含有13种甘油酯的药物组合物、制剂及其应用_3

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肝癌、肺癌等 细胞株均有一定的抑制作用;本发明注射液可增强机体免疫机能,同时具有与LAK疗法合 并用药效应。
[0144] 通过试验证实,本发明所述的其它含量的甘油酯组合物及其制剂均能够达到上述 试验例所述的效果。
[0145] 本发明通过以下具体的实施例进一步说明本发明,但不作为本发明的限制。
【具体实施方式】
[0146] 实施例1薏苡仁油的制备
[0147] 取水分< 10 %的薏苡仁1000 g粉碎成100目,采用超临界二氧化碳萃取,萃取温 度50°C,萃取压力22Mpa,分离温度40°C,分离压力8Mpa,二氧化碳流量500L/h,连续萃取3 小时,分离得到薏苡仁粗油;加入薏苡仁粗油重量46%的石油醚,及1%的氢氧化钠的水溶 液碱炼;分液后取有机相,首先加入5%的活化中性氧化错过滤,滤液加热至45°C,又加入 4%经活化的高岭土过滤,减压除溶剂,再加入10%活化中性氧化铝,过滤,170°C减压干热 灭菌,冷却过滤,得薏苡仁油。
[0148] 实施例2
[0149] 薏该仁油8000mg加入IOml正己烧超声溶解,再用流动相丙酮配制成50mg/mL的 薏苡仁油溶液。利用CHEETAH-HP100高效液相制备色谱仪进行分离;流动相:正己烷:丙 酮=94:6(v/v);每次分离进样量:15ml;色谱柱:Venusil XBP silica(20*250mm,10ym); 流速:18mL/min ;ELSD检测器:漂移管温度45°C,载气流速2. OL/min。收集保留时间为 15. Smin的色谱峰流分,接收液于30°C下减压浓缩后转移到IOml样品瓶中氮气室温下氮气 吹干,即得1,3-二油酸甘油二酯。
[0150] 室温下,无色油状物;
[0151] Q-TOF/MS :准分子离子峰[M+Na]+ = m/z643. 5277(Calcd. = 643. 5272, C39H72O5Na),不饱和度=4,
[0152] 1H NMR 谱和 13C NMR 谱见表 9。
[0153] 表 9 1H NMR 和 13C NMR 谱数据(CDCl3)
[0156] 实施例3
[0157] 薏该仁油8000mg加入IOml正己烧超声溶解,再用流动相丙酮配制成50mg/mL的 薏苡仁油溶液。利用CHEETAH-HP100高效液相制备色谱仪进行分离;流动相:正己烷:丙酮 = 94:6(v/v);每次分离进样量:15ml;色谱柱:Venusil XBP silica(20*250mm,10ym);流 速:18mL/min。ELSD检测器:漂移管温度45°C,载气流速2. OL/min。收集保留时间为17min 的色谱峰流分,接收液于30°C下减压浓缩后转移到IOml样品瓶中氮气室温下氮气吹干,即 得1-亚油酸-3-油酸甘油二酯。
[0158] 室温下,无色油状物;
[0159] Q-T0F/MS :准分子离子峰[M+Na]+ = m/z641. 5121 (Calcd. = 641. 5115, C39H70O5Na),不饱和度=5 ;
[0160] 1H NMR 谱和 13C NMR 谱见表 10。
[0161]表 10 1H NMR 和 13C NMR 谱数据(CDCl3)
[0163] 实施例4
[0164] 薏该仁油8000mg加入IOml正己烧超声溶解,再用流动相丙酮配制成50mg/mL的 薏苡仁油溶液。利用CHEETAH-HP100高效液相制备色谱仪进行分离;流动相:正己烷:丙酮 = 94:6(v/v);每次分离进样量:15ml;色谱柱:Venusil XBP silica(20*250mm,10ym);流 速:18mL/min。ELSD检测器:漂移管温度45°C,载气流速2. OL/min。收集保留时间为23min 的色谱峰流分,接收液于30°C下减压浓缩后转移到IOml样品瓶中氮气室温下氮气吹干,即 得1,2_二油酸甘油酯。
[0165] 室温下,无色油状物;
[0166] Q-T0F/MS :准分子离子峰[M+Na]+ = m/z643. 5277 (Calcd.= 643. 5272, C39H72O5Na),不饱和度=4 ;
