结晶肽环氧酮蛋白酶抑制剂和氨基酸酮-环氧化物的合成的制作方法

专利名称：结晶肽环氧酮蛋白酶抑制剂和氨基酸酮-环氧化物的合成的制作方法
结晶肽环氧酮蛋白酶抑制剂和氨基酸酮-环氧化物的合成相关申请本申请要求2007年10月4日申请的US临时专利申请No. 60/997, 613和2007年 12月20日申请的US临时专利申请No. 61/008987的优先权，其教导全文列为本文参考文 献。
背景技术：
在真核细胞中，蛋白质降解主要通过遍在蛋白质途径传递，其中用于破坏目标的 蛋白质连接于76氨基酸多肽遍在蛋白。一旦成为目标，遍在化的蛋白质随后用作26S蛋白 酶体，一种多催化蛋白酶的基质，蛋白酶体通过其三种主要蛋白水解活性将蛋白质断裂成 短肽。在细胞内蛋白质周转中具有常规功能的同时，蛋白酶体传递的降解还在许多过程，例 如主要组织相容性复合物(MHC) I类抗原表达、编程性细胞死亡、细胞生长降解、NF- κ B活 化、抗原处理和促炎信号转换中起关键作用。20S蛋白酶体是由组织成4个环的28个亚单元组成的700kDa圆柱形多催化蛋白 酶配合物，在酵母和其它真核细胞内，7个不同α亚单元形成外环，7个不同β亚单元形成 内环。α亚单元用作19S(PA700)和11S(PA28)调节配位体的结合位，和由2个β亚单元 环形成的内蛋白水解室的物理屏障，因此，在体内，蛋白酶体被认为作为26S微粒(“26S蛋 白酶体”)存在。体内实验显示蛋白酶体20S形式的抑制能够容易地与26S蛋白酶体的抑 制相关联，在微粒形成过程中，β亚单元的氨基末端原顺序的断裂，暴露氨基末端苏氨酸残 基，它用作催化亲核试剂。蛋白酶体中起催化活性的亚单元因而具有氨基末端亲核残基，这 些亚单元属于N-末端亲核试剂(Ntn)水解酶家族(亲核N-末端残基是例如Cys、Ser、Thr 和其它亲核部分的地方)。该家族包括，例如青霉素G酰基转移酶(PGA)、青霉素V酰基转 移酶(PVA)、谷氨酸PRPP酰胺转移酶(GAT)和糖基天冬酰胺酶。除无所不在表达的β亚单 元外，高级脊椎动物还具有三种干扰素Y可诱导的β亚单元(LMP7、LMP2和MECL1)，其分 别转换其正常配对物X、Y和Ζ，因而改变蛋白酶体的催化活性。通过使用不同的肽基质，真 核细胞20S蛋白酶体的三种主要蛋白水解活性被定义为断裂大疏水残基的胰凝乳蛋白酶 类活性(CT-L)、断裂碱性残基的胰岛素类活性(T-L)和断裂酸性残基的肽谷氨酰胺酰肽水 解活性。两种附加的不太特性化的活性也归属于蛋白酶体断裂支链氨基酸的BrAAP活性 和断裂小中性氨基酸的SNAAP活性。大多数蛋白酶体蛋白水解活性归功于不同催化位，β 亚单元的点突变和Y干扰素诱导的β亚单元的交换，抑制剂改变其活性至不同程度。人们需要用于制备和配制蛋白酶体抑制剂的改善组合物和方法。发明概述本发明一般涉及蛋白酶体抑制剂的合成和其所用中间体的制备和纯化。发明的一个方面涉及具有式(I )结构的结晶化合物和其可药用的盐， 其中X是0、NH或N-烷基，优选0 ；Y 是 NH、N-烷基、0 或 C(R9)2，优选 N-烷基、0 或 C(R9)2 ；Z 是 0 或 C(R9)2，优选 C(R9)2 ；H R3 和 R4 是氢;每个R5、R6、R7、R8和R9分别选自氢、C^6烷基、Cp6羟基烷基、Cp6烷氧基烷基、芳基 和(V6芳烷基，每个任选被选自烷基、酰胺、胺、羧酸或其可药用的盐、羧酸酯、硫醇和硫醚的 基团取代；R5、R6、R7和R8优选分别选自CV6烷基、Ch6羟基烷基和Ch6芳烷基，每个R9是氧， 更优选R6和R8分别是CV6烷基，R5和R7分别是Cp6芳烷基和每个R9是H ；m是整数0-2;和η是整数0-2，优选0或1。本发明的另一方面涉及式(III)的结晶化合物
(III)其中X是任何合适的抗衡离子。本发明的另一方面还涉及根据方案(I )合成氨基酸酮-环氧化物的方法
(I)其中R1选自保护基团或氨基酸的其它链，其本身可以是任选取代的，优选保护基团，最 优选吸电子保护基团；R2选自氢和Cp6烷基；R3选自氢、CV6烷基、Cp6烷氧基烷基、杂环基、芳基、杂芳基、Cp6杂芳烷基和Cp6芳 烷基；和其中方法包括在环氧化条件下，优选在选自吡啶、乙腈、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲 基亚砜(DMSO)、N-甲基吡咯烷(NMP)、二甲基乙酰胺(DMA)、四氢呋喃(DHF)和硝基甲烷的助溶剂存在下的含水次氯酸钠(漂白剂)或次氯酸钙溶液，进行立体选择性环氧化。附图简述附

图1显示结晶化合物1的DSC(差示扫描量热法)热分析图。附图2显示结晶化合物1的XRPD(X射线粉末衍射)图。附图3显示结晶化合物1的TG热分析图。附图4显示与结晶化合物1的DSC热分析图相比较的无定形化合物1的DSC热分 析图。附图5显示与结晶化合物1的XRPD图相比较的无定形化合物1的XRPD图。附图6显示与结晶化合物1的TG热分析图相比较的无定形化合物1的TG热分析图。附图7显示化合物1无定形样品的DSC曲线。附图8显示无定形化合物1的XRPD图。附图9显示结晶化合物F的DSC曲线。附图10显示结晶化合物F的XRPD图。附图11显示化合物1的结晶柠檬酸盐的DSC曲线。附图12显示化合物1的结晶柠檬酸盐的XRPD图。发明详述在某些实施方案中，本发明涉及具有结构式(I )的结晶化合物或其可药用的盐。 其中X是0、NH或N-烷基，优选0 ；Y 是 NH、N-烷基、0 或 C (R9)2,优选 N-烷基、0 或 C (R9) 2 ；Z 是 0 或 C (R9) 2，优选 C (R9) 2 ；R1、R2、R3 和 R4 是氢;每个R5、R6、R7、R8和R9分别选自氢、C^6烷基、C^6羟基烷基、C^6烷氧基烷基、芳基 和(V6芳烷基，每个任选被选自烷基、酰胺、胺、羧酸或其可药用的盐、羧酸酯、硫醇和硫醚的 基团取代；R5、R6、R7和R8优选分别选自CV6烷基、Ch6羟基烷基和Ch6芳烷基，每个R9是氧， 更优选R6和R8分别是CV6烷基，R5和R7分别是Cp6芳烷基和每个R9是H ；m是整数0-2;和η是整数0-2，优选0或1。在某些实施方案中，X是0和R1、R2、R3和R4均是相同的，优选R1、R2、R3和R4都是 氢。在某些如此的实施方案中，R5、R6、R7和R8分别选自Cp6烷基、Ch6羟基烷基和Ch6芳烷 基，更优选R6和R8分别是CV6烷基，R5和R7分别是。芳烷基。在某些优选实施方案中，X是0，R1、R2、R3和R4均是氧，R6和R8分别都是异丁基，R5是苯基乙基，R7是苯基甲基。在某些实施方案中，R5、R6、R7和R8分别选自氢、C1^6烷基、C^6羟基烷基、C1^6烷氧 基烷基、芳基和Cp6芳烷基，每个任选被选自烷基、酰胺、胺、羧酸或其可药用的盐、羧酸酯、 硫醇和硫醚的基团取代。在某些实施方案中，R5和R7的至少一个是烷基取代的CV6芳烷基， 更优选被全卤代烷基取代。在某些如此的实施方案中，R7是三氟甲基取代的Cp6芳烷基。在某些实施方案中，Y选自N-烷基、0和CH2。在某些如此的实施方案中，Z是CH2， m和η都是0。在某些供选择的如此实施方案中，Z是CH2, m是0，η是2或3。在另一可供 选择的实施方案中，Z是0，m是1，η是2。在某些实施方案中，本发明涉及式(II )的结晶化合物
(II)在某些实施方案中，本发明涉及制备式(I )或(II )的结晶化合物的方法，其包 括一步或多步(i)制备无定形化合物，例如根据US专利No. 7，232，818; (ii)将无定形化 合物溶解在有机溶剂中；(iii)使溶液达到过度饱和导致结晶形成；和(iv)分离结晶，例如 通过过滤结晶、通过由结晶滗析液体或通过任何其它合适的分离技术。在某些实施方案中， 制备方法还包括洗涤过滤的结晶，例如用溶剂或非溶剂液体。在某些实施方案中，制备方法 还包括干燥，优选在减压下，例如在真空压力下。在某些实施方案中，本发明涉及制备式(I )或(II )结晶化合物的方法，其包 括一步或多步(i)制备无定形化合物的溶液，化合物可以在有机溶剂中根据，例如US专利 No. 7，232，818制备；(ii)使溶液达到过度饱和导致结晶形成；(iii)分离结晶，例如通过过 滤结晶、通过由结晶滗析液体或通过任何其它合适的分离技术。在某些实施方案中，制备方 法还包括诱导结晶。在某些实施方案中，制备方法还包括洗涤过滤的结晶，例如用溶剂或非 溶剂液体。在某些实施方案中，制备方法还包括干燥，优选在减压下，例如在真空压力下。在某些实施方案中，无定形化合物可溶解在有机溶剂中，其选自乙腈、甲醇、乙醇、 乙酸乙酯、异丙醇、异丙基乙酸酯、异丁基乙酸酯、丁基乙酸酯、丙基乙酸酯、甲乙酮、甲基异 丁基酮和丙酮，或其任何组合。在某些实施方案中，无定形化合物可溶解在有机溶剂中，其 选自乙腈、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、异丙基乙酸酯、甲乙酮和丙酮，或其任何组合。在某些实施 方案中，无定形化合物可溶解在有机溶剂中，其选自乙腈、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、异丙基乙 酸酯，或其任何组合。在某些实施方案中，有机溶剂可与水组合。在某些实施方案中，使溶液达到过度饱和包括加入抗溶剂，例如水或与有机溶剂 可溶混的另一种极性液体；使溶液冷却；减少溶液体积或其任何组合。在某些实施方案中， 使溶液达到过度饱和包括加入抗溶剂；使溶液冷却至室温或更低；和减少溶液体积，例如通过由溶液蒸发溶剂。在某些实施方案中，使溶液冷却可以是被动的(例如使溶液在室温 下静置)或主动的(例如在冰浴或制冷器中冷却溶液)。在某些实施方案中，方法还包括诱导沉淀或结晶。在某些实施方案中，诱导沉淀或 结晶包括二次晶核形成，其中晶核形成在种晶存在下或与环境(结晶器壁、搅拌桨、超声波 等)作用发生。在某些实施方案中，洗涤结晶包括用液体洗涤，其选自抗溶剂、乙腈、甲醇、乙醇、 乙酸乙酯、甲基乙基酮、丙酮或其组合。优选结晶用抗溶剂和有机溶剂的组合洗涤。在某些 实施方案中，抗溶剂是水。在某些实施方案中，洗涤结晶包括用甲醇和水洗涤式(II )结晶化合物。在某些实施方案中，式(II )结晶化合物基本上是纯的。在某些实施方案中，式 (II )结晶化合物的熔点在约200-约220°C，约205-约215°C，约211-约213°C，或者在约 212°C。在某些实施方案中，式(II )结晶化合物的DSC在约212°C具有急剧的吸热最高值， 例如由结晶形式的熔融和分解产生，如附图1所示。在某些实施方案中，式(II )结晶化合物的X射线粉末图是(Θ-2Θ ° ) 6. 10 ； 8. 10 ；9. 32 ；10. 10 ；11. 00 ；12. 14 ；122. 50 ；13. 64 ；13. 94 ；17. 14 ；17. 52 ；18. 44 ；20. 38 ； 21. 00 ；22. 26 ；23. 30 ；24. 66 ；25. 98 ；26. 02 ；27. 84 ；28. 00 ；28. 16 ；29. 98 ；30. 46 ；32. 98 ； 33. 22 ；34. 52 ；39. 46，如附图 2 所示。在某些实施方案中，式(II )结晶化合物的TG热分析图显示在25-200°C的温度范 围有0. 0-0. 的重量损失，如附图3所示。在某些实施方案中，式(II )结晶化合物不是溶剂化的(即晶格不包含溶剂分 子)。在某些任选的实施方案中，式(II )结晶化合物是溶剂化的。在某些实施方案中，本发明涉及制备式(II )无定形式化合物的方法，包括一步 或多步(i)将结晶化合物溶解在有机溶剂中；(ii)使溶液达到过度饱和导致形成结晶；和 (iii)分离结晶，例如通过过滤结晶、通过由结晶滗析液体或通过任何其它合适的分离技 术。在某些实施方案中，制备方法还包括诱导沉淀。在某些实施方案中，制备方法还包括洗 涤无定形化合物。在某些实施方案中，制备方法还包括干燥，优选在减压下，例如在真空压 力下。在某些实施方案中，本发明涉及式(I )或(II )化合物的结晶盐，其中盐抗衡离子 选自氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、 戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、琥珀酸盐、甲苯磺酸盐、 丙二酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐等。在某些 实施方案中，盐抗衡离子选自柠檬酸盐、酒石酸盐、三氟乙酸盐、甲磺酸盐、甲苯磺酸盐、盐 酸盐和氢溴酸盐，优选柠檬酸盐。在某些实施方案中，本发明涉及制备式(II )化合物结晶盐的方法，其包括一步或 多步(i)制备无定形化合物，例如根据US专利No. 7，232，818 ； (ii)将无定形化合物溶解 在有机溶剂中；(iii)使溶液达到过度饱和导致结晶形成；和(iv)分离结晶，例如通过过滤 结晶、通过由结晶滗析液体或通过任何其它合适的分离技术。在某些实施方案中，制备方法 还包括诱导结晶。在某些实施方案中，制备方法还包括洗涤结晶，例如用溶剂或非溶剂液 体。在某些实施方案中，制备方法还包括干燥，优选在减压下，例如在真空压力下。在某些实施方案中，本发明涉及制备式(II )化合物结晶盐的方法，其包括一步或多步⑴在有机溶剂中制备式(II )化合物的溶液；(ii)加入合适的酸；(iii)使溶液达到 过度饱和导致结晶形成；和(iv)分离结晶，例如通过过滤结晶、通过由结晶滗析液体或通 过任何其它合适的分离技术。在某些实施方案中，制备方法还包括诱导结晶。在某些实施 方案中，制备方法还包括洗涤结晶，例如用溶剂或非溶剂液体。在某些实施方案中，制备方 法还包括干燥，优选在减压下，例如在真空压力下。在其中盐比游离碱不太溶解于溶剂的某 些实施方案中，向溶液中加入酸本身足以使溶液达到过度饱和。在某些实施方案中，盐抗衡离子选自氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、 乙酸盐、三氟乙酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、 苯甲酸盐、乳酸盐、琥珀酸盐、甲苯磺酸盐、丙二酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石 酸盐、甲磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐等。在某些实施方案中，盐抗衡离子选自柠檬酸盐、酒石酸 盐、三氟乙酸盐、甲磺酸盐、甲苯磺酸盐、盐酸盐和氢溴酸盐，优选柠檬酸盐。在某些实施方案中，有机溶剂选自THF、乙腈、乙醚和MTBE，或其任何组合，优选 THF或乙腈或其组合。在某些实施方案中，式(II )化合物结晶柠檬酸盐基本上是纯的。在某些实施方 案中，式(II )化合物结晶柠檬酸盐的熔点在约180-约190°C，及至约184-约188°C。
在某些实施方案中，式(II )化合物结晶柠檬酸盐的DSC在约187°C具有急剧的吸 热最高值，例如由结晶形式的熔融和分解产生，如附图11所示。在某些实施方案中，式(II )化合物结晶柠檬酸盐的X射线粉末图是(θ -2 θ ° ) 4. 40 ；7. 22 ；9. 12 ；12. 36 ；13. 35 ；14. 34 ；15. 54 ；16. 14 ；16. 54 ；17. 00 ；18. 24 ；18. 58 ； 19. 70 ；19. 90 ；20. 30 ；20. 42 ；21. 84 ；22. 02 ；23. 34 ；23. 84 ；24. 04 ；24. 08 ；24. 48 ；24. 76 ； 25. 48 ；26. 18 ；28. 14 ；28. 20 ；28. 64 ；29. 64 ；31. 04 ；31. 84 ；33. 00 ；33. 20 ；34. 06 ；34. 30 ； 34. 50 ；35. 18 ；37. 48 ；37. 90 ；39. 48，如附图 12 中所示。在某些实施方案中，本发明涉及式(III )结晶化合物 其中X是任何合适的抗衡离子。在某些实施方案中，X是抗衡离子，其选自氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝 酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂 酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、琥珀酸盐、甲苯酰磺盐、丙二酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、 酒石酸盐、甲磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐等。(参见例如Berge等.(1977) "Pharmaceutical Salts”，J. Pharrn. Sci. 66 :1_19)。在某些实施方案中，X选自三氟乙酸盐、甲磺酸盐、甲苯 磺酸盐、乙酸盐、盐酸盐和氢溴酸盐，优选三氟乙酸盐。在某些实施方案中，本发明涉及制备式(III)结晶化合物的方法，其包括一步或多 步:(i)制备式(IV)化合物，例如根据 Bioorg. Med. Chem. Letter 1999，9，2283-88 或 US 专 利申请2005-0256324，其中PG是合适的保护基团(例如，Boc或Cbz)

(IV)(ii)将式(IV )化合物溶解在有机溶剂中；(iii)加入合适的酸；(iv)使溶液达 到过度饱和导致结晶形成；和(V )分离结晶，例如通过过滤结晶、通过由结晶滗析液体或 通过任何其它合适的分离技术。在某些实施方案中，制备方法还包括诱导结晶。在某些实 施方案中，制备方法还包括洗涤结晶，例如用溶剂或非溶剂液体。在某些实施方案中，制备 方法还包括干燥，优选在减压下，例如在真空压力下。在某些实施方案中，本发明涉及制备式(III)结晶化合物的方法，其包括一步或多 步⑴在有机溶剂中制备式(IV )无定形化合物溶液，例如根据Bioorg. Med. Chem. Letter 1999，9，2283-88或US专利申请2005-0256324，其中PG是合适的保护基团(例如，Boc或 Cbz) ( )使溶液达到过度饱和导致结晶形成；和(iii)分离结晶，例如通过过滤结晶、 通过由结晶滗析液体或通过任何其它合适的分离技术。在某些实施方案中，制备方法还包 括诱导结晶。在某些实施方案中，制备方法还包括洗涤结晶，例如用溶剂或非溶剂液体。在 某些实施方案中，制备方法还包括干燥，优选在减压下，例如在真空压力下。在某些实施方案中，酸选自氢溴酸、盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬 酸、甲磺酸、戊酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸、月桂酸、苯甲酸、乳酸、琥珀酸、对甲苯酰磺、柠檬 酸、丙二酸、马来酸、富马酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、2-羟基乙磺酸等，酸优选三氟乙酸。在某些实施方案中，X是抗衡离子，其选自氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝 酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂 酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、琥珀酸盐、甲苯磺酸盐、丙二酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、 酒石酸盐、甲磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐等。(参见例如Berge等.(1977) "Pharmaceutical Salts”，J. Pharrn. Sci. 66 :1_19)。在某些实施方案中，X选自三氟乙酸盐、甲磺酸盐、甲苯 磺酸盐、乙酸盐、盐酸盐和氢溴酸盐，优选三氟乙酸盐。在某些实施方案中，式(IV)化合物可溶解在有机溶剂中，其选自二氯甲烷、乙酸 乙酯、异丙基乙酸酯、异丁基乙酸酯、丁基乙酸酯、丙基乙酸酯、乙醚、甲基叔丁基醚(MTBE) 或其任何组合。在某些实施方案中，有机溶剂选自二氯甲烷、乙酸乙酯、MTBE或其任何组合， 优选二氯甲烷和MTBE或乙酸乙酯和MTBE
