本发明属于化合物制备领域，具体涉及一种抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法。
背景技术：
苯丁酸氮芥已经证实很好的用于慢性淋巴性白血病，淋巴肉瘤、何杰金氏病、也适用于恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、卵巢病的治疗。另外近年来与美罗华(利妥昔单抗，rituxan)的联合使用对于既往未经治疗的慢性淋巴瘤、细胞白血病(cll)患者的早期临床治疗效果显著，显示出良好的应用前景。但目前的生产制备方法路线长、反应条件苛刻、后处理及纯化困难、生产成本高等缺点。已有报道的代表性方法有：方法一，由苯基丁酸经过硝化、酯化、还原、氨基二取代、氯代、水解得到产物，如文献journalofmedicinalchemistry,1990,vol.33,#11p.3014–3019。bioorganicandmedicinalchemistry,2003,vol.11,#23p.5007–5012。bioorganicandmedicinalchemistry,2009,vol.17,#17p.6463–6480等等。该方法的缺点是第一步就需要浓硫酸，浓硝酸进行高温硝化反应，该步骤再放大生产过程中危险性非常大、污染严重，后处理困难。整个路线的收率很低，其中3步需要柱层析纯化，不利于商业化生产。方法二，4-羟基苯甲醛经过8步反应得到产物，其中有3步的收率均在40％以下，有4步反应需要柱层析分离，也存在无法工业化的问题，相关文献如organicandbiomolecularchemistry,2012,vol.10,#27p.5238–5244。journaloftheamericanchemicalsociety,2004,vol.126,#1p.320–328。除此之外，苯丁酸氮芥的其他合成方法也有报道，基本上都存在路线长、成本高、纯化困难、操作复杂、无法放大生产等特点，如文献journaloforganicchemistry,2016,vol.81,#22p.11168–11175。organicandbiomolecularchemistry,2012,vol.10,#27p.5238–5244。
本发明选取了廉价易得的n,n-二羟乙基苯胺为原料，进行4步反应得到产物。本发明的路线对设备要求不高，生产成本低、制备路线短、易于纯化及工业化生产，是一条温和、高效的制备方法。解决了设备条件苛刻、生产危险性大、纯化困难、成本高等技术问题。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供一种抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，该方法原料廉价易得：n,n-二羟乙基苯胺，对设备要求不高，生产成本低、制备路线短、易于纯化，是一条温和、高效的制备方法。解决了设备条件苛刻、生产危险性大、纯化困难、成本高等技术问题。便于工业化大规模生产，以满足迅猛增长的商业化需求。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：
抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法：以n,n-二羟乙基苯胺为原料，与三氯氧磷及dmf进行vilsmeier反应制得4-[双(2-氯乙基)氨基]苯甲醛，再与甲氧基甲基三苯基氯化膦通过wittig反应进一步得到含双键的关键中间体4-[双(2-氯乙基)氨基]-beta-甲氧基苯乙烯，酸性条件下的得到4-[双(2-氯乙基)氨基]苯乙醛，最后在三乙胺、甲酸体系中与米氏酸反应制备出目标产物，反应路线如下：
所述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，包括以下步骤：
(1)冰盐浴条件下，按照质量比n,n-二甲基甲酰胺:三氯氧磷＝2～5:1，向n,n-二甲基甲酰胺中滴加三氯氧磷，滴加完成后搅拌；然后滴加n,n-二羟乙基苯胺的二甲基甲酰胺溶液，滴加完成后室温反应0.4～0.5h，升温至85～100℃，反应5～6h；反应完成，将反应体系缓慢倒入冰水中终止反应，滴加碳酸氢钠溶液调碱至ph＝8～9，抽滤、水洗后得到白色固体，将白色固体烘干、有机溶剂重结晶后，得到4-[双(2-氯乙基)氨基]苯甲醛；
(2)在氮气保护的四氢呋喃中依次加入碱、甲氧基甲基三苯基氯化膦，甲氧基甲基三苯基氯化膦与四氢呋喃中的质量比为0.16～0.17:1；搅拌下滴加步骤(1)制备的4-[双(2-氯乙基)氨基]苯甲醛的四氢呋喃溶液，室温反应5～8h，加水终止反应，经乙酸乙酯萃取，水洗、饱和食盐水洗，分层有机相，有机相干燥后旋蒸溶剂，得到4-[双(2-氯乙基)氨基]-beta-甲氧基苯乙烯；其中，所述碱、甲氧基甲基三苯基氯化膦与4-[双(2-氯乙基)氨基]苯甲醛的物质的量之比为1.2～1.6:1.2～1.3:1；
