紫色的formazan，而死细胞中此酶消失，MTT不被还原。因此，通过测定溶液颜色深浅变化可以反映肿瘤细胞受影响的情况(谭卫东，金红，罗弟祥，等.抗肿瘤药物筛选中MTT法和SRB法的比较[J].天然产物研究与开发，1999，11(3): 17-22.)。MTT法操作简便、敏感，可重复性及信号-噪音比好。
[0023]细胞培养
[0024]取对数生长期的人神经胶质瘤细胞(U87，购自上海信裕生物科技有限公司)，以内含10% (v/v)胎牛血清(fetal bovine serum)的RPM1-1640培养液(购自上海肯强仪器有限公司)稀释为5 X 14个/L的细胞悬浮液，接种于96孔板中，100 μ L/孔，置于37°C、饱和湿度、5% CO2培养箱中培养24h。
[0025]选择实施例中制备的提取物，用DMSO溶解后，用含10% (v/v)胎牛血清的RPM1-1640培养液(购自上海肯强仪器有限公司)100，80，60，40，20，10 μ g/ml六个梯度。将上述含药培养液加入96孔板中，放置于与细胞培养相同条件的培养箱中培养48h，以作为给药组。以加入同量的生理盐水者作为对照组。然后加入MTT染色4小时，采用酶标仪在570nm下测定OD值。数据分析按照以下方法计算:细胞生长抑制率=[1_给药组OD值/对照组OD值]XlOO%
[0026]结果
[0027]对于U87，100, 80，60，40，20，10 μ g/ml六个梯度的细胞生长抑制率分别为
51.2%,46.3%,42.7%,38.3%,33.3%和30.2%。实验结果表明，本发明的提取物体外对于人神经胶质瘤细胞U87具有生长抑制性，并且毒性试验表明毒性较小，适合继续开发以制备新的药物。
【权利要求】
1.东庵子提取物在制备对人神经胶质瘤细胞U87具有生长抑制活性的药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述东庵子提取物是通过下列方法制备的:取东庵子1000克，粉碎，过30目筛，加入无水乙醇300毫升，在40°C、封闭的条件下加热3小时，冷却至室温，过滤，向滤液中加入水，至醇含量为70体积％，在封闭的条件下放置24小时，过滤，在回收滤液中的乙醇后，加入等体积的乙酸乙酯萃取3次，每次乙酸乙酯层的体积都和水层的体积相同，合并萃取后的乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯至恒重，得到6.3克的东庵子提取物。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物可以制成片剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、汤剂或散剂。
4.一种东庵子提取物的制备方法，该方法包括下列步骤:取东庵子1000克，粉碎，过30目筛，加入无水乙醇300毫升，在40°C、封闭的条件下加热3小时，冷却至室温，过滤，向滤液中加入水，至醇含量为70体积％，在封闭的条件下放置24小时，过滤，在回收滤液中的乙醇后，加入等体积的乙酸乙酯萃取3次，每次乙酸乙酯层的体积都和水层的体积相同，合并萃取后的乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯至恒重，得到6.3克的东庵子提取物。
5.一种抗肿瘤的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含东庵子提取物和药学上可接受的载体。
6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述东庵子提取物是通过下列方法制备的:取东庵子1000克，粉碎，过30目筛，加入无水乙醇300毫升，在40°C、封闭的条件下加热3小时，冷却至室温，过滤，向滤液中加入水，至醇含量为70体积％，在封闭的条件下放置24小时，过滤，在回收滤液中的乙醇后，加入等体积的乙酸乙酯萃取3次，每次乙酸乙酯层的体积都和水层的体积相同，合并萃取后的乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯至恒重，得到6.3克的东庵子提取物。
7.根据权利要求5或6所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物可以制成片剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、汤剂或散剂。
【文档编号】A61K36/185GK104382965SQ201410629394
【公开日】2015年3月4日 申请日期:2014年11月10日 优先权日:2014年11月10日
【发明者】朱绪臻 申请人:朱绪臻