在某些实施方案中，使溶液达到过度饱和包括加入抗溶剂，例如己烷或庚烷或与有机溶剂可溶混的另一种极性液体；使溶液冷却；减少溶液体积或其任何组合。在某些实 施方案中，使溶液达到过度饱和包括加入抗溶剂；使溶液冷却至室温或更低；和减少溶液 体积，例如通过由溶液蒸发溶剂。在某些实施方案中，抗溶剂是己烷或庚烷，优选庚烷。在某些实施方案中，洗涤结晶包括用选自抗溶剂、乙酸乙酯、二氯甲烷或其组合的 液体洗涤，结晶优选用抗溶剂，优选庚烷洗涤。在某些实施方案中，式(III)结晶化合物的DSC在约137°C具有急剧的吸热最高 值，例如由结晶形式的熔融和分解产生，如附图9所示。在某些实施方案中，式(II )结晶化合物的X射线粉末图是(Θ-2Θ ° ) 8.84； 15. 18 ；15. 32 ；16. 20 ；16. 82 ；17. 66 ；18. 26 ；19. 10 ；21. 20 ；22. 58 ；23. 06 ；23. 52 ；25. 32 ； 26. 58 ；28. 60 ；30. 08 ；30. 48 ；30. 84 ；32. 20 ；36. 14 ；37. 12，如附图 10 所示。在某些实施方案中，式(III)结晶化合物未被溶剂化(例如晶格不包含溶剂分 子)。在某些实施方案中，式(III)结晶化合物被溶剂化。在某些实施方案中，本发明涉及制备式(II )结晶化合物的方法，其包括一步或多 步(i)在第一种有机溶剂中制备式(IV)化合物的溶液，其中PG是合适的保护基团(例如 Boc 或 Cbz)；
(IV)(ii)加入合适的酸；(iii)使溶液达到过度饱和导致结晶形成；和(iv)分离结晶 得到式(III)结晶化合物；(V)使式(III)结晶化合物
(III)其中X是任何合适的抗衡离子，与式(V )化合物反应 得到式(II )化合物；(Vi)在第二种有机溶剂中制备式(II )化合物的溶液； (Vii)使溶液达到过度饱和导致结晶形成；和(Viii)分离结晶得到式(II)结晶化合物，例 如通过过滤结晶、通过滗析或通过任何其它合适的分离技术。在某些实施方案中，制备方 法还包括诱导结晶。在某些实施方案中，制备方法还包括洗涤结晶，例如用溶剂或非溶剂液 体。在某些实施方案中，制备方法还包括干燥，优选在减压下，例如在真空压力下。在某些实施方案中，酸选自氢溴酸、盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬 酸、甲磺酸、戊酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸、月桂酸、苯甲酸、乳酸、琥珀酸、对甲苯酰磺、柠檬 酸、丙二酸、马来酸、富马酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、2-羟基乙磺酸等，酸优选三氟乙酸。在某些实施方案中，X是抗衡离子，其选自氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝 酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂 酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、琥珀酸盐、甲苯磺酸盐、丙二酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、 酒石酸盐、甲磺酸盐、2-羟基乙磺酸盐等。(参见例如Berge等.(1977) "Pharmaceutical Salts”，J. Pharrn. Sci. 66 :1_19)。在某些实施方案中，X选自三氟乙酸盐、甲磺酸盐、甲苯 磺酸盐、乙酸盐、盐酸盐和氢溴酸盐，优选三氟乙酸盐。在某些实施方案中，第一种有机溶剂选自二氯甲烷、乙酸乙酯、异丙基乙酸酯、异 丁基乙酸酯、丁基乙酸酯、丙基乙酸酯、乙醚、甲基叔丁基醚(MTBE)或其任何组合。在某些 实施方案中，有机溶剂选自二氯甲烷、乙酸乙酯、MTBE或其任何组合，优选二氯甲烷和MTBE 或乙酸乙酯和MTBE。在某些实施方案中，第二种溶剂选自乙腈、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、异丙醇、异丙基 乙酸酯、异丁基乙酸酯、丁基乙酸酯、丙基乙酸酯、甲乙酮、甲基异丁基酮和丙酮，或其任何 组合。在某些实施方案中，无定i形化合物可溶解在有机溶剂中，其选自乙腈、甲醇、乙醇、 乙酸乙酯、丙酮，或其任何组合。在某些实施方案中，有机溶剂可与水组合。在某些实施方案中，制备方法还包括洗涤式(II )或(III)或两者的结晶。在某 些实施方案中，洗涤式(II )化合物结晶包括用选自抗溶剂、乙腈、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙 酮或其组合的液体洗涤。式(II )化合物结晶优选用抗溶剂和有机溶剂的组合洗涤。在某 些实施方案中，结晶洗涤包括用甲醇和水洗涤式(II )结晶化合物。在某些实施方案中，洗 涤式(III)化合物结晶包括用选自抗溶剂、乙酸乙酯、二氯甲烷或其组合的液体洗涤。式 (III)化合物结晶优选用抗溶剂，优选庚烷洗涤。在某些实施方案中，制备方法还包括干燥式(II )或(III)或两者的结晶，优选在 减压下，例如在真空压力下。在某些实施方案中，本发明涉及药物组合物，其含有式(I )或(II )结晶化合物 和可药用的载体。在某些实施方案中，药物组合物选自片剂、胶囊和注射剂。
本发明还涉及环氧酮，例如如上式(III)和(IV)的合成方法。因此，在另一方面，
本发明提供根据方案(I)制备氨基酸酮-环氧化物的方法 其中R1选自保护基团或氨基酸的其它链，其本身可以是任选取代的，优选保护基团，最 优选吸电子保护基团；R2选自氢和Cp6烷基；和R3选自氢、CV6烷基、C1^6烷氧基烷基、杂环基、芳基、杂芳基、Cp6杂芳烷基和Cp6芳 烷基；和其中方法包括在环氧化条件下，优选在选自吡啶、乙腈、DMF、DMSO、NMP、DMA、DHF禾口 硝基甲烷的助溶剂存在下的含水次氯酸钠(漂白剂)或次氯酸钙溶液，进行立体选择性环氧化。在某些实施方案中，助溶剂选自NMP和吡啶，优选吡啶。在某些实施方案中，环氧化过程在选自吡啶、乙腈、DMF、DMSO, NMP, DMA、THF和硝 基甲烷，优选NMP或吡啶，更优选吡啶的助溶剂存在下用含水次氯酸钠进行。在某些实施方 案中，环氧化过程用10 %含水次氯酸钠溶液进行。在某些实施方案中，环氧化过程在吡啶存 在下用10%含水次氯酸钠溶液进行。在某些实施方案中，环氧化过程在NMP存在下用次氯 酸钙溶液进行。在某些实施方案中，R1选自保护基团或氨基酸的其它链，其本身可以是任选取代 的。在某些该实施方案中，R1是保护基团，优选吸电子保护基团。在某些实施方案中，R1选自叔丁氧基羰基(Boc)、苯甲酰基(Bz)、芴-9-基甲氧基 羰基(Fmoc)、三氯乙氧基羰基(Troc)和苄氧基羰基(Cbz)。在某些实施方案中，R1选自叔 丁氧基羰基(Boc)、苯甲酰基(Bz)、三氯乙氧基羰基(Troc)、和苄氧基羰基(Cbz)，优选Cbz 或Boc。在某些实施方案中，R1是Boc。在某些实施方案中，R3选自氢、Cp6烷基、Cp6烷氧基烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 CV6杂芳烷基和Cp6芳烷基。在优选实施方案中，R3是Cp6烷基，优选异丁基。在某些优选 实施方案中，R3是CV6芳烷基，优选苯基甲基、4-羟基苯基甲基或2-苯基乙基。在某些实施方案中，立体选择性环氧化过程在不明显产生带有R3的碳的差向异构 作用的条件下进行，因而存在低于10%，低于5%，低于2%，甚至低于1 %的带有R3的碳的 差向异构作用。在某些实施方案中，进行立体选择性环氧化过程，使得产物是大于约90%， 大于95 %，大于98 %，或甚至大于99 %非对映异构体纯的。在某些实施方案中，环氧化过程在约-15°C -约10°C，约-10°C -约5°C或甚至 约-5°C -约0°C范围的温度下进行。在某些实施方案中，方案I中的化合物具有如下立体化学 在某些实施方案中，进行立体选择性环氧化过程，使得产物是大于约90%，大于 95 %，大于98 %，或甚至大于99 %非对映异构体纯的。各种N-保护基团，例如苄氧基羰基或叔丁氧基羰基(Boc)、各种偶合试剂，例如二 环己基碳化二亚胺(DCC)、1，3-二异丙基碳化二亚胺(DIC)U-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙 基碳化二亚胺(EDC)、N-羟基氮杂苯并三唑(HATU)、羰基联咪唑或1-羟基苯并三唑单水合 物(HOBT)和各种断裂条件，例如三氟乙酸(TFA)、二噁烷中的HC1、有机溶剂(例如甲醇或 乙酸乙酯)中的Pd/C氢化、三(三氟乙酸酯)硼、溴化氰和在溶液中的反应和中间体的分 离和纯化是肽合成领域中已知的，可相等地应用于制备目标化合物(Greene. T. W. ；ffuts, P. G. M. Protective Groups in OrganicSynthesis,
3rded. ；Wiley :New York, 1999)。在某些实施方案中，氨基酸酮-环氧化物可进一步通过胺的脱保护改性，如果可 行，与氨基酸链偶合。该片段的偶合方法是现有技术中已知的(El0fSS0n，M.等.(1999) Chemistry&Biology,6 :811_822 ；Elofsson, M 等(1999)Chemistry&Biology, 6 :811_822)。 在优选实施方案中，氨基酸链包括1-3个氨基酸。在某些实施方案中，氨基酸链具有式(VI)结构可药用的盐 其中每个A分别选自C = 0、C = S和SO2，优选C = 0;或当相邻于Z出现时，A是任选的共价键；L不存在或选自C = 0、C = S和SO2，优选L不存在或C = 0 ；M不存在或是Ch2烷基，优选C^8烷基；Q不存在或选自0、ΝΗ和N-CV6烷基，优选Q不存在、0或NH，最优选Q不存在或0 ；X是C00H或其活化形式，优选X是C00H、COCl或CON (Me) (OMe)，最优选X是C00H 或 COCl ；Y不存在或选自0、NH、N-Cp6烷基、S、SO、SO2, CHOR17和CHCO2R17 ；每个Z分别选自 0、S、NH和N-Cp6烷基，优选0 ；或当相邻于A出现时，Z是任选的共价键；R5、R6和R7分别选自CV6烷基、CV6羟基烷基、Cp6烷氧基烷基、芳基和Cp6芳烷基， 其任一任选被一个或多个酰胺、胺、羧酸(或其盐)、酯(包括Ch6烷基和Ci_5烷基酯和芳基 酯)、硫醇或硫醚取代基取代；R9 是 N (Rici) LQR11 ；R10、R12和R13分别选自氢、OH和Cp6烷基，优选Rltl选自氢、OH和C^6烷基，R12和 R13分别选自氢和Cp6烷基，优选氢；R11选自氢、CV6烷基、CV6烯基、CV6炔基、芳基、C1^6芳烷基、杂芳基、C1^6杂芳烷基、R15ZAZ-C1^8 烷基-、R18Z-CV8 烷基 _、(R15O) (R16O)P ( = 0) O-C^8 烷基-ZAZ-CV8 烷基 _、 R15ZAZ-C1^8 烷基-ZAZ-CV8 烷基 _、杂环基 MZAZ-CV8 烷基 _、(R15O) (R16O) P ( = 0) O-C1^8 烷基-、 (R17) 2N-C1_12 烷基-、(R17) 3N+-C1_12 烷基 _、杂环基 M-、碳环基 M^R18SO2CV8 烷基 _ 和 R18SO2NH ； 优选CV6烷基、C1^6烯基、CV6炔基、芳基、CV6芳烷基、杂芳基、C1^6杂芳烷基、R15ZA-CV8烷 基-、R18Z-C^8 烷基-、(R15O) (R16O) P ( = 0) O-CV8 烷基-ZAZ-C1^8 烷基-、(R15O) (R16O) P ( = 0) O-CV8 烷基-Z-CV8 烷基 _、R15ZA-CV8 烷基-ZAZ-CV8 烷基 _、杂环基 MZAZ-Ch 烷基 _、(R15O) (R16O)P( = 0)-O-Cb烷基-、(R17)2N-CV12 烷基_、(R17)3N+-CV12 烷基 _、杂环基M-、碳环基M-、 R18SO2C1^8烷基-和R18SO2NH,其中每次出现的Z和A分别不是共价键；R10 和 R11 — 起是 Cp6 烷基-Y-Cp6 烷基、Cp6 烷基-ZAZ-C^6 烷基、ZAZ-C1^ 烷 基-ZAZ-Ch烷基、ZAZ-CV6烷基-ZAZ或C^6烷基-A，从而形成环；优选C"烷基-Y-C^2烷 基、C1^2烷基-ZA-CV2烷基、A-C1^2烷基-ZA-C^2烷基、A-CV3烷基或烷基-A，其中每 次出现的Z和A分别不是共价键；
R15和R16分别选自氢、金属阳离子、CV6烷基、Cp6烯基、Cp6炔基、芳基、杂芳基、CV6 芳烷基和Cp6杂芳烷基，优选氢、金属阳离子和CV6烷基或R15和R16 —起是Ch6烷基，从而 形成环；每个R17分别选自氢和CV6烷基，优选Cp6烷基；R18分别选自氢、OH、CV6烷基、CV6烯基、CV6炔基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基和 (V6杂芳烷基；其前提是，在任何出现的序列ZAZ中，至少一个序列成员必须不是共价键。在某些实施方案中，R5、R6和R7选自Cp6烷基或CV6芳烷基。在优选实施方案中， R6是Cp6烷基而R5和R7是Cp6芳烷基。在最优选实施方案中，R6是异丁基，R5是2-苯基乙 基和R7是苯基甲基。在某些实施方案中，L和Q不存在，R11选自CV6烷基、Cp6烯基、CV6炔基、Cp6芳烷 基和Cp6杂芳烷基。在某些该实施方案中，R10是CV6烷基，R11选自丁基、烯丙基、炔丙基、苯 基甲基、2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基。在其它实施方案中，L是S02，Q不存在，R11选自Cp6烷基和芳基。在某些该实施方 案中，R11选自甲基和苯基。在某些实施方案中，L是C = 0，R11选自Cp6烷基、Cp6烯基、Cp6炔基、芳基、Cp6芳 烷基、杂芳基、C1^6 杂芳烷基、R15ZA-CV8 烷基-、R18Z-Ch8 烷基-、(R15O) (R16O) P ( = 0) O-CV8 烷基-、(R15O) (R16O) P ( = 0) O-CV8 烷基-ZAZ-CV8 烷基 _、(R15O) (R16O) P ( = 0) O-C^8 烷 基-Z-Cp8 烷基-、R15ZA-C1^8 烷基-ZAZ-Ch8 烷基-、杂环基 MZAZ-Ch8 烷基 _、(R17)2N-C1^8 烷 基-、(R17) 3N+-(V8烷基-、杂环基M-、碳环基M-、R18SO2CV8烷基_和R18SO2NH,其中每次出现 的Z和A分别不是共价键。在某些实施方案中，L是C = 0，Q不存在和R11是H。在某些实施方案中，Rw是CV6烷基，R11是Cp6烷基，Q不存在和L是C = 0。在某 些该实施方案中，Rn是乙基、异丙基、2，2，2-三氟乙基或2-(甲基磺酰基)乙基。在其它实施方案中，L是C = 0，Q不存在，R11是C^6芳烷基。在某些实施方案中， R11选自2-苯基乙基、苯基甲基、(4-甲氧基苯基)甲基、(4-氯苯基)甲基和(4-氟苯基) 甲基。在其它实施方案中，L是C = 0，Q不存在，R10是C^6烷基，R11是芳基。在某些该实施方案中，R11是取代或未取代的苯基。在某些实施方案中，L是C = 0，Q不存在或0，η是0或1，R11是-(CH2)n碳环基。 在某些该实施方案中，R11是环丙基或环己基。在某些实施方案中，L和A是C = 0，Q不存在，Z是0，η是1-8整数(优选1)，R11 选自 R15ZA-CV8 烷基-H-CV8 烷基-、R15ZA-CV8 烷基-ZAZ-CV8 烷基 _、(R15O) (R16O) P ( = 0) O-CV8 烷基-ZAZ-CV8 烷基-、(R15O) (R16O) P ( = 0) O-Cp8 烷基-Z-Cp8 烷基-和杂环基 MZAZ-CV8 烷基-，其中每次出现的A分别不是共价键。在某些该实施方案中，R7是杂环基MZAZ-CV8 烷基_，其中杂环基是取代或未取代的氧代间二氧杂环戊烯基(oxodioxolenyl)或N(R12) (R13)，其中R12和R13 —起是CV6烷基-Y-C^6烷基，优选C1^烷基-Y-C^3烷基，从而形成环。在某些实施方案中，L是C = 0，Q不存在，η是1-8整数，R11选自(R15O) (R16O) P (= 0)0-(ν8烷基-、(R17)2NCV8烷基、(R17)3N+(CH2)n-和杂环基Μ-。在某些该实施方案中，R11 是-Cm烷基N (R17) 2或-CV8烷基N+ (R17) 3，其中R17是。烷基。在某些其它该实施方案中， Rn是杂环基Μ-，其中杂环基选自吗啉代、哌啶子基、哌嗪基和吡咯烷基。在某些实施方案中，L是C = 0，Rltl是Cp6烷基，Q选自0和NH，R11选自C^6烷基、 环烷基-Μ、C1^6芳烷基和CV6杂芳烷基。在其它实施方案中，L是C = 0，Rltl是Cp6烷基，Q 选自0和NH，R11是Cp6烷基，其中Cp6烷基选自甲基、乙基和异丙基。在进一步实施方案中， L是C = 0，Rltl是CV6烷基，Q选自0和NH，R11是C^6芳烷基，其中芳烷基是苯基甲基。在 其它实施方案中，L是C = 0，Rltl是Cp6烷基，Q选自0和NH，R11是C^6杂芳烷基，其中杂芳 烷基是(4-吡啶基)甲基。在某些实施方案中，L不存在或是C = 0，R10和R11 —起是C^6烷基-Y-C^6烷基、 CV6烷基-ZA-CV6烷基或CV6烷基-Α，其中每次出现的Z和A分别不是共价键，从而形成环。 在某些优选实施方案中，L是C = 0，Q和Y不存在，Rki和R11 —起是C"烷基-Y-Ch烷基。 在另一优选实施方案中，L和Q不存在，Rki和R11 —起是C"烷基-Y-Ch烷基。在另一优选 实施方案中，L是C = 0，Q不存在，Y选自NH和N-Cp6烷基，俨和R" 一起是C1^烷基-Y-CV3 烷基。在另一优选实施方案中，L是C = 0，Y不存在，Rki和R11 —起是CV3烷基-Y-C^3烷 基。在另一优选实施方案中，L和A是C = 0，Rw和R11 —起是C"烷基-ZA-CV2烷基。在 另一优选实施方案中，L和A是C = 0，Rw和R11 —起是C2_3烷基-A。在某些实施方案中，氨基酸的链具有式(νπ)结构
(VII)其中每个A分别选自C = 0、C = S和SO2，优选C = 0 ；或当相邻于Z出现时，A是任选的共价键；每个B分别选自C = 0、C = S和S02，优选C = O;D不存在或是CV8烷基；G 选自 0、NH 和 N-C1^6 烷基；