(3)将步骤(2)制备的4-[双(2-氯乙基)氨基]-beta-甲氧基苯乙烯加入反应溶剂中，再加入稀盐酸，升温后回流，反应2～5h，反应完成后，待反应体系冷却至0～10℃，用浓氨水缓慢调节至ph＝7.5～8，经乙酸乙酯萃取，水洗、饱和食盐水洗，分层有机相，有机相干燥后旋蒸溶剂，得到4-[双(2-氯乙基)氨基]苯乙醛；其中，所述4-[双(2-氯乙基)氨基]-beta-甲氧基苯乙烯与稀盐酸中hcl的物质的量之比为0.9～1.1:1；
(4)将三乙胺缓慢滴加到甲酸体系中，40～50℃搅拌反应1～2h，再分批向体系中加入步骤(3)制得的4-[双(2-氯乙基)氨基]苯乙醛；最后加入米氏酸，搅拌1～2h，然后升温至70～95℃，反应5～7h，将体系转移至水中，用二氯甲烷萃取，水洗、饱和食盐水洗，分层有机相，有机相干燥后旋蒸溶剂得到粗品油状物，粗品油状物经混合溶剂重结晶后，得到纯品苯丁酸氮芥。
其中，上述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤(1)中所述冰盐浴温度在0～5℃之间；在三氯氧磷滴加过程中，控制体系温度t≤45℃；三氯氧磷的滴加时间为1～2h。
其中，上述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤(1)中所述n,n-二羟乙基苯胺与三氯氧磷物质的量之比1:3～8；所述n,n-二羟乙基苯胺的二甲基甲酰胺溶液中，n,n-二羟乙基苯胺的浓度为40～45wt％，所述n,n-二羟乙基苯胺的二甲基甲酰胺溶液的滴加时间为2～3h。
其中，上述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤(1)中所述搅拌的时间为0.5～1.0h，所述碳酸氢钠溶液的浓度为1mol/l，所述有机溶剂为乙酸乙酯、甲酸乙酯或者醋酸丁酯。
其中，上述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤(2)中加碱之前要求四氢呋喃的温度在5℃以下；所述碱为叔丁醇钾、叔丁醇钠或者甲醇钠，且分批次加入；所述4-[双(2-氯乙基)氨基]苯甲醛的四氢呋喃溶液中，4-[双(2-氯乙基)氨基]苯甲醛的浓度为30～35wt％；所述4-[双(2-氯乙基)氨基]苯甲醛的四氢呋喃溶液的滴加时间为1～2h。
其中，上述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤(3)中所述4-[双(2-氯乙基)氨基]-beta-甲氧基苯乙烯与反应溶剂的质量为0.08～0.11:1。
其中，上述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤(3)中所述反应溶剂为四氢呋喃或水，升温至65～75℃回流；所述稀盐酸的浓度为2～3mol/l，所述浓氨水的浓度为25～33wt％。
其中，上述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤(4)中所述4-[双(2-氯乙基)氨基]苯乙醛与米氏酸的物质的量之比为1:1～1.05；所述三乙胺与4-[双(2-氯乙基)氨基]苯乙醛物质的量的比例为5～6:1；所述甲酸与三乙胺的体积比为1.8～2.0:1。
其中，上述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤(4)中所述三乙胺的滴加时间为3～5h，所述4-[双(2-氯乙基)氨基]苯乙醛分5～7批次加入。
其中，上述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤(4)中混合溶剂为石油醚与乙酸乙酯的混合溶剂、二氯甲烷与石油醚的混合溶剂或者正己烷与乙醇的混合溶剂。
本发明具有的有益效果：本发明方法原料n,n-二羟乙基苯胺廉价易得、对设备要求不高、生产成本低、制备路线短、易于纯化，是一条温和、高效的制备方法，解决了设备条件苛刻、生产危险性大、纯化困难、成本高等技术问题该方法易于工业化生产，以更有竞争力的技术优势、成本优势，服务于迅猛增长的商业化需求。
具体实施方式
本发明提供了一种抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，该方法包括以下步骤步骤：
