实际上是将含药纳米颗粒大量集中在这些器官的免疫细胞中，不可避免地会杀伤免疫细胞，甚至引起更严重的骨髓抑制毒性(白细胞减少)。在实验中发现，本发明中通过引入白蛋白，在药理活性物质表面形成一定的外壳包裹，显著降低了鬼白毒素类药物的骨髓抑制毒性，而且出人意料地发现该白蛋白纳米粒具有明显的肝、肺靶向性，这和我们前期研制的蒽环类抗肿瘤药物白蛋白纳米粒(ZL201010150346.1)的体内分布结果大不一样。
[0020]考虑到已上市的鬼臼毒素类药物如依托泊苷和替尼泊苷本身就对小细胞肺癌、非小细胞肺癌等有良好的疗效，鬼白毒素类药物白蛋白纳米粒具有很好的应用前景。我们还可以进一步在本发明纳米制剂的白蛋白表面修饰一定的配体/抗体，以实现更精确的革巴向。
[0021]专利文献CN1772290A中披露“本发明华蟾酥毒基白蛋白纳米粒制剂，具有缓释性和肝靶向性，有利于华蟾酥毒基治疗”。实际上，加了交联剂，白蛋白被交联剂固化了，已失去白蛋白的立体结构、生理作用，作为普通的纳米粒，进入血液后，由于粒径在50-250nm范围内，会被肝脏的网状内皮系统摄取，达到肝靶向。由于骨髓中的网状内皮系统也很丰富，这种方式通常会增加骨髓抑制。然而，本发明中白蛋白包裹在药物纳米粒的表面上，白蛋白保留了生物活性，其聚集于肝、肺的机理却不一定是被网状内皮系统摄取，但具体机理还需进一步研究。
[0022]本发明的目的之一，提供一种含鬼白毒素类药物的药物组合物，其中包含鬼臼毒素类药物与磷脂形成的复合物及白蛋白，基于重量份计，鬼白毒素类药物I份、磷脂1~50份，白蛋白2~100份；优选地，鬼臼毒素类药物I份、磷脂2~10份、白蛋白5~50份。
[0023]本发明的目的之一，提供一种含鬼臼毒素类药物的磷脂复合物白蛋白纳米粒(制剂)，其中包含鬼白毒素类药物与磷脂形成的复合物及白蛋白，基于重量份计，鬼白毒素类药物I份、磷1~50份，白蛋白2~100份；优选地，鬼臼毒素类药物I份、磷脂2~10份、白蛋白5-50 份。
[0024]本发明所述的含鬼白毒素类药物的药物组合物，等同于含鬼白毒素类药物的磷脂复合物白蛋白纳米粒(制剂)的概念。
[0025]本发明提供的药物组合物或纳米(制剂)的粒径在约10-500nm，优选在100_300nm，更优选为100-200nm左右。
[0026]本发明所述的鬼白毒素类药物，也包括经过亲脂化处理的鬼白毒素类药物及其衍生物。
[0027]本发明所述的鬼臼毒素类抗肿瘤药物或鬼臼毒素类药物具有相同涵义，具体包括鬼臼毒素、替尼泊苷、依托泊苷、依托泊苷盐酸盐、氨基糖依托泊苷、4-脱氧-4-取代芳基胺基表鬼白毒素，4-氨基表鬼白毒素的席夫碱，4-烷胺基表鬼白毒素及其药学上可接受的衍生物(如，盐、酯、前体、水合物等)中的一种或多种混合物。
[0028]本发明所述的磷脂包括天然磷脂、半合成磷脂、合成磷脂或它们的混合物。
[0029]其中，天然磷脂包括蛋黄卵磷脂或大豆卵磷脂，或它们以任何比例组成的混合物；其中，半合成和合成磷脂包括但不限于氢化磷脂、二油酰基卵磷脂、二肉豆蘧酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二肉豆蘧酰磷脂酰丝氨酸、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、二月桂酰卵磷脂、二肉豆蘧酰卵磷脂、二棕榈酰卵磷脂、二硬脂酰卵磷脂、肉豆蘧酰-2-棕榈酰卵磷月旨、上述磷脂的聚乙二醇化衍生物(如聚乙二醇一二硬脂酰磷脂酰乙醇胺)或它们的混合物。
[0030]本发明所述的白蛋白包括牛血清白蛋白、人血清白蛋白、兔血清白蛋白、猪血清白蛋白、半乳糖化白蛋白及其他种类白蛋白。其加入水相的浓度范围约为0.1-25%(W/V)，优选范围0.5-10%(w/v)。白蛋白因其良好的生物相容性和低免疫原性在本发明中作为优选，实际上只要在其结构内含有巯基或二硫键，可以在纳米粒周围形成二硫键交联外壳的天然或人工合成的聚合物，也可以应用于本发明，例如球蛋白、血红蛋白、脂蛋白、多核苷酸、多聚糖(淀粉，纤维素，透明质酸等)等的巯基衍生物。
[0031]本发明的目的之一，提供一种性质稳定且可采用现有技术工业化生产的鬼白毒素类药物磷脂复合物白蛋白纳米粒的制备方法。