K不存在或选自C = 0、C = S和SO2，优选K不存在或是C = 0 ；L不存在或选自C = 0、C = S和SO2，优选L不存在或是C = 0 ；M不存在或是CV8烷基；Q不存在或选自0、NH和N-Cp6烷基，优选Q不存在、0或NH，最优选Q不存在；X是COOH或其活化形式，优选X是C00H、COCl或CON (Me) (OMe)，最优选X是COOH 或 COCl ；每个V分别不存在或选自0、S、NH和N-Cp6烷基，优选V不存在或是0 ；W不存在或分别选自0、S、NH和N-Cp6烷基，优选 ；Y不存在或选自0、NH、N-Cp6烷基、S、SO、SO2, CHOR17和CHCO2R17 ；每个Z分别选自0、S、NH和N-Cp6烷基，优选0 ；或在相邻于A出现时，Z是任选的共价键；R5、R6和R7分别选自Cp6烷基、Cp6羟基烷基、C1^6烷氧基烷基、芳基、C1^6芳烷基和 R16DVKOC1^烷基_，其中R5和R7至少一个是R16DVKOCV3烷基_ ；R9 是 N (Rici) LQR11 ；Rltl选自氢、OH和CV6烷基，优选氢或CV6烷基；R11是氨基酸的其它链、氢、保护基团、芳基或杂芳基，其任一任选被卤素、羰基、硝 基、羟基、芳基、C1^5烷基取代；或R11选自Cp6烷基、Cp6烯基、CV6炔基、Cp6芳烷基、Cp6杂 芳烷基、R12ZAZ-Ch8 烷基-、R15ZAZ-C1^8 烷基-、(R12O) (R13O) P ( = 0) O-C1^8 烷基-ZAZ-C^8 烷 基-、R12ZAZ-CV8 烷基-ZAZ-CV8 烷基 _、杂环基 MZAZ-Ch 烷基-、(R12O) (R13O) P ( = 0) O-C1^8 烷基_、(R14) 2N-(V8烷基-、(R14)烷基-、杂环基M-、碳环基M-、R15SO2CV8烷基_和 R15SO2NH ；或R10 和 R11 — 起是 Cp6 烷基-Y-C1^ 烷基、Cp6 烷基-ZAZ-Ch 烷基、ZAZ-C^6 烷 基-ZAZ-Ch 烷基、ZAZ-CV6 烷基-ZAZ 或 C^6 烷基-ZAZ ；R12和R13分别选自氢、金属阳离子、CV6烷基、Cp6烯基、Cp6炔基、芳基、杂芳基、CV6 芳烷基和Cp6杂芳烷基，优选氢、金属阳离子和Ch6烷基，或R12和R13 —起是Ch6烷基，从而 形成环；每个R14分别选自氢和CV6烷基，优选Cp6烷基；每个R15分别选自氢、OR14、CV6烷基、CV6烯基、CV6炔基、碳环基、杂环基、芳基、杂 芳基、 芳烷基和 杂芳烷基；R16 选自氢、(R17O) (R18O) P ( = 0)W_、R17GB-,杂环基 _、(R19)2N-, (R19)3N+-, R19SO2GBG-和R17GBCm烷基_，其中CV8烷基部分任选被ΟΗΧ"烷基W (任选被卤素取代，优 选氟)、芳基、杂芳基、碳环基、杂环基和Cp6芳烷基，优选至少一个R16不是氢；R17和R18分别选自氢、金属阳离子、CV6烷基、Cp6烯基、Cp6炔基、芳基、杂芳基、CV6 芳烷基和Cp6杂芳烷基，优选氢、金属阳离子和Ch6烷基，或R17和R18 —起是Ch6烷基，从而 形成环；和每个R19分别选自氢、OR14、CV6烷基、CV6烯基、CV6炔基、碳环基、杂环基、芳基、杂 芳基、Cp6芳烷基和CV6杂芳烷基；和选择D、G，V、K、和 W，使得不存在 0-0、N_0、S-N 或 S-0 键。在某些实施方案中，R5、R6和R7分别选自CV6烷基、CV6羟基烷基、Cp6烷氧基烷基、芳基、CV6芳烷基和R16DVKOCV3烷基-，其中R5和R7的至少一个是R16DVKOCh3烷基-。在优 选实施方案中，R5和R7 —个是Cp6芳烷基，另一个是R16DVKOCh3烷基-，R6独立地是Ch6烷 基。在最优选实施方案中，R5和R7 —个是2-苯基乙基或苯基甲基，另一个是R16DVKOCH2-或 R16DVKO (CH3) CH-，而 R6 是异丁基。在 某些实施方案中，每个R15分别选自氢、CV6烷基、Cp6烯基、Cp6炔基、碳环基、杂 环基、芳基、杂芳基、C1^6芳烷基和CV6杂芳烷基。在某些实施方案中，R19分别选自氢、Cp6烷基、Cp6烯基、CV6炔基、碳环基、杂环基、 芳基、杂芳基、C1^6芳烷基和CV6杂芳烷基。在某些实施方案中，L和Q不存在，R11选自氢、氨基酸的其它链、Cp6酰基、保护基 团、芳基、杂芳基、(V6烷基、CV6烯基、CV6炔基、CV6芳烷基和Cp6杂芳烷基。在某些该实 施方案中，Rki是CV6烷基和R选自丁基、烯丙基、炔丙基、苯基甲基、2-吡啶基、3-吡啶基和 4-吡啶基。在其它实施方案中，L是S02，Q不存在和R11选自C^6烷基和芳基。在某些该实施 方案中，R11选自甲基和苯基。在某些实施方案中，L是C = 0，R11选自Cp6烷基、Cp6烯基、Cp6炔基、芳基、Cp6芳 烷基、杂芳基、C1^6 杂芳烷基、R12ZA-CV8 烷基-、R15Z-Ch8 烷基-、(R12O) (R13O) P ( = 0) O-CV8 烷基-、(R12O) (R13O) P ( = 0) O-CV8 烷基-ZAZ-CV8 烷基 _、(R12O) (R13O) P ( = 0) O-C1^8 烷 基-Z-Ch 烷基-、R12ZA-C1^8 烷基-ZAZ-CB 烷基 _、杂环基 MZAZ-CV8 烷基 _、(R14)2N-C1^8 烷 基_、(R14) 3N+-(V8烷基_、杂环基M-、碳环基M-、R15SO2CV8烷基_和R15S02NH-。在某些实施 方案中，L是C = 0，Q不存在和R11是H。在某些实施方案中，Rw是CV6烷基，R11是Cp6烷基，Q不存在和L是C = 0。在某 些该实施方案中，Rn是乙基、异丙基、2，2，2-三氟乙基或2-(甲基磺酰基)乙基。在其它实施方案中，L是C = 0，Q不存在，R11是Cp6芳烷基。在某些该实施方案 中，R11选自2-苯基乙基、苯基甲基、(4-甲氧基苯基)甲基、(4-氯苯基)甲基和(4-氟苯 基)甲基。在其它实施方案中，L是C = 0，Q不存在，R10是C^6烷基和R11是芳基。在某些该 实施方案中，R11是取代或未取代的苯基。在某些实施方案中，L是C = 0，Q不存在或0，R11是-(CH2)n碳环基。在某些该实 施方案中，R11是环丙基或环己基。在某些实施方案中，L和A是C = 0，Q不存在，Z是0和R11选自R12ZA-CV8烷基-、 R15Z-CV8 烷基 _、R12ZA-CV8 烷基-ZAZ-Cb 烷基 _、(R12O) (R13O) P ( = 0) O-C1^8 烷基-ZAZ-CV8 烷基-、(R12O) (R13O) P ( = 0) O-CV8烷基-Z-CV8烷基_和杂环基MZAZ-Ch烷基_。在某些该 实施方案中，R11是杂环基MZAZ-Cm烷基-，其中杂环基是取代或未取代的氧代间二氧杂环 戊烯基或N(R20) (R21)，其中R2°和R21 —起是Cp6烷基-Y-CV6烷基，优选Cu烷基-Y-CV3烷 基，从而形成环。在某些实施方案中，L是C = 0，Q不存在，R11选自(R12O) (R13O)P( = 0)O-CV8烷 基-、(R14)2NCh烷基、(R14)3N+(CH2)n-和杂环基M-。在某些该实施方案中，R11是-C^8烷基 N(R14)2或-CV8烷基N+(R14)3，其中R14是Cp6烷基。在某些其它该实施方案中，R11是杂环基 M-，其中杂环基选自吗啉代、哌啶子基、哌嗪基和吡咯烷基。
在某些实施方案中，L是C = 0，Rltl是Cp6烷基，Q选自0和NH，R11选自C^6烷基、 环烷基-M、C1^6芳烷基和CV6杂芳烷基。在其它实施方案中，L是C = 0，Rltl是Cp6烷基，Q 选自0和NH，R11是Cp6烷基，其中Cp6烷基选自甲基、乙基和异丙基。在进一步实施方案中， L是C = 0，Rltl是CV6烷基，Q选自0和NH，R11是C^6芳烷基，其中芳烷基是苯基甲基。在 其它实施方案中，L是C = 0，Rltl是Cp6烷基，Q选自0和NH，R11是C^6杂芳烷基，其中杂芳 烷基是(4-吡啶基)甲基。在某些实施方案中，L不存在或是C = 0，R10和R11 —起是C^6烷基-Y-C^6烷基、 CV6烷基-ZA-Ch烷基或Cp6烷基-A，从而形成环。在某些优选实施方案中，L是C = 0，Q 和Y不存在，R10和R11 —起是Cu烷基-Y-Ch烷基。在另一优选实施方案中，L和Q不存 在，R10和R11 —起是CV3烷基-Υ-。烷基。在另一优选实施方案中，L是C = 0，Q不存在， Y选自NH和N-Cp6烷基，R1q和R11 一起是C"烷基-Y-CV3烷基。在另一优选实施方案中，L 是C = 0，Y不存在，Rltl和R11—起是CV3烷基-Y-CV3烷基。在另一优选实施方案中，L和A 是C = 0，R10和R11 —起是Cp2烷基-ZA-C^2烷基。在另一优选实施方案中，L和A是C = 0，R10 和 R11 —起是 C2_3 烷基-A。在某些实施方案中，R16是(R17O) (R18O)P( = 0)W_。在某些该实施方案中，D、V、K 和W不存在。在其它该实施方案中，V和K不存在，D是CV8烷基，W是0。在其它该实施方 案中，D是Cp8烷基，K是C = 0，￥和1是0。
在某些实施方案中，R16是R17GB-。在优选实施方案中，B是C = 0，G是0，D是C1^ 烷基，V是0和K是C = 0。在某些实施方案中，R16是杂环基_。在优选的该实施方案中，D是C"烷基。在某 些该实施方案中，V是0，K是C = O和杂环基是氧代二氧杂环戊烯基。在其它该实施方案 中，V不存在，K不存在或是C = 0，杂环基是N(R20) (R21)，其中R2°和R21 —起是J-T-J、J-WB-J 或 B-J-T-J，T 不存在或选自 0、NR17、S、SO、SO2, CHOR19, CHCO2R17, C = 0、CF2 和 CHF，J 不存 在或是C"烷基。在某些实施方案中，R16是(R19)2N-或(R19)3N+-,优选V不存在。在优选的该实施方 案中，D是CV8烷基，K不存在或C = 0。在其中V不存在和R16是(R19)2N-的某些实施方案 中，D不存在，K不存在或是C = 0，优选K是C = 0。在某些实施方案中，R16是R19S02GBG-。在优选的该实施方案中，B是C = 0、D、V， K不存在和G是NH或NCV6烷基。在某些实施方案中，R16是R17GBCm烷基_。在优选实施方案中，B是C = 0，G是0， CV8烷基部分任选被0Η、(ν8烷基(任选被卤素，优选氟取代)、Ci_8烷基W、芳基、杂芳基、碳 环基、杂环基和Ch6芳烷基取代。在某些该实施方案中，CV8烷基部分是未取代的、单取代的 或二取代的Cl烷基。在某些实施方案中，氨基酸的链具有式(VDI)或(IX)结构或其可药用的盐 R5 R10
护jYfVxrVx
O R6R5
(VIII)(IX)其中
每个Ar分别是芳香或杂芳基，其任选被1-4个取代基取代；L不存在或选自C = 0、C = S和SO2，优选SO2或0 = 0 ；X是COOH或其活化形式，优选X是C00H、COCl或CON (Me) (OMe)、最优选X是COOH 或 COCl ；Y不存在或选自C = 0和SO2 ；Z不存在或是CV6烷基；R5和R6分别选自Cp6烷基、CV6羟基烷基、C1^6烷氧基烷基、芳基和Cp6芳烷基，其 任一任选被一个或多个酰胺、胺、羧酸(或其盐)、酯(包括Ch6烷基和CV5烷基酯和芳基 酯)、硫醇或硫醚取代基取代；R9 是 N (R10)L-Z-R11 ；Rltl选自氢、OH、C1^6芳烷基-Y-和CV6烷基_Y_，优选氢；R11选自氢、OR12、Cp6烯基、Ar-Y-、碳环基和杂环基；和R12选自氢、CV6烷基和CV6芳烷基，优选氢。在某些实施方案中，L选自C = 0、C = S和SO2，优选302或0 = 0。在某些实施方案中，Rltl选自氢、OH、C1^6芳烷基和Cp6烷基，优选氢。在某些实施方案中，R11选自氢、Cp6烯基、Ar-Y-、碳环基和杂环基。在某些实施方案中，R5和R6分别选自Cp6烷基、Cp6羟基烷基和Cp6芳烷基。在优 选的该实施方案中，R5是CV6烷基和R6是CV6芳烷基。在更优选的该实施方案中，R5是异 丁基和R6是苯基甲基。在某些实施方案中，R10是氢，L是C = 0或S02，R11是Ar_Y_和每个Ar分别选自 苯基、吲哚基、苯并呋喃基、萘基、喹啉基、喹诺酮基、噻吩基、吡啶基、吡嗪基等。在某些该实 施方案中，Ar可被Ar-Q-取代，其中Q选自直接的键、_0_和C^6烷基。在其中Z是C^6烷 基的某些其它该实施方案中，Z可以被取代，优选被Ar，例如苯基。在某些实施方案中，Rltl是氢，Z不存在。L是C = O或S02，R11选自Ar-Y和杂环基。 在某些优选的该实施方案中，杂环基选自色酮基、色满基、吗啉代和哌啶基。在某些其它优 选实施方案中，Ar选自苯基^丨哚基、苯并呋喃基、萘基、喹啉基、喹诺酮基、噻吩基、吡啶基、 吡嗪基等。在某些实施方案中，Rltl是氢，L是C = 0或S02，Z不存在，R11是C^6烯基，其中C1^ 烯基是取代的乙烯基，其中取代基优选是芳基或杂芳基，更优选任选被1-4个取代基取代
的苯基。在某些实施方案中，R12选自氢和。烷基。在某些优选的该实施方案中，R12选自 氢和甲基。在更优选的该实施方案中，R12是氢。在某些优选实施方案中，氨基酸的链具有式(X )结构 X是COOH或其活化形式，优选X是C00H、COCl或CON (Me) (OMe)，最优选X是COOH或 COCl ；R5、R6和R7分别选自CV6烷基、CV6羟基烷基、Cp6烷氧基烷基、芳基和C^6芳烷基， 其每个任选被选自酰胺、胺、羧酸或其可药用的盐、羧酸酯、硫醇和硫醚的基团取代，优选R6 是CV6烷基，R5和R7是CV6芳烷基，最优选R6是异丁基，R5是2-苯基乙基和R7是苯基甲基；R9是氨基酸的其它链、氢、Cp6酰基、保护基团、芳基或杂芳基，其中取代基包括卤 素、羰基、硝基、羟基、芳基和C"烷基，优选R9是CV6酰基，最优选R9是异丁基。在某些优选实施方案中，氨基酸的链具有式(XI )结构或其可药用的盐
(XI)其中L不存在或选自-CO2或-C ( = S) 0;X是COOH或其活化形式；优选X是C00H、C0C1或CON (Me) (OMe)，最优选X是COOH 或 COCl ；Y 是 NH、N-烷基、0 或 C (R9)2,优选 N-烷基、0 或 C (R9) 2 ；Z 是 0 或 C (R9) 2，优选 C (R9) 2 ；R1、R2和R3分别选自氢和式(XD)基团，优选R1、R2和R3全部相同，更优选R1、R2
和R3都是氢；
(XII)R5、R6、R7和R9分别选自氢、Cp6烷基、Cp6羟基烷基、C^6烷氧基烷基、芳基和C^6芳 烷基，其每个任选被选自烷基、酰胺、胺、羧酸或其可药用的盐、羧酸酯、硫醇和硫醚的基团 取代，优选R5、R6和R7分别选自Cp6烷基、Cp6羟基烷基和Cp6芳烷基，每个R9是氧，更优选 R6是C1^6烷基、R5和R7分别是C1^6芳烷基，每个R9是H ；R10和R11分别选自氢和Cp6烷基，或Rw和R11 —起形成3_6元碳环或杂环；R12和R13分别选自氢、金属阳离子、CV6烷基和Cp6芳烷基，或R12和R13 —起代表 (V6烷基，从而形成环；m是0-2的整数；和η是0-2的整数，优选0或1。在某些实施方案中，X是0，R1、R2和R3均相同，优选R1、! 2和R3都是氢。在某些该 实施方案中，R5、R6和R7分别选自Cp6烷基、CV6羟基烷基和CV6芳烷基，最优选R6是Cp6烷 基，R5和R7分别是Cp6芳烷基。在某些优选实施方案中，R1、R2和R3都是氢，R6和R8均是异丁基，R5是苯基乙基和R7是苯基甲基。在某些实施方案中，R5、R6和R7分别选自氢、CV6烷基、Cp6羟基烷基、Cp6烷氧基烷 基、芳基和Cp6芳烷基，其每个任选被选自烷基、酰胺、胺、羧酸或其可药用的盐、羧酸酯、硫 醇和硫醚的基团取代。在某些实施方案中，R5和R7至少一个是被烷基取代的CV6芳烷基， 更优选被全卤代烷基取代。在某些该实施方案中，R7是被三氟甲基取代的Cp6芳烷基。在某些实施方案中，Y选自N-烷基、0和CH2。在某些该实施方案中，Z是CH2，m和 η均0。在某些其它的该实施方案中，Z是CH2, m是0，η是2或3，在其它的该实施方案中， Z是0,m是1禾口 η是2。在某些优选实施方案中，氨基酸的链具有式(VDI )结构 其中每个Ar分别是任选被1_4个取代基取代的芳基或杂芳基；每个A分别选自C = 0、C = S和SO2，优选C = O ；或在相邻于Z出现时，A任选是 共价键；B不存在或是N (R9) R10,优选不存在；L不存在或选自C = 0、C = S和SO2，优选SO2或C = 0 ；M不存在或是CV12烷基，优选C^8烷基；Q不存在或选自0、NH和N-C1^烷基； X是COOH或其活化形式，优选X是C00H、C0C1或CON (Me) (OMe)，最优选X是COOH 或 COCl ；Y不存在或选自C = 0和SO2 ；每个Z分别选自0、S、NH和N-Ch烷基，优选 ；或在相邻于A出现时，Z任选是共价键；R1选自H、-CV6烷基-B、C1^6羟基烷基、C1^6烷氧基烷基、芳基和C^6芳烷基；R2选自芳基、Cp6芳烷基、杂芳基和Cp6杂芳烷基；R4^N(R5)L-Q-R6 ；R5选自氢、OH、C1^6芳烷基和Cp6烷基，优选氢；R6选自氢、CV6烷基、CV6烯基、CV6炔基、Ar-Y-、碳环基、杂环基、N-末端保护基团、 芳基、CV6芳烷基、杂芳基、C1^6杂芳烷基、R11ZAZ-C1^8烷基-、R14Z-CV8烷基-、(R11O) (R12O) P ( = 0) O-C1^8 烷基-ZAZ-Cb 烷基 _、R11ZA Z-C1^8 烷基-ZAZ-C^ 烷基 _、杂环基 MZAZ-CV8 烷 基 _、(R11O) (R12O) P ( = 0) O-Cp8 烷基 _、(R13) 2Ν-(^_12 烷基-、(R13) 3N+-C1_12 烷基-、杂环基 M-、 碳环基M-A14SO2Cm烷基-和R14SO2NH ；优选N-末端保护基团，更优选叔丁氧基羰基或苄氧 基羰基；或R5 和 R6 — 起是 C1^6 烷基-Y-CV6 烷基、C1^6 烷基-ZAZ-C1^6 烷基、ZAZ-CV6 烷 基-ZAZ-Ch烷基、ZAZ-CV6烷基-ZAZ，或C^6烷基-A，从而形成环；
R7选自氢、Cm烷基和CM芳烷基，优选氢；R9选自氢、0H和烷基，优选烷基；和R1Q是N-末端保护基团；R11和R12分别选自氢、金属阳离子、(V6烷基、Cm烯基、CM炔基、芳基、杂芳基、
芳烷基和杂芳烷基，优选氢、金属阳离子和烷基，或R11和R12 —起是烷基，从而 形成环；每个R13分别选自氢和(V6烷基，优选烷基；和R14分别选自氢、(V6烷基、Cm烯基、CM炔基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、CM芳 烷基和Cm杂芳烷基；其前提是，在任何出现的序列ZAZ中，序列的至少一个成员必须不是共价键。在某些实施方案中，R1选自-Cm烷基-B和CM芳烷基。在某些该实施方案中，R1 被一个或多个选自羟基、卤素、酰胺、胺、羧酸(或其盐)、酯(包括Cm烷基酯、Ci_5烷基酯和 芳基酯)、硫醇或硫醚的取代基取代。在某些优选的该实施方案中，R1被一个或多个选自羧 酸和酯的取代基取代。在某些实施方案中，R1选自甲基、乙基、异丙基、羧甲基和苄基。在某 些实施方案中，R1是-CV6烷基-B和Cm芳烷基。在某些优选的该实施方案中，B不存在。在某些实施方案中，R2选自Cm芳烷基和CM杂芳烷基。在某些该实施方案中， R2选自Cm烷基-苯基、CM烷基-吲哚基、CM烷基-噻吩基、CM烷基-噻唑基和CM烷 基-异噻唑基，其中烷基部分可含有6、5、4、3、2或1个碳原子，优选1或2个。在某些该实 施方案中，R2被一个或多个选自羟基、卤素、酰胺、胺、羧酸(或其盐)、酯(包括(V6烷基酯、 (V5烷基酯和芳基酯)、硫醇或硫醚的取代基取代。在某些该实施方案中，R2被选自烷基、三 卤代烷基、烷氧基、羟基或氰基的取代基取代。在某些该实施方案中，R2选自(V6烷基-苯 基和Cm烷基-吲哚基。在某些优选的该实施方案中，R2选自 R = H或任何合适的保护基团其中D选自^OMejBu^OHXN^FjnCHy在某些实施方案中，D选自H、0Me、0H、 CN、CF3 禾口 CH3。在其中D连接于6元环的某些优选的该实施方案中，相对于连接点，D连接于4位， 优选排除其中环的4位被吡啶环的氮占据的实施方案。在某些实施方案中，R5是氢，L是C = 0或S02，R6是Ar_Y_，每个Ar分别选自苯基、 口引哚基、苯并呋喃基、萘基、喹啉基、喹诺酮基、噻吩基、吡啶基、吡嗪基等。在某些该实施方案中，Ar可被Ar-E-取代，其中E选自直接的键、-0-和烷基。在其中Q是烷基的 某些其它该实施方案中，Q可以被取代，优选被Ar，例如苯基取代。在某些实施方案中，R5是氢，Q不存在，L是C = 0或S02，R6选自Ar_Y和杂环基。 在某些优选的该实施方案中，杂环基选自色酮基、色满基、吗啉代和哌啶基。在某些其它优 选实施方案中，Ar选自苯基^丨哚基、苯并呋喃基、萘基、喹啉基、喹诺酮基、噻吩基、批啶基、 吡嗪基等。在某些实施方案中，R5是氢，L是C = 0或S02，Q不存在和R6是烯基，其中
烯基是取代的乙烯基，其中取代基优选是芳基或杂芳基，更优选任选被1-4个取代基取代
