一种他克莫司类脂质体及其凝胶和制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种他克莫司类脂质体及其凝胶和制备方法。
【背景技术】
[0002] 他克莫司（tacrolimus，Tac)是一种大环内酯类免疫抑制剂，局部外用可用于特 应性皮炎（AD)、银肩病等皮肤病的治疗，疗效确切，目前已有Tac软膏上市。由于Tac的分 子量大（8〇4Dalton)，分子中含有大环内酯刚性结构，难以透过皮肤角质层，外用药物皮肤 内滞留时间短，给药频繁且临床疗效变异大。此外，上市Tac软膏为油性基质，涂在皮肤上 有油腻感，清洗困难，患者顺应性差。延长药物在皮肤内的滞留时间，改变Tac外用制剂的 基质性质，具有重要临床意义。
【发明内容】
[0003] 本发明解决的技术问题是，他克莫司软膏难以渗透皮肤，涂在皮肤上有油腻感，清 洗困难，在皮肤内的滞留时间短。
[0004] 本发明的技术方案是，提供一种他克莫司类脂质体，按重量份，以80-120份类脂 质体作为5份他克莫司的药物载体；所述类脂质体的主材料为失水山梨醇硬脂酸酯。
[0005] 进一步地，所述他克莫司类脂质体的制备方法为：按重量份，称取失水山梨醇硬 脂酸酯80-120份、他克莫司5份、胆固醇8-12份，加入氯仿溶解，减压蒸干有机溶剂，得到 均匀半透明的薄膜；向装有所述薄膜的容器中加入含稳定剂的水溶液，再加入水化珠，在 55-65Γ下水化得到他克莫司类脂质体混悬液，探头超声，得到他克莫司类脂质体；所述超 声的参数为：每工作2-4s、间隔5-7s，共超声2-3分钟，振幅30-40%。
[0006] 进一步地，所述超声的参数为：每工作3s、间隔6s，共超声2. 5分钟，振幅35%。
[0007] 进一步地，所述含稳定剂的水溶液中含稳定剂5-8份，水8000-12000份；所述稳定 剂为胆酸钠。
[0008] 进一步地，各物质的加入量分别为：失水山梨醇硬脂酸酯107份，他克莫司5份，胆 固醇9. 7份，胆酸钠6. 7份，水10000份。
[0009] 考虑到类脂质体（NS)为混悬液，其黏附性不足，不便于直接外用于皮肤；如将NS 混悬液分散到水凝胶中，既可以巩固NS的稳定性，同时还有利于保持皮肤水分、控制药物 释放及增加药物在皮肤的粘附性的作用。
[0010] 本发明进一步地提供一种他克莫司类脂质体凝胶，以卡波姆-934为凝胶基质，将 权利要求1所述的他克莫司类脂质体制备成他克莫司类脂质体凝胶，所述他克莫司类脂质 体凝胶中卡波姆-934与他克莫司的质量比为5-15:1。
[0011] 进一步地，他克莫司类脂质体凝胶制备方法为：按重量份，取1份卡波姆-934， 再加入4-6份甘油，研磨均匀，加水使其溶胀；再按卡波姆-934与他克莫司的质量比为 5-15:1的比例加入权利要求1所述的他克莫司类脂质体，搅拌均匀，滴加三乙醇胺调节pH 后再加蒸馏水，搅拌均匀即可。
[0012] 类脂质体（Niosomes，NS)是一种由非离子表面活性剂和胆固醇为主要成分的可 包载脂溶性药物的纳米脂质体类似物，又称为非离子表面活性剂囊泡或类脂囊泡；NS能显 著提高药物穿透角质层屏障进入皮肤的能力，能均匀分散于水性凝胶基质中形成稳定的半 固体制剂，进入皮肤的类脂囊泡能缓慢释放药物，从而减少给药频率。
[0013] 现已有大量研究将NS作为非留体抗炎药、激素、抗生素、肽类、细胞因子等经皮穿 透的载体。由于NS双分子层既具有亲水性又具有亲脂性，使其既能包载水溶性药物，又能 作为脂溶性药物的载体。他克莫司（Tac)属于难溶性药物，其大环内酯结构的刚性较强，难 以透过皮肤，而将Tac包裹于NS中将使得其透皮能力极大增强。
[0014] 非离子表面活性剂是NS的主要成囊材料，一般要求其具有生物可降解、毒性低、 与药物相容性好等特点，比较常用的有聚甘油脂肪酸类、脂肪酸山梨坦类（Span类）、聚山 梨酯类（Tween类）、聚氧乙烯脂肪酸醚类（Brij类）以及合成的嵌段共聚物等。查阅相关文 献，采用Span、Brij系列的表活作为囊材往往能获得粒径均一，稳定性好的NS。因此，本文 首先选择Span-40、Span-60、Bri j-52及Bri j-93为囊材制备NS，结果发现四者均能形成粒 径均一的NS，但Span-40、Brij-52及Brij-93对Tac的包装率（EE%)远低于Span-60。推 测原因可能为不同类型的表活、同一类型但链长不同的表活对药物的亲和性不同，Span-60 对亲脂性药物如Tac有较好的亲和性，易于形成EE %高、稳定性好的NS，因此，我们选择 Span-60做为囊材。
