专利名称：黄芩素脂质体凝胶及其制备方法
技术领域：
本发明涉及药物载体技术领域，具体涉及一种黄芩素脂质体及其制备方法。
背景技术：
脂质体由类脂质双分子层组成，结构与细胞膜相似，具有良好的细胞融合性和经皮渗透作用，皮肤在使用经脂质双分子层包裹的药物后，容易穿透角质层进人皮肤。脂质体作为药物载体具有延缓药物释放，提高药物疗效、减轻药物不良反应及靶向作用的特点。黄芩素具有显著的抗菌、抗炎、抗氧化等多种药理作用。体外对痢疾杆菌、白喉杆菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎双球菌、脑膜炎球菌、霍乱弧菌等有不同程度的抑制作用。临床上常用以治疗小儿肺炎、支气管炎、带状疱疹、沙眼等。但由于口服给药的药物首过效应影响，药物的利用度不高。本发明要解决的技术问题是提供一种改善黄芩素药物释放速度、吸收效果的黄芩素脂质体凝胶及其制备方法。本发明的技术方案是一种黄芩素脂质体凝胶，它主要由以下重量份数的原料制成黄芩素1 4、卵磷脂20 100、胆固醇2 10、PH为6 7的磷酸盐缓冲溶液。一种黄芩素脂质体凝胶优选主要由以下重量份数的原料制成黄芩素1 2、卵磷脂12 40、胆固醇2 4、pH为6. 7的磷酸盐缓冲溶液。黄芩素脂质体凝胶制备方法，它的步骤如下(1)制备黄芩素脂质体；(2)在1 2重量份的水中加入3 5重量份的聚乙二醇，1 3重量份的促渗剂， 15 30重量份的丙二醇，搅拌均勻，再加入0. 5 1. 5重量份的卡波姆，充分搅拌，然后加入含黄芩素脂质体的磷酸盐缓冲溶液，至药物终浓度为4 6 %，调pH值为7，搅拌成均勻的凝胶。乙醚注入法制备黄芩素脂质体的步骤如下①将1 4重量份的黄芩素溶于PH为6. 7的磷酸盐缓冲溶液中；②将20 100重量份的卵磷脂和2 10量份的胆固醇溶于乙醚中；③将步骤②中的乙醚液缓缓加入到步骤①中的磷酸盐缓冲溶液中，并在40°C水浴加热蒸去乙醚。薄膜分散法制备黄芩素脂质体的步骤如下①将1 4重量份的黄芩素溶于pH为6. 7的磷酸盐缓冲溶液中；②将20 100重量份的卵磷脂和2 10重量份的胆固醇溶于氯仿中，用旋转蒸发仪蒸干成膜；③在真空条件下，将步骤②中的膜溶于步骤①中的磷酸盐缓冲溶液中。逆相蒸发法制备黄芩素脂质体的步骤如下①将1 4重量份的黄芩素溶于pH为6. 7的磷酸盐缓冲溶液中；②将20 100重量份的卵磷脂和2 10重量份的胆固醇溶于乙醚中；
③将步骤①中的磷酸盐缓冲溶液和步骤②中的乙醚液一起加入梨形瓶中，然后用旋转蒸发仪在真空条件下蒸去乙醚，水浴温度控制在40°C，直到形成均勻的混悬液。所述步骤(2)中聚乙二醇为PEG-400、PEG-600 或 PEG-1000。所述步骤O)中促渗剂为氮酮、薄荷醇、月桂氮卓酮或聚乙烯基吡咯烷酮。所述步骤O)中的卡波姆为卡波姆940、卡波姆934或卡波姆ultrez-10。所述步骤O)中用10 15%的NaOH溶液调pH值为7，搅拌成均勻的凝胶。脂质体制备以后要低速离心，脂质体沉淀出来，上清中没包裹的裸药和溶剂都除去，只要脂质体药物。本发明的有益效果是本发明的黄芩素脂质体凝胶包封率可达到47. 66 %，黄芩素脂质体在24h的透过率为91. 2%，平均粒径在1 lOnm。三天急性皮肤刺激试验显示， 各组白豚鼠外观体征、行为活动、进食、排泄均正常，从给药至观察期结束，全部动物情况良好，无一死亡。发现该制剂与裸药相比，具有显著的缓释效果，治疗周期缩短，且对皮肤无刺激作用，高效安全，可作为一种优良的抗菌抗炎外用缓释制剂。实验过程(1)包封率的测定分别量取两份黄芩素脂质体溶液2. 5mL加入到IOmL离心管中，编号为1、2。再往 2号管中加入5mL乙醇充分振摇破乳。离心，取上清液，分别测定处的吸光度A1、A2。 由标准曲线可求得对应浓度cl、c2，由此可求得包封率EF%= (1-C1/3W) X100%。结果发现乙醚注入法平均包封率为33. 65%，薄膜分散法为20. 18%，逆相蒸发法为12. 3%。通过三因素四水平正交实验发现，卵磷脂及胆固醇的比例对包封率的影响最为显著明显，因此，为了提高药物的包封率，我们进一步调整了该影响因素，结果如
