一种特异性检测结核分枝杆菌感染的蛋白的制作方法

技术特征：

1.一种结核分枝杆菌的特异性蛋白抗原，所述抗原序列如SEQ ID NO.2所示。

2.一种结核分枝杆菌的特异性蛋白抗原，所述抗原序列与SEQ ID NO.2所示序列之间，有95％以上的同源性。

3.编码权利要求1或2所述抗原的核苷酸片段。

4.权利要求1或2所述的抗原的制备方法，其特征在于，所述方法为：

方法一，

步骤(1)以LREnzyme mix催化Rv0472c的入门载体(美国Craig Ventor Institute下设的PFGRC所免费提供)和pDEST^TM17载体重组生成Rv0472c的表达载体；

步骤(2)将步骤(1)所述Rv0472c的表达载体转化目标表达宿主，表达目标Rv0472c蛋白；

步骤(3)破碎细胞收集蛋白并复性目标蛋白；

方法二，

步骤(1)表达含有多聚组氨酸标签的目标融合蛋白并收集表达宿主菌体：

步骤(2)收集含有多聚组氨酸标签的目标融合蛋白：

步骤(3)纯化目标融合蛋白。

5.权利要求1或2所述的抗原作为检测结核分枝杆菌的免疫原的应用，所述的应用包括，

(1)将该蛋白抗原单独用于检测结核分枝杆菌；

或(2)将该抗原与现有结核分枝杆菌检测抗原联用，用于检测结核分枝杆菌。

6.由权利要求1或2所述的抗原制备的单一抗原型结核分枝杆菌检测试剂盒，所述试剂盒包含，

(1)检测有效量浓度(优选浓度为75ug/ml)的抗原；

(2)必要的检测试剂及显色试剂。

7.包含权利要求1或2所述的抗原的多抗原联用型结核分枝杆菌检测试剂盒，所述试剂盒包含，

(1)检测有效量浓度(优选浓度为75ug/ml)的强烈要求1或2所述的抗原，以及检测有效量的现有结核分枝杆菌检测抗原；

(2)必要的检测试剂及显色试剂。

8.根据权利要求5的应用，其特征在于，所述的现有结核分枝杆菌检测抗原为结核分枝杆菌来源的ESAT-6抗原、CFP10抗原、PPD抗原、BCG抗原、LAM抗原、ES-31抗原。

9.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述的现有结核分枝杆菌检测抗原为结核分枝杆菌来源的ESAT-6抗原、CFP10抗原、PPD抗原、BCG抗原、LAM抗原、ES-31抗原。

10.权利要求1或2所述的抗原在制备抗结核分枝杆菌的疫苗中的应用。