胰高血糖素/glp-1受体共激动剂的制作方法

专利名称：：胰高血糖素/glp-1受体共激动剂的制作方法胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂相关申请的交叉引用本申请要求2007年2月15日提交的美国临时专利申请第60/890，087号和2007年5月17日提交的美国临时专利申请第60/938，565号的优先权。这些临时申请中公开的主题由此通过引用明确并入本申请。背景前胰高血糖素原是158个氨基酸的前体多肽，其在不同组织中被加工以形成许多不同的胰高血糖素原衍生肽，包括胰高血糖素、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、胰高血糖素样肽-2(GLP-2)和泌酸调节肽(OXM)，它们参与各种各样的生理功能，包括葡萄糖稳态、胰岛素分泌、胃排空和肠生长、以及食物摄入的调节。胰高血糖素是对应于前胰高血糖素原的氨基酸33至61的29-氨基酸肽，而GLP-1产生为对应于前胰高血糖素原的氨基酸72至108的37-氨基酸肽。GLP-1(7-36)酰胺或GLP-1(7-37)酸是显示基本等同的对GLP-1受体的活性的GLP-1的生物有效形式。当血液葡萄糖水平降至太低而不能为身体活动提供足够的能量时，即发生低血糖。在成人或大于io岁的儿童中，除了作为糖尿病治疗的副作用外低血糖是罕见的，但是它可由其它药物治疗或疾病、激素或酶缺陷、或肿瘤造成。当血液葡萄糖开始下降时，胰腺产生的激素胰高血糖素发信号让肝脏分解糖原并释放葡萄糖，引起血液葡萄糖水平向正常水平上升。因此，葡萄糖调节中的胰高血糖素一般作用是对抗胰岛素的作用并维持血液葡萄糖水平。但是对于糖尿病患者，对低血糖的此胰高血糖素应答可能受损，使得葡萄糖水平难以回到正常范围。低血糖是需要立即求医的威胁生命事件。施用胰高血糖素是治疗急性低血糖的成熟药物治疗，并且它可在施用数分钟内恢复葡萄糖的正常水平。当胰高血糖素用于低血糖的急性医学治疗时，将胰高血糖素的结晶形式溶解于稀酸缓冲液，然后肌内注射该溶液。虽然此治疗是有效的，但是这种方法麻烦，并且对于半意识状态的人是危险的。因此，需要保持或超过母体分子的生物性能但是在相关的生理条件下足够可溶和稳定以使其可预配制为即时注射的溶液的胰高血糖素类似物。另外，鼓励糖尿病患者保持接近正常的血液葡萄糖水平以延迟或防止微血管并发症。实现此目标通常需要密集的胰岛素治疗。在努力实现此目标时，医生已遭遇他们的糖尿病患者的低血糖频率和严重程度的大幅度增加。因此，需要治疗糖尿病的改进的药物和方法，其引起低血糖的可能性低于现在的胰岛素治疗。与胰高血糖素相比，GLP-1具有不同的生物活性。它的作用包括剌激胰岛素合成和分泌、抑制胰高血糖素分泌和抑制食物摄入。已显示GLP-1在糖尿病患者中降低高血糖(升高的葡萄糖水平)。毒蜥外泌肽-4(Exendin-4)是一种来自蜥蜴毒液的与GLP-1共有约50X氨基酸同一性的肽，活化GLP-1受体并同样显示在糖尿病患者中降低高血糖。也有证据表明GLP-1和毒蜥外泌肽_4可降低食物摄入和促进体重减轻，此效应将不仅对糖尿病患者有益，而且对患有肥胖的患者有益。肥胖患者具有更高的糖尿病、高血压、高脂血症、心血管疾病和肌肉骨骼疾病的风险。因此，仍需要替代的并且优选地改进的治疗糖尿病和肥胖的方法。概述如本文所述，提供了高效价胰高血糖素激动剂类似物，其还表现出增加的对胰高血糖素受体的活性，并且在进一步的实施方案中表现出增强的生物物理稳定性和/或水溶解性。另外，根据本发明的另一方面，提供了胰高血糖素激动剂类似物，其丧失了天然胰高血糖素对胰高血糖素受体相对GLP-1受体的选择性，并因而代表这两种受体的共激动剂(co-agonist)。胰高血糖素类似物内选择的氨基酸修饰可控制类似物对GLP-1受体与胰高血糖素受体的相对活性。因此，本发明的又一方面提供相对GLP-1受体具有对胰高血糖素受体的更高活性的胰高血糖素共激动剂类似物、对两种受体具有大约相等的活性的胰高血糖素共激动剂类似物、和相对胰高血糖素受体具有对GLP-1受体的更高活性的胰高血糖素共激动剂类似物。后一类共激动剂可被加工为表现出极小或没有对胰高血糖素受体的活性，而仍保留以与天然GLP-1相同或比其更高的效价活化GLP-1受体的能力。这些类似物中的任一个还可包括赋予增强的生物物理稳定性和/或水溶解性的修饰。展示对胰高血糖素受体和GLP-1受体的共激动性的胰高血糖素类似物对于几种应用是有利的。首先，使用胰高血糖素治疗低血糖可过补偿低血液葡萄糖水平并造成过量的血液葡萄糖水平。如果施用胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂，附加的GLP-1剌激可缓冲胰高血糖素激动剂效应，以防止低血糖治疗造成过量的葡萄糖血液水平。另外如本文所述，本发明的胰高血糖素共激动剂类似物在单独或与其它抗糖尿病或抗肥胖治疗组合施用时，可用于控制高血糖、或引起体重减轻或防止体重增加。引起体重减轻的另一化合物是泌酸调节肽，一种在小肠中发现的天然存在的消化性激素(参见Diabetes2005;54:2390-2395)。泌酸调节肽是37氨基酸肽，含有胰高血糖素的29氨基酸序列(即SEQIDNO:1)后接SEQIDNO:27(KRNRNNIA)的8氨基酸羧基末端延伸。虽然本发明考虑了本文描述的胰高血糖素类似物可任选地结合至此8氨基酸羧基末端延伸(SEQIDNO:27)，但是本发明在一些实施方案中也特别地考虑了缺乏SEQIDNO:27的8连续羧基氨基酸的类似物及类似物的用途。可通过氨基酸修饰定制化合物以调节所述肽的GLP-1活性，因此可使本发明的胰高血糖素类似物适以治疗特定的疾患或疾病。更特别地，本文提供了胰高血糖素类似物，其中每种类似物显示对分别的胰高血糖素受体和GLP-1受体的特征性的相对活性水平。例如，可对每种肽进行修饰以产生相对于天然GLP-1具有从至少约10%(包括至少约20%、30%、40%、50%、60%、75%、100%、125%、150%、175%)至约200%的任何百分比或更高的对GLP-1受体的活性和相对于天然胰高血糖素具有从至少约10%(包括约20%、30%、40%、50%、60%、75%、100%、125%、150%、175%、200%、250%、300%、350%、400%、450%)至约500%的任何百分比或更高的对胰高血糖素受体的活性的胰高血糖素肽。天然胰高血糖素的氨基酸序列是SEQIDNO:l，GLP-1(7-36)酰胺的氨基酸序列是SEQIDNO:52，而GLP-1(7-37)酸的氨基酸序列是SEQIDNO:50。在示例性实施方案中，胰高血糖素肽可表现出天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的至少10X和天然GLP-1对GLP-1受体的活性的至少50%、或天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的至少40%和天然GLP-1对GLP-1受体的活性的至少40%、或天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的至少60%和天然GLP-1对GLP-1受体的活性的至少60%。胰高血糖素肽对胰高血糖素受体相对GLP-1受体的选择性可描述为胰高血糖素/GLP-1活性的相对比值(相对于天然胰高血糖素的肽对胰高血糖素受体的活性除以相对于天然GLP-1的肽对GLP-1受体的活性)。例如，表现出天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的60%和天然GLP-1对GLP-1受体的活性的60%的胰高血糖素肽具有1:1的胰高血糖素/GLP-1活性比值。胰高血糖素/GLP-1活性的示例性比值包括约l:1、1.5:1、2:i、3:i、4:i、5:i、6:i、7:i、8:i、9:i或io:i，或约i:io、i:9、i:8、i:7、i:6、i:5、i:4、i:3、i:2、或1:1.5。作为一个实例，胰高血糖素/glp-i活性比值为IO:l表示胰高血糖素受体相对GLP-1受体的10倍选择性。相似地，GLP-1/胰高血糖素活性比值为10:1表示GLP-1受体相对胰高血糖素受体的10倍选择性。根据一个实施方案，提供了具有增强的效价和任选地提高的溶解度和稳定性的胰高血糖素类似物。在一个实施方案中，增强的胰高血糖素效价由天然胰高血糖素(SEQIDN0:1)位置16处的氨基酸修饰提供。作为非限制性实例，此增强的效价可通过用谷氨酸或用具有长度为4个原子的侧链的另一荷负电的氨基酸，或替代地用谷氨酰胺、高谷氨酸、或高磺丙氨酸中任一个、或具有含有至少一个杂原子(如N、0、S、P)并且侧链长度为约4(或3-5)个原子的侧链的荷电氨基酸，取代位置16处天然存在的丝氨酸而提供。在一个实施方案中，所述增强效价的胰高血糖素激动剂包含肽SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDN0:6、SEQIDNO:7、或SEQIDNO:5的胰高血糖素激动剂类似物。根据一个实施方案，提供了相对于野生型胰高血糖素具有增强的对胰高血糖素受体的效价的胰高血糖素类似物蛋白，其中所述肽包含序列SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9或SEQIDNO:lO，其中所述胰高血糖素肽保留其相对于GLP-l受体对胰高血糖素受体的选择性。胰高血糖素受体活性可通过位置3处的氨基酸修饰降低，如用任何氨基酸取代位置3处天然存在的谷氨酰胺。已显示用酸性、碱性或疏水性氨基酸(谷氨酸、鸟氨酸、正亮氨酸)在此位置的取代大幅度降低或破坏胰高血糖素受体活性。在一些实施方案中，所述类似物具有天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的约10%或更低，如约1-10%，或约0.1_10%、或大于约0.1%但小于约10%，且表现出GLP-1对GLP-1受体的活性的至少20%。例如，本文描述的示例性类似物具有约O.5%、约1%或约7%的天然胰高血糖素的活性，且表现出GLP-1对GLP-1受体的活性的至少20%。在另一实施方案中，提供了相对于天然胰高血糖素肽具有增强的或保留的对胰高血糖素受体的效价、而且具有大大增强的对GLP-1受体的活性的胰高血糖素类似物。胰高血糖素一般具有天然GLP-1对GLP-1受体的活性的约1%，而GLP-1—般具有天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的小于约0.01%。增强的对GLP-1受体的活性是通过用电荷中性基团(比如酰胺或酯)置换C-末端氨基酸的羧酸提供的。在一个实施方案中，这些胰高血糖素类似物包含序列SEQIDN0:20，其中所述羧基末端氨基酸具有取代天然氨基酸中发现的羧酸基的酰胺基。这些胰高血糖素类似物具有对胰高血糖素受体和GLP-1受体二者的强活性，并因此充当两种受体的共激动剂。根据一个实施方案，提供了胰高血糖素受体和GLP-1受体共激动剂，其中所述肽包含序列SEQIDN0:20，其中位置28处的氨基酸是Asn或Lys且位置29处的氨基酸是Thr-酰胺。增强的对GLP-1受体的活性还通过在被三个居间氨基酸分开的两个氨基酸的侧链之间形成分子内桥来稳定胰高血糖素的C-末端部分(大约氨基酸12-29)中的ci-螺旋结构而提供。在示例性实施方案中，所述桥或连接体长度为约8(或约7-9)个原子，并且在位置12和16处的、或位置16和20处的、或位置20和24处的、或位置24和28处的氨基酸的侧链之间形成。这些氨基酸的侧链可通过氢键结合或离子相互作用(比如形成盐桥)或通过共价键彼此连接。根据一个实施方案，提供了包含胰高血糖素肽SEQIDN0:20的胰高血糖素激动剂，其中位于位置12、20或28处的赖氨酸残基和位于位置16或24的谷氨酸残基的侧链之间形成内酰胺环，其中侧链参与形成所述内酰胺环的胰高血糖素肽的两个氨基酸彼此间隔三个居间氨基酸。根据一个实施方案，所述携带内酰胺的胰高血糖素类似物包含选自由SEQIDN0:11、SEQIDN0:12、SEQIDN0:13、SEQIDN0:14、SEQIDNO:15、SEQIDN0:16、SEQIDN0:17和SEQIDNO:18组成的组的氨基酸序列。在一个实施方案中，所述携带内酰胺的肽的羧基末端氨基酸包含代替末端羧酸的酰胺基或酯基。在一个实施方案中，SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13和SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17和SEQIDNO:18的胰高血糖素肽进一步包含共价结合至SEQIDNO:ll、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17或SEQIDNO:18的羧基末端的另外氨基酸。在进一步的实施方案中，提供了包含选自由SEQIDNO:66、SEQIDNO:67、SEQIDNO:68和SEQIDNO:69组成的组的序列的胰高血糖素肽，其进一步包含共价结合至SEQIDNO:66、SEQIDNO:67、SEQIDNO:68和SEQIDNO:69的羧基末端的另外氨基酸。在一个实施方案中，位置28处的氨基酸是天冬酰胺或赖氨酸，位置29处的氨基酸是苏氨酸。增强的对GLP-1受体的活性也通过位置20处的氨基酸修饰提供。在一个实施方案中，位置20处的谷氨酰胺置换为另一亲水性氨基酸，所述亲水性氨基酸具有荷电的或能形成氢键、并且长度为至少约5(或约4-6)个原子的侧链，例如，赖氨酸、瓜氨酸、精氨酸或鸟氨酸。如上所述的增加或降低胰高血糖素受体活性和增加GLP-1受体活性的修饰中的任何一个可单独或组合应用。增加GLP-1受体活性的修饰的组合一般提供比单独采用此类修饰中的任何一个更高的GLP-1活性。例如，本发明提供包含位置16处的、位置20处的和C-末端羧酸基处的修饰，任选地具有位置16和20处的氨基酸之间的共价键的胰高血糖素类似物；包含位置16处的和C-末端羧酸基处的修饰的胰高血糖素类似物；包含位置16和20处的修饰的、任选地具有位置16和20处的氨基酸之间的共价键的胰高血糖素类似物；和包含位置20处的和C-末端羧酸基处的修饰的胰高血糖素类似物；任选地条件是位置12处的氨基酸不是Arg;或任选地条件是位置9处的氨基酸不是Glu。位置1或2处的其它修饰，如本文所述，可增加所述肽对二肽基肽酶IV(DPPIV)切割的抗性，例如，位置2处的氨基酸可置换为0_丝氨酸、丙氨酸、D-丙氨酸、缬氨酸、甘氨酸、N-甲基丝氨酸J-甲基丙氨酸、或氨基异丁酸。替代地或另外，位置1处的氨基酸可置换为0-组氨酸、去氨基组氨酸、羟基组氨酸、乙酰基组氨酸、高组氨酸、^甲基组氨酸、a-甲基组氨酸、咪唑乙酸或a，a_二甲基咪唑(imidiazole)乙酸(DMIA)。观察到位置2处的修饰(如位置2处的AIB)和在一些情况下位置l处的修饰可降低胰高血糖素活性，有时显著地降低；令人惊奇的是，胰高血糖素活性的此降低可通过位置12和16、16和20、或20和24处的氨基酸之间的共价键、如位置16处的谷氨酸和位置20处的赖氨酸之间的内酰胺桥10恢复。在又进一步的示例性实施方案中，前述化合物中的任何一种可通过修饰SEQIDNO:1的位置15处的氨基酸以减少所述肽随时间的降解(尤其是在酸性或碱性缓冲液中)而被进一步修饰以提高稳定性。在另一实施方案中，本文公开的胰高血糖素肽的溶解度通过亲水部分与所述肽的共价连接得到增强。在一个实施方案中，所述亲水部分是聚乙二醇(PEG)链，任选地在位置16、17、21、24、29或C-末端中的一个或多个连接至所述肽。在一些实施方案中，该位置处的天然氨基酸取代为具有适合与亲水部分交联的侧链的氨基酸，以促进所述亲水部分与所述肽的连接。在其它实施方案中，被修饰为包含亲水基团的氨基酸添加至所述肽的c-末端。在一个实施方案中，所述肽共激动剂包含选自由SEQIDN0:11、SEQIDN0:12、SEQIDNO:13、SEQIDN0:14、SEQIDNO:15、SEQIDN0:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18禾PSEQIDNO:19组成的组的序列，其中所述胰高血糖素肽的位置16、17、21或24中的一个位置处的氨基酸残基的侧链进一步包含具有选自约500至约40，000道尔顿范围的分子量的聚乙二醇链。在一个实施方案中，所述聚乙二醇链具有选自约500至约5，000道尔顿范围的分子量。在另一实施方案中，所述聚乙二醇链具有约10，000至约20，000道尔顿的分子量。在其它的示例性实施方案中，所述聚乙二醇链具有约20，000至约40，000道尔顿的分子量。在另一实施方案中，前述的胰高血糖素类似物中的任何一个的溶解度可通过向所述肽的C-末端部分、优选地向SEQIDN0:l的位置C-末端至位置27引入荷电氨基酸的氨基酸取代和/或添加而得到提高。任选地，可在C-末端部分(优选地C-末端至位置27)内引入一、二或三个荷电的氨基酸。根据一个实施方案，位置28和/或29处的天然氨基酸取代为荷电的氨基酸，和/或在进一步的实施方案中，还向所述肽的C-末端添加一至三个荷电的氨基酸。在示例性实施方案中，所述荷电的氨基酸中的一个、两个或全部是荷负电的。可对所述胰高血糖素肽进行仍允许其保留胰高血糖素活性的另外的修饰(如保守取代)。在一个实施方案中，提供了SEQIDNO:20的肽的类似物，其中所述类似物与SEQIDNO:20的差异为位置17-26处的1至2个氨基酸取代，且在一个实施方案中，所述类似物与SEQIDNO:20的肽的差异为位置20处的氨基酸取代。根据一个实施方案，本文公开的胰高血糖素肽是通过向所述胰高血糖素肽的羧基末端添加第二肽来修饰的，所述第二肽例如，SEQIDNO:26、SEQIDNO:27或SEQIDNO:28。在一个实施方案中，具有选自SEQIDNO:ll、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:19、SEQIDN0:66、SEQIDNO:67、SEQIDNO:68和SEQIDNO:69组成的组的肽序列的胰高血糖素肽通过肽键共价结合至第二肽，其中所述第二肽包含选自由SEQIDN0:26、SEQIDNO:27和SEQIDNO:28组成的组的序列。在进一步的实施方案中，在包含所述C_末端延伸的胰高血糖素肽中，天然胰高血糖素肽位置29处的苏氨酸置换为甘氨酸。具有甘氨酸取代位置29处的苏氨酸并包含SEQIDN0:26羧基末端延伸的胰高血糖素类似物对GLP-1受体的效价是修饰为包含SEQIDN0:26羧基末端延伸的天然胰高血糖素的四倍。丙氨酸取代位置18处的天然精氨酸可进一步增强对GLP-1受体的效价。因此，如本文所公开的，提供了还表现出提高的溶解度和/或稳定性的高效价胰高血糖素类似物或胰高血糖素共激动剂类似物。示例性高效价胰高血糖素类似物表现出天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的至少约200%，并任选地在介于6和8之间的pH(如pH7)以至少lmg/mL的浓度可溶，并任选地在25。C下24小时后保留原始肽的至少95%(如5%或更少的原始肽被降解或切割)。作为另一个实例，示例性胰高血糖素共激动剂类似物表现出对胰高血糖素受体和GLP-1受体二者的大于约40%或大于约60%的活性(以介于约i:3和3:l之间、或介于约i:2和2:i之间的比值)，任选地在介于6和8之间的pH(如pH7)以至少lmg/mL的浓度可溶，并任选地在25。C下24小时后保留原始肽的至少95%。另一示例性胰高血糖素共激动剂类似物表现出天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的约175%或更高和天然GLP-1对GLP-1受体的活性的约20%或更低，任选地在介于6和8之间的pH(如pH7)以至少lmg/mL的浓度可溶，并任选地在25"下24小时后保留原始肽的至少95%。又一示例性胰高血糖素共激动剂类似物表现出天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的约10%或更低和天然GLP-1对GLP-1受体的活性的至少约20%，任选地在介于6和8之间的pH(如pH7)以至少lmg/mL的浓度可溶，并任选地在25t:下24小时后保留原始肽的至少95%。又一示例性胰高血糖素共激动剂类似物表现出天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的约10%或更低但高于0.1%、0.5%或1%和天然GLP-1对GLP-1受体的活性的至少约50%、60%、70%、80%、90%或100%或更高，任选地在介于6和8之间的pH(如pH7)以至少lmg/mL的浓度可溶，并任选地在25"下24小时后保留原始肽的至少95%。在一些实施方案中，此类胰高血糖素类似物保留天然胰高血糖素中对应的位置天然存在的氨基酸中的至少22、23、24、25、26、27或28(如相对于天然存在的胰高血糖素具有1-7、1-5或1-3个修饰)。下列肽的任何一种排除在本发明的化合物之外，虽然对其的进一步修饰表现出期望的共激动剂活性，使用此类化合物的药物组合物、药盒和治疗方法可包括在本发明中具有[Argl2]取代和C-末端酰胺的SEQIDNO:1的肽；具有[Argl2、Lys20]取代和C-末端酰胺的SEQIDN0:1的肽；具有[Argl2、Lys24]取代和C-末端酰胺的SEQIDN0:1的肽；具有[Argl2、Lys29]取代和C-末端酰胺的SEQIDNO:1的肽；具有[Glu9]取代的SEQIDNO:1的肽；缺少Hisl、具有[Glu9、Glul6、Lys29]取代和C-末端酰胺的SEQIDNO:1的肽；具有[Glu9、Glul6、Lys29]取代和C-末端酰胺的SEQIDNO:1的肽；具有通过内酰胺桥连接的[Lysl3、Glul7]取代和C-末端酰胺的SEQIDNO:1的肽；具有通过内酰胺桥连接的[Lysl7、Glu21]取代和C_末端酰胺的SEQIDNO:1的肽；缺少Hisl、具有通过内酰胺桥连接的[Glu20、Lys24]取代的SEQIDNO:1的肽。根据一个实施方案，提供了包含本文公开的任何新型胰高血糖素肽，优选地无菌的和优选地纯度水平为至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%，和药学可接受稀释剂、载体或赋形剂的药物组合物。此类组合物可含有浓度为至少0.5mg/ml、lmg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、11mg/ml、12mg/ml、13mg/ml、14mg/ml、15mg/ml、16mg/ml、17mg/ml、18mg/ml、19mg/ml、20mg,ml、2lmg/ml、22mg/ml、23mg/ml、24mg/ml、25mg/ml或更高的胰高血糖素肽。在一个实施方案中，所述药物组合物包含灭菌并任选地储存在不同容器中的水溶液。根据一个实施方案，本发明的化合物可用于制备即时注射的预配制溶液。在其它实施方案中，所述药物组合物包含冻干的粉剂。所述药物组合物可进一步包装为药盒的一部分，所述药盒包括向患者施用所述组合物的一次性设备。所述容器或药盒可被标记以在室温下或在冷冻温度下储存。12根据一个实施方案，提供了使用本发明的胰高血糖素肽的预配制的水性组合物快速增加葡萄糖水平或治疗低血糖的方法。所述方法包括施用有效量的包含本公开的新颖的修饰胰高血糖素肽的水溶液的步骤。在一个实施方案中，所述胰高血糖素肽在胰高血糖素肽的位置21或24处聚乙二醇化，且所述PEG链具有约500至约5，000道尔顿的分子量。在一个实施方案中，修饰的胰高血糖素溶液预包装在用于向患有低血糖的患者施用所述组合物的设备中。根据一个实施方案，提供了在胰岛素依赖性患者中调节血液葡萄糖水平的改进方法。所述方法包括施用治疗上有效控制糖尿病的量的胰岛素和施用治疗有效防止低血糖的量的本公开的新颖的修饰胰高血糖素肽的步骤，其中所述施用步骤在彼此的12小时内进行。在一个实施方案中，所述胰高血糖素肽和所述胰岛素作为单一组合物共施用，其中所述胰高血糖素肽是用具有选自约5，000至约40，000道尔顿范围的分子量的PEG链聚乙二醇化的。在另一实施方案中，提供了引起肠道暂时麻痹的方法。所述方法包括向患者施用本文公开的一种或多种胰高血糖素肽的步骤。在又一实施方案中，提供了治疗高血糖的方法、或降低体重增加或引起体重减轻的方法，其包括施用有效量的包含本发明的胰高血糖素肽的水溶液。在一个实施方案中，任一方法包括施用有效量的包含胰高血糖素激动剂的组合物，所述胰高血糖素激动剂选自由SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDN0:17、SEQIDNO:18和SEQIDNO:19组成的组。在另一实施方案中，所述方法包括施用有效量的包含胰高血糖素激动剂的组合物，其中所述胰高血糖素激动剂包含选自由SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:19、SEQIDNO:66、SEQIDNO:67、SEQIDNO:68和SEQIDNO:69组成的组的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽的氨基酸29通过肽键结合至第二肽，且所述第二肽包含序列SEQIDNO:26、SEQIDNO:27或SEQIDN0:28。在进一步的实施方案中，提供了包括共施用常规剂量或降低剂量的胰岛素和本发明的胰高血糖素的治疗糖尿病的方法。还提供了用本发明的胰高血糖素肽而不共施用胰岛素治疗糖尿病的方法。在又一方面，本发明提供治疗高血糖的新颖方法和降低食欲或促进体重减轻的新颖方法，其包括施用活化胰高血糖素受体和GLP-1受体二者的胰高血糖素/GLP-1共激动剂分子(包括其药学可接受盐)。胰高血糖素受体和GLP-1受体二者的激动(即活化)提供了在治疗高血糖中与单独的GLP-1激动相比意想不到的改进。因此，添加胰高血糖素激动提供了意想不到的加合或协同效应、或其它意想不到的临床益处。根据此类方法，还考虑了常规剂量的胰岛素、降低剂量的胰岛素、或无胰岛的施用。胰高血糖素受体的激动还在促进体重减轻或防止体重增加中具有与单独的GLP-1激动相比意想不到的有益效应。示例性胰高血糖素/GLP-1共激动剂分子包括本发明的胰高血糖素肽、活化GLP-1受体和胰高血糖素受体二者的GLP-1类似物、胰高血糖素和GLP-1的融合体、或胰高血糖素类似物和GLP-1类似物的融合体、或其化学修饰的衍生物。替代地，活化胰高血糖素受体的化合物可与活化GLP-1受体的化合物(比如GLP-l类似物、毒蜥外泌肽-4类似物、或其衍生物)共施用。本发明还考虑了胰高血糖素激动剂类似物与GLP-1激动剂类似物的共施用。13用于治疗高血糖和/或用于降低食欲或促进体重减轻的此类方法包括施用具有任选地与位置16和/或20处的修饰组合的位置12处的修饰(如Argl2)的胰高血糖素类似物。本发明的方法还包括施用包含氨基酸12至29区域内被三个居间氨基酸分开的两个氨基酸，如位置12和16、位置13和17(例如Lysl3Glu17或Glul3Lys17)、位置16和20、位置17和21(如Lysl7Glu21或Glul7Lys21)、位置20和24、或位置24和28的侧链之间的分子内桥并任选地包括C-末端酰胺或酯的胰高血糖素类似物，任选的条件是位置9处的氨基酸不是Glu。根据一个实施方案，排除在此类胰高血糖素/GLP-1共激动剂分子之外的是在先前技术中已知可用于此类方法的任何胰高血糖素类似物或GLP-1类似物。