PDI均呈下降趋势，EE% 也随之下降，但均不是很明显，综合考虑，选择超声时间为2. 5min。
[0029] 实施例2
[0030] 本实施例提供一种他克莫司类脂质体，同实施例1的制备方法分别对稳定剂的选 择、胆固醇的相对添加量（Span-60与胆固醇的比例）、Span-60的浓度进行了考察。
[0031] 表2稳定剂对各指标的影响
[0033] 结果表明，三种稳定剂制得的NS的粒径和EE(% )差别不明显，但在放置过夜后， Tw-60和PC-E80制得的NS混悬液有明显沉降，而加入SDC (胆酸钠）的NS则很少沉降，且 在显微镜下观察其粒子的形态更圆整，少有聚集，因此，选择SDC作为稳定剂。
[0034] 胆固醇（CH)是制备NS必不可少的添加剂，它能增加 NS的稳定性、提高药物的 EE%，因此，选择合适比例的CH对制备优良NS非常重要。本研究中固定Span-60浓度为 0. 05mol · L1，药载比为5%，Span-60-SDC比为10:l(mol/mol)，其它因素不变，按实施例1 的工艺制备NS，考察不同Span-60-CH比对NS粒径、PDI等指标的影响，结果见表3。
[0035] 表3 Span60-CH比对各指标的影响
[0037] 结果表明，随着CH量的增加，NS的粒径与PDI并未呈现规律性变化，且 Span-60-CH比从15:1减少到10:1时，其EE%也无明显变化，但当Span-60-CH减少到5:1 时，其EE%显著下降，旋蒸时烧瓶底部有大量白色蜡状固体出现。提示加入合适比例的CH， 能帮助NS成囊并提高NS的EE%。
[0038] Span-60是制备NS的主材料，因此对Span-60浓度的考察显得尤为重要。本研究 中固定 Span-60-CH 比为 10:1 (mol/mol)，药载比为 5%，Span-60-SDC 比为 10:1 (mol/mol)， 其它因素不变，按实施例1的工艺制备NS，考察不同浓度的Span-60对NS粒径、PDI等指标 的影响，结果见表4。
[0039] 表4 Span-60浓度对各指标的影响
[0041] 结果表明，随着Span-60浓度增加，NS的粒径逐渐增加，PDI逐渐减少，EE %逐渐下 降。由于药载比固定，水的量也是固定的，当Span-60用量增加时，Tac用量也随之增加，水 的水化能力减弱，Span-60对药物的包封作用也随之下降；此外，当材料浓度变大时，NS颗 粒间的间隙减少，NS之间易碰撞融合成大粒子，从而导致粒径增大。
[0042] 实施例3
[0043] 本实施例提供一种Tac-NS，其中类脂质体为失水山梨醇硬脂酸酯Span-60,所述 Tac-NS的制备方法为：按重量份，称取失水山梨醇硬脂酸酯107mg、他克莫司5mg、胆固醇 9. 7mg份，加入氯仿5mL溶解，减压蒸干有机溶剂，得到均匀半透明的薄膜；向装有所述薄膜 的容器中加入水10mL，再加入水化珠，在60°C下水化得到他克莫司类脂质体混悬液，探头 超声，得到他克莫司类脂质体；所述超声的参数为：每工作3s、间隔6s，共超声2. 5分钟，振 幅 35 % 〇
[0044] 该实施例得到的Tac-NS外观为白色乳状混悬液，其各项质量指标均较高。取少量 制得的Tac-NS混悬液，滴至碳网上，于探照灯下晾干，在透射电镜（TEM)下观察可见Tac-NS 接近球形，且分散均匀，很少聚集，说明所制得的Tac-NS稳定性较好。
[0045] 以马尔文激光纳米粒度测定仪测定其平均粒径、PDI及zeta电位分别为 233. 0±6. 48nm，0. 266±0. 021，-41. 7±0. 32mV。
[0046] 取lmL样品（Tac-NS或Tac-NS材料混合物）置于MD10-14透析袋（截留分子 量：3500)中，两端扎紧后放入100mL烧杯中，杯内为50mL脱气处理过的释放介质（0.1% SDS-PBS (pH7. 4))。将烧杯置于恒温水浴震荡箱中，试验温度为32°C，震荡速度为lOOrpm。 分别于l、2、4、8、12、24h吸取2mL释放介质，并补充等量同温介质，进行体外释放测试。
[0047] 体外释放结果表明，对照组Tac-NS材料混合物中Tac的释放速度较快，前24h累 积释药接近80 %，而Tac-NS在前8h释药较快，累积释药约20 %，后期释药缓慢，24h累积释 药约28%，说明其具有良好的缓释效果。