的苯基。在某些实施方案中，L和Q不存在和R6选自(V6烷基，(V6烯基、(V6炔基、Cm芳 烷基、Cm杂芳烷基。在某些该实施方案中，R5是CM烷基和R6选自丁基、烯丙基、炔丙基、 苯基甲基、2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基。在其它实施方案中，L是S02，Q不存在，R6选自烷基和芳基。在某些该实施方 案中，R选自甲基和苯基。在某些实施方案中，L是C = 0，R6选自(V6烷基、烯基、炔基、芳基、芳 烷基、杂芳基、(^ 杂芳烷基、R^ZA-CH 烷基-、R^Z-Ch 烷基-、(Rn0) (R120)P( = 0)0-(V8 烷基-、(Rn0) (R120)P( = 0) O-C^g 烷基-ZAZ-C^g 烷基-、(Rn0) (R120)P( = 0) O-C^g 烷 基-Z-C^ 烷基-、R^ZA-CH 烷基-ZAZ-CH 烷基-、杂环基 MZAZ-Ch 烷基-、(R13)2N-(V8 烷 基-、(R13) 3N+-(V8烷基-、杂环基M-、碳环基M-、R14S02(V8烷基-和R14S02NH，其中每个出现 的Z和A分别不是共价键。在某些实施方案中，L是C = 0，Q不存在，R6是H。在某些实施方案中，R5是(V6烷基，R6是(V6烷基，Q不存在，L是C = 0。在某些 该实施方案中，R6是乙基、异丙基、2，2，2-三氟乙基，或2-(甲基磺酰基)乙基。 在其它实施方案中，L是C = 0，Q不存在，R6是(V6芳烷基。在某些该实施方案中， R6选自2-苯基乙基、苯基甲基、(4-甲氧基苯基)甲基、(4-氯苯基)甲基和(4-氟苯基) 甲基。在其它实施方案中，L是C = 0，Q不存在，R5是烷基和R6是芳基。在某些该 实施方案中，R6是取代或未取代的苯基。在某些实施方案中，L是C = 0，Q不存在，R6选自杂芳基和杂芳烷基。在某些 该实施方案中，R6是杂芳基，其选自吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、异噁唑、噁唑、噁二唑、噻唑、噻 二唑、三唑、吡唑、吡啶、吡嗪、哒嗪和嘧啶。在某些该实施方案中，R6是Cm杂芳烷基，其选 自吡咯基甲基、呋喃基甲基、噻吩基甲基、咪唑基甲基、异噁唑基甲基、噁唑基甲基、噁二唑 基甲基、噻唑基甲基、噻二唑基甲基、三唑基甲基、吡唑基甲基、吡啶基甲基、吡嗪基甲基、哒 嗪基甲基和嘧啶基甲基。在某些实施方案中，L是C = 0，Q不存在或0，R6是碳环基M_，其中M是Q^烷基。 在某些该实施方案中，R6是环丙基或环己基。在某些实施方案中，L和A是C = 0，Q不存在，Z是0、M是烷基，优选亚甲 基，R6 选自 RHZA-Ch 烷基-、RMZ-CB 烷基-、R^ZA-CB 烷基-ZAZ-C^ 烷基-、(Rn0) (R120) P ( = 0) 0-Cb 烷基-ZAZ-C^ 烷基-、(Rn0) (R120) P ( = 0) O-C^ 烷基-Z-C^ 烷基-和杂环 基MZAZ-Cm烷基_，其中每个出现的A分别不是共价键。在某些该实施方案中，R6是杂环基MZAZ-(V8烷基_，其中杂环基是取代或未取代的氧代间二氧杂环戊烯基或N(R16) (R17)，其中 R16和R17 —起是烷基-Y-C^烷基，优选(V3烷基-Y-(V3烷基，从而形成环。在某些优选实施方案中，L是C = 0，Q不存在，M是。卜8烷基，R6选自(Rn0) (R120) P( = 0)o-c^烷基-、(R13)2N(V8烷基、(R13)3N+(V8烷基-和杂环基-M-。在某些该实施方案 中，R6是(RINCm烷基或(們冗‘烷基-，其中俨是^烷基。在某些其它该实施方案 中，R6是杂环基M-，其中杂环基选自吗啉代、哌啶子基、哌嗪基和吡咯烷。在某些实施方案中，L是C = 0，R5是(V6烷基，Q选自0和NH，R6选自烷基、环 烷基-M、(V6芳烷基和Cm杂芳烷基。在其它实施方案中，L是C = 0，R5是CM烷基，Q选 自0和NH，R6是Cm烷基，其中CM烷基选自甲基、乙基和异丙基。在其它实施方案中，L是 C = 0，R5是(V6烷基，Q选自0和NH和R6是(V6芳烷基，其中芳烷基是苯基甲基。在其它 实施方案中，L是C = 0。R5是Cm烷基，Q选自0和NH，R6是(V6杂芳烷基，其中杂芳烷基 是(4-吡啶基)甲基。在某些实施方案中，L不存在或是C = 0，R5和R6 —起是烷基-Y-C^烷基、 烷基-ZA-Ch烷基或Cm烷基-A，其中每个出现的Z和A分别不是共价键，从而形成环。在 某些优选实施方案中，L是C = 0，Q和Y不存在，R5和R6 —起是烷基-Y-C^烷基。在 其它优选实施方案中，L和Q不存在，R5和R6 —起是Ci_3烷基-Y-(V3烷基。在另外优选的 实施方案中，L是C = 0，Q不存在，Y选自NH和N-。烷基，R5和R6—起是(V3烷基 烷基。在另外的优选实施方案中，L是C = 0，Y不存在，R5和R6 —起是Ci_3烷基-Y-Ch烷 基。在另外优选实施方案中，L和A是C = 0，R5和R6 —起是Ci_2烷基-ZA-C^烷基。在另 外的优选实施方案中，L和A是C = 0，R5和R6 —起是C2_3烷基-A。在某些实施方案中，R7选自氢和。烷基。在某些优选的该实施方案中，R7选自氢 和甲基。在更优选实施方案中，R7是氢。在某些实施方案中，R2和R3是分别是h芳烷基，R1选自(V6烷基、羟基烷基、 (V6烷氧基烷基、芳基和Cm芳烷基，其任一被一个或多个酰胺、胺、羧酸(或其盐)、酯(包 括Cm烷基酯、(V5烷基酯和芳基酯)、硫醇或硫醚取代基取代。在某些优选实施方案中，氨基酸的链具有式(XIV)结构
(XIV)每个Ar分别是任选被1-4个取代基取代的芳基或杂芳基；每个A分别选自C = 0、C = S和S02，优选C = 0 ；或在相邻于Z出现时，A任选是共价键；L不存在或选自C = 0、C = S和S02，优选S02或C = 0 ；M不存在或是(V12烷基，优选Ci_8烷基；Q不存在或选自0、NH和N-Ch烷基；Y不存在或选自C = 0和S02 ；
每个Z分别选自0、S、NH和N-。烷基，优选0 ；或在相邻于A出现时，Z任选是共价键；R2选自芳基、Cm芳烷基、杂芳基和CM杂芳烷基；R4 是 N(R5)L-Q-R6 ；R5选自氢、OICh芳烷基和烷基，优选氢；R6选自氢、(V6烷基、(V6烯基、(V6炔基、Ar-Y-、碳环基、杂环基、N-末端保护基团、 芳基、CV6芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、RHzaz-C^烷基-、R14Z-(V8烷基-、(Rn0) (R120) P( = 0)O-C^g 烷基-ZAZ-CH 烷基-、R"ZA Z-C^g 烷基-ZAZ-C^8 烷基-、杂环基 MZAZ-(V8 烷 基 _、(Rn0) (R120) P ( = 0) 0-C^ 烷基-、(R13) J-Cm 烷基-、(R13) 3N+-C1_12 烷基-、杂环基 M_、 碳环基M-.RMSC^Cm烷基-和R14S02NH ；优选N-末端保护基团，更优选叔丁氧基羰基或苄氧 基羰基；或R5和R6 —起是Ch烷基-Y-CH烷基、CH烷基-ZAZ-C^e烷基、ZkZ-C^烷 基-ZAZ-C^烷基、ZAZ-C^e烷基-ZAZ，或烷基-A，从而形成环；R9选自氢、0H和Cm烷基，优选CM烷基；和R1Q是N-末端保护基团；R11和R12分别选自氢、金属阳离子、(V6烷基、Cm烯基、CM炔基、芳基、杂芳基、(V6 芳烷基和杂芳烷基，优选氢、金属阳离子和烷基，或R11和R12 —起是烷基，从而 形成环；每个R13分别选自氢和(V6烷基，优选烷基；和R14分别选自氢、(V6烷基、烯基、炔基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、芳 烷基和Cm杂芳烷基；R15选自氢、烷基、羟基烷基、(V6烷氧基、_C (0) 0(V6烷基、-C (0) N HC^烷 基和cv6芳烷基，优选(V6烷基和(V6羟基烷基，更优选甲基、乙基、羟基甲基和2-羟基乙 基；其前提是，在任何出现的序列ZAZ中，序列的至少一个成员必须不是共价键。在某些实施方案中，R2选自Cm芳烷基和CM杂芳烷基。在某些该实施方案中， R2选自Cm烷基-苯基、CM烷基-吲哚基、CM烷基-噻吩基、CM烷基-噻唑基和CM烷 基-异噻唑基，其中烷基部分可含有6、5、4、3、2或1个碳原子，优选1或2个。在某些该实 施方案中，R2被一个或多个选自羟基、卤素、酰胺、胺、羧酸(或其盐)、酯(包括(V6烷基酯、 (V5烷基酯和芳基酯)、硫醇或硫醚的取代基取代。在某些该实施方案中，R2被选自烷基、三 卤代烷基、烷氧基、羟基或氰基的取代基取代。在某些该实施方案中，R2选自(V6烷基-苯 基和Cm烷基-吲哚基。在某些优选的该实施方案中，R2是选自
30 R = H或任何合适的保护基团其中D选自^OMejBu^O^ClCFdn CH3。在某些 实施方案中，D选自H、0Me、0H、CN、CF3和CH3。在其中D连接于6元环的某些优选的该实施方案中，相对于连接点，D连接于4位， 优选排除其中环的4位被吡啶环的氮占据的实施方案。在某些实施方案中，R5是氢，L是C = 0或S02，R6是Ar_Y_，每个Ar分别选自苯基、 口引哚基、苯并呋喃基、萘基、喹啉基、喹诺酮基、噻吩基、吡啶基、吡嗪基等。在某些该实施方 案中，Ar可被Ar-E-取代，其中E选自直接键、-0-和烷基。在其中Q是烷基的某 些其它该实施方案中，Q可以被取代，优选被Ar，例如苯基取代。在某些实施方案中，R5是氢，Q不存在，L是C = 0或S02，R6选自Ar_Y和杂环基。 在某些优选的该实施方案中，杂环基选自色酮基、色满基、吗啉代和哌啶基。在某些其它优 选实施方案中，Ar选自苯基^丨哚基、苯并呋喃基、萘基、喹啉基、喹诺酮基、噻吩基、批啶基、 吡嗪基等。在某些实施方案中，R5是氢，L是C = 0或S02，Q不存在，R6是烯基，其中
烯基是取代的乙烯基，其中取代基优选是芳基或杂芳基，更优选任选被1-4个取代基取代
的苯基。在某些实施方案中，L和Q不存在，R6选自Cm烷基，CM烯基、炔基、芳烷 基、Cm杂芳烷基。在某些该实施方案中，R5是CM烷基和R6选自丁基、烯丙基、炔丙基、苯 基甲基、2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基。在其它实施方案中，L是S02，Q不存在，R6选自烷基和芳基。在某些该实施方 案中，R选自甲基和苯基。在某些实施方案中，L是C = 0，R6选自(V6烷基、烯基、炔基、芳基、芳 烷基、杂芳基、(^ 杂芳烷基、R^ZA-CH 烷基-、R^Z-Ch 烷基-、(Rn0) (R120)P( = 0)0-(V8 烷基-、(Rn0) (R120)P( = 0) O-C^g 烷基-ZAZ-C^g 烷基-、(Rn0) (R120)P( = 0) O-C^g 烷 基-Z-C^ 烷基-、R^ZA-CH 烷基-ZAZ-CH 烷基-、杂环基 MZAZ-Ch 烷基-、(R13)2N-(V8 烷 基-、(R13) 3N+-(V8烷基-、杂环基M-、碳环基M-、R14S02(V8烷基-和R14S02NH，其中每个出现 的Z和A分别不是共价键。在某些实施方案中，L是C = 0，Q不存在，R6是H。在某些实施方案中，R5是(V6烷基，R6是(V6烷基，Q不存在，L是C = 0。在某些 该实施方案中，R6是乙基、异丙基、2，2，2-三氟乙基或2-(甲基磺酰基)乙基。在其它实施方案中，L是C = 0，Q不存在，R6是芳烷基。在某些该实施方案中，
31R6选自2-苯基乙基、苯基甲基、(4-甲氧基苯基)甲基、(4-氯苯基)甲基和(4-氟苯基) 甲基。在其它实施方案中，L是C = 0，Q不存在，R5是烷基和R6是芳基。在某些该 实施方案中，R6是取代或未取代的苯基。在某些实施方案中，L是C = 0，Q不存在，R6选自杂芳基和杂芳烷基。在某些 该实施方案中，R6是杂芳基，其选自吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、异噁唑、噁唑、噁二唑、噻唑、噻 二唑、三唑、吡唑、吡啶、吡嗪、哒嗪和嘧啶。在某些该实施方案中，R6是Cm杂芳烷基，其选 自吡咯基甲基、呋喃基甲基、噻吩基甲基、咪唑基甲基、异噁唑基甲基、噁唑基甲基、噁二唑 基甲基、噻唑基甲基、噻二唑基甲基、三唑基甲基、吡唑基甲基、吡啶基甲基、吡嗪基甲基、哒 嗪基甲基和嘧啶基甲基。在某些实施方案中，L是C = 0，Q不存在或0，R6是碳环基M-，其中M是Cm烷基。 在某些该实施方案中，R6是环丙基或环己基。在某些实施方案中，L和A是C = 0，Q不存在，Z是0、M是(V8烷基，优选亚甲基， R6 选自 RHZA-CH 烷基-、R^Z-Ch 烷基-、RHZA-CH 烷基-ZA Z-C^ 烷基-、(Rn0) (R120) P ( = 0) 0-Cb 烷基-ZAZ-C^ 烷基-、(Rn0) (R120) P ( = 0) O-C^ 烷基-Z-C^ 烷基-和杂环 基MZAZ-Cm烷基_，其中每个出现的A分别不是共价键。在某些该实施方案中，R6是杂环基 MZAZ-(V8烷基-，其中杂环基是取代或未取代的氧代间二氧杂环戊烯基或N(R16) (R17)，其中 R16和R17 —起是烷基-Y-C^烷基，优选(V3烷基-Y-(V3烷基，从而形成环。在某些优选实施方案中，L是C = 0，Q不存在，M是。卜8烷基，R6选自(Rn0) (R120) P( = 0)o-c^烷基-、(R13)2N(V8烷基、(R13)3N+(V8烷基-和杂环基-M-。在某些该实施方案 中，R6是(RINCm烷基或(們冗‘烷基-，其中俨是^烷基。在某些其它该实施方案 中，R6是杂环基M-，其中杂环基选自吗啉代、哌啶子基、哌嗪基和吡咯烷。在某些实施方案中，L是C = 0，R5是(V6烷基，Q选自0和NH，R6选自烷基、环 烷基-M、(V6芳烷基和Cm杂芳烷基。在其它实施方案中，L是C = 0，R5是CM烷基，Q选 自0和NH，R6是Cm烷基，其中CM烷基选自甲基、乙基和异丙基。在其它实施方案中，L是 C = 0，R5是(V6烷基，Q选自0和NH和R6是(V6芳烷基，其中芳烷基是苯基甲基。在其它 实施方案中，L是C = 0。R5是Cm烷基，Q选自0和NH，R6是(V6杂芳烷基，其中杂芳烷基 是(4-吡啶基)甲基。在某些实施方案中，L不存在或是C = 0，R5和R6 —起是烷基-Y-C^烷基、 烷基-ZA-Ch烷基或Cm烷基-A，其中每个出现的Z和A分别不是共价键，从而形成环。在 某些优选实施方案中，L是C = 0，Q和Y不存在，R5和R6 —起是烷基-Y-C^烷基。在 其它优选实施方案中，L和Q不存在，R5和R6 —起是Ci_3烷基-Y-(V3烷基。在另外优选的 实施方案中，L是C = 0，Q不存在，Y选自NH和N-。烷基，R5和R6—起是(V3烷基 烷基。在另外的优选实施方案中，L是C = 0，Y不存在，R5和R6 —起是Ci_3烷基-Y-Ch烷 基。在另外优选实施方案中，L和A是C = 0，R5和R6 —起是Ci_2烷基-ZA-C^烷基。在另 外的优选实施方案中，L和A是C = 0，R5和R6 —起是C2_3烷基-A。在某些实施方案中，R2是(V6芳烷基，R1选自(V6烷基、Cm羟基烷基、CM烷氧基 烷基、芳基和cv6芳烷基，其任一被一个或多个酰胺、胺、羧酸(或其盐)、酯(包括Cm烷基 酯、Ci_5烷基酯和芳基酯)、硫醇或硫醚取代基取代。
在某些优选实施方案中，氨基酸的链具有式(XV)结构 其中L选自 C = 0、C = S 和 S02，优选C = 0 ；X是C00H或其活化形式，优选X是C00H、C0C1或CON (Me) (OMe)，最优选X是C00H 或 C0C1 ；Z不存在、(V6烷基、Cm烷氧基或NR，例如不存在、烷基或烷氧基，优选不 存在；R选自H禾口 Ch烷基，优选H或CH3 ；R1和R2分别选自氢、Cm烷基、C2_6烯基、C2_6炔基、(V6羟基烷基、CM烷氧基烷基、 芳基、Cm芳烷基、杂芳基、杂环基、(V6杂环烷基、CM杂芳烷基、碳环基和CM碳环烷基；R4选自氢、芳烷基和烷基；R5是杂芳基；和R6选自氢、烷基和芳烷基。在某些实施方案中，R1和R2分别选自氢、Cm烷基、CM羟基烷基、CH烷氧基烷基、 (V6芳烷基、cv6杂环烷基、(V6杂芳烷基和Cm碳环烷基。在某些实施方案中，R1和R2分别 (V6烷基，其选自甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基和异丁基。在某些实施方案中，R1和 R2分别是Cm羟基烷基。在某些优选的该实施方案中，R1和R2分别选自羟基甲基和羟基乙 基，优选羟基甲基。在某些实施方案中，R1和R2分别是(V6烷氧基烷基。在某些该实施方案 中，R1和R2分别选自甲氧基甲基和甲氧基乙基，优选甲氧基甲基。在某些实施方案中，R1和 R分别是Cm杂芳烷基。在某些该实施方案中，R1和R2分别选自咪唑基甲基、吡唑基甲基、 噻唑基甲基和吡啶基甲基，优选咪唑-4-基甲基、噻唑-4-基甲基、2-吡啶基甲基、3-吡啶 基甲基或4-吡啶基甲基。在某些实施方案中，R1和R2分别是(V6芳烷基。在某些该实施方 案中，R1和R分别选自苯基甲基(苄基)和苯基乙基，优选苯基甲基。在某些实施方案中， R1和R2分别是(V6碳环烷基。在某些该实施方案中，R1是环己基甲基。在某些实施方案中 R1和R2是不同的。在某些实施方案中，R1和R2是相同的。在某些实施方案中，R1和R2至少一个选自Cm羟基烷基和(V6烷氧基烷基。在某 些该实施方案中，R1和R2至少一个是烷氧基烷基。在某些该实施方案中，R1和R2至少一个 选自甲氧基甲基和甲氧基乙基。在某些实施方案中，R4和R6分别选自氢和甲基，优选氢。在某些实施方案中，R5是5或6元杂芳基，在某些该实施方案中，R5选自异噁唑、 呋喃、噻吩、噁唑、噻唑、吡唑或咪唑，优选异噁唑、呋喃或噻唑。在某些实施方案中，R5是二环杂芳基。在某些该实施方案中，二环杂芳基选自苯并 异噁唑、苯并噁唑、苯并噻唑、苯并异噻唑。
在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是1，3-噻唑_5_基或1，3_噻唑_4_基。 在某些该实施方案中，当噻唑被取代时，它至少在2位上被取代。在其它该实施方案中，R5 是未取代1，3-噻唑-5-基或1，3-噻唑-4-基。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是取代1，3_噻唑-5-基。在某些该 实施方案中，R5是取代1，3-噻唑-5-基，取代基选自Cm烷基、(V6烷氧基、CM烷氧基烷 基、Cm羟基烷基、羧酸、氨基羧酸酯、CM烷基氨基羧酸酯、(CM烷基)2氨基羧酸酯、CM烷 基羧酸酯、Cm杂芳烷基、(V6杂环烷基和CM碳环烷基。在某些优选的该实施方案中，R5是 取代1，3-噻唑-5-基，取代基选自甲基、乙基、异丙基和环丙基甲基。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是取代1，3_噻唑-4-基。在某些该 实施方案中，R5是取代1，3-噻唑-4-基，取代基选自Cm烷基、(V6烷氧基、CM烷氧基烷 基、Cm羟基烷基、羧酸、氨基羧酸酯、CM烷基氨基羧酸酯、(CM烷基)2氨基羧酸酯、CM烷 基羧酸酯、Cm杂芳烷基、(V6杂环烷基和CM碳环烷基。在某些优选的该实施方案中，R5是 取代1，3-噻唑-4-基，取代基选自甲基、乙基、异丙基和环丙基甲基。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是异噁唑-3-基或异噁唑-5-基。在 某些优选的该实施方案中，当异噁唑-3-基被取代时，它至少在5位上被取代。在某些优选 的该实施方案中，当异噁唑-5-基被取代时，它至少在3位上被取代。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是未取代异噁唑_3_基。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是取代异噁唑-3-基。在某些该实施 方案中，R5是取代的异噁唑-3-基，取代基选自(^烷基、烷氧基、烷氧基烷基、(V6 羟基烷基、羧酸、氨基羧酸酯、C^e烷基氨基羧酸酯、(CM烷基)2氨基羧酸酯、C^e烷基羧酸 酯、Cm杂芳烷基、(V6杂环烷基和CM碳环烷基。在某些优选的该实施方案中，R5是取代异 噁唑-3-基，取代基选自甲基、乙基、异丙基和环丙基甲基。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是4_6元含氮杂环烷基取代的异 噁唑-3-基。在某些该实施方案中，R5是氮杂环丁烷基，优选氮杂环丁烷-1-基取代的异噁 唑-3-基。在某些其它的该实施方案中，L是C = 0，Z不存在和R5是被如下取代基取代的 异噁唑-3-基 其中W是0、NR或CH2，R是H或(V6烷基。在某些该实施方案中，W是0。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是5元含氮杂环烷基，例如吡唑 基甲基、咪唑基甲基、三唑-5-基甲基，优选1，2，4-三唑-5-基甲基取代的异噁唑-3-基。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是Cm烷氧基或烷氧基烷基，优 选甲氧基、乙氧基、甲氧基甲基或甲氧基乙基取代的异噁唑-3-基。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是(V6羟基烷基，优选羟基甲基或羟 基乙基取代的异噁唑-3-基。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是羧酸、氨基羧酸酯、烷基氨基羧 酸酯、(CV6烷基)2氨基羧酸酯或Cm烷基羧酸酯取代的异噁唑-3-基。在某些该实施方案 中，R5被甲基羧酸酯或乙基羧酸酯，优选甲基羧酸酯取代。