在另一实施方案中，美国专利第6，864，069号中描述的作为GLP-1激动剂和胰高血糖素拮抗剂二者用于治疗糖尿病的肽也排除在胰高血糖素/GLP-1共激动剂分子之外。在另一实施方案中，排除的是使用胰高血糖素拮抗剂治疗糖尿病、比如Unson等人，J.Biol.Chem.，264:789-794(1989)，Ahn等人，J.Med.Chem.，44:3109-3116(2001)和Sapse等人，Mol.Med.，8(5):251-262(2002)中描述的拮抗剂。在进一步的实施方案中，泌酸调节肽或含有泌酸调节肽(SEQIDN0:27)的8个C-末端氨基酸的胰高血糖素类似物也排除在胰高血糖素/GLP-1共激动剂分子之外。预期用于治疗高血糖的此类方法用于许多类型的高血糖，包括糖尿病、I型糖尿病、n型糖尿病、或妊娠糖尿病(胰岛素依赖性或非胰岛素依赖性)和降低糖尿病的并发症，包括肾病、视网膜病和血管疾病。用于降低食欲或促进体重减轻的此类方法预期用于降低体重、防止体重增加、或治疗各种原因的肥胖(包括药物诱导的肥胖)和降低与肥胖有关的并发症，包括血管疾病(冠状动脉疾病、中风、外周血管疾病、缺血再灌注等)、高血压、n型糖尿病发作、高脂血症和肌肉骨骼疾病。本文描述的所有治疗方法、药物组合物、药盒和其它相似实施方案考虑，使用术语胰高血糖素类似物包括其所有药学可接受盐或酯。附图简述图1是代表于37"分别孵育24、48、72、96、144和166小时的胰高血糖素Cys21马来酰亚胺基PEG5K的稳定性的条形图。图2代表在pH5于37t:分别孵育24、72或144小时的胰高血糖素Cys21马来酰亚胺基PEG5K的HPLC分析产生的数据。图3代表显示胰高血糖素类似物的受体介导的cAMP诱导的数据。更具体地，图3A比较了胰高血糖素类似物E16、K20參，E15、E16▲，E16、K20V，E15、E16^,E16一和Gluc-NH2B对胰高血糖素受体的诱导。图4A和4B代表显示胰高血糖素类似物的受体介导的cAMP诱导的数据。更具体地，图4A比较了胰高血糖素类似物Gluc-NH2參，E16Gluc-NH2▲，E3、E16Gluc_NH2V,0rn3、E16Gluc-NH24和Nle3、E16Gluc_NH2^相对于天然胰高血糖素■的对胰高血糖素受体的诱导，而图4B比较了胰高血糖素类似物Gluc-NH2參，E16Gluc-NH2▲，E3、E16Gluc_NH2T，0rn3、E16Gluc-NH2^和Nle3、E16Gluc_NH2^4目对于天然GLP-1B对GLP-1受体的诱导。图5A和5B代表显示胰高血糖素类似物的受体介导的cAMP诱导的数据。更具体地，图5A比较了胰高血糖素类似物(E16、K20Gluc-NH2參(5nM，贮液)，E15、14E16Gluc-NH2A(5nM，贮液)，E16、K20Gluc-NH2T(10nM，贮液)，E15、E16Gluc_NH24(10nM，贮液)和E16Gluc-NH2>)相对于胰高血糖素_NH2(■)对胰高血糖素受体的诱导，而图5B比较了胰高血糖素类似物(E16、K20Gluc-NH2參，E15、E16Gluc_NH2A和E16Gluc_NH2)相对于GLP-1(■)和胰高血糖素_NH2(□)对GLP-1受体的诱导。图6A和6B代表显示胰高血糖素类似物的受体介导的cAMP诱导的数据。更具体地，图6A比较了胰高血糖素类似物(Gluc-NH2參，K12E16-NH2内酰胺A，E16K20_NH2内酰胺V,K20E24-NH2内酰胺4和E24K28_NH2内酰胺一)相对于胰高血糖素(■)对胰高血糖素受体的诱导，而图6B比较了胰高血糖素类似物(Gluc-NH2參，K12E16-NH2内酰胺A、E16K20-NH2内酰胺V，K20E24-NH2内酰胺-和E24K28_NH2内酰胺^)相对于GLP-1(■)对GLP-1受体的诱导。图7A和7B代表显示胰高血糖素类似物的受体介导的cAMP诱导的数据。更具体地，图7A比较了胰高血糖素类似物(Gluc-NH2參，E16Gluc-NH2▲，K12、E16Gluc_NH2内酰胺"T,E16、K20Gluc-NH24和E16、K20Gluc_NH2内酰胺一)相对于胰高血糖素(■)对胰高血糖素受体的诱导，而图7B比较了胰高血糖素类似物(Gluc-NH2參、E16Gluc-NH2▲、K12、E16Gluc-NH2内酰胺V、E16、K20Gluc_NH24和E16、K20Gluc_NH2内酰胺一)相对于GLP-1(■)对GLP-1受体的诱导。图8A-8F代表显示胰高血糖素类似物对胰高血糖素受体(图8A、8C和8E)或GLP-1受体(图8B、8C和8F)的受体介导的cAMP诱导的数据，其中hE=高谷氨酸和hC=高磺丙氨酸。图9A和9B:代表显示GLP(17-26)胰高血糖素类似物的受体介导的cAMP诱导的数据，其中天然胰高血糖素(SEQIDNO:1)的氨基酸位置17-26已被取代为天然GLP-1(SEQIDNO:50)的位置17-26的氨基酸。更具体地，图9A比较了指定的GLP(17-26)胰高血糖素类似物对胰高血糖素受体的诱导，而图9B比较了指定的GLP(17-26)胰高血糖素类似物对GLP-1受体的诱导。图10A-E:是提供体内数据的图，其显示了本发明的胰高血糖素肽在皮下注射指示量的相应化合物的小鼠中引起体重减轻的能力。图IOA-IOE中列出的胰高血糖素肽的序列指示符如下所示对于图10A:嵌合体(Chimera)2Aib2C2440KPEG(SEQIDNO:486)，Aib2C24嵌合体240K内酰胺(SEQIDNO:504)和Aib2E16K20Gluc_NH2Lac40K(SEQIDNO:528);图10B:Aib2C24Chi2内酰胺40K(SEQIDNO:504)，DMIAlC24Chi2内酰胺40K(SEQIDNO:505)，嵌合体2DMIA1C2440K(SEQIDNO:519)和嵌合体2Aib2C2440K(SEQIDNO:486)，其中序列末尾的数字指示所用的剂量，70或350nmol/kg;图IOC:AIB2w/(有)内酰胺C2440K(SEQIDNO:504)，AIB2E16K20w/内酰胺C2440K(SEQIDNO:528)，DMIAlE16K20w/内酰胺C2440K(SEQIDNO:510)，DMIA1E16K20w/内酰胺CEX40K(SEQIDNO:513)和DMIAlE16K20w/o(没有)内酰胺CEX40K(SEQIDNO:529);图10D:AIB2w内酰胺C2440K(SEQIDNO:504)，AIB2E16K20w内酰胺C2440K(SEQIDNO:528)，DMIAlE16K20w内酰胺C2440K(SEQIDNO:510)和DMIAlE16K20w内酰胺/CexC2440K(SEQIDN0:513)，其中序列末尾的数字指示所用的剂量，14或70nmol/kg/wk;图10E:AIB2w/o内酰胺C2440K(SEQIDNO:486)，Chi2AIB2C24CEX40K(SEQIDNO:533)、AIB2E16A18K20C2440K(SEQIDNO:492)，AIB2w/o内酰胺CEXG29C4040K(SEQIDNO:488)，AIB2w/o内酰胺CEXC40C41-2(SEQIDNO:532)，AIB2w/o内酰胺CEXC24C40-2(SEQIDNO:531)和AIB2w/o内酰胺C2460K(SEQIDNO:498)，其中名称40K或60K代表连接至胰高血糖素肽的聚乙烯链的分子量。详细描述定义在描述和要求保护本发明时，将根据下面列出的定义使用下列术语。如本文所用，术语"药学可接受载体"包括任何标准的药学载体，比如磷酸缓冲盐水溶液、水、乳剂(比如油/水或水/油乳剂)和各种类型的润湿剂。该术语还包括美国联邦政府管理机构批准的或列于《美国药典》的用于动物包括人类的任何剂。如本文所用术语"药学可接受盐"指保留母体化合物的生物活性并且不是生物学上或在其他方面不希望的化合物的盐。本文公开的许多化合物能够依靠存在的氨基和/或羧基基团或与其相似的基团形成酸式盐和/或碱式盐。药学可接受碱加成盐可从无机和有机碱制备。无机碱衍生的盐包括，仅作为实例，钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、*丐盐和镁盐。有机碱衍生的盐包括但不限于伯胺、仲胺和叔胺的盐。药学可接受酸加成盐可从无机和有机酸制备。无机酸衍生的盐包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸和类似酸。有机酸衍生的盐包括乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸和类似酸。如本文所用，术语"治疗"包括预防特定的病症或疾患，或缓解与特定的病症或疾患有关的症状和/或防止或消除所述症状。例如，如本文所用，术语"治疗糖尿病"将一般指向正常水平方向改变葡萄糖血液水平，并可根据给定的情形包括增加或降低血液葡萄糖水平。如本文所用，胰高血糖素肽的"有效"量或"治疗有效量"指无毒但足以提供所需效应的所述肽的量。例如一种所需的效应可以是防止或治疗低血糖，例如由血液葡萄糖水平的增加所测量的。本公开的共激动剂类似物的一种替代的所需效应可包括治疗高血糖，如，由血液葡萄糖水平接近正常的变化所测量的，或引起体重减轻/防止体重增加，如，由体重降低所测量的，或防止或降低体重的增加，或使身体脂肪的分布正常化。"有效"的量将根据个体的年龄和全身情况、施用模式和类似因素而在受治疗者中不同。因此，不是总可以指定精确的"有效量"。不过，在任何个体情况下的适当"有效"量可由本领域普通技术人员使用常规实验确定。术语"肠胃外"指不通过消化道而是通过一些其它路径，比如皮下、肌内、脊柱内或静脉内。如本文所用，术语"纯化的"和类似术语涉及分子或化合物以基本不含一般在天然或自然环境中与所述分子或化合物缔合的杂质的形式分离。如本文所用，术语"纯化的"不要求绝对的纯度，而是意在作为相对的定义。术语"纯化多肽"在本文用于描述已与其它化合物(包括但不限于核酸分子、脂质和糖类)分开的多肽。术语"分离的"要求所指物质从其原始环境(如自然环境，如果它是天然存在的)移出。例如，活体动物中存在的天然存在的多核苷酸不是分离的，但是与所述天然系统中的一些或所有共存物质分开的同一多核苷酸是分离的。如本文所用，术语"肽"包括3个或多个氨基酸并且通常少于50个氨基酸的序列，其中所述氨基酸是天然存在的或非天然存在的氨基酸。非天然存在的氨基酸指不在体内天然存在但是可以包括于本文所述的肽结构的氨基酸。如本文所用，术语"多肽"和"蛋白质"是可互换使用以指氨基酸聚合体的术语，无论所述聚合体的长度如何。通常，多肽和蛋白质具有大于"肽"的聚合体长度。如本文所用，"胰高血糖素肽"包括包含氨基酸序列SEQIDN0:1，或氨基酸序列SEQIDN0:1的任何类似物的任何肽，包括所述肽的氨基酸取代、添加、缺失或翻译后修饰(如，甲基化、酰化、泛素化、分子内共价键合比如内酰胺桥形成、聚乙二醇化和类似修饰)，其中所述类似物剌激胰高血糖素受体或GLP-l受体活性，所述活性使用实施例14中描述的测定由cAMP产生测量。术语"胰高血糖素激动剂"指包含剌激胰高血糖素受体活性的胰高血糖素肽的复合体，所述活性使用实施例14中描述的测定由cAMP产生测量。如本文所用，"胰高血糖素激动剂类似物"是包含选自由SEQIDNO:10、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14禾卩SEQIDNO:15组成的组的序列或已经修饰以包括在位置2、5、7、10、11、12、13、14、17、18、19、20、21、24、27、28或29中的一个或多个上的一个或多个保守氨基酸取代的此序列的类似物的胰高血糖素肽。如本文所用，氨基酸"修饰"指取代、添加或缺失氨基酸，并包括用人类蛋白质中通常发现的20种氨基酸中的任何氨基酸，以及非典型的或非天然存在的氨基酸进行取代或添加。在本申请中，所有通过数字对特定氨基酸位置的提及(如位置28)指天然胰高血糖素(SEQIDN0:1)中该位置处或其任何类似物中对应的氨基酸位置的氨基酸。例如，本文中提及"位置28"指已缺失了SEQIDNO:1的第一个氨基酸的胰高血糖素类似物中的对应位置27。相似地，本文中提及"位置28"指已在SEQIDNO:1的N_末端之前添加了一个氨基酸的胰高血糖素类似物的对应位置29。非典型氨基酸的商业来源包括Sigma-Aldrich(Milwaukee,WI)、ChemP印Inc.(Miami，FL)禾口GenzymePharmaceuticals(Cambridge,MA)。非典型氨基酸可从商业供应商购买、从头合成、或从其它氨基酸化学修饰或衍生。如本文所用，"胰高血糖素共激动剂"是表现出相对于天然胰高血糖素至少约10%至约500%或更多的对胰高血糖素受体的活性，并且还表现出相对于天然GLP-l约至少10%至约200%或更多的对GLP-l受体的活性的胰高血糖素肽。如本文所用，"胰高血糖素/GLP-l共激动剂分子"是表现出相对于天然胰高血糖素至少约10%的对胰高血糖素受体的活性并且还表现出相对于天然GLP-l至少约10%的对GLP-l受体的活性的分子。如本文所用，术语"天然胰高血糖素"指由序列SEQIDNO:1组成的肽，而术语"天然GLP-l"是指GLP-l(7-36)酰胺(由序列SEQIDNO:52组成)、GLP_1(7-37)酸(由序列SEQIDN0:50组成)或这两种化合物的混合物的通用术语。如本文所用，缺乏任何进一步的命名时，一般提及"胰高血糖素"或"GLP-l"分别意在指天然胰高血糖素或天然GLP-l。如本文所用，氨基酸"取代"指一个氨基酸残基被不同的氨基酸残基置换。如本文所用，术语"保守氨基酸取代"在本文定义为在下列五组中的一个组内进行交换I.小的脂肪族、非极性或略有极性的残基Ala、Ser、Thr、Pro、Gly;II.极性、荷负电的残基以及它们的酰胺和酯Asp、Asn、Glu、Gln、磺丙氨酸和高磺丙氨酸；III.极性、荷正电的残基His、Arg、Lys、鸟氨酸(0rn)IV.大的、脂肪族、非极性残基Met、Leu、Ile、Val、Cys、正亮氨酸(Nle)、高半胱氨酸V.大的、芳族残基Phe、Tyr、Trp、乙酰苯丙氨酸。如本文所用，通用术语"聚乙二醇链"或"PEG链"指环氧乙烷和水的支链或直链縮合聚合物的混合物，用通式H(0CH2CH2)n0H表示，其中n至少是9。缺乏任何进一步描述时，该术语意在包括具有选自500至40，000道尔顿范围的平均总分子量的乙二醇聚合物。"聚乙二醇链"或"PEG链"与数字后缀组合使用以指示其大致的平均分子量。例如，PEG-5，000指具有约5，000的平均总分子量的聚乙二醇链。如本文所用，术语"聚乙二醇化"和类似术语指已通过将聚乙二享链连接至化合物而从其天然状态进行修饰的化合物。"聚乙二醇化胰高血糖素肽"是具有共价结合至胰高血糖素肽的PEG链的胰高血糖素肽。如本文所用，一般提及肽意在包括具有修饰的氨基和羧基末端的肽。例如，包括代替末端羧酸的酰胺基的氨基酸链意在包括指定标准氨基酸的氨基酸序列中。如本文所用，"连接体"是把两个分开的实体彼此连接在一起的键、分子或分子组。连接体可提供所述两个实体的最佳间隔或可进一步提供允许所述两个实体彼此分开的不稳定连接。不稳定连接包括可光切割的基团、酸不稳定部分、碱不稳定部分和可酶切割的基团。如本文所用，"二聚体"是包含通过连接体彼此共价结合的两个亚基的复合体。当没有使用任何限定语言时，术语二聚体包括同二聚体和异二聚体两者。同二聚体包含两个相同的亚基，而异二聚体包含彼此基本相似但又不同的两个亚基。如本文所用，术语"荷电的氨基酸"指包含在生理pH下在水溶液中荷负电的(即，去质子化的)或荷正电的(即，质子化的)侧链的氨基酸。例如荷负电的氨基酸包括天冬氨酸、谷氨酸、磺丙氨酸、高磺丙氨酸和高谷氨酸，而荷正电的氨基酸包括精氨酸、赖氨酸和组氨酸。荷电的氨基酸包括人类蛋白质中常见的20种氨基酸中的荷电的氨基酸，以及非典型的或非天然存在的氨基酸。如本文所用，术语"酸性氨基酸"指包含第二个酸性部分包括例如羧酸或磺酸基团的氨基酸。实施方案本发明提供对胰高血糖素受体或GLP-1受体或二者具有增加的或降低的活性的胰高血糖素肽。本发明还提供了具有对胰高血糖素受体相对GLP-1受体的改变的选择性的胰高血糖素肽。增加的对胰高血糖素受体的活性是通过如本文所述的天然胰高血糖素(SEQIDNO:1)位置16处的氨基酸修饰提供的。降低的对胰高血糖素受体的活性是通过如本文所述的位置3处的氨基酸修饰提18供的。增加的对GLP-1受体的活性是通过用电荷中性基团比如酰胺或酯置换C-末端氨基酸的羧酸提供的。增加的对GLP-1受体的活性是通过如本文所述的允许被三个居间氨基酸分开的两个氨基酸，例如，位置12和16、或16和20、或20和24的侧链之间形成分子内桥的修饰提供的。增加的对GLP-1受体的活性是通过如本文所述的位置20处的氨基酸修饰提供的。增加的对GLP-1受体的活性是在包含SEQIDNO:26的C-末端延伸的胰高血糖素类似物中提供的。此类包含SEQIDNO:26的类似物的GLP-1活性可通过如本文所述的修饰位置18、28或29或位置18和29处的氨基酸而进一步增加。已被位置1和2处的氨基酸修饰降低的胰高血糖素活性的恢复是通过如本文所述的被三个居间氨基酸分开的两个氨基酸，例如，位置12和16、或16和20、或20和24之间的侧链之间的共价键提供的。GLP-1效价的进一步适度增加是通过将位置10处的氨基酸修饰为Trp而提供的。如上所述的增加或降低胰高血糖素受体活性和增加GLP-1受体活性的任何修饰可单独或组合应用。如上所述的任何修饰还可与赋予其它所需特性比如增加的溶解度和/或稳定性和/或作用持续时间的其它修饰组合。替代地，如上所述的任何修饰可与不显著影响溶解度或稳定性或活性的其它修饰组合。示例性修饰包括但不限于(A)例如，通过向天然胰高血糖素的C-末端部分(优选地在位置C-末端至位置27)引入一个、两个、三个或更多荷电的氨基酸而提高溶解度。此荷电的氨基酸可通过如在位置28或29处用荷电的氨基酸取代天然氨基酸，或替代地通过如在位置27、28或29之后添加荷电的氨基酸而引入。在示例性实施方案中，一个、两个、三个或所有的荷电的氨基酸是荷负电的。在其它实施方案中，一个、两个、三个或所有的荷电的氨基酸是荷正电的。此类修饰增加溶解度，如当在25t:下于24小时后测量时，在约5.5至8之间的给定pH如pH7下，提供相对于天然胰高血糖素至少2倍、5倍、10倍、15倍、25倍、30倍或更高的溶解度。(B)通过如本文所述的如在所述肽的位置16、17、20、21、24或29处或C-末端处添加亲水部分比如聚乙二醇链而增加溶解度和作用持续时间或在循环中的半衰期。(C)通过位置15处的天冬氨酸的修饰，例如，通过缺失或用谷氨酸、高谷氨酸、磺丙氨酸或高磺丙氨酸取代而增加稳定性。此类修饰可降低在5.5至8的范围内的pH下的降解或切割，例如，在25°C下24小时后保留原始肽的至少75%、80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%。(D)通过位置27处的氨基酸的修饰，例如，通过用甲硫氨酸、亮氨酸或正亮氨酸取代而增加稳定性。此类修饰可降低氧化降解。(E)通过如本文所述的位置1或2处的氨基酸的修饰增加对二肽基肽酶IV(DPPIV)切割的抗性。(F)不影响活性的保守取代、添加或缺失，例如，位置2、5、7、10、11、12、13、14、16、17、18、19、20、21、24、27、28或29中的一个或多个位置的保守取代；或氨基酸29的缺失，任选地与用C-末端酰胺或酯代替C-末端羧酸基团组合；(G)添加如本文所述的C-末端延伸；(H)如本文所述的同二聚体化或异二聚体化。在示例性实施方案中，所述胰高血糖素肽可相对于天然胰高血糖素序列包含总共1、多达2、多达3、多达4、多达5、多达6、多达7、多达8、多达9、或多达10个氨基酸修饰。本文公开的一个实施方案是针对已相对于野生型肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr_Ser_Asp_Tyr_Ser_Lys_Tyr_Leu_Asp_Ser_Arg_Arg_Ala_Gln_Asp_Phe_Val_Gln_Trp_Leu-Met-Asn-Thr(SEQIDN0:1)进行修饰来增加所述肽对胰高血糖素受体的效价的胰高血糖素激动剂。令人惊奇的是，申请人发现，天然胰高血糖素(SEQIDN0:1)位置16处正常存在的丝氨酸可用选择的酸性氨基酸取代以增加胰高血糖素的效价，即其在经验证的体外模型测定(参见实施例14)中剌激cAMP合成的能力。更具体地，此取代使所述类似物对胰高血糖素受体的效价增加了至少2倍、4倍、5倍和多达10倍多。此取代还使所述类似物对GLP-1受体的活性相对于天然胰高血糖素增加了至少5倍、10倍、或15倍，但是选择性仍保持为胰高血糖素受体超过GLP-1受体。根据一个实施方案，天然胰高血糖素位置16处的丝氨酸残基取代为选自由谷氨酸、谷氨酰胺、高谷氨酸、高磺丙氨酸、苏氨酸或甘氨酸组成的组的氨基酸。根据一个实施方案，天然胰高血糖素位置16处的丝氨酸残基取代为选自由谷氨酸、谷氨酰胺、高谷氨酸和高磺丙氨酸组成的组的氨基酸，且在一个实施方案中，所述丝氨酸残基取代为谷氨酸。在一个实施方案中，对胰高血糖素受体具有增强的特异性的胰高血糖素肽包含肽SEQIDNO:8、SEQIDN0:9、SEQIDNO:10或其胰高血糖素激动剂类似物，其中羧基末端氨基酸保持它的天然羧酸基团。根据一个实施方案，提供了包含序列NH厂His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser_Asp_Tyr_Ser_Lys_Tyr_Leu_Asp_Glu_Arg_Arg_Ala_Gln_Asp_Phe_Val_Gln_Trp_Leu_Met-Asn-Thr-COOH(SEQIDNO:10)的胰高血糖素激动剂，其中所述肽表现出相对于天然胰高血糖素的对胰高血糖素受体的大约5倍增强的效价，如实施例14的体外cAMP测定所测量的。本发明的胰高血糖素肽可被进一步修饰以提高所述肽在生理pH下在水溶液中的溶解度和稳定性，而保持相对于天然胰高血糖素的高生物活性。根据一个实施方案，预期在肽SEQIDNO:9或SEQIDNO:10的位置17、21和24处引入亲水基团可提高所述高效价胰高血糖素类似物在具有生理PH的溶液中的溶解度和稳定性。引入此类基团还增加了作用持续时间，如由在循环中延长的半衰期所测量的。合适的亲水部分包括本领域已知的任何水溶性聚合物，包括PEG、PEG的同聚物或共聚物、单甲基取代的PEG聚合物(mPEG)、或聚氧乙烯甘油(P0G)。根据一个实施方案，所述亲水基团包含聚乙烯(PEG)链。更具体地，在一个实施方案中，所述胰高血糖素肽包含序列SEQIDN0:6或SEQIDN0:7，其中所述胰高血糖素肽的位置21和24处存在的氨基酸的侧链共价连接了PEG链，且所述肽的羧基末端氨基酸具有羧酸基团。本公开还包括其中本发明的胰高血糖素肽任选地经由共价键和任选地经由连接体连接至轭合物的其它轭合物。连接可通过共价化学键、物理作用力如静电、氢、离子、范德华、或疏水或亲水相互作用实现。可使用许多非共价偶联系统，包括生物素_亲和素、配体/受体、酶/底物、核酸/核酸结合蛋白、脂/脂结合蛋白、细胞黏着分子配偶体；或彼此具有亲和性的任何结合配偶体或其片段。示例性轭合物包括但不限于异源肽或多肽(包括例如血浆蛋白)、靶向剂、免疫球蛋白或其部分(如可变区、CDR、或Fc区)、诊断标记比如放射性同位素、荧光团或酶标记、聚合物包括水溶性聚合物、或其它治疗或诊断剂。在一个实施方案中，提供了包含本发明的胰高血糖素肽和血浆蛋白的轭合物，其中所述血浆蛋白选自由白蛋白、运铁蛋白(transferin)、纤维蛋白原和球蛋白(glubulin)组成的组。在一个实施方案中，所述轭合物的血浆蛋白部分是白蛋白或运铁蛋白(transferin)。在一些实施方案中，所述连接体包含1至约60、或1至30个原子或更长、2至5个原子、2至10个原子、5至10个原子、或10至20个原子长的原子链。在一些实施方案中，所述链原子全是碳原子。在一些实施方案中，所述连接体的主链中的链原子选自由C、0、N和S组成的组。链原子和连接体可根据它们预期的溶解度(亲水性)进行选择以便提供溶解更好的轭合物。在一些实施方案中，所述连接体提供经受靶组织或器官或细胞中发现的酶或其它催化剂或水解条件的切割的官能团。在一些实施方案中，所述连接体的长度足以降低位阻的势能。如果所述连接体是共价键或肽键，且所述轭合物是多肽，则完整的轭合物可以是融合蛋白。此肽基连接体可以是任何长度。示例性连接体的长度是约1至50个氨基酸，是5至50、3至5、5至10、5至15、或10至30个氨基酸。此类融合蛋白可替代地通过本领域普通技术人员已知的重组遗传工程方法产生。本公开还包括胰高血糖素融合肽或蛋白，其中第二肽或多肽已融合至胰高血糖素肽的末端、如羧基末端。更具体地，所述融合胰高血糖素肽可包含胰高血糖素激动剂SEQIDN0:55、SEQIDN0:9或SEQIDNO:10，其进一步包含连接至胰高血糖素肽的氨基酸29的氨基酸序列SEQIDNO:26(GPSSGAPPPS)、SEQIDNO:27(KRNRNNIA)或SEQIDN0:28(KRNR)。在一个实施方案中，氨基酸序列SEQIDNO:26(GPSSGAPPPS)、SEQIDNO:27(KRNRNNIA)或SEQIDN0:28(KRNR)通过肽键结合至胰高血糖素肽的氨基酸29。申请人发现，在包含C-末端延伸月太(extensionp印tide)毒蜥外泌肽_4(如，SEQIDN0:26或SEQIDNO:29)的胰高血糖素融合肽中，用甘氨酸取代位置29处的天然苏氨酸残基显著增加GLP-1受体活性。此氨基酸取代可与本文公开的其它修饰联合使用以增强胰高血糖素类似物对GLP-1受体的亲和性。例如，T29G取代可与S16E和N20K氨基酸取代，任选地与氨基酸16和20之间的内酰胺桥，以及任选地与添加如本文所述的PEG链组合。在一个实施方案中，提供了胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂，其包含序列SEQIDNO:64。在一个实施方案中，胰高血糖素融合肽的胰高血糖素肽部分选自由SEQIDN0:55、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4和SEQIDN0:5组成的组，其中PEG链，当存在于位置17、21、24或C-末端氨基酸处，或21和24两处时，选自500至40，000道尔顿的范围。更特别地，在一个实施方案中，胰高血糖素肽区段选自由SEQIDNO:7、SEQIDNO:8和SEQIDNO:63组成的组，其中所述PEG链选自500至5，000的范围。在一个实施方案中，所述胰高血糖素肽是包含序列SEQIDNO:55和SEQIDNO:65的融合肽，其中肽SEQIDNO:65连接至SEQIDNO:55的羧基末端。根据一个实施方案，对胰高血糖素肽SEQIDNO:10的另外的化学修饰使GLP-1受体效价增加至对胰高血糖素受体和GLP-1受体的相对活性几乎相等的点。因此在一个实施方案中，提供了胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂，其中本发明胰高血糖素肽的末端氨基酸具有酰胺基团代替存在于天然氨基酸上的羧酸基团。胰高血糖素类似物对分别的胰高血糖素受体和GLP-1受体的相对活性可通过对所述胰高血糖素肽的进一步修饰而进行调节，以产生展示天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的约40%至约500%或更高和天然GLP-l对GLP-1受体的活性的约20%至约200%或更高，如相对于胰高血糖素对GLP-l受体的正常活性的50倍、100倍或更高的增加的类似物。