[0048] 实施例4
[0049] 本实施例提供一种Tac-NS凝胶，制备方法如下：称取卡波姆-9340. lg，放置于 小烧杯中，加甘油〇. 5g润湿，研磨均匀，加适量水使其溶胀，加入处方量实施例3制得的 Tac-NS混悬液，搅拌均勾，滴加三乙醇胺0. lg调节凝胶的pH，加蒸馏水至10g，搅拌均勾，即 得Tac-NS凝胶（规格：10g，Tac含量0· 1 % )。
[0050] 取3批Tac-NS凝胶，各取0· 5g，用水稀释10倍溶解，测定其pH值。得到其pH值 为 6. 13±0· 34。
[0051] 稠度体现了半固体制剂的流动性，一般用锥入度表示，采用锥入度计测定Tac-NS 凝胶的锥入度为181. 5±14. 1。
[0052] 取Tac-NS凝胶适量，放置于室温25°C及4°C条件下，分别于0、10、30天取出，用水 稀释10倍溶解，测定其平均粒径、PDI、pH及药物含量，实验结果见表5。
[0053] 表5 Tac-NS凝胶的稳定性测试
[0054]
[0055] 结果表明，Tac-NS凝胶在室温25°C及4°C条件下放置30天其粒径、含量等均无明 显变化，说明其稳定性较好。
[0056] 取Tac-NS凝胶0. 5g于5mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，超声破乳20min，平行 制备3份，0.45 μπι微孔滤膜过滤后色谱分析。结果表明，凝胶中Tac的含量为标示量的 95. 32±5· 09%。
【主权项】
1. 一种他克莫司类脂质体，其特征在于，按重量份，以80-120份类脂质体作为5份他 克莫司的药物载体；所述类脂质体的主材料为失水山梨醇硬脂酸酯。2. -种如权利要求1所述的他克莫司类脂质体的制备方法，其特征在于，按重量份，称 取失水山梨醇硬脂酸酯80-120份、他克莫司5份、胆固醇8-12份，加入氯仿溶解，减压蒸干 有机溶剂，得到均匀半透明的薄膜；向装有所述薄膜的容器中加入含稳定剂的水溶液，再加 入水化珠，在55-65°C下水化得到他克莫司类脂质体混悬液，探头超声，得到他克莫司类脂 质体；所述超声的参数为：每工作2-4s、间隔5-7s，共超声2-3分钟，振幅30-40%。3. 如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述超声的参数为：每工作3s、间隔 6s，共超声2. 5分钟，振幅35%。4. 如权利要求2或3所述的的制备方法，其特征在于，所述含稳定剂的水溶液中含稳定 剂5-8份，水8000-12000份；所述稳定剂为胆酸钠。5. 如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，各物质的加入量分别为：失水山梨醇硬 脂酸酯107份，他克莫司5份，胆固醇9. 7份，胆酸钠6. 7份，水10000份。6. -种他克莫司类脂质体凝胶，其特征在于，以卡波姆-934为凝胶基质，将权利要求1 所述的他克莫司类脂质体制备成他克莫司类脂质体凝胶，所述他克莫司类脂质体凝胶中卡 波姆-934与他克莫司的质量比为5-15:1。7. -种如权利要求6所述的他克莫司类脂质体凝胶的制备方法，其特征在于，按重量 份，取1份卡波姆-934,再加入4-6份甘油，研磨均匀，加水使其溶胀；再按卡波姆-934与 他克莫司的质量比为5-15:1的比例加入权利要求1所述的他克莫司类脂质体，搅拌均匀， 滴加三乙醇胺调节pH后再加蒸馏水，搅拌均匀即可。
【专利摘要】本发明公开了一种他克莫司类脂质体及其凝胶和制备方法，所述他克莫司类脂质体，按重量份，是以80-120份类脂质体作为5份他克莫司的药物载体；所述类脂质体的主材料为失水山梨醇硬脂酸酯。该他克莫司类脂质体能显著延长他克莫司在皮肤内的滞留时间，具有缓释作用。
【IPC分类】A61P37/06, A61K47/14, A61K31/436, A61P17/00, A61K9/06, A61K9/127, A61K47/32, A61P17/06
【公开号】CN105232462
【申请号】CN201510753564
【发明人】李岱, 丁劲松, 王鑫
【申请人】中南大学湘雅医院
【公开日】2016年1月13日
【申请日】2015年11月6日