磁性荧光复合纳米药物载体。图4为制备的磁性荧光复合纳米药物载体的吸收光谱和荧光光谱。
[0028]实施例4: 4.1采用水相法制备CdSe量子点.在氮气保护下，将0.0106 g NaBH4与0.0063 gSe粉溶于2 mL蒸馏水中，加热至40°C，完全溶解后得到NaHSe溶液；取0.0533 g Cd (Ac) 2溶入20 mL蒸馏水中，待其完全溶解后加入1.0 mmol巯基丙酸，用lmol/L的NaOH溶液调节pH=ll.5，得到Cd的前驱体溶液；将Cd的前驱体转入三口瓶中，在氮气保护下迅速注入NaHSe溶液，油浴100°C回流，磁力搅拌Ih后取出放入冰箱中快速冷却至室温，即为制备好的CdSe QDs溶液。
[0029]4.2磁性纳米颗粒的制备。采用专利公开号为CN 101928043 A的方法制备a -Fe2O3磁性纳米颗粒。
[0030]4.3采用共混包埋法制备羧甲基-β-环糊精磁性纳米复合物。称取0.5 ga-Fe2O3磁性纳米颗粒溶于30 mL pH =7.4，浓度为0.0lmol/L的PBS缓冲溶液中，通氮气去氧，利用超声波清洗机将磁性粒子分散均匀，得到分散均匀的a -Fe2O3纳米颗粒溶液；称取0.8 g羧甲基-β-环糊精溶于20 mL PBS=7.4的缓冲溶液中，同时加入0.5 g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDAC)活化羧甲基-β-环糊精表面的基团；之后将羧甲基-β -环糊精溶液加入a -Fe2O3纳米颗粒溶液，在恒温水浴振荡器中25°C振荡6h，反应结束后用磁铁收集产物，再依次用蒸馏水和PBS ( pH=7.4)缓冲溶液充分洗涤，即得到羧甲基-β -环糊精磁性纳米复合物。
[0031]4.4采用离子交联法制备磁性荧光复合纳米药物载体。取4.1制备的浓缩的水相CdSe量子点，异丙醇分离提纯后溶于5 mL蒸馏水中，并加入钼酸钠，其中钼酸钠和CdSe量子点的浓度分别为2.5 mg/mL和0.25 mol/L，得到反应溶液A ;将50mg疏水性药物喜树碱的甲醇溶液与3.9g磺丁基-β -环糊精混合，得到包含喜树碱的包合物B ;取0.05 g步骤
4.3中制备的羧甲基-β-环糊精修饰的磁性纳米复合物溶于10 mL蒸馏水中，超声30 min,使磁性纳米微粒分散均匀，并加入质量浓度为5 mg/mL聚二烯丙基二甲基氯化铵，得到反应溶液C ;将A和B溶液逐滴加入C溶液中，在25°C的恒温水浴振荡器中振荡10 h，磁铁收集反应产物，用蒸馏水清洗反应产物，即得磁性荧光复合纳米药物载体。图5为制备的磁性荧光复合纳米药物载体在紫外灯和外加磁场时的数码照片。
【主权项】
1.一种磁性荧光复合纳米药物载体的制备方法，其特征在于:以带负电荷的羧甲基壳聚糖或羧甲基-β-环糊精修饰的磁性纳米粒子、聚二烯丙基二甲基氯化铵(PDDA)、离子交联剂和负载药物的阴离子型高分子有机物通过离子交联法连接水溶性量子点得到，所述荧光量子点以单分散形式均匀分布在磁性纳米颗粒的表面，其中磁性纳米颗粒的粒径大小在10-200 nm，量子点的粒径在1.5-10 nm。
2.根据权利要求1所述的一种磁性荧光复合纳米药物载体的制备，其特征在于，所述的制备方法包括以下步骤: Ca)采用共混包埋法制备带负电荷的磁性纳米复合物:①称取50-500mg磁性纳米颗粒溶于30 mL pH =7.4，浓度为0.0lmol/L的PBS缓冲溶液中，通氮气去氧，利用超声波清洗机将磁性粒子分散均匀；②称取10-800 mg羧甲基壳聚糖或羧甲基-β-环糊精溶于20mL PBS=7.4的缓冲溶液中，同时加入0.1-0.5 g 1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDAC)活化羧甲基壳聚糖或羧甲基-β -环糊精表面的基团；③将①和②两溶液混合，在恒温水浴振荡器中25°C振荡2-6 h，再依次用蒸馏水和PBS ( pH=7.4)缓冲溶液充分洗涤，即得到带负电荷的磁性纳米复合物； (b)采用离子交联法制备磁性荧光复合纳米药物载体: 取制备的浓缩的水相量子点溶于蒸馏水中，并加入离子交联剂，得到反应溶液A ;将疏水性药物的甲醇或乙醇溶液与阴离子型高分子有机物混合，常温下振荡反应2-10 h，得到包含药物的包合物B ;取0.005-0.05g步骤(a)中制备的带负电荷的磁性纳米复合物溶于蒸馏水中，超声20-60 min，使磁性纳米微粒分散均匀，并加入聚二烯丙基二甲基氯化铵得到反应溶液C ;将反应溶液A和B逐滴加入到反应溶液C中，常温下振荡反应2-10 h，离心分离，蒸馏水洗涤，即得到磁性荧光复合纳米药物载体。