在进一步的实施方案中，提供了表现出胰高血糖素/GLP-l受体共激动剂活性的胰高血糖素类似物，其中两个氨基酸侧链之间形成分子内桥以稳定所述肽的羧基末端的三维结构。更特别地，氨基酸对12和16、16和20、20和24、或24和28的侧链彼此连接，从而稳定胰高血糖素a螺旋。两个侧链可通过氢键、离子相互作用比如形成盐桥、或通过共价键彼此连接。在一些实施方案中，环或连接体的大小为约8个原子、或约7-9个原子。能够共价键合形成7原子连接桥的氨基酸配对的实例包括0rn-Glu(内酰胺环)；Lys-Asp(内酰胺)；或高ser-高glu(内酯)。可形成8原子连接体的氨基酸配对的实例包括Lys-Glu(内酰胺)；高lys-Asp(内酰胺)；Orn-高glu(内酰胺)；4-氨基Phe-Asp(内酰胺)；或Tyr-Asp(内酯)。可形成9原子连接体的氨基酸配对的实例包括高lys-Glu(内酰胺)；Lys-高glu(内酰胺)；4-氨基Phe-Glu(内酰胺)；或Tyr-Glu(内酯)。这些氨基酸上的任何侧链可另外地取代为另外的化学基团，只要不破坏a-螺旋的三维结构。本领域普通技术人员可预见将生成具有相似大小和所需效应的稳定结构的替代的配对或替代的氨基酸类似物，包括化学修饰的衍生物。例如，高半胱氨酸_高半胱氨酸二硫桥的长度为6个原子，并可进一步修饰以提供所需的效应。即使没有共价连接，如上所述的氨基酸配对或本领域普通技术人员可预见的相似配对也可通过非共价键，例如，通过形成盐桥或氢键相互作用向a螺旋提供增加的稳定性。进一步示例性实施方案包括下列配对，任选地以内酰胺桥位置12处的Glu与位置16处的Lys;位置12处的天然Lys与位置16处的Glu;位置16处的Glu与位置20处的Lys;位置16处的Lys与位置20处的Glu;位置20处的Glu与位置24处的Lys;位置20处的Lys与位置24处的Glu;位置24处的Glu与位置28处的Lys;位置24处的Lys与位置28处的Glu。根据一个实施方案，提供了表现出胰高血糖素/GLP-l受体共激动剂活性的胰高血糖素类似物，其中所述类似物包含选自由SEQIDN0:ll、47、48和49组成的组的氨基酸序列。在一个实施方案中，所述侧链彼此共价结合，和在一个实施方案中，两个氨基酸彼此结合形成内酰胺环。内酰胺环的大小可根据氨基酸侧链的长度而不同，且在一个实施方案中，所述内酰胺是通过将赖氨酸氨基酸的侧链连接至谷氨酸侧链形成的。内酰胺环中酰胺键的顺序可以颠倒(如，内酰胺环可在Lysl2和Glul6的侧链之间或替代地Glul2和Lysl6之间形成)。根据一个实施方案，提供了SEQIDNO:45的胰高血糖素类似物，其中至少一个内酰胺环是在选自由氨基酸对12和16、16和20、20和24或24和28组成的组的氨基酸对的侧链之间形成的。在一个实施方案中，提供了胰高血糖素/GLP-l受体共激动剂，其中所述共激动剂包含SEQIDN0:20的胰高血糖素肽类似物，其中所述肽包含氨基酸位置12和16之间或氨基酸位置16和20之间形成的分子内内酰胺桥。在一个实施方案中，提供了包含序列SEQIDNO:20的胰高血糖素/GLP-l受体共激动剂，其中氨基酸位置12和16之间、氨基酸位置16和20之间、或氨基酸位置20和24之间形成了分子内内酰胺桥，且位置29处的氨基酸是甘氨酸，其中序列SEQIDN0:29连接至SEQIDNO:20的C-末端氨基酸。在进一步的实施方案中，位置28处的氨基酸是天冬氨酸。胰高血糖素肽SEQIDNO:20的溶解度可进一步提高，例如，通过向胰高血糖素肽SEQIDNO:20的C-末端部分，优选地在位置C_末端至位置27，引入一个、两个、三个或更多荷电的氨基酸。此荷电的氨基酸可通过用荷电的氨基酸取代如位置28或29处的天然氨基酸，或替代地通过在如位置27、28或29后添加荷电的氨基酸而引入。在示例性实施方案中，一个、两个、三个或所有的荷电的氨基酸是荷负电的。替代地，溶解度还可通过将亲水部分比如聚乙二醇共价连接至所述肽来增强。根据一个实施方案，提供了包含序列SEQIDNO:55的胰高血糖素类似物，其中所述类似物与SEQIDNO:55的差异为选自位置1、2、3、5、7、10、11、13、14、17、18、19、21、24、27、28和29的1至3个氨基酸，其中所述胰高血糖素肽表现出天然GLP-1对GLP-1受体的活性的至少20%。根据一个实施方案，提供包含如下序列的胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂NH2-His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xaa-Xaa_Arg-Arg-Ala-Xaa-Asp-Phe-Val-Xaa-Trp-Leu-Met-Xaa-Xaa-R(SEQIDNO:33)，其中位置15处的Xaa选自由Asp、Glu、磺丙氨酸、高谷氨酸和高磺丙氨酸组成的氨基酸组，位置16处的Xaa选自由Ser、Glu、Gln、高谷氨酸和高磺丙氨酸组成的氨基酸组，位置20处的Xaa是Gin或Lys，位置24处的Xaa是Gin或Glu，位置28处的Xaa是Asn、Lys或酸性氨基酸，位置29处的Xaa是Thr、Gly或酸性氨基酸，且R是C00H或C0NH2，条件是当位置16是丝氨酸时，位置20是Lys，或替代地当位置16是丝氨酸时，位置24是Glu且位置20或位置28的任一个是Lys。在一个实施方案中，胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂包含序列SEQIDN0:33，其中位置28处的氨基酸是天冬氨酸且位置29处的氨基酸是谷氨酸。在另一实施方案中，位置28处的氨基酸是天然天冬酰胺，位置29处的氨基酸是甘氨酸且氨基酸序列SEQIDNO:29或SEQIDNO:65共价连接至SEQIDNO:33的羧基末端。在一个实施方案中，提供包含序列SEQIDNO:33的共激动剂，其中所述肽的羧基末端添加了另外的酸性氨基酸。在进一步的实施方案中，胰高血糖素类似物的羧基末端氨基酸具有代替天然氨基酸的羧酸基团的酰胺。在一个实施方案中，所述胰高血糖素类似物包含选自由SEQIDN0:40、SEQIDNO:41、SEQIDNO:42、SEQIDNO:43禾PSEQIDNO:44组成的组的序列。根据一个实施方案，提供了SEQIDNO:33的胰高血糖素肽类似物，其中所述类似物与SEQIDNO:33的差异为选自位置1、2、3、5、7、10、11、13、14、17、18、19、21和27的l至3个氨基酸，条件是当位置16处的氨基酸是丝氨酸时，位置20是赖氨酸，或位置24处的氨基酸和位置20或位置28处的氨基酸之间形成内酰胺桥。根据一个实施方案，所述类似物与SEQIDN0:33的差异为选自位置l、2、3、21和27的l至3个氨基酸。在一个实施方案中，SEQIDN0:33的胰高血糖素肽类似物与该序列的差异为选自位置1、2、3、5、7、10、11、13、14、17、18、19、21和27的1至2个氨基酸，或在一个实施方案中差异为选自位置1、2、3、5、7、10、11、13、14、17、18、19、21和27的单个氨基酸，条件是当位置16处的氨基酸是丝氨酸时，位置20是赖氨酸、或位置24处的氨基酸和位置20或位置28处的氨基酸之间形成内酰胺桥。根据另一实施方案，提供了包含如下序列的相对选择性的GLP-1受体激动剂NH2一His-Ser-Xaa-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xaa-Xaa-Arg-Arg-Ala-Xaa-Asp-Phe-Val-Xaa-Trp-Leu-Met-Xaa-Xaa-R(SEQIDN0:53)，其中位置3处的Xaa选自23由Glu、0rn或Nle组成的氨基酸组，位置15处的Xaa选自由Asp、Glu、磺丙氨酸、高谷氨酸和高磺丙氨酸组成的氨基酸组，位置16处的Xaa选自由Ser、Glu、Gln、高谷氨酸和高磺丙氨酸组成的氨基酸组，位置20处的Xaa是Gln或Lys，位置24处的Xaa是Gln或Glu，位置28处的Xaa是Asn、Lys或酸性氨基酸，位置29处的Xaa是Thr、Gly或酸性氨基酸，且R是COOH、C0NH2、SEQIDNO:26或SEQIDNO:29，条件是当位置16是丝氨酸时，位置20是Lys，或替代地当位置16是丝氨酸时，位置24是Glu且位置20或位置28是Lys。在一个实施方案中，位置3处的氨基酸是谷氨酸。在一个实施方案中，在位置28和/或29处取代的酸性氨基酸是天冬氨酸或谷氨酸。在一个实施方案中，所述胰高血糖素肽(包括共激动剂肽)包含序列SEQIDN0:33，其进一步包含添加至所述肽的羧基末端的酸性氨基酸。在进一步的实施方案中，胰高血糖素类似物的羧基末端氨基酸具有取代天然氨基酸的羧酸基团的酰胺。根据一个实施方案，提供了包含选自由如下组成的组的修饰的胰高血糖素肽的胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂NH2-His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xaa-Xaa_Arg-Arg-Ala-Xaa-Asp-Phe-Val-Xaa-Trp-Leu-Met-Xaa-Xaa-R(SEQIDNO:34)，其中位置15处的Xaa选自由Asp、Glu、磺丙氨酸、高谷氨酸和高磺丙氨酸组成的氨基酸组，位置16处的Xaa选自由Ser、Glu、Gln、高谷氨酸和高磺丙氨酸组成的氨基酸组，位置20处的Xaa是Gln或Lys，位置24处的Xaa是Gln或Glu，且位置28处的Xaa是Asn、Asp或Lys，R是C00H或C0NH2，位置29处的Xaa是Thr或Gly，且R是C00H、C0NH2、SEQIDNO:26或SEQIDNO:29，条件是当位置16是丝氨酸时，位置20是Lys，或替代地当位置16是丝氨酸时，位置24是Glu且位置20或位置28是Lys。在一个实施方案中，1是0)朋2，位置15处的Xaa是Asp，位置16处的Xaa选自由Glu、Gln、高谷氨酸和高磺丙氨酸组成的氨基酸组，位置20和24处的Xaa各自是Gln，位置28处的Xaa是Asn或Asp且位置29处的Xaa是Thr。在一个实施方案中，位置15和16处的Xaa各自是Glu，位置20和24处的Xaa各自是Gln，位置28处的Xaa是Asn或Asp，位置29处的Xaa是Thr且R是C0NH2。已报道天然胰高血糖素肽的某些位置可被修饰，而保留母体肽的至少一些活性。因此，申请人预期位于肽SEQIDNO:11的位置2、5、7、10、11、12、13、14、17、18、19、20、21、24、27、28或29处的一个或多个氨基酸可取代为与天然胰高血糖素肽中存在的氨基酸不同的氨基酸，并仍保留对胰高血糖素受体的活性。在一个实施方案中，天然肽位置27处存在的甲硫氨酸残基被改变为亮氨酸或正亮氨酸以防止所述肽的氧化降解。在另一实施方案中，位置20处的氨基酸取代为Lys、Arg、Orn或瓜氨酸(Citrullene)，和/或位置21处的氨基酸取代为Glu、高谷氨酸或高磺丙氨酸。在一个实施方案中，提供了SEQIDNO:20的胰高血糖素类似物，其中选自所述类似物的位置1、2、5、7、10、11、13、14、17、18、19、21、27、28或29的1至6个氨基酸不同于SEQIDNO:1的对应氨基酸，条件是当位置16处的氨基酸是丝氨酸时，位置20是Lys，或替代地当位置16是丝氨酸时，位置24是Glu且位置20或位置28是Lys。根据另一实施方案，提供了SEQIDN0:20的胰高血糖素类似物，其中选自所述类似物的位置l、2、5、7、10、11、13、14、17、18、19、20、21、27、28或29的1至3个氨基酸不同于SEQIDNO:1的对应氨基酸。在另一实施方案中，提供了SEQIDNO:8、SEQIDNO:9或SEQIDNO:11的胰高血糖素类似物，其中选自所述类似物的位置1、2、5、7、10、11、13、14、17、18、19、20或21的1至2个氨基酸不同于SEQIDN0:1的对应氨基酸，且在进一步的实施方案中，所述一至两个不同氨基酸代表相对于天然胰高血糖素序列(SEQIDN0:1)中存在的氨基酸的保守氨基酸取代。在一个实施方案中，提供了SEQIDN0:12、SEQIDN0:13、SEQIDN0:14或SEQIDNO:15的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽进一步包含选自位置2、5、7、10、11、13、14、17、18、19、20、21、27或29的位置处的一个、两个或三个氨基酸取代。在一个实施方案中，在位置2、5、7、10、11、13、14、16、17、18、19、20、21、27或29处的取代是保守氨基酸取代。根据一个实施方案，提供了包含序列SEQIDNO:33的变体的胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂，其中分别选自所述变体的位置16、17、18、20、21、23、24、27、28和29的1至IO个氨基酸不同于SEQIDN0:1的对应氨基酸。根据一个实施方案，提供了序列SEQIDNO:33的变体，其中所述变体与SEQIDNO:33的差异为选自由Glnl7、Alal8、Glu21、Ile23、Ala24、Va127和Gly29组成的组的一个或多个氨基酸取代。根据一个实施方案，提供了包含序列SEQIDN0:33的变体的胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂，其中选自所述变体的位置17-26的1至2个氨基酸不同于SEQIDNO:1的对应氨基酸。根据一个实施方案，提供了序列SEQIDNO:33的变体，其中所述变体与SEQIDNO:33的差异为选自由Glnl7、Ala18、Glu21、Ile23和Ala24组成的组的氨基酸取代。根据一个实施方案，提供了序列SEQIDNO:33的变体，其中所述变体与SEQIDNO:33的差异为位置18处的氨基酸取代，其中所述取代的氨基酸选自由Ala、Ser、Thr、Pro和Gly组成的组。根据一个实施方案，提供了序列SEQIDNO:33的变体，其中所述变体与SEQIDNO:33的差异为位置18处的Ala氨基酸取代。此类变异包括于SEQIDNO:55中。在另一实施方案中，提供了包含序列SEQIDNO:33的变体的胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂，其中选自所述变体的位置17-22的1至2个氨基酸不同于SEQIDNO:l的对应氨基酸，并且在进一步的实施方案中，提供了SEQIDNO:33的变体，其中所述变体与SEQIDNO:33的差异为位置20和21处的1或2个氨基酸取代。根据一个实施方案，提供了包含如下序列的胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂NH2-His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Xaa-Xaa_Arg-Arg-Ala-Xaa-Xaa-Phe-Val-Xaa-Trp-Leu-Met-Xaa-Xaa-R(SEQIDNO:51)，其中位置15处的Xaa是Asp、Glu、磺丙氨酸、高谷氨酸或高磺丙氨酸，位置16处的Xaa是Ser、Glu、Gln、高谷氨酸或高磺丙氨酸，位置20处的Xaa是Gln、Lys、Arg、Orn或瓜氨酸，位置21处的Xaa是Asp、Glu、高谷氨酸或高磺丙氨酸，位置24处的Xaa是Gin或Glu，位置28处的Xaa是Asn、Lys或酸性氨基酸，位置29处的Xaa是Thr或酸性氨基酸且R是C00H或C0NH2。在一个实施方案中，R是C0NH2。根据一个实施方案，提供了包含SEQIDN0:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:47、SEQIDNO:48或SEQIDNO:49的变体的胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂，其中所述变体与所述序列的差异为位置20处的氨基酸取代。在一个实施方案中，位置20处的氨基酸取代选自由Lys、Arg、Orn或瓜氨酸组成的组。在一个实施方案中，提供了包括SEQIDNO:34的类似物肽的胰高血糖素激动剂，其中所述类似物与SEQIDNO:34的差异为其在位置2处具有不同于丝氨酸的氨基酸。在一个实施方案中，所述丝氨酸残基取代为氨基异丁酸或丙氨酸，且在一个实施方案中，所述丝氨酸残基取代为氨基异丁酸。此类修饰抑制二肽基肽酶IV的切割，而保留母体化合物的固有效价(如母体化合物效价的至少75%、80%、85%、90%、95%或更多)。在一个实施方案中，所述类似物的溶解度例如通过向天然胰高血糖素的C-末端部分(优选地位置C-末端至位置27处)引入一个、两个、三个或更多荷电的氨基酸来增加。在示例性实施方案中，一个、两个、三个或所有荷电的氨基酸是荷负电的。在另一实施方案中，所述类似物进一步包含取代肽SEQIDNO:34的位置28或29处的天然氨基酸的酸性氨基酸，或添加到肽SEQIDN0:34羧基末端的酸性氨基酸。在一个实施方案中，进一步在位置1或2处修饰本文公开的胰高血糖素类似物以降低对二肽基肽酶IV切割的敏感性。在一个实施方案中，提供了SEQIDN0:9、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14或SEQIDNO:15的胰高血糖素类似物，其中所述类似物与母体分子的差异为位置2处的取代，并表现出对二肽基肽酶IV切割的敏感性降低(即抗性)。更特别地，在一个实施方案中，所述类似物肽的位置2取代为选自由d-丝氨酸、丙氨酸、缬氨酸、氨基正丁酸、甘氨酸、N-甲基丝氨酸和氨基异丁酸组成的组的氨基酸。在一个实施方案中，所述类似物肽的位置2取代为选自由d-丝氨酸、丙氨酸、甘氨酸、N-甲基丝氨酸和氨基异丁酸组成的组的氨基酸。在另一实施方案中，所述类似物肽的位置2取代为选自由d-丝氨酸、甘氨酸、N-甲基丝氨酸和氨基异丁酸组成的组的氨基酸。在一个实施方案中，所述胰高血糖素肽包含序列SEQIDNO:21或SEQIDNO:22。在一个实施方案中，提供了SEQIDNO:9、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14或SEQIDNO:15的胰高血糖素类似物，其中所述类似物与母体分子的差异为位置1处的取代，并表现出对二肽基肽酶IV切割的敏感性降低(即抗性)。更特别地，所述类似物肽的位置1取代为选自由d-组氨酸、a，a-二甲基咪唑乙酸(DMIA)、N_甲基组氨酸、a_甲基组氨酸、咪唑乙酸、去氨基组氨酸、羟基组氨酸、乙酰基组氨酸和高组氨酸组成的组的氨基酸。在另一实施方案中，提供了包含SEQIDN0:34的类似物肽的胰高血糖素激动剂，其中所述类似物与SEQIDNO:34的差异为在位置1处具有不同于组氨酸的氨基酸。在一个实施方案中，所述类似物的溶解度例如通过向天然胰高血糖素的c-末端部分(优选地在位置C-末端至位置27)引入一个、两个、三个或更多的荷电氨基酸而增加。在示例性实施方案中，一个、两个、三个或所有的荷电的氨基酸是荷负电的。在另一实施方案中，所述类似物进一步包含取代肽SEQIDNO:34的位置28或29处的天然氨基酸的酸性氨基酸或添加至肽SEQIDN0:34羧基末端的酸性氨基酸。在一个实施方案中，所述酸性氨基酸是天冬氨酸或谷氨酸。在一个实施方案中，胰高血糖素/GLP-l受体共激动剂包含序列SEQIDN0:20，其进一步包含一个氨基酸的或选自由SEQIDN0:26、SEQIDNO:27和SEQIDN0:28组成的组的肽的另外的羧基末端延伸。在其中SEQIDNO:20的羧基末端添加了单个氨基酸的实施方案中，所述氨基酸通常选自20种常见氨基酸之一，并且在一个实施方案中，所述另外的羧基末端氨基酸具有代替天然氨基酸的羧酸的酰胺基。在一个实施方案中，所述另外的氨基酸选自由谷氨酸、天冬氨酸和甘氨酸组成的组。在替代的实施方案中，提供了胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂，其中所述肽包含谷氨酸残基和赖氨酸残基的侧链之间形成的至少一个内酰胺环，其中所述谷氨酸残基和赖氨酸残基被三个氨基酸隔开。在一个实施方案中，携带内酰胺的胰高血糖素肽的羧基末端氨基酸具有代替天然氨基酸的羧酸的酰胺基。更特别地，在一个实施方案中，提供了包含修饰的胰高血糖素肽的胰高血糖素和GLP-1共激动剂，所述修饰的胰高血糖素肽选自由以下组成的组NH2-His一Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu--Asp--Glu--Arg—Arg--Ala--Gin--Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Xaa-Xaa-R(SEQIDNO:66)NH2-His一Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu--Asp--Glu--Arg—Arg--Ala-七ys--Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Xaa-Xaa-R(SEQIDNO:67)NH2-His一Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu--Asp--Ser--Arg—Arg--Ala-丄ys--Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Xaa-Xaa-R(SEQIDNO:68)NH2-His一Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu--Asp--Ser--Arg—Arg--Ala--Gin--Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Lys-Xaa-R(SEQIDNO:69)NH2-His一Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu--Asp--Glu--Arg—Arg--Ala-七ys--Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-R(SEQIDNO:16)NH2-His一Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu--Asp--Glu--Arg—Arg--Ala--Gin--Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Lys-Thr-R(SEQIDNO:17)NH2-His一Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu--Asp--Glu--Arg—Arg--Ala-七ys--Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Lys-Thr-R(SEQIDNO:18)其中位置28处的Xaa=Asp或Asn，位置29处的Xaa是Thr或Gly，R选自由C00H、C0NH2、谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、SEQIDN0:26、SEQIDNO:27和SEQIDNO:28组成的组，且内酰胺桥在位置12处的Lys和位置16处的Glu之间(对于SEQIDNO:66)、在位置16处的Glu和位置20处的Lys之间(对于SEQIDNO:67)、在位置20处的Lys和位置24处的Glu之间(对于SEQIDNO:68)、在位置24处的Glu和位置28处的Lys之间(对于SEQIDNO:69)、在位置12处的Lys和位置16处的Glu之间和在位置20处的Lys和位置24处的Glu之间(对于SEQIDNO:16)、在位置12处的Lys和位置16处的Glu之间和在位置24处的Glu和位置28处的Lys之间(对于SEQIDNO:17)和在位置16处的Glu和位置20处的Lys之间和在位置24处的Glu和位置28处的Lys之间(对于SEQIDNO:18)形成。在一个实施方案中，R选自由C00H、C0NH2、谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸组成的组，位置28处的氨基酸是Asn，且位置29处的氨基酸是苏氨酸。在一个实施方案中，R是C0M^，位置28处的氨基酸是Asn，且位置29处的氨基酸是苏氨酸。在另一实施方案中，R选自由SEQIDNO:26、SEQIDNO:29和SEQIDNO:65组成的组，且位置29处的氨基酸是甘氨酸。在进一步的实施方案中，所述胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂选自由SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17和SEQIDN0:18组成的组，其中所述肽进一步包含一个氨基酸的或选自由SEQIDN0:26、SEQIDNO:27和SEQIDNO:28组成的组的肽的另外的羧基末端延伸。在一个实施方案中，所述末端延伸包含序列SEQIDNO:26、SEQIDNO:29或SEQIDN0:65，且所述胰高血糖素肽包含序列SEQIDNO:55。在一个实施方案中，所述胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂包含序列SEQIDNO:33，其中位置16处的氨基酸是谷氨酸，位置20处的氨基酸是赖氨酸，位置28处的氨基酸是天冬酰胺，且氨基酸序列SEQIDNO:26或SEQIDN0:29连接至SEQIDNO:33的羧基末端。在其中SEQIDN0:20的羧基末端添加了单个氨基酸的实施方案中，所述氨基酸通常选自20种常见氨基酸之一，且在一个实施方案中，所述氨基酸具有代替天然氨基酸的羧酸的酰胺基。在一个实施方案中，所述另外的氨基酸选自由谷氨酸和天冬氨酸和甘氨酸组成的组。在其中所述胰高血糖素激动剂类似物进一步包含羧基末端延伸的实施方案中，所述延伸的羧基末端氨基酸在一个实施方案中以酰胺基或酯基而不是羧酸来结束。在另一实施方案中，胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂包含序列NH2-His-Ser-Gln_Gly_Thr_Phe_Thr_Ser_Asp_Tyr_Ser_Lys_Tyr_Leu_Asp_Glu_Arg_Arg_Ala_Gln_Asp_Phe_Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Xaa-CONH2(SEQIDN0:19)，其中位置30处的Xaa代表任何氨基酸。在一个实施方案中，Xaa选自20种常见氨基酸之一，且在一个实施方案中，所述氨基酸是谷氨酸、天冬氨酸或甘氨酸。此肽的溶解度可通过向SEQIDN0:19的位置17、21、24或30处的氨基酸的侧链共价连接PEG链来进一步提高。在进一步的实施方案中，所述肽包含选自由SEQIDN0:26、SEQIDNO:27和SEQIDNO:28组成的组的肽的另外的羧基末端延伸。根据一个实施方案，胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂包含序列SEQIDNO:30、SEQIDNO:31禾PSEQIDNO:32。