金黄色葡萄球菌的肽核酸原位荧光杂交鉴定方法及试剂盒和PNA探针与流程

技术特征：

1.一种金黄色葡萄球菌的肽核酸原位荧光杂交鉴定PNA探针，该PNA探针的核苷酸序列如下：GGATCCGCGCTGCAT T-FAM。

2.一种金黄色葡萄球菌的肽核酸原位荧光杂交鉴定方法，其特征在于该方法包括以下的步骤：

1）离心收集对数生长期的细菌，PBS调整细菌浓度至OD₆₀₀=1.0，取10µl 菌液于98%酒精清洗过的玻片上涂匀，火焰固定，将玻片于80%的酒精中浸泡15 min，风干；

2）取25 µl含500pmole/ml权利要求1所述的PNA探针的杂交缓冲液滴加于玻片上，55℃作用1.5 h，杂交后玻片于55 ℃预热的洗涤缓冲液中洗涤2次，每次10分钟，取2-5 µl菌液涂片，风干后荧光显微镜观察荧光亮度及细菌的形态。

3.根据权利要求2所述的一种金黄色葡萄球菌的肽核酸原位荧光杂交鉴定方法，其特征在于PNA探针的杂交缓冲液pH7.5含有以下的组分：10%（w/v） 硫酸葡聚糖，10 mM NaCl，30% (v/v)甲酰胺，0.1%（w/v）焦磷酸钠，0.2%（w/v）聚乙烯吡咯烷酮，0.2%（w/v）聚蔗糖，5 mM Na₂EDTA，0.2% (v/v) TritonX-100，50 mM Tris/HC。

4.一种金黄色葡萄球菌的肽核酸原位荧光杂交鉴定试剂盒，其特征在于该试剂盒包括含有权利要求1所述的PNA探针的杂交缓冲液。

5.根据权利要求4所述的一种金黄色葡萄球菌的肽核酸原位荧光杂交鉴定试剂盒，其特征在于PNA探针的杂交缓冲液pH7.5含有以下的组分：10%（w/v） 硫酸葡聚糖，10 mM NaCl，30% (v/v)甲酰胺，0.1%（w/v）焦磷酸钠，0.2%（w/v）聚乙烯吡咯烷酮，0.2%（w/v）聚蔗糖，5 mM Na₂EDTA，0.2% (v/v) TritonX-100，50 mM Tris/HC。