3.根据权利要求1或2所述的一种磁性荧光复合纳米药物载体，其特征在于，所述的磁性荧光复合纳米药物载体的粒径为10-220 nm ;所述的磁性纳米颗粒(MNPs)为超顺磁、顺磁或铁磁性的金属及金属氧化物，选自Fe3O4、Fe2O3、MeFe2O4 (Me=Co、Mn、Ni)、化合物钕铁硼、钐钴等、金属Fe、Co、Ni以及合金Fe2Co、Ni2Fe的金属氧化物的纳米颗粒中的一种；磁性纳米颗粒的制备方法包括共沉淀法、水热法；磁性纳米颗粒表面含有羟基、氨基、羧基中的至少一种。
4.根据权利要求1或2所述的一种磁性荧光复合纳米药物载体，其特征在于，所述的量子点为表面带有亲水基团的水溶性量子点，量子点为I1-VI族半导体材料，或者为I1-VI半导体材料形成的复合材料，所述量子点粒径为1.5-10 nm ;优选的量子点为ZnSe、CdSe>CdTe、CdS、ZnSe/ZnS、CdS/ZnS、CdSe/ZnS、CdTe/ZnS、ZnxCd1^xSe, CdSe1^xSx, CdSe1^xTex, CdSe/ZnSe, CdS/ZnSe、CdTe/ZnSe、CdSe/CdS、CdTe/CdS、CdSZZnxCd1^xS, ZnSeZZnxCd1^xS, CdSe/ZnxCdgS 或 CdTeZZnxCdHS 中的一种，其中 0 < X < I。
5.根据权利要求1或2所述的一种磁性荧光复合纳米药物载体，其特征在于，所述的离子交联剂包括三聚磷酸盐、四聚磷酸盐、六偏磷酸盐、焦磷酸盐、钼酸盐、透明质酸或γ -聚谷氨酸中的一种或几种；阴离子型高分子有机物包括羧甲基-环糊精或磺丁基-环糊精；所述的羧甲基壳聚糖可选用O-羧甲基壳聚糖或N，O-羧甲基壳聚糖；聚二烯丙基二甲基氯化铵的分子量和质量浓度分别为IX 105-2 X 15和0.51-5.1 mg/mL。
6.根据权利要求1或2所述的一种磁性荧光复合纳米药物载体，其特征在于，所述的疏水性药物包括布洛芬、5-氟尿嘧啶、多西紫杉醇、喜树碱或紫杉醇中的至少一种。
7.根据权利要求2所述的一种磁性荧光复合纳米药物载体，其特征在于，步骤(a)中羧甲基壳聚糖或羧甲基-β -环糊精在磁性纳米颗粒表面的厚度为3-10 nm;步骤(b)中疏水性药物与阴离子型高分子有机物的摩尔比为1:10-1:60，带负电荷的磁性纳米复合物与量子点的摩尔比为1:1-1:20，聚二烯丙基二甲基氯化铵:阴离子型高分子有机物:离子交联剂的质量比为1:0.1-2:0.01-0.5o
8.根据权利要求4所述的水溶性量子点的制备，其特征是:所述量子点表面含有巯基、羧基、氨基中的至少一种；半导体量子点合成中所使用的亲水基团配体包括3-巯基丙酸、巯基乙酸、L-半胱氨酸、2-巯基丙酸、巯基丁酸、巯基戊酸、巯基己酸、巯基丁二酸、巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基丙醇或巯基乙胺中的一种或几种。
【专利摘要】本发明涉及一种磁性荧光复合纳米药物载体的制备方法，本发明选用带有内腔分子结构的β-环糊精衍生物包裹疏水性药物，大大改善了包封效果。该载体结构以带负电荷的羧甲基壳聚糖或羧甲基-β-环糊精修饰的磁性纳米粒子为核，然后在聚二烯丙基二甲基氯化铵（PDDA）、离子交联剂和负载药物的阴离子型高分子有机物的作用下，通过离子交联法连接水溶性量子点得到磁性荧光复合纳米颗粒。本发明所述的荧光量子点均匀分布在磁性纳米颗粒的表面，其中磁性纳米颗粒的粒径大小在10-200 nm，量子点的粒径在1.5-10 nm。本发明反应条件温和，操作方法简单，复合纳米药物载体具有良好的生物相容性和亲水性，可实现对肿瘤药物的可控封装与释放，同时具有磁靶向和荧光示踪功能，在药物载体、生物成像及生物分子监测与分离等相关领域具有重要的研究与应用价值。
【IPC分类】A61K47-32, A61K47-48, A61K47-36, A61K49-00
【公开号】CN104840977
【申请号】CN201510124945
【发明人】刘福田, 丁永玲, 孙康宁, 刘云
【申请人】济南大学
【公开日】2015年8月19日
【申请日】2015年3月23日