可进行于胰高血糖素序列SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:19和SEQIDN0:64内的另外的位点特异性修饰以产生一组拥有可变程度的GLP-1激动的胰高血糖素激动剂。因此，已制备和鉴定了对每种受体拥有几乎相同的体外效价的多种肽。相似地，已鉴别和鉴定了对两个受体中的每一个具有IO倍选择性地增强的效价的多种肽。如上所述，用谷氨酸取代位置16处的丝氨酸残基增强了天然胰高血糖素对胰高血糖素受体和GLP-1受体二者的效价，但是保持了对胰高血糖素受体的大约10倍的选择性。另外，通过用谷氨酸取代位置3处的天然谷氨酰胺(SEQIDNO:22)产生了表现出对GLP-1受体的大约io倍的选择性的胰高血糖素类似物。可通过在胰高血糖素/GLP-1共激动剂肽的位置16、17、21和24处引入亲水基固，或通过在胰高血糖素/GLP-1共激动剂肽的羧基末端添加单个修饰的氨基酸(即修饰为包括亲水基团的氨基酸)来进一步增强所述肽在生理pH下在水溶液中的溶解度，而保留相对于天然胰高血糖素的高生物活性。根据一个实施方案，所述亲水基团包含聚乙烯(PEG)链。更特别地，在一个实施方案中，所述胰高血糖素肽包括序列SEQIDNO:10、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17或SEQIDNO:18，其中PEG链共价连接至所述胰高血糖素肽的位置16、17、21、24、29处的氨基酸或C-末端氨基酸的侧链，条件是当所述肽包含SEQIDN0:10、SEQIDN0:11、SEQIDNO:12或SEQIDNO:13时，所述聚乙二醇链共价结合至位置17、21或24处的氨基酸残基，当所述肽包括SEQIDN0:14或SEQIDNO:15时，所述聚乙二醇链共价结合至位置16、17或21处的氨基酸残基，且当所述肽包含SEQIDN0:16、SEQIDNO:17或SEQIDNO:18时，所述聚乙二醇链共价结合至位置17或21处的氨基酸残基。在一个实施方案中，所述胰高血糖素肽包含序列SEQIDN0:11、SEQIDN0:12或SEQIDN0:13，其中PEG链共价连接至所述胰高血糖素肽的位置17、21、24处的氨基酸、或c-末端氨基酸的侧链，且所述肽的羧基末端氨基酸具有代替天然氨基酸的羧酸基团的酰胺基。在一个实施方案中，所述胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂肽包括选自由SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQID28NO:18和SEQIDNO:19组成的组的序列，其中PEG链共价连接至所述胰高血糖素肽的SEQIDN0:12、SEQIDN0:13禾PSEQIDNO:19的位置17、21或24处，或SEQIDN0:14禾PSEQIDNO:15的位置16、17或21处，或SEQIDNO:16、SEQIDNO:17禾口SEQIDNO:18的位置17或21处的氨基酸侧链。在另一实施方案中，所述胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂肽包含序列SEQIDNO:11或SEQIDNO:19，其中PEG链共价连接至所述胰高血糖素肽的位置17、21或24处的氨基酸或C-末端氨基酸的侧链。根据一个实施方案，并受前述段落描述的条件限制，所述胰高血糖素共激动剂肽被修饰为含有位置16、17、21、24、或29或C-末端氨基酸处的一个或多个氨基酸取代，其中天然氨基酸取代为具有适合与亲水部分(包括例如，PEG)交联的侧链的氨基酸。所述天然肽可用天然存在的氨基酸或合成的(非天然存在的)氨基酸进行取代。合成的或非天然存在的氨基酸指不是在体内天然存在的但是仍然可以并入本文所述的肽结构的氨基酸。替代地，可将具有适合与亲水部分(包括例如，PEG)交联的侧链的氨基酸添加至本文公开的任何胰高血糖素类似物的羧基末端。根据一个实施方案，在选自由位置16、17、21、24或29组成的组的位置对所述胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂肽进行氨基酸取代，用选自由赖氨酸、半胱氨酸、鸟氨酸、高半胱氨酸和乙酰基苯丙氨酸组成的组的氨基酸置换天然氨基酸，其中所述取代氨基酸进一步包含共价结合至该氨基酸的侧链的PEG链。在一个实施方案中，选自由SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18和SEQIDNO:19组成的组的胰高血糖素肽进一步修饰为包含共价连接至该胰高血糖素肽的位置17或21处的氨基酸的侧链的PEG链。在一个实施方案中，所述聚乙二醇化的胰高血糖素/GLP-l受体共激动剂进一步包含序列SEQIDNO:26、SEQIDNO:27或SEQIDNO:29。在另一实施方案中，所述胰高血糖素肽包含序列SEQIDN0:55或SEQIDNO:56，其进一步包含连接至SEQIDNO:55或SEQIDNO:56的C_末端氨基酸的SEQIDNO:26、SEQIDNO:29或SEQIDNO:65的C_末端延伸，并任选地进一步包含共价连接至所述肽的位置17、18、21、24或29处的氨基酸或C_末端氨基酸的侧链的PEG链。在另一实施方案中，所述胰高血糖素肽包含序列SEQIDNO:55或SEQIDNO:56，其中PEG链共价连接至所述胰高血糖素肽的位置21或24处的氨基酸的侧链，并且所述肽进一步包含SEQIDN0:26或SEQIDNO:29的C_末端延伸。在另一实施方案中，所述胰高血糖素肽包含序列SEQIDNO:55、或SEQIDNO:33或SEQIDNO:34，其中SEQIDNO:33或SEQIDNO:34的羧基末端添加了另外的氨基酸，且PEG链共价连接至所添加的氨基酸的侧链。在进一步的实施方案中，所述聚乙二醇化的胰高血糖素类似物进一步包含连接至SEQIDNO:33或SEQIDNO:34的C_末端氨基酸的SEQIDN0:26或SEQIDNO:29的C_末端延伸。在另一实施方案中，所述胰高血糖素肽包含序列SEQIDN0:19，其中PEG链共价连接至所述胰高血糖素肽的位置30处的氨基酸的侧链，并且所述肽进一步包含连接至SEQIDN0:19的C-末端氨基酸的SEQIDNO:26或SEQIDNO:29的C-末端延伸。所述聚乙二醇链可以是直链的形式，或其可以是分支的。根据一个实施方案，所述聚乙二醇链具有选自约500至约IO，OOO道尔顿范围的平均分子量。在一个实施方案中，所述聚乙二醇链具有选自约1，000至约5，000道尔顿范围的平均分子量。在替代的实施方案中，所述聚乙二醇链具有选自约10，000至约20，000道尔顿范围的平均分子量。根据一个实施方案，所述聚乙二醇化的胰高血糖素肽包含共价结合至所述胰高血糖素肽的两个或多个聚乙烯链，其中所述胰高血糖素链的总分子量为约1，000至约5，000道尔顿。在一个实施方案中，所述聚乙二醇化的胰高血糖素激动剂包含由SEQIDNO:5或SEQIDNO:5的胰高血糖素激动剂类似物组成的肽，其中PEG链共价连接至位置21处的和位置24处的氨基酸残基，且其中所述两个PEG链的组合分子量为约1，000至约5，000道尔顿。如实施例中详细描述的，本发明的胰高血糖素激动剂具有增强的生物物理稳定性和水溶解性，并显示出相对于天然肽的增强的生物活性。因此，认为本发明的胰高血糖素激动剂适合先前描述的天然胰高血糖素肽的任何用途。因此，本文描述的修饰的胰高血糖素肽可用于治疗低血糖或增加血液葡萄糖水平、引起肠的暂时麻痹以用于放射学用途、或治疗由胰高血糖素的低血液水平造成的其他的代谢疾病。预期本文描述的胰高血糖素肽还用于减轻或维持体重、或治疗高血糖、或降低血液葡萄糖水平、或使血液葡萄糖水平正常化。本发明的胰高血糖素肽可单独或与其它抗糖尿病或抗肥胖剂组合施用。本领域已知的或正在研究的抗糖尿病剂包括胰岛素，磺酰脲类，比如甲苯磺丁脲(Orinase)、醋磺环己脲(Dymelor)、妥拉磺脲(Tolinase)、氯磺丙脲(Diabinese)、格列吡嗪(Glucotrol)、格列本脲(Diabeta，Micronase，Glynase)、格列美脲(Amaryl)或格列齐特(Diamicron);氯茴苯酸类(meglitinides)，比如瑞格列奈(Prandin)或那格列奈(Starlix);双胍类，比如二甲双胍(Glucophage)或苯乙双胍；噻唑烷二酮类，比如罗格列酮(Avandia)、吡格列酮(Actos)或曲格列酮(Rezulin)，或其它PPARY抑制剂；抑制糖类消化的a葡糖苷酶抑制剂，比如米格列醇(Glyset)、阿卡波糖(Precose/Glucobay);艾塞那肽(Byetta)或普兰林肽；二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制剂，比如维格列汀或西他列汀；SGLT(钠依赖性葡萄糖转运蛋白1)抑制剂；或FBP酶(果糖l，6-二磷酸酶)抑制剂。本领域已知的或正在研究的抗肥胖剂包括食欲抑制剂，包括苯乙胺型兴奋剂、芬特明(任选地与芬氟拉明或右芬氟拉明一起)、二乙胺苯丙酮(Tenuate⑧)、苯甲曲秦(Prelu-2,Bontril⑧)、苄非他明(Didrex)、西布曲明(Meridia,Reductil)、利莫那班(Acomplia⑧)、其它大麻素受体拮抗剂；泌酸调节肽；盐酸氟西汀(Prozac);Qnexa(托吡酯和芬特明)、Excalia(安非他酮和唑尼沙胺)或Contrave(安非他酮和纳曲酮)；或脂酶抑制剂，类似于赛尼可(xenical)(0rlistat)或西替利司他(也称为ATL-962)，或GT389-255。本公开的一个方面是关于用于治疗低血糖的本文公开的胰高血糖素激动剂的预配制的水溶液。本文描述的激动剂组合物的提高的稳定性和溶解度允许制备胰高血糖素的预配制的水溶液，以快速施用和治疗低血糖。在一个实施方案中，提供了包含聚乙二醇化的胰高血糖素激动剂的溶液以施用于患有低血糖的患者，其中连接至所述聚乙二醇化的胰高血糖素激动剂的PEG链的总分子量介于约500至约5，000道尔顿之间。在一个实施方案中，所述聚乙二醇化的胰高血糖素激动剂包含选自由SEQIDNO:23、SEQIDNO:24和SEQIDNO:25组成的组的肽，和SEQIDNO:23、SEQIDNO:24和SEQIDNO:25的胰高血糖素激动剂类似物，或包含序列SEQIDN0:20的胰高血糖素的聚乙二醇化的内酰胺衍生物，其中所述胰高血糖素肽的氨基酸残基的侧链共价结合至所述聚乙二醇链。根据本发明的治疗低血糖的方法包含使用任何标准的施用路径向患者施用本文公开的胰高血糖素激动剂的步骤，所述施用路径包括肠胃外、比如静脉内、腹膜内、皮下或肌内、鞘内、透皮地、经直肠地、口服地、经鼻地或通过吸入。在一个实施方案中，所述组合物为皮下或肌内施用。在一个实施方案中，所述组合物为肠胃外施用，且所述胰高血糖素组合物预包装在注射器中。令人惊奇的是，申请人发现可以制备保留母体肽的生物活性和特异性的聚乙二醇化的胰高血糖素肽。不过，增加PEG链的长度或将多个PEG链连接至肽以使连接的PEG的总分子量大于5，000道尔顿，开始延迟修饰的胰高血糖素的作用时间。根据一个实施方案，提供了SEQIDN0:23、SEQIDN0:24和SEQIDNO:25的胰高血糖素肽或其胰高血糖素激动剂类似物、或包含序列SEQIDN0:20的胰高血糖素的聚乙二醇化的内酰胺衍生物，其中所述肽包含一个或多个聚乙二醇链，其中连接的PEG的总分子量大于5，000道尔顿，且在一个实施方案中，大于10，000道尔顿但小于小于40，000道尔顿。此类修饰的胰高血糖素肽具有延迟的或延长的活性时间，但是并未损失生物活性。因此，可施用此类化合物以延长施用的胰高血糖素肽的效应。已修饰为共价结合至具有大于10，000道尔顿的分子量的PEG链的胰高血糖素肽可与胰岛素联合施用，以在糖尿病患者中缓冲胰岛素的作用和帮助维持稳定的血液葡萄糖水平。本公开的修饰的胰高血糖素肽可作为单一组合物与胰岛素共施用，作为单独的溶液同时施用，或替代地，胰岛素和所述修饰的胰高血糖素肽可于相对于彼此的不同时间施用。在一个实施方案中，包括胰岛素的组合物和包含修饰的胰高血糖素肽的组合物在彼此的12小时内施用。修饰的胰高血糖素肽相对于施用的胰岛素的精确比值将部分依赖于确定患者的胰高血糖素水平，并可通过常规的实验确定。根据一个实施方案，提供了包含胰岛素和选自由SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDN0:4、SEQIDNO:5和其胰高血糖素激动剂类似物组成的组的修饰的胰高血糖素肽的组合物，其中所述修饰的胰高血糖素肽进一步包含共价结合至位置17、21、24或21和24处的氨基酸侧链的聚乙二醇链。在一个实施方案中，所述组合物是包含胰岛素和所述胰高血糖素类似物的水溶液。在其中所述胰高血糖素肽包含序列SEQIDNO:24或SEQIDNO:25的实施方案中，PEG链共价结合于胰高血糖素肽的位置21或24处。在一个实施方案中，所述聚乙二醇链具有约10，000至约40，000的分子量。根据一个实施方案，本文公开的修饰的胰高血糖素肽用于引起肠道暂时麻痹。此方法具有用于放射目的的效用，并包含施用有效量的药物组合物的步骤，所述药物组合物包含聚乙二醇化的胰高血糖素肽、包含c-末端延伸的胰高血糖素肽或此类肽的二聚体。在一个实施方案中，所述胰高血糖素肽包含选自由SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9、SEQIDNO:10、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDN0:13SEQIDNO:14禾PSEQIDN0:15组成的组的序列。在一个实施方案中，所述胰高血糖素肽进一步包含共价结合至位置21或24处的氨基酸残基的约1，000至40，000道尔顿的PEG链。在一个实施方案中，所述胰高血糖素肽选自由SEQIDNO:10、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14禾PSEQIDNO:15组成的组。在一个实施方案中，所述PEG链具有约500至约5，000道尔顿的分子在进一步的实施方案中，用于引起肠道暂时麻痹的组合物包含第一修饰的胰高血糖素肽和第二修饰的胰高血糖素肽。所述第一修饰的肽包含选自由SEQIDN0:23、SEQIDNO:24和SEQIDNO:25组成的组的序列，其任选地连接至约500至约5，000道尔顿的PEG链，且第二肽包含选自由SEQIDN0:23、SEQIDNO:24和SEQIDNO:25组成的组的序列，其共价连接至约10，000至约40，000道尔顿的PEG链。在此实施方案中，每种肽的PEG链共价结合至相应肽的位置17、21或24处的氨基酸残基，并且彼此独立。已报道小肠中发现的天然存在的消化性激素泌酸调节肽在施用于大鼠或人类时造成体重减轻(参见Diabetes2005;54:2390-2395)。泌酸调节肽是37氨基酸肽，含有胰高血糖素的29氨基酸序列(即SEQIDNO:1)后接SEQIDNO:27(KRNRNNIA)的8个氨基酸的羧基末端延伸。因此，申请人认为通过用本文公开的修饰的胰高血糖素肽取代泌酸调节肽的胰高血糖素肽部分，可保留泌酸调节肽的生物活性(即食欲抑制和引起体重减轻/体重维持)，而提高该化合物的溶解度和稳定性，并改善药物代谢动力学。另外，申请人还认为包含本发明的胰高血糖素肽、除去泌酸调节肽的末端四个氨基酸的截短的泌酸调节肽分子也将有效抑制食欲和引起体重减轻/体重维持。因此，本发明还包括具有SEQIDNO:27(KRNRNNIA)或SEQIDNO:28的羧基末端延伸的本发明的修饰的胰高血糖素肽。这些化合物可施用于个体以引起体重减轻或防止体重增加。根据一个实施方案，SEQIDNO:33或SEQIDNO:20的胰高血糖素激动剂类似物，进一步包含连接至胰高血糖素肽的氨基酸29的氨基酸序列SEQIDNO:27(KRNRNNIA)或SEQIDNO:28，施用于个体以引起体重减轻或防止体重增加。更特别地，所述胰高血糖素肽包含选自由SEQIDNO:10、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14禾PSEQIDNO:15组成的组的序列，其进一步包含连接至胰高血糖素肽的氨基酸29的氨基酸序列SEQIDNO:27(KRNRNNIA)或SEQIDNO:28。毒蜥外泌肽-4是由39个氨基酸组成的肽。它是称为GLP-1的受体的强剌激物。还报道此肽抑制食欲和引起体重减轻。申请人发现毒蜥外泌肽-4的末端序列在添加于胰高血糖素的羧基末端时提高胰高血糖素的溶解度和稳定性，而不危害胰高血糖素的生物活性。在一个实施方案中，毒蜥外泌肽-4的末端十氨基酸(即序列SEQIDNO:26(GPSSGAPPPS))连接至本公开的胰高血糖素肽的羧基末端。预期这些融合蛋白具有抑制食欲和引起体重减轻/体重维持的药理学活性。根据一个实施方案，SEQIDNO:33或SEQIDNO:20的胰高血糖素激动剂类似物，进一步包含连接至胰高血糖素肽的氨基酸29的氨基酸序列SEQIDNO:26(GPSSGAPPPS)或SEQIDNO:29，施用于个体以引起体重减轻或防止体重增加。更特别地，所述胰高血糖素肽包含选自由SEQIDNO:10、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:66、SEQIDNO:67、SEQIDNO:68、SEQIDNO:69、SEQIDNO:55禾PSEQIDNO:56组成的组的序列，其进一步包含连接至胰高血糖素肽的氨基酸29的氨基酸序列SEQIDNO:26(GPSSGAPPPS)或SEQIDNO:29。在一个实施方案中，施用的胰高血糖素肽类似物包含序列SEQIDNO:64。本公开还包括本文公开的修饰的胰高血糖素肽的多聚体。两个或多个修饰的胰高血糖素肽可使用本领域技术人员已知的标准连接剂和程序连接在一起。例如，两个修饰的胰高血糖素肽之间可通过使用双功能硫醇交联剂和双功能胺交联剂形成二聚体，特别是已用半胱氨酸、赖氨酸、鸟氨酸、高半胱氨酸或乙酰基苯丙氨酸残基取代的胰高血糖素肽(如32SEQIDN0:3和SEQIDNO:4)。所述二聚体可以是同二聚体或替代地可以是异二聚体。在一个实施方案中，所述二聚体包含胰高血糖素融合肽的同二聚体，其中所述胰高血糖素肽部分包含SEQIDNO:11或SEQIDNO:20和连接至胰高血糖素肽的氨基酸29的氨基酸序列SEQIDNO:26(GPSSGAPPPS)、SEQIDNO:27(KRNRNNIA)或SEQIDN0:28(KRNR)。在另一实施方案中，所述二聚体包含SEQIDNO:ll的胰高血糖素激动剂类似物的同二聚体，其中所述胰高血糖素肽进一步包含共价结合至胰高血糖素肽的位置21或24的聚乙二醇链。根据一个实施方案，提供了包含第一胰高血糖素肽经由连接体结合至第二胰高血糖素肽的二聚体，其中所述第一胰高血糖素肽包含选自由SEQIDNO:8、SEQIDNO:9、SEQIDNO:10和SEQIDNO:11组成的组的肽，且所述第二胰高血糖素肽包含SEQIDNO:20。根据另一实施方案，提供了包含第一胰高血糖素肽经由连接体结合至第二胰高血糖素肽的二聚体和所述胰高血糖素多肽的药学可接受盐，其中所述第一胰高血糖素肽包含选自由SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9、SEQIDNO:10、SEQIDNO:11组成的组的序列，且所述第二胰高血糖素肽包含SEQIDNO:11。根据另一实施方案，提供了包含第一胰高血糖素肽经由连接体结合至第二胰高血糖素肽的二聚体和所述胰高血糖素多肽的药学可接受盐，其中所述第一胰高血糖素肽选自由SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17和SEQIDNO:18组成的组，且所述第二胰高血糖素肽独立选自由SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17和SEQIDN0:18组成的组。在一个实施方案中，所述胰高血糖素肽选自由SEQIDNO:20组成的组，且所述第二胰高血糖素肽独立选自由SEQIDNO:8、SEQIDNO:9和SEQIDNO:11组成的组。在一个实施方案中，所述二聚体在两个肽之间形成，其中每个肽包含氨基酸序列SEQIDNO:11。根据一个实施方案，本发明的修饰的胰高血糖素肽可作为药盒的一部分提供。在一个实施方案中，提供了用于向需要其的患者施用胰高血糖素激动剂的药盒，其中所述药盒包括选自由以下组成的组的修饰的胰高血糖素肽l)包括序列SEQIDNO:20、SEQIDN0:9、SEQIDNO:IO或SEQIDNO:11的胰高血糖素肽；2)包括SEQIDNO:11、SEQIDNO:20或SEQIDN0:55的胰高血糖素激动剂类似物和连接至胰高血糖素肽的氨基酸29的氨基酸序列SEQIDNO:26(GPSSGAPPPS)、SEQIDNO:27(KRNRNNIA)或SEQIDN0:28(KRNR)的胰高血糖素融合肽；和3)SEQIDNO:ll或SEQIDNO:51的聚乙二醇化的胰高血糖素肽，其进一步包括连接至胰高血糖素肽的氨基酸29的氨基酸序列SEQIDNO:26(GPSSGAPPPS)、SEQIDNO:27(KRNRNNIA)或SEQIDNO:28(KRNR)，其中共价结合至位置17、21或24的PEG链具有约500至约40，000道尔顿的分子量。在一个实施方案中，所述药盒包括胰高血糖素/GLP-1共激动剂，其中所述肽包括选自由SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17禾卩SEQIDN0:18组成的组的序列。在一个实施方案中，提供具有用于将胰高血糖素组合物施用于患者的设备的药盒，所述设备如注射器针头、笔设备(pendevice)、喷射注射器(jetinjector)或其它无针注射器。所述药盒可替代地或另外地包括一个或多个容器，例如小瓶、管、瓶、单室或多室的预填充注射器、药筒、输注泵(外部的或可植入的)、喷射注射器、预填充的笔设备和类似容器，任选地含有冻干形式的或于水溶液中的胰高血糖素肽。优选地，所述药盒还将包括使用说明书。根据一个实施方案，所述药盒的设备是气溶胶配药设备，其中所述组合物预包装在所述气溶胶设备内。在另一实施方案中，所述药盒包含注射器和针头，并且在一个实施方案中，无菌的胰高血糖素组合物预包装在注射器内。本发明的化合物可通过标准的合成方法、重组DNA技术、或制备肽和融合蛋白的任何其它方法来制备。虽然某些非天然氨基酸不能通过标准的重组DNA技术表达，但是它们的制备技术是本领域已知的。除标准的肽化学反应以外，当合适时，包括非肽部分的本发明的化合物可通过标准有机化学反应合成。实施例通用合成方案在改良的AppliedBiosystem430A肽合成仪上使用HBTU-活化的"FastBoc"单偶联(singlecoupling)从O.2mmo1BocThr(OBzl)Pam树脂开始合成胰高血糖素类似物。Boc氨基酸和HBTU获自MidwestBiotech(Fishers，IN)。使用的侧链保护基团是Arg(Tos)、Asn(Xan)、Asp(0cHex)、Cys(pMeBzl)、His(Bom)、Lys(2C1-Z)、Ser(0Bzl)、Thr(0Bzl)、Tyr(2Br-Z)和Trp(CH0)。N-末端His的侧链保护基团是Boc。每个完成的肽基树脂用二甲基甲酰胺中的20%哌啶(piperdine)溶液处理，以从色氨酸上除去甲酰基团。液体氟化氢切割在对甲酚和二甲基硫的存在下进行。切割使用HF仪器(PenmnsulaLabs)于冰浴中运行1小时。蒸发HF后，将残留物悬浮于二乙醚，并过滤固体物质。用30-70ml乙酸水溶液萃取每种肽，稀释的等份通过HPLC[BeckmanSystemGold，O.46x5cmZorbaxC8，lml/min，45C，214nm，A缓冲液=0.1%TFA，B=0.1%TFA/90%乙腈，梯度为10%至80%B，10min]分析。纯化在FPLC上通过2.2x25cmKromasilC18柱进行，并监测214nmUV和收集每5分钟级分。合并同质的级分并将其冻干，以获得>95%的产物纯度。使用MALDI-质谱分析确认正确的分子质量和纯度。通用聚乙二醇化方案(Cys-马来酰亚胺基)通常，将胰高血糖素Cys类似物溶解于磷酸缓冲盐水溶液(5-10mg/ml)，并添加0.01M乙二胺四乙酸(总体积的10-15%)。添加过量的(2倍)马来酰亚胺基甲氧PEG试剂(Nektar)，在室温下搅拌反应物，同时通过HPLC监测反应进程。8-24小时后，酸化反应混合物，并将其上样至制备型反相柱，以使用0.1%TFA/乙腈梯度纯化。合并适当的级分并将其冻干，以获得所需的聚乙二醇化的类似物。实施例1胰高血糖素Cys17(l-29)和相似的单Cys类似物的合成0.2mmolBocThr(0Bzl)Pam树脂(SynChemInc)于60ml反应容器中，加入下列序列并使用FastBocHBTU-活化的单偶联在改良的AppliedBiosystems430A肽合成仪上运行。HSQGTFTSDYSKYLDSCRAQDFVQWLMNT(SEQIDNO:35)使用下列侧链保护基团Arg(Tos)、Asp(0cHex)、Asn(Xan)、Cys(pMeBzl)、Glu(0cHex)、His(Boc)、Lys(2C1-Z)、Ser(Bzl)、Thr(Bzl)、Trp(CH0)和Tyr(Br-Z)。完成的肽基树脂用20%哌啶/二甲基甲酰胺处理，以除去Trp甲酰保护，然后转移至HF反应容器并在真空下干燥。随磁力搅拌棒添加1.Oml对甲酚和0.5ml二甲基硫。将所述容器连接至HF仪器(PennisulaLabs)，在干冰/甲醇浴中冷却，排空，约10ml液体氟化氢被冷凝入。在冰浴中搅拌反应物1小时，然后在真空下除去HF。将残留物悬浮于乙醚；过滤固体物质，将其用醚洗涤，将肽萃取至50ml乙酸水溶液。对切割萃取物的小份样品运行分析型HPLC。将剩余的萃取物上样至2.2x25cmKromasilC18制备型反相柱，并使用PharmaciaFPLC系统运行乙腈梯度。收集每5min的级分，同时监测214nmUV(2.OA)。A=0.1%TFA，B=0.1%TFA/50X乙腈。梯度=30%B至100%B，450min。合并含有最纯的产物的级分(48-52)，将其冷冻和冻干，以获得30.lmg。产物的HPLC分析展示〉90X的纯度，且MALDI质谱分析展示所需的质量3429.7。相似地制备了胰高血糖素Cys胰高血糖素Cys24和胰高血糖素Cys29。实施例2胰高血糖素-Cex和其它C-末端延伸的类似物的合成。将285mg(0.2mmo1)甲氧二苯甲基胺树脂(MidwestBiotech)置于60ml反应容器中，加入下列序列并使用FastBocHBTU-活化的单偶联在改良的AppliedBiosystems430A肽合成仪上运行。HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTGPSSGAPPPS(SEQIDNO:36)使用下列侧链保护基团:Arg(Tos)、Asp(OcHex)、Asn(Xan)、Cys(pMeBzl)、Glu(OcHex)、His(Boc)、Lys(2C1-Z)、Ser(Bzl)、Thr(Bzl)、Trp(CHO)和Tyr(Br-Z)。完成的肽基树脂用20%哌啶/二甲基甲酰胺处理，以除去Trp甲酰保护，然后转移至HF反应容器并在真空下干燥。随磁力搅拌棒添加1.Oml对甲酚和0.5ml二甲基硫。