图1所示，当卵磷脂和胆固醇的比例为10 1时，包封率可达到47. 66%。此时的药物配方为卵磷脂0. SOOgJi 固醇 0. 080g，黄芩素 0. 020g,乙醚 15mL, ρΗ6· 7 的 PBS 为 20mL。(2)黄芩素纯品透析用电子天平精密取黄芩素纯品0. IOOg,用pH6. 7的PBS将其溶解于IOOmL的容量瓶中，配置成lmg/mL的黄芩素标准液。用移液管取2. OmL置于透析袋中，然后将包含标准液的透析袋至于IOOmL的pH6. 7的PBS溶液中，同时需要在摇床中振摇。然后每隔一段时间取样一次测定透析袋外PBS中药物的吸光度，计算各个时间的
累积释药量。黄芩素标准液在PBS溶液中释放1个小时之后，药物透过1. 920g，透过率达到 96. 0%。透过率=透过的药物质量/药物总质量=1.920/2. OOX 100% = 96. 0%(3)黄芩素脂质体缓释测试配置lmg/mL的脂质体溶液，用移液管移出2. OmL置于透析袋中，将封好的透析袋至于IOOmL的PBS中，同时需要在摇床中震摇；然后每隔一段时间取样一次测定透析袋外样品吸光度，计算各个时间的累积释药量，如下表所示
权利要求
1.一种黄芩素脂质体凝胶，其特征在于，它主要由以下重量份数的原料制成黄芩素 1 4、卵磷脂20 100、胆固醇2 10、PH为6 7的磷酸盐缓冲溶液。
2.一种黄芩素脂质体凝胶，其特征在于，它主要由以下重量份数的原料制成黄芩素 1 2、卵磷脂12 40、胆固醇2 4、pH为6. 7的磷酸盐缓冲溶液。
3.根据权利要求1或2所述的黄芩素脂质体凝胶制备方法，其特征在于，它的步骤如下(1)制备黄芩素脂质体；(2)在1 2重量份的水中加入3 5重量份的聚乙二醇，1 3重量份的促渗剂，15 30重量份的丙二醇，搅拌均勻，再加入0. 5 1. 5重量份的卡波姆，充分搅拌，然后加入含黄芩素脂质体的磷酸盐缓冲溶液，至药物终浓度为4 6%，调pH值为7，搅拌成均勻的凝胶。
4.根据权利要求3所述的黄芩素脂质体凝胶制备方法，其特征在于所述步骤(1)中黄芩素脂质体的制备步骤如下①将1 4重量份的黄芩素溶于pH为6.7的磷酸盐缓冲溶液中；②将20 100重量份的卵磷脂和2 10量份的胆固醇溶于乙醚中；③将步骤②中的乙醚液缓缓加入到步骤①中的磷酸盐缓冲溶液中，并在40°C水浴加热蒸去乙醚。
5.根据权利要求3所述的黄芩素脂质体凝胶制备方法，其特征在于所述步骤(1)中黄芩素脂质体的制备步骤如下①将1 4重量份的黄芩素溶于pH为6.7的磷酸盐缓冲溶液中；②将20 100重量份的卵磷脂和2 10重量份的胆固醇溶于氯仿中，用旋转蒸发仪蒸干成膜；③在真空条件下，将步骤②中的膜溶于步骤①中的磷酸盐缓冲溶液中。
6.根据权利要求3所述的黄芩素脂质体凝胶制备方法，其特征在于所述步骤(1)中黄芩素脂质体的制备步骤如下①将1 4重量份的黄芩素溶于pH为6.7的磷酸盐缓冲溶液中；②将20 100重量份的卵磷脂和2 10重量份的胆固醇溶于乙醚中；③将步骤①中的磷酸盐缓冲溶液和步骤②中的乙醚液一起加入梨形瓶中，然后用旋转蒸发仪在真空条件下蒸去乙醚，水浴温度控制在40°C，直到形成均勻的混悬液。
7.根据权利要求3所述的黄芩素脂质体凝胶制备方法，其特征在于所述步骤O)中聚乙二醇为 PEG-400、PEG-600 或 PEG-1000。
8.根据权利要求3所述的黄芩素脂质体凝胶制备方法，其特征在于所述步骤O)中促渗剂为氮酮、薄荷醇、月桂氮卓酮或聚乙烯基吡咯烷酮。
9.根据权利要求3所述的黄芩素脂质体凝胶制备方法，其特征在于所述步骤O)中的卡波姆为卡波姆940、卡波姆934或卡波姆ultrez-10。
10.根据权利要求3所述的黄芩素脂质体凝胶制备方法，其特征在于所述步骤(2)中用10 15%的NaOH溶液调pH值为7，搅拌成均勻的凝胶。
全文摘要
本发明公开了一种黄芩素脂质体凝胶，它主要由以下重量份数的原料制成黄芩素1～4、卵磷脂20～100、胆固醇2～10、pH为6～7的磷酸盐缓冲溶液。本发明的黄芩素脂质体凝胶包封率可达到47.66％，黄芩素脂质体在24h的透过率为91.2％，平均粒径在1～10nm。三天急性皮肤刺激试验显示，各组白豚鼠外观体征、行为活动、进食、排泄均正常，从给药至观察期结束，全部动物情况良好，无一死亡。发现该制剂与裸药相比，具有显著的缓释效果，治疗周期缩短，且对皮肤无刺激作用，高效安全，可作为一种优良的抗菌抗炎外用缓释制剂。
文档编号A61K9/127GK102258460SQ20101028818
公开日2011年11月30日 申请日期2010年9月21日 优先权日2010年9月21日
发明者介晓阳, 冯书晓, 刘秋伟, 李梅, 李聪聪, 梁菊, 赵爽 申请人:河南科技大学