(1)在0～5℃冰盐浴条件下，按照质量比n,n-二甲基甲酰胺:三氯氧磷＝2～5:1，向n,n-二甲基甲酰胺中滴加三氯氧磷，在三氯氧磷滴加过程中，控制体系温度t≤45℃，1～2h内滴加完成后搅拌0.5～1.0h；然后滴加浓度40～45wt％n,n-二羟乙基苯胺的二甲基甲酰胺溶液，2～3h内滴加完成后，室温反应0.4～0.5h，升温至85～100℃，反应5～6h；反应完成，将反应体系缓慢倒入冰水中终止反应，滴加碳酸氢钠溶液调碱至ph＝8～9，抽滤、水洗后得到白色固体，将白色固体烘干、有机溶剂重结晶后，得到4-[双(2-氯乙基)氨基]苯甲醛；其中，所述n,n-二羟乙基苯胺与三氯氧磷物质的量之比1:3～8；
(2)在氮气保护的5℃以下的四氢呋喃中依次加入碱、甲氧基甲基三苯基氯化膦，甲氧基甲基三苯基氯化膦与四氢呋喃中的质量比为0.16～0.17:1；搅拌下滴加步骤(1)制备的4-[双(2-氯乙基)氨基]苯甲醛(浓度为30～35wt％)的四氢呋喃溶液，1～2h滴加完成后，室温反应5～8h，加水终止反应，经乙酸乙酯萃取，水洗、饱和食盐水洗，分层有机相，有机相干燥后旋蒸溶剂，得到4-[双(2-氯乙基)氨基]-beta-甲氧基苯乙烯；其中，所述碱、甲氧基甲基三苯基氯化膦与4-[双(2-氯乙基)氨基]苯甲醛的物质的量之比为1.2～1.6:1.2～1.3:1；
(3)将步骤(2)制备的4-[双(2-氯乙基)氨基]-beta-甲氧基苯乙烯加入反应溶剂中，再加入稀盐酸，升温至65～75℃后回流，反应2～5h，反应完成后，待反应体系冷却至0～10℃，用浓氨水缓慢调节至ph＝7.5～8，经乙酸乙酯萃取，水洗、饱和食盐水洗，分层有机相，有机相干燥后旋蒸溶剂，得到4-[双(2-氯乙基)氨基]苯乙醛；其中，所述4-[双(2-氯乙基)氨基]-beta-甲氧基苯乙烯与反应溶剂的质量为0.08～0.11:1；所述4-[双(2-氯乙基)氨基]-beta-甲氧基苯乙烯与稀盐酸中hcl的物质的量之比为0.9～1.1:1；
(4)将三乙胺按照体积比1:1.8～2.0缓慢滴加到甲酸体系中，3～5h滴加完成，40～50℃搅拌反应1～2h，再分5～7批向体系中加入步骤(3)制得的4-[双(2-氯乙基)氨基]苯乙醛；最后加入米氏酸，搅拌1～2h，然后升温至70～95℃，反应5～7h，将体系转移至水中，用二氯甲烷萃取，水洗、饱和食盐水洗，分层有机相，有机相干燥后旋蒸溶剂得到粗品油状物，粗品油状物经混合溶剂重结晶后，得到纯品苯丁酸氮芥；其中，所述4-[双(2-氯乙基)氨基]苯乙醛与米氏酸的物质的量之比为1:1～1.05；所述三乙胺与4-[双(2-氯乙基)氨基]苯乙醛物质的量之比为5～6:1。
其中，上述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤(1)中所述碳酸氢钠溶液的浓度为1mol/l，所述有机溶剂为乙酸乙酯、甲酸乙酯或者醋酸丁酯。
其中，上述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤(2)中所述碱为叔丁醇钾、叔丁醇钠或者甲醇钠，且分批次加入。
其中，上述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤(3)中所述反应溶剂为四氢呋喃或水；所述稀盐酸的浓度为2～3mol/l，所述浓氨水的浓度为25～33wt％。
其中，上述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤(4)中混合溶剂为石油醚与乙酸乙酯的混合溶剂、二氯甲烷与石油醚的混合溶剂或者正己烷与乙醇的混合溶剂。
其中，上述抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤(1)和(2)中所述室温为20～25℃。
以下结合具体的实施例对本发明作进一步的解释和说明，但并不因此限制本发明的保护范围。本发明实施例所用试剂均为市售产品，未做进一步处理。
实施例1
抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤如下：
(1)2℃冰盐浴条件下，向1000gn,n-二甲基甲酰胺中滴加210g三氯氧磷，滴加过程中，控制温度t在40℃左右，1.3h滴加完成后，搅拌0.6h。然后室温25℃下滴加80gn,n-二羟乙基苯胺和100g二甲基甲酰胺的混合溶液，2h滴加完成并维持室温反应0.5h，升温至90℃，反应5h。反应完成，将体系缓慢倒入3000g冰水中终止反应，滴加1mol/l的碳酸氢钠溶液调碱至ph＝8，将所得固体抽滤，水洗得到白色固体，烘干得120g，加入960g乙酸乙酯重结晶，抽滤烘干得到4-[双(2-氯乙基)氨基]苯甲醛96.8g，白色晶体，收率89.1％。
(2)在氮气保护下，加入490g四氢呋喃，冷却至温度3℃，分批加入叔丁醇钠23g，再加入82g甲氧基甲基三苯基氯化膦，搅拌下滴加49g的4-[双(2-氯乙基)氨基]苯甲醛和100g四氢呋喃混合溶液，1.2h滴完，然后室温25℃反应6h，水800g终止反应，加入200g乙酸乙酯萃取，300g水洗2次并分层，有机相用200g饱和食盐水洗1次，分层有机相，干燥后旋蒸溶剂得到4-[双(2-氯乙基)氨基]-beta-甲氧基苯乙烯62g，油状物，收率94.3％。