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在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是未取代异噁唑_5_基。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是取代异噁唑-5-基。在某些该实施 方案中，R5是取代异噁唑-5-基，取代基选自CM烷基、C^e烷氧基、C^e烷氧基烷基、C^e羟 基烷基、羧酸、氨基羧酸酯、Cm烷基氨基羧酸酯、(CV6烷基)2氨基羧酸酯、CM烷基羧酸酯、 (V6杂芳烷基、Cm杂环烷基和CM碳环烷基。在某些优选的该实施方案中，R5是取代异噁 唑-5-基，取代基选自甲基、乙基、异丙基和环丙基甲基。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是4_6元含氮杂环烷基取代的异 噁唑-5-基。在某些该实施方案中，R5是氮杂环丁烷基，优选氮杂环丁烷-1-基取代的异噁 唑-5-基。在某些其它的该实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是如下取代基取代的异噁 唑-5-基 其中W是0、NR或CH2，R是H或(V6烷基。在某些该实施方案中，W是0。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是5元含氮杂芳基，例如吡唑基 甲基、咪唑基甲基、三唑-5-基甲基，优选1，2，4-三唑-5-基甲基取代的异噁唑-5-基。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是烷氧基或烷氧基烷基，优 选甲氧基、乙氧基、甲氧基甲基或甲氧基乙基取代的异噁唑-5-基。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是(V6羟基烷基，优选羟基甲基或羟 基乙基取代的异噁唑-5-基。在某些实施方案中，L是C = 0，Z不存在，R5是羧酸、氨基羧酸酯、Cm烷基氨基羧 酸酯、(CV6烷基)2氨基羧酸酯或Cm烷基羧酸酯取代的异噁唑-5-基。在某些该实施方案 中，R5被甲基羧酸酯或乙基羧酸酯，优选甲基羧酸酯取代。在某些实施方案中，Z是NR，优选NH。酶抑制剂的用涂有序蛋白质降解对保持正常细胞功能是至关重要的，蛋白酶体对蛋白质降解过程 是整体需要的。蛋白酶体控制对细胞周期进程重要的蛋白质含量和正常和迁移细胞的凋 亡；例如细胞周期蛋白、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶、BCL2和nF-kB(Kumat0ri等，Proc.Natl. Acad. Sci. USA (1990) 87 :7071_7075 ；Almond 等，Leukemia (2002) 16 :433_443)。因此，人们 不惊讶制备蛋白酶体活性可转变成处理各种疾病状态，例如根据所包含的细胞恶性、良性 和自身免疫疾病的治疗。体外和体内模型均显示恶性细胞通常易感于蛋白酶体抑制，事实上，蛋白酶体抑 制作为治疗多发性骨髓瘤的治疗策略已经得到确认，这部分是由于高增生恶性细胞对蛋 白酶体体系的依赖性以迅速除去蛋白质(Rolfe等，J. Mol. Med. (1997)75 5-17 ；Adams. Nature (2004) 4 :349_360)。因此，本发明的某些实施方案涉及治疗癌症的方法，其包括 向需要该治疗的患者给药有效量的本文公开的蛋白酶体抑制剂化合物。用于本文的术 语“癌症”包括，但不限于，血液、骨骼和实体瘤。癌症涉及血液、骨骼、器官、皮肤组织和 血管系统的疾病，包括，但不限于，膀胱、血液、骨骼、脑、乳房、宫颈、胸廓、结肠、子宫内膜 (endrometrium)、食管、眼、头、肾、肝、肺、淋巴结、口腔、颈、卵巢、胰、前列腺、直肠、肾脏、皮肤、胃、睾丸、喉管和子宫的癌。具体癌症包括，但不限于，白血病(急性淋巴细胞白血病 (ALL)、急性髓性白血病(AML)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、慢性髓性白血病(CML)、毛细胞 白血病)、成熟B细胞肿瘤(小淋巴细胞淋巴瘤、B细胞幼淋巴细胞白血病、淋巴质浆细胞淋 巴瘤(例如Waldenstrom巨球蛋白血症、脾边缘区淋巴瘤、浆细胞骨髓瘤、浆细胞瘤、单克隆 免疫球蛋白沉积病、重链疾病、结节外边缘区B细胞淋巴瘤(MALT淋巴瘤)、结节边缘区B细 胞淋巴瘤(NMZL)、小囊淋巴瘤、外套细胞淋巴瘤、扩散B细胞淋巴瘤、纵隔(胸腺)大B细 胞淋巴瘤、血管内大B细胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤和Burkitt淋巴瘤/白血病)、成 熟T细胞和天然杀手(NK)细胞肿瘤(T细胞幼淋巴细胞白血病、T细胞大粒状淋巴细胞白 血病、攻击性NK细胞肿瘤、成熟T细胞白血病/淋巴瘤、结节外NK/T细胞淋巴瘤、肠病型T 细胞淋巴瘤、肝脾T细胞淋巴瘤、原始细胞NK细胞淋巴瘤、蕈样肉芽肿病(塞扎里综合征)、 原发皮肤间变性大细胞淋巴瘤、淋巴瘤样丘疹病、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤、非特异 末梢T细胞淋巴瘤和间变性大细胞淋巴瘤)、霍奇金淋巴瘤(结节性硬化型、混合何杰金氏 病、富淋巴细胞、淋巴细胞衰竭或未衰竭、结节性淋巴细胞突出)、骨髓瘤(多发性骨髓瘤、 无痛性骨髓瘤、郁积型骨髓瘤)、慢性骨髓增生性疾病、骨髓发育不良/骨髓增生性疾病、骨 髓增生异常综合征、免疫缺陷相关的淋巴组织增殖性疾病、组织细胞和树突细胞肿瘤、肥大 细胞增多、软骨肉瘤、尤因肉瘤、纤维肉瘤、恶性巨细胞瘤、骨髓瘤骨病、骨肉瘤、乳腺癌(激 素依赖、非激素依赖)、妇科癌(颈部、子宫内膜、输卵管、妊娠滋养细胞疾病、卵巢、腹膜、子 宫、阴道和外阴)、基底细胞癌(BCC)、鳞状细胞癌(SCC)、恶性黑色素瘤、隆突性皮肤纤维肉 瘤、Merkel细胞癌、卡波西肉瘤、星形细胞瘤、纤维状细胞星形细胞瘤、胚胎发育不良性神 经上皮瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤、多形性胶质母细胞瘤、混合神经胶质瘤、寡星状细胞 瘤、髓母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、神经母细胞瘤、生殖细胞瘤、畸胎瘤、恶性间皮瘤(腹膜 间皮瘤、心包间皮瘤、胸膜间皮瘤)、胃肠胰神经内分泌肿瘤(GEP-NET)、类癌、胰腺内分泌 肿瘤(PET)、结肠直肠腺癌、结肠癌、侵略性神经内分泌肿瘤、平滑肌肉瘤粘蛋白腺癌、印戒 细胞腺癌、肝细胞癌、胆管上皮癌、肝母细胞瘤、血管瘤、肝腺瘤、局限性结节状增生(结节 性再生性增生、错构瘤)、非小细胞肺癌(NSCLC)(扁平细胞肺癌、腺癌、大细胞肺癌)、小细 胞肺癌、甲状腺癌、前列腺癌(激素抗拒、雄激素不依赖、雄激素依赖、非敏感性激素)和软 组织肉瘤(纤维肉瘤、恶化纤维组织细胞瘤、皮肤纤维肉瘤、脂肪肉瘤、横纹肌肉瘤、平滑肌 肉瘤、血管肉瘤、滑膜肉瘤、恶性末梢神经鞘瘤/神经纤维肉瘤、骨外骨肉瘤)。造血和淋巴细胞的许多肿瘤以增加的细胞增殖或特定类型的细胞为特征。慢性骨 髓增生性疾病(CMPD)是以一种或多种骨髓谱系的骨髓增殖，引起增加数量的末梢血中的 粒细胞、红血细胞儿/或血小板为特征的克隆造血干细胞症状。因此，使用治疗该疾病的 蛋白酶体抑制剂是有吸引力和被验证(Cilloni等，Haematologica(2007)92 =1124-1229)。 CMPD可包括慢性骨髓内白血球过多症、慢性嗜中性白血球过多症、慢性嗜酸性白血球过多 症、真性红血球增多症、慢性特发性黄瘤病骨髓纤维化、原发血小板增多和未分类慢性骨髓 增生性疾病。本发明的一个方面是治疗CMPD的方法，其包括向需要该治疗的患者给药有效 量的本文公开的蛋白酶体抑制剂化合物。骨髓发育不良/骨髓增生疾病，例如慢性骨髓单核细胞性白血球过多症和未分类 骨髓发育不良/骨髓增生疾病，由于一种或多种骨髓谱系的增生，以骨髓的细胞过多为特 征。通过向需要该治疗的患者提供有效量的用本文描述的组合物，抑制蛋白酶体可用作治疗这些骨髓发育不良/骨髓增生疾病。骨髓增生异常综合征(MDS)涉及以一种或多种成年髓样细胞系发育异常和无效造 血作用为特征的一组造血干细胞症状。在这些恶性血液病中用蛋白酶体抑制剂靶向NF-kB 诱导细胞凋亡，从而杀死恶性细胞(Braun等，Cell Death and Differentiation(2006) 13 748-758)。本发明的另一实施方案涉及治疗MDS的方法，其包括向需要该治疗的患者给药 有效量的本文公开的化合物。MDS包括难治性贫血、具有环形铁粒幼红细胞的难治疗贫血、 具有多谱系发育异常的难治性血细胞减少、具有过多胚细胞的难治疗贫血、未分类骨髓增 生异常综合征和与离休缺失(5q)染色体异常有关的骨髓增生异常综合征。肥大细胞增多症是肥大细胞增殖及其随后在一种或多种器官系统中的堆积。肥大 细胞增多症包括，但不限于，皮肤肥大细胞瘤、静止性系统性肥大细胞增多症(ISM)、与克隆 血液学非肥大细胞谱系疾病(SM-AHNMD)相关的系统性肥大细胞增多症、侵略性系统性肥 大细胞增多症(ASM)、肥大细胞白血病(MCL)和肥大细胞肉瘤(MCS)和末端皮肤肥大细胞 瘤。本发明的另一实施方案中治疗肥大细胞增多症的方法，包括向诊断为肥大细胞增多症 的患者给药有效量的本文公开的化合物。蛋白酶体调节NF-KB，进而调节在免疫和炎症应答中包含的基因。例如，NF-KB 对于免疫球蛋白轻链K基因、IL-2受体a-链基因、I类主要组织相容性复合体基因和 编码例如IL-2、IL-6、粒细胞集落刺激因子和IFN-0的许多细胞因子基因的表达是必需 的(Palombella等，Cell(1994)78 :773-785)。因此，在某些实施方案中，本发明涉及影响 IL-2、MHC-I、IL-6、TNFa、IFN-0或任何其它上述蛋白质表达水平的方法，其包括向患者 给药有效量的本文所述的蛋白酶体抑制剂组合物。在某些实施方案中，本发明包括在哺乳 动物中治疗自身免疫疾病的方法，包括给药治疗有效量的本文所述的化合物。本文的“自身 免疫疾病”是个体自身组织产生和定向的疾病或症状。自身免疫疾病或症状的实例包括， 但不限于，炎症应答，例如炎症性皮肤病，包括银屑病和皮炎(例如变应性皮炎)；系统性硬 皮病和硬化；与炎性肠病有关的响应(例如局限性肠炎和溃疡性结肠炎)；呼吸窘迫综合征 (包括成人呼吸窘迫综合征、ARDS)；皮炎；脑膜炎；脑炎；葡萄膜炎；大肠炎；肾小球肾炎； 过敏症状，例如湿疹和哮喘和其它症状，包括T细胞渗入和慢性炎症应答；动脉粥样硬化； 白细胞粘附缺陷；风湿性关节炎；全身性红斑狼疮(SLE)；糖尿病(例如I型糖尿病或胰岛 素依赖性糖尿病)；多发性硬化；Reynaud综合征；自身免疫性甲状腺炎；变应性脑脊髓炎； Sjorgen综合征；青少年糖尿病；与通常在结核病、结节病、多肌炎、肉芽肿病和血管炎中发 现的细胞因子和T-淋巴细胞传递的急性和迟发型超敏反应相关的免疫应答；恶性贫血(艾 迪生病)；包含白细胞血细胞渗出的疾病；中枢神经系统(CNS)炎性症状；多器官损伤综合 征；溶血性贫血(包括，但不限于，球蛋白冷球蛋白血症(cryoglobinemia)或Coombs正贫 血)；重症肌无力；抗原抗体复合物传递的疾病；抗肾小球基膜疾病；抗磷脂综合征；变应 性神经炎；格雷夫斯病；Lambert-Eaton肌无力综合征；类天疱疮；大疱性天疱疮；自身免 疫多内分泌腺病；赖特尔病；僵人综合征；Beheet病；巨细胞动脉炎；免疫复合物肾炎；IgA 肾病；IgM多发性神经病；免疫性血小板减少紫癜(ITP)或自身免疫血小板减少症。免疫系统对病毒感染的自身细胞的筛选进行了致癌性转化或在其表面存在非家 庭肽。细胞内蛋白分解产生小肽提供给T淋巴细胞以诱导I类MHC传递的免疫应答。因此， 在某些实施方案中，本发明涉及在细胞中用化合物作为免疫调节剂抑制或改变抗原呈递的方法，包括使细胞(或向患者给药)暴露于本文所述的化合物。具体实施方案包括在哺乳 动物中治疗移植相关的疾病，例如移植物抗宿主病或宿主抗移植物病，包括给药治疗有效 量的本文描述的化合物。用于本文的术语“移植”是指基于供体的生物学材料移植到受体。 移植包括该不同材料，例如分离的细胞，例如小岛细胞；组织，例如新生儿羊膜、骨髓、造血 前体细胞和眼睛组织，例如角膜组织；和器官，例如皮肤、心脏、肝、脾、胰、甲状腺裂片、肺、 肾、管状器官(例如肠、血管或食道)。管状器官可用于替代食管、血管或胆管的损坏部分。 皮肤移植不仅可用于烧伤，还可用于包扎损坏的肠或封闭某个缺陷，例如隔膜疝。移植物来 自任何哺乳动物源，包括人，无论是尸体或活体供体，在某些情况下，供体和宿主是相同的 哺乳动物。移植物优选是骨髓或器官，例如心脏，移植物的供体和宿主进行HLAII类抗原配 对。组织细胞和树突细胞肿瘤由吞噬细胞和附属细胞产生，它们在进程和向淋巴细 胞供给抗原中起主要作用。减少树突细胞中蛋白酶体含量显示改变了其抗原诱导响应 (Chapatte等，Cancer Res. (2006)66:5461-5468)。因此，本发明的另一实施方案包括向患 有组织细胞或树突细胞肿瘤的患者给药有效量的本文所述的组合物。组织细胞和树突细胞 肿瘤包括组织细胞肉瘤、Langerhans细胞综合征、Langerhans细胞肉瘤、交错树突细胞肉 瘤/肿瘤、小结树突细胞肉瘤/肿瘤和非特异树突细胞肉瘤。蛋白酶体的抑制已显示有益于治疗其中细胞类型增殖的疾病和免疫症状，因此， 本发明的实施方案包括治疗与初次免疫症状(PID)相关的淋巴细胞增生性疾病，其包括向 需要的患者给药有效量的公开的化合物。与淋巴组织增殖性疾病，包括B细胞和T细胞肿 瘤和淋巴瘤增加的发病率相关的免疫缺陷的最常见临床情况是原发性免疫缺陷综合征和 其它原发性免疫疾病、感染人免疫缺陷病毒(HIV)、接受实体器官或骨髓异体移植患者的医 源性免疫抑制和与甲氨蝶呤治疗相关的医源性免疫抑制。通常与LPD相关的其它PID是， 但不限于，运动失调性毛细血管扩张症(AT)、Wiskott-Aldrich综合征(WAS)、普通可变型 免疫缺陷(CVID)、重症联合免疫缺陷(SCID)、X连锁淋巴组织增生症(XLP) .Nijmegen染色 体断裂综合征(NBS)、高IgM综合征和自身免疫淋巴细胞增生综合征(ALPS)。本发明的附加实施方案涉及影响癌基因蛋白的蛋白酶体依赖型调节和治疗或抑 制癌生长的方法，每个方法包括将细胞(体内，例如在患者中或体外)暴露于本文公开的蛋 白酶体抑制剂组合物。HPV-16和HPV-18衍生的E6蛋白质刺激天然网红细胞裂解物中p53 的ATP-和泛素依赖的接合和降解，已显示隐性癌基因p53在非许可温度下与突变的不耐热 E1 一起堆积在细胞系中，提高的p53含量会导致细胞凋亡。由泛素系统退化的原始癌基因 蛋白的实例包括c-Mos、c-Fos和c-Jim。在某些实施方案中，本发明涉及治疗p53相关细 胞凋亡的方法，包括向患者给药有效量的本文公开的蛋白酶体抑制剂组合物。本发明的另一方面涉及本文公开的蛋白酶体抑制剂组合物治疗神经变性疾病或 症状的用作，所述疾病或症状包括，但不限于，中风、神经系统的缺血性损伤、神经创伤(例 如冲击脑损伤、脊髓损伤和神经系统的外伤伤害)、多发性硬化和其它免疫传递的神经病 (例如格_巴二氏综合征及其变种、急性运动轴索神经病、急性炎性脱髓鞘性多神经病和菲 希尔综合征)、HIV/AIDS痴呆复合体、axonomy、糖尿病神经病变、帕金森病、亨廷顿病、多发 性硬化、细菌、寄生虫、真菌和病毒脑膜炎、脑炎、血管性痴呆、多发性梗塞性痴呆、Lewy体痴 呆、额叶痴呆，例如皮克氏病、皮质下痴呆(例如亨廷顿或进行性核上麻痹)、局部皮质萎缩综合征(例如原发失语症)、代谢中毒痴呆(例如慢性甲状腺功能减退症或B12缺乏)和感 染引起的痴呆(例如梅毒或慢性脑膜炎)。早老性痴呆以0 -淀粉样蛋白(0 -AP)在衰老斑和脑血管的细胞外沉积为牲特 征，0 -AP是由淀粉样蛋白前体(APP)产生的39-42个氨基酸的肽片段，已知至少3个APP 亚型(695、751和770氨基酸)。mRNA的选择性剪切产生亚型；正常加工影响部分0 _AP序 列，从而防止产生日-AP。人们相信在早老性痴呆脑中由于蛋白酶体引起的异常蛋白质加 工产生大量日-AP。在大鼠中APP-加工酶含有约10个不同亚单元(22kDa-32kDa)，25kDa 亚单元具有 N-末端序列 X-Gln-Asn-Pro-Met-X-Thr-Gly-Thr-Ser，它与人体 macropain 的
亚单元相同(Kojima.S.等，Fed. Eur. Biochem. Soc，(1992) 304 :57_60)。APP 加工酶在 Gin15—Lys16键断裂，在钙离子存在下，酶还在Met-L-Asp1键和AspL-Ala2键断裂以释放 B-AP的胞外域。因此，本发明的一方面涉及治疗早老性痴呆的方法，包括向患者给药有效量的本 文公开的蛋白酶体抑制剂组合物。该治疗包括降低0-AP加工速率、降低0-AP蚀斑形成 速率、降低0 "AP传代速率和降低早老性痴呆的临床征兆。纤维化是由于成纤维细胞的过增生生长产生的纤维结缔组织的过量和持久形成， 与TGF-0信号途径的活化有关。纤维化包含胞外基质的广泛沉积，事实上可发生在任何组 织或横跨若干不同组织。通常活化TGF-0刺激的靶基因转录的胞内信号蛋白质(Smad)的 水平由蛋白酶体活性调节(Xu等，2000)，然而，在纤维变性症状，例如囊性纤维化病、注射 纤维化、心内膜心肌纤维化症、特发性肺纤维化、骨髓纤维化、腹膜后纤维化、进行性块状纤 维变性、肾发生全身性纤维化中已观察到TGF-0信号组分的加速降解。通常与纤维化相关 的其它症状包括肝感化、弥散实质肺病、输精管切除术后疼痛综合征、结核、镰刀形红细胞 贫血病和类风湿关节炎。本发明的实施方案是治疗纤维变性或纤维变性相关症状的方法， 包括向需要该治疗的患者给药有效量的本文所述的组合物。烧伤患者的治疗通常被纤维化妨碍，因此，在某些实施方案中，本发明涉及抑制剂 的局部或全身给药以治疗烧伤。外科手术后烧伤创面愈合通常与毁损疤痕有关，因此，在某 些实施方案中，本发明涉及预防或降低疤痕的方法。脂多糖(LPS)诱导的细胞因子，例如TNFa的过度产生被认为与脓毒性休克相关 的过程是重要的，此外，通常公认的是LPS细胞活化的第一步是LPS结合于特定膜受体， 20S蛋白酶体复合物的a-和0亚单元被确定为LPS结合蛋白质，从而提议LPS诱导的 信号传导可能是治疗或预防脓毒症的重要治疗靶点(Qureshi.N等，J. Immun. (2003) 171 1515-1525)。因此，在某些实施方案中，蛋白酶体抑制剂组合物可用于抑制TNFa以预防和 /或治疗脓毒性休克。缺血和再灌注损伤产生于缺氧，一种存在到达身体组织的氧缺乏的症状，该症状 导致增加的I k -B a降解，从而产生NF- K B的活化(Koong等，1994)。已经证明缺氧引起 的损伤严重性可通过给药蛋白酶体抑制剂降低(Gao等，2000 ；Bao等，2001 ；Pye等，2003)。 因此本发明的某些实施方案涉及治疗缺血性症状或再灌注损伤的方法，包括向需要该治疗 的患者给药有效量的本文公开的蛋白酶体抑制剂化合物。该症状或损伤的实例包括，但不 限于，急性冠状动脉综合征(易损小半鞘翅)、动脉阻塞性疾病(心脏、大脑、末梢动脉和血 管闭塞)、动脉粥样硬化(冠状动脉感化、冠状动脉病)、梗塞、尽力衰竭、胰腺炎、心肌肥大、狭窄和再狭窄。NF- k B还特异结合于HIV增强子/启动子，与mac239的Nef相比，pbj 14的HIV 调节蛋白质Nef在控制蛋白激酶结合区域的两个氨基酸不同，认为蛋白激酶发出1KB磷酰 化的信号，通过泛素_蛋白酶体途径触发1KB降解。降解后，NF-k B释放至神经核，从而提 高HIV的转录(Cohen. J. Science. (1995)267:960)。在某些实施方案中，本发明涉及抑制 或降低患者HIV感染的方法或降低病毒基因表达水平的方法，每个方法包括向患者给药有 效量的本文公开的蛋白酶体抑制剂组合物。病毒感染促成许多疾病病理学，心脏病，例如进行性心肌炎和扩张型心肌病与柯 萨奇病毒B3相关联。在感染的小鼠心脏全基因组微点阵比较分析中，在小鼠心脏中特定蛋 白酶体亚单元一致向上调节，这发展为慢性心肌炎(Szalay等，Am J Pathol 168:1542-52， 2006)。某些病毒在病毒进入步骤中利用泛素_蛋白酶体系统，病毒由核内体释放入胞质 溶胶中。小鼠肝炎病毒(MHV)属于冠状病毒科家族，它还诱导严重急性呼吸综合征(SARS) 冠状病毒。Yu和Lai(J Virol 79 =644-648,2005)证明，与未治疗的细胞相比，用蛋白酶体 抑制剂治疗HMV感染的细胞导致病毒复制下降，伴随着降低的病毒效价。人乙型肝炎病毒 (HBV)，一种嗜肝病毒科病毒家族成员，同样需要病毒编码的包膜蛋白以进行繁殖。抑制蛋 白酶体降低途径导致分泌的包膜蛋白数量明显下降(Simsek等，J Virol79 12914-12920， 2005)。除HBV外，其它肝炎病毒(A、C、D和E)也利用泛素-蛋白酶体降解途径进行分泌、 形态发生和发病机制。因此，在某些实施方案中，本发明涉及治疗病毒感染，例如SARS或肝 炎A、B、C、D和E的方法，包括使细胞与有效量本文公开的化合物接触(或向患者给药)。在某些实施方案中，公开的组合物可用于治疗寄生虫感染，例如原生动物寄生 虫引起的感染。这些寄生虫的蛋白酶体被认为主要与细胞分化和复制活动有关(Paugam 等，Trends Parasitol. 2003. 19(2) :55_59)。此外，已显示内阿米巴属种在暴露于蛋白 酶体抑制剂时失去成囊能力(Gonzales 等，Arch. Med. Res. 1997. 28. Spec No 139-140)。 在某些该实施方案中，蛋白酶体抑制剂组合物的给药方案用于治疗人体原生动物寄生 虫引起的寄生虫感染，所述寄生虫选自疟原虫(Plasmodium)属(包括P. falciparum、 P. vivax> P. malariae 禾口 P. ovale,胃弓双)、！(Trypanosoma)属(T. cruzi, 其引起Chagas病，以及T. brucei,其引起非洲昏睡病)、利什曼原虫(Leishmania) 属(包括 L. amazonesis、L. donovani> L. infantum、L. mexicana 等)、卡氏月市囊虫 (Pneumocystiscarinii)(已知在AIDS和其它免疫抑制患者中引起肺炎的原生动物)、鼠 弓形虫(Toxoplasma gondii)、溶组织内阿米巴(Entamoeba histolytica)、两栖类内阿米 巴(Entamoeba invadens)和兰伯贾第虫(Giardia Iambiia) 在某些实施方案中，公开 的蛋白酶体抑制剂组合物用于治疗动物和家畜由原生动物寄生虫引起的寄生虫感染，所述 寄生虫选自疟原虫(Plasmodiumhermani)、隐孢子虫(Cryptosporidium)属、细粒棘球绦 虫(Echinococcusgranulosus)、禽艾美球虫(Eimeria tenella)、肉抱子虫(Sarcocystis neurona)和粗糙链孢霉(Neurospora crassa) 0作用治疗寄生虫病的蛋白酶体抑制剂的其 它化合物在W0 98/10779中描述，其全文列为本文参考文献。在某些实施方案中，蛋白酶体抑制剂组合物在寄生虫中抑制蛋白酶体活性而不在 红血细胞和白血细胞中恢复。在某些该实施方案中，血细胞的长半衰期可提供对再次暴露 于寄生虫方面治疗的延长防护。在某些实施方案中，蛋白酶体抑制剂组合物可提供对进一