[0167] 1H NMR 谱和 13C NMR 谱见表 11。
[0168] 表 11 1H NMR 和 13C NMR 谱数据(CDCl3)
[0169]
[0170] 实施例5
[0171] 薏该仁油8000mg加入IOml正己烧超声溶解,再用流动相丙酮配制成50mg/mL的 薏苡仁油溶液。利用CHEETAH-HP100高效液相制备色谱仪进行分离;流动相:正己烷:丙 酮=94:6(v/v);每次分离进样量:15ml;色谱柱:Venusil XBP silica(20*250mm,10ym); 流速:18mL/min。ELSD检测器:漂移管温度45°C,载气流速2.0L/min。收集保留时间为 24. 5min的色谱峰流分,接收液于30°C下减压浓缩后转移到IOml样品瓶中氮气室温下氮气 吹干,即得1-油酸-2-亚油酸甘油二酯。
[0172] 室温下,无色油状物;
[0173] Q-T0F/MS :准分子离子峰[M+Na]+ = m/z641. 5121 (Calcd.= 641. 5115, C39H70O5Na),不饱和度=5 ;
[0174] 1H NMR 谱和 13C NMR 谱见表 12。
[0175] 表 12 1H NMR 和 13C NMR 谱数据(CDCl3)
[0176]
[0177] 实施例6
[0178] 薏该仁油8000mg加入IOml正己烧超声溶解,再用流动相丙酮配制成50mg/mL的 薏苡仁油溶液。利用CHEETAH-HP100高效液相制备色谱仪进行分离;流动相:正己烷:丙酮 = 94:6(v/v);每次分离进样量:15ml;色谱柱:Venusil XBP silica(20*250mm,10ym);流 速:18mL/min。ELSD检测器:漂移管温度45°C,载气流速2. OL/min。收集保留时间为27min 的色谱峰流分,接收液于30°C下减压浓缩后转移到IOml样品瓶中氮气室温下氮气吹干,即 得1,2_二亚油酸甘油酯。
[0179] 室温下,无色油状物;
[0180] Q-T0F/MS :准分子离子峰[M+Na]+ = m/z639. 4964 (Calcd.= 639. 4959, C39H68O5Na),不饱和度=6 ;
[0181] 1H NMR 谱和 13C NMR 谱见表 13。
[0182] 表 13 1H NMR 和 13C NMR 谱数据(CDCl3)

[0185] 实施例7三亚油酸甘油酯的制备
[0186] 利用P3000A高效液相制备色谱仪进行分离,流动相A :乙腈,流动相B :乙腈-四 氢呋喃(I: 1),用流动相B配制成50mg/mL的薏苡仁油溶液,每次分离进样体积I. 5mL ;色 谱柱:Superstar Benetnach? C18(20mmX 150πιπι,5μ m);梯度条件:流动相 B :0 ~27min : 50%~60%,27~35111丨11:90%,35~45111丨11:100% ;流速:1811117111丨11;紫外检测波长:20811111 ; 收集保留时间为12. 6~14. 2min的色谱峰流分,在氮气的保护下采用旋转蒸发仪减压浓 缩,用氯仿转移至IOmL小瓶,在真空干燥箱中35°C干燥6h后,充入氮气,干燥好的样品于冰 箱中冷冻保存,即得三亚油酸甘油酯。
[0187] HR-EI-MS :m/z = 878. 7344 (Calcd. = 878. 7363, C57H98O6),不饱和度=9。
[0188] IR(KBr film) :1746、1170、1098 ;2928、2856、724 ;3008、1655(弱)cm \
[0189] 1H-NMR 数据见表 14。
[0190] 13C-NMR 数据见表 15。
[0191] 表14实施例7-14所述化合物的1H-NMR图谱数据
[0192]
[0193] 其中,A :三亚油酸甘油酯,B :1-油酸-2, 3-二亚油酸甘油酯,C :1-棕榈酸-2, 3-二 亚油酸甘油酯,D : 1,3_二油酸-2-亚油酸甘油酯,E :1_棕榈酸-2-亚油酸-3-油酸甘油酯, F :1,3-二棕榈酸-2-亚油酸甘油酯,G :三油酸甘油酯,H :1-棕榈酸-2, 3-二油酸甘油酯。
