1.一种多重PCR检测腹泻寄生虫用引物组,其中,该引物组包括SEQ ID NO.1和3-18所示的引物;所述腹泻寄生虫包括溶组织内阿米巴、贾第鞭毛虫、隐孢子虫、日本血吸虫、华支睾吸虫、粪类圆线虫、人芽囊原虫和卫氏并殖吸虫。
2.根据权利要求1所述的引物组,其中,所述引物组还包括SEQ ID NO.19-20所示的引物。
3.腹泻寄生虫的检测方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
(1)提取待测样本的总DNA;
(2)以所述总DNA为模板,并使用权利要求1或2所述的引物组,进行多重PCR反应,获得多重PCR扩增后的物料;
(3)对所述多重PCR扩增后的物料进行核酸电泳检测,得到核酸电泳检测的结果;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有215bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有溶组织内阿米巴;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有423bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有贾第鞭毛虫;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有256bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有隐孢子虫;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有453bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有日本血吸虫;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有362bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有华支睾吸虫;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有334bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有粪类圆线虫;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有149bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有人芽囊原虫;
如果核酸电泳检测的结果显示所述多重PCR扩增后的物料中含有282bp的扩增产物,则指示所述待测样本中含有卫氏并殖吸虫。
4.根据权利要求3所述的检测方法,其中,SEQ ID NO.3-20所示的引物的最终使用浓度各自为0.1-0.8μM,SEQ ID NO.1所示的引物的最终使用浓度为0.4-0.8μM。
5.根据权利要求3或4所述的检测方法,其中,多重PCR反应的条件包括如下a-h的步骤:
a:94-96℃,3-6min;
b:94-96℃,15-60s,
c:50-60℃,15-60s,
d:71-73℃,60-120s,进行10-15个b-d的循环;
e:94-96℃,15-60s,
f:55-65℃,15-60s,
g:71-73℃,30-60s,进行30-35个e-g的循环;
h:71-73℃,5-10min。
6.根据权利要求3或4所述的检测方法,其中,所述核酸电泳检测包括核酸凝胶电泳和/或核酸毛细管电泳。
7.一种多重PCR检测腹泻寄生虫的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1或2所述的引物组和DNA聚合酶;所述腹泻寄生虫包括溶组织内阿米巴、贾第鞭毛虫、隐孢子虫、日本血吸虫、华支睾吸虫、粪类圆线虫、人芽囊原虫和卫氏并殖吸虫。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括PCR反应缓冲液和dNTP。
9.权利要求1或2所述的引物组在制备检测腹泻寄生虫的试剂盒中的用途;其中,所述腹泻寄生虫包括溶组织内阿米巴、贾第鞭毛虫、隐孢子虫、日本血吸虫、华支睾吸虫、粪类圆线虫、人芽囊原虫和卫氏并殖吸虫。