40步感染的化学防护方面的延长保护。原核生物相等于真核生物20S蛋白酶体微粒，尽管原核生物20S微粒的亚单元 组分小于真核生物，但它具有以类似方式水解肽键的能力，例如对肽键的亲核攻击通过 3 -亚单元的N-末端上的苏氨酸残基发生。因此，本发明的实施方案涉及治疗原核生物感 染的方法，包括向患者给药有效量的本文公开的蛋白酶体抑制剂组合物。原核生物感染可 包括由分枝杆菌(例如结核病、订风或布路里溃疡)或古细胞导致的疾病。已经证明结合于20S蛋白酶体的抑制剂刺激骨器官培养物中的骨形成，此外， 当该抑制剂向小鼠全身性给药时，某些蛋白酶体抑制剂增加骨体积和成骨速率超过70% (Garrett. I. R.等，J Clin. Invest. (2003) 111 :1771_1782)，从而说明泛素-蛋白酶体机制 调节成骨细胞分化和骨形成。因此，公开的蛋白酶体抑制剂组合物可用于治疗和/或预防 与骨丢失，例如骨质疏松相关的疾病。因此，在某些实施方案中，本发明涉及治疗选自癌症、自身免疫疾病、移植相关症 状、神经变性疾病、纤维变性相关症状、缺血性相关症状、感染(病毒、寄生虫或原核生物) 和与骨丢失相关疾病的疾病或症状的方法，包括给药式(II )的结晶化合物。如本文所述制备的化合物可以各种形式给药，取决于所治疗的疾病和患者的年 龄、症状和体重，是本领域已知的。例如，在化合物口服给药时，它们可配制成片剂、胶带、颗 粒、粉末或糖浆；用于肠胃外给药时，它们可配制成注射剂(静脉内、肌内或皮下)、滴剂输 液制剂或栓剂；经眼粘膜途径施用时，可配制成眼滴剂或眼软膏。这些制剂可用常规方法制 备，如果需要，活性成分可与任何常规添加剂或赋形剂，例如粘合剂、崩解剂、润滑剂、矫味 剂、增溶剂、悬浮助剂、乳化剂、涂层剂、环糊精和/或缓冲剂混合。虽然课题将根据患者的 症状、年龄和体重、所治疗或预防疾病的性质和严重性、给药途径和药物形式变化，但对于 成人患者，建议0. 01-2000mg化合物的是剂量，可以单份剂量或分份剂量给药。可与载体材 料混合以生产单份剂量形式的活性成分的量通常为产生治疗效果的化合物的量。对特定患者在治疗有效性方面产生最有效结果的给药精确时间和/或组合物的 数量将取决于具体化合物的活性、药动学和生物可利用率、患者的生理条件(包括年龄、性 别、疾病类型和阶段、一般身体健康状况、对给定剂量的应答性和药物治疗的类型)、给药途 径等。然而，上述指导方针可服务体系细调治疗，例如决定最佳时间和/或给药量的基础， 细调将只需要常规实验，包括监测患者和调节剂量和/或时间。用于本文的术语“可药用的”是指那些配位体、材料、组合物和/或剂量形式，它们 在有效的医生判断范围内适用于与人体和动物的组织接触，没有过量毒性、刺激性、过敏响 应或其它问题或并发症，与合理效果/风险比相当。用于本文的短语“可药用的载体”是指可药用的材料、组合物或赋形剂，例如液体 或固体填料、稀释剂、赋形剂、溶剂或包胶囊材料。每个载体在与配方的其它成分相容和对 患者没有伤害方面必须是“可接受的”。可用途可药用的载体的材料的部分实例包括(1) 糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，例如玉米淀粉、马铃薯淀粉和取代或未取代环 糊精；(3)纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和纤维素乙酸酯；(4)粉 末黄芪胶；(5)麦芽；(6)明胶；(7)滑石；(8)油，例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄 榄油、玉米油和大豆油；(10) 二醇类，例如丙二醇；(11)多元醇，例如甘油、山梨糖醇、甘露 醇和聚乙二醇；(12)酯，例如油酸乙酸酯和乳酸乙酸酯；(17)等张盐水；(18)Ringer溶液；(19)乙醇；(20)磷酸缓冲液和(21)其它用于药物制剂的无毒相容物质；和(21)其它用于 药物配方的无毒相容性物质。在某些实施方案中，本发明的药物组合物是不发热的，即在向 患者给药时不引起明显的温度升高。术语“可药用的盐”是指抑制剂相对无毒的无机和有机酸加成盐，这些盐可在抑制 剂的最终分离和纯化过程中就地制备，或通过单独的使游离碱形式的纯化的抑制剂与合适 的有机或无机酸反应并分离由此形成的盐制备。代表性的盐包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸 盐、硫酸氢盐、磷酸盐、硝酸盐、乙酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、苯 甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、 萘甲酸盐、甲磺酸盐、葡庚糖酸盐、乳糖酸盐、十二烷基磺酸盐和氨基酸盐等。(参见例如 Berge 等，(1977) ‘‘Pharmaceutical Salts，，，J. Pharm. Sci. 66 :1_19)。在某些情况下，用于本发明方法的抑制剂可含有一个或多个酸性官能团，因此，能 够与可药用的碱形成可药用的盐。在这些情况下的术语“可药用的盐”是指抑制剂的相对 无毒的无机和有机碱加成盐。这些盐同样可在抑制剂的最终分离和纯化过程中就地制备， 或单独地通过使游离酸形式的纯化的抑制剂与合适的碱，例如可药用的金属阳离子的氢氧 化物、碳酸盐或碳酸氢盐、氨或可药用的有机伯、仲或叔胺反应制备。代表性的碱金属或碱 土金属盐包括锂、钠、钾、钙、镁和铝盐等，用于形成碱加成盐的代表性有机胺包括乙胺、二 乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等(参见例如Berge等，如上)。增湿剂、乳化剂和润滑剂，例如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂、释放剂、 涂层剂、增甜、调味和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可存在于组合物中。可药用的抗氧化剂的实例包括(1)水溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸、半胱氨酸盐 酸盐、硫酸氢钠、偏亚硫酸氢钠、亚硫酸氢钠等；(2)油溶性抑制剂，例如抗坏血酸棕榈酸 酯、酰基化羟基茴香醚(BHA)、丁基化羟基甲苯(BHT)、卵磷脂、丙基没食子酸酯、a生育酚 等；和⑶金属螯合剂，例如柠檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨醇、酒石酸、膦酸等。适合于口服给药的制剂可以是胶囊、扁囊剂、丸剂、片剂、糖锭(使用香料基质，通 常为蔗糖、阿拉伯树胶或黄芪胶)、粉末、颗粒或作为在含水或非水液体中的溶液或悬浮液， 或作为油包水或水包油液体乳液或作为酏剂或糖浆，或作为锭剂(例如惰性基质，例如明 胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯树胶)和/或嗽口水等，每个含有预定量的抑制剂作为活性成 分。组合物还可作为推注、煎膏剂或糊剂给药。在用于口服给药的固体剂量形式(胶囊、片剂、丸剂、糖衣丸、粉末、颗粒等)中， 活性成分与一种或多种可药用的载体，例如柠檬酸钠或磷酸氢二钙和/或任何如下组分混 合(1)填料或添加物，例如淀粉、环糊精、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；(2)粘合 剂，例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯树胶；⑶湿润 剂，例如甘油；(4)崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、褐藻酸、某些硅酸盐和碳 酸钠；(5)溶液延迟剂，例如石蜡；(6)吸收加速剂，例如季铵化合物；(7)增湿剂，例如乙酰 基醇和甘油单硬脂酸酯；(8)吸收剂，例如高岭土和膨润土； (9)润滑剂，例如滑石、硬脂酸 钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠和它们的混合物和(10)着色剂。在胶囊、片 剂和丸剂的情况下，药物组合物还可含有缓冲剂。类似类型的固体组合物还可用作填料软 和硬填充明胶胶囊的填料，使用赋形剂，例如乳糖或奶糖以及高分子聚乙二醇等。片剂可通过压制或成型，任选与一种或多种附加成分一起制备。压制的片剂可用
42粘合剂(例如明胶或羟丙基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如淀粉 乙醇酸钠或交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂制备。成型片剂可通过在合适的机 器中成型用惰性液体稀释剂润湿的粉末抑制剂制备。片剂和其它固体剂量形式，例如糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒，可任选划痕或用涂层 或壳，例如肠涂层和其它药物配制技术中已知的涂层制备。它们还可配制成提供活性成分 的缓慢或控制释放，其中例如使用改变比例的羟丙基甲基纤维素以提供所需的释放曲线、 其它聚合物基质、脂质体和/或微球体。它们可通过例如经细菌保留过滤器或通过加入杀 菌剂以无菌固体组合物的形式杀菌，在使用前它们可直接溶解在无菌水或某些其它无菌注 射介质中。这些组合物还可任选含有遮光剂，可以是仅仅或优选在肠胃道的某些部分，任选 以延迟方式释放活性成分。可使用的植入组合物的实例包括聚合物和蜡，如果需要，活性成 分还可以是含有一种或多种上述赋形剂的微胶囊形式。用于口服给药的液体剂量形式包括可药用的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和 酏剂。除活性成分外，液体剂量形式可含有本领域常用的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂、 增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、乙基碳酸酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苄基苯甲酸酯、丙二 醇、1，3_ 丁二醇、油(尤其是棉籽、落花生、玉米、胚芽、橄榄、蓖麻和芝麻油)、甘油、四氢呋 喃醇、聚乙二醇和脱水山梨醇的脂肪酸酯和它们的混合物。除惰性稀释剂外，口服组合物还可包括辅料，例如增湿剂、乳化和悬浮剂、增甜、调 味、着色、香料和防腐剂。除活性成分外，悬浮液可含有悬浮剂，例如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和 脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄芪胶和它们的混合物。用于直肠和阴道给药的配方可作为栓剂制备，它们可通过混合一种或多种抑制剂 与一种或多种合适的非刺激性赋形剂或载体制备，所述赋形剂或载体包括，例如，可可脂、 聚乙二醇、栓剂蜡或水杨酸盐，它们在室温下是固体，但在体温下是液体，从而将在直肠或 阴道腔中熔融，释放活性成分。适用于阴道给药的配方还包括含有本领域已知的合适载体的子宫托、止血垫、乳 液、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾配方。用于抑制剂局部或皮下给药的剂量形式包括粉末、喷雾剂、软膏、糊剂、乳剂、洗 液、凝胶、溶液、扁平胶囊和吸入剂。活性成分可在无菌条件下与可药用的载体和与任何防 腐剂、缓冲剂或所需的推进剂混合。除抑制剂外，软膏、糊剂、乳剂和凝胶可含有赋形剂，例如动物和植物脂肪、油、蜡、 淀粉、黄芪胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、聚硅氧烷、膨润土、硅酸、滑石和氧化锌或它们的混 合物。除抑制剂外，粉末和喷雾剂可含有赋形剂，例如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸 钙和聚酰胺粉末或这些物质的混合物。喷雾剂可附加地含有常规推进剂，例如氯氟烃和挥 发未取代烃，例如丁烷和丙烷。做为选择，抑制剂可通过气溶胶给药，这通过制备含有组合物的含水气溶胶、脂质 体配制品或固体微粒制备，也可使用非水(例如氟碳推进剂)悬浮剂。优选音速喷雾器，因 为它们使药物暴露于导致化合物降解的切应力最小。通常含水气溶胶通过配制药物与常规可药用的载体和稳定剂的水溶液或悬浮液制备。载体和稳定剂随特定组合物的需要变化，但通常包括非离子表面活性剂(吐温、普流 罗尼、脱水山梨糖醇酯、卵磷脂、克列莫佛)、可药用的助溶剂，例如聚乙二醇、无毒蛋白质， 如血清白蛋白、油酸、氨基酸，例如甘氨酸、缓冲剂、盐、蔗糖和糖醇，气溶胶通常由等渗溶液 制备。皮肤贴片具有向身体提供控制释放的抑制剂的附加优点，该剂量形式可通过将药 物溶解或分散在合适中制备。吸收增强剂也可用于增强抑制剂越过皮肤的通量，该通量速 率可通过提供速率控制膜或将抑制剂分散在聚合物基质或凝胶中控制。适用于肠胃外给药的本发明的药物组合物含有与一种或多种可药用的无菌含水 或非水溶液、分散液、悬浮液或乳液混合的一种或多种抑制剂，或无菌粉末，它在使用前可 重新构成无菌可注射溶液或分散液，它可含有抗氧化剂、缓冲剂、杀菌剂、使制剂与所需患 者的血液等张的溶质或悬浮或增稠剂。可用于本发明药物组合物的合适含水和非水载体的实例包括水、乙醇、多元醇 (例如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)和其合适的混合物、植物油，例如橄榄油和可注射有机 酯，例如乙基油酸酯。可通过例如使用涂层材料，例如卵磷脂、在分散液情况下通过保持所 需的微粒尺寸和通过使用表面活性剂保持合适的流动性。这些组合物还可含有辅料，例如防腐剂、增湿剂、乳化剂和分散剂。微生物作用的 预防可通过包含各种抗菌和抗真菌剂，例如对羟苯甲酸酯、氯丁醇、酚山梨酸等确保。还可 在组合物中包括张力调节剂，例如蔗糖、氯化钠等。此外，通过包括延迟吸收的试剂，例如单 硬脂酸铝和明胶使得可注射药物形式延迟吸收。在某些情况下，为延长药物的效果，需要减缓药物由皮下或肌内注射的吸收，例 如，肠胃外给药药物的延迟吸收通过将药物溶解或悬浮在油赋形剂中完成。注射用储存(d印ot)形式通过在可生物降解的聚合物，例如聚交酯-聚乙醇酸交 酯形成抑制剂的微胶囊基质制备。根据药物与聚合物的比率和所采用的特定聚合物的性 质，可控制药物释放的速率。其它可生物降解聚合物的实例包括聚(正酯)和聚(酐)。储 存注射制剂还通过将药物俘获在与身体组织相容的脂质体或微乳液中制备。药物制剂可口服、肠胃外、局部或直肠给药，辉砷镍矿，它们以适合每种给药途径 的形式给药。例如，它们以片剂或胶囊形式、通过注射、吸入、眼洗液、软膏、栓剂、灌输、由洗 液或软膏局部地或用栓剂直肠给药，优选口服给药。用于本文的短语“肠胃外给药”是指除肠内和局部给药外通常通过注射的给药模 式，其包括，但不限于，静脉内、肌内、动脉内、鞘内、囊内、眼窝内、心脏内、皮层内、腹膜内、 经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内和胸骨内注射和灌输。用于本文的短语“全身给药”、“系统给药”和“外围给药”是指除直接进入中枢神 经系统外，配位体、药物或其它物质的给药，使得药物进入患者全身，因此，经受代谢和其它 类似过程，例如皮下给药。这些抑制剂可通过任何合适的给药途径向人体和其它动物给药用于治疗，包括口 服、鼻腔，通过例如喷雾、直肠、叶鞘内、肠胃外、脑池内和局部，通过粉末、软膏或滴剂，包括 面颊和舌下。与所选的给药途径无关，本发明的抑制剂(可以合适的水合形式使用)和/或药 物组合物通过本领域技术人员已知的常规方法配制可药用的剂量形式。
本发明药物组合物中活性成分的实际剂量水平可改变以得到对于特定患者、组合 物和给药方式有效达到所需治疗响应而对患者没有毒性的活性成分的量。在可药用的混合物中公开化合物的浓度将根据若干因素变化，包括给药的化合物 剂量、所用化合物的药物代谢动力学特性和给药途径。通常对于肠胃外给药，除其它物质 外，本发明的组合物可提供含有约0. 1-10% w/v本文公开化合物的水溶液。典型剂量范围 为每天约0. 01-约50mg/kg体重，以1-4分份剂量给药。每个分份剂量可含有相同或不同 的本发明的化合物，根据若干因素，包括患者总体健康和所选化合物的配制和给药途径，剂 量将是有效量。术语“Cx_y烷基”是指取代或未取代饱和烃基，包括直链和支链烷基，其在链中含有 x-y个碳原子，包括卤代烷基，例如三氟甲基和2，2，2-三氟乙基等。Ctl烷基在基团在末端 位置时表示氢，在内部时则为键。术语“C2_y烯基”和“C2_y炔基”是指取代或未取代不饱和 脂族基团，具有类似于上述烷基的长度和可能的取代，但分别含有至少一个双键或三键。术语“烷氧基”是指带有连接的氧的烷基，代表性的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙 氧基、叔丁氧基等。“醚”是由氧共价连接的两个烃基，因此，烷基取代基使得烷基是醚或类 似于烷氧基。术语“Cu烷氧基烷基”是指被烷氧基取代的Cp6烷基，从而形成醚。用于本文的术语“Cu芳烷基“是指被芳基取代的Cp6烷基。术语“胺”和“氨基”是公认的，是指未取代和取代的胺和其盐，例如由如下通式表 示的基团 其中R9、R10和Rlt1'分别表示氢、烷基、烯基、-(CH2)m-R8或R9和Riq和与其相连的 N原子一起构成环结构具有4-8个原子的杂环；R8表示芳基、环烷基、环烯基、杂环基或多环 基；m是0或1-8的整数。在优选实施方案中，R9或Rki仅一个可以是羰基，例如R9、R10和 氮一起不形成酰胺。在更优选实施方案中，R9和Rltl(和任选Rltl')分别表示氢、烷基、烯基 或-(CH2)m-R8。在某些实施方案中，氨基是碱性的，表示质子化形式具有pKa > 7. 00。术语“酰胺”和“酰氨基”是公认的氨基取代的羰基，包括可由如下通式表示的基 团 其中R9、R10是如上定义的。酰胺优选实施方案将不包括可能不稳定的酰胺。用于本文的术语“芳基”包括5-、6_和7-元取代或未取代单环芳香基团，其中每个 环原子是碳。术语“芳基”还包括具有两个或多个环的多环体系，其中两个或多个碳共用于 两个相邻环，其中至少一个环是芳香的，例如其它环可以是环烷基、环烯基、环炔基、芳基、 杂芳基和/或杂环基。芳基包括苯、萘、菲、苯酚、苯胺等。
用于本文的术语“碳环”和“碳环基”是指非芳香取代或未取代环，其中每个环原 子是碳。术语“碳环”和“碳环基”还包括具有两个或多个环的多环体系，其中两个或多个 碳共用于两个相邻环，其中至少一个环是碳环，例如其它环可以是环烷基、环烯基、环炔基、 芳基、杂芳基和/或杂环基。术语“羰基”是公认的，包括可用如下通式表示的基团