[0194] 表15实施例7-14所述化合物的13C-NMR图谱数据
[0196] 其中,A :三亚油酸甘油酯,B :1_油酸-2, 3-二亚油酸甘油酯,C :1_棕榈酸-2, 3-二 亚油酸甘油酯,D : 1,3_二油酸-2-亚油酸甘油酯,E :1_棕榈酸-2-亚油酸-3-油酸甘油酯, F :1,3-二棕榈酸-2-亚油酸甘油酯,G :三油酸甘油酯,H :1-棕榈酸-2, 3-二油酸甘油酯。
[0197] 实施例8 1-油酸-2, 3-二亚油酸甘油酯的制备
[0198] 利用P3000A高效液相制备色谱仪进行分离,流动相A :乙腈,流动相B :乙腈-四 氢呋喃(I: I),用流动相B配制成50mg/mL的薏苡仁油溶液,每次分离进样体积I. 5mL ;色 谱柱:Superstar Benetnach? C18(20mmX 150πιπι,5μ m);梯度条件:流动相 B :0 ~27min : 50%~60%,27~35111丨11:90%,35~45111丨11:100% ;流速:1811117111丨11;紫外检测波长:20811111 ; 收集保留时间为15. 4~17. 3min的色谱峰流分,在氮气的保护下采用旋转蒸发仪减压浓 缩,用氯仿转移至IOmL小瓶,在真空干燥箱中35°C干燥6h后,充入氮气,干燥好的样品于冰 箱中冷冻保存,即得1-油酸-2, 3-二亚油酸甘油酯。
[0199] HR-EI-MS :m/z = 880. 7518 (Calcd. = 880. 7520, C55H98O6),不饱和度=7。
[0200] IR(KBr film) : 1747,1164,1098 ;2925,2854,723 ;3008,1655(弱)cm \
[0201] 1H-NMR 数据见表 14。
[0202] 13C-NMR 数据见表 15。
[0203] 实施例9 1-棕榈酸-2, 3-二亚油酸甘油酯的制备
[0204] 利用P3000A高效液相制备色谱仪进行初步分离,流动相A :乙腈,流动相B :乙 腈-四氢呋喃(1:1),用流动相B配制成50mg/mL的薏苡仁油溶液,每次分离进样体积 I. 5mL ;色谱柱:Superstar Benetnach? C18(20mmX 150mm,5 μ m);梯度条件:流动相 B :0 ~ 2711^11:50%~60%,27~35111丨11:90%,35~45111丨11 :100%;流速:1811117111丨11;紫外检测波长 : 208nm ;收集保留时间为17. 4~18. Imin的色谱峰流分,在氮气的保护下采用旋转蒸发仪减 压浓缩,得粗品。
[0205] 二次纯化时流动相A :乙腈,流动相B :乙腈-四氢呋喃(I: 1),将上述粗品用流动 相B配制成20mg/mL的溶液,每次分离进样体积I. 5mL ;色谱柱:Superstar Benetnach? (:18(1011111^250臟,5 4 111);梯度条件:流动相8:0~2311^11:50%~60%,32~4311^11 :60%~ 90%,43~60min :100% ;流速:3mL/min ;紫外检测波长:208nm,收集保留时间为31. 2~ 34. 7min的色谱峰流分,在氮气的保护下采用旋转蒸发仪减压浓缩,用氯仿转移至IOmL小 瓶,在真空干燥箱中35°C干燥6h后,充入氮气,干燥好的样品于冰箱中冷冻保存,即得1-棕 榈酸-2, 3-二亚油酸甘油酯单体。
[0206] HR-EI-MS :m/z = 854. 7370 (Calcd. = 854. 7363, C55H98O6),不饱和度=7。
[0207] IR(KBr Flim) :1746,1165,1095 ;2926, 2854, 722 ;3009,1648cm 1(弱)。
[0208] 1H-NMR 数据见表 14。
[0209] 13C-NMR 数据见表 15。
[0210] 实施例10 1,3-二油酸-2-亚油酸甘油酯的制备
[0211] 利用P3000A高效液相制备色谱仪进行分离,流动相A :乙腈,流动相B :乙腈-四 氢呋喃(I: 1),
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