[0015] 本发明以薄膜水化-超声法制备了 Tac-NS，以卡波姆为基质构建Tac-NS凝胶，通 过比较Tac-NS凝胶、市售Tac软膏与普通凝胶的离体皮肤渗透性，及在大鼠的经皮吸收特 征，评价Tac-NS凝胶在提高Tac皮肤滞留量、延长药物释放的作用规律及特点，为Tac新型 外用制剂的研究开发提供实验依据。
[0016] 薄膜水化法制得的NS初始粒径很大且大小及不均一，因此需要采用超声的方法 减少NS粒径。为了获得粒径均一的NS，同时防止NS被超声破碎导致药物析出，以包封率 (EE% )、平均粒径（nm)、PDI为指标对超声温度及时间进行了进一步的考察。
[0017] 随着超声温度的变化，Tac-NS各指标均有显著变化，当温度为4°C时，NS有较大的 粒径和Η)Ι，EE%也较低，而当温度增加到55-65°C时，粒径和PDI均有明显改善，EE%也显 著提高，推测由于60°C为NS的水化温度，当NS被超声波破碎后，其材料仍能重组形成NS， 而4°C时则很难重组再形成NS，从而导致EE%下降。
[0018] 以卡波姆-934为凝胶基质，采用碱法制备载药量为0. 1%的Tac-NS凝胶，该凝胶 的pH值为6. 1±0. 3,稠度为181. 5±14. 1。凝胶在室温和4°C条件下放置30天，其pH值、 Tac量及NS粒径等均无明显变化（P>0. 05)，说明其稳定性较好。
[0019] 以0· 1%十二烷基硫酸钠（SDS)-磷酸盐缓冲液（0· lmol/L，pH 7. 4，PBS)为释放介 质，考察Tac-NS的体外释放。结果表明，Tac-NS在前8h累积释药约20%，24h内的药物释 放量约为28 %;而Tac-NS材料混合物前8h累积释药超过50 %，24h内的释放量接近80 %， 说明Tac-NS具有良好的缓释效果。
[0020] 以0. 1% SDS-PBS (pH 7. 4)为接收介质，以乳猪腹部皮肤为渗透屏障，采用改良 的直立式Franz扩散池法研究比较Tac-NS及Tac-NS材料混合物的体外经皮渗透规律；结 果显示，Tac-NS在24h内的单位质量皮肤滞留量（Qskin)约为Tac-NS材料混合物的2. 4倍 (P〈0. 05)，而二者24h内的单位面积累积渗透量（Q24)相当（P>0. 05)，与物理混合物相比，NS 能显著提高Tac的皮肤滞留量。而Tac软膏组的药物^^在0-24h不同时间点与Tac-NS 凝胶组相比，差别无统计学意义（P > 〇. 05)，说明二者对药物的促渗能力是相当的。
[0021 ] 本发明的有益效果是，Tac-NS及其凝胶相比于Tac和NS混合物的释放速度慢，可 明显增加药物在皮肤内的滞留量，NS能显著延长Tac在皮肤内的滞留时间，说明其具有缓 释作用；采用薄膜水化-超声法制备的Tac-NS包封率高、粒径小、分布均匀。
【具体实施方式】
[0022] 下面结合实施例对本发明作进一步说明。
[0023] 实施例1
[0024] 本实施例提供一种他克莫司类脂质体，所述类脂质体为失水山梨醇硬脂酸酯，所 述他克莫司类脂质体的制备方法为：按重量份，称取失水山梨醇硬脂酸酯1〇〇份、他克莫司 5份、胆固醇10mg，加入氯仿5mL溶解，减压蒸干有机溶剂，得到均匀半透明的薄膜；向装有 所述薄膜的容器中加入含稳定剂的水溶液，再加入水化珠，在55-65Γ下水化得到他克莫司 类脂质体混悬液，探头超声，得到他克莫司类脂质体；所述超声的参数为：每工作3s、间隔 6s，超声时间分别为2、2. 5、3分钟，振幅35%。
[0025] 薄膜水化法制得的NS初始粒径很大且大小及不均一，因此需要采用超声的方法 减少NS粒径。为获得粒径均一的NS，但同时要防止NS被超声破碎导致药物析出，本实施例 对其中重要的指标进行考察，实验结果如下标1所示。
[0026] 表1超声时间对各指标的影响
[0028] 结果表明，随着超声时间增加，NS的粒径及（多分散系数）