将所述容器连接至HF仪器(PennisulaLabs)，在干冰/甲醇浴中冷却，排空，约10ml液体氟化氢被冷凝入。在冰浴中搅拌反应物1小时，然后在真空下除去HF。将残留物悬浮于乙醚；过滤固体物质，将其用醚洗涤，将肽萃取至50ml乙酸水溶液。对切割萃取物的小份样品运行分析型HPLC[O.46x5cmZorbaxC8，lml/min，45C，214nm，0.1%TFA的A缓冲液，0.1%TFA/90%ACN的B缓冲液，梯度=10%B至80%B，10min]。将萃取物上样至2.2x25cmKromasilC18制备型反相柱，并使用PharmaciaFPLC系统运行乙腈梯度进行洗脱。收集每5min的级分，同时监测214nmUV(2.0A)。A=0.1%TFA，B=0.1%TFA/50%乙腈。梯度二30XB至100%B，450min。合并级分58-65，将其冷冻和冻干，以获得198.lmg。产物的HPLC分析显示大于95%的纯度。MALDI质谱分析显示作为C-末端酰胺的产物的所需理论质量4316.7的存在。从适当上样的PAM-树脂开始，相似地制备了作为C-末端羧酸的泌酸调节肽和泌酸调节肽-KRNR。实施例3胰高血糖素Cys17Mal-PEG_5K将15.lmg胰高血糖素Cys17(1-29)和27.3mg甲氧聚(乙二醇)马来酰亚胺平均分子量5000(mPEG-Mal-5000，NektarTher即eutics)溶解于3.5ml磷酸缓冲盐水溶液(PBS)，添加O.5ml0.OIM乙二胺四乙酸(EDTA)。在室温下搅拌反应物，并通过HPLC分析监测反应进程。5小时后，将反应混合物上样至2.2x25cmKromasilC18制备型反相柱。在PharmaciaFPLC上运行乙腈梯度，同时监测214nm的UV波长，并收集每5min的级分。A=0.1%TFA，B=0.1%TFA/50X乙腈，梯度二30%B至100%B，450min。合并对应于产物的级分，将其冷冻和冻干，以获得25.9mg。在HPLC[O.46x5cmZorbaxC8，lml/min，45C，214nm(0.5A)，A=0.1%TFA，B=0.1%TFA/90%ACN，梯度二10%B至80%B，lOmin.]上分析此产物，其显示大约90%的纯度。MALDI(基质辅助激光解吸电离)质谱分析显示8700至9500的宽质量范围(PEG衍生物典型的)。这显示向起始胰高血糖素肽的质量(3429)添加了大约5，000a.m.u.。实施例4胰高血糖素Cys21Mal-PEG_5K将21.6mg胰高血糖素Cys21(1-29)和24mgmPEG-MAL_5000(NektarTher即eutics)溶解于3.5ml磷酸缓冲盐水溶液(PBS)，并添加0.5ml0.OIM乙二胺四乙酸(EDTA)。在室温下搅拌反应物。2小时后，添加另外12.7mg的mPEG-MAL-5000。8小时后，将反应混合物上样至2.2x25cmVydacC18制备型反相柱，并在PharmaciaFPLC上以4ml/min运行乙腈梯度，同时收集每5min的级分。A=0.1%TFA，B=0.1%TFA/50%ACN。梯度=20%至80%B，450min。合并对应于产物出现的级分，将其冷冻和冻干，以获得34mg。对产物的分析型HPLC[O.46x5cmZorbaxC8，lml/min，45C，214nm(0.5A)，A=0.1%TFA，B=0.1%TFA/90XACN，梯度二10%B至80%B，10min]分析显示不同于起始胰高血糖素肽的同质产物。MALDI(基质辅助激光解吸电离)质谱分析显示8700至9700的宽质量范围(PEG类似物典型的)。这显示向起始胰高血糖素肽的质量(3470)添加了大约5，000a.m.u.。实施例5胰高血糖素Cys24Mal-PEG-5K将20.lmg胰高血糖素C24(1-29)和39.5mgmPEG-Mal-5000(NektarTherapeutics)在搅拌下溶解于3.5mlPBS，并添加0.5ml0.OIMEDTA。在室温下搅拌反应物7小时，然后添加另外40mgmPEG-Mal-5000。大约15小时后，将反应混合物上样至2.2x25cmVydacC18制备型反相柱，并使用PharmaciaFPLC运行乙腈梯度。收集每5min的级分，同时监测214nm的UV(2.OA)。A缓冲液=0.1%TFA，B缓冲液=0.1%TFA/50%ACN，梯度=30%B至100%B，450min。合并对应于产物的级分，将其冷冻和冻干，以获得45.8mg。MALDI质谱分析显示典型的PEG宽信号，最大值在9175.2，这比胰高血糖素C24(3457.8)高出大约5，000a.m.u.。实施例6胰高血糖素Cys24Mal-PEG_20K将25.7mg胰高血糖素Cys24(l—29)禾P40.7mgmPEG-Mal-20K(NektarTherapeutics)在室温搅拌下溶解于3.5mlPBS，并添加O.5ml0.OIMEDTA。6小时后，起始物质与产物的比值为大约60:40，如HPLC所测定的。添加另外25.lmgmPEG-Mal-20K，并让反应物搅拌另外16小时。产物比值没有显著提高，所以将反应混合物上样至2.2x25cmKromasilC18制备型反相柱，并在PharmaciaFPLC上使用30%B至100%B的梯度纯化运行450min。A缓冲液=0.1%TFA，B缓冲液=0.1%TFA/50%ACN，流速二4ml/min，并收集每5min的级分，同时监测214nm的UV(2.OA)。合并含同质产物的级分，将其冷冻和冻干，以获得25.7mg。分析型HPLC测定的纯度为90%。MALDI质谱分析显示23，000至27，000的宽峰，这比起始胰高血糖素C24(3457.8)高出大约20，OOOa.m.u.。实施例7胰高血糖素Cys29Mal-PEG-5K将20.0mg的胰高血糖素Cys29(1-29)和24.7mgmPEG-Mal-5000(NektarTherapeutics)在室温搅拌下溶解于3.5mlPBS，并添加0.5ml0.OIMEDTA。4小时后，添加另外15.6mgmPEG-Mal-5000以驱动反应完成。8小时后，将反应混合物上样至2.2x25cmVydacC18制备型反相柱，并在PharmaciaFPLC系统上运行乙腈梯度。收集每5min的级分，同时监测214nm的UV(2.OA)。A=0.1%TFA，B=0.1%TFA/50%ACN。合并级分75-97，将其冷冻和冻干，以获得40.Omg不同于HPLC上的回收的起始物质(级分58-63)的产物。对产物的分析型HPLC[O.46x5cmZorbaxC8，lml/min，45C，214nm(0.5A)，A=0.1%TFA，B=0.1%TFA/90%ACN，梯度二10%B至80XB，lOmin.]分析显示大于95%的纯度。MALDI质谱分析显示具有8，000至10，000(最大9025.3)的质量范围的PEG组分的存在，其比起始物质(3484.8)大出5，540a.m.u.。实施例8胰高血糖素Cys24(2-丁内酯)向24.7mg胰高血糖素Cys24(1-29)添加4ml0.05M碳酸氢铵/50%乙腈和5.5ul2-溴-4-羟基丁酸-Y-内酯的溶液(100ul于900ul乙腈中)。在室温搅拌3小时后，向反应混合物添加另外105ul内酯溶液，将其再搅拌15小时。将反应混合物用10%乙酸水溶液稀释至10ml，并上样至2.2x25cmKromasilC18制备型反相柱。在PharmaciaFPLC上运行乙腈梯度(20%B至80%B，450min)，同时收集每5min的级分，并监测214nm的UV(2.OA)。流速=4ml/min，A=0.1%TFA，B=0.1%TFA/50%ACN。合并级分74-77，将其冷冻和冻干，以获得7.5mg。HPLC分析显示95%的纯度，并且MALDI质谱分析显示3540.7或比起始物质大出84个质量单位的质量。此结果与添加单个丁内酯部分一致。精确质量=3538分子式=C155H226N42050S2实施例9胰高血糖素Cys24(S_羧甲基)将18.lmg胰高血糖素Cys24(1-29)溶解于9.4ml0.1M磷酸钠缓冲液(pH=9.2)，并添加0.6ml溴乙酸溶液(1.3mg/ml，于乙腈中)。在室温下搅拌反应物，并通过分析型HPLC跟踪反应进程。1小时后，添加另外0.lml溴乙酸溶液。将反应物搅拌另外60min，然后用乙酸水溶液酸化，并上样至2.2x25cmKromasilC18制备型反相柱进行纯化。在PharmaciaFPLC上运行乙腈梯度(流速=4ml/min)，同时收集每5min的级分并监测214nm的UV(2.OA)。A=0.1%TFA，B=0.1%TFA/50%ACN。合并级分26-29，将其冷冻和冻干，以获得几mg的产物。分析型HPLC显示90%的纯度，并且MALDI质谱分析确认所需产物3515的质量。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula>分子量=3515.87精确质量=3512分子式=C153H224N42050S2实施例10胰高血糖素Cys24马来酰亚胺基PEG-3.4K_二聚体将16mg胰高血糖素Cys24禾P1.02mgMal-PEG-Mal-3400(聚(乙二醇)-二-马来酰亚胺平均分子量3400，NektarTherpeutics)溶解于3.5磷酸缓冲盐水溶液和0.5ml0.01MEDTA，并在室温下搅拌反应物。16小时后，添加另外16mg胰高血糖素Cys24并继续搅拌。大约40小时后，将反应混合物上样至PharmciaP印RPC16/10柱，并在PharmaciaFPLC上运行乙腈梯度，同时收集每2min的级分，并监测214nm的UV(2.OA)。流速=2ml/min，A=0.1%TFA，B=0.1%TFA/50%ACN。合并级分69-74，将其冷冻和冻干，以获得10.4mg。分析型HPLC显示90%的纯度，并且MALDI质谱分析显示9500-11，000范围内的组分，其与所需的二聚体一致。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage38</formula>实施例11胰高血糖素内酰胺的合成将285mg(0.2mmo1)甲氧二苯甲基胺树月旨(MidwestBiotech)添加至60mL反应容器，并使用BocDEPBT-活化的单偶联在改良的AppliedBiosystems430A肽合成仪上装配下列序列。HSQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNT-NH2(12-16内酰胺；SEQIDNO:12)使用下列侧链保护基团:Arg(Tos)、Asp(0cHx)、Asn(Xan)、Glu(0Fm)、His(BOM)、Lys(Fmoc)、Ser(Bzl)、Thr(Bzl)、Trp(CH0)、Tyr(Br-Z)。如果内酰胺是从16-20、20-24或24-28构建，在位置12处使用Lys(Cl-Z)。将完成的肽基树脂用20%哌啶/二甲基甲酰胺旋转处理1小时，以除去Trp甲酰基团以及Lysl2和Glul6的Fmoc和0Fm保护。通过阳性茚三酮测试确认去除后，将树脂用二甲基甲酰胺、然后是二氯甲烷和然后再次用二甲基甲酰胺洗涤。将树脂用于二甲基甲酰胺和二异丙基乙胺(DIEA)中的520mg(lmmo1)六氟磷酸苯并三唑-l-基-氧基-三吡咯烷基磷(PyB0P)处理。反应继续8-10小时，然后通过阴性茚三酮反应确认环化。将树脂用二甲基甲酰胺、然后是二氯甲烷洗涤，并接着用三氟乙酸处理10分钟。通过阳性茚三酮反应确认Boc基团的去除。在转移至氢氟酸(HF)反应容器之前，将树脂用二甲基甲酰胺和二氯甲烷洗涤并干燥。随磁力搅拌棒添加500iiL对甲酚。将容器连接至HF仪器(PeninsulaLabs)，在干冰/甲醇浴中冷却，排空，约10ml液体氢氟酸冷凝入容器。在冰浴中搅拌反应物1小时，并接着在真空下除去HF。将残留物悬浮于乙醚；过滤固体物质，将其用醚洗涤，将肽用150mL20%乙腈/1%乙酸溶解。对粗溶解的肽的分析型HPLC分析在下列条件下执行[4.6X30mmXterraC8，1.50mL/min，220nm，A缓冲液0.1%TFA/10%ACN，B缓冲液0.1%TFA/100%ACN，梯度5-95%B，15分钟]。将萃取物用水稀释两倍，并上样至2.2X25cmVydacC4制备型反相柱，并使用乙腈梯度在WatersHPLC系统上洗脱(A缓冲液0.1%TFA/10%ACN，B缓冲液0.1%TFA/10%ACN，梯度为0-100%B进行120分钟，流速15.00ml/min。对纯化肽的HPLC分析展示大于95%纯度，且电喷雾电离质谱分析确认12-16内酰胺的质量为3506Da。相似地制备了16-20、20-24和24-28内酰胺。实施例12胰高血糖素溶解度测定在0.01NHC1中制备胰高血糖素(或类似物)的溶液(lmg/ml或3mg/ml)。将100ul贮液用0.01NHC1稀释至lml，并测定UV吸光度(276nm)。使用200-250ul0.1MNa2HP04(pH9.2)将剩余贮液的pH调节至pH7。将所述溶液在4。C放置过夜，然后离心。然后将100ul上清用0.01NHC1稀释至lml，并测定UV吸光度(两个重复)。针对体积的增加补偿初始吸光度读数，并使用下列计算确立百分比溶解度^収缝xioo=溶解百分比初始吸光度结果示于表l，其中胰高血糖素-Cex代表野生型胰高血糖素(SEQIDNO:1)加上SEQIDN0:26羧基末端添加，且胰高血糖素-CexR12代表SEQIDNO:39。表1胰高血糖素类似物的溶解度数据(date)类似物溶解百分比胰高血糖素16胰高血糖素-Cex，R12104胰高血糖素-Cex87泌酸调节肽104胰高血糖素，Cysl7PEG5K94胰高血糖素，Cys21PEG5K105胰高血糖素，Cys24PEG5K133实施例13胰高血糖素受体结合测定利用闪烁接近测定(scintillationproximityassay)技术，在竞争结合测定中测量肽对胰高血糖素受体的亲和性。在96孔白色/透明底平板(Corninglnc.，Acton，MA)中，将在闪烁接近测定缓冲液(0.05MTris-HCl，pH7.5，0.15MNaCl，0.1%w/v牛血清白蛋白)中制备的肽的系列3倍稀释液与0.05nM(3-[125I]-碘酪氨酰)Tyr10胰高血糖素(AmershamBiosciences,Piscataway，NJ)(1-6微克/孑L)、从过表达人类胰高血糖素受体的细胞制备的质膜碎片和lmg/孔聚乙烯亚胺处理的小麦胚芽凝集素A型闪烁接近测定珠(AmershamBiosciences,Piscataway，NJ)混合。以800rpm在旋转振荡仪上振荡5min后，将平板在室温下孵育12h，然后在MicroBetal450液体闪烁计数器(Perkin-Elmer，Wellesley，MA)上读数。以比测试样品中的最高浓度高4倍浓度的"冷"天然配体孔测量非特异性结合(NSB)放射活性，并以无竞争者孔检测总结合放射活性。特异性结合百分比按如下计算％特异性结合=((结合-NSB)/(总结合-NSB))X100。使用Origin软件(OriginLab，Northampton,MA)确定IC5。值。实施例14功能测定-cAMP合成在基于萤火虫荧光素酶的报告分子(r印orter)测定中测量了胰高血糖素类似物诱导cAMP的能力。通过在补充O.25%牛生长血清(BovineGrowthSer咖，HyClone，Logan，UT)的DMEM(Invitrogen，Carlsbad,CA)中培养16h对用胰高血糖素受体或GLP-1受体和连接至cAMP响应元件的荧光素酶基因共转染的HEK293细胞进行血清耗竭，然后将其与胰高血糖素、GLP-1或新颖胰高血糖素类似物的系列稀释液在37°C、5%C02下于96孔聚_D_赖氨酸包被的"Biocoat"平板(BDBiosciences,SanJose，CA)中孵育5h。孵育结束时，向每个孔中添加100微升LucLite荧光底物试剂(Perkin-Elmer，Wellesley，MA)。将平板短暂振荡，在黑暗条件下孵育10min，然后在MicroBeta-1450液体闪烁计数器(Perkin-Elmer，Wellesley，MA)上测量光输出。通过使用Origin软件(OriginLab，Northampton,MA)计算50%有效浓度。结果示于图3-9和表2至10。表2具有C-末端延伸的胰高血糖素类似物对cAMP的诱导<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>*-实验次数表4E16胰高血糖素类似物对cAMP的诱导<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>表5E16胰高血糖素类似物对cAMP的诱导<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>表6E16胰高血糖素类似物诱导cAMP的EC50值<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>表7E16胰高血糖素类似物诱导cAMP的EC50值<table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table>表10GLP-117-26胰高血糖素类似物对cAMP的诱导<table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table>实施例15胰高血糖素Cys-马来酰亚胺基PEG类似物的稳定性测定将每种胰高血糖素类似物溶解于水或PBS，然后进行初始HPLC分析。调节pH(4、5、6、7)后，将所述样品在37t:孵育指定的时间段，并通过HPLC重新分析以确定所述肽的完整性。确定感兴趣的具体肽的浓度，并计算相对于初始分析的保持完整的百分比。胰高血糖素Cys21-马来酰亚胺基PEG5K的结果示于图1和2。实施例16总体按上文实施例1-11的描述构建了下列胰高血糖素肽在所有下列序列中，"a"指C-末端酰胺。HSQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa(SEQIDNO:70)HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:71)HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:72)HSQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:73)HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:74)HSQGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:75)HSQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:76)HSQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:77)HSQGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:78)HSQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:79)HSQGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:80)HSQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa(SEQIDNO:81)HSQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:82)HSQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:83)HSQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa(SEQIDNO:84)HSQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:85)HSQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:86)XISQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa(SEQIDNO:87)XISQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:88)XISQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:89)XISQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:90)XISQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:91)XISQGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:92)XISQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:93)XISQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMHTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:94)XISQGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:95)XISQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:96)XISQGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:97)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFLAWLMNTa(SEQIDNO:98)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:99)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:100)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa(SEQIDNO:101)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:102)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:103)其中，在前述的序列中，Xl=(去氨基)HisHX2QGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa(SEQIDNO:104)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:105)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:106)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:107)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:108)HX2QGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:109)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa〔SEQIDNO:110)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:111)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:112)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:113)HX2QGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:114)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa〔SEQIDNO:115)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:116)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:117)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa〔SEQIDNO:118)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:119)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:120)其中在前述的序列中X2=氨基异丁酸HX2QGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa〔SEQIDNO:121)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa〔SEQIDNO:122)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:123)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:124)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:125)HX2QGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:126)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa〔SEQIDNO:127)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:128)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:129)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:130)HX2QGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:131)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa〔SEQIDNO:132)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:133)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:134)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa〔SEQIDNO:135)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:136)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:137)其中在前述的序列中X2=(D-Ala)HSEGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa(SEQIDNO:138)HSEGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:139)HSEGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:140)HSEGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa(内酰胺@12_16;SEQIDNO:141)HSEGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(内酰胺@12_16;SEQIDNO:142)HSEGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMNTa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:143)HSEGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:144)HSEGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:145)HSEGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMNTa(内酰胺@12_16;SEQIDNO:146)HSEGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa(内酰胺@12_16;SEQIDNO:147)HSEGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMNTa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:148)HSEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa(SEQIDNO:149)HSEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa(内酰胺@12_16;SEQIDNO:150)HSEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:151)HSEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa(SEQIDNO:152)HSEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa(内酰胺@12_16;SEQIDNO:153)HSEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:154)XISEGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa(SEQIDNO:155)XISEGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:156)XISEGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20-SEQIDNO:157)XISEGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16-SEQIDNO:158)XISEGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16-SEQIDNO:159)XISEGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20-SEQIDNO:160)XISEGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:161)XISEGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20-SEQIDNO:162)XISEGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16-SEQIDNO:163)XISEGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16-SEQIDNO:164)XISEGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20-SEQIDNO:165)XISEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa(SEQIDNO:166)XISEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa(内酰胺@12-16-SEQIDNO:167)XISEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa(内酰胺@16-20-SEQIDNO:168)XISEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa(SEQIDNO:169)XISEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa(内酰胺@12-16-SEQIDNO:170)XISEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa(内酰胺@16-20-SEQIDNO:171)其中在前述的序列中XI=(去氨基)HisHX2EGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa(SEQIDNO:172)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:173)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20-SEQIDNO:174)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16-SEQIDNO:175)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16-SEQIDNO:176)HX2EGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20-SEQIDNO:177)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:178)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20-SEQIDNO:179)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16-SEQIDNO:180)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa(内酰胺@12-16-SEQIDNO:181)HX2EGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMNTa(内酰胺@16-20-SEQIDNO:182)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa〔SEQIDN0:183)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:184)HX2EGTFFSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:185)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa〔SEQIDNO:186)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:187)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:188)其中在前述的序列中X2=氨基异丁酸HX2EGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa〔SEQIDNO:189)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa〔SEQIDNO:190)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:191)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:192)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:193)HX2EGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:194)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa〔SEQIDNO:195)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:196)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:197)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:198)HX2EGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:199)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa〔SEQIDNO:200)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:201)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:202)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa〔SEQIDNO:203)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:204)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLVKGa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:205)其中在前述的序列中X2=HSQGTFTSDYSKYLDER國HSQGTHSQGTHSQGTHSQGTHSQGTHSQGTHSQGTHSQGTHSQGTHSQGTHSQGTHSQGTHSQGTFTSDYFTSDYFTSDYFTSDYFTSDYFTSDYFTSDYFTSDYFTSDYFTSDYFTSDYFTSDYFTSDYSKYLDSKYLDSKYLDSKYLDSKYLDSKYLDSKYLDSKYLDSKYLDSKYLDSKYLDSKYLDSKYLDERRAKERRAKERRAQERRAKKRRAEERAAKERAAKERAAQERAAKKRAAEEQAAKEQAAKEQAAK(D-Ala)DFVOWDFVOWDFVOWDFVOWDFVOWDFVOWDFVOWDFVOWDFVOWDFVOWDFVOWEFIOWEFIOWEFIOWLMNTaLMNTaLMNTaLMNTaLMNTaLMNTaLMNTaLMNTaLMNTaLMNTaLMNTaLMNTaLMNTaLMNTaSEQIDSEQID内酰胺内酰胺内酰胺内酰胺SEQID内酰胺内酰胺内酰胺内酰胺SEQID内酰胺内酰胺NO:206)NO:207)@16-20;SEQ@12-16;SEQ@12-16;SEQ@16-20;SEQNO:212)@16-20;SEQ@12-16;SEQ@12-16;SEQ@16-20;SEQNO:217)@12-16;SEQ@16-20;SEQIDIDIDIDIDIDIDIDNONONONONONONONOIDNOIDNO:208):209):210):211):213):214):215):216):218):219)HSQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLVKGa(SEQIDNO:220)HSQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLVKGa(内酰胺@12_16;SEQIDNO:221)HSQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLVKGa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:222)XISQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVOWLMNTa(SEQIDNO:223)XISQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNTa(SEQIDNO:224)XISQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNTa(内酰胺@16-20;:SEQIDNO:225)XISQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVOWLMNTa(内酰胺@12-16;:SEQIDNO:226)XISQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNTa(内酰胺@12-16;:SEQIDNO:227)XISQGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVOWLMNTa(内酰胺@16-20;:SEQIDNO:228)XISQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVOWLMNTa(SEQIDNO:229)XISQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVOWLMNTa(内酰胺@16-20;:SEQIDNO:230)XISQGTFTSDYSKYLDERAAQDFVOWLMNTa(内酰胺@12-16;:SEQIDNO:231)XISQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVOWLMNTa(内酰胺@12-16;:SEQIDNO:232)XISQGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVOWLMNTa(内酰胺@16-20;:SEQIDNO:233)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(SEQIDNO:234)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(内酰胺@12-16;:SEQIDNO:235)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(内酰胺@16-20;:SEQIDNO:236)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLVKGa(SEQIDNO:237)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLVKGa(内酰胺@12-16;:SEQIDNO:238)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLVKGa(内酰胺@16-20;:SEQIDNO:239)其中在前述的序列中XI=(去氨基)His;并且其中C*是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地(f:是连接至约20kD平均分子量的聚乙」二醇的Cys，或替代地(f是连接至约40kD平均分子量:的聚乙二醇的Cys。HX2QGTFTSDYSKYLDERRAQDFVOWLMNTa(SEQIDNO:240)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNTa(SEQIDNO:241)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:242)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAQDFVOWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:243)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:244)HX2QGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVOWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:245)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVOWLMNTa(SEQIDNO:246)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVOWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:247)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAQDFVOWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:248)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVOWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:249)HX2QGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVOWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:250)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(SEQIDNO:251)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:252)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:253)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLVKGa(SEQIDNO:254)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLVKGa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:255)其中在前述的序列中X2=氨基异丁酸；并且其中C*是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地C*是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。HX2EGTFTSDYSKYLDERRAQDFVOWLMNTa(SEQIDNO:325)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNTa(SEQIDNO:326)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:327)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAQDFVOWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:328)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:329)HX2EGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVOWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:330)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVOWLMNTa(SEQIDNO:331)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVOWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:332)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAQDFVOWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:333)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVOWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:334)HX2EGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVOWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:335)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(SEQIDNO:336)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:337)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:338)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLVKGa(SEQIDNO:339)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLVKGa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:340)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLVKGa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:341)其中在前述的序列中X2二(D-Ala);并且其中C*是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地C*是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。HSQGTFTSDYSKYLDORRAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:342)HSQGTFTSDYSKYLDORAAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:343)HSQGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLMNTa(SEQIDNO:344)HSQGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLVKGa(SEQIDNO:345)X1SQGTFTSDYSKYLDORRAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:346)X1SQGTFTSDYSKYLDORAAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:347)X1SQGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLMNTa(SEQIDNO:348)X1SQGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLVKGa(SEQIDNO:349)其中X1二(去氨基)His;并且其中(f是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地C*是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。HX2QGTFTSDYSKYLDORRAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:350)HX2QGTFTSDYSKYLDORAAKDFVQWLMTa(SEQIDNO:351)HX2QGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLMNTa(SEQIDNO:352)HX2QGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLVKGa(SEQIDNO:353)其中X2=氨基异丁酸；并且其中C*是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代52地C*是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。HX2QGTFTSDYSKYLDORRAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:354)HX2QGTFTSDYSKYLDORAAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:355)HX2QGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLMNTa(SEQIDNO:356)HX2QGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLVKGa(SEQIDNO:357)其中X2=(D-Ala);并且其中C*是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地C*是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。HSEGTFTSDYSKYLDORRAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:358)HSEGTFTSDYSKYLDORAAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:359)HSEGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLMNTa(SEQIDNO:360)HSEGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLVKGa(SEQIDNO:361)X1SEGTFTSDYSKYLDORRAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:362)X1SEGTFTSDYSKYLDORAAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:363)X1SEGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLMNTa(SEQIDNO:364)X1SEGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLVKGa(SEQIDNO:365)其中X1二(去氨基)His;并且其中(f是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地C*是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。HX2EGTFTSDYSKYLDORRAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:366)HX2EGTFTSDYSKYLDORAAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:367)HX2EGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLMNTa(SEQIDNO:368)HX2EGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLVKGa(SEQIDNO:369)其中X2=(D-Ala);并且其中C*是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地C*是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。HX2EGTFTSDYSKYLDORRAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:370)HX2EGTFTSDYSKYLDORAAKDFVQWLMNTa(SEQIDNO:371)HX2EGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLMNTa(SEQIDNO:372)HX2EGTFTSDYSKYLDOQAAKEFIAWLVKGa(SEQIDNO:373)其中X2=(D-Ala);并且其中(f是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地C*是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。HSQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMDTa(SEQIDNO:374)HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa(SEQIDNO:375)HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:376)HSQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMDTa(内酰胺@12_16;SEQIDNO:377)HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa(内酰胺@12_16;SEQIDNO:378)HSQGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:379)HSQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa(SEQIDNO:380)HSQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:381)HSQGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:382)HSQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:383)HSQGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:384)HSQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa(SEQIDNO:385)HSQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:386)HSQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:387)XISQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMDTa〔SEQIDNO:388)XISQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa〔SEQIDNO:389)XISQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:390)XISQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:391)XISQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:392)XISQGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:393)XISQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa〔SEQIDNO:394)XISQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:395)XISQGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:396)XISQGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:397)XISQGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:398)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔SEQIDNO:399)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:400)XISQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:401)其中在前述的序列中XI=(去氨基)HisHX2QGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMDTa〔SEQIDNO:402)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa〔SEQIDNO:403)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:404)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:405)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:406)HX2QGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:407)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa〔SEQIDNO:408)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:409)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:410)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:411)HX2QGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:412)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔SEQIDNO:413)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔内酰胺@12-16-SEQIDNO:414)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔内酰胺@16-20-SEQIDNO:415)其中在前述的序列中X2=氨基异丁酸HX2QGTFTSDYSKYLDER圃DFVQWLMDTa(SEQIDNO:416)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa(SEQIDNO:417)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:418)HX2QGTFTSDYSKYLDER圃DFVQWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:419)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:420)HX2QGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:421)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa(SEQIDNO:422)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:423)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:424)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:425)HX2QGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:426)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa(SEQIDNO:427)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:428)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:429)其中在前述的序列中X2=(D-Ala)HSEGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMDTa(SEQIDNO:430)HSEGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa(SEQIDNO:431)HSEGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:432)HSEGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:433)HSEGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:434)HSEGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:435)HSEGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa(SEQIDNO:436)HSEGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:437)HSEGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:438)HSEGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:439)HSEGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:440)HSEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa(SEQIDNO:441)HSEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:442)HSEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:443)X1SEGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMDTa(SEQIDNO:444)X1SEGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa(SEQIDNO:445)X1SEGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:446)X1SEGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:447)X1SEGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:448)X1SEGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:449)X1SEGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa(SEQIDNO:450)X1SEGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa(内酰胺@16-20;SEQIDNO:451)X1SEGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:452)X1SEGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa(内酰胺@12-16;SEQIDNO:453)X1SEGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20;SEQIDNO:454)X1SEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔SEQIDNO:455)X1SEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔内酰胺@12-16;SEQIDNO:456)X1SEGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔内酰胺@16-20;SEQIDNO:457)其中在前述的序列中XI=(去氨基)HisHX2EGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMDTa〔SEQIDNO:458)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa〔SEQIDNO:459)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20;SEQIDNO:460)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16;SEQIDNO:461)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16;SEQIDNO:462)HX2EGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20;SEQIDNO:463)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa〔SEQIDNO:464)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20;SEQIDNO:465)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16;SEQIDNO:466)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16;SEQIDNO:467)HX2EGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20;SEQIDNO:468)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔SEQIDNO:469)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔内酰胺@12-16;SEQIDNO:470)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔内酰胺@16-20;SEQIDNO:471)其中在前述的序列中X2=氨基异丁酸HX2EGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMDTa〔SEQIDNO:472)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa〔SEQIDNO:473)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20;SEQIDNO:474)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16;SEQIDNO:475)HX2EGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16;SEQIDNO:476)HX2EGTFTSDYSKYLDKRRAEDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20;SEQIDNO:477)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa〔SEQIDNO:478)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20;SEQIDNO:479)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAQDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16;SEQIDNO:480)HX2EGTFTSDYSKYLDERAAKDFVQWLMDTa〔内酰胺@12-16;SEQIDNO:481)HX2EGTFTSDYSKYLDKRAAEDFVQWLMDTa〔内酰胺@16-20;SEQIDNO:482)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔SEQIDNO:483)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔内酰胺@12-16;SEQIDNO:484)HX2EGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMDTa〔内酰胺@16-20;SEQIDNO:485)其中在前述的序列中X2=(D-Ala)还总体按上文实施例1-11的描述构建了下列具有约5或更高的GLP-1/胰高血糖素活十:生比值的胰高血糖素肽。总体而:1"，在这些肽中，位置2的AIB提供了DPPIV抗性，但也显著降低了胰高血糖素活性HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(SEQIDNO:486)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNOa(SEQIDNO:487)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNGGPSSGAPPPSOa(SEQIDNO:488)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNGGPSSGAPPPSOa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:489)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNGGPSSGAPPPSa(SEQIDNO:490)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNGGPSSGAPPPSa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:491)其中在前述的序列中X2=AIB，并且其中C*是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地C*是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKHX2QGTFTSDYSKYLDERAAKHX2QGTFTSDYSKYLDERAAKHX2QGTFTSDYSKYLDERAAKIDNO:495)HX2QGTFTSDYSKYLDERAAKHX2QGTFTSDYSKYLDERAAKNO:497)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKHX2QGTFTSDYSKYLDERRAKHX2QGTFTSDYSKYLDERRAKHX2QGTFTSDYSKYLDERRAKIDNO:501)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKHX2QGTFTSDYSKYLDERRAKNO:503)其中在前述的序列中X2二AIB，并且其中(f是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地C*是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。还总体按上文实施例1-11的描述构建了为GLP-l/胰高血糖素共激动剂的下列胰高血糖素肽。氨基酸16和20之间形成的内酰胺桥恢复了由位置2处的取代造成的胰高血糖素活性的降低。HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:504)其中在前述的序列中X2二AIB，并且其中(f是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地C*是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。X1SQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:505)X1SQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNOa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:506)X1SQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNGGPSSGAPPPSOa(内酰胺@16_20;SEQDFVOWLMNTa(SEQIDNO:492)DFVQWLMNOa(SEQIDNO:493)DFVQWLMNGGPSSGAPPPSOa(SEQIDNO:494)DFVQWLMNGGPSSGAPPPSOa(内酰胺@16_20;SEQDFVOWLMNGGPSSGAPPPSa(SEQIDNO:496)DFVOWLMNGGPSSGAPPPSa(内酰胺@16_20;SEQIDDFVOWLMNTa(SEQIDNO:498)DFVQWLMNOa(SEQIDNO:499)DFVQWLMNGGPSSGAPPPSOa(SEQIDNO:500)DFVQWLMNGGPSSGAPPPSOa(内酰胺@16_20;SEQDFVOWLMNGGPSSGAPPPSa(SEQIDNO:502)DFVOWLMNGGPSSGAPPPSa(内酰胺@16_20;SEQID57IDNO:507)X1SQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNGGPSSGAPPPSOa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:508)X1SQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNGGPSSGAPPPSa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:509)X1SQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNTa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:510)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNTa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:511)X1SQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNOa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:512)X1SQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNGGPSSGAPPPSa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:513)其中在前述的序列中Xl=DMIA(a，a-二甲基咪唑乙酸)，并且其中(f是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地C*是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。HSQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(任选地具有内酰胺016-20;SEQIDNO:514)其中C*是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地C*是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNTa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:517)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVG*WLMNTa(内酰胺@16_20;SEQIDNO:528)HX2QGTFTSDYSKYLDERRAKEFIOWLMNGGPSSGAPPPSOa(SEQIDNO:531)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNGGPSSGAPPPSOOa(SEQIDNO:532)HX2QGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNGGPSSGAPPPSa(SEQIDNO:533)其中在前述的序列中X2二AIB，并且其中(f是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地C*是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。HSQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(SEQIDNO:518)X1SQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIOWLMNTa(SEQIDNO:519)X1SQGTFTSDYSKYLDEQAAKEFIAWLMNOa(SEQIDNO:520)X1SQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNGGPSSGAPPPSa(SEQIDNO:529)X1SQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVOWLMNTa(SEQIDNO:530)其中，在前述的序列中，X1=匿IA(a，a-二甲基咪唑乙酸)，并且其中(f是Cys或连接至亲水性聚合物的Cys，或替代地(f是连接至约20kD平均分子量的聚乙二醇的Cys，或替代地C*是连接至约40kD平均分子量的聚乙二醇的Cys。HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTGPSSGAPPPSa(SEQIDNO:521)HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNGGPSSGAPPPSa(SEQIDNO:522)HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMKGGPSSGAPPPSa(SEQIDNO:523)HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLVKGGPSSGAPPPSa(SEQIDNO:524)HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMDGGPSSGAPPPSa(SEQIDNO:525)HSQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMDGGPSSGAPPPSa(SEQIDNO:526)58HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGGa(SEQIDNO:527)X1X2QGTFTSDYSKYLDERX5AKDFVX3WLMNX4(SEQIDNO:61)其中X1=His、D-组氨酸、去氨基组氨酸、羟基组氨酸、乙酰基组氨酸、高组氨酸或a，a-二甲基咪唑乙酸(DMIA)、N-甲基组氨酸、a_甲基组氨酸、或咪唑乙酸，X2=Ser、D_丝氨酸、Ala、Val、甘氨酸、N-甲基丝氨酸或氨基异丁酸(AIB)、N_甲基丙氨酸和D-丙氨酸。X3=Ala、Gin或Cys—PEGX4=Thr-C0NH2或Cys-PEG或GGPSSGAPPPS(SEQIDN0:515)或GGPSSGAPPPSC-PEG(SEQIDNO:516)条件是当X3是Cys-PEG时，X4不是Cys-PEG或GGPSSGAPPPSC-PEG(SEQIDNO:516)，并且当X2=Ser时，XI不是His。X5=Ala或ArgX1X2QGTFTSDYSKYLDEQX5AKEFIX3WLMNX4(SEQIDNO:62)其中X1=His、D-组氨酸、去氨基组氨酸、羟基组氨酸、乙酰基组氨酸、高组氨酸或a，a-二甲基咪唑乙酸(DMIA)、N_甲基组氨酸、a-甲基组氨酸或咪唑乙酸X2=Ser、D-丝氨酸、Ala、Val、甘氨酸、N-甲基丝氨酸或氨基异丁酸(AIB)、N_甲基丙氨酸和D-丙氨酸。X3=Ala、Gin或Cys-PEGX4=Thr-C0NH2或Cys-PEG或GGPSSGAPPPS(SEQIDN0:515)或GGPSSGAPPPSC-PEG(SEQIDNO:516)条件是当X3是Cys-PEG时，X4不是Cys-PEG或GGPSSGAPPPSC-PEG(SEQIDNO:516)，并且当X2=Ser时，XI不是His。X5=Ala或Arg任何前述的序列均可包括另外的修饰，如，不破坏活性的1、2、3、4或5个修饰，包括但不限于可用于增强效价的WIO或R20取代。任何前述的序列还可制备为不含赋予DPPIV抗性的修饰，即其中位置l处是天然的His，位置2处是天然的Ser。另外，任何前述的化合物可任选地连接至轭合物，比如异源多肽、免疫球蛋白或其部分(如Fc区)、靶向剂、诊断标记、或诊断剂或治疗剂。实施例17总体按上文实施例1-11的描述构建了下列修饰为包含连接至胰高血糖素肽的羧基末端的c-末端延伸SEQIDNO:26的胰高血糖素肽，并使用实施例14中描述的体外测定测定了其对GLP-1受体和胰高血糖素受体的活性。表11代表各种胰高血糖素类似物对胰高血糖素受体和GLP-1受体的活性。数据显示，对于包含c-末端延伸SEQIDN0:26的胰高血糖素类似物，位置16、20、28和29处的氨基酸取代可影响所述类似物对GLP-1受体的活性。表ll胰高血糖素-Cex结构活性关系59<table>tableseeoriginaldocumentpage60</column></row><table>实施例18表12代表对不同胰高血糖素肽积累的比较它们对胰高血糖素受体和GLP-l受体的相对活性的体外数据。表12:含和不含PEG的激动剂和共激动剂的比较<table>tableseeoriginaldocumentpage60</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage61</column></row><table>权利要求一种非天然的胰高血糖素肽，其包含序列SEQIDNO55或SEQIDNO55的类似物，其中所述类似物不是天然存在的肽，且所述类似物与SEQIDNO55的差异为1至3个氨基酸修饰，所述氨基酸修饰选自位置1、2、3、5、7、10、11、13、14、17、18、19、21、24、27、28和29，其中所述胰高血糖素肽表现出天然GLP-1对GLP-1受体的活性的至少20％。2.如权利要求l所述的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽包含SEQIDNO:55。3.如权利要求l所述的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽包含SEQIDNO:56。4.如权利要求1、2或3的任一项所述的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽进一步包含连接至所述胰高血糖素肽的羧基末端的选自由SEQIDNO:26、SEQIDNO:29和SEQIDNO:65组成的组的肽。5.如权利要求2或3所述的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽进一步包含连接至所述胰高血糖素肽的羧基末端的SEQIDNO:26。6.如权利要求1、2或3的任一项所述的胰高血糖素肽，其包含选自由位置16和20处的氨基酸、位置12和16处的氨基酸、位置20和24处的氨基酸、和位置24和28处的氨基酸组成的组的两个氨基酸之间的内酰胺桥。7.如权利要求6所述的胰高血糖素肽，其中所述内酰胺桥介于位置16和20处的氨基酸之间。8.如权利要求1所述的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽包含SEQIDNO:33。9.如权利要求1所述的胰高血糖素肽，其中位置28处的氨基酸是Asp、Asn或Lys，且位置29处的氨基酸是Gly或Thr。10.如权利要求1所述的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽包含与SEQIDNO:55具有1至2个氨基酸的差异的SEQIDNO:55的类似物。11.如权利要求l所述的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽包含与SEQIDNO:55具有1个氨基酸的差异的SEQIDNO:55的类似物。12.如权利要求ll所述的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽包含序列SEQIDNO:53。13.如权利要求12所述的胰高血糖素肽，其中位置3处的氨基酸是谷氨酰胺。14.如权利要求1所述的胰高血糖素肽，其中位置3处的氨基酸是谷氨酸。15.如权利要求1-13的任一项所述的胰高血糖素肽，其表现出天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的至少10%和天然GLP-1对GLP-1受体的活性的至少50%。16.如权利要求1-13的任一项所述的胰高血糖素肽，其表现出天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的至少40%和天然GLP-1对GLP-1受体的活性的至少40%。17.如权利要求1-13的任一项所述的胰高血糖素肽，其表现出天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的至少60%和天然GLP-1对GLP-1受体的活性的至少60%。18.如权利要求1-12和14的任一项所述的胰高血糖素肽，其表现出天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的0.1_10%和天然GLP-1对GLP-1受体的活性的至少20%。19.如权利要求1-12和14的任一项所述的胰高血糖素肽，其表现出天然胰高血糖素对胰高血糖素受体的活性的1_10%和天然GLP-1对GLP-1受体的活性的至少20%。20.如权利要求1-19的任一项所述的胰高血糖素肽，其中位置16处的氨基酸是谷氨酸，位置20处的氨基酸是赖氨酸，且C-末端羧酸基团置换为酰胺，任选地具有位置16处的谷氨酸和位置20处的赖氨酸之间的内酰胺桥。21.如权利要求20所述的胰高血糖素肽，其中聚乙二醇链共价连接至位置17、21或24处的氨基酸或C-末端氨基酸的侧链。22.如权利要求20所述的胰高血糖素肽，其中位置28或29处的氨基酸包含酸性氨基酸。23.如权利要求1、5、8、20、21或22的任一项所述的胰高血糖素肽，其中位置1或2处的氨基酸被修饰为表现出降低的对二肽基肽酶IV切割的敏感性。24.如权利要求1所述的胰高血糖素肽，其中所述肽包含序列X^QGTFTSDYSKYLDERX5AKDFVX3WLMNX4(SEQIDNO:61)或X^QGTFTSDYSKYLDEQX5AKEFIX3WLMNX4(SEQIDNO:62)，条件是当X3是Cys-PEG时，X4不是Cys-PEG或GGPSSGAPPPSC-PEG，且当X2是丝氨酸时，^不是组氨酸。25.如权利要求24所述的胰高血糖素肽，其中X3是Cys-PEG。26.如权利要求25所述的胰高血糖素肽，其中X4是GGPSSGAPPPS。27.如权利要求24所述的胰高血糖素肽，其中X4是GGPSSGAPPPSC-PEG。28.如权利要求24-27的任一项所述的胰高血糖素肽，其进一步包含位置16和20处的氨基酸之间的内酰胺桥。29.如权利要求1所述的胰高血糖素肽，其中所述肽包含序列NH2-His-Ser-Gln-Gly-Thr_Phe_Thr_Ser_Asp_Tyr_Ser_Lys_Tyr_Leu_Asp_Glu_Arg_Arg_Ala_Gln_Asp_Phe_Val_Gln-Trp-Leu-Xaa-Asn-Thr-COOH(SEQIDNO:9)，其中Xaa选自由Met、Leu和Nle组成的组。30.如权利要求1所述的胰高血糖素肽，其中所述肽包含选自由SEQIDNO:40、SEQIDNO:41、SEQIDNO:42、SEQIDNO:43禾口SEQIDNO:44组成的组的序列。31.如权利要求1所述的胰高血糖素肽，其中所述肽包含选自由SEQIDN0:12、SEQIDNO:13、SEQIDN0:14禾PSEQIDNO:15组成的组的序列。32.如权利要求23所述的胰高血糖素肽，其中位置2处的氨基酸选自由d-丝氨酸、丙氨酸、0-丙氨酸、缬氨酸、甘氨酸、^甲基丝氨酸、N-甲基丙氨酸和氨基异丁酸组成的组。33.如权利要求23所述的胰高血糖素肽，其中位置1处的氨基酸选自由d-组氨酸、去氨基组氨酸、羟基组氨酸、乙酰基组氨酸、高组氨酸、N-甲基组氨酸、a-甲基组氨酸、咪唑乙酸和a，a-二甲基咪唑乙酸(DMIA)组成的组。34.如权利要求1-23的任一项所述的胰高血糖素肽，其进一步包含共价结合于所述胰高血糖素肽的位置17、21或24或于C-末端氨基酸的亲水部分。35.如权利要求34所述的胰高血糖素肽，其中所述亲水部分是聚乙二醇链。36.如权利要求1或31所述的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽进一步包含选自由SEQIDNO:26、SEQIDNO:27、SEQIDNO:28和SEQIDNO:65组成的组的序列。37.如权利要求36所述的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽包含序列SEQIDNO:33，其中位置28处的氨基酸是天冬氨酸，位置29处的氨基酸是甘氨酸，且氨基酸序列SEQIDNO:29共价连接至SEQIDNO:33的羧基末端。38.如权利要求37所述的胰高血糖素肽，其中所述肽包含序列SEQIDNO:64。39.如权利要求l所述的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽包含SEQIDNO:20，其中位置20处的氨基酸选自由精氨酸、鸟氨酸和瓜氨酸组成的组。40.如权利要求l所述的胰高血糖素肽，其中所述肽包含选自由以下组成的组的序列SEQIDNO:10，SEQIDNO:11，NH2_His_Ser_Gln_Gly_Thr_Phe_Thr_Ser_Asp_Tyr_Ser_Lysrg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Xaa-Xaa-R(SEQIDNH2_His_Ser_Gln_Gly_Thr_Phe_Thr_Ser_Asp_Tyr_Ser_Lysrg-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Xaa-Xaa-R(SEQIDNH2_His_Ser_Gln_Gly_Thr_Phe_Thr_Ser_Asp_Tyr_Ser_Lysrg-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Xaa-Xaa-R(SEQIDNH2_His_Ser_Gln_Gly_Thr_Phe_Thr_Ser_Asp_Tyr_Ser_Lysrg_Ala_Gln_Asp_Phe_Val_Glu_Trp_Leu_Met_Lys_Thr_R(SEQIDNH2_His_Ser_Gln_Gly_Thr_Phe_Thr_Ser_Asp_Tyr_Ser_Lysrg_Ala_Lys_Asp_Phe_Val_Glu_Trp_Leu_Met_Asn_Thr_R(SEQIDNH2_His_Ser_Gln_Gly_Thr_Phe_Thr_Ser_Asp_Tyr_Ser_Lysrg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Lys-Thr-R(SEQIDNH2_His_Ser_Gln_Gly_Thr_Phe_Thr_Ser_Asp_Tyr_Ser_Lysrg-Ala-Lys-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Met-Lys-Thr-R(SEQID55，其中所述肽的位置28处的Xaa是天冬酰胺或天冬氨酸；所述肽的位置29处的Xaa是苏氨酸或甘氨酸；且R是SEQIDNO:26、SEQIDNO:29、COOH或CONH2。41.如权利要求40所述的胰高血糖素肽，其中R是CONH2。42.如权利要求40所述的胰高血糖素肽，其中所述肽包含序列SEQIDNO:IO。43.如权利要求40所述的胰高血糖素肽，其中所述肽包含序列SEQIDNO:ll。44.如权利要求41所述的胰高血糖素肽，其中所述肽进一步包含共价结合至位置16、17、21或24处的氨基酸残基或C-末端氨基酸处的聚乙二醇链，和所述胰高血糖素肽的药学可接受盐，条件是当所述肽包含SEQIDN0:10、SEQIDN0:11、SEQIDN0:12或SEQIDNO:13时，所述聚乙二醇链共价结合至位置17、21或24处的氨基酸残基，当所述肽包含SEQIDNO:14或SEQIDN0:15时，所述聚乙二醇链共价结合位置16、17或21处的氨基酸残基，当所述肽包含SEQIDNO:55时，所述聚乙二醇链共价结合至位置21或24处的氨基酸位置，和当所述肽包含SEQIDN0:16、SEQIDNO:17或SEQIDNO:18时，所述聚乙二醇链共价结合至位置17或21处的氨基酸残基。45.如权利要求44所述的胰高血糖素肽，其中所述聚乙二醇链具有选自约l，OOO至约5，000道尔顿范围的分子量。46.如权利要求44所述的胰高血糖素肽，其中所述聚乙二醇链具有约40，OOO道尔顿的分子量。47.如权利要求39所述的胰高血糖素肽，其中所述肽进一步包含添加至所述肽的羧基末端的另外氨基酸，所述另外氨基酸包含代替天然氨基酸的末端羧酸基团的酰胺基团。48.如权利要求40所述的胰高血糖素肽，其进一步包含结合至所述胰高血糖素肽的氨基酸29的延伸肽，所述氨基酸序列选自由SEQIDNO:26、SEQIDNO:27和SEQIDNO:28_Tyr_Leu_Asp_Glu_Arg_ANO:66)，_Tyr_Leu_Asp_Glu_Arg_ANO:67)，_Tyr_Leu_Asp_Ser_Arg_ANO:68)，_Tyr_Leu_Asp_Ser_Arg_ANO:69)，_Tyr_Leu_Asp_Glu_Arg_ANO:16)，_Tyr_Leu_Asp_Glu_Arg_ANO:17)，禾口_Tyr_Leu_Asp_Glu_Ara_ANO:18)，禾PSEQIDNO:组成的组。49.如权利要求48所述的胰高血糖素肽，其中位置28处的氨基酸是天冬氨酸，位置29处的氨基酸是甘氨酸，且氨基酸序列SEQIDN0:29共价连接至所述胰高血糖素肽的氨基酸29。50.—种胰高血糖素肽，其包含序列NH2_His_Ser_Gln_Gly_Thr_Phe_Thr_Ser_Asp_Tyr_Ser_Lys_Tyr_Leu_Asp_Xaa_Xaa_Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Xaa-Asn-Thr-R(SEQIDNO:2);NH2_His_Ser_Gln_Gly_Thr_Phe_Thr_Ser_Asp_Tyr_Ser_Lys_Tyr_Leu_Asp_Xaa_Arg_Arg-Ala-Gln-Xaa-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Xaa-Asn-Thr-R(SEQIDNO:3);NH2_His_Ser_Gln_Gly_Thr_Phe_Thr_Ser_Asp_Tyr_Ser_Lys_Tyr_Leu_Asp_Xaa_Arg_Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Xaa-Trp-Leu-Xaa-Asn-Thr-R(SEQIDNO:4);和SEQIDNO:2、SEQIDNO:3和SEQIDNO:4的胰高血糖素激动剂类似物，其中R是COOH或CONH2，且所述胰高血糖素肽的位置17、21或24处的氨基酸残基或C-末端氨基酸处的侧链进一步包含共价结合至所述氨基酸残基的亲水部分，和所述胰高血糖素肽的药学可接受盐。51.如权利要求50所述的胰高血糖素肽，其中R是COM^且所述亲水部分是聚乙二醇链。52.如权利要求51所述的胰高血糖素肽，其中所述肽包含选自由SEQIDNO:23、SEQIDNO:24和SEQIDNO:25组成的组的序列。53.如权利要求52所述的胰高血糖素肽，其中所述聚乙二醇链具有选自约l，OOO至约5，000道尔顿范围的分子量。54.如权利要求52所述的胰高血糖素肽，其中所述聚乙二醇链具有至少约20，OOO道尔顿的分子量。55.—种同二聚体，其包含通过连接体彼此结合的两个权利要求37所述的胰高血糖素肽。56.—种药物组合物，其包含权利要求1所述的胰高血糖素激动剂或其药学可接受盐，和药学可接受载体。57.—种用于向需要其的患者施用胰高血糖素激动剂的药盒，所述药盒包含权利要求56所述的药物组合物；禾口向患者施用所述组合物的设备。58.—种使用预配制的水性组合物治疗低血糖的方法，所述方法包括施用有效量的权利要求56所述的药物组合物的步骤。59.—种治疗糖尿病的方法，所述方法包括施用有效量的权利要求56所述的药物组合物。60.—种引起肠道暂时麻痹的方法，所述方法包括施用有效量的权利要求56所述的药物组合物。61.—种降低体重增加或引起体重减轻的方法，所述方法包括施用有效量的包含胰高血糖素激动剂的组合物，所述胰高血糖素激动剂包含选自由SEQIDNO:10、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18和SEQIDNO:55组成的组的胰高血糖素肽，其中所述胰高血糖素肽的氨基酸29通过肽键结合至第二肽，且所述第二肽包含选自由SEQIDNO:26、SEQIDNO:27、SEQIDNO:28、SEQIDNO:29和SEQIDNO:65组成的组的序列。62.—种降低体重增加或引起体重减轻的方法，所述方法包括施用有效量的包含权利要求36所述的胰高血糖素肽的组合物。63.如权利要求61所述的方法，其中所述胰高血糖素激动剂进一步包含在位置17、21或24处结合至所述胰高血糖素肽的聚乙二醇链，且所述聚乙烯链具有选自约5，000至约40，000道尔顿范围的分子量，条件是当所述肽包含SEQIDNO:10、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12或SEQIDN0:13时，所述聚乙二醇链共价结合至位置16、17、21或24处的氨基酸残基，当所述肽包含SEQIDNO:14或SEQIDNO:15时，所述聚乙二醇链共价结合至位置16、17或21处的氨基酸残基，当所述肽包含SEQIDN0:55时，所述聚乙二醇链共价结合至位置21或24处的氨基酸位置，和当所述肽包含SEQIDN0:16、SEQIDNO:17或SEQIDNO:18时，所述聚乙二醇链共价结合至位置17或21处的氨基酸残基。64.如权利要求58所述的方法，其中所述胰高血糖素激动剂进一步包含在位置16、17、21或24处结合至所述胰高血糖素肽的聚乙二醇链，且所述聚乙烯链具有选自约5，000至约40，000道尔顿范围的分子量，条件是当所述肽包含SEQIDNO:10、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12或SEQIDNO:13时，所述聚乙二醇链共价结合至位置17、21或24处的氨基酸残基，当所述肽包含SEQIDNO:14或SEQIDNO:15时，所述聚乙二醇链共价结合至位置16、17或21处的氨基酸残基，和当所述肽包含SEQIDN0:16、SEQIDNO:17或SEQIDN0:18时，所述聚乙二醇链共价结合至位置17或21处的氨基酸残基。65.—种胰高血糖素肽，其包含选自和属于SEQIDNO:70至SEQIDN0:514指定的序列的序列。全文摘要公开了相对于天然胰高血糖素具有增强的对胰高血糖素受体的效价的修饰的胰高血糖素肽。通过形成内酰胺桥或用酰胺基取代末端羧酸对所述胰高血糖素肽进一步修饰产生了表现出胰高血糖素/GLP-1受体共激动剂活性的肽。这些高效价胰高血糖素类似物的溶解度和稳定性可通过聚乙二醇化、取代羧基末端氨基酸、或添加选自由SEQIDNO26(GPSSGAPPPS)、SEQIDNO27(K-RNRNNIA)和SEQIDNO28(KRNR)组成的组的羧基末端肽对多肽修饰而得到进一步提高。文档编号C07K14/605GK101790538SQ200880012086公开日2010年7月28日申请日期2008年2月13日优先权日2007年2月15日发明者乔纳森·达,大卫·斯迈利,玛丽亚·迪玛琪,理查德·D·迪玛琪,约瑟夫·查本纳,詹姆士·帕特森申请人:印第安纳大学研究与科技公司