[0032]本发明将鬼白毒素及其衍生物先制备成磷脂复合物，再包裹于白蛋白纳米粒中，既能消除现有制剂的过敏反应，降低此类抗肿瘤药物自身的毒性，又能显著改变药物分布，提高肝、脾、肺的靶向性，利于这些部位肿瘤的治疗。
[0033]本发明提供一种上述组合物的制备方法，其特征包括下述步骤:
(1)取鬼白毒素类药物和磷脂，溶于脂溶性溶剂中(如选用鬼白毒素类药物的盐酸盐，先用如碳酸氢钠等的碱性溶液中和盐酸，再和磷脂溶于脂溶性溶剂中)，在温度约30°C?50°C下，搅拌反应，形成鬼白毒素类药物磷脂复合物；
(2)减压浓缩除去脂溶性溶剂；
(3)用水不溶性有机溶剂溶解上述药理活性物质，作为油相；
(4)取适量白蛋白，溶解于适量水性溶剂中，作为水相；
(5)油相与水相混合，搅拌或超声形成乳浊液； (6)将(5)所述的乳浊液用高压乳匀机、微射流均质机、超声处理器、高剪切混合器、高剪切搅拌器或类似设备制备成纳米乳剂；
(7)减压蒸发除去有机溶剂，即得鬼白毒素类药物磷脂复合物白蛋白纳米粒混悬液。
[0034]本发明所述的药理活性物质即鬼白毒素类抗肿瘤药物和磷脂形成的复合物优选溶解在一种合适的有机溶剂内，所述溶剂选自乙醇、乙腈、丙酮、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃、二氧六环、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、甲基吡咯烷酮或类似溶剂，以及2种或2种以上这些溶剂的混合物；所述溶剂也可选自大豆油、棉籽油、芝麻油、椰子油、橙油、橄榄油、红花油、苎烯油、聚乙二醇、C1-C2tl醇、C 2-C2(l酯、C 3-C2(l酮、脂肪烃、芳香烃、齒代烃及其混合物。
[0035]其中，步骤(I)所述的脂溶性溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、四氢呋喃等。
[0036]其中，步骤(3)所述的水不溶性有机溶剂选自乙醚、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、正己烷、正庚烷等。
[0037]其中，步骤(4)所述的水性溶剂选自纯水、缓冲盐溶液或水与乙醇混合溶剂。
[0038]其中，步骤(7)所述的蒸发方法包括使用旋转蒸发器、降膜蒸发器、喷雾干燥器、冷冻干燥器和类似设备。
[0039]作为本发明的具体实施方案之一，本发明提供上述组合物的制备方法，其特征包括下述步骤:
(a)取鬼白毒素类药物和磷脂，溶于脂溶性溶剂中(如选用鬼白毒素类药物的盐酸盐，先用如碳酸氢钠等的碱性溶液中和盐酸再和磷脂溶于脂溶性溶剂中)，在温度约30°C?50°C下，搅拌反应，形成鬼白毒素类药物磷脂复合物，作为油相；
(b)取适量白蛋白，溶解于适量水性溶剂中，作为水相；
(c)油相与水相混合，搅拌或超声形成乳浊液；
(d)将(c)所述的乳浊液用高压乳匀机、微射流均质机、超声处理器、高剪切混合器、高剪切搅拌器或类似设备制备成纳米乳剂；
(e)减压蒸发除去有机溶剂，即得鬼白毒素类药物磷脂复合物白蛋白纳米粒混悬液。
[0040]其中，步骤(a)所述的脂溶性溶剂选自水不溶性的乙醚、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、正己烷、正庚烷等。
[0041]其中，步骤(b)所述的水性溶剂选自纯水、缓冲盐溶液或水与乙醇混合溶剂。
[0042]其中，步骤(e)所述的蒸发方法包括使用旋转蒸发器、降膜蒸发器、喷雾干燥器、冷冻干燥器和类似设备。
[0043]本发明所述的鬼白毒素类药物磷脂复合物白蛋白纳米粒是在高压和高剪切力条件下经均化作用形成的。这种均化作用通常在高压乳匀机内进行，典型的操作压力在3，000至30，OOOPsi范围内，本发明优选的压力在5,000至15，OOOPsi范围。可接受的均化方法包括可赋予高剪切和空化作用:如高压乳匀机、微射流均质机、高剪切混合器、超声处理器和类似设备。
[0044]本发明的目的之一，提供一种鬼白毒素类药物磷脂复合物白蛋白纳米粒固体制齐U，该固体制剂是上述纳米粒加入冻干保护剂并采用冷冻干燥工艺制成的。
[0045]为延长上述纳米粒的存放时间，便于运输，可将本发明的纳米粒通过冷冻干燥工艺制成固体制剂；为防止干燥工艺中纳米粒聚集，保护其形态结构，需加入冻干保护剂及其他药学上可接受的辅料。
[0046]本发明