(3)将55g的4-[双(2-氯乙基)氨基]-beta-甲氧基苯乙烯加入四氢呋喃520g中，再加入2mol/l稀盐酸100ml，升温至t＝65℃回流，反应4h至完成，冷却至7℃，用25wt％浓氨水缓慢调节至ph＝8左右，乙酸乙酯300g萃取反应液2次，180ml水洗2次分层、有机相用200ml饱和食盐水洗1次，分层有机相，无水硫酸钠干燥后旋蒸溶剂得到4-[双(2-氯乙基)氨基]苯乙醛48g，油状物，收率92.3％。
(4)将76g三乙胺缓慢滴加到230甲酸体系中，3h滴加完成后，于45℃搅拌反应1.5h。向体系中分6批加入4-[双(2-氯乙基)氨基]苯乙醛39g，最后加入米氏酸22g，升温至85℃反应6h至完成，将体系转移至水中，用二氯甲烷100g分别萃取2次，200g水洗1次、100g饱和食盐水洗1次，分层有机相，干燥后旋蒸溶剂得到粗品油状物41g。用100g乙酸乙酯和60g石油醚的混合溶剂重结晶得到白色固体纯品苯丁酸氮芥33g，收率73％，含量99.6％。
实施例2
抗肿瘤药物苯丁酸氮芥的制备方法，步骤如下：
(1)5℃冰盐浴条件下，向2500gn,n-二甲基甲酰胺中滴加1050g三氯氧磷，滴加过程中，控制温度t在35℃左右，2h滴加完成后，搅拌1.0h。然后室温23℃下滴加200gn,n-二羟乙基苯胺和250g二甲基甲酰胺的混合溶液，3h滴加完成并维持室温反应0.5h，升温至90℃，反应6h。反应完成，将体系缓慢倒入3000g冰水中终止反应，滴加1mol/l的碳酸氢钠溶液调碱至ph＝9，将所得固体抽滤，水洗得到白色固体，烘干得303g，加入2200g甲酸乙酯重结晶，抽滤烘干得到4-[双(2-氯乙基)氨基]苯甲醛246g，白色晶体，收率90.6％。
(2)在氮气保护下，加入1000g四氢呋喃，冷却至温度2℃，分批加入叔丁醇钾71g，再加入165g甲氧基甲基三苯基氯化膦，搅拌下滴加100g的4-[双(2-氯乙基)氨基]苯甲醛和200g四氢呋喃混合溶液，2h滴完，室温23℃反应8h，水1500g终止反应，加入400g乙酸乙酯萃取，500g水洗2次并分层，有机相用500g饱和食盐水洗1次，分层有机相，干燥后旋蒸溶剂得到4-[双(2-氯乙基)氨基]-beta-甲氧基苯乙烯118g，油状物，收率89.7％。
(3)将82.5g的4-[双(2-氯乙基)氨基]-beta-甲氧基苯乙烯加入水1000g中，再加入2mol/l稀盐酸160ml，升温至t＝71℃回流，反应2.5h至完成，冷却至5℃，用30wt％浓氨水缓慢调节至ph＝7.6，乙酸乙酯600g萃取反应液2次，400ml水洗2次分层、有机相用380ml饱和食盐水洗1次，分层有机相，无水硫酸钠干燥后旋蒸溶剂得到4-[双(2-氯乙基)氨基]苯乙醛69g，油状物，收率88.5％。
(4)将304g三乙胺缓慢滴加到680g的920甲酸体系中，5h滴完，50℃搅拌反应2h。向体系中分7批加入4-[双(2-氯乙基)氨基]苯乙醛156g，最后加入米氏酸87g，升温至95℃反应5h至完成。将体系转移至水中，用二氯甲烷500g分别萃取2次，1000g水洗1次、500g饱和食盐水洗1次，分层有机相，干燥后旋蒸溶剂得到粗品油状物172g。用500g二氯甲烷和200g石油醚的混合溶剂重结晶得到苯丁酸氮芥139g，白色晶体。收率76.9％，含量99.2％。
苯丁酸氮芥的相关检测数据：
mp.：67～68℃。
含量检测方法：取供试品约0.2g，加丙酮10ml溶解后，迅即加水10ml与酚红指示液3滴，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/l)迅速滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/l)相当于30.42mg的c14h19cl2no2。根据滴定液使用量，计算苯丁酸氮芥的含量。
1hnmr(δ,cdcl3):7.08(t,2h,arh),6.92(m,2h,arh),3.582～3.735(m,8h,2ch2ch2h),2.551～2.602(t,2h,ch2),2.343～2.391(t,2h,ch2)；1.865～1.965(t,2h,ch2)。
以上所述为本发明的优选实施例，应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明结构的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些也应当视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和本专利的实用性。