义)TR11或、义R”，其中X是键或表示氧或硫，R11表示氢、烷基、烯基、-(CH2)m-R或可药用盐，R11’表 示氢、烷基、烯基或-(CH2)m-R,其中m和R是如上定义的。当X是氧，R11或R11’不是氢，上 式表示“酯”，当X是氧，Rn是氧，上式表示“羧酸”。术语“杂芳基”包括取代或未取代芳香5-7元环结构，更优选5-6元环，该环结构包 括1-4个杂原子。术语“杂芳基”还包括具有两个或多个环的多环体系，其中两个或多个碳 共用于两个相邻环，其中至少一个环是杂芳基，例如其它环可以是环烷基、环烯基、环炔基、 芳基、杂芳基和/或杂环基。杂芳基包括，例如吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、噁唑、噻唑、三唑、吡 唑、吡啶、吡嗪、哒嗪和嘧啶等。用于本文的术语“杂原子“是指除碳或氢外的任何元素的原子，优选杂原子是氮、 氧、磷和硫。术语“杂环基”是指取代或未取代非芳香3-10元环结构，更优选3-7元环，该环结 构包括1-4个杂原子。术语“杂环基”还包括具有两个或多个环的多环体系，其中两个或多 个碳共用于两个相邻环，其中至少一个环是杂环基，例如其它环可以是环烷基、环烯基、环 炔基、芳基、杂芳基和/或杂环基。杂环基包括，例如哌啶、哌嗪、吡咯烷、吗啉、内酯类、内酰 胺类等。术语“Cu羟基烷基”是指被羟基取代的Cp6烷基。术语“多环基”是指两个或多个环(例如环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/ 或杂环基)，其中两个或多个碳共用于两个相邻环，例如环是“稠环”，多环的每个环可以是 取代或未取代。用于本文的术语“蛋白酶体”是指包括免疫和组成蛋白酶体。用于本文的术语“基本上纯”是指结晶多形体大于90%纯，是指含有少于10%任 何其它化合物，包括相应的无定形化合物。结晶多形体优选大于95%纯，甚至大于98%纯。术语“取代的”是指在一个或多个骨架的碳上具有置换氢的取代基的基团，应理解 “取代”或“被取代”包括暗示，只要该取代符合取代的原子和取代基的允许化合价，和取代 作用形成稳定的化合物，例如它不自然地进行转变，例如重排、环化、消除等。用于本文的术 语“取代的”预期包括有机化合物的所有可能的取代基。在广义方面，允许的取代基包括有 机化合物的无环和环、支链和非支链、碳环和杂环、芳香和非芳香取代基，对适当的有机化 合物，允许的取代基可以是一个或多个和相同或不同的。对于本发明，杂原子，例如氮可具 有本文所述的有机化合物的氢取代基和/或任何允许的取代基，它满足杂原子的化合价。 取代基包括，例如卤素、羟基、羰基(例如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、硫代羰基(例如硫酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸盐、膦酸盐、亚膦酸盐、氨基、酰氨 基、脒、亚胺、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸盐、氨磺酰基、磺氨基、磺酰基、 杂环基、芳烷基、芳香或杂芳香基团。本领域技术人员应理解，如果需要在烃链上取代的基 团可本身被取代。有关于主题治疗方法的化合物的“治疗有效量”是指在制剂中化合物的数量，在作 为所需剂量制度部分(向哺乳动物，优选人)给药时，按照临床对所治疗的疾病或症状或化 妆品用途的可接受标准，减轻症状、减缓症状或延缓疾病的发作，例如以对任何临床治疗可 适用的合理效果/风险比。术语“硫醚”是指如上定义的烷基带有连接的硫基团，在优选实施方案中，“硫醚” 用-S-烷基表示。代表性硫醚基团包括甲硫基、乙硫基等。用于本文的术语“治疗”包括在哺乳动物中倒转、降低或停止症状、临床征兆和症 状的潜在病理学以改善或稳定患者症状。
实施例实施例1化合物1的合成 (B)的合成将羟基苯并三唑(HOBT)(10. 81g，80. Ommo 1)和 DIEA(200. Ommol, 25. 85g，35mL)加 入 Nboc 亮氨酸(50. Ommol，11. 56g)和苯基丙胺酸甲酯(50. Ommol，10. 78g)在 500mL DMF 中的溶液中。混合物在冷水浴中冷却到0°C，分几次在5分钟内加入苯并三唑-1-基氧基三 (二甲基氨基)膦六氟磷酸盐(B0P)(80.0mmol，35.38g)，反应在氩气气氛下搅拌过夜。反 应物用盐水(IOOOmL)稀释，用Et0Ac(5x200mL)提取，合并有机层，用水(IOxlOOmL)和盐水 (2xl50mL)洗涤，用MgSO4干燥。过滤除去MgSO4,减压除去挥发物得到㈧(18. 17g)。向50mL 0°C冷却的 80% TFA/DCM 溶液中加入 BocNHLeuPhe OMe (45. 86mmol, 18. Og)，搅拌溶液，在 2小时内使其温热到室温，减压除去挥发得到油。随后向油中加入BocNHhPhe (45. 86mmol, 12. 81g)、DMF(500mL)、H0BT(73. 37mmol,9. 91g)和 DIEA(183. 44mmol,23. 70g，32. OmL)。混 合物在冷水浴中冷却到0°C，在5分钟内分几次加入BOP (73. 37mmol,32. 45g)。反应在氩气 气氛下温热到室温过夜。反应物用H20(1500mL)稀释，用DCM(5x300mL)提取，合并的有机 层用H20(6x300mL)和盐水(lx300mL)洗涤，用MgSO4干燥。过滤除去MgSO4,减压除去挥发 物得到黄色固体。向黄色固体中加入Et0H(200mL，95% )，混合物加热到65°C以溶解所有固 体，溶液随后加入IOOOmL冷冻H2O中，收集得到的沉淀得到(B) (21. 59g)。(C)的合成将(B) (1. 80mmol, 1. Og)与TFA/DCM(80 % )混合，在室温下搅拌1小时，在此温 度下将混合物浓缩，在高真空下放置2小时得到三肽胺的TFA盐。向TFA盐(1. SOmmol) 在DMF(IOmL)中的0°C溶液中加入DIEA(3. 6mmol，0. 7mL)，随后加入氯乙酰氯(2. 7mmol, 0.215mL)。反应温热到室温，期间在氮气中搅拌过夜。混合物随后用盐水(15mL)稀释，用 EtOAc (3x15mL)提取，合并有机层，用H2O (2xl5mL)和盐水(2x15mL)洗涤，用Na2SO4干燥。 过滤除去Na2SO4，减压除去挥发物，粗物质悬浮在EtOAc中，过滤得到(C) (0. 640g)。(D)的合成将KI(0. 019mmol，0. 0032g)和吗啉(0· 1 IOmmol，0. 0096g)加入(C) (0. 094mmol, 0.050g)在THF(IOmL)中的溶液中，混合物在氮气中搅拌过夜。减压除去挥发物，粗物质溶 解在EtOAc (15mL)中，用H2O (2x1 OmL)和盐水(2xl0mL)洗涤，用MgSO4干燥。过滤除去MgSO4, 减压除去挥发物得到(D)。(E)的合成将LiOH(0. 94mmol,0. 023g)加入(D) (0. 094mmol)在冷却到 0°C的 4mL3 IMeOH/ H2O中的浆料中。在5°C 12小时后，反应物用20mL饱和NH4Cl骤冷，用IOmL H2O稀释。反 应混合物的用INHCl调节pH至3，用DCM(3xl5mL)提取，用MgSO4干燥。过滤除去MgSO4,减 压除去挥发物得到(E)。化合物1的合成将(E)(0. 082mmol，0. 046g)、DIEA (0. 328mmol，0. 057mL)禾Π HOBT (0. 133mmol, 0.018g)加入(F) (0. 082mmol)在DMF(2mL)中的搅拌溶液中。混合物在冰浴中冷却到，分 几次加入B0P(0. 131mmol,0. 058g)。混合物在氩气中在搅拌过夜，反应物随后用H20(15mL) 稀释，用EtOAc提取。有机层用水、饱和NaHCO3和盐水洗涤，用无水MgSO4干燥。过滤除 去MgSO4,减压除去挥发物得到化合物1 (0. 034g) (IC50 20SCT-L < IOOnM ；IC50细胞基CT-L < IOOnM)。
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实施例2将化合物1 (1. Og)溶解在加热到80°C的甲醇(16mL)中，缓慢加入水(4mL)，透明 溶液冷却到室温，通过用压缩空气蒸发IOmL溶剂使溶液过饱和。过滤得到的结晶，用SmL 1 1去离子水-甲醇洗涤，真空干燥12小时得到结晶化合物1(0. 9g)，熔点212°C。样品的特征DSC 曲线示于附图 1，用 TA Instruments DifferentialScanning Calorimeter 2920记录，加热速率10°C /分钟。实施例3将化合物1 (1. Og)溶解在加热到80°C的乙腈(17mL)中，缓慢加入水(SmL)，透明 溶液冷却到室温，通过用压缩空气蒸发IOmL溶剂使溶液过饱和。过滤得到的结晶，用SmL 1 1去离子水-乙腈洗涤，真空干燥12小时得到结晶化合物1(0. 85g)，熔点212°C。实施例4将化合物1 (1. Og)溶解在加热到800C的乙醇(17mL)中，缓慢加入水(5mL)，透明 溶液冷却到室温，通过用压缩空气蒸发15mL溶剂使溶液过饱和。过滤得到的结晶，用SmL 1 1去离子水-乙醇洗涤，真空干燥12小时得到结晶化合物1(0. 82g)，熔点212°C。实施例5将化合物1 (1. Og)溶解在加热到80°C的乙酸乙酯(30mL)中，缓慢加入水(5mL)， 透明溶液冷却到室温，通过用压缩空气蒸发20mL溶剂使溶液过饱和。过滤得到的结晶，用 5mL乙酸乙酯洗涤，真空干燥12小时得到结晶化合物1 (0. 60g)，熔点212°C。实施例6将化合物1 (1. Og)溶解在加热到800C的乙醇(15mL)中，缓慢加入水(5mL)，透明 溶液冷却到室温，通过用压缩空气蒸发IOmL溶剂使溶液过饱和。过滤得到的结晶，用IOmL 1 1去离子水-乙醇洗涤，真空干燥12小时得到结晶化合物1(0. 54g)，熔点212°C。实施例7 (F)的合成根据US 专利申请 2005-0256324 制备化合物(G) (0. 43g)，与 Pd/C (10% wt，0. 10g) 一起加入烧瓶中，随后缓慢加入TFA (35mL)。将烧瓶排空，用氢气回洗三次，随后反应混合物在1大气压氢气下在室温搅拌2小时。反应混合物随后通过Celite过滤，滤液减压浓缩。 加入二氯甲烷(25mL)，减压除去挥发物。得到的粘稠黄色浆料在高真空下干燥至恒重，浆料 随后转移到50mL体积烧瓶中，用8. 5mL乙醚漂洗得到结晶化合物(F) (0. 33g)。化合物1的合成向IOmL体积烧瓶中加入1-羟基苯并三唑(H0BT，0. 54g)和N，N，N，，N，-四甲 基-0-(1Η-苯并三唑-1-基)脲阳离子六氟磷酸盐(HBTU，1.54g)，用DMF稀释到，对HBOT 和HBTU，偶合试剂的储备溶液是0. 4M。将(E) (0. 61g)、(F) (0. 33g)和偶合试剂储备溶液(2. 7mL)加入IOmL烧瓶中，混合 物冷却到0°C。随后向冷却的溶液中滴加DIEA (0. 56mL)，混合物在0°C搅拌60分钟，随后通 过加入饱和碳酸氢钠(15mL)骤冷。混合物用乙酸乙酯(35mL)稀释，分层。有机层用饱和 碳酸氢钠(3xl5mL)、盐水(2xl5mL)洗涤，用硫酸钠干燥。过滤除去硫酸钠，减压除去挥发物 得到粘稠浆料，它进一步在高真空下干燥得到粗化合物1泡沫(0. 59g)。实施例8将粗化合物1 (0. 590g)通过搅拌和在油浴(80°C )中加热完全溶解在甲醇(IlmL) 中，滴加去离子水(17mL)。混合物用结晶化合物接种，搅拌和缓慢蒸发12小时到约20mL以 沉淀化合物1。过滤悬浮液，用1 1去离子水_甲醇(4mL)洗涤，在室温下真空干燥12小 时得到化合物1白色固体(0. 25g)。结晶再重复两次以得到结晶化合物1 (0. 13g)。将结晶化合物1 (0. 3g)通过搅拌和在油浴(80°C )中加热溶解在异丙醇(15mL) 中，减压浓缩溶液以降低体积到5mL。迅速加入去离子水(20mL)，得到的悬浮液剧烈搅拌1 小时。过滤玻璃状沉淀，用去离子水(25mL)洗涤，干燥得到无定形化合物1(0. 3g)。无定形样品的特征DSC曲线示于附图7，它用TA InstrumentsDifferential Scanning Calorimeter 2920记录，无定形化合物1的加热速率为1°C /分钟。无定形粉末的特征X射线衍射图示于附图8，用ShimadzuXRD-6000记录，使用Cu Ka射线[电压和电流设定为40kV和40mA ；分散和散射缝设为1°和接受缝设为0. 15mm ； NaI闪烁检测器用于散射射线；θ-2 θ以3° /min(0.4sec/0.02°步)持续扫描，由2. 5至 40° 2 θ ；样品用硅插入物放置在铝支架中；和用XRD-6100/7000V. 5. 0记录和分析数据]。实施例9(F)的合成在烧瓶中加入(G)和乙酸乙酯(400mL)，将溶液在搅拌下在冰浴中冷却15分钟， 滴加三氟乙酸(200mL)，保持内部温度低于10°C。一次加入Pd/C(3. 6g)，烧瓶在高真空下 净化，重新充入氢气3次。2小时后，反应物通过Celite过滤，减压蒸发滤液得到粘稠橙色 油，用170mL乙醚缓慢旋动。随着烧瓶旋动，细结晶形成，使烧瓶放置在室温下，将烧瓶紧紧 盖住，放在冰箱中过夜(< _5°C )。过滤出生成的结晶固体，用冰冷的乙醚(50mL)洗涤，高 真空下干燥，得到(F)细白色结晶(14. Ig;熔点137°C)。化合物1的合成在烧瓶中加入(F)(IOg)、(E) (15. 3g)、HBTU (15. 3g)、HOBt (5. 5g)和 DMF(300mL)， 混合物剧烈搅拌直到溶解，放置在NaCl/冰浴(_5°C)中。15分钟后，在< 10分钟内滴加 DIEA(7. ImL)，保持内部温度低于-3°C。在加完后，反应混合物在浴中搅拌1小时，通过加入 饱和NaHCO3 (含水)(200mL)骤冷。浆料用乙酸乙酯(1. 5L)提取，有机层用饱和NaHCO3 (含水)(2x300mL)和饱和NaCl (含水)(200mL)洗涤，随后用MgSO4干燥。减压下将有机层浓缩至约50mL，加入甲乙酮(200mL)，溶液两次浓缩至约50mL。两 次加入甲乙酮(125mL)，溶液在油浴(80°C)中搅拌直到透明。随后使溶液冷却，用纯结晶 化合物1接种。混合物在25°C搅拌2小时，随后在0°C搅拌过夜。过滤出白色固体沉淀，用 冰冷的甲乙酮(300mL)洗涤得到白色固体。固体在室温下高真空干燥至恒重得到13. 5g纯 化合物1。实施例10 (F)的合成在氩气中向烧瓶中加入(H)(IOOg)[参见Bioorg.Med. Chem. Letterl999，9， 2283-88]和二氯甲烷(300mL)，将溶液在冰浴中冷却到0-5°C。在搅拌下在0-10°C滴加三 氟乙酸(136. 9mL)，随后反应混合物由冰浴移出，在室温下搅拌2小时。加入甲基叔丁基醚 (300mL)，减压蒸发400mL溶剂，随后经添加漏斗加入MTBE (200mL)，溶液在20°C搅拌20分 钟，随后在10分钟内加入庚烷(IOOOmL)，将反应混合物冷却到0-5°C。反应混合物搅拌30 分钟，随后过滤出固体，用冷庚烷(0-5°C，3xl00mL)漂洗，高真空干燥至恒重得到白色固体 90. 69g(F)。化合物1的合成将(F) (137. 53g)在DMF(900mL)中的溶液在NaCl/冰浴中冷却到约2°C，随后向 溶液中加入 HBTU (138. 06g)、HOBT (55. 90g)、(F) (90. OOg)和冰冷的 DMF(180mL)，随后经添 加漏斗以使内部温度保持在约0°C的速率加入纯DIEA(67. 19g，509. 66mmol)。2小时后，经 添加漏斗加入纯异丙基乙胺(24. Og)，混合物在0°C搅拌直到转化率>99%。反应混合物 随后分批转移到添加漏斗中，缓慢加入冰冷的半饱和NaHCO3溶液(3. 6L)(内部温度保持在 20°C )。得到的浆料用机械搅拌器搅拌30分钟，过滤出固体，滤饼用冰冷的水(2xl350mL)洗 涤。固体随后溶解在二氯甲烷(2. 7L)中，有机相用水(每次2700mL)提取直到HPLC(200 μ L 溶液用作HPLC样品)显示HOBt/HBTU的相对百分数面积< 15%。有机相通过硫酸钠栓过 滤，随后通过活性碳垫在线过滤。有机相减压浓缩，加入甲乙酮(1350mL)，溶液再次减压浓缩，再次加入甲乙酮(1350mL)，溶液再次减压浓缩。将得到的浓缩溶液冷却到0°C直到固体形成，随后混合物加 热到75°C，同时加入更多甲乙酮(约750mL)直到完全溶解。将溶液冷却到65°C，接种，得 到的溶液/浆料以0. 5°C /分钟的速率冷却到20°C (搅拌速率60-70rpm)。浆料在20°C搅 拌至少5小时，从而完全结晶。过滤出固体，用冰冷的甲乙酮(720mL)洗涤，滤饼在氮气流 下干燥1小时。将固体转移到圆底烧瓶中，减压干燥至恒重得到116g结晶化合物1。实施例11将甲醇(200mL)加入粗化合物1中，混合物浓缩到IOOmL,再加入甲醇(275mL)与 去离子水(75mL)，混合物浓缩至400mL。透明溶液用纯结晶化合物接种，搅拌，在压缩空气 流下缓慢蒸发至200mL。得到的黄色固体用去离子水(400mL)和1 1去离子水-甲醇 (300mL)洗涤直到转变为白色，滤液变得透明。化合物1随后真空干燥12小时。将得到的化合物1(17. 3g)经搅拌和油浴(浴温设定在85°C ；混合物温度低于 650C )加热完全溶解在甲醇(275mL)中，在15分钟内滴加去离子水(75mL)，使透明混合物 冷却到室温。向搅拌溶液中加入化合物晶种，混合物在压缩空气流中在9小时内缓慢浓缩 至250mL。过滤出结晶，用1 1去离子水-甲醇(300mL)洗涤。白色固体在22°C真空干 燥12小时得到结晶化合物1 (14. Og)。实施例12将粗化合物1(12. Ig)经搅拌和油浴加热(浴温设定在85°C ；混合物温度低于 650C )完全溶解在甲醇(50mL)中，使透明混合物冷却到室温，向溶液中加入化合物1晶种， 混合物在室温下结晶3小时以上。得到的固体用1 1去离子水-甲醇(500mL)洗涤，过 滤，真空干燥12小时得到结晶化合物1 (9. 4g)。实施例13(F)的合成在烧瓶中加入(H) (Ig)和乙酸乙酯(20mL)，溶液在冰浴中在搅拌下冷却15分钟。 随后滴加三氟乙酸(IOmL)，期间保持内部温度低于3°C。在0°C搅拌2小时后，使反应物温 热到室温，再搅拌2小时。将溶液减压蒸发至粘稠无色油，粗混合物用IOmL乙醚缓慢旋动， 随着溶液旋动，细结晶形成。在室温下30分钟后，将烧瓶紧紧盖住，放在冰箱中过夜。过滤 出生成的结晶固体，用冰冷的乙醚洗涤，高真空干燥至恒重得到细白色结晶(F) (670mg)。实施例14化合物1的合成将(E)(14. 2g) ,HBTU (14. 3g) ,HOBT (5. Ig)和 DMF (300mL)加入(F)中，混合物在室 温下搅拌直到完全溶解。将反应物在冰浴中冷却15分钟，在15分钟内滴加DIEA(32mL)， 期间保持内部温度低于10°C。反应混合物随后在0°C搅拌1小时，随后用饱和碳酸氢钠 (200mL)骤冷。混合物用乙酸乙酯(1.5L)提取，有机层用饱和碳酸氢钠(2x300mL)和去离 子水(lx200mL)洗涤。合并的含水洗涤物用乙酸乙酯(200mL)提取，合并有机层(1. 7L)。合并的有机层(1.7L)减压浓缩到IOOmL,随后加入甲醇(200mL)，混合物再次浓 缩到100mL。加入附加的甲醇(200mL)，在搅拌下缓慢加入去离子水(75mL)，混合物浓缩至 300rnL。透明溶液用结晶化合物1接种，搅拌，在压制空气流中缓慢浓缩至约200mL。用 4 1去离子水-甲醇(2L)和1 1去离子水-甲醇(500mL)洗涤灰白色固体直到固体变 成白色，滤液变得透明。得到的固体在22°C真空干燥12小时得到化合物1 (16. Sg)。
将化合物1经搅拌和油浴加热(浴温设定在85°C;混合物温度低于65°C )完全溶 解在乙醇(200mL)中，使透明混合物冷却到室温，向搅拌溶液中加入化合物1晶种，混合物 用空气吹扫，使其结晶。过滤混合物，用1 1去离子水-乙醇(200mL)洗涤，在室温下真 空干燥12小时得到10. 2g结晶化合物1。实施例15(F)的合成500mL烧瓶配备机械搅拌器、热电偶、冷却浴，将(G) (12. 5g)溶解在乙酸乙酯 (125mL)中，将透明溶液冷却到0-5°C，随后缓慢加入三氟乙酸(375mL)使得内部温度保持 在低于10°C。在温热到室温后，加入5% Pd/C(l. 25g)，反应混合物保持在氢气气氛2小 时。反应混合物通过玻璃纤维过滤，用乙酸乙酯(50mL)漂洗，滤液随后减压浓缩得到黄色 油。向油中加入MTBE(50mL)，在25°C共同蒸发成黄色油。再次加入MTBE(60mL)，混合物冷 却到-10°C，搅拌60分钟。向搅拌混合物中缓慢加入庚烷(120mL)，在-10°C再持续搅拌 15分钟。过滤收集固体，结晶用庚烷(2x40mL)漂洗，在室温(22°C )下高真空干燥至恒重 (10. Ig)。化合物1的合成配备机械搅拌器、热电偶、冷却浴、氮气入口和干燥管的烧瓶加入DMF、(F) (133. 9g)、(E) (241. 8g)、HBTU (242. 8g)和 HOBT (86. 5g)，将混合物搅拌，冷却到 0-5 0C0 在 至少30分钟内缓慢加入DIEA (156mL)，期间保持温度为0_5°C，反应混合物在0_5°C搅拌1 小时，随后倾入剧烈搅拌的饱和碳酸氢钠溶液(3630mL)和乙酸乙酯(900mL)中。加入附加 的乙酸乙酯(2000mL)以提取产物，分离有机层，水层用乙酸乙酯(1930mL)提取。合并有机 相，用碳酸氢钠饱和溶液(2420mL)和盐水(2420mL)洗涤，用硫酸镁(360g)干燥，经玻璃纤 维过滤器过滤，用乙酸乙酯(2x360mL)漂洗。将得到的溶液减压浓缩成半固体，加入甲醇(725mL)，减压共同蒸发得到半固体化 合物1。粗产物溶解在甲醇(5320mL)中，搅拌溶液，同时在20分钟内加入水(2130mL)。当 水加完后，加入约0. 3g纯晶种，甲醇/水溶液搅拌3小时。得到的结晶白色固体用过滤分 离，细白色结晶产物用甲醇/水溶液(1 l，1200mL)漂洗。得到的固体用甲醇/水溶液 (1 l，1200mL)漂洗，结晶产物倾入干燥盘，在氮气流中在27°C高真空干燥至恒重得到结 晶化合物1 (230g)。实施例16(F)的合成在IOOmL三颈圆底烧瓶中加入(G) (5g)和二氯甲烷(15mL)，搅拌混合物直到固体 溶解，随后放置在冰浴中。20分钟后，内部温度达到0.6°C，在5分钟内滴加三氟乙酸。加 完后，将烧瓶温热到室温，2小时后，向烧瓶中加入MTBE (35mL)，混合物在冰浴中冷却，其中 在冷却过程中(F)开始结晶。随后在15分钟内向烧瓶中滴加庚烷(65mL)，烧瓶放置在冰箱 (-50C )中，1小时后，收集固体白色产物，用庚烷(IOmL)洗涤得到4.57g(F)。实施例17化合物1柠檬酸盐的合成将化合物1 (IOg)和柠檬酸(2. 7g)溶解在THF (75mL)和乙腈(50mL)中，溶解随后 在室温下搅拌2小时，此时形成白色沉淀。将烧瓶冷却到-10°C，搅拌过夜。过滤出固体用IOOmL乙腈洗涤得到1. 52g化合物1柠檬酸盐。实施例18(H)和(Q)的合成 (I)的合成在氩气气氛下将二甲基羟基胺盐酸盐(10. 53g，108mmol)在DCM(270mL)中的悬 浮液剧烈搅拌0. 5小时，随后经添加漏斗加入TEA (10. 92g，14. 75mL, 108mmol)。将Boc-亮 氨酸-OH(25. Og, 108mmol)在DCM(270mL)中的溶液冷却到O°C，随后经添加漏斗加入异丁 基氯甲酸酯(14. 73g，13. 98mL, 108mmol)。将混合物进一步冷却到_20°C，经添加漏斗加入 NMM(10. 92g，11. 87mL, 108mmol)，加入速率使得内部温度保持在低于-10°C。在_20°C搅拌 5分钟后，经大孔Teflon套管加入先前制备的二甲基羟基胺溶液，反应混合物由冷却浴移 出，温热到室温过夜。混合物用水(IOOmL)稀释，搅拌15分钟。分层，水层用DCM(2x50mL)提 取，合并有机层，用 lNHCl(4xl50mL)、水(Ix 150mL)、饱和 NaHCO3(2xIOOmL)、盐水(lx250mL) 洗涤，用Na2SO4干燥。过滤除去Na2SO4,减压除去挥发物得到(I) (28. 05g, 102mmol)。(J)的合成在氩气气氛下用添加漏斗向(I) (10. Og, 36. 4mmol,)在IOOmL无水THF中的0°C溶 液中滴加异丙烯基溴化镁(364mL，182mmol,5. 0eq,0. 5MTHF溶液)。调节添加速率使得内部 温度保持在低于5°C。6小时后，将反应混合物倾入250mL饱和NH4Cl和500mL湿冰中。在 搅拌30分钟后，混合物变得透明，减压除去挥发物，粗物质用Et0Ac(200mL)稀释。分层，水 层用EtOAc (3x150mL)提取，合并有机层，用水(2xl50mL)、盐水(2xl50mL)洗涤，用MgSO4干 燥。过滤除去MgSO4，减压除去挥发物，用快速色谱法(15 1己烷/EtOAc)纯化得到(J)固体(7. 5g，29. 37mmol)。(K)和(L)的合成向(J) (5. Og, 19. 58mmol)在 200mL MeOH 中的 0°C溶液中加入 CeCl3_7H20(8. 75g, 23. 50mmol)，溶液在氩气气氛下搅拌直到CeCl3_7H20完全溶解。向此溶液中在2分钟内分 10次加入NaBH4 (0. 88g，23. 50mmol)，反应随后在氩气气氛下在0°C搅拌6小时。在0°C用 约2. 5mL冰HOAc骤冷反应，再在0°C搅拌30分钟后，混合物变得透明。减压除去气管，残余 的油溶解在EtOAc (200mL)中，有机层用水(2xl00mL)、盐水(2xl00mL)洗涤，用MgSO4干燥。 过滤除去MgSO4,减压除去挥发物得到蜡状白色固体(4. 75g，18. 5mmol)。经HPLC测定非对 映异构体比率4. 5 1。(M)、(N)、(0)和(P)的合成向(K)和(L) (0. 025g,0. 097mmol)在 DCM(ImL)中的溶液中加入 mCPBA(0. 018g， 0. 107mmol)，混合物在室温下搅拌1小时，此时混合物用饱和NaHCO3 (5mL)稀释。分层，水 层用DCM(2x2mL)提取，合并有机层，用水(2x5mL)、盐水(2x5mL)洗涤，MgSO4干燥。过滤除 去MgSO4，减压除去挥发物得到油。(H)和(Q)的合成在 5°C 向 Dess-Martin Periodinane (0. 023g，0. 055mmol)在 ImL MeCN 中的溶液中 作为在MeCN(ImL)中的溶液加入(M)、(N)、(0)和(P)的混合物(0. 010g，0. 037mmol)。混 合物放置在氩气气氛下，使其温热到室温，同时搅拌过夜。在完成后，形成白色沉淀，反应在 冰浴中冷却，用2mL饱和NaHCO3稀释。混合物用IOmL EtOAc稀释，通过Celite栓过滤除 去固体。将混合物转移到分液漏斗中，分层。水层用EtOAc (2x5mL)提取，合并有机层，用水 (3x5mL)、盐水(lx5mL)洗涤，用Na2SO4干燥。过滤除去Na2SO4,减压除去挥发物得到(H)和 (Q)的混合物浅黄色油。实施例19(H)和(Q)的另一种合成 (H)和(Q)的另一种合成向(R) (0. 200g,0. 78mmol)在吡啶(3mL)中的_5°C溶液中以保持内部反应温度低 于-4°C的速率滴加10%含水Na0Cl(1.5mL)。在NaOCl加完后，将反应烧瓶放置在0°C浴 中，搅拌2小时。混合物随后用EtOAc(IOmL)稀释，用水(2xl0mL)、盐水(2xl0mL)洗涤， 用Na2SO4干燥，过滤除去Na2SO4,减压除去挥发物得到(H)和(Q)的粗混合物。经快速色谱 法(20 1 己烷/EtOAc)纯化得到油状的(H) (0. 059g,0. 216mmol)和固体的(Q) (0. 023g, 0. 085mmol)。实施例20化合物1的合成 (F)的合成向IOmL圆底烧瓶中加入(H) (0. 050g，0. 18mmol)和DCM(0. 80mL)，将混合物冷却到 0°C，滴加纯TFA(0.20mL)。在TFA加完后，将烧瓶温热到室温，期间搅拌1小时。减压除去 挥发物，得到的油用DCM(2mLx2)捕集，减压除去挥发物。化合物1的合成向含有(F)的IOmL 圆底烧瓶中加入(E) (0. 085g，0. 15mmol)、MeCN(2. OmL)、 HOBT (0. 031g, 0. 23mmol)和 HBTU (0. 087g, 0. 23mmol)，混合物 7令却到 O °C。向此混合物 缓慢加Λ DIEA (0. 077g, 0. 104mL. 0. 6mmol)，使混合物在0 °C搅拌1小时，随后用饱和 NaHCO3 (5mL)骤冷。混合物用EtOAc (15mL)稀释，分层，有机层用饱和NaHCO3 (3x5mL)、盐水 (2x5mL)洗涤，用Na2SO4干燥。过滤除去Na2SO4,减压除去挥发物得到粘稠油。向含有油的 烧瓶中加入DCM(ImL)，在转动下置于高真空，得到化合物1(0. IOOg, 0. 14mmol)的泡沫。实施例21化合物1的合成 (S)的合成
向IOmL 圆底烧瓶中加入(G) (0. 055g，0. 18mmol)、甲酸(2mL)和 Pd/C(5%wt， 0. 05g)，经TLC和LCMS认定脱保护完成，减压除去挥发物。油用DCM(2mLx2)捕集，减压除 去挥发物。化合物1的合成向含有(S)的IOmL 圆底烧瓶中加入(E) (0. 085g，0. 15mmol)、MeCN(2. OmL)、 HOBT (0. 031g，0. 23mmol)、HBTU(0. 087g，0. 23mmol)，混合物冷却到 0 °C。向此混合物缓 慢加入DIEA(0. 077g，0. 104mL、0. 6mmol)，混合物随后在0°C搅拌60分钟，通过加入饱和 NaHCO3 (5mL)骤冷。混合物用EtOAc (15mL)稀释，分层，有机层用饱和NaHCO3 (3x5mL)、盐水 (2x5mL)洗涤，用Na2SO4干燥。过滤除去Na2SO4,减压除去挥发物得到粘稠油。向含有油的 烧瓶中加入DCM(lmL)，在转动下置于高真空，得到化合物1的泡沫。实施例22(H)的合成 将水(214mL)加入带有机械搅拌器、添加漏斗和带有显示的热电偶的三颈烧瓶 中，冷却到-5-0°C的温度。随后在约5分钟内加入固体次氯酸钙(107g，748mmOl)，期间混合 物的温度保持在-5-0°C。混合物进一步冷却到-10°C至_5°C，搅拌10分钟，随后经添加漏 斗以保持内部温度在-10°C至_5°C的速率加入NMP (IOOOmL)，反应浆料随后在_10°C至搅拌 15分钟。将(R) (47. 8g, 187mmol)溶解NMP (400mL)，在保持内部温度在-15°C至-10°C的同 时滴加到反应混合物中。反应混合物随后在_5°C至0°C搅拌直到TLC显示反应完成。在反 应完成后，混合物通过缓慢加入1. OM硫代硫酸钠溶液(500mL)骤冷，保持内部温度在-10°C 至_5°C。随后加入乙酸乙酯(IOOOmL)，分层，水层提取两次。合并的有机层用水(500mL)和 盐水(500mL)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤和减压浓缩得到黄色油，将其溶解在己烷(600mL) 中，通过硅胶栓过滤得到(H)浅黄色油(20. Sg)。等同物本领域技术人员通过不太多的常规实验将认识或能够确定本文所述的化合物和 使用方法的许多等同物，该等同物被认为包括在本发明的范围内，被如下权利要求书覆盖。所有引用的参考文献和出版物列为本文参考文献。
权利要求
制备式(II)结晶化合物的方法包括(i)在有机溶剂中制备式(II)化合物的溶液；(ii)使溶液达到过度饱和导致结晶形成；(iii)分离结晶。FPA00001146398400011.tif
2.权利要求1的方法，其中有机溶剂选自乙腈、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、异丙基乙酸酯、 甲乙酮和丙酮或其任何组合。
3.权利要求2的方法，其中有机溶剂选自乙腈、甲醇、乙醇、乙酸乙酯和甲乙酮。
4.权利要求1-3的任何之一的方法，其中使溶液达到过度饱和包括加入抗溶剂、使溶 液冷却、减少溶液体积或其任何组合。
5.权利要求4的方法，其中使溶液达到过度饱和包括加入抗溶剂、冷却溶液到室温和 减少溶液体积。
6.权利要求4或5的方法，其中抗溶剂是水。
7.权利要求1-6的任何之一的方法，其还包括洗涤结晶。
8.权利要求7的方法，其中洗涤包括用选自抗溶剂、乙腈、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、甲乙 酮、丙酮或其组合的液体洗涤。
9.权利要求8的方法，其中洗涤包括用抗溶剂和有机溶剂的组合洗涤。
10.权利要求9的方法，其中抗溶剂是水。
11.权利要求1-10的任何之一的方法，其中分离结晶包括过滤结晶。
12.权利要求1-11的任何之一的方法，其还包括减压干燥结晶。
13.具有式(II)结构的结晶化合物
14.权利要求13的结晶化合物，具有基本上如附图1所示的DSC热分析图。
15.权利要求13的结晶化合物，具有约205-约215°C的熔点。
16.权利要求15的结晶化合物，具有约211-约213°C的熔点。
17.权利要求13-16的任何之一的结晶化合物，具有基本上如附图2所示的XRPD图。
18.权利要求13-16的任何之一的结晶化合物，具有2θ值6. 10 ；8. 10 ；9. 32 ；10. 10 ； 11. 00 ；12. 14 ；122. 50 ；13. 64 ；13. 94 ；17. 14 ；17. 52 ；18. 44 ；20. 38 ；21. 00 ；22. 26 ；23. 30 ； 24. 66 ；25. 98 ；26. 02 ；27. 84 ；28. 00 ；28. 16 ；29. 98 ；30. 46 ；32. 98 ；33. 22 ；34. 52 ；39. 46。
19.制备式(II)化合物结晶盐的方法，其中盐选自柠檬酸盐、酒石酸盐、三氟乙酸盐、甲磺酸盐、甲苯磺酸盐、盐酸盐和氢溴酸 盐；和方法包括(i)在有机溶剂中制备式(II)化合物的溶液；(ii)加入酸，其选自柠檬酸、 酒石酸、三氟乙酸、甲磺酸、甲苯磺酸、盐酸和氢溴酸；(iii)使溶液达到过度饱和导致结晶 形成；和(iV)分离结晶。
20.权利要求19的方法，其中有机溶剂选自乙醚、THF、乙腈和MTBE或其任何组合。
21.权利要求20的方法，其中有机溶剂是THF和乙腈的混合物。
22.权利要求19-21的任何之一的方法，其中使溶液达到过度饱和包括缓慢加入抗溶 剂、使溶液冷却、减少溶液体积或其任何组合。
23.权利要求22的方法，使溶液达到过度饱和包括冷却溶液到室温或更低。
24.权利要求19-23的任何之一的方法，还包括洗涤结晶。
25.权利要求24的方法，其中洗涤包括用选自乙醚、THF、乙腈和MTBE或其任何组合的 液体洗涤。
26.权利要求25的方法，其中洗涤包括用乙腈洗涤。
27.权利要求19-26的任何之一的方法，其中分离结晶包括过滤结晶。
28.权利要求19-27的任何之一的方法，还包括减压干燥结晶。
29.具有式(II)结构的化合物结晶盐 其中盐是柠檬酸盐。
30.权利要求29的结晶盐，具有基本上如附图11所示的DSC热分析图。
31.权利要求29的结晶盐，具有约180-约190°C的熔点。
32.权利要求31的结晶盐，具有约184-约188°C的熔点。
33.权利要求29-32的任何之一的结晶盐，具有基本上如附图12所示的XRPD图。
34.权利要求29-32的任何之一的结晶盐，具有2Θ°值4. 40 ;7. 22 ;9. 12 ;12. 36 13. 35 ；14. 34 ；15. 54 ；16. 14 ；16. 54 ；17. 00 ；18. 24 ；18. 58 ；19. 70 ；19. 90 ；20. 30 ；20. 42 21. 84 ；22. 02 ；23. 34 ；23. 84 ；24. 04 ；24. 08 ；24. 48 ；24. 76 ；25. 48 ；26. 18 ；28. 14 ；28. 20 28. 64 ；29. 64 ；31. 04 ；31. 84 ；33. 00 ；33. 20 ；34. 06 ；34. 30 ；34. 50 ；35. 18 ；37. 48 ；37. 90 39. 48。
35.制备式(III)结晶化合物的方法， (III)其中X是任何合适的抗衡离子，其包括(i)在有机溶剂中制备式(IV)化合物的溶液， 其中PG是合适的保护基团； ( )加入合适的酸；(iii)使溶液达到过度饱和导致结晶形成；和(iv)分离结晶。
36.权利要求35的方法，其中PG选自Boc和Cbz，X是三氟乙酸盐。
37.权利要求35或36的方法，其中有机溶剂选自二氯甲烷、乙酸乙酯、异丙基乙酸酯、 异丁基乙酸酯、丁基乙酸酯、丙基乙酸酯、乙醚、甲基叔丁基醚(MTBE)或其任何组合。
38.权利要求37的方法，其中有机溶剂选自二氯甲烷、乙酸乙酯、MTBE或其任何组合。
39.权利要求35-38的任何之一的方法，其中使溶液达到过度饱和包括加入抗溶剂、冷 却溶液，减少溶液体积或其任何组合。
40.权利要求39的方法，其中使溶液达到过度饱和包括加入抗溶剂、冷却溶液至室温 或更低和减少溶液体积。
41.权利要求39或40的方法，其中抗溶剂是己烷或庚烷。
42.权利要求35-41的任何之一的方法，还包括洗涤结晶。
43.权利要求42的方法，其中洗涤包括用选自抗溶剂、二氯甲烷、乙酸乙酯、异丙基乙 酸酯、异丁基乙酸酯、丁基乙酸酯、丙基乙酸酯、乙醚、甲基叔丁基醚或其任何组合的液体洗 涤。
44.权利要求43的方法，其中洗涤包括用抗溶剂洗涤。
45.权利要求44的方法，其中抗溶剂是己烷或庚烷。
46.权利要求35-45的任何之一的方法，其中分离结晶包括过滤结晶。
47.权利要求35-46和任何之一的方法，还包括减压干燥结晶。
48.具有式(III)结构的结晶化合物 其中X是三氟乙酸盐。
49.权利要求48的结晶化合物，具有基本上如附图9所示的DSC热分析图。
50.权利要求48或49的结晶化合物，具有基本上如附图10所示的XRPD图。
51.权利要求48-50的任何之一的结晶化合物，具有2θ值8. 84 ；15. 18 ；15. 32 ；16. 20 ； 16. 82 ；17. 66 ；18. 26 ；19. 10 ；21. 20 ；22. 58 ；23. 06 ；23. 52 ；25. 32 ；26. 58 ；28. 60 ；30. 08 ； 30. 48 ；30. 84 ；32. 20 ；36. 14 ；37. 12。
52.制备式(II)结晶化合物的方法， (II)其包括(i)在第一种有机溶剂中制备式(IV)化合物的溶液，其中PG是合适的保护基团； (IV)(ii)加入合适的酸；(iii)使溶液达到过度饱和导致结晶形成；和(iV)分离结晶得到 式(III)的结晶化合物；(ν)使式(III)的结晶化合物 (III)其中X是任何合适的抗衡离子，与式(V)化合物在第二种有机溶剂中反应； (vi)在第二种有机溶剂中制备式(II)化合物的溶液；(vii)使溶液达到过度饱和导致 结晶形成；和(viii)分离结晶得到式(II)的结晶化合物。 53.根据方案(I)合成氨基酸酮-环氧化物的方法(J)其中R1选自保护基团或氨基酸的其它链，其本身可以是任选取代的； R2选自氢和CV6烷基；或R3选自氢、CV6烷基、Cp6烷氧基烷基、杂环基、芳基、杂芳基、CV6杂芳烷基和Cp6芳烷 基；和其中方法包括在选自吡啶、乙腈、DMF、DMSO、NMP, DMA、THF和硝基甲烷的助溶剂存在下 用含水次氯酸钠或次氯酸钙溶液进行立体选择性环氧化。
53.
54.权利要求53的方法，其中R1是保护基团。
55.权利要求54的方法，其中R1是吸电子保护基团。
56.权利要求55的方法，其中R1选自叔丁氧基羰基(Boc)、苯甲酰基(Bz)、三氯乙氧基 羰基(Troc)和苄氧基羰基(Cbz)。
57.权利要求56的方法，其中R1是Boc。
58.权利要求53-57的任何之一的方法，其中R2是氢。
59.权利要求53-59的任何之一的方法，其中R3选自氢、C^6烷基、C^6烷氧基烷基、杂 环基、芳基、杂芳基、C1^6杂芳烷基和Cp6芳烷基。
60.权利要求59的方法，其中R3是Cp6烷基。
61.权利要求60的方法，其中R3是异丁基。
62.权利要求59的方法，其中R3是Cp6芳烷基。
63.权利要求62的方法，其中R3选自苯基甲基、4-羟基苯基甲基和2-苯基乙基。
64.权利要求53-63的任何之一的方法，其中助溶剂选自NMP和吡啶。
65.权利要求64的方法，其中助溶剂是吡啶。
66.权利要求53-65的任何之一的方法，其中进行立体选择性环氧化过程，使得产物是 大于98%非对映异构体纯的。
67.权利要求53-66的任何之一的方法，其中方案(I)中的化合物具有如下立体化学:
68.权利要求53-67的任何之一的方法，还包括如果需要除去保护基团和与氨基酸链偶A俩口。
69.权利要求68的方法，其中氨基酸的链包含三个氨基酸。
70.权利要求68的方法，其中氨基酸的链包含两个氨基酸。
71.治疗选自癌症、自身免疫疾病、移植相关症状、神经变性疾病、纤维变性相关症状、 缺血性相关症状、感染(病毒、寄生虫或原核生物)和与骨丢失相关疾病的疾病或症状的方 法，包括给药权利要求13的结晶化合物。
全文摘要
本发明涉及结晶肽酮环氧化物化合物、它们的制备方法和相关药物组合物。本发明还涉及制备氨基酸酮环氧化物的方法。具体地说，烯丙基酮被立体选择性地转化为所需的酮环氧化物。
文档编号C07K5/10GK101883779SQ200880119013
公开日2010年11月10日 申请日期2008年10月3日 优先权日2007年10月4日
发明者G·J·莱迪希, L·C·塞尔, P·菲娅西丰萨, W·D·富勒 申请人:欧尼斯治疗公司