一种榆黄蘑菌株及其杂交育种方法与流程

文档序号:11144727阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种榆黄蘑菌株,其特征在于所述榆黄蘑菌株为Pleurotus citrinopileatus 2-2榆黄蘑2-2,该菌株的保藏号为CCTCC NO:M 2016384。

2.根据权利要求1所述的榆黄蘑菌株,其特征在于:其子实体平均菌盖直径为3.21cm,平均菌盖厚度为0.43cm,平均菌柄长度为6.9cm,子实体单菇鲜重在178~225g之间。

3.根据权利要求1所述的榆黄蘑菌株杂交育种方法,其特征在于:

(1)孢子收集:取发育健壮、无病虫害、尚未开伞的供试菌株的子实体,用酒精棉擦拭其表面,然后用无菌水进行冲洗数次后置于超净工作台吹干待用;用灭过菌的解剖刀切取带菌褶的子实体块,用无菌铁钩的一端勾住子实体块,钩子另一端挂在装有10mL无菌水与3颗玻璃珠的三角瓶的瓶口,使子实体正好悬挂于三角瓶中,菌褶面朝下;用无菌棉塞封住瓶口,在25℃恒温培养箱中放置24h,制得孢子悬浮液;

(2)单孢分离:逐级稀释孢子悬浮液,稀释至400倍显微镜视野中含1~3个孢子,此时浓度为最佳稀释浓度;移取0.5mL最佳稀释浓度孢子悬浮液至固体培养基上,涂布,在25℃下,倒置遮光培养4~5d;

(3)单核菌丝鉴定:当菌落长至直径为3~4cm时,挑取边缘菌丝,制水片,置于高倍显微镜下观察,若无锁状联合,即可认为是单核菌丝;

(4)杂交配对:用直径为0.5cm的金属打孔器将两个亲本单核菌丝接种到同一平板培养基上,两者相距2cm,于25℃恒温培养箱培养;单核菌株配对采用全排列组合,两两配对;

(5)杂交菌株的鉴定:通过镜检锁状联合和拮抗实验筛选得到杂交菌株;

(6)杂交后代菌株的筛选:采用平板菌丝生长速度检测、摇瓶液体发酵培养、菌丝胞内多糖含量检测及对绿霉抗性的实验,筛选得到性状较优的杂交后代。

4.根据权利要求3所述榆黄蘑菌株杂交育种方法,其特征在于:所述固体培养基中含有质量百分比为20%的马铃薯,2%的葡萄糖和1.8%的琼脂,固体